CN109206432A - 一种喜树碱单体的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种喜树碱单体的制备方法，使用0.1%三氟乙酸和乙腈做流动相，将喜树碱粗品通过液相色谱系统进行分离纯化，得到高纯度的喜树碱单体。本发明采用半工业制备级液相色谱分离系统得到喜树碱单体，分离提纯效果好，操作简单，周期短，效率高，纯度可达99%及以上。

Description

一种喜树碱单体的制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种喜树碱单体的制备方法。

背景技术

喜树碱是一种植物抗癌药物，从中国中南、西南分布的喜树中提取可得到喜树碱。1976年中国化学家高怡生等合成消旋喜树碱成功。喜树碱对肠胃道和头颈部癌等有较好的疗效，但对少数病人有尿血的副作用。10-羟基喜树碱的抗癌活性超过喜树碱，对肝癌和头颈部癌也有明显疗效 ，而且副作用较少。

喜树碱本品静脉注射后大部分与血浆蛋白结合，半衰期长，血中可存留6天以上。动物实验显示，本药在胃肠道、肝、骨髓及肾脏中含量较高，其中胃肠道浓度最高，停留时间也长。本品主要以原形经尿排泄，48h排出17%。

而现有文献中对喜树碱的研究较少，也没有文献具体研究喜树碱的大规模的分离制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种喜树碱单体的制备方法，以解决目前没有较好的方法分离纯化喜树碱单体的问题。

具体包括以下步骤：

A.80mg喜树碱粗品加入10ml85%磷酸和10ml水超声溶解，用体积比为1:1的乙腈和水定容至100 ml，混合后进行过滤，除去微小的固体不溶物，得到滤液作为分离粗品（可等比例放大）；

B.将步骤A得到的滤液通过进样泵或者进样阀注入制备液相色谱系统，其中色谱柱的规格：内径50-300mm、长度150-300mm，且所填充固定相为硅胶填料；

C.采用0.1%三氟乙酸和乙腈做流动相，体积比（V/V）范围为77/23-40/60，梯度洗脱，收集喜树碱单体对应谱带的馏分；

D.将步骤C中收集的馏分中的溶剂蒸干，即可得到色谱纯为99%的喜树碱单体。

本发明的有益效果是可直接采用半合成后的喜树碱粗品来制备喜树碱单体，不需要大量的前处理过程，简单，易控制，工艺技术简化，适用于大规模制备。

具体实施方式

实施例1

1. 将80mg喜树碱粗品加入100ml 85%磷酸和100ml水超声溶解，用体积比为1:1的乙腈和水定容至1000ml，混合后进行过滤，除去微小的固体不溶物，得到滤液作为分离粗品；

2.将上述步骤得到的滤液注入液相制备色谱分离系统，动态轴向压缩柱尺寸为50×250mm，固定相硅胶填料，粒径为20-45um，上样量为10mg，流动相流速为50ml/min。分离初期，流动相0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈体积比范围为77/23~75/25，洗脱7min后，流动相0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈体积比切换为40/60，洗脱至27min一个分离周期结束。采用的紫外光度检测器的检测波长为260nm，收集保留时间在24-26min，经HPLC分析纯度≥90%

实施例2

1. 将80mg喜树碱粗品加入100ml 85%磷酸和100ml水超声溶解，用乙腈-水（1:1）定容至1000ml，混合后进行过滤，除去微小的固体不溶物，得到滤液作为分离粗品；

2. 将上述步骤得到的滤液注入液相制备色谱分离系统，动态轴向压缩柱尺寸为50×250mm，固定相为硅胶填料，粒径为20-45um，上样量为25mg，流动相流速为50ml/min。分离初期，流动相0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈体积比范围为77/23~75/25，洗脱7min后，流动相0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈体积比切换为40/60，洗脱至27min一个分离周期结束。采用的紫外光度检测器的检测波长为260nm，收集保留时间在18-26min，经HPLC分析纯度≥90%。

Claims (1)

1.一种喜树碱单体的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

A.80mg喜树碱粗品加入10ml85%磷酸和10ml水超声溶解，用体积比为1:1的乙腈和水定容至100ml，混合后进行过滤，除去微小的固体不溶物，得到滤液作为分离粗品（可等比例放大）；

B.将步骤A得到的滤液通过进样泵或者进样阀注入制备液相色谱系统，其中色谱柱的规格：内径50~300mm、长度150~300mm，且所填充固定相为硅胶填料；

C.采用0.1%三氟乙酸和乙腈做流动相，体积比（V/V）范围为77/23~40/60，梯度洗脱，收集喜树碱单体对应谱带的馏分；

D.将步骤C中收集的馏分中的溶剂蒸干，即可得到色谱纯为99%的喜树碱单体。