CN109152771A - 2-取代的吲唑用于治疗和预防自身免疫疾病的用途 - Google Patents

Abstract

本申请涉及取代的吲唑、其单独或以结合物的形式用于治疗和/或预防自身免疫疾病的用途、及其用于制备用于治疗和/或预防自身免疫疾病的药物的用途，特别是用于治疗和/或预防关节炎(尤其银屑病性关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、系统性红斑狼疮、多发性硬化、银屑病、特应性皮炎、过敏性湿疹和慢性炎性肠病(尤其克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)的药物的用途。

Description

2-取代的吲唑用于治疗和预防自身免疫疾病的用途

本申请涉及2-取代的吲唑用于治疗和/或预防疾病的用途，及其用于制备用于治疗和/或预防疾病的药物的用途，所述疾病尤其是由IRAK4介导的自身免疫疾病，如外周关节炎(银屑病性关节炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)，轴性关节炎(特别是强直性脊柱炎)，全身性血管炎如巨细胞动脉炎和ANCA(抗中性粒细胞胞浆抗体)-相关的血管炎，痛风和其他晶体性关节病或代谢性关节炎(羟基磷灰石性关节病、软骨钙质沉着症(焦磷酸钙二水合物(CPPD))，内分泌性关节疾病(endocrine jointdisorders)如糖尿病患者甲状旁腺活动过度(甲状旁腺机能亢进)、甲状腺活动过度(甲状腺机能亢进)、结节病、幼年特发性关节炎、银屑病、特应性皮炎、过敏性湿疹/接触性过敏、多发性硬化、系统性红斑狼疮和所谓的自身炎症性疾病如施尼德氏综合征(Schnitzler′ssyndrome)、CRMO(慢性复发性多灶性骨髓炎)、SAPHO(滑膜炎、痤疮、脓疱病、骨质增生和骨炎的首字母缩写词)综合征和PAPA(化脓性关节炎、脓皮病和痤疮的首字母缩写词)综合征、慢性炎性肠病，特别是克罗恩病(Crohn′s disease)和溃疡性结肠炎、以及炎症诱发的疼痛或慢性疼痛。

本申请涉及抑制白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)的通式(I)的取代的吲唑用于治疗自身免疫疾病或功能障碍的用途。

人IRAK4(白细胞介素-1受体相关激酶4)在免疫系统的激活中起重要作用。因此，该激酶是用于开发炎症抑制物质的重要治疗靶分子。IRAK4由许多细胞表达并介导以下受体的信号转导：Toll样受体(TLR)(TLR3除外)，以及由IL-1R(受体)、IL-18R、IL-33R和IL-36R组成的白细胞介素(IL)-1β家族受体(Janeway和Medzhitov，Annu.Rev.Immunol.，2002；Dinarello，Annu.Rev.Immunol.，2009；Flannery和Bowie，Biochemical Pharmacology，2010)。

IRAK4敲出的小鼠和来自缺乏IRAK4的患者的人细胞均对TLR(TLR3除外)和IL-1β家族的刺激不起反应(Suzuki，Suzuki等人，Nature，2002；Davidson，Currie等人，JImmunol，2006；Ku，von Bernuth等人，JEM，2007；Kim，Staschke等人，JEM，2007)。

TLR配体或IL-1β家族配体与各自受体的结合导致MyD88[髓细胞分化初次应答基因(88)]募集并结合至受体。从而，MyD88与IRAK4相互作用，导致形成活性复合物，所述活性复合物与激酶IRAK1或IRAK2相互作用并将其激活(Kollewe，Mackensen等人，J Biol Chem，2004；Precious等人，J.Biol.Chem.，2009)。由此，将NF(核因子)-κB信号途径和MAPK(促分裂原活化蛋白激酶)信号途径激活(Wang，Deng等人，Nature，2001)。NF-κB信号途径和MAPK信号途径两者的激活产生与不同的免疫过程相关的过程。例如，存在增多的多种炎症信号分子和酶(如细胞因子、趋化因子和COX-2(环加氧酶-2))的表达，以及增强的炎症相关基因(例如COX-2、IL-6(白细胞介素-6)、IL-8)的mRNA稳定性(Holtmann，Enninga等人，J BiolChem，2001；Datta，Novotny等人，J Immunol，2004)。此外，这些过程可伴随有某些细胞类型(例如单核细胞、巨噬细胞、树突细胞、T细胞和B细胞)的增殖和分化(Wan，Chi等人，NatImmunol，2006；McGettrick and J.O′Neill，Br J Haematol，2007)。

自身免疫疾病是免疫系统直接针对身体本身(“自身”)的疾病，因此攻击健康的内源组织。在本文中，免疫系统可以仅选择性地针对某种器官(例如，在溃疡性结肠炎的情况下为肠，在银屑病的情况下为皮肤或在多发性硬化的情况下为神经)，因此他们被归类为所谓的器官特异性自身免疫疾病；或者其直接针对整个系统，从而导致非器官特异性系统性自身免疫疾病。在非器官特异性系统性自身免疫疾病的情况下，免疫系统攻击身体的各种器官(例如在系统性红斑狼疮的情况下，具有对皮肤、关节、肾脏等反应)。免疫系统的这种不受控制的功能失常随后导致体内的慢性炎症过程。如果自身免疫疾病仍未得到治疗，由于严重的炎症反应，受影响的器官被破坏，在严重病程(系统性受累)的某些情况下，其可导致死亡。因此，早期诊断和治疗具有重要意义。

激酶IRAK4或经由IRAK4的信号传导在多种自身免疫疾病的潜在病理学中发挥着核心作用(Chaudhary等人，J Med Chem，2015)。特别地，IRAK4的核心作用已通过直接比较野生型(WT)小鼠与具有激酶失活形式的IRAK4(IRAK4KDKI)的遗传修饰动物而证明，在多发性硬化动物模型中，其中IRAK4KDKI动物具有改善的MS症状(Staschke等人，J Immunol，2009)。还已表明IRAK4的表达与伏格特-小柳-原田综合征(Vogt-Koyanagi-Haradasyndrome)的程度相关(Sun，Yang等人，PLoS ONE，2014)。此外，已显示IRAK4与通过浆细胞样树突细胞的免疫复合物介导的IFNα(干扰素α)产生(系统性红斑狼疮(SLE)发病机理中的关键过程)高度相关(Chiang等人，J Immunol，2010)。除了IRAK4在先天免疫性中的关键作用，也存在这样的暗示：IRAK4影响所谓的Th17 T细胞(适应性免疫的成员)的分化。在IRAK4激酶活性缺失情况下，与WT小鼠相比，有较少的IL-17-生成T细胞(Th17 T细胞)产生。抑制IRAK4使得能够预防和/或治疗外周关节炎(例如银屑病性关节炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、轴性关节炎(特别是强直性脊柱炎(Bekhterev′sdisease))、结节病、系统性红斑狼疮、银屑病、白癜风、巨细胞动脉炎、特应性皮炎、过敏性湿疹/接触性过敏、多发性硬化和慢性炎性肠病(特别是克罗恩病和溃疡性结肠炎(Staschke等人，J Immunol，2009；Marquez等人，Ann Rheum Dis，2014；Ciccia等人，Rheumatology，2015；Cinetto和Agostini，Expert Rev Clin Immunol，2016；Lock等人，NatMed，2002；Esendagli等人，J Neuroimmunol，2013；Brucklacher Waldert等人，Brain，2009；Li等人，J Neuroimmunol，2011；Zambrano-Zargoza等人，Int J Inflamm，2014；Geremia和Jewell，Expert Rev Gastroenterol Hepatol，2012；Kobayashi等人，Gut，2008；Sugihara等人，Clin Exp Immunol，2010；Fujino等人，Gut，2003；Rovedatti等人，Gut2009)。

由于IRAK4在TLR(TLR3除外)和IL-1受体家族的MyD88-介导信号级联中的核心作用，抑制IRAK4可以用于预防和/或治疗由所述受体介导的疾病。TLR和IL-1受体家族的成员参与以下疾病的发病机理：类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、幼年特发性关节炎、重症肌无力、脉管炎(例如贝切特氏病(Behcet’s disease)和巨细胞动脉炎肉芽肿病)、胰腺炎、系统性红斑狼疮、皮肌炎和多肌炎、糖尿病(1型和2型)、糖尿病肾病、骨关节炎、斯耶格伦氏综合征( syndrome)、斯蒂尔氏病(Still’s disease)、多发性硬化和败血症(Yang，Tuzun等人，J Immunol，2005；Zhou等人，Arthritis Rheum，2005；Candia，Marquez等人，TheJournal of Rheumatology，2007；Li，Eur J Immunol，2008；Scanzello，Plaas等人，CurrOpin Rheumatol，2008；Deng，Ma-Krupa等人，Circ Res，2009；Roger，Froidevaux，et al，PNAS，2009；Devaraj，Tobias等人，Arterioscler Thromb Vasc Biol，2011；Ferraccioli等人，Mol Med，2010；Kim，Cho等人，Clin Rheumatol，2010；Carrasco等人，Clinical andExperimental Rheumatology，2011；Gambuzza，Licata等人，Journal ofNeuroimmunology，2011；Fresno，Archives Of Physiology And Biochemistry，2011；Volin和Koch，J Interferon Cytokine Res，2011；Akash，Shen等人，Journal ofPharmaceutical Sciences，2012；Goh和Midwood，Rheumatology，2012；Dasu，Ramirez等人，Clinical Science，2012；Ouziel，Gustot等人，Am J Patho，2012；Ramirez和Dasu，CurrDiabetes Rev，2012，Okiyama等人，ArthritisRheum，2012；Chen等人，Arthritis ResTher，2013；Liu等人，Clin Rev Allergy Immunol，2013；Sedimbi，Hagglof等人，Cell MolLife Sci，2013；Van de Veerdonk等人，Front Immunol，2013；Zarpelon等人，Br JPharmacol，2013；Caso，Costa等人，Mediators of Inflammation，2014；Cordiglieri，Marolda等人，J Autoimmun，2014；Jialal，Major等人，J Diabetes Complications，2014；Kaplan，Yazgan等人，Scand J Gastroenterol，2014；Talabot-Aye等人，Cytokine，2014；Zong，Dorph等人，Ann Rheum Di，2014；Timper，Seelig等人，J Diabetes Complications，2015)。

皮肤病如银屑病、特应性皮炎、金德勒综合征(Kindler′s syndrome)、大疱性类天疱疮、变应性接触性皮炎、斑秃、反常性痤疮和寻常痤疮同样与IRAK4介导的TLR信号途径或IL-1R家族有关(Schmidt，Mittnacht等人，J Dermatol Sci，1996；Hoffnann，J InvestigDermatol Symp Proc，1999；Gilliet，Conrad等人，Archives of Dermatology，2004；Niebuhr，Langnickel等人，Allergy，2008；Miller，AdV Dermatol，2008；Terhorst，Kalali等人，Am J Clin Dermatol，2010；Viguier，Guigue等人，Annals of Internal Medicine，2010；Carrier等人，J Invest Dermatol，2011；Cevikbas，Steinhoff，J Invest Dermatol，2012；Minkis，Aksentijevich等人，Archives of Dermatology，2012；Dispenza，Wolpert等人，J Invest Dermatol，2012；Minkis，Aksentijevich等人，Archives of Dermatology，2012；Liu等人，Clin Rev Allergy Immunol，2013；Gresnigt和van de Veerdonk，Seminarsin Immunology，2013；Selway，Kurczab等人，BMC Dermatology，2013；Sedimbi，Hagglof等人，Cell Mol Life Sci，2013；Wollina，Koch等人，Indian Dermatol Online，2013；Foster，Baliwag等人，J Immunol，2014)。

此外，TLR和IL-1R家族成员还参与其他炎症性疾病的发病机理，所述炎症性疾病如过敏症、贝切特氏病、结晶性关节病如痛风、系统性红斑狼疮、成人斯蒂尔氏病(adult-onset Still′s disease)和慢性炎性肠病例如溃疡性结肠炎和克罗恩氏病，因此，在这里，抑制IRAK4是一种合适的预防和/或治疗方法(Liu-Bryan，Scott等人，Arthritis&Rheumatism，2005；Piggott，Eisenbarth等人，J Clin Inves，2005；Christensen，Shupe等人，Immunity，2006；Cario，Inflammatory Bowel Diseases，2010；Nickerson，Christensen等人，The Journal of Immunology，2010；Rakoff-Nahoum，Hao等人，Immunity，2006；Heimesaat，Fischer等人，PLoS ONE，2007；Heimesaat，Nogai等人，Gut，2010；Kobori，Yagi等人，J Gastroenterol，2010；Schmidt，Raghavan等人，Nat Immunol，2010；Shi，Mucsi等人，Immunological Reviews，2010；Coccia等人，J Exp Med，2012；Leventhal和Schroppel，Kidney Int，2012；Chen，Lin等人，Arthritis Res Ther，2013；Hao，Liu等人，Curr OpinGastroenterol，2013；Kreisel和Goldstein，Transplant International，2013；Li，Wang等人，Pharmacology&Therapeutics，2013；Walsh，Carthy等人，Cytokine&Growth FactorReviews，2013；Zhu，Jiang等人，Autoimmunity，2013；Yap和Lai，Nephrology，2013；Vennegaard，Dyring-Andersen等人，Contact Dermatitis，2014；D′Elia，Brucato等人，Clin Exp Rheumatol，2015；Jain，Thongprayoon等人，Am J Cardiol.，2015；Li，Zhang等人，Oncol Rep.，2015)。

除了已经提及的疾病外，在炎性眼部疾病如葡萄膜炎、角膜炎和过敏性结膜炎的发病机理中也描述了IRAK4介导的TLR过程(Li等人，Curr Mol Med.2009；Bascherini等人，Clin Rheumatol.2015；Sun和Pearlman，Investigative Ophthalmology&Visual Science，2009；Redfern和McDermott，Experimental Eye Research，2010；Kezic，Taylor等人，JLeukoc Biol，2011；Chang，McCluskey等人，Clinical&Experimental Ophthalmology，2012)。

由于在瘙痒和疼痛(包括急性、慢性、炎性和神经性疼痛)的情况下通过IRAK4参与TLR介导的信号和IL-1受体家族介导的信号，可以认为通过抑制IRAK4对所述适应症具有治疗作用。疼痛的实例包括痛觉过敏、异常性疼痛、手术后疼痛、神经性疼痛、腹痛、炎症引发的疼痛、腰痛和慢性疼痛(Wolf等人，Brain，Behav Imm，2008；Kim等人，Toll-likeReceptors：Roles in Infection and Neuropathology，2009；del Rey，Apkarian等人，AnnNY AcSci，2012；Guerrero等人，EurJPharmacol，2012；Kwok等人，PLoS ONE，2012；Nicotra等人，Ex Neurol，2012；Chopra和Cooper，J Neuroimmune Pharmacol，2013；David等人，Neurobiol Dis，2013；Liu和Ji，Pflugers Arch.，2013；Stokes等人，JNeuroinflammation，2013；Park，Stokes等人，Cancer Chemother Pharmacol，2014；Won等人，J Pain，2014；Siddique和Khan，Dig Dis Sci.2011；Schrepf等人，Brain Behav Immun，2015)。

炎症性疾病如CAPS(冷吡啉相关周期性综合征(cryopyrin-associated periodicsyndromes))，包括FCAS(家族性寒冷型自身炎症综合征(familial coldautoinflammatory syndrome))、MWS(Muckle-Wells综合征)、NOMID(新生儿多系统炎症性疾病(neonatal-onset multisystem inflammatory disease))和CONCA(慢性婴儿神经皮肤关节综合征(chronic infantile，neurological，cutaneous，and articular)))；FMF(家族性地中海热)、HIDS(高-IgD综合征)、TRAPS(肿瘤坏死因子受体1相关周期性综合征)、幼年特发性关节炎(juvenile idiopathic arthritis)、成人斯蒂尔氏病、亚-贝二氏综合征(Adamantiades- disease)、类风湿性关节炎、骨关节炎、施尼德氏综合征、SAPHO(滑膜炎、痤疮、脓疱病、骨质增生和骨炎的首字母缩写词)综合征、PAPA(化脓性关节炎、脓皮病和痤疮的首字母缩写词)综合征、PASS(脓皮病、寻常痤疮、化脓性汗腺炎和强直性脊柱炎的首字母缩写词)综合征和斯耶格伦氏综合征，它们通过阻断IL-1信号途径来治疗；因此在这里IRAK4抑制剂也适用于治疗所述疾病(Narayanan等人，Cornea 2008；Brenner等人，Br J Dermatol，2009；Henderson和Goldbach-Mansky，Clin Immunol，2010；Dinarello，European Journal of Immunology，2011；Gul，Tugal-Tutkun等人，Ann Rheum Dis，2012；Pettersson，Annals of MedicinePetterson，2012；Ruperto等人，N Engl J Med，2012；等人，J Rheumatol，2012；Vijmasi等人，Mol Vis，2013；Yamada等人，ExpertOpin Ther Target，2013；de Koning，Clin Transl Allergy，2014)。IL-33R、IL-33的配体特别参与特应性皮炎和过敏性湿疹/皮炎和强直性脊柱炎的发病机制，因此，对于预防和/或治疗而言，抑制IRAK4是合适的治疗方法(Li等人，J Investig Med，2013；Theoharides等人，J Pharmacol Exp Ther.2015；Saluja等人，Clin Transl Allergy.2015；Firinu等人，Curr Rheumatol Rep，2016；Leuenberger等人，Dermatology，2016；Nygaard等人，J EurAcad Dermatol Venereol.2016；Omenetti等人，Rheumatology(Oxford)，2016)。IL-1受体家族成员与不同的炎症性疾病如哮喘、COPD、特发性间质性肺炎、变应性鼻炎、肺纤维化、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和CRMO(慢性复发性多灶性骨髓炎)相关，因此，在所述适应症中，预防和/或治疗作用寄希望于通过抑制IRAK4进行(Kang等人，J Immunol，2007；Imaoka等人，Eur Resp J，2008；Couillin等人，J Immunol，2009；Lloyd，Curr OpinImmunol，2010；Pauwels等人，Eur Respir J，2011；Haenuki等人，J Allergy Clin Immunol，2012；Yin等人，ClinExpImmunol，2012；Alexander-Brett等人，J Clin Invest，2013；Bunting等人，BioMed Res Int，2013；Byers等人，J Clin Invest，2013；Kawayama等人，J InterferonCytokine Res，2013；Martínez-Gonzáález等人，Am J Respir Cell Mol Biol，2013；Nakanishi等人，PLoS ONE，2013；Qiu等人，Immunol，2013；Li等人，JAllergy ClinImmunol，2014；Saluja等人，Mol Immunol，2014；Scianaro等人，Pediatr Rheumatol Online，2014；Lugrin等人，J Immunol，2015)。

作为自身免疫疾病如多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病和外周关节炎情况下的标准治疗，使用基本上抑制免疫系统的免疫抑制剂。

目前的多发性硬化(MS)的药物治疗遵循不同的方法：

·使用高剂量全身性类固醇治疗急性MS发作，

·使用与症状匹配的各种药物进行对症治疗，以及

·用于预防新的MS发作的治疗。在本文中，使用肠胃外(例如β-干扰素、醋酸格拉替雷、那他珠单抗)和口服的药物(例如芬戈莫德(Fingolimod)(富马酸二甲酯)、特立氟胺(teriflunomide))，以及可的松制剂(例如泼尼松龙(prednisolone)或甲基泼尼松龙(methyl prednisolone))。

对于系统性红斑狼疮(SLE)的治疗，使用免疫抑制剂或免疫调节剂如NSAID、羟氯喹、全身性类固醇(糖皮质激素)、吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil)(MMF)、硫唑嘌呤(azathioprine)、来氟米特(leflunomide)、氨甲喋呤(methotrexate)、环孢菌素或环磷酰胺(通常为组合物并间隔/持续治疗)或贝利单抗(belimumab)或利妥昔单抗(rituximab)(肠胃外施用的抗体)。

银屑病治疗取决于严重程度并使用局部类固醇和维生素D3类似物(或两者的结合物)或局部蒽三酚或类维生素A(通常与外用的去角质化合物(如水杨酸或尿素)一起使用)以及光疗进行。在一些情况下，也可使用钙调神经磷酸酶抑制剂如他克莫司(tacrolimus)和吡美莫司(pimecrolimus)。可用的全身性治疗方法尤其是氨甲喋呤(methotrexate)、环孢菌素、富马酸酯、阿普斯特(Apremilast)、类维生素A TNF阻断剂和其他活性化合物。生物制剂如TNF阻断剂(例如依那西普(Etanercept)、英夫利昔单抗(Infliximab)、阿达木单抗(Adalimumab)、格里木单抗(golimumab)和塞妥珠单抗(certolizumab pegol))或抑制白细胞介素的单克隆抗体如优特克单抗(ustekinumab)和苏金单抗(secukinumab)也被用于银屑病的治疗中。

对于特应性皮炎(神经性皮炎)和过敏性湿疹的治疗，使用类固醇、水杨酸、尿素、钙调神经磷酸酶抑制剂(calcineurin inhibitors)如他克莫司(tacrolimus)、抗生素(例如莫匹罗星(mupirocin))、抗组织胺药(antihistamines)、环孢菌素和光疗。

对于关节炎如类风湿性关节炎、银屑病性关节炎和强直性脊柱炎的治疗，除NSAID(非甾族抗炎药物)、羟氯喹和类固醇(例如强的松(prednisone)之外，还可用所谓的化学性疾病缓解药物(DMARDS)如氨甲喋呤、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)和来氟米特(leflunomide)、TNF-阻断剂和其他活性化合物。将生物制剂如TNF阻断剂(英夫利昔单抗、阿达木单抗、格里木单抗和塞妥珠单抗，以及依那西普、、阿巴西普(abatacept)或抑制白细胞介素的单克隆抗体如优特克单抗、托珠单抗(tocilizumab)和苏金单抗，或Jak/STAT抑制剂例如托法替尼(tofacitinib)用于治疗关节炎。

慢性炎性肠病患者例如用抗生素如环丙沙星和甲硝唑、止泻药如洛哌丁胺或轻泻药(比沙可啶)以及益生菌(Mutaflor，Lactobacillus GG，Lactobacillusplantarum，L.acidophilus，L.casei，BiHdobacterium infantis 35624，Enterococcusfecium SF68，Bifidobacterium longum，Escherichia coli Nissle 1917)治疗。此外，患者对用类固醇(例如布地奈德)局部治疗或用类固醇(例如泼尼松龙)全身性治疗有响应。此外，柳氮磺胺吡啶、硫唑嘌呤、巯基嘌呤、氨甲喋呤、环孢菌素、TNF-阻断剂(例如阿达木单抗、依那西普)和整联蛋白抗体(例如维多珠单抗(vedolizumab)、那他珠单抗(natalizumab))也可用于治疗。

