CN109258305A - 一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基 - Google Patents

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Abstract

一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基，包括下列步骤：第一步：在一容器中加入液体培养基，然后进行灭菌；第二步：冷却后，向所述液体培养基接入直径为0.8~1.2cm的羊肚菌原种PDA菌块，然后置于摇床培养箱于暗处培养；第三步：将第二步培养好的羊肚菌的液体种接种到固体培养基上，然后将接种后的培养包放在暗处培养。本发明的方法与现有培养羊肚菌菌核的方法相比，其操作简便，效果更突出，显著地提高了羊肚菌菌核生成的数量，同时为快速筛选生成菌核能力强的菌株提供简单便捷的方法，为后续羊肚菌育种提供筛选的预判依据。

Description

一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基
技术领域
本发明涉及一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基和固体培养基，快速检测羊肚菌菌核形成能力的检测方法及其应用，属于食用菌育种、制种技术领域。
背景技术
羊肚菌（Morchella spp.）肉质鲜美脆嫩、营养和药用价值极高，是一种珍贵的食药用菌，深受各国人们喜爱，但是其人工栽培及其子实体发生机理的问题一直未得到解决。1982年，Ower用羊肚菌菌核作为唯一营养库，经过特殊条件处理，观察到羊肚菌在人工控制条件下长出子实体的过程，由此证明菌核的形成是子实体发生的前提，以后国内外许多学者的研究都支持这一结论。因此，羊肚菌菌核出现的时间和质量是决定羊肚菌菌种质量的关键。
改良培养基，优化培养条件等方法已用于加速羊肚菌菌丝生长，并取得了一定的效果，但是大都操作复杂，药品需求较大。同时，现在羊肚菌的菌种制作模式都是固体接固体，这样培养模式周期长，操作复杂，成本较高，菌核得率相对较低，在制种阶段不能及时发现、判定菌株的成核能力。同样在羊肚菌菌种选育阶段，不能快速判定其能否成核，往往要经过完整的栽培出菇才能判定，给菌株推广和应用带来了极大的风险。
发明内容
本发明目的在于提供一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基。
为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种促进羊肚菌菌核形成的液体培养基，每升蒸馏水中加入其质量0.5-2.0%的白砂糖、0.10-0.3%的蛋白胨、0.6-0.7%的豆粕粉、0.05-0.20%的KH2PO4和0.05-0.10%的MgSO4。
为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种促进羊肚菌菌核形成的方法，包括下列步骤：
第一步：在一容器中加入权利要求1所述的液体培养基，然后进行灭菌；
第二步：冷却后，向所述液体培养基接入直径为0.8~1.2cm的羊肚菌原种PDA菌块，然后置于摇床培养箱于暗处培养；
第三步：将第二步培养好的羊肚菌的液体种接种到固体培养基上，然后将接种后的培养包放在暗处培养。
优选的技术方案为：在第一步中，灭菌的条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为15min。
优选的技术方案为：在第二步中，培养的温度为18~22℃，摇床的速度为140~160rpm，培养时间为6~8天。
优选的技术方案为：所述固体培养基的含水量为55~65%。
优选的技术方案为：所述固体培养基的固体成分包含下列质量百分含量的材料：58~62%的木屑、27~32%的玉米芯、1.3~1.5‰的磷酸二氢钾、8-9%的麸皮、1-2%的轻质碳酸钙。
优选的技术方案为：所述固体培养基的灭菌条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为2.5小时。
优选的技术方案为：在第三步：暗处培养的温度为20℃。
附图说明
附图1为本发明的方法和现有技术羊肚菌菌核生成情况对比图。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：
本发明的方法与现有培养羊肚菌菌核的方法相比，其操作简便，效果更突出，显著地提高了羊肚菌菌核生成的数量，同时为快速筛选生成菌核能力强的菌株提供简单便捷的方法，为后续羊肚菌育种提供筛选的预判依据。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