然而，已知的治疗方法不能消除病因并且可能导致危及生命的感染。

在某些情况下，所述的所有治疗方法都可能导致严重的副作用，例如骨质疏松症、对葡萄糖水平的负面影响(全身性类固醇)，在某些情况下致死性的感染、结核病复活(TNF阻断剂)、器官损伤(胰腺炎、肝炎、肺炎)、输注和注射反应、自身抗体形成(大多数肠外生物制剂)、癌症风险增加(TNF阻断剂)及其他。所提及的治疗方法均未治愈所述疾病，并且新的发作和急性发作非常频繁，特别是当治疗中断时。

本发明的目的是提供治疗自身免疫疾病的替代性选择，所述自身免疫疾病特别是多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、外周关节炎(特别是银屑病性关节炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、轴性关节炎(特别是别赫捷列夫病)、慢性炎性肠病(特别是克罗恩病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹/接触性皮炎。

本发明所要解决的问题通过通式(I)的化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病的用途而解决，

其中：

R¹为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代，或者被以下基团单取代或相同或不同地多取代：

卤素、羟基、未取代的或者单-或多-卤素取代的C₃-C₆-环烷基，或R⁶、R⁷SO₂、R⁷SO或R⁸O基团，

或选自以下的基团：

其中＊代表基团与分子其余部分的键合位点；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或C₁-C₆-烷基；

R⁴为卤素、氰基、未取代的C₁-C₆-烷基或者单取代或相同或不同地多取代的C₁-C₆-烷基、或未取代的C₃-C₆-环烷基或者单取代或相同或不同地多取代的C₃-C₆-环烷基，且取代基选自卤素和羟基；

R⁵为氢、卤素或未取代的或单-或多-卤素取代的C₁-C₆-烷基；

R⁶为具有4至6个环原子的未取代或者单-或二-甲基取代的单环饱和杂环，其含有选自O、S、SO和SO₂的杂原子或杂基；

R⁷为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代或者被卤素、羟基或C₃-C₆-环烷基单取代或相同或不同地多取代，或R⁷为C₃-C₆-环烷基；

R⁸为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代或者被卤素单取代或相同或不同地多取代。

本发明的另一实施方案包括通式(I)的化合物用于治疗和/或预防以下疾病的用途：多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、特应性皮炎和过敏性湿疹、关节炎(特别是银屑病性关节炎、别赫捷列夫病、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(特别是克罗恩病、溃疡性结肠炎)。

对于本发明的目的而言，多发性硬化(MS)——其也被称作播散性脑脊髓炎(ED)——应理解为是指包括脑和脊髓的中枢神经系统的慢性炎性疾病，且在其过程中，神经结构，特别是髓鞘被自身反应性免疫系统破坏。在大多数情况下，疾病的发作是在早期成年期，并且其可导致各种症状如视力受损、疼痛和/或麻痹。女性多发性硬化的发生率约为男性的两倍。对于MS尚无治愈方法，但是其病程可使用药物如特立氟胺、富马酸二甲酯和芬戈莫德来减弱。个体与个体之间，MS的病程可能有很大不同。MS的两种最重要的进展形式是阵发性和慢性渐进(进展)病程。通常(在约80％的患者中)，最初的阵发-缓解病程(复发-缓解，简称RR-MS)后来变成慢性进展病程(继发性渐进，简称SP-MS)。不太常见地是(在大约10％的MS病例中)在开始时就存在慢性进展病程(原发性渐进，简称PP-MS)，而事先没有任何疾病的发作。

对于本发明的目的而言，系统性红斑狼疮(SLE)应理解为是指慢性且危及生命的自身免疫疾病，其可导致多器官病变、皮肤症状(例如蝴蝶疹)和肾脏疾病(狼疮性肾炎)。在本文中，自身反应性B细胞分泌的抗-DNA(脱氧核糖核酸)和其他自身抗体的形成导致形成病原学相关的免疫复合物。然后它们可以通过体内核酸特异性toll-样受体(TLR)，特别是TLR7和TLR9来活化免疫系统细胞，例如浆细胞样树突状细胞(pDC)。这导致产生I型干扰素(例如IFN-α和TNF-α)(Chen等人，Clinic Rev Allerg Immunol，2015)。除INF-α和TNF-α以外，在SLE患者中还观察到与健康个体相比IL-6和IFN-γ的血清水平的显著增加(Lyn-Cook等人，Mol Immunol，2014)。此外，循环ThH17细胞(17型T辅助细胞)的频率增加，随后IL-17血清水平增加，这两者都与疾病严重程度相关(Zambrano-Zargoza等人，Int J Inflamm，2014)。

对于本发明的目的而言，银屑病应理解为是指阵发性渐进的且皮肤剥落增加的慢性皮肤炎症。典型症状是银白色的圆形皮肤病变，其强烈剥落且优选发生在膝盖、肘部和头皮。受影响的区域通常非常痒。发展成银屑病的原因是Th1和Th17细胞(1型或17型的T辅助细胞)介导的慢性炎症反应。在该炎症反应期间，产生促炎细胞因子如IFN-γ、TNF-α、IL-23和IL-17(Deng等人，Clin Rev Allergy Immunol.2016；Zambrano-Zargoza等人，Int JInflamm，2014；Chen等人，Clinic Rev Allerg Immunol，2015)。这导致角质形成细胞增殖并以约7倍地更快地速度迁移到皮肤的角质层(不是28天，在银屑病患者情况下，这仅需要约4天)。这导致表皮快速的新形成。除皮肤以外，指甲也经常受影响，其显示出凹痕和褐色斑点。在约25％的患者中，关节也受影响，其被称为银屑病性关节炎(Raychaudhuri等人，Clin Rheumatol.，2015)。

对于本发明而言，特应性皮炎(神经性皮炎)和过敏性湿疹应理解为意指与瘙痒相关的慢性炎性皮肤病。而过敏性湿疹是免疫系统对外部过敏原特异性的不适当的过度反应的结果，所述外部过敏原本身不会对机体有害，相比之下，在神经性皮炎患者的情况下，皮肤的保护功能减弱。在特应性患者中，接触物理、化学或微生物刺激之后可能导致炎症。特应性皮炎通常始于婴儿期和儿童期，并且如果有的话，通常与症状很少的阶段交替发作进行(Malajian和Guttman-Yassky，Cytokine，2015)。过敏反应如过敏性湿疹可引发或维持特应性皮炎(Fischer等人，Der Hautarzt，2003)。在许多神经性皮炎患者中，可检测到免疫球蛋白E(IgE)——其在过敏反应中起重要作用——水平增加。过敏性湿疹需要通过上表皮(epicutane)测试揭示原因，即过敏原，随后避开过敏源是至关重要的。Th2型免疫反应是常见的炎性皮肤疾病，即由于接触过敏源或由于皮肤屏障缺陷，因此例如细菌侵入，这些患者的自身反应性免疫系统通过TLR或IL-1家族的受体而激发，导致Th2细胞的活化。作为该免疫应答的结果，产生促炎细胞因子如IL-4、IL-5、IL-13、IL-18、IL-33等(Kaesler等人，JAllergy Clin Immunol.2014；Panzer等人，Exp Dermatol，2014；Skabytska等人，J DtschDermatol Ges，2016；Paul，Cytokine，2015；Malajian and Guttman-Yassky，Cytokine，2015；McKenzie，Ann Am Thorac Soc.2014)。

对于本发明的目的而言，关节炎(银屑病性关节炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、别赫捷列夫病、全身型幼年特发性关节炎)应理解为是指炎症性关节疾病。在本文中，以脊柱关节的炎症为特征的轴性关节炎(例如别赫捷列夫病)与主要影响四肢关节如脚趾、脚踝、膝盖、手指、手或肘的外周关节炎不同。在本文中，外周关节炎可以是对称的，即身体两侧的相同的关节均受到影响(例如类风湿性关节炎)，或者是不对称的，即在身体两侧发炎的关节不均匀分布(例如银屑病性关节炎)。在本文中，发炎关节的活动性受到严重限制，并且上面的皮肤变红且过热。关节炎疾病的特征在于阵发性进展渐进，其可导致关节破坏和严重残疾直至病废。自身反应性B细胞、Th1细胞和Th17细胞以及促炎细胞因子如IFN-γ、TNF、IL-6、IL-12、IL-23和IL-17在关节炎病理过程的诱导，以及渐进中起核心作用。这些免疫细胞还诱导金属蛋白酶的产生以及破骨细胞的成熟和活化，然后其导致受影响关节中的软骨和骨的破坏(Raychaudhuri等人，Clin Rheumatol，2015；Burmester等人，Ann RheumDis，2015；Furst和Emery，Rheumatol，2014；McInnes和Schett，Engl J Med，2011)。

对于本发明的目的而言，主要形式为克罗恩病和溃疡性结肠炎的慢性炎性肠病(IBD)应理解为是指可持续终生的胃肠道阵发性炎症。虽然克罗恩病和溃疡性结肠炎具有许多相同的病理特征和临床症状(例如腹部痉挛伴随体重减轻的血性腹泻)，但它们在许多方面也存在差异。在克罗恩病的情况下，炎症可能发生在从口腔至肛门的整个胃肠道中，但是在溃疡性结肠炎患者的情况下，炎症仅限于结肠。此外，在克罗恩病的情况下，肠道炎症的分布更加不均匀，即健康和发炎部分交替分布，但是在溃疡性结肠炎的情况下，炎症从肛门至结肠均匀分布。此外，还可能存在胃肠道外(例如在关节和皮肤处)的症状以及肝脏炎症。此外，溃疡性结肠炎患者特别地具有增加的肠癌风险(Geremia等人，AutoimmunityRev，2014)。两种疾病在20至40岁之间出现的更加频繁，但是，儿童和青少年也可能受影响。慢性炎性肠病无法治愈；然而，通过用药物如用柳氮磺胺吡啶、类固醇或生物制剂(如抗-TNF抗体)治疗和改变生活方式可以减少疾病阵发的频率和强度。

在下文描述的本发明的合成中间体和工作实施例的情况下，以相应的碱或酸的盐的形式给出的任何化合物通常是按照各自的制备和/或纯化方法而得到的未知精确化学计量组成的盐。因此，除非更详细地说明，否则在这样的盐的情况下，增补的名称和结构式(如“盐酸盐”、“三氟乙酸盐”、“钠盐”或“x HCl”、“x CF₃COOH”、“x Na⁺”)不应当在化学计量意义上理解，而仅是对其中所包含的盐-形成组分的说明性符号。

这同样适用于通过所述制备/或纯化方法而得到的未知化学计量组成(如果其为确定的类型)的溶剂合物(例如水合物)形式的合成中间体或工作实施例或其盐的情况。

式(I)的化合物应理解为是指化合物及其盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，由式(I)涵盖且为下述结构式的化合物及其盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，以及由式(I)涵盖并在下文中作为实施方案提及的化合物及其盐、溶剂合物和盐的溶剂合物，条件是由式(I)涵盖并在下文中提及的化合物并不是盐、溶剂合物和盐的溶剂合物。

在本发明的上下文中，优选的盐为通式(I)的化合物的生理上可接受的盐。然而，本发明还涵盖本身不适于制药应用但可用于例如分离或纯化通式(I)的化合物的盐。

通式(I)的化合物的生理上可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如以下酸的盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸。

通式(I)的化合物的生理上可接受的盐还包括常规碱的盐，例如并优选碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)以及衍生自氨或具有1至16个碳原子的有机胺的铵盐，所述有机胺例如并优选乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙基胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、二甲氨基乙醇、普鲁卡因、二苄基胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。

在本发明的上下文中，溶剂合物描述为通过与溶剂分子配位形成固态或液态络合物的通式(I)的化合物的那些形式。水合物是与水配位的特殊形式的溶剂合物。

根据其结构，通式(I)的化合物可以不同的立体异构形式存在，即以构型异构体或(如果合适)构象异构体(对映异构体和/或非对映异构体，包括阻转异构体)的形式存在。因此，本发明包含对映异构体和非对映异构体及其各自的混合物。可以以已知方式从对映异构体和/或非对映异构体的这些混合物中分离出立体异构上均一的成分；为此目的优选使用色谱法，特别是在非手性相或手性相上的HPLC色谱法。

如果通式(I)的化合物可以以互变异构的形式存在，则本发明涵盖所有的互变异构形式。

通式(I)的化合物还可以以通式(I)的化合物的所有适合的同位素变体的形式存在。在本文中，本发明化合物的同位素变体应理解为意指这样的化合物：其中本发明化合物中至少一个原子已被替换为原子序数相同但原子质量与在自然界中通常或主要存在的原子质量不同的另一原子。可纳入本发明化合物的同位素的实例为氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，如2H(氘)、3H(氚)、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I和131I。本发明化合物的特别的同位素变体，特别例如其中已纳入一种或多种放射性同位素的变体，可以有利于例如考察在体内的作用机理或活性化合物分布；由于相对容易的可制备性和可检测性，用3H或14C同位素标记的特定化合物适于此目的。此外，同位素(例如氘)的纳入由于化合物的更高的代谢稳定性可能产生特别的治疗益处，例如延长在体内的半衰期或减小所需的活性剂量；因此，在一些情况下，通式(I)的化合物的此类修饰也可构成本发明的优选实施方案。通式(I)的化合物的同位素变体可通过本领域技术人员已知的方法，例如通过在下文进一步描述的方法以及在工作实施例中描述的方法，通过使用各自试剂和/或起始化合物的相应同位素修饰来制备。

术语通式(I)的化合物还涵盖通式(I)的化合物的前药。在该上下文中，术语“前药”表示这样的化合物：其本身可以有生物活性或无生物活性，但在体内停留期间被(例如代谢或水解地)转化为通式(I)的化合物。

除非另有说明，在本发明的上下文中，取代基具有以下的含义：

烷基在本发明的上下文中代表具有指定的特定数目碳原子的直链或支链烷基基团。实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、1-甲基丙基、2-甲基丙基、叔丁基、正戊基、1-乙基丙基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、2，2-二甲基丙基、正己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1-乙基丁基和2-乙基丁基。优选甲基、乙基、正丙基、正丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基和2，2-二甲基丙基。

环烷基在本发明的上下文中为在每种情况下具有指定数目碳原子的单环饱和烷基基团。优选的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

烷氧基在本发明的上下文中代表具有指定的特定数目碳原子的直链或支链烷氧基基团。优选1至6个碳原子。实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、1-甲基丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、异戊氧基、1-乙基丙氧基、1-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、3-甲基丁氧基和正己氧基。特别优选具有1至4个碳原子的直链或支链烷氧基基团。可作为优选的提及的实例为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基丙氧基、正丁氧基和异丁氧基。

卤素在本发明的上下文中为氟、氯和溴。优选氟。

羟基在本发明的上下文中为OH。

单环饱和杂环是具有4至6个环原子并含有选自O、S、SO和SO₂的杂原子或杂基的单环饱和杂环。优选具有选自O、SO和SO₂的杂原子或杂基的杂环。实例包括：氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢-2H-吡喃-4-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-3-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-2-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基、1，1-二氧四氢噻吩-3-基、1，1-二氧四氢噻吩-2-基、1，1-二氧硫杂环丁烷-2-基或1，1-二氧硫杂环丁烷-3-基。在本文中特别优选氧杂环丁烷和四氢呋喃。非常特别优选氧杂环丁烷-3-基。

键上的符号＊表示分子中的键合点。

当通式(I)的化合物中的基团被取代时，所述基团可被单取代或多取代，除非另有说明。在本发明的上下文中，所有出现多于一次的基团被彼此独立地定义。优选被一个、两个或三个相同或不同的取代基取代。

R¹的一个优选实施方案是被1、2或3个氟原子取代的C₂-C₆-烷基基团。特别优选2，2，2-三氟乙基、3，3，3-三氟丙基和4，4，4-三氟丁基。非常特别优选的是4，4，4-三氟丁基基团。

R¹的另一优选实施方案是被一个或两个羟基基团或者一个C₁-C₃-烷氧基或三氟取代的C₁-C₃-烷氧基取代的C₂-C₆-烷基基团。特别优选被羟基或者C₁-C₃-烷氧基或三氟甲氧基或2，2，2-三氟乙氧基取代的C₂-C₅-烷基基团。非常特别优选3-羟基-3-甲基丁基、3-甲氧基丙基、3-羟基丙基、3-三氟甲氧基丙基、2-甲氧基乙基或2-羟基乙基。特别优选3-羟基-3-甲基丁基基团。

另外优选地，R¹为被C₁-C₆-烷基-SO₂基团取代的C₂-C₆-烷基基团。甲基-SO₂-取代的C₂-C₄-烷基基团是特别优选的。特别优选R¹为2-(甲基磺酰基)乙基或3-(甲基磺酰基)丙基。在后一组中，2-(甲基磺酰基)乙基是特别优选的。

另外优选地，R¹是被以下基团取代的C₁-C₃-烷基基团：氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢-2H-吡喃-4-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-3-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-2-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基、1，1-二氧四氢噻吩-3-基、1，1-二氧四氢噻吩-2-基、1，1-二氧硫杂环丁烷-2-基或1，1-二氧硫杂环丁烷-3-基。特别优选的是被氧杂环丁烷基团取代的C₁-C₃-烷基基团。特别优选R¹为氧杂环丁烷-3-基甲基基团。

对于R²和R³(它们总是具有相同的定义)，氢或甲基是优选的。特别优选甲基。

就R⁴来说，优选未取代或者单-或多-卤素-取代的C₁-C₃-烷基基团，或被一个羟基基团取代的C₁-C₃-烷基基团，或被一个羟基基团和三个氟原子取代的C₁-C₃-烷基基团。

对于R⁴，特别优选以下基：甲基、乙基、三氟-C₁-C₃-烷基、二氟-C₁-C₃-烷基、羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基丙-2-基和2，2，2-三氟-1-羟基乙基。对于R⁴，特别优选甲基、三氟甲基和二氟甲基基团。在本文中特别优选三氟甲基基团。

R⁵的优选实施方案是氢、氟、氯或C₁-C₃-烷基。更优选地，R⁵是氢、氟或甲基。最优选地，R⁵为氢或氟。

还特别优选其中R⁴为甲基或三氟甲基且R⁵为氟的化合物。非常特别优选其中R⁴为甲基且R⁵为氟的化合物，其中R⁵是在R⁴的邻位。

对于R⁶，优选的实施方案包括氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢-2H-吡喃-4-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-3-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-2-基、1，1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基、1，1-二氧四氢噻吩-3-基、1，1-二氧四氢噻吩-2-基、1，1-二氧硫杂环丁烷-2-基或1，1-二氧硫杂环丁烷-3-基。在本文中特别优选氧杂环丁烷基。非常特别优选氧杂环丁烷-3-基。

R⁷仅连接至官能团-SO₂-和-SO-上，即，R⁷为R⁷-取代的-SO₂-或SO基团。就此而论，R⁷优选为C₁-C₄-烷基，其中C₁-C₄-烷基基团未被取代，或被羟基或环丙基单取代，或被三个氟原子取代。另外优选R⁷为环丙基基。特别优选的R⁷为甲基、乙基或羟基乙基。非常特别优选R⁷为甲基。

这意味着，在被R⁷SO₂-或R⁷SO-取代的C₁-C₆-烷基基团的情况下，就R¹而言，优选被C₁-C₆-烷基-SO₂或C₁-C₆-烷基-SO取代的C₁-C₆-烷基。对于R¹，在本文中特别优选甲基磺酰基乙基和甲基磺酰基丙基。在本文中非常特别优选甲基磺酰基乙基。

对于R⁸，优选未取代的C₁-C₄-烷基基团或三氟取代的C₁-C₄-烷基基团。特别优选甲基、乙基、三氟甲基或2，2，2-三氟乙基。非常特别优选甲基、三氟甲基或2，2，2-三氟乙基。

优选式(I)的化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病，尤其用于治疗和预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途，在式(I)的化合物中

R¹为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代，或者被氟、羟基或R⁶、R⁷SO₂、R⁷SO或R⁸O基团单取代或相同或不同地多取代；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或C₁-C₃-烷基；

R⁴为卤素、氰基或C₁-C₃-烷基，其中C₁-C₃-烷基基团未被取代，或者被卤素或羟基单取代或相同或不同地多取代；

R⁵为氢、氟、氯或C₁-C₃-烷基；

R⁶为氧杂环丁烷基或四氢呋喃基；

R⁷为C₁-C₄-烷基，其中C₁-C₄-烷基基团未被取代，或者被羟基或环丙基单取代，或被三个氟原子取代；

R⁸为未取代的C₁-C₄-烷基或三氟取代的C₁-C₄-烷基。

另外优选式(I)的化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病，尤其用于治疗和预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途，在式(I)的化合物中

R¹为C₂-C₆-烷基，其中C₂-C₆-烷基是未取代的，或C₂-C₆-烷基是单-、二-或三-氟取代的，或C₂-C₆-烷基被羟基、R⁶、R⁷SO₂或R⁸O单取代，或其中R¹为氧杂环丁烷基取代的C₁-C₃-烷基；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或甲基；

R⁴为未取代的C₁-C₃-烷基基团或单-或多-卤素取代的C₁-C₃-烷基基团，或被一个羟基取代的C₁-C₃-烷基基团，或被一个羟基和三个氟原子取代的C₁-C₃-烷基基团；

R⁵为氢、氟或C₁-C₃-烷基；

R⁷为C₁-C₃-烷基；

R⁸为C₁-C₄-烷基，其中C₁-C₄-烷基基团是未取代的或单-、二-或三-氟取代的。

还特别优选通式(I)的化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病，尤其用于治疗和预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途，在通式(I)的化合物中

R¹为被羟基或C₁-C₃-烷氧基或三氟甲氧基或2，2，2-三氟乙氧基或三氟甲基取代的C₂-C₅-烷基基团，或为甲基-SO₂-取代的C₂-C₄-烷基基团，或为氧杂环丁烷-3-基-取代的C₁-C₂-烷基基团；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或甲基；

R⁴为甲基、乙基、三氟-C₁-C₃-烷基、二氟-C₁-C₃-烷基、羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基丙-2-基和2，2，2-三氟-1-羟基乙基，且

R⁵为氢、氟或甲基。

非常特别优选化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病，尤其用于治疗和预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途，在所述化合物中

R¹为4，4，4-三氟丁基、3-羟基-3-甲基丁基、3-羟基丁基、3-甲氧基丙基、3-羟基丙基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-三氟甲氧基丙基、2-甲氧基乙基、2-羟基乙基、2-(甲基磺酰基)乙基或3-(甲基磺酰基)丙基；

R²和R³均为甲基或氢，且

R⁴为二氟甲基、三氟甲基或甲基，且

R⁵为氢或氟。

还非常特别优选化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病，尤其用于治疗和预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途，在所述化合物中

R¹为3-羟基-3-甲基丁基、3-羟基丁基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-(甲基磺酰基)丙基或2-(甲基磺酰基)乙基；

R²和R³均为甲基；

R⁴为二氟甲基或三氟甲基；且

R⁵为氢。

还特别优选化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病，尤其用于治疗和预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途，在所述化合物中

R¹为3-羟基-3-甲基丁基、3-羟基丁基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-(甲基磺酰基)丙基或2-(甲基磺酰基)乙基；

R²和R³均为甲基；

R⁴为甲基，且

R⁵为氟，其中R⁵在R⁴的邻位。

本发明特别提供以下化合物用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病的用途：

1)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

2)N-[6-(羟基甲基)-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

3)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-甲氧基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

4)N-[6-(羟基甲基)-2-(3-甲氧基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

5)N-[2-(2-羟基乙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

6)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-羟基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

7)N-[2-(2-羟基乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

8)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

9)N-[6-(羟基甲基)-2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

10)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(甲基磺酰基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

11)N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

12)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[2-(甲基磺酰基)乙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

13)6-(二氟甲基)-N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

14)6-(二氟甲基)-N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[2-(甲基磺酰基)乙基]-2H-吲唑-5-基}吡啶-2-甲酰胺

15)6-(二氟甲基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-羟基丙基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

16)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

17)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(三氟甲氧基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

18)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(2，2，2-三氟乙氧基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

19)5-氟-N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-甲基吡啶-2-甲酰胺

20)N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-甲基吡啶-2-甲酰胺

21)6-(2-羟基丙-2-基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

22)N-{2-[2-(1-羟基环丙基)乙基]-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺。

本发明还提供上述化合物1)至22)用于治疗和/或预防以下疾病的用途：多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹。

本发明还提供通式(III)的化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病的用途，

在通式(III)中

R¹为4，4，4-三氟丁基、3-羟基-3-甲基丁基、3-甲氧基丙基、3-羟基丙基、3-羟基丁基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-三氟甲氧基丙基、2-甲氧基乙基、2-羟基乙基、2-(甲基磺酰基)乙基、3-(甲基磺酰基)丙基或2-(1-羟基环丙基)乙基；

R⁴为二氟甲基、三氟甲基或甲基；且

R⁵为氢或氟。

本发明的另一实施方案为通式(III)的化合物(其中R¹、R⁴和R⁵如上所定义)用于治疗和/或预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途。

本发明的另一个实施方案为以下的通式(III)的化合物：

5-{[(5-氟-6-甲基吡啶-2-基)羰基]氨基}-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯，和

2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯，它们用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病的用途，尤其用于治疗和/或预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹的用途。

通式(III)的化合物是白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK4)的抑制剂。

通式(I)的化合物发挥IRAK4激酶抑制剂的作用并且具有不可预见的有用的药理活性谱。

因此，除了上文提及的主题之外，本发明还提供通式(I)的化合物用于治疗和/或预防人和动物疾病的用途。

特别优选用本发明的IRAK4抑制剂治疗和/或预防自身免疫疾病，例如炎性神经疾病(MS)、炎性关节疾病(各种形式的关节炎)、炎性皮肤疾病(银屑病、特应性皮炎和过敏性湿疹)、炎性肠病(IBD)和多器官疾病(SLE)。

通式(I)的化合物适于预防和/或治疗各种疾病以及疾病相关状态，特别是由TLR(除TLR3之外)和/或IL-1受体家族介导的疾病和/或病理直接由IRAK4介导的疾病。IRAK4-相关疾病包括多发性硬化、关节炎(银屑病性关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、痛风、Vogt-Koyanagi-Harada综合征、系统性红斑狼疮、慢性炎性肠病(克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、银屑病、特应性皮炎和过敏性湿疹。

通式(I)的化合物还可用于预防和/或治疗由MyD88和TLR(除TLR3之外)介导的疾病。这包括多发性硬化、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎、强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮、骨关节炎、斯耶格伦氏综合征、巨细胞动脉炎、脓毒病、多发性皮肌炎和皮肌炎、皮肤疾病如银屑病、特应性皮炎、斑秃、过敏性湿疹、反常性痤疮和寻常痤疮、慢性炎性肠病如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎。

由于本发明的通式(I)的化合物的作用机理，它们适于预防和/或治疗TLR介导的疾病例如类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病、特应性皮炎、系统性红斑狼疮、贝切特氏病、痛风。此外，本发明的通式(I)的化合物适合用于治疗和/或预防多发性硬化、成人斯蒂尔氏病以及慢性炎性肠病如溃疡性结肠炎和克罗恩氏病。

通式(I)的化合物也提供对瘙痒和疼痛，特别是急性、慢性、炎性和神经性疼痛的预防和/或治疗。

此外，通式(I)的化合物适用于治疗和/或预防通过IL-1受体家族介导的疾病。这些疾病包括：CAPS(冷吡啉相关周期性综合征)，包括FCAS(家族性寒冷型自身炎症综合征)；MWS(Muckle-Wells综合征)；NOMID(新生儿多系统炎症性疾病)和CONCA(慢性婴儿神经皮肤关节(chronicinfantile，neurological，cutaneous，and articular))综合征；FMF(家族性地中海热(familial mediterranean fever))；HIDS(高-IgD综合征)；TRAPS(肿瘤坏死因子受体1相关周期性综合征)；幼年特发性关节炎；成人斯蒂尔氏病；痛风；亚-贝二氏综合征(Adamantiades- disease)；类风湿性关节炎；银屑病；关节炎；别赫捷列夫病；反应性关节炎；全身型幼年特发性关节炎；骨关节炎；干燥性角结膜炎以及斯耶格伦氏综合征；多发性硬化症；系统性红斑狼疮；斑秃；1型糖尿病；2型糖尿病和心肌梗死后遗症。以下疾病与IL-1受体家族的调节异常有关，适合于通式(I)的化合物的治疗和/或预防使用：肺部疾病如哮喘、COPD、特发性间质性肺炎和ARDS；慢性炎性肠病如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎。

通式(I)的化合物也可用于治疗和/或预防由IL-1受体家族介导的神经障碍，如多发性硬化以及皮肤疾病如银屑病、特应性皮炎、反常性痤疮、斑秃和变应性接触性皮炎。

此外，通式(I)的化合物还适合用于治疗和/或预防疼痛疾病，特别是急性、慢性、炎性和神经性疼痛。这优选包括痛觉过敏、异常性疼痛、由关节炎(例如骨关节炎、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎和反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)引起的疼痛、手术后疼痛、由脊髓损伤引起的疼痛、炎症引发的疼痛、腰痛和慢性疼痛。

本发明另外还提供治疗和/或预防疾病、特别是上文所提及的疾病的方法，所述方法使用有效量的至少一种通式(I)的化合物。

在本发明的上下文中，术语“治疗(treatment或treating)”包括抑制、延缓、阻止(checking)、缓解、减轻、限制、减少、制止、抵抗或治愈疾病、病症、障碍、损伤或健康问题，或所述状态的发展、进程或演进和/或所述状态的症状。术语“疗法”在本文中应理解为与术语“治疗”同义。

在本发明的上下文中，术语“防止(prevention)”、“预防(prophylaxis)”和“阻止(preclusion)”同义使用并且指避免或减少感染、经受、遭受或患有疾病、病症、障碍、损伤或健康问题或所述状态的发展或演进和/或所述状态的症状的风险。

关于由IRAK4介导的自身免疫疾病，在本发明中，“防止(prevention)”、“预防(prophylaxis)”或“阻止(preclusion)”应理解为是指疾病缓解后的维持治疗，用于防止再发(复发)。这意味着可以防止或至少延迟新的急性炎症。

“疾病的缓解”应理解为是指暂时或永久停止身体或精神性质的疾病症状，但未达到永久恢复。

“再发”或“复发”应理解为是指暂时成功治疗后，或自发缓解后，疾病或其症状的重现。

可以部分或完全地治疗或预防疾病、病症、障碍、损伤或健康问题。

通式(I)的化合物可以单独使用或(如果需要)与其他活性成分结合使用。本发明还提供药物，所述药物包含至少一种通式(I)的化合物和一种或多种其他活性成分，特别用于治疗和/或预防上述病症。适于结合的活性成分的优选实例包括：

通常可提及的活性成分如：抗细菌物质(例如青霉素、万古霉素、环丙沙星、莫匹罗星、抗病毒物质(例如阿昔洛韦、奥司他韦)和抗真菌物质(例如萘替芬、制霉菌素)；丙种球蛋白化合物、免疫调节化合物和免疫抑制化合物如环孢菌素、TNF阻断剂(例如依那西普、英夫利昔单抗、格里木单抗和塞妥珠单抗)、IL-1抑制剂(例如阿那白滞素(Anakinra)、卡那单抗(Canakinumab)、利洛纳塞(Rilonacept))、磷酸二酯酶抑制剂(例如阿普斯特(Apremilast))、一般的Jak/STAT(Jak/STAT in general)(例如托法替尼(Tofacitinib)、Baricitinib、GLPG0634)、来氟米特(leflunomid)、芬戈莫德、特立氟胺、富马酸二甲酯(例如tecfidera)、IL-6拮抗剂(阿利特拉(Actemra)，沙利鲁单抗(sarilumab))、IL-2抑制剂(如Selela)、乙酸格拉替雷(glatiramer acetate)(例如Copaxone、Glatopa)、Tysabri、环磷酰胺、利妥昔单抗、贝利木单抗、钙调神经磷酸酶抑制剂(例如他克莫司)、雷帕霉素、吗替麦考酚酯、干扰素(例如betaferon)、皮质甾类/糖皮质激素(例如泼尼松、泼尼松龙、地塞米松、甲泼尼龙、氢化可的松、倍他米松)、环磷酰胺、硫唑嘌呤和柳氮磺胺吡啶；对乙酰氨基酚、抗组织胺药(例如中的氮卓斯汀、中的羟嗪、中的氯马斯汀)、非甾族抗炎物质(NSAIDS)(阿司匹林、布洛芬、萘普生、依托度酸、塞来昔布、秋水仙碱)。

除了上文提及的那些之外，本发明的IRAK4抑制剂也可以与以下活性成分结合：

6-巯基嘌呤、ACE抑制剂(例如贝那普利)、乙酰胆碱酯酶抑制剂(例如多奈哌齐)、血管紧张素受体阻断剂(例如氯沙坦、缬沙坦)、阴离子交换剂(例如考来烯胺、考来替泊、考来维仑)、抗生素例如环丙沙星和甲硝唑、抗-CD3抗体、抗胆碱能药(例如格隆铵)、抗糖尿病药如二甲双胍、止泻药如洛哌丁胺或轻泻药(比沙可啶)、镇痉挛药(例如加巴喷丁)；抗-T-淋巴细胞球蛋白/抗淋巴细胞球蛋白、阿普斯特、硫唑嘌呤、巴利昔单抗、贝利单抗、β-2-拟交感神经药(例如沙丁胺醇)、β-阻断剂(例如美托洛尔)、β-干扰素(IFN-β)(例如IFNβ-1b、IFNβ-1a 和)、B细胞和T细胞疗法的生物制剂(例如利妥昔单抗、阿巴西普)、钙调神经磷酸酶抑制剂(例如他克莫司)、钙通道阻断剂(例如硝苯地平)、氯喹、可的松、环磷酰胺、环孢菌素、达利珠单抗、地蒽酚、利尿剂(例如氢氯噻嗪)、DPP-4(二肽基肽酶4)抑制剂(例如利格列汀、沙格列汀、西格列汀、维格列汀)、依泽替米贝(ezetimib)、他汀类(例如辛伐他汀、氟伐他汀)、贝特类(例如苯扎贝特、依托贝特、非诺贝特、吉非罗齐、芬戈莫德、富马酸酯(富马酸二甲酯)、醋酸格拉替雷、格列奈(例如那格列奈)、糖皮质激素、尿素、羟氯喹、IgE抗体、免疫球蛋白、免疫抑制药物例如米托蒽醌、硫唑嘌呤和环磷酰胺、肠降血糖素(葡萄糖依赖性促胰岛素肽(GIP)和类高血糖素肽((GLP-1)类似物/激动药)(例如艾塞那肽、利拉鲁肽、利司那肽)、胰岛素增敏剂(例如吡格列酮)和胰岛素疗法(例如低精蛋白胰岛素(NPH insulin)、赖脯胰岛素)、干扰素、整联蛋白抗体(例如维多珠单抗、那他珠单抗)、Jak/STAT抑制剂(例如托法替尼、巴瑞替尼、GLPG0634)、含皮质醇的制剂、白三烯受体拮抗剂(例如孟鲁司特)、来氟米特、MAO(单胺氧化酶)抑制剂(例如司来吉兰)、美沙拉嗪、氨甲喋呤、甲基黄嘌呤(例如茶碱)、那他珠单抗、烟酸衍生物(例如烟碱酸/拉罗匹仑)、PDE-4(磷酸二酯酶4型)抑制剂(例如罗氟司特)、光疗法、益生菌(Mutaflor、Lactobacillus GG、Lactobacillus plantarum、L.acidophilus、L.casei、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)35624、Enterococcus fecium SF68、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、大肠杆菌(Escherichia coli)Nissle 1917)、雷帕霉素、类维生素A、利妥昔单抗、水杨酸、苏金单抗、SGLT2(钠/葡萄糖协同转运蛋白2)抑制剂/格列净(gliflozin)(例如达格列净(dapagliflozin)、恩格列净(empagliflozin))、他汀类(例如辛伐他汀、氟伐他汀)、柳氮磺胺吡啶、磺酰脲(例如格列本脲、甲苯磺丁脲)、特立氟胺、托珠单抗、局部类固醇、优特克单抗、维多珠单抗、维生素D3类似物如，例如，钙泊三醇、他卡西醇或骨化三醇；细胞分裂抑制剂(例如硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、霉酚酸、依维莫司或西罗莫司)以及α-葡糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖、米格列醇、伏格列波糖)。

还应提及用于治疗和预防上述疾病的下述药物，所述药物包含至少一种通式(I)的化合物和一种或多种其他活性成分，特别是EP4抑制剂(前列腺素E2受体4抑制剂)、P2X3抑制剂(P2X嘌呤受体3)、PTGES抑制剂(前列腺素E合成酶抑制剂)、P2X4抑制剂(P2X嘌呤受体4)、MKNKl/2抑制剂(MAP激酶相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1/2)或AKRlC3抑制剂(醛酮还原酶家族1成员C3抑制剂)。

通式(I)的化合物可全身地和/或局部地作用。为此，其可以以适合的方式给药，例如通过口服、肠胃外、皮下、关节内、肺、鼻、舌下、舌、颊、直肠、真皮、经皮或结膜途径、经由耳或作为植入物或支架。

通式(I)的化合物可以以适于这些给药途径的给药剂型进行给药。

口服给药的合适的给药剂型是这样的：其依据现有技术工作并快速和/或以改造的方式释放通式(I)的化合物，并且其含有结晶和/或无定形和/或溶解形式的通式(I)的化合物，其例如为片剂(未包衣或包衣片剂，所述包衣片剂例如具有控制本发明化合物释放的抗胃液包衣或延迟溶解包衣或不溶包衣)、在口腔中迅速崩解的片剂或软片/扁圆片(oblates)、软片剂/冻干剂、胶囊剂(例如硬或软明胶胶囊剂)、糖衣片剂、颗粒剂、丸剂、粉末剂、乳剂、悬浮剂、气雾剂或溶液剂。

肠胃外给药可通过避过吸收步骤(例如通过静脉内、动脉内、关节内、心内、脊椎内或腰椎内途径)或包括吸收(例如通过肌内、皮下、皮内、经皮或腹膜内注射途径)而完成。适用于肠胃外给药的给药剂型包括溶液剂、悬浮剂、乳剂、冻干剂或无菌粉末剂的形式的注射和输液用制剂。

对于其他的给药途径，适合的实例为可吸入药物形式(包括粉雾剂(powderinhalers)、喷雾剂)；滴鼻剂；溶液剂或喷雾剂；用于舌、舌下或颊给药的片剂、软片/扁圆片或胶囊剂；栓剂；耳用或眼用制剂；水悬剂(洗液、振荡合剂(shaking mixtures))；亲脂性悬浮剂；软膏剂；乳膏；经皮治疗系统(例如贴剂)；乳剂(milk)；糊剂；泡沫剂；喷粉剂(sprinkling powders)；植入物或支架。

优选口服或肠胃外给药，特别是口服给药。

通式(I)的化合物可转化成所提及的给药形式。这可以以本身已知的方式通过与惰性、无毒、药学上适合的赋形剂混合来完成。这些赋形剂包括载体(例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂和分散剂或润湿剂(例如十二烷基硫酸钠、聚氧脱水山梨醇油酸酯)、粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然聚合物(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂，例如抗坏血酸)、着色剂(例如无机颜料，例如氧化铁)以及矫味剂和/或矫臭剂。

本发明还提供包含至少一种本发明的化合物，通常同时包含一种或多种惰性、无毒、药学上适合的赋形剂的药物，及其用于上述目的的用途。

通常，已发现，在肠胃外给药的情况下，给药量为约0.001至1mg/kg体重，优选约0.01至0.5mg/kg体重是有利的，以便达到有效的效果。在口服给药的情况下，剂量为约0.01至100mg/kg体重，优选约0.01至20mg/kg体重且最优选0.1至10mg/kg体重。

然而，在某些情况下，可能有必要地偏离规定量，具体地可随体重、给药途径、对活性成分的个体反应、制剂的性质以及给药时间或给药间隔来调整。因此，在有些情况下，用少于上述最小量来处理可能就足够，而在其他情况下，必须超过所提及的上限。在更大给药量的情况下，可取的是将它们分成一天之内的若干单独剂量。

以下工作实施例用于说明本发明。但本发明不限于所述实施例。

除非另有说明，以下试验和实施例中的百分比为重量百分比；份为重量份。液体/液体溶液的溶剂比、稀释比和浓度数据在各种情况下均基于体积计。

通式(I)的化合物的制备

本申请中描述的化合物及其制备在尚未公开的申请PCT/EP2015/077596中给出。

通式(I)的化合物的制备通过以下合成方案说明。

用于合成通式(I)的化合物的起始物料是羧酸(中间体V3)，其市售可得或者可通过由文献已知的路线或类似于由文献已知的路线来制备(参见例如European Journal ofOrganic Chemistry 2003，8，1559-1568，Chemical and Pharmaceutical Bulletin，1990，38，9，2446-2458，Synthetic Communications 2012，42，658-666，Tetrahedron，2004，60，51，11869-11874)(参见例如合成方案1)。一些羧酸V3可从羧酸酯(中间体V2)开始，通过水解(参见例如6-(羟基甲基)吡啶-2-甲酸乙酯与氢氧化钠水溶液在甲醇中的反应，WO200411328)或——在叔丁酯的情况下——通过与酸如氯化氢或三氟乙酸反应(参见例如Dalton Transactions，2014，43，19，7176-7190)来制备。羧酸V3也可以其碱金属盐的形式使用。中间体V2任选地也可由带有氯、溴或碘作为取代基X¹的中间体V1来制备，所述制备通过在一氧化碳气氛中，任选地在提高的压力下，在膦配体(例如1，3-双(二苯基膦基)丙烷)、钯化合物(例如乙酸钯(II))和碱(例如三乙胺)存在下，于溶剂(例如二甲亚砜)中添加甲醇或乙醇而进行(对于制备方法，参见，例如WO2012112743、WO 2005082866、ChemicalCommunications(Cambridge，England)，2003，15，1948-1949，WO200661715)。中间体V1市售可得或可通过由文献已知的路线制得。示例性制备方法详述于WO 2012061926、EuropeanJournal of Organic Chemistry，2002，2，327-330，Synthesis，2004，10，1619-1624、Journal of the American Chemical Society，2013，135，32，12122-12134、BioorganicandMedicinal Chemistry Letters，2014，24，16，4039-4043、US2007185058、WO2009117421中。

合成方案1

X¹为氯、溴或碘。

R^d为甲基、乙基、苄基或叔丁基。

R⁴、R⁵各自如在通式(I)中所定义。

按照合成方案2，由1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体0)开始，与WO 2008/001883类似地，通过硝化和在钯碳的存在下用氢还原中间体1的硝基可以得到5-氨基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体2)。对于由中间体2开始来制备中间体3，可以使用由文献已知的多种偶联剂(Amino Acids，Peptides and Proteins in Organic Chemistry，第3卷-BuildingBlocks，Catalysis and Coupling Chemistry，Andrew B.Hughes，Wiley，第12章-Peptide-Coupling Reagents，407-442；Chem.Soc.Rev.，2009，38，606)。例如，可以结合使用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与1-羟基-1H-苯并三唑水合物(HOBt，WO2012107475；Bioorg.Med.Chem.Lett.，2008，18，2093)、四氟硼酸(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)-N，N-二甲基甲亚铵(TBTU，CAS 125700-67-6)、六氟磷酸(二甲基氨基)-N，N-二甲基(3H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-3-基氧基)甲铵(HATU，CAS 148893-10-1)、丙烷膦酸酐(以乙酸乙酯溶液或DMF溶液的形式，CAS68957-94-8)或二-1H-咪唑-1-基甲酮(CDI)作为偶联剂，并在每种情况下向反应混合物中加入碱例如三乙胺或N-乙基-N-异丙基丙-2-胺。优选使用TBTU和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺的THF溶液。

合成方案2

取代基R⁴、R⁵各自如在通式(I)中所定义。

从中间体3开始，可以制备2-取代的吲唑衍生物(中间体4)(参见合成方案3)。为此目的，有用的反应包括与任选取代的烷基氯化物、烷基溴化物、烷基碘化物或4-甲基苯磺酸烷基酯的反应。所用的烷基卤化物或4-甲基苯磺酸烷基酯为市售可得的，或者可类似于由文献已知的路线来制备(对于4-甲基苯磺酸烷基酯的制备，一个实例是在三乙胺或吡啶的存在下使合适的醇与4-甲基苯磺酰氯反应；参见，例如Bioorganicand MedicinalChemistry，2006，14，124277-4294)。任选地，在使用烷基氯化物或烷基溴化物的情况下，还可以添加碱金属碘化物，如碘化钾或碘化钠。所用的碱例如可以是碳酸钾、碳酸铯或氢化钠。就反应性烷基卤化物来说，在一些情况下也可以使用N-环己基-N-甲基环己胺。有用的溶剂包括，例如，1-甲基吡咯烷-2-酮、DMF、DMSO或THF。任选地，所用的烷基卤化物或4-甲基苯磺酸烷基酯可具有任选地预先已用保护基保护起来的官能团(还参见P.G.M.Wuts，T.W.Greene，Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis，第四版，ISBN：9780471697541)。例如，如果使用具有一个或多个羟基基团的烷基卤化物或4-甲基苯磺酸烷基酯，则这些羟基基团任选可用本领域技术人员熟知的叔丁基(二甲基)甲硅烷基或类似的含有硅的保护基进行保护。或者，也可用四氢-2H-吡喃(THP)基团或乙酰基或苯甲酰基来保护羟基基团。然后，可在合成中间体4之后将所用的保护基脱去，或在合成(I)之后脱去。例如，如果将叔丁基(二甲基甲硅烷基)基团用作保护基，那么其可以使用在溶剂如THF中的四丁基氟化铵来脱去。THP保护基例如可使用4-甲基苯磺酸(任选地以一水合物的形式)来脱去。乙酰基或苯甲酰基可通过用氢氧化钠水溶液处理来脱去。