实施例一：一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基
（1）羊肚菌的菌种是经过组织分化得到的羊肚菌菌株。将试管原种进行活化，转接到PDA培养基上，得到羊肚菌原种PDA菌块。
（2）一级种的液体培养基的配方是：在1L的蒸馏水中加入其质量2.0%的白砂糖，0.3%的蛋白胨，0.7%的豆粕粉，0.20%KH2PO4和0.10%的MgSO4。
250ml的三角瓶中加入100ml液体培养基，在温度为121℃，压力0.15Mpa的条件下灭菌15min。
（3）在经过灭菌冷却后，接入直径为1cm的羊肚菌原种PDA菌块6块，置于20℃摇床培养箱150rpm的速度暗处培养7天。对照组是羊肚菌的固体培养基培养的一级种。
（4）羊肚菌固体种的培养基配方是：木屑60%，玉米芯30%，1.5‰磷酸二氢钾，麸皮9%，轻质碳酸钙 2%。含水量60%。将固体培养基配制好后装入灭菌袋，在温度为121℃，压力0.15Mpa的条件下灭菌2.5小时。
（5）将步骤（2）培养好的羊肚菌的液体种接种到灭菌冷却好的固体培养基，每个培养料包接种液体培养基20mL。对照组是常规的羊肚菌的固体原种接固体种。然后，将接种后的培养包放在温度为20℃暗处培养。
（6）待菌包培养20天，对照组和液体种中的菌包内的羊肚菌菌核生成的情况如图1所示。发现对照组的菌丝培养到20天的时候，固体种还未看到菌核的形成，液体种已经有大量的菌核形成。
实施例二：一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基
一种促进羊肚菌菌核形成的液体培养基，每升蒸馏水中加入其质量0.5%的白砂糖、0.10%的蛋白胨、0.6%的豆粕粉、0.05%的KH2PO4和0.05%的MgSO4。
一种促进羊肚菌菌核形成的方法，包括下列步骤：
第一步：在一容器中加入液体培养基，然后进行灭菌；
第二步：冷却后，向所述液体培养基接入直径为0.8cm的羊肚菌原种PDA菌块，然后置于摇床培养箱于暗处培养；
第三步：将第二步培养好的羊肚菌的液体种接种到固体培养基上，然后将接种后的培养包放在暗处培养。
优选的实施方式为：在第一步中，灭菌的条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为15min。
优选的实施方式为：在第二步中，培养的温度为18℃，摇床的速度为140rpm，培养时间为6天。
优选的实施方式为：所述固体培养基的含水量为55%。
优选的实施方式为：所述固体培养基的固体成分包含下列质量百分含量的材料：58%的木屑、32%的玉米芯、1.5‰的磷酸二氢钾、8.85%的麸皮、1%的轻质碳酸钙。
优选的技术方案为：所述固体培养基的灭菌条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为2.5小时。
优选的技术方案为：在第三步：暗处培养的温度为20℃。
实施例三：一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基
一种促进羊肚菌菌核形成的液体培养基，每升蒸馏水中加入其质量1.25%的白砂糖、0.2%的蛋白胨、0.65%的豆粕粉、1.025%的KH2PO4和0.07%的MgSO4。
为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种促进羊肚菌菌核形成的方法，包括下列步骤：
第一步：在一容器中加入液体培养基，然后进行灭菌；
第二步：冷却后，向所述液体培养基接入直径为 1.2cm的羊肚菌原种PDA菌块，然后置于摇床培养箱于暗处培养；
第三步：将第二步培养好的羊肚菌的液体种接种到固体培养基上，然后将接种后的培养包放在暗处培养。
优选的实施方式为：在第一步中，灭菌的条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为15min。
优选的实施方式为：在第二步中，培养的温度为22℃，摇床的速度为160rpm，培养时间为 8天。
优选的实施方式为：所述固体培养基的含水量为 65%。
优选的实施方式为：所述固体培养基的固体成分包含下列质量百分含量的材料：62%的木屑、27%的玉米芯、1.3‰的磷酸二氢钾、8.87%的麸皮、2%的轻质碳酸钙。
优选的实施方式为：所述固体培养基的灭菌条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为2.5小时。
优选的实施方式为：在第三步：暗处培养的温度为20℃。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (8)