任选地，所用的烷基卤化物或4-甲基苯磺酸烷基酯可含有可通过本领域技术人员已知的氧化或还原反应进行转化的官能团(参见例如Science of Synthesis，GeorgThieme Verlag)。例如，如果所述官能团为硫醚基，则其可通过在文献中已知的方法而氧化为亚砜基或砜基。就亚砜基来说，其可以又被氧化成砜基。对于这些氧化步骤，例如可以使用3-氯过氧苯甲酸(CAS 937-14-4)(关于这点，还参见例如，US201094000中关于2-(甲基硫烷基)乙基-1H-吡唑衍生物氧化为2-(甲基亚磺酰基)乙基-1H-吡唑衍生物，以及另外2-(甲基硫烷基)乙基-1H-吡唑衍生物氧化为2-(甲基磺酰基)乙基-1H-吡唑衍生物)。如果所使用的烷基卤化物或甲苯磺酸酯含有酮基，则其可通过本领域技术人员已知的还原方法还原成醇基(参见例如Chemische Berichte，1980，113，1907-1920中关于硼氢化钠的使用)。这样的氧化或还原步骤可在合成中间体4后进行，或在合成通式(I)的化合物之后进行。或者，可通过中间体3与任选取代的烷基醇的Mitsunobu反应(参见例如K.C.K.Swamy等人，Chem.Rev.2009，109，2551-2651)来制备中间体4。可以结合使用各种膦(例如三苯基膦、三丁基膦或1，2-二苯基膦基乙烷)与文献中提及的偶氮二甲酸二异丙基酯(CAS 2446-83-5)或其他二氮烯衍生物(K.C.K.Swamy等人，Chem.Rev.2009，109，2551-2651)。优选使用三苯基膦和偶氮二甲酸二异丙基酯。如果烷基醇带有官能团，那么，可以如上述与烷基卤化物的反应一样进行已知的保护基策略(其他指示可参见P.G.M.Wuts，T.W.Greene，Greene’sProtective Groups in Organic Synthesis，第四版，ISBN：9780471697541)，并且如上述与烷基卤化物的反应一样地，相应于中间体4的合成进行氧化或还原步骤，或在合成通式(I)的化合物之后进行。从中间体4开始，通过格氏反应，可以得到其中R²和R³定义为C₁-C₆-烷基的通式(I)的化合物(其中R²和R³具有相同的定义)(参见例如EP 2489663中的1H-吲唑-6-甲酸甲酯衍生物与甲基溴化镁的反应)。对于格氏反应，可以使用烷基卤化镁。特别优选在THF或乙醚中或在THF与乙醚的混合物中的甲基氯化镁或甲基溴化镁。或者，可从中间体4开始，通过与烷基锂试剂反应来得到其中R²和R³定义为C₁-C₆-烷基的本发明通式(I)的化合物(其中R²和R³具有相同的定义)(参见例如WO2006116412中的2-氨基-4-氯-1-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酸甲酯衍生物与异丙基锂或叔丁基锂的反应)。从中间体4开始，通过用在THF中的氢化铝锂、在THF中的硼氢化锂或在THF中的硼氢化钠(任选添加甲醇)、或硼氢化锂与硼氢化钠的混合物还原，可以制备其中R²和R³被定义为H的通式(I)的化合物。

合成方案3

取代基R¹、R²、R³、R⁴、R⁵各自如在通式(I)中所定义。

从中间体3开始，通过格氏反应，可以得到其中R²和R³被定义为C₁-C₆-烷基的中间体5(其中R²和R³具有相同的定义)(参见例如合成方案4)。为此目的，可以使用在THF或乙醚中的或在THF与乙醚的混合物中的合适的烷基卤化镁，例如甲基氯化镁或甲基溴化镁。

从中间体5开始，接着可以制备其中R²和R³被定义为C₁-C₆-烷基的通式(I)的化合物(I)(其中R²和R³具有相同的定义)的部分(I-a)。为此目的，与合成方案3(中间体3的制备)类似，有用的反应是中间体5与任选取代的烷基氯化物、烷基溴化物、烷基碘化物或4-甲基苯磺酸烷基酯的反应。可以使用与在合成方案3中描述的那些类似的保护基策略。

或者，对于其中R²和R³被定义为C₁-C₆-烷基的通式(I)的化合物(I)(其中R²和R³具有相同的定义)的部分(I-a)的制备，可以利用中间体5与任选取代的烷基醇的Mitsunobu反应(与合成方案3类似)。

如果式(I-a)化合物中的R¹包含合适的官能团，那么任选地随后可以利用氧化或还原反应来制备其他的本发明化合物(与合成方案3类似)。

合成方案4

取代基R¹、R⁴、R⁵分别如在通式(I)中所定义。R²和R³总是具有相同的定义且均为C₁-C₆-烷基。

从中间体1开始，可以以另一种方式制备中间体4(参见合成方案5)。首先，通过如合成方案3中的方法(由中间体3制备中间体4)将中间体1转化成中间体6。

然后，可将中间体6通过硝基的还原而转化成中间体7。例如，硝基可以用钯碳在氢气气氛下进行还原(参见例如WO2013174744中关于将6-异丙氧基-5-硝基-1H-吲唑还原为6-异丙氧基-1H-吲唑-5-胺的反应)，或通过使用在水或乙醇中的铁和氯化铵还原(还参见例如Journal of the Chemical Society，1955，2412-2419)，或通过使用氯化锡(II)(CAS7772-99-8)还原。优选使用在水和乙醇中的铁和氯化铵。由中间体7制备中间体4可类似于合成方案2(由中间体2制备中间体3)的方式进行。

如合成方案3所描述，在合成方案5的情况下，任选也可以使用保护基策略。从中间体6或中间体7开始，任选地也可以如合成方案3所描述地进行本领域技术人员已知的氧化或还原反应(参见例如Science of Synthesis，Georg Thieme Verlag)。

合成方案5

取代基R¹、R⁴、R⁵各自如在通式(I)中所定义。

实施例化合物的合成

缩写及说明

DMF	N，N-二甲基甲酰胺
		DMSO	二甲基亚砜
THF	四氢呋喃
		RT	室温
HPLC	高效液相色谱法
		h	小时
HCOOH	甲酸
		MeCN	乙腈
min	分钟
		UPLC	超高效液相色谱法
DAD	二极管阵列检测器
		ELSD	蒸发光散射检测器
ESI	电喷雾电离
		SQD	单四极杆检测器
CPG	抽芯精密玻璃(core-pulled precision glass)
		NH<sub>3</sub>	氨

术语氯化钠溶液总是表示饱和氯化钠水溶液。

中间体和实施例的化学名称使用ACD/LABS(Batch 12.01版)软件生成。

方法

在一些情况中，通式(I)的化合物及其前体和/或中间体通过LC-MS分析。

方法A1：UPLC(MeCN-HCOOH)：

仪器：Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001；柱：Acquity UPLC BEH C18 1.750×2.1mm；洗脱液A：水+0.1体积％甲酸(99％)，洗脱液B：乙腈；梯度：0-1.6min 1-99％B，1.6-2.0min 99％B；流速0.8ml/min；温度：60℃；进样：2μl；DAD扫描：210-400nm；MS ESI+，ESI-，扫描范围160-1000m/z；ELSD。

方法A2：UPLC(MeCN-NH₃)：

仪器：Waters Acquity UPLC-MS SQD 3001；柱：Acquity UPLC BEH C18 1.750×2.1mm；洗脱液A：水+0.2体积％的氨(32％)；洗脱液B：乙腈；梯度：0-1.6min 1-99％B，1.6-2.0min 99％B；流速0.8ml/min；温度：60℃；进样：2μl；DAD扫描：210-400nm；MS ESI+，ESI-，扫描范围160-1000m/z；ELSD。

方法A3：(LC-MS)

仪器：Agilent 1290 Infinity LC；柱：Acquity UPLC BEH C18 1.750×2.1mm；洗脱液A：水+0.05体积％的甲酸，洗脱液B：乙腈+0.05体积％的甲酸；梯度：0-1.7min 2-90％B，1.7-2.0min 90％B；流速1.2ml/min；温度：60℃；进样：2μl；DAD扫描：190-390nm；MS：Agilent TOF 6230。

方法A4：(LC-MS)

仪器：Waters Acquity；柱：Kinetex(Phenomenex)，50×2mm；洗脱液A：水+0.05体积％的甲酸，洗脱液B：乙腈+0.05体积％的甲酸；梯度：0-1.9min 1-99％B，1.9-2.1min99％B；流速1.5ml/min；温度：60℃；进样：0.5μl；DAD扫描：200-400nm。

在一些情况中，通式(I)的化合物及其前体和/或中间体通过以下示例性的制备型HPLC方法纯化。

方法P1：系统：Waters自动纯化系统系统：泵2545，样品管理器2767，CFO，DAD2996，ELSD 2424，SQD；柱：XBridge C18 5μm 100×30mm；洗脱液A：水+0.1体积％的甲酸，洗脱液B：乙腈；梯度：0-8min 10-100％B，8-10min 100％B；流速：50ml/min；温度：室温；溶液：最大250mg/最大2.5ml DMSO或DMF；进样：1×2.5ml；检测：DAD扫描范围210-400nm；MS ESI+，ESI-，扫描范围160-1000m/z。

方法P2：系统：Waters自动纯化系统系统：泵254，样品管理器2767，CFO，DAD 2996，ELSD 2424，SQD 3100；柱：XBridge C18 5μm 10×30mm；洗脱液A：水+0.2体积％的氨(32％)，洗脱液B：甲醇；梯度：0-8min 30-70％B；流速：50ml/min；温度：室温；检测：DAD扫描范围210-400nm；MS ESI+，ESI-，扫描范围160-1000m/z；ELSD。

方法P3：系统：Labomatic，泵：HD-5000，级分收集器：LABOCOL Vario-4000，UV检测器：Knauer UVD 2.1S；柱：XBridge C18 5μm 100×30mm；洗脱液A：水+0.2体积％的氨(25％)，洗脱液B：乙腈；梯度：0-1min 15％B，1-6.3min 15-55％B，6.3-6.4min 55-100％B，6.4-7.4min 100％B；流速：60ml/min；温度：室温；溶液：最大250mg/2ml DMSO；进样：2×2ml；检测：UV 218nm；软件：SCPA PrepCon5。

方法P4：系统：Labomatic，泵：HD-5000，级分收集器：LABOCOL Vario-4000，UV检测器：Knauer UVD 2.1S；柱：Chromatorex RP C18 10μm 125×30mm；洗脱液A：水+0.1体积％的甲酸，洗脱液B：乙腈；梯度：0-15min 65-100％B；流速：60ml/min；温度：室温；溶液：最大250mg/2ml DMSO；进样：2×2ml；检测：UV 254nm；软件：SCPA PrepCon5。

方法P5：系统：Sepiatec：Prep SFC100；柱：Chiralpak IA 5μm 250×20mm；洗脱液A：二氧化碳，洗脱液B：乙醇；梯度：等度20％B；流速：80ml/min；温度：40℃；溶液：最大250mg/2ml DMSO；进样：5×0.4mL；检测：UV 254nm。

方法P6：系统：Agilent：Prep 1200，2×prep泵，DLA，MWD，Gilson：Liquid Handler215；柱：Chiralcel OJ-H 5μm 250×20mm；洗脱液A：己烷，洗脱液B：乙醇；梯度：等度30％B；流速：25ml/min；温度：25℃；溶液：187mg/8ml乙醇/甲醇；进样：8×1.0ml；检测：UV 280nm。

方法P7：系统：Labomatic，泵：HD-5000，级分收集器：LABOCOL Vario-4000，UV检测器：Knauer UVD 2.1S；柱：XBridge C18 5μm 100×30mm；洗脱液A：水+0.1体积％的甲酸，洗脱液B：乙腈；梯度：0-3min：65％B等度，3-13min：65-100％B；流速：60ml/min；温度：室温；溶液：最大250mg/2ml DMSO；进样：2×2mi；检测：UV 254nm。

方法P8：系统：Agilent：Prep 1200，2×prep泵，DLA，MWD，Gilson：Liquid Handler215；柱：Chiralpak IF 5μm 250×20mm；洗脱液A：乙醇，洗脱液B：甲醇；梯度：等度50％B；流速：25ml/min；温度：25℃；溶液：600mg/7ml N，N-二甲基甲酰胺；进样：10×0.7ml；检测：UV254nm。

在一些情况中，物质混合物通过在硅胶上的柱色谱法来纯化。

为了制备一些通式(I)的化合物及其前体和/或中间体，在硅胶上使用购自Biotage的仪器进行柱色谱法(“快速色谱法”)纯化。这使用购自Biotage的小柱完成，例如不同尺寸的“SNAP Cartridge，KP_SIL”小柱和购自Interchim的不同尺寸的“Interchim Puriflash Silica HP 15UM flash column”小柱。

起始材料

中间体V2-1

6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-甲酸甲酯

将2.00g(9.26mmol)2-(6-溴吡啶-2-基)丙-2-醇(CAS 638218-78-7)溶解于20ml甲醇和20ml DMSO中。随后，加入250mg 1，3-双(二苯基膦基)丙烷、130mg乙酸钯(II)和3ml三乙胺。在室温下将反应混合物用一氧化碳吹扫三次，并在13bar的一氧化碳气氛下搅拌30min。通过施用真空除去一氧化碳气氛，并将混合物在14bar一氧化碳气氛下在100℃下搅拌24h。将高压釜减压，向反应混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取反应混合物三次，用饱和碳酸氢钠水溶液和氯化钠水溶液洗涤，通过疏水性过滤器过滤，浓缩。这得到1.60g粗产品。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝0.76min(UV检测器：TIC)，质量测量值195.00。

中间体V3-1

6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-甲酸钾

首先将1.60g中间体0-1粗产品加入15ml甲醇中，添加0.74g氢氧化钾，并将混合物在50℃下搅拌16.5h。浓缩后，得到2.1g残余物，其无需进一步纯化即使用。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝0.47min(UV检测器：TIC)，质量测量值181.00。

中间体1-1

5-硝基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯

在配有CPG搅拌器、滴液漏斗和内部温度计的三口烧瓶中，将4.60g(26.1mmol)1H-吲唑-6-甲酸甲酯(CAS号：170487-40-8)溶解在120ml硫酸(96％)中并冷却至-15℃。在15min时间内，向该溶液中逐滴加入已预先制备并冷却了的硝化酸(10ml 96％硫酸于5ml的65％硝酸中)。待逐滴添加结束后，将混合物再搅拌1h(内部温度为-13℃)。将反应混合物加入到冰中，并抽滤出沉淀，用水洗涤并在干燥箱中在50℃下减压干燥。得到5.49g标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝0.75min

MS(ESIpos)：m/z＝222(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.87(s，3H)，7.96(s，1H)，8.44(s，1H)，8.70(s，1H)，13.98(宽单峰，1H)。

中间体2-1

5-氨基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯

将4.40g(19.8mmol)5-硝基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体1-1)溶解于236ml甲醇中，并用1.06g(0.99mmol)钯活性碳在标准氢气压力下在25℃下氢化3h。将反应混合物通过硅藻土过滤，用甲醇洗涤过滤器，并将滤液浓缩。得到3.53g标题化合物。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.85(s，3H)6.01(s，2H)6.98(s，1H)7.79-7.91(m，1H)7.99(s，1H)12.84(宽单峰，1H)。

中间体3-1

5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯

首先将4.95g(25.9mmol)6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸加入45ml THF中。加入9.07g(28.2mmol)四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲和4.92ml(28.2mmol)N-乙基-N-异丙基丙-2-胺，并将混合物在25℃下搅拌30min。随后，加入4.50g(23.5mmol)5-氨基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体2-1)，并将混合物在25℃下搅拌24h。通过薄膜过滤器抽滤反应混合物，用THF和水洗涤固体，并在干燥箱中干燥过夜。得到7.60g标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.16min

MS(ESIpos)：m/z＝365(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.97(s，3H)，8.13-8.27(m，2H)，8.30(s，1H)，8.33-8.45(m，1H)，8.45-8.51(m，1H)，9.15(s，1H)，12.57(s，1H)，13.44(s，1H)。

中间体3-2

5-({[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯

首先将2.85g(23.5mmol)6-(二氟甲基)吡啶-2-甲酸加入30ml THF中。加入6.05g(18.8mmol)四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲和3.3ml N-乙基-N-异丙基丙-2-胺，并将混合物在室温下搅拌10分钟。随后，加入3.00g(15.7mmol)5-氨基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯，并将混合物在室温下搅拌过夜。使反应混合物与水混合，抽滤出沉淀，并用水和二氯甲烷重复洗涤。这得到1.53g(理论值的27％)标题化合物。分离滤液的各相，将有机相浓缩，与少量二氯甲烷混合并悬浮于超声浴中，并抽滤出沉淀。这再得到1.03g标题化合物。

1H-NMR(第一产物部分，300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.99(s，3H)，7.09(t，1H)，8.00(d，1H)，8.21-8.40(m，4H)，9.14(s，1H)，12.53(s，1H)，13.44(s，1H)。

中间体3-3

5-({[6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯

首先将2.10g 6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-甲酸钾(中间体V3-1)加入15ml THF中。加入3.69g(11.5mmol)四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲和2.00ml N-乙基-N-异丙基丙-2-胺，并将混合物在室温下搅拌15min。随后，加入1.83g(9.58mmol)5-氨基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体2-1)，并将混合物在室温下搅拌19h。使混合物与水和乙酸乙酯混合，过滤掉未溶解的固体，分离滤液的各相，并用乙酸乙酯萃取水相两次，用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩，并通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。待除去溶剂后，得到黄色泡沫状的1.56g标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.00min(UV检测器：TIC Smooth)，质量测量值354.00。

1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝1.63(s，6H)，3.97(s，3H)，5.37(s，1H)，7.90-7.95(m，1H)，8.03-8.07(m，2H)，8.23(s，1H)，8.29(s，1H)，9.19(s，1H)，12.79(s，1H)，13.41(宽单峰，1H)。

中间体4-1

2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

将1.00g(2.66mmol)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)溶解于10ml DMF中，待加入1.10g(7.99mmol)碳酸钾和221mg(1.33mmol)碘化钾后，将混合物在25℃下搅拌30min。加入603mg(3.99mmol)3-溴甲基氧杂环丁烷，并将混合物在25℃下搅拌24h。反应混合物在水和乙酸乙酯之间分层。将混合物用乙酸乙酯萃取两次，并将合并的有机相通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。得到260mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.24min

MS(ESIpos)：m/z＝435(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.49-3.64(m，1H)，3.95(s，3H)，4.49(t，2H)，4.68(dd，2H)，4.81(d，2H)，8.20(dd，1H)，8.35-8.41(m，1H)，8.43-8.49(m，2H)，8.55-8.58(m，1H)，9.06(s，1H)，12.53(s，1H)。

中间体4-2

2-(2-甲氧基乙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

将1.00g(2.75mmol)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)溶解于5ml DMF中，搅拌加入387μl(4.12mmol)2-溴乙基甲基醚、1.14g(8.23mmol)碳酸钾和228mg(1.37mmol)碘化钾。将反应混合物在25℃下搅拌24h，用水稀释并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机相通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。得到12mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.24min

MS(ESIpos)：m/z＝423(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.24(s，3H)，3.86(t，2H)，3.96(s，3H)，4.65(t，2H)，8.21(dd，1H)，8.35-8.42(m，1H)，8.43-8.51(m，2H)，8.52(d，1H)，9.06(s，1H)，12.53(s，1H)。

中间体4-3

2-(3-甲氧基丙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

将1.00g(2.75mmol)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)溶解于5ml DMF中，搅拌加入460μl(4.12mmol)1-溴-3-甲氧基丙烷、1.14g(8.23mmol)碳酸钾和228mg(1.37mmol)碘化钾。将反应混合物在25℃下搅拌72h，用水稀释并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机相通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。得到28mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.29min

MS(ESIpos)：m/z＝437(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝2.17(五重峰，2H)，3.24(s，3H)，3.33-3.36(m，2H)，3.96(s，3H)，4.53(t，2H)，8.21(dd，1H)，8.35-8.42(m，1H)，8.45-8.49(m，2H)，8.54(d，1H)，9.06(s，1H)，12.54(s，1H)。

中间体4-4

2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

制备方法1

首先将930mg(2.55mmol)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)、1.06g碳酸钾和212mg碘化钾加入9ml DMF中，并将混合物搅拌15min。然后加入0.62ml 4-溴-2-甲基丁-2-醇，并将混合物在60℃下搅拌16h。使混合物与水混合并用乙酸乙酯萃取两次，将萃取物用饱和氯化钠溶液洗涤三次，过滤并浓缩。在硅胶上的柱色谱法纯化(己烷/乙酸乙酯)得到424mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.21min(UV检测器：TIC)，质量测量值450.00。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.16(s，6H)2.02-2.11(m，2H)3.96(s，3H)4.51-4.60(m，3H)8.20(dd，J＝7.83，1.01Hz，1H)8.39(s，1H)8.45(s，2H)8.55(d，J＝0.76Hz，1H)9.05(s，1H)12.52(s，1H)。

制备方法2

首先将1.95g(7.03mmol)5-氨基-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体7-1)加入30ml THF中。加入1.48g(7.73mmol)6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸、2.71g(8.44mmol)四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲和1.47ml(8.44mmol)N-乙基-N-异丙基丙-2-胺，并将混合物在25℃下搅拌20.5h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物三次，将萃取物用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯梯度)进行分离。得到2.79g标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.23min(UV检测器：TIC)，质量测量值450.00。

中间体4-5

2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

首先将1.00g(2.66mmol，97％)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)加入50ml DMF中，搅拌加入1.10g(7.99mmol)碳酸钾和221mg(1.33mmol)碘化钾，并将混合物在25℃下搅拌30min。随后，加入857μl(3.99mmol)(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷，并将混合物在25℃下搅拌24h。用水稀释反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。得到400mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.58min

MS(ESIpos)：m/z＝523(M+H)⁺

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝-0.18--0.13(m，6H)，0.74(s，9H)，3.96(s，3H)，4.08(t，2H)，4.57(t，2H)，8.15-8.25(m，1H)，8.32-8.43(m，1H)，8.43-8.52(m，3H)，9.07(s，1H)，12.53(s，1H)。

中间体4-6

2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

与中间体4-5类似地，将1.00g(2.75mmol)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)溶解于10ml DMF中，搅拌加入1.14g(8.24mmol)碳酸钾和228mg(1.37mmol)碘化钾，并将混合物在25℃下搅拌30min。随后，加入1.04g(4.12mmol)(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷，并将混合物在25℃下搅拌24h。过滤反应混合物，并用乙酸乙酯洗涤滤饼。反应混合物在水和乙酸乙酯之间分层，用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机相通过疏水过滤器过滤，浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到428mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.63min

MS(ESIpos)：m/z＝537(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝-0.02-0.06(m，6H)，0.87(s，9H)，2.14(五重峰，2H)，3.62(t，2H)，3.96(s，3H)，4.54(t，2H)，8.20(d，1H)，8.35-8.42(m，1H)，8.43-8.48(m，3H)，8.49-8.53(m，1H)，9.06(s，1H)。

中间体4-7

5-({[6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

首先将300mg(0.80mmol)5-({[6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-3)加入4.5ml DMF中。加入287mg(1.21mmol)1，1，1-三氟-4-碘丁烷和333mg碳酸钾，并将混合物在100℃下搅拌23h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物三次。浓缩该混合物并将产物通过制备型HPLC纯化。这得到72mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.26min(UV检测器：TIC)，质量测量值464.17。

中间体4-8

5-{[(5-氟-6-甲基吡啶-2-基)羰基]氨基}-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

在19.5h内，类似于中间体4-4(制备方法2)，使195mg(0.46mmol)5-氨基-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体7-1)与78mg(0.50mmol)5-氟-6-甲基吡啶-2-甲酸反应。在类似的水后处理之后，得到228mg粗产物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.20min(UV检测器：TIC)，质量测量值414.00。

中间体4-9

2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-{[(6-甲基吡啶-2-基)羰基]氨基}-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

在19.5h内，类似于中间体4-4(制备方法2)的制备，使195mg(0.45mmol)5-氨基-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体7-1)与70mg(0.50mmol)6-甲基吡啶-2-甲酸反应。在类似的水后处理之后，得到作为粗产物的278mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.14min(UV检测器：TIC)，质量测量值396.00。

中间体4-10

2-[3-(2，2，2-三氟乙氧基)丙基]-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

在100℃下，将在3ml DMF中的250mg(0.58mmol)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)、193mg(0.88mmol)3-溴丙基2，2，2-三氟乙基醚、242mg碳酸钾和145mg碘化钾的混合物搅拌20h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物，并将萃取物用氯化钠溶液洗涤，并浓缩。通过制备型HPLC纯化，得到52mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.39min(UV检测器：TIC)，质量测量值504.12。

中间体4-11

5-({[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

首先将2.00g 5-氨基-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体7-1)加入40ml THF中。加入1.50g 6-(二氟甲基)吡啶-2-甲酸、2.78g四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲(TBTU，CAS号125700-67-6)和1.5ml N-乙基-N-异丙基丙-2-胺，并将混合物在室温下搅拌24h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物三次，将合并的有机相用氯化钠溶液洗涤，并通过疏水过滤器过滤。浓缩混合物，并将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。这得到3.05g黄色固体状的标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：Rt＝1.15min(UV检测器：TIC)，质量测量值432.00。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.17(s，6H)，2.04-2.11(m，2H)，3.99(s，3H)，4.52-4.60(m，3H)，7.10(t，1H)，8.00(dd，1H)，8.28-8.38(m，2H)，8.44-8.47(m，1H)，8.56(d，1H)，9.05(s，1H)，12.49(s，1H)。

中间体5-1

N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

向1.50g(4.12mmol)5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-1)溶于20ml THF的溶液(在冰水冷却浴中冷却)中小心加入6.9ml(5当量)3M的甲基溴化镁的乙醚溶液。将混合物在用冰浴冷却的同时搅拌1h，并在室温下搅拌19.5h。再加入2当量的甲基溴化镁溶液，并将混合物在室温下再搅拌24h。加入饱和氯化铵水溶液，搅拌混合物并用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。得到763mg标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.63(s，6H)，5.99(s，1H)，7.49(s，1H)，8.06(s，1H)，8.14-8.19(m，1H)，8.37(t，1H)，8.46(d，1H)，8.78(s，1H)，12.32(s，1H)，12.97(s，1H)。

中间体5-2

6-(二氟甲基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

类似于中间体5-1的制备，使在10ml THF中的2.40g(6.93mmol)5-({[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体3-2)与三份3M的甲基溴化镁的乙醚溶液反应(6.9ml，之后在室温下搅拌45min；11.6ml，之后在室温下搅拌2h；6.9ml，之后在室温下搅拌2h)。在如对中间体5-1那样的后处理之后，得到2.39g粗产物，其无需进一步纯化即进一步使用。

中间体6-1

2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

首先将5.00g(22.6mmol)5-硝基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体1-1)加入40ml DMF中。加入5.65g(33.9mmol)4-溴-2-甲基丁-2-醇、9.37g(67.8mmol)碳酸钾和5.63g(33.9mmol)碘化钾，并将混合物在100℃下搅拌20h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物三次，将萃取物用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。将所得固体通过用乙醚搅拌进行萃取，抽滤出来，用乙醚洗涤，并干燥。得到2.49g标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝0.93min(UV检测器：TIC)，质量测量值307.00。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.15(s，6H)，2.02-2.11(m，2H)，3.84(s，3H)，4.54(s，1H)，4.58-4.65(m，2H)，8.05(s，1H)，8.69(s，1H)，8.86(s，1H)。

中间休7-1

5-氨基-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯

将4.53g铁和217mg氯化铵加入到2.49g(8.10mmol)2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体6-1)溶于30ml乙醇和10ml水的溶液中，并将混合物在90℃下搅拌21.5h。将混合物通过硅藻土过滤，并用乙醇洗涤三次，将滤液浓缩，并将残余物与水混合。用乙酸乙酯进行三次萃取(为了改进相分离，加入氯化钠溶液)。将合并的有机相用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩。这得到1.95g(理论值的85％)标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝0.67min(UV检测器：TIC)，质量测量值277.00。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.14(s，6H)，1.96-2.08(m，2H)，3.85(s，3H)，4.39-4.51(m，3H)，5.81(s，2H)，6.80(s，1H)，8.05(s，1H)，8.18(s，1H)。

工作实施例

实施例1

N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将75mg(0.18mmol)2-(2-甲氧基乙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-2)溶解于500μl THF中，并混合887μl(0.89mmol)1M的甲基溴化镁的THF溶液。将反应混合物在25℃下搅拌60min。随后，小心地加入1ml饱和氯化铵水溶液，并过滤混合物。用乙酸乙酯萃取水相两次，合并有机相，通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物溶解于3ml DMSO中，通过制备型HPLC纯化。将含有产物的部分冷冻干燥。得到20mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.08min

MS(ESIpos)：m/z＝423(M+H)⁺

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝1.62(s，6H)，3.22(s，3H)，3.82(t，2H)，4.55(t，2H)，5.96(s，1H)，7.57(s，1H)，8.16(d1H)，8.29-8.42(m，2H)，8.42-8.50(m，1H)，8.71(s，1H)，12.36(s，1H)

实施例2

N-[6-(羟基甲基)-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将13mg(0.36mmol)氢化铝锂悬浮于1ml THF中，并将混合物冷却至0℃。逐滴加入75mg(0.17mmol)2-(2-甲氧基乙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-2)溶于500μl THF中的溶液，并将混合物在25℃下搅拌60min。用水稀释该混合物并用乙酸乙酯萃取两次，将合并的有机相用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩，并减压干燥。这得到13mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝0.99min

MS(ESIpos)：m/z＝394(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.23(s，3H)，3.83(t，2H)，4.56(t，2H)，4.69(d，2H)，5.77(t，1H)，7.57(s，1H)，8.19(d，1H)，8.33-8.41(m，2H)，8.43-8.47(m，1H)，8.51(s，1H)，11.20(s，1H)

实施例3

N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-甲氧基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将75mg(0.17mmol)2-(3-甲氧基丙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-3)溶解于500μl THF中，并混合859μl(0.86mmol)1M的甲基溴化镁的THF溶液。将反应混合物在25℃下搅拌60min。随后，小心地加入1ml饱和氯化铵溶液，并过滤混合物。用乙酸乙酯萃取水相两次，合并有机相，通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物溶解于3ml DMSO中，并通过制备型HPLC纯化。将含有产物的部分冷冻干燥。得到25mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.13min

MS(ESIpos)：m/z＝437(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝1.62(s，6H)，2.14(五重峰，2H)，3.23(s，3H)，3.26-3.32(m，2H)，4.44(t，2H)，5.95(s，1H)，7.58(s，1H)，8.16(d，1H)，8.31-8.40(m，2H)，8.43-8.48(m，1H)，8.72(s，1H)，12.36(s，1H).

实施例4

N-[6-(羟基甲基)-2-(3-甲氧基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将13mg氢化铝锂悬浮于THF中，并将混合物冷却至0℃。逐滴加入75mg(0.17mmol)2-(3-甲氧基丙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-3)溶于THF中的溶液，并使混合物在30min内达到室温。用水稀释该混合物并过滤，将残余物用乙酸乙酯洗涤，并用乙酸乙酯萃取滤液。将合并的乙酸乙酯相用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝2.14(五重峰，2H)，3.23(s，3H)，3.29(t，2H)，4.45(t，2H)，4.68(d，2H)，5.77(t，1H)，7.58(s，1H)，8.18(d，1H)，8.32-8.48(m，3H)，8.51(s，1H)，11.21(s，1H)。

实施例5

N-[2-(2-羟基乙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

步骤A：

N-[2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺的制备

将100mg(0.19mmol)2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-5)溶解于1ml THF中，并混合669μl(0.67mmol)1M的甲基溴化镁的THF溶液。将反应混合物在25℃下搅拌60min。加入另外287μl(0.29mmol)1M的甲基溴化镁的THF溶液，将混合物在25℃下搅拌3h。随后，小心加入20ml饱和氯化铵溶液，并过滤混合物。用乙酸乙酯萃取水相两次，合并有机相，通过硫酸镁干燥，过滤，浓缩，并减压干燥。这得到50mg N-[2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.51min

MS(ESIpos)：m/z＝523(M+H)⁺

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝-0.17--0.09(m，6H)，0.78(s，9H)，1.62(s，6H)，4.04(t，2H)，4.47(t，2H)，5.98(s，1H)，7.57(s，1H)，8.16(d，1H)，8.29(s，1H)，8.37(t，1H)，8.45(d，1H)，8.73(s，1H)，12.38(s，1H)。

步骤B：

将50mg(96μmol)N-[2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺溶解于1.0ml THF中，并混合144μl(0.14mmol)1M的四丁基氟化铵的THF溶液。将反应混合物在室温下搅拌1h。用水稀释该混合物并用乙酸乙酯萃取两次，将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩。这得到36mg N-[2-(2-羟基乙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(实施例5)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：d[ppm]＝1.62(s，6H)，3.86(q，2H)，4.43(t，2H)，4.95(t，1H)，5.94(s，1H)，7.57(s，1H)，8.16(dd，1H)，8.30(s，1H)，8.37(t，1H)，8.45(d，1H)，8.72(s，1H)，12.36(s，1H)。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝0.97min(UV检测器：TIC)，质量测量值408.00。

实施例6

N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-羟基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

步骤A：

N-[2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺的制备

将50mg(0.09mmol)2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-6)溶解于500μl THF中，并混合326μl(0.33mmol)1M的甲基溴化镁的THF溶液。将反应混合物在25℃下搅拌60min。随后，小心地加入20ml饱和氯化铵溶液，并将混合物用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机相通过疏水过滤器过滤，浓缩，并减压干燥。将残余物通过制备型HPLC纯化。得到40mg N-[2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.58min

MS(ESIpos)：m/z＝537(M+H)⁺

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝0.02-0.05(m，6H)，0.84-0.91(m，9H)，1.62(s，6H)，2.02-2.18(m，2H)，3.55-3.62(m，2H)，4.45(t，2H)，5.96(s，1H)，7.57(s，1H)，8.16(d，1H)，8.31(s，1H)，8.33-8.42(m，1H)，8.45(d，1H)，8.72(s，1H)，12.37(s，1H)。

步骤B：

将37mg(0.07mmol)N-[2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺溶解于500μl THF中，并混合207μl(0.21mmol)1M的四丁基氟化铵的THF溶液。将反应混合物在25℃下搅拌2h。用水稀释该混合物并用乙酸乙酯萃取两次，将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化后，得到10mg N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-羟基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(实施例6，含有次要组分)。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.00min

MS(ESIpos)：m/z＝423(M+H)⁺

¹H NMR选出的信号(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝1.61(s)，2.00-2.12(m)，3.38(t，2H)，4.44(t，2H)，4.62(宽单峰，1H)，5.93(宽单峰，1H)，7.55(s，1H)，8.13(d，1H)，8.27-8.38(m，2H)，8.43(d，1H)，8.71(s，1H)，12.30(宽单峰，1H)。

实施例7

N-[2-(2-羟基乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

步骤A：

N-[2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将100mg(0.19mmol)2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-5)溶解于1ml THF中，并混合191μl(0.38mmol)2M的硼氢化锂溶液混合。将混合物在25℃下搅拌24h。加入14mg(0.38mmol)硼氢化钠和500μl甲醇，并将混合物在25℃下搅拌4h。再加入14mg(0.38mmol)硼氢化钠，并将混合物在25℃下搅拌24h。向反应混合物中小心地加入水，除去有机相。然后将混合物用乙酸乙酯萃取两次，并将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩。将残余物置于2ml DMSO中，并通过制备型HPLC纯化。这得到30mg N-[2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.44min

MS(ESIpos)：m/z＝495(M+H)⁺

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝-0.16--0.12(m，6H)，0.75-0.79(m，9H)，4.05(t，2H)，4.48(t，2H)，4.69(d，2H)，5.75-5.77(m，1H)，7.57(s，1H)，8.18(dd，1H)，8.30-8.33(m，1H)，8.38(t，1H)，8.45(d，1H)，8.51(s，1H)，11.20(s，1H)。

步骤B：

将33mg(0.07mmol)N-[2-(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺溶解于1ml THF中，并混合100μl(0.10mmol)1M的四丁基氟化铵的THF溶液。将反应混合物在25℃下搅拌1h。用水将该混合物稀释并用乙酸乙酯萃取两次，将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，浓缩，并减压干燥。得到25mg N-[2-(2-羟基乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(实施例7)。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝0.87min

MS(ESIpos)：m/z＝381(M+H)⁺

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.87(q，2H)，4.44(t，2H)，4.69(d，2H)，4.98(t，1H)，5.70-5.81(m，1H)，7.57(s，1H)，8.11-8.23(m，1H)，8.31-8.42(m，2H)，8.43-8.49(m，1H)，8.51(s，1H)，11.20(s，1H)。

实施例8

N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将50mg(0.12mmol)2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-1)溶解于500μl THF中，并混合576μl(0.58mmol)1M的甲基溴化镁的THF溶液。将反应混合物在25℃下搅拌60min。随后，小心地加入20ml饱和氯化铵水溶液，并将混合物浓缩。用乙酸乙酯萃取水相两次，合并有机相，通过硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。将残余物溶解于2.0ml DMSO中，并通过制备型HPLC纯化。将含有产物的部分冷冻干燥。得到30mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.03min

MS(ESIpos)：m/z＝435(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝1.62(s，6H)，3.45-3.61(m，1H)，4.48(t，2H)，4.66(dd，2H)，4.72(d，2H)，5.94(s，1H)，7.57(s，1H)，8.16(d，1H)，8.33-8.42(m，2H)，8.42-8.47(m，1H)，8.72(s，1H)，12.36(s，1H)。

实施例9

N-[6-(羟基甲基)-2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将75mg(0.17mmol)2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-1)溶解于1ml THF/甲醇(1∶1)混合物中，并加入8mg(0.21mmol)硼氢化钠。将混合物在25℃下搅拌60min。将反应混合物浓缩，并将残余物与水混合。将悬浮液剧烈搅拌15min，抽滤出固体，用水洗涤两次，用乙醚洗涤两次，并减压干燥。得到48mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝0.94min

MS(ESIpos)：m/z＝407(M+H)⁺

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ[ppm]＝3.55(s，1H)，4.48(t，2H)，4.61-4.77(m，6H)，7.57(s，1H)，8.18(dd，1H)，8.33-8.49(m，3H)，8.51(s，1H)，11.21(s，1H)。

实施例10

N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(甲基磺酰基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

在室温下，将在5.0ml DMF中的500mg(1.32mmol)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(中间体5-1)、569mg碳酸钾和114mg碘化钾的混合物搅拌15min。加入414mg 1-溴-3-(甲基磺酰基)丙烷，并将混合物在室温下搅拌过夜。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物两次，将萃取物用氯化钠溶液洗涤，并浓缩。将残余物通过柱色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇梯度)。将产物部分通过用乙醚搅拌而萃取，得到59mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.02min

MS(ESIpos)：m/z＝485(M+H)+

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.63(s，6H)，2.26-2.42(m，2H)，2.99(s，3H)，3.06-3.16(m，2H)，4.55(t，2H)，5.96(s，1H)，7.60(s，1H)，8.16(d，1H)，8.33-8.48(m，3H)，8.73(s，1H)，12.37(s，1H)。

实施例11

N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

制备方法1

首先将705mg(1.57mmol)2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-4)加入到10ml THF中，并在冰水冷却浴中冷却。加入2.6ml(5.0当量)3M的甲基溴化镁溶液(于乙醚中)，将混合物在用冰浴冷却的同时搅拌1h，并在室温下搅拌4.5h。加入又1当量的甲基溴化镁溶液，并将混合物在室温下搅拌20.5h。再加入又1当量的甲基溴化镁溶液，并将混合物在室温下搅拌22h。将反应混合物与饱和氯化铵水溶液混合，搅拌并用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。这得到790mg残余物，其通过制备型HPLC纯化。这得到234mg标题化合物和164mg产物部分，所述产物部分通过用乙醚搅拌而萃取。抽滤，然后干燥，这之后，又得到146mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.10min(UV检测器：TIC)，质量测量值450.00。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.14(s，6H)，1.61(s，6H)，1.99-2.08(m，2H)，4.42-4.55(m，3H)，5.93(s，1H)，7.56(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.32-8.39(m，2H)，8.41-8.47(m，1H)，8.70(s，1H)，12.34(s，1H)。

制备方法2

在室温下，将在5ml DMF中的500mg(1.37mmol)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(中间体5-1)、569mg碳酸钾和114mg碘化钾的混合物搅拌15min。加入344mg(1.5当量)4-溴-2-甲基丁-2-醇，并将混合物加热至100℃，保持2h。再加入0.5当量的4-溴-2-甲基丁-2-醇，并将混合物在室温下搅拌16h。将混合物与水混合并用乙酸乙酯萃取两次，将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。将残余物通过在硅胶上的柱色谱纯化法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。这得到100mg产物部分，将所述产物部分通过用乙醚搅拌而萃取。干燥之后，得到60mg标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.14(s，6H)，1.61(s，6H)，1.99-2.07(m，2H)，4.43-4.52(m，3H)5.94(s，1H)7.57(s，1H)8.15(dd，1H)8.33-8.40(m，2H)，8.42-8.48(m，1H)，8.71(s，1H)，12.35(s，1H)

实施例12

N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[2-(甲基磺酰基)乙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将160mg(0.44mmol)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(中间体5-1)与182mg碳酸钾和36mg碘化钾一同悬浮于1.0ml DMF中，并将混合物在室温下搅拌15min。然后加入123mg 2-溴乙基甲基砜(0.66mmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物两次，将萃取物用饱和氯化钠水溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到20mg标题化合物。

UPLC(方法A2)：R_t＝1.01min；

MS(ESIpos)：m/z＝471(M+H)+

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.63(s，6H)，2.90(s，3H)，3.85(t，2H)，4.86(t，2H)，5.97(s，1H)，7.59(s，1H)，8.13-8.19(m，1H)，8.37(s，1H)，8.41-8.48(m，2H)，8.74(s，1H)，12.37(s，1H)。

实施例13

6-(二氟甲基)-N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

制备方法1

在室温下，将在2.5ml DMF中的250mg 6-(二氟甲基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺(中间体5-2的粗产物)、144mg碘化钾和239mg碳酸钾的混合物搅拌15min。加入145mg(0.87mmol)4-溴-2-甲基丁-2-醇，将混合物在110℃下搅拌3h，再加入96mg 4-溴-2-甲基丁-2-醇，并将混合物在110℃下搅拌4h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物两次，并将萃取物用半饱和氯化钠水溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。得到61mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.00min(UV检测器：TIC)，质量测量值432.00.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.14(s，6H)，1.63(s，6H)，1.97-2.08(m，2H)，4.41-4.55(m，3H)，5.99(s，1H)，7.03(t，1H)，7.56(s，1H)，7.94-8.00(m，1H)，8.24-8.38(m，3H)，8.71(s，1H)，12.49(s，1H)。

制备方法2

类似于实施例11(制备方法1)的制备，使3.00g 5-({[6-(二氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-11)与3M的甲基溴化镁溶液(于乙醚中)反应。通过用乙醚萃取性搅拌，然后通过制备型HPLC将粗产物纯化之后，得到1.37g标题化合物。

实施例14

6-(二氟甲基)-N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[2-(甲基磺酰基)乙基]-2H-吲唑-5-基}吡啶-2-甲酰胺

在室温下，将在2.5ml DMF中的250mg 6-(二氟甲基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺(中间体5-2的粗产物)、144mg碘化钾和239mg碳酸钾的混合物搅拌15min。加入162mg 2-溴乙基甲基砜(0.87mmol)，并将混合物在110℃下搅拌3h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物两次，并将萃取物用半饱和氯化钠水溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，并将产物部分通过在硅胶上的柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)再次纯化。得到40mg标题化合物。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.65(s，6H)，2.90(s，3H)，3.85(t，2H)，4.85(t，2H)，6.03(s，1H)，7.04(t，1H)，7.59(s，1H)，7.98(d，1H)，8.25-8.36(m，2H)，8.43(s，1H)，8.75(s，1H)，12.52(s，1H)。