1.一种促进羊肚菌菌核形成的液体培养基，其特征在于：每升蒸馏水中加入其质量0.5-2.0%的白砂糖、0.10-0.3%的蛋白胨、0.6-0.7%的豆粕粉、0.05-0.20%的KH2PO4和0.05-0.10%的MgSO4。
2.一种促进羊肚菌菌核形成的方法，其特征在于：包括下列步骤：
第一步：在一容器中加入权利要求1所述的液体培养基，然后进行灭菌；
第二步：冷却后，向所述液体培养基接入直径为0.8~1.2cm的羊肚菌原种PDA菌块，然后置于摇床培养箱于暗处培养；
第三步：将第二步培养好的羊肚菌的液体种接种到固体培养基上，然后将接种后的培养包放在暗处培养。
3.根据权利要求2所述的促进羊肚菌菌核形成的方法，其特征在于：在第一步中，灭菌的条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为15min。
4.根据权利要求2所述的促进羊肚菌菌核形成的方法，其特征在于：在第二步中，培养的温度为18~22℃，摇床的速度为140~160rpm，培养时间为6~8天。
5.根据权利要求2所述的促进羊肚菌菌核形成的方法，其特征在于：所述固体培养基的含水量为55~65%。
6.根据权利要求2所述的促进羊肚菌菌核形成的方法，其特征在于：所述固体培养基的固体成分包含下列质量百分含量的材料：58~62%的木屑、27~32%的玉米芯、1.3~1.5‰的磷酸二氢钾、8-9%的麸皮、1-2%的轻质碳酸钙。
7.根据权利要求2所述的促进羊肚菌菌核形成的方法，其特征在于：所述固体培养基的灭菌条件为：温度为121℃，压力为0.15Mpa，灭菌时间为2.5小时。
8.根据权利要求2所述的促进羊肚菌菌核形成的方法，其特征在于：在第三步：暗处培养的温度为20℃。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109845577A (zh) * 2019-02-01 2019-06-07 云南菌视界生物科技有限公司 一种羊肚菌免二次营养袋的栽培方法
CN111527820A (zh) * 2020-06-15 2020-08-14 上海市农业科学院 一种利用羊肚菌栽培改善蔬菜大棚次生盐渍化土壤的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101828482A (zh) * 2010-05-28 2010-09-15 云南省农业科学院高山经济植物研究所 一种羊肚菌菌核快速生成方法
CN103804090A (zh) * 2014-02-21 2014-05-21 甘肃省科学院生物研究所 一种羊肚菌液体培养发酵原种及制备方法以及用该原种进行液体培养的方法
CN105985913A (zh) * 2015-02-06 2016-10-05 上海市农业科学院 一种杏鲍菇液体菌种培养基配方及其制备方法
CN108522153A (zh) * 2018-04-25 2018-09-14 北京市农业技术推广站 一种利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法
CN108575563A (zh) * 2018-06-12 2018-09-28 伊犁师范学院 一种批量栽培雪莲菇用固体培养基、制备方法及应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101828482A (zh) * 2010-05-28 2010-09-15 云南省农业科学院高山经济植物研究所 一种羊肚菌菌核快速生成方法
CN103804090A (zh) * 2014-02-21 2014-05-21 甘肃省科学院生物研究所 一种羊肚菌液体培养发酵原种及制备方法以及用该原种进行液体培养的方法
CN105985913A (zh) * 2015-02-06 2016-10-05 上海市农业科学院 一种杏鲍菇液体菌种培养基配方及其制备方法
CN108522153A (zh) * 2018-04-25 2018-09-14 北京市农业技术推广站 一种利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法
CN108575563A (zh) * 2018-06-12 2018-09-28 伊犁师范学院 一种批量栽培雪莲菇用固体培养基、制备方法及应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109845577A (zh) * 2019-02-01 2019-06-07 云南菌视界生物科技有限公司 一种羊肚菌免二次营养袋的栽培方法
CN111527820A (zh) * 2020-06-15 2020-08-14 上海市农业科学院 一种利用羊肚菌栽培改善蔬菜大棚次生盐渍化土壤的方法

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