实施例15

6-(二氟甲基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-羟基丙基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

步骤A：

N-[2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(二氟甲基)吡啶-2-甲酰胺的制备

将在2.5ml DMF中的250mg 6-(二氟甲基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺(中间体5-2)、48mg碘化钾和239mg碳酸钾的混合物在室温下搅拌15min。加入219mg(0.87mmol，1.5当量)(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷，并将混合物在110℃下搅拌3h。再加入1当量的(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷，并将混合物在100℃下搅拌4h。加入水，用乙酸乙酯萃取混合物，并将萃取物用氯化钠水溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)进行纯化。得到92mg标题化合物。

阶段B：

类似于实施例6步骤B的制备，在1h内使92mg N-[2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(二氟甲基)吡啶-2-甲酰胺与0.53ml 1M的四丁基氟化铵的THF溶液反应。如实施例6中那样进行水后处理，并通过制备型HPLC进行纯化，得到46mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝0.92min(UV检测器：TIC)，质量测量值404.00。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.64(s，6H)，2.05(五重峰，2H)，3.35-3.46(m，2H)，4.45(t，2H)，4.64(t，1H)，5.99(s，1H)，7.04(t，1H)，7.57(s，1H)，7.95-7.99(m，1H)，8.25-8.36(m，3H)，8.73(s，1H)，12.50(s，1H)。

实施例16

N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

将210mg(0.58mmol)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(中间体5-1)于3ml DMF中的这一混合物与0.11ml(0.87mmol)1，1，1-三氟-4-碘丁烷和239mg碳酸钾混合，并将混合物在80℃下搅拌6h。在加入水后，用乙酸乙酯萃取混合物三次，并将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC纯化。得到19mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.27min(UV检测器：TIC)，质量测量值474.15。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.62(s，6H)，2.10-2.33(m)，4.49(t，2H)，5.94(s，1H)，7.59(s，1H)，8.13-8.18(m，1H)，8.32-8.41(m，2H)，8.41-8.47(m，1H)，8.72(s，1H)，12.35(s，1H)。

实施例17

N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(三氟甲氧基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

首先将150mg(0.33mmol)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(中间体5-1)加入2ml THF中。加入58mg(0.40mmol)3-(三氟甲氧基)丙-1-醇、131mg三苯基膦和71μl偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD，CAS 2446-83-5)，并将混合物在室温下搅拌19h。加入0.83ml氢氧化钠溶液(2M)，并将混合物在40℃下搅拌5h。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取三次，将合并的有机相浓缩并通过制备型HPLC纯化。得到16mg粗产物形式的标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.26min(UV检测器：TIC)，质量测量值490.14。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆，选出的信号)：δ[ppm]＝1.61(s，6H)，1.84(d，1H)，2.32(五重峰，2H)，4.08(t，2H)，4.51(t，2H)，7.58(s，1H)，8.15(d，1H)，8.31-8.39(m，2H)，8.44(d，1H)，8.72(s，1H)，12.35(s，1H)。

实施例18

N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(2，2，2-三氟乙氧基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

类似于实施例11的制备(制备方法1)，使在3ml THF中的52mg(0.10mmol)的2-[3-(2，2，2-三氟乙氧基)丙基]-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-10)与2×171μl 3M的溴化镁的乙醚溶液反应。通过制备型HPLC纯化，得到12mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A1)：R_t＝1.25min(UV检测器：TlC)，质量测量值504.16。

¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.63(s，6H)，2.20(五重峰，2H)，3.58(t，2H)，4.05(q，2H)，4.47(t，2H)，5.94(s，1H)，7.58(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.32(s，1H)，8.36(t，1H)，8.45(d，1H)，8.73(s，1H)，12.36(s，1H)。

实施例19

5-氟-N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-甲基吡啶-2-甲酰胺

首先将228mg(0.31mmol)5-{[(5-氟-6-甲基吡啶-2-基)羰基]氨基}-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-8)加入4.5ml THF中，并用冰冷却浴冷却。加入0.63ml 3M的甲基溴化镁溶液(于乙醚中)，并将混合物在用冰浴冷却的同时搅拌2h，并在室温下搅拌21h。将反应混合物与饱和氯化铵水溶液混合，并用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化。得到82mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.03min(UV检测器：TIC)，质量测量值414.21。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.13(s，6H)，1.63(s，6H)，1.99-2.05(m，2H)，2.55-2.59(m，3H)，4.42-4.50(m，3H)，5.95(s，1H)，7.54(s，1H)，7.83(t，1H)，8.05(dd，1H)，8.31(s，1H)，8.68(s，1H)，12.33(s，1H)。

实施例20

N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-甲基吡啶-2-甲酰胺

首先将278mg(0.48mmol)2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-{[(6-甲基吡啶-2-基)羰基]氨基}-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-9)加入5.0ml THF中，并用冰冷却浴冷却。加入0.97ml 3M的甲基溴化镁溶液(于乙醚中)，将混合物在用冰浴冷却的同时搅拌2h，并在室温下搅拌20.5h。再加入0.48ml 3M的甲基溴化镁溶液，并将混合物在室温下搅拌67h。将混合物与饱和氯化铵水溶液混合，并用乙酸乙酯萃取三次，将萃取物用氯化钠水溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化。得到111mg标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝0.97min(UV检测器：TIC)，质量测量值396.22。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.15(s，6H)，1.64(s，6H)，2.00-2.08(m，2H)，2.61(s，3H)，4.41-4.59(m，3H)，5.92(s，1H)，7.50(dd，1H)，7.56(s，1H)，7.90-7.99(m，2H)，8.33(s，1H)，8.70(s，1H)，12.39(s，1H)。

实施例21

6-(2-羟基丙-2-基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

将72mg(0.16mmol)5-({[6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯(中间体4-7)溶于10ml THF中的溶液在冰/水冷却浴中冷却。加入0.26ml 3M的甲基溴化镁的乙醚溶液，并将混合物搅拌2h，然后在室温下搅拌20h。再加入1当量3M的甲基溴化镁溶液，并将混合物在室温下搅拌24h。加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取混合物三次，将萃取物用氯化钠溶液洗涤，并浓缩。制备型HPLC得到22mg(理论值的31％)标题化合物。

UPLC-MS(方法A2)：R_t＝1.15min(UV检测器：TIC)，质量测量值464.20。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝1.56(s，6H)，1.64(s，6H)，2.07-2.34(m，4H)，4.49(t，2H)，5.32(s，1H)，6.05(s，1H)，7.60(s，1H)，7.87(dd，1H)，7.99-8.05(m，2H)，8.35(s，1H)，8.79(s，1H)，12.45(s，1H)。

实施例22

N-{2-[2-(1-羟基环丙基)乙基]-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

首先将250mg(0.69mmol)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺(中间体5-1)加入5ml DMSO中。加入159mg(0.96mmol)1-(2-溴乙基)环丙醇、285mg碳酸钾和171mg碘化钾，并将混合物在100℃下搅拌5h。加入水，并用乙酸乙酯萃取混合物三次。将合并的有机相用氯化钠溶液洗涤，通过疏水过滤器过滤，并浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(柱：Waters XBridge C18 5μ 100×30mm，洗脱液A：水+0.1体积％的甲酸(99％)，洗脱液B：乙腈)。冷冻干燥得到45mg标题化合物。

¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ[ppm]＝0.18-0.22(m，2H)，0.48-0.52(m，2H)，1.62(s，6H)，2.08(t，2H)，4.54-4.60(m，2H)，5.36(s，1H)，5.96(s，1H)，7.57(s，1H)，8.16(dd，1H)，8.34-8.39(m，2H)，8.45(d，1H)，8.72(s，1H)，12.36(s，1H)。

在多种自身免疫疾病中的生理功效评价

IRAK4激酶测定

本发明物质的IRAK4抑制活性在下文中描述的IRAK4 TR-FRET测定(TR-FRET＝时间分辨荧光共振能量转移)中进行测量。

使用来自于N-末端GST(谷胱甘肽-S-转移酶)和人IRAK4的重组融合蛋白作为酶，所述重组融合蛋白在杆状病毒感染的昆虫细胞(Hi5，BTI-TN-5B1-4，购自Invitrogen的细胞系，目录号B855-02)中表达，并经由亲和色谱法纯化。用于激酶反应的底物为生物素化的(biotinylated)肽生物素-Ahx-KKARFSRFAGSSPSQASFAEPG(C末端为酰胺形式)，其可购自，例如，Biosyntan GmbH(Berlin-Buch)。

对于所述测定，由2mM测试物质的DMSO溶液制备20μM至0.073nM范围内的11个不同的浓度。将50nl各溶液吸移到黑色低容量384-孔微量滴定板(Greiner Bio-One，Frickenhausen，德国)中，加入2μl IRAK4于测定缓冲液(50mM HEPES pH 7.5，5mM MgCl₂，1.0mM二硫苏糖醇，30μM活化的原钒酸钠，0.1％(w/v)牛γ-球蛋白(BGG)0.04％(v/v)诺乃洗涤剂-P40(Sigma))中的溶液，并将混合物温育15min以使所述物质在激酶反应之前预结合至所述酶。然后通过加入3μl三磷酸腺苷(ATP，1.67mM＝在5μl测定体积中的终浓度：1mM)和肽底物(0.83μM＝在5μl测定体积中的终浓度：0.5μM)于测定缓冲液的溶液启动激酶反应，并将所得的混合物在22℃下温育45min的反应时间。IRAK4的浓度根据酶的相应活性来调节和设置以使测定在线性范围内进行。通常浓度在约0.2nM的量级上。所述反应通过添加5μl TR-FRET检测试剂[0.1μM链霉抗生素蛋白-XL665(Cisbio Bioassays；法国，目录号610SAXLG)]和1.5nM抗磷酸丝氨酸抗体[Merck Millipore，“STK抗体”，目录号35-002]以及0.6nM LANCE EU-W1024标记的抗小鼠IgG抗体(Perkin-Elmer，产品号AD0071；或者可使用来自Cisbio Bioassays的铽穴合物标记的抗小鼠IgG抗体)于EDTA水溶液(100mM EDTA，0.4％(w/v)牛血清白蛋白[BSA]于25mM HEPESpH7.5)中的溶液来终止反应。

将所得的混合物在22℃下温育1h以形成生物素化磷酸化底物和检测试剂的复合物。随后磷酸化底物的量通过测量从铕螯合物标记的抗小鼠IgG抗体到链霉抗生素蛋白-XL665的共振能量转移进行评价。为此，利用TR-FRET测量仪器，例如Rubystar(BMGLabtechnologies，Offenburg，德国)或Viewlux(Perkin-Elmer)，测量在350nm激发之后，在620nm和665nm的荧光发射。取665nm和622nm的发射之比作为磷酸化底物的量的量度。将数据归一化(无测试物质的酶反应＝0％抑制，具有所有其他测定组分而不含酶＝100％抑制)。通常，将测试物质以20μM至0.073nM范围内的11个不同浓度(20μM、5.7μM、1.6μM、0.47μM、0.13μM、38nM、11nM、3.1nM、0.89nM、0.25nM和0.073nM)于相同的微量滴定板上测试。稀释系列在测定之前(在100％DMSO中的2mM至7.3nM)通过系列稀释制备。使用4-参数拟合计算IC₅₀值。

表1：在IRAK4激酶测定中实施例化合物的IC₅₀值

在上文描述的IRAK4TR-FRET测定中同样测定了通式(III)的化合物关于IRAK4的抑制剂活性。以下示例性地提及：化合物中间体4-2具有IC₅₀＝21.7nM、中间体4-3具有IC₅₀＝13.0nM，以及中间体4-4具有IC₅₀＝6.2nM。

THP-1细胞中的TNF-α分泌

借助于该测试，其可适于测试物质抑制THP-1细胞(人单核细胞急性白血病细胞系)中TNF-α(肿瘤坏死因子α)分泌的能力。TNF-α为参与所列自身免疫疾病的炎性过程的关键细胞因子，所述自身免疫疾病如类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病、克罗恩病、溃疡性结肠炎等。在该测试中，TNF-α分泌通过与细菌脂多糖(LPS)的温育而触发。

将THP-1细胞保存于连续悬浮细胞培养基(含有L-Glutamax的RPMI 1460培养基(Gibco，目录号61870-044)，补充有胎牛血清(FCS)10％(Invitrogen，目录号10082-147)、1％青霉素/链霉素(Gibco BRL，目录号15140-114))中，并且不应超过1×10⁶个细胞/ml的细胞浓度。所述测定在细胞培养基(含有L-Glutamax的RPMI 1460培养基，补充有FCS 10％)中进行。

在每种情况下，将每孔2-2.5μl的细胞悬浮液(对应4000个细胞)分配至384-孔测试板(Greiner，目录号784076)中，其中在每种情况下，将40-50nl物质溶于100％DMSO中。对于每种物质，这使用在范围20μM至0.073nM内的10个不同浓度来完成。将细胞在室温下温育15min。然后将2-2.5μl的溶于细胞培养基中的0.1μg/ml的LPS(Sigma，大肠杆菌(Escherichia coli)055：B5，目录号L5418)(终浓度0.05μg/ml)分配至每孔中。作为中性对照，细胞用0.05μg/ml LPS和1％DMSO进行处理，作为抑制对照，仅用1％DMSO处理。

将板以80g离心30s，并在37℃、5％CO₂和95％大气湿度下温育17h。TNF-α的量使用TNF-α HTRF检测试剂盒(Cisbio，目录号62TNFPEB/C)测定。为此，在每种情况下，加入2μl的检测溶液——其由抗-TNF-α-XL665缀合物和抗-TNF-α-穴合物缀合物组成，根据制造商的说明书溶于重建缓冲液中——用于HTRF(均相时间分辨荧光)测试。加入后，将混合物在室温下温育3h或在4℃温育过夜。然后使用支持HTRF的测量仪器如BMG PheraStar读取620/665nm处的信号。

物质的活性表示为以百分比计的介于中性对照和抑制对照之间的比例。使用4-参数拟合计算IC₅₀值。

表2：实施例化合物对于THP-1细胞中TNF-α分泌的IC₅₀值。

体外LPS((脂多糖))-诱导的人PBMC(外周血单核细胞)中细胞因子产生

考察通式(I)的化合物对于人PBMC中诱导性细胞因子产生的功效。此处，细胞因子产生由LPS——TLR4配体，其导致IRAK4-介导的信号途径的激活——诱导。

人PBMC由人抗凝全血得到。为此目的，首先将15ml Ficoll-Paque(Biochrom，目录号L6115)装入Leucosep管中，并加入20ml人血。将800g该血在室温下离心15min后，移除并弃去包含血小板的血浆。将PBMC转移至离心管中并补充PBS(磷酸盐缓冲盐水)(Gibco，目录号14190)。将250g细胞悬浮液在室温下离心10min并弃去上清液。将PBMC重新悬浮于完全培养基(RPMI 1640，不含L-谷氨酰胺(PAA，目录号E15-039)，10％FCS；50U/ml青霉素，50μg/ml链霉素(PAA，目录号P11-010)和1％L-谷氨酰胺(Sigma，目录号G7513))中。

测定也是在完全培养基中进行。将PBMC以2.5×10⁵个细胞/孔的细胞密度接种到96-孔板。将通式(I)的化合物进行一系列稀释，稀释在等容的100％DMSO中，并以10μM至3nM范围内的8个不同浓度应用于测定中，使得最终的DMSO浓度为0.4％DMSO。在实际刺激之前，将细胞随其预温育30min。为了诱导细胞因子分泌，用0.1μg/ml LPS(Sigma，Escherichiacoli 0128：B12，目录号L2887)刺激细胞24小时。细胞生存力使用CellTiter-Glo发光测定(Promega，目录号G7571(G755/G756A))按照制造商的说明书进行测定。细胞培养上清液中分泌的TNF-α的量使用Human ProInflammatory 9-Plex Tissue Culture Kit(MSD，目录号K15007B)按照制造商的说明书进行测定。例如，实施例化合物11和实施例化合物12具有≤1μM的活性。

体外TLR-4/TLR-7诱导的人树突细胞(DC)的白细胞介素(IL)-23分泌

在人DC中考察通式(I)的化合物对促炎细胞因子IL-23的诱导产生的功效，所述促炎细胞因子IL-23对TH-17细胞的产生起重要作用(IL-17-产生T-辅助细胞)。据报道，TH-17细胞在疾病如类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、别赫捷列夫病(强直性脊柱炎)、银屑病、特应性皮炎、系统性红斑狼疮或多发性硬化的发病机理中起到关键作用(Lubberts，Nat.Rev.Rheumatol.，2015；Marinoni等人，Auto.Immun.Highlights，2014；Isailovic等人，J.Autoimmun.，2015；Richtlin&Krueger，Curr Opin Rheumatol.2016年5月；28(3)：204-10Leonardi等人，Allergy Asthma Proc.2015；Araújo等人，Rev BrasRheumatol.2016；Staschke等人，J Immunol.，2009)。为了检测通式(I)的化合物对IL-23产生的影响，使人原代单核细胞(在磁分离的辅助下从人PBMC中分离[Miltenyi Biotech，Monocyte Isolation Kit，目录号130-091-153]并在完全培养基(VLE(非常低的内毒素)RPMI 1640[Biochrom AG，目录号FG1415]、10％胎牛血清(FBS)[Gibco，目录号10493-106]；50μM β-巯基乙醇([Gibco，目录号31350]、50U/ml青霉素和链霉素[Gibco，目录号15140-114])中加入生长因子(重组型人GM-CSF[PeproTech，目录号300-03]和IL-4[PeproTech，目录号200-04])在培养基中在6天内分化为DC。在收获DC后，将其重悬浮于完全培养基中并以2×10⁷个细胞/孔的细胞密度接种于96-孔板(Costar，目录号3599)中。将通式(I)的化合物进行一系列稀释，稀释在等容的100％DMSO中，并以10μM至1nM范围内的9个不同浓度用于检测中。此处确保对于所使用的9个浓度中的每一个，所存在的DMSO浓度总为0.1％。用通式(I)的化合物对DC进行30分钟的预培养。然后，通过10ng/ml的LPS(Sigma，大肠杆菌(Escherichia coli)血清型serotype 0127：B8，目录号L3129)(TLR4配体)和2.5μg/ml的TLR7/8配体R848(Invivogen，目录号tlrl-r848-5)(它们均激活IRAK4介导的信号途径)，在培养箱(37℃，95％rH，5％CO₂)中刺激DC产生IL-23，进行24小时。在24小时的培养后，移除上清液并在市售可得的hIL-23ELISA(eBiosciences，目录号88-7237-88)的辅助下进行分析，其根据制造商的说明书进行。以实施例化合物12为例，对人DC中IL-23的抑制的结果示于图1中。

体外刺激人Th17细胞分泌白细胞介素(IL)-17

在人Th17细胞中考察通式(I)的化合物对诱导产生促炎细胞因子IL-17的抑制功效，所述促炎细胞因子IL-17被认为是类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、别赫捷列夫病(强直性脊柱炎)、反应性关节炎、银屑病、特应性皮炎、系统性红斑狼疮、慢性炎性肠病和多发性硬化的发病机理中的关键细胞因子。为此，首先，如下从抗凝的人全血中得到人PBMC：将20ml的人血加入预先初始装有15ml Ficoll-Paque(Biochrom，目录号L6115)的leucosep管中。将800g该血在室温下离心15min，然后移除并弃去包含血小板的血浆。将PBMC转移至离心管中并补充PBS(磷酸盐缓冲盐水)(Gibco，目录号14190)。将250g细胞悬浮液在室温下离心10min并弃去上清液。将PBMC重新悬浮于完全培养基(RPMI 1640，不含L-谷氨酰胺(PAA，目录号E15-039)，10％FCS；50U/ml青霉素，50μg/ml链霉素(PAA，目录号P11-010)和1％L-谷氨酰胺(Sigma，目录号G7513))中。随后，通过磁性细胞分离器(CD4+T细胞分离试剂盒，Miltenyi Biotech，目录号130-096-533)在柱(LS柱，Miltenyi Biotech，目录号130-042-401)上从PBMC中分离CD4+T-细胞。将以此方式得到的CD4+T细胞以5×10⁴个CD4+T细胞/孔的细胞密度接种在96-孔板(平底，Costar，目录号3599)中。该测定也使用完全培养基进行。将通式(I)的化合物在等容的100％DMSO中进行一系列稀释，并以10μM至1nM范围的9个不同的浓度应用于测试中，使得最终的DMSO浓度为0.1％DMSO。将细胞用相应浓度的通式(I)的化合物在培养箱中预温育30分钟。然后加入由抗体-CD3/抗体-CD28珠(2500珠每50000细胞；T细胞激活试剂盒，Miltenyi Biotech，目录号130-091-441)、重组人(rh)IL-23(20ng/ml；eBioscience，目录号14-8239-63)、rhIL-1β(20ng/ml；eBioscience，目录号34-8018)、rhIL-6(20ng/ml；eBioscience，目录号34-8069)和rhIL-2(100IU/ml；eBioscience；目录号SRP3085)组成的Th17分化混合剂，在该Th17分化混合剂的辅助下，CD4+T细胞在6天内分化成Th17细胞并且同时被刺激产生IL-17。在培养箱中培养6天后，移除细胞培养物上清液并使用商业hIL-17ELISA(人IL-17a ELISA Ready-SET-Go，eBiosciences，目录号88-7176-88)分析，这根据厂家的说明书进行。以实施例化合物12为例，对Th17细胞分化以及由此最后对IL-17产生的抑制的结果示于图2中。

体外TLR-7/8-或TLR-9诱导的人浆细胞样树突细胞(pDC)的IFN-α产生

借助该测试，可以研究通式(I)的化合物对人pDC中的IFNα(干扰素-α)(系统性红斑狼疮发病机理中的关键细胞因子)的产生的影响(Mathian等人，Arthritis Rheum，2009；Crow M.K.，Rheum Dis Clin N Am，2010)。为此目的，如上所述，从全血中分离人PBMC，并使用市售可得的细胞分离试剂盒从中分离出浆细胞样DC(pDC)(Miltenyi Biotech，浆细胞样树突细胞分离试剂盒II，目录号130-097-415)。将由此得到的pDC重悬浮于完全培养基(补充有10％FBS[Gibco，目录号10493-106]和50U青霉素/链霉素[Gibco，目录号15140-114]的RPMI1640+GlutaMax[Gibco，目录号61870-010])中，并以5×10⁴个细胞/孔的细胞密度移植于96-孔微量滴定板(Costar，目录号3599)中。将通式(I)的化合物在等容的100％DMSO中进行一系列稀释，并以10μM至1nM范围内的9个不同的浓度用于检测中。在本文中，确保对于所使用的9个浓度中的每一个，所存在的DMSO浓度始终为0.1％。用通式(I)的化合物对pDC进行30分钟的预培养。用TLR7/8配体(咪喹莫特，R837，Invivogen，目录号tlrl-imq)或用TLR-9配体(CPG-A，ODN2216，Invivogen，目录号tlrl-2216-1)刺激pDC，这导致将IRAK-4介导的信号途径激活。在培养24小时后，除去细胞培养物上清液，并使用市售可得的人IFNα ELISA(IFNalpha Multi-Subtype ELISA Kit，pbl Assay Science，目录号41105-1)进行分析。以实施例化合物12为例，对人浆细胞样DC中IFNα的抑制的结果示于图3中。

TLR-介导的炎症的体内模型

在体内TLR-介导的炎症模型中考察通式(I)的化合物的体内功效。由于使用了LPS-介导的炎症模型，因此该机理模型特别示出了通式(I)的化合物对于TLR4-介导的疾病的潜在功效。在该模型中，将雌性NMRI小鼠(约6周龄；Charles River实验室，德国)分组，每组5只动物。用其中溶解所述物质的溶媒(物质溶媒)(乙醇-花生油10：90体积/体积)和其中溶解LPS的溶媒处理健康对照组。与物质处理组一样，阳性对照组也分别以0.2mg LPS/kg体重(Sigma，目录号L4391)(来自E.coli0111：B4的脂多糖)经腹膜内注射(i.p.)给药。此外，阳性对照组用上述的物质溶媒处理。在通过给予LPS诱导炎症前1小时，口服给予所述物质。为了考察通式(I)的化合物对于炎症的功效，1.5小时后从所述动物中采取最终的血液样品。使用小鼠TNF-α和小鼠IL-6Ready-SET-Go ELISA试剂盒(eBioscience，mTNFα目录号88-7324-88，mIL-6目录号88-7064-88)按照厂商的说明书测定血浆中细胞因子TNF-α和IL-6的浓度。IRAK4抑制剂在TLR-介导的炎症模型中是有效的。LPS的应用快速诱导血浆中的促炎细胞因子如TNF-α和IL-6，其通过用通式(I)的化合物处理以剂量依赖性方式被抑制。这例如通过图4中的化合物12和11示出。在一些实验中，在用于比较抑制效力的动物模型中还测试了临床相关的对比物质，例如TNF拮抗剂阿达木单抗(adalimumab)或依那西普(Etanercept)，在每种情况下两者在用LPS以1.5mg/kg、5mg/kg和10mg/kg的剂量诱导炎症前1h分别经皮下给药。

体内佐剂诱导的关节炎模型

为了测定通式(I)的化合物的抗炎症活性，在关节炎模型中考察它们的体内功效。为此目的，在第0天，将各雄性Lewis大鼠(约100-125g，Charles River Laboratories，德国)向尾基部内皮下给药100μl的完全弗式佐剂(CFA)溶液(结核分枝杆菌H37Ra[Difo Lab，目录号-231141]溶解于不完全弗式佐剂[Difco Lab，目录号-263910]中)。在每组中有n＝8只大鼠。健康对照组和疾病对照组均纳入研究中。各对照组仅以预防方式(从第0天)或以治疗方式(从第9天)用测试物质溶媒(Cremophor-乙醇-水40：10：50体积/体积/体积)进行口服处理。也开始以预防方式或以治疗方式通过口服施用进行用不同剂量的测试物质治疗。在第0天，根据疾病活动性评分(基于评分系统的关节炎严重程度分级(rating of theseverity of arthritis based on a points system))预先确定动物的起始状况。在该评分系统(评分)中，根据关节发炎程度，对存在包括关节肿胀在内的红斑，将两双后爪判定为0至4分(0＝无；1＝轻度；2＝中度；3＝明显；4＝严重)，并加和。为了测定化合物的抗炎功效，从第8天(当动物最先出现发炎迹象时)开始，借助疾病活性评分对动物的疾病状态进行评分，随后每周3次，直到结束(第20天)。此外，在实验过程期间，使用自动握力测试仪(IITCLife Science Inc.，USA)测定动物的握力作为痛觉过敏的量度。作为关节肿胀的量度，还通过体积计(IITC Life Science Inc.，USA)测量爪的体积，作为关节肿胀的量度。在第20天，终止实验并在吸入麻醉(异氟烷)下在MRT(磁共振断层扫描仪；MAGNETOM Avanto syngoMR B17，Siemens，德国)中进行磁共振成像扫描，使用MRT序列STIR(用于脂肪信号抑制和用于检测水肿的短时间反转恢复序列)作为用于分析关节炎严重程度的成像方法。此外，特别地，通过用150μl无菌生理盐水在关节内冲洗膝关节而由炎症关节得到滑液，并使用来自Meso Scale Discovery(MSD)的市售多重ELISA仪器来检测存在的细胞因子浓度(促炎小组1；目录号K15059D-1)。然后使用膝关节活体组织切片来分析在组织中的细胞因子浓度(通过来自MSD的多重-ELISA)或CRP水平(大鼠C-反应蛋白，目录号557825，BD Bioscience)或弹性蛋白酶活性(作为中性粒细胞浸润的量度)或者对在滑液以及关节内和关节周围组织中的炎症症状进行组织病理学检测。为此，将膝关节活体组织切片在冷却的珠磨机中在-196℃下(CryoMill；Retsch GmBH，德国)粉碎，在每种情况下，将200mg溶解在用于细胞因子分析(在0.5ml RPMI1640培养基中，Gibco)或用于弹性蛋白酶活性(在1ml的均浆缓冲液中[pH 7.0；储存室温；5g 5％的十六烷基三甲基溴化铵、2.09g 10mM MOPS和900ml 30-35°的蒸馏水1)的合适的缓冲液中。为了对噬中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的蛋白酶活性进行定量，使用对NE具有高度特异性的荧光-标记底物[MeOSuc-AAPV-AMC(N-甲氧基琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Val-7-氨基-4-甲基香豆素)，目录号1-1270，Bachem，德国]。将重组鼠NE(目录号4517-SE-010，R&D Systems，德国；溶解在均浆缓冲液中，参见上文)用作标准曲线，并将均浆缓冲液作为空白值。对于弹性蛋白酶测定，在每种情况下使用25μl的关节均浆并移液到黑色的96-孔微量滴定板(平底，NUNC，德国)中，然后与25μl 1mM的于冷TrisBSA缓冲液(0.1％BSA[级分V]，0.1M三(羟基甲基)氨基甲烷，1M的于1升水中的NaCl；pH 8.5；储存在4℃下)中的MeOSuc-AAPV-AMC底物溶液混合。使用预热的板读数器(SpectraMax M2，Molecular Devices)，将微量滴定板中的荧光在37℃以及入_Ex＝380nm和λ_Em＝460nm下30min之后进行测量，并通过软件SoftmaxPro 6.4使用NE标准曲线计算中性粒细胞弹性蛋白酶的量。而对于组织病理学评估，依据所讨论的相应参数(炎症、软骨损伤、滑膜增生、血管翳、骨损伤、骨膜变化)的损伤程度，对病理性关节损伤的存在或严重程度使用判定评分为0至4(0＝无；1＝轻度；2＝中度；3＝明显；4＝严重)的分数。使用单因素方差分析ANOVA进行统计学分析，并通过多重比较分析(Dunnett′s检验)与对照组进行比较。

在大鼠中的CFA皮下给药导致大鼠具有有明显关节发炎的急性关节炎。以示例性方式，该大鼠关节炎模型代表了在人关节炎情况下的关节炎症如银屑病性关节炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎和别赫捷列夫病(Bendele，J Musculoskel Neuron Interact2001；McCann等人，Arthritis Res Ther，2010)。通过用实施例化合物11的预防性但也是治疗性的治疗，可以显著抑制佐剂诱导的关节炎，并且组织学和MRI数据特别表明了类似于DMARD(改善疾病的抗风湿药)的疾病改善作用。这通过图5说明。在一些实验中，临床相关的对比物质，即TNF拮抗剂依那西普(10mg/kg或25mg/kg，从第0天起)——其每3天皮下给药——也在动物模型中测试，用于比较抑制效果。

体内胶原抗体-诱导的小鼠关节炎模型

在另一种鼠类关节炎模型中考察通式(I)的化合物的抗炎作用。为此目的，在第0天，将雌性Balb/c小鼠(约9周龄，Charles River Laboratories，Kingston，Canada)向尾静脉中静脉内注射200μl胶原抗体混合剂(10mg/ml；ArthritoMab，MD Bioproducts)(研究中包括的健康对照组除外)。然后，在第6天，使这些小鼠再分别接受腹膜内注射200μl LPS。每组有n＝10只小鼠。健康对照组和疾病对照组均纳入研究中。各对照组以预防方式(即从第0天)或以治疗方式(从第9天)仅用测试物质的溶媒(乙醇∶花生油10∶90体积/体积)进行口服治疗。也开始以预防方式或以治疗方式通过口服给药用不同剂量的测试物质进行治疗。在整个实验过程中，基于针对疾病活动性评分评分判定系统对所有四只爪的患病程度进行评分。在该评分判定中，对于健康的爪判定为没有评分，而对于从脚趾通过跖关节至踝关节发生的特定程度的关节发炎，分别判定为1分[轻度发炎，例如脚趾发炎]至4分[延伸到整个爪子的严重发炎]，说明如下：

·0＝正常

·1＝限于跗节或踝关节或脚趾的红斑和轻度肿胀

·2＝从踝关节延伸至跖骨的红斑和轻度肿胀(2阶段)

·3＝从踝关节延伸至远至跖骨关节的红斑和中度肿胀

·4＝涵盖跖骨、足和趾的红斑和严重肿胀

同时，在实验过程中，通过体积计(IITC Life Science Inc.，USA)测量爪体积作为关节肿胀的量度。对于该参数，分别在开始实验的前一天(第-1天)事先确定起始条件，且随后从第8天开始对该疾病活动性评分和爪体积每周评分三次。在第21天，终止实验并检查膝关节活体组织，以便对滑液内以及关节内和关节周围组织中的炎症症状进行组织病理学分析。对于组织病理学评估，同样地，依据所讨论的相应参数(炎症、软骨损伤、滑膜增生、血管翳、骨损伤、骨膜变化)的损伤程度，对病理性关节损伤的存在或严重程度使用判定评分为0至4(0＝无；1＝轻度；2＝中度；3＝明显；4＝严重)的分数。使用单因素方差分析(ANOVA)进行统计学分析，并通过多重比较分析(Dunnett′s检验)与对照组进行比较。

在小鼠中静脉给药胶原抗体混合剂，包括随后腹膜内注射给药LPS，这导致小鼠中具有严重关节发炎的急性关节炎(Holmdahl等人，APMIS1989；McCann等人，Arthritis ResTher，2010)，因此代表了用于关节炎指征银屑病关节炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎和别赫捷列夫病(Bechterew disease)的另外的动物模型。通过用实施例化合物12预防性但也是治疗性的治疗，可显著抑制该胶原抗体诱导的关节炎，并且后爪关节的组织病理学数据表明了疾病改善作用，这由图6说明。

体内MOG_33-35-诱导的小鼠慢性EAE(实验性自身免疫性脑脊髓炎)模型

为了测定通式(I)的化合物的抗炎活性，在多发性硬化(MS)的实验动物模型中检测它们的体内功效。慢性MOG_33-35(髓鞘少突神经胶质细胞糖蛋白)-诱导的EAE(实验自身免疫性脑脊髓炎)模型是用于测试潜在用于MS患者中的药理学物质的标准动物模型。为此，将雌性C57BL/6小鼠(19-20g；Jackson Laboratories，Bar Harbor，USA)随机化并以每组10至15只动物的组强度使用。使用皮下注射，在每种情况下注射0.1ml含有200μg乳化在补充有结核分枝杆菌(MT；8mg/ml，菌株H37RA)的100μl的CFA(全弗佐剂；2mg/ml)中的MOG_33-35肽溶液，在第0天，通过额外腹膜内注射给药(第0天和第2天)200ng百日咳毒素(PTx；溶解在0.1ml的PBS中(2μg/ml))来诱导EAE疾病，并监测其进展超过34天。实验还包含健康对照组和疾病对照组，两者均已用实施例化合物12的溶媒(乙醇：花生油10：90体积/体积)进行口服处理。替代地，治疗组接受不同日剂量的实施例化合物12作为预防性治疗，即从第0天开始，通过口服给药。每天检查参数诸如发病率和EAE症状。在本文中，使用代表疾病严重程度的评分系统来对EAE症状进行评分(EAE疾病活动性评分)：

·0＝正常，健康

·1＝跛行/麻痹的小鼠尾巴

·2＝跛行/麻痹的小鼠尾巴并且后爪虚弱

·3＝跛行/麻痹的小鼠尾巴并且后爪完全麻痹

·4＝麻痹的尾巴，后爪完全麻痹并且前爪部分麻痹

·5＝所有前爪和后爪完全麻痹，安乐死

在EAE诱导后34天，终止实验并且，特别是，从小鼠中抽取血液用于随后的生物标记分析，并且抽取脊髓用于神经轴索变性和淋巴细胞渗透的组织病理学评估。对于疾病严重程度的组织病理学评估，将脊髓用苏木精、曙红和勒克司坚牢蓝(luxol fast blue)染色，然后使用评分系统对神经轴索变性、淋巴细胞浸润白质和淋巴细胞浸润灰质进行盲点评分(0＝正常，无发现；1＝最少发现；2＝轻度发现；3＝中度发现；4＝显著发现；5＝严重发现)。使用单因素方差分析(ANOVA)进行统计学分析，并通过多重比较分析(Dunnett′s检验)与对照组进行比较。通过用实施例化合物12处理，可以抑制诱导的EAE——MS的实验模型。在本文中，实施例化合物与类固醇(泼尼松龙；从第0天开始每天口服1mg/kg)或特立氟胺(teriflunomide)(从第0天开始每天口服10mg/kg)的效果相当或甚至更佳，在本实验中也测试所述类固醇或特立氟胺，作为临床对比物质。这在图7中说明。

体内咪喹莫特-诱导的小鼠银屑病模型

在银屑病的动物模型中检测通式(I)的化合物的抗炎作用。在小鼠中，局部给药咪喹莫特(IMQ)——一种TLR7/8配体和有效的免疫激活剂——导致皮肤上银屑病样表型。因此，在7天内，每天将3.5mg咪喹莫特(相当于70mg 5％乳膏，Meda AB)局部施用于小鼠的背部皮肤(已预先剃光)和双耳(外侧)。健康对照组——其也进行测试——替代地接受了石蜡油。随后，将IMQ疾病对照组以及健康对照组进行预防性治疗，即从第0天开始，每日口服(p.o.)测试化合物的溶媒(Solutol HS15-水(40/60体积/体积))。采用不同剂量的测试化合物的每日口服处理也是从第0天开始。在每种情况下，组大小为n＝10只动物。在实验期间，通过评分系统使用下述的临床评分每天目测评估银屑病的表现：

与此平行地，每天使用数字卡尺(Kutimeter；Horex Digital Caliper，Helios-Preisser，德国)测量背部和双耳皮肤的厚度和/或水肿形成。每2天，核查每只小鼠的体重。在第7天，终止实验并且，将动物处死了之后，将背部和耳朵的皮肤固定在福尔马林中，用于随后的组织病理学评估。在切片机(Leica，德国)中苏木精/曙红染色石蜡皮肤切片(2μm)后进行耳朵和背部皮肤的组织病理学评估，该评估是通过病理学家以盲法形式进行。在本文中，通过评分系统(对每个检测参数)对以下方面的严重程度进行检测和评估：角化不全(以保留在角质层中的细胞核或细胞核残留为特征的受损角化)/角化过度(皮肤的过度角化)以及免疫细胞浸润真皮或表皮。在本文中，检测的各个组织学参数评估如下：

·0＝正常

·1＝轻度变化

·2＝中度变化

·3＝显著变化

然后将所有组织学参数相加并表示为总组织学分散。另外，测量皮肤切片中的表皮的厚度。小鼠中IMQ-介导的皮肤炎症代表了指征银屑病或银屑病性关节炎中的皮肤表型的动物模型(van der Fits等人，J Immunol 2009)。通过用实施例化合物12治疗，可以抑制诱导的银屑病。在本文中，实施例化合物与类固醇(倍他米松，每日口服2.5mg/kg)或TNF拮抗剂(依那西普；每隔一天腹膜内注射5mg/kg)的效果相当或更佳，所述类固醇或TNF拮抗剂在本实验中也被测试，作为临床对比物质。这在图8中说明。

体内DNFB-诱导的小鼠皮肤炎症模型

DNFB(2，4-二硝基-1-氟苯)-诱导的小鼠变应性接触性皮炎(接触过敏)模型代表具有主要由1型T-辅助淋巴细胞(Th1细胞)介导的延迟型免疫反应(延迟型超敏反应；DTH)的背景的炎性皮肤疾病。该Th1-介导的皮肤炎症反应代表了银屑病、银屑病性关节炎和过敏性接触湿疹期间的炎性过程的实例(Roese等人，Exp Dermatol.2012)。为了引发皮肤炎症，预先使雌性NMRI小鼠(22-24g，Charles River，德国)致敏，在第0天和第1天，在剃光的背部皮肤上(面积约10cm²)分别使用25μl的0.5％浓度(重量/体积)的DNFB溶液(2，4-二硝基氟苯，目录号70-34-8，Sigma Aldrich，德国；溶解在丙酮/橄榄油中；4/1；体积/体积)。在每种情况下，组大小为n＝10只小鼠。然后在第5天通过向双耳外侧(每只耳朵面积约2cm²)分别局部施用20μl 0.3％浓度(重量/体积)的DNFB溶液(在丙酮/橄榄油中；4/1；体积/体积)而引发皮肤炎症。健康对照组(仅用溶剂丙酮/橄榄油[4/1；体积/体积]“致敏和引发”)、疾病对照组(用DNFB致敏和引发)和刺激对照(用溶剂致敏，用DNFB引发)也在实验中进行测试。这些对照组仅仅是在引发皮肤炎症之前1h，用测试物质的溶媒(乙醇∶花生油，10∶90体积/体积)口服治疗，治疗组同样是口服接受适当剂量的测试物质。在第6天(引发炎症后24小时)，使用数字卡尺单独测量每只耳朵的耳朵厚度，确定每只小鼠的耳朵的重量。通过随后的分析，在通过将耳朵在1.5ml的均浆缓冲液中均质化(由德国拜耳公司的Feinmechanik-Werkstatt生产的自动均化器)20秒并且随后离心(15000rpm；12℃，20min)并去除上清液，尤其可以确定弹性蛋白酶活性作为中性粒细胞浸润发炎组织的量度。为了量化中性粒细胞弹性体(NE)的蛋白酶活性，使用了荧光标记的底物(MeOSuc-AAPV-AMC；目录号I-1270，Bachem，德国)，其对NE具有高度特异性(Castillo等人，1979；Wiesner等人，2005)。在本文中，使用重组小鼠NE(目录号4517-Se-010，R&D Systems，德国；溶解于均浆缓冲液中)作为标准曲线并使用均浆缓冲液作为空白值。对于弹性蛋白酶测定，分别使用25μl的耳朵均浆并移液到黑色的96-孔微量滴定板(平底，NUNC，德国)中，然后与25μl 1mM的于冷TrisBSA缓冲液中的MeOSuc-AAPV-AMC底物溶液混合。在30分钟之后在37℃以及λEx＝380nm和λEm＝460nm下，使用预热的板读数器(SpectraMax M2，Molecular Devices)测量微量滴定板中的荧光，并用软件SoftmaxPro 6.4使用NE标准曲线计算中性粒细胞弹性蛋白酶的量。

通过用实施例化合物11和实施例化合物12治疗，可以抑制由DNFB引发的ThH1-介导的皮肤炎症。这示于图9中。

体内TMA-诱导的小鼠皮肤炎症模型

TMA(偏苯三酸酐)-诱导的小鼠变应性接触性皮炎(接触过敏)模型代表具有主要由2型嗜酸性粒细胞和T-辅助淋巴细胞(THh2细胞)介导的延迟型免疫反应的(延迟型超敏反应；DTH)的背景的炎性皮肤疾病。该Th2-介导的皮肤炎症反应代表了特应性皮炎期间和接触过敏期间的炎性过程的实例(Sur等人，BMC Complement Altern Med.2015)。为了引发皮肤炎症，预先使雌性NMRI小鼠(22-24g，Charles River，德国)致敏，在第0天，在剃光的背部皮肤上(面积约10cm²)分别使用50μl的3％浓度(重量/体积)的TMA溶液(目录号552-30-7，Sigma Aldrich，德国；溶解在丙酮/肉豆蔻酸异丙酯中；4/1；体积/体积)。在每种情况下，组大小为n＝10只小鼠。然后在第5天通过向双耳外侧(每只耳朵面积约2cm²)分别局部施用10μl 3％浓度(重量/体积)的TMA溶液(在丙酮/肉豆蔻酸异丙酯中；4/1；体积/体积)而引发皮肤炎症。健康对照组(仅用溶剂丙酮/肉豆蔻酸异丙酯[4/1；体积/体积]“致敏和引发”)和疾病对照组(用TMA致敏和引发)也在实验中进行测试。这些对照组仅仅是在引发皮肤炎症之前1h，用测试物质的溶媒(乙醇∶花生油10∶90，体积/体积)，口服，治疗组同样是口服接受适当剂量的测试物质。在第6天(引发炎症后24小时)，使用数字卡尺单独测量每只耳朵的耳朵厚度，并确定每只小鼠的耳朵的重量。通过随后在耳朵均浆——其可以如上所述地得到——中的分析，尤其可以确定弹性蛋白酶活性，其作为中性粒细胞浸润发炎组织的量度，如上所述(在“DNFB-诱导的皮肤模型”下)。通过用实施例化合物12治疗，可以抑制由TMA引发的Th2-介导的皮肤炎症。这使用参数耳朵厚度(Δ耳朵厚度＝第6天的耳朵厚度减去初始耳朵厚度)示于图10中，其代表炎症过程期间的水肿形成。

体内DSS-诱导的小鼠结肠炎模型

为了测定通式(I)的化合物的抗炎潜力，在肠道炎症动物模型——DSS(葡聚糖硫酸钠)-诱导的结肠炎模型——中评估这些化合物。通过饮用水向易感小鼠给药DSS导致发展了具有典型临床症状如血性腹泻、重量减轻、在结肠中形成水肿的急性肠道炎症(结肠炎)。因此其为包括指示克罗恩病和溃疡性结肠炎(Okaysu等人，Gastroenterol，1990；Dieleman等人，Gastroenterol，1994)的IBD(炎性肠病)的实验动物模型。从第0天开始直至并且包括第5天，使雄性C57BL/6小鼠(6-8周；Charles River，USA；n＝10-12只小鼠/组)通过饮用水接受每天新鲜制备的3％浓度的DSS(35-48kDa；目录号DB001；TDB ConsultancyAB，Sweden)，以引发结肠炎。替代地，使还测试的健康对照组(n＝8只小鼠)接受正常的饮用水。在每种情况下，对照组(健康对照和结肠炎疾病对照)仅仅用测试物质的溶媒口服治疗。用各种剂量的测试物质治疗是预防性地进行，即从第0天开始，通过口服给药第一次DSS剂量而进行。在本文中，在实验过程中，每天评估体重和甚至可能的血性腹泻的存在(通过0-4分的评分系统[评分]评估，其中0＝正常成型的粪便，1＝软型粪便，2＝软未成型的粪便，3＝水状粪便/腹泻，4＝血性腹泻)。在本文中，使用血红细胞测试检测隐血粪便(目录号3060；Beckman Coulter，德国)。此外，在第10天和第16天，在吸入异氟烷麻醉下进行视频内窥镜检查(Karl Storz Endoskope，德国)，以评估结肠炎的严重程度，其中肠损伤的程度是使用以下0至4分的评分系统(评分)评估：

0＝正常，健康

1＝血管分布缺失

2＝血管分布丧失，且脆弱

3＝脆弱且糜烂

4＝溃疡且出血

在最后一次内窥镜检查后，终止实验，通过腔静脉取出血液并检查结肠的长度及其重量，两者均代表(作为间接标记)结肠炎-相关的肠壁增厚，这与结肠炎的严重程度相关。另外还在固定在福尔马林中通过苏木精/曙红染色石蜡切片后对肠(来自远端和近端各一个2cm的片)进行组织病理学分析。通过用实施例化合物12的治疗能够抑制小鼠中诱导的DSS结肠炎——一种慢性炎性肠病的实验模型(IBD)。实施例化合物12的效果与经批准的生物制剂(从第0天开始以10mg/kg Q3D[每隔3天]腹膜内注射抗-IL-12p40或从第0天开始以10mg/kg Q3D皮下注射抗-TNF [阿达木单抗])的效果相当，其作为临床相关参考物质包括在实验中。这在图12中说明。

体内姥鲛烷(pristane)-诱导的小鼠SLE模型

为了测定通式(I)的化合物的抗炎活性，将化合物在SLE(系统性红斑狼疮)-模型中评估其体内功效。姥鲛烷——一种矿物油(2，6，10，14-四甲基十五烷)——在注射到小鼠内之后，导致系统性红斑狼疮，其具有特征性器官累及(例如肾炎，轻度糜烂性关节炎)、典型的自身抗体产生如抗双链DNA抗体(Leiss等人，Lupus 2013)和依赖于1型干扰素(例如IFN-a)和TLR信号，如人们所述(Satoh等人，Proc Natl Acad Sci USA，1995；Thibault等人，Arthritis Res Ther.2009；Thibault等人，J Clin Invest.2008；Wu等人，ActaPharmacol Sin.2015；Hagberg and Scand J Immunol，2015)。因此，在第0天，分别将500μl姥鲛烷(Sigma，目录号1921-70-6)腹膜内给药于雌性Balb/c小鼠(20-22g，Charles River Laboratories，USA)。在每种情况下，组大小为n＝10只小鼠。健康对照组和疾病对照组也在实验中进行测试。两种对照组仅用测试物质的溶媒(乙醇：花生油10：90体积/体积)口服治疗。预先用各种剂量的测试物质进行治疗，即从第0天开始，通过在注射姥鲛烷约1h之后口服给药而进行。另外，在第0天，测定动物关于以下方面的基线：尿液中蛋白质状态(使用考马斯亮蓝G 250测量的蛋白尿，以BSA[牛血清白蛋白]作为参考)、自身-抗体浓度(例如抗-dsDNA)和血清中肌酸酐值和爪体积(使用体积计)。在实验过程中，然后监测这些参数：姥鲛烷注射后每周的爪体积、在第2、4和6周尿液中的蛋白质状态和血清中的自身抗体和肌酸酐。在由姥鲛烷引发SLE后6周，终止实验并将肾脏固定在用于组织病理学评估的10％的中性缓冲的福尔马林中，随后通过用苏木精和曙红(H&E)染色对5-μm-石蜡切片进行病理学评估。在本文中，使用评分系统来评估和分类组织学发现(0＝健康，1＝肾脏组织最小变化，2＝轻度变化，3＝中度变化，4＝肾脏组织明显变化)。通过用实施例化合物12治疗，作为姥鲛烷-诱导的SLE中的关键特征的狼疮性肾炎能够被抑制。实施例化合物12稍微优于免疫抑制剂环磷酰胺(从第0天开始，每周一次，口服50mg/kg)，其作为临床参考物质包括在实验中。这通过肾病理学的评估在图11中说明。

体内PLP_139-151-诱导的复发-缓解小鼠EAE模型

为了测定通式(I)的化合物的抗炎潜力，将这些化合物在MS的复发-缓解动物模型中评估其用于治疗急性MS发作或用于预防新的发作的体内效果。复发-缓解PLP_139-151(蛋白脂质-蛋白)-诱导的EAE模型是测试用于在MS患者中潜在用途的药理学物质的标准动物模型。为了引发复发-缓解EAE，在第0天，在小鼠背部的四个不同侧面(2个在上颈部区域，2个在距尾基约2cm头盖骨的下部区域)，将含有PLP_139-151/CFA(Hooke Kit^TM PLP_139-151/CFAEmulsion；目录号EK-0120；Hooke Laboratories，Lawrence MA，USA)的乳液皮下注射(0.05ml/注射部位)到雌性SJL小鼠(8-10周龄，Jackson Laboratories Bar Harbor，USA)中。健康对照组(n＝5只小鼠)——其也进行测试——未进行免疫。除了该对照组，在实验中还测试了EAE疾病对照。在研究期间，将两种对照组口服测试物质的溶媒(乙醇∶花生油10∶90体积/体积)进行治疗。在第一次发作期间或发作之后，治疗性地进行用不同剂量的测试物质或其溶媒的每日口服治疗。在本文中，进行EAE发作后的治疗性治疗(第一次发作；治疗开始第12天)以测定治疗急性MS发作的可能性，而在第一次发作后用实施例化合物的治疗性治疗(治疗开始第9天)是旨在找出测试物质可以多大程度地预防新的发作。在该PLP_139-151-诱导的EAE模型中，第一次EAE症状出现在约第11天。从第9天开始，每天盲法评估临床EAE症状，使用评分系统进行评估(评分；从0＝健康至5＝垂死的评分)，该评分系统代表了疾病的严重程度(如同在MOG-EAE模型中相同的评分指数)。在研究期间还监测了体量和死亡率。

图1：实施例化合物12对人单核细胞产生的DC中IL-23的抑制。数据显示为带有标准偏差的平均值。

图2：通过用抗-CD3/抗-CD28/rhIL-23/rhIL-6/rhl-1β/rhIL-2(TH17细胞分化混合剂)刺激-人CD4+T后产生的IL-17而测量的对6天的Th17细胞分化的抑制，，以示例性方式示出实施例化合物12对于两种供体(A、B)的作用。数据显示为带有标准偏差的平均值。

图3：实施例化合物12对(A)咪喹莫特(R837，TLR7/8配体)-或(B)CpG-A-(TLR9配体)刺激的人浆细胞样DC中INF-α的抑制。数据显示为带有标准偏差的平均值。

图4：(A)用实施例化合物12治疗LPS诱导的炎症导致小鼠血浆中分泌的TNF-α和IL-6的量减少。(B)在此情况下，通过实施例化合物11和12对TNFα的抑制与临床相关的TNF-拮抗剂[阿达木单抗依那西普]相当。数据显示为带有标准偏差的平均值。单因素ANOVA方差分析，随后通过Dunnett’s检验进行与LPS对照组的多重比较分析；＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001。

图5：实施例化合物11在关节炎动物模型(佐剂诱导的大鼠模型)中的抗炎功效。使用疾病活动性评分测量在(A)与临床相关的对比物质依那西普相比的预防性治疗(从第0天开始)之后以及(B)治疗性治疗(＞9天)之后关节炎性关节炎症的显著性和剂量依赖性抑制。(C)通过苏木精/曙红染色预防性治疗后的关节的组织病理学分析证实了这一点，如同(D)通过MRI(磁共振成像)的成像过程所证实的一样。(E)另外，在实验过程期间通过小鼠的握力强度测量，观察到了对痛觉过敏的显著抑制。通过用实施例化合物11治疗，滑液(F)和关节炎后爪(G)的离体分析显示了对细胞因子浓度的显著抑制。数据对应平均值+标准偏差。单因素ANOVA方差分析，随后通过Dunnett’s检验进行与CFA对照组的多重比较分析；＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001。缩写：

图(A)和图(B)：“评分”是指疾病活动性评分；“天数”是指关节炎诱导后的天数；Etanerc.-依那西普；ctrl.-健康对照；CFA ctrl.-关节炎对照。

图C：“评分”是指“组织病理学评分”。

图D：

I＝ctrl.(健康对照)

II＝CFA ctrl.(关节炎对照)

III＝CFA+200mg/kg#11(用IRAK4抑制剂实施例11治疗)

图E：“％”是指抓握强度；“天数”是指诱导关节炎后的天数。

图6：实施例化合物12在关节炎动物模型(胶原抗体诱导的小鼠模型，CAIA)中的抗炎功效。使用疾病活动性评分测量在预防性治疗(0天)(A)和治疗性治疗(＞9天)(B)之后关节炎性关节炎症的显著性和剂量依赖性抑制。通过苏木精/曙红染色的关节炎关节的组织病理学分析证实了治疗性治疗后的抗炎活性。通过实施例化合物12抑制关节炎。数据对应于平均值+标准偏差。通过单因素ANOVA方差分析，随后多重比较分析(Dunnett’s检验)来计算胶原抗体(AK)对照组和治疗组之间的统计显著性(＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001)。缩写：图(A)和图(B)：“评分”是指疾病活动性评分；“天数”是指关节炎诱导后的天数；ctrl.-健康对照；CAIA-关节炎对照。图C：“评分”是指“组织病理学评分”。

图7：与特立氟胺和泼尼松龙相比，实施例化合物12在多发性硬化的动物模型(MOG_33-35-诱导的EAE小鼠模型)中的抗炎活性。在用化合物12治疗后，通过神经轴索变性(变性，神经轴索性，白质)和淋巴细胞浸润白质(浸润，淋巴组织细胞，白质)或浸润灰质(皮质，浸润，淋巴组织细胞，灰质)来评估该疾病的临床严重程度(EAE疾病活动性评分)、该疾病的发生率(B)和脊髓的组织病理学损伤(C)的显著性和剂量依赖性抑制。数据对应于平均值+标准偏差。通过单因素ANOVA方差分析，随后通过多重比较分析(Dunnett’s检验)来计算MOG-EAE对照组和治疗组之间的统计显著性(＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001)。缩写：图A“评分”是指EAE疾病活动性评分；“天数”是指EAE诱导后的天数；ctrl.-健康对照；MOG-EAE-EAE对照；图B“％”是指EAE疾病患病率；“天数”是指EAE诱导后的天数。图C“评分”是指关于白质中神经轴索变性的组织病理学评分。图D“评分”是指关于白质中淋巴组织细胞浸润的组织病理学评分。图E“评分”是指关于灰质中淋巴组织细胞浸润的组织病理学评分。

图8：实施例化合物12在银屑病动物模型(IMQ-诱导的小鼠模型)中的抗炎作用。包括背部皮肤红斑、剥落和增厚的临床症状的临床评分(A)以及耳朵的组织病理学评估(B)或背部皮肤的组织病理学评估(C)的显著性抑制，其评估了病理参数角化不全、炎症和胞吐作用。数据对应于平均值+标准偏差。通过单因素ANOVA方差分析，随后通过多重比较分析(Dunnett’s检验)来计算IMQ对照组和治疗组之间的统计显著性(＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001)。缩写：Etanerc.-依那西普；Betameth-倍他米松；po-口服；ip-腹膜内注射；bid-每天两次；q2d-每两天一次。

图9：实施例化合物12在TH1-介导的皮肤炎症的动物模型(DNFB-诱导的小鼠皮肤炎症模型)中的抗炎效果。通过耳朵重量(以mg计)证明了皮肤炎症的显著性和剂量依赖性抑制，其与炎症期间的水肿形成相关。通过单因素ANOVA方差分析，随后通过多重比较分析(Dunnett’s检验)来计算DNFB-对照组和治疗组之间的统计显著性(＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001)。缩写：y轴上的“mg”是指耳朵重量；ctrl-健康对照；irritant-刺激对照。

图10：实施例化合物12在TH2-介导的皮肤炎症的动物模型(TMA-诱导的小鼠皮肤炎症模型)中的抗炎效果。皮肤炎症的抑制显示为与基线相比耳朵厚度的增加(delta[Δ]耳朵厚度，以mm计)。增加的耳朵厚度被视作炎症的量度并表示炎症反应期间耳朵组织中的水肿形成。缩写：y轴上的“mm”是指耳朵重量的变化(Δ)；ctrl-健康对照。

图11：实施例化合物12在系统性红斑狼疮的动物模型(姥鲛烷-诱导的小鼠模型)中的抗炎效果。肾脏损伤的显著抑制通过肾脏的组织病理学评估显示。数据对应于平均值+标准偏差。通过单因素方差分析ANOVA，随后通过多重比较分析(Dunnett’s检验)来计算SLE对照组和治疗组之间的统计显著性(＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001)。缩写：“评分”是指肾脏组织病理学评分；IRAK4i是指IRAK4抑制剂——本文中的实施例化合物11；CPA-环磷酰胺；ctrl.-健康对照；2x-每日两次。

图12：实施例化合物12在IBD(炎性肠病)动物模型(DSS-诱导的小鼠结肠炎)中的抗炎效果。包括溃疡在内的肠道炎症的显著性抑制在第16天通过内窥镜检查测定。内窥镜检查评估通过关于结肠炎症的严重性和程度的评分系统评估。数据对应于平均值+标准偏差。通过单因素方差分析ANOVA，随后多重比较分析(Dunnett’s检验)来计算DSS对照组和治疗组之间的统计显著性(＊p＜0.05；＊＊p＜0.01；＊＊＊p＜0.001；＊＊＊＊p＜0.0001)。缩写：“评分”是指内窥镜检查评分；αIL-12p40-抗-小鼠IL-12p40单克隆抗体；IRAK4i是指IRAK4抑制剂——本文中的实施例化合物11；BID-每日两次；Q3D-每3天。

Claims (18)

1.通式(I)的化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病的方法中，

其中：

R¹为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代，或者被以下基团单取代或相同或不同地多取代：

卤素、羟基、未取代的或者单-或多-卤素-取代的C₃-C₆-环烷基，或R⁶、R⁷SO₂、R⁷SO或R⁸O基团，

或选自以下的基团：

其中＊代表基团与分子其余部分的键合位点；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或C₁-C₆-烷基；

R⁴为卤素、氰基、未取代的C₁-C₆-烷基或者单取代或相同或不同地多取代的C₁-C₆-烷基、或未取代的C₃-C₆-环烷基或者单取代或相同或不同地多取代的C₃-C₆-环烷基，取代基选自卤素和羟基；

R⁵为氢、卤素或未取代的或单-或多-卤素-取代的C₁-C₆-烷基；

R⁶为具有4至6个环原子的未取代或者单-或二-甲基-取代的单环饱和杂环，其含有选自O、S、SO和SO₂的杂原子或杂基；

R⁷为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代，或者被卤素、羟基或C₃-C₆-环烷基单取代或相同或不同地多取代，或R⁷为C₃-C₆-环烷基；

R⁸为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代，或者被卤素单取代或相同或不同地多取代。

2.根据权利要求1的化合物，其中

R¹为C₁-C₆-烷基，其中C₁-C₆-烷基基团未被取代，或者被氟、羟基或R⁶、R⁷SO₂、R⁷SO或R⁸O基团单取代或相同或不同地多取代；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或C₁-C₃-烷基；

R⁴为卤素、氰基或C₁-C₃-烷基，其中C₁-C₃-烷基基团未取代或者被卤素或羟基单取代或相同或不同地多取代；

R⁵为氢、氟、氯或C₁-C₃-烷基；

R⁶为氧杂环丁烷基或四氢呋喃基；

R⁷为C₁-C₄-烷基，其中C₁-C₄-烷基基团未被取代，或者被羟基或环丙基单取代，或被三个氟原子取代；

R⁸为未取代的C₁-C₄-烷基基团或三氟取代的C₁-C₄-烷基基团。

3.根据权利要求1或2的化合物，其中R⁴为二氟甲基、三氟甲基或甲基。

4.根据权利要求1、2或3的化合物，其中R⁵为氢或氟。

5.根据权利要求1、2、3或4的化合物，其中R²和R³均为氢或甲基。

6.根据权利要求2的化合物，其中

R¹为C₂-C₆-烷基，其中C₂-C₆-烷基基团是未取代的，或C₂-C₆-烷基基团是单-、二-或三-氟取代的，或C₂-C₆-烷基基团被羟基、R⁶、R⁷SO₂或R⁸O单取代，或R¹为氧杂环丁烷基取代的C₁-C₃-烷基基团；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或甲基；

R⁴为未取代的C₁-C₃-烷基基团或者单-或多-卤素取代的C₁-C₃-烷基基团，或被一个羟基取代的C₁-C₃-烷基基团，或被一个羟基和三个氟原子取代的C₁-C₃-烷基基团；

R⁵为氢、氟或C₁-C₃-烷基；

R⁷为C₁-C₃-烷基；

R⁸为C₁-C₄-烷基，其中C₁-C₄-烷基基团是未取代的或单-、二-或三-氟取代的。

7.根据权利要求6的化合物，其中

R¹为被羟基或C₁-C₃-烷氧基或三氟甲氧基或2，2，2-三氟乙氧基或三氟甲基取代的C₂-C₅-烷基基团，或为甲基-SO₂-取代的C₂-C₄-烷基基团，或为氧杂环丁烷-3-基-取代的C₁-C₂-烷基基团；

R²和R³总是具有相同的定义，且均为氢或甲基；

R⁴为甲基、乙基、三氟-C₁-C₃-烷基、二氟-C₁-C₃-烷基、羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基丙-2-基和2，2，2-三氟-1-羟基乙基；

R⁵为氢、氟或甲基。

8.根据权利要求7的化合物，其中

R¹为4，4，4-三氟丁基、3-羟基-3-甲基丁基、3-羟基丁基、3-甲氧基丙基、3-羟基丙基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-三氟甲氧基丙基、2-甲氧基乙基、2-羟基乙基、2-(甲基磺酰基)乙基或3-(甲基磺酰基)丙基；

R²和R³均为甲基或氢；

R⁴为二氟甲基、三氟甲基或甲基；

R⁵为氢或氟。

9.根据权利要求8的化合物，其中

R¹为3-羟基-3-甲基丁基、3-羟基丁基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-(甲基磺酰基)丙基或2-(甲基磺酰基)乙基；

R²和R³均为甲基；

R⁴为二氟甲基或三氟甲基；且

R⁵为氢。

10.根据权利要求8的化合物，其中

R¹为3-羟基-3-甲基丁基、3-羟基丁基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-(甲基磺酰基)丙基或2-(甲基磺酰基)乙基；

R²和R³均为甲基；

R⁴为甲基；

R⁵为氟，其中R⁵在R⁴的邻位。

11.根据权利要求1-10的化合物，其为以下化合物：

1)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

2)N-[6-(羟基甲基)-2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

3)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-甲氧基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

4)N-[6-(羟基甲基)-2-(3-甲氧基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

5)N-[2-(2-羟基乙基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

6)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-羟基丙基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

7)N-[2-(2-羟基乙基)-6-(羟基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

8)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

9)N-[6-(羟基甲基)-2-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

10)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(甲基磺酰基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

11)N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

12)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[2-(甲基磺酰基)乙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

13)6-(二氟甲基)-N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

14)6-(二氟甲基)-N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[2-(甲基磺酰基)乙基]-2H-吲唑-5-基}吡啶-2-甲酰胺

15)6-(二氟甲基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(3-羟基丙基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

16)N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-5-基]-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

17)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(三氟甲氧基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

18)N-{6-(2-羟基丙-2-基)-2-[3-(2，2，2-三氟乙氧基)丙基]-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺

19)5-氟-N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-甲基吡啶-2-甲酰胺

20)N-[2-(3-羟基-3-甲基丁基)-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基]-6-甲基吡啶-2-甲酰胺

21)6-(2-羟基丙-2-基)-N-[6-(2-羟基丙-2-基)-2-(4，4，4-三氟丁基)-2H-吲唑-5-基]吡啶-2-甲酰胺

22)N-{2-[2-(1-羟基环丙基)乙基]-6-(2-羟基丙-2-基)-2H-吲唑-5-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺。

12.权利要求1至11中任一项所定义的通式(I)的化合物，其用于治疗和/或预防以下疾病的方法中：多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(尤其银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(尤其克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹。

13.权利要求1至11中任一项所定义的通式(I)的化合物，其用于治疗和/或预防疼痛的方法中，所述疼痛包括急性、慢性、炎性和神经性疼痛，优选痛觉过敏、异常性疼痛、由关节炎(例如骨关节炎、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)引起的疼痛、手术后疼痛、由脊髓损伤引起的疼痛、炎症引发的疼痛、腰痛、神经性疼痛和慢性疼痛。

14.权利要求1至11中任一项所定义的通式(I)的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病的方法中。

15.根据权利要求14的用途，用于治疗和/或预防多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病、关节炎(尤其银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)、慢性炎性肠病(尤其克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、特应性皮炎和过敏性湿疹。

16.根据权利要求14的用途，用于治疗和/或预防疼痛，所述疼痛包括急性、慢性、炎性和神经性疼痛，优选痛觉过敏、异常性疼痛、由关节炎(例如骨关节炎、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、强直性脊柱炎、反应性关节炎、全身型幼年特发性关节炎)引起的疼痛、手术后疼痛、由脊髓损伤引起的疼痛、炎症引发的疼痛、腰痛、神经性疼痛和慢性疼痛。

17.通式(III)的化合物，及其非对映异构体、对映异构体、代谢物、盐、溶剂合物或盐的溶剂合物，其用于治疗和/或预防由IRAK4介导的自身免疫疾病，

其中，

R¹为4，4，4-三氟丁基、3-羟基-3-甲基丁基、3-甲氧基丙基、3-羟基丙基、3-羟基丁基、3-羟基-2-甲基丙基、3-羟基-2，2-二甲基丙基、3-三氟甲氧基丙基、2-甲氧基乙基、2-羟基乙基、2-(甲基磺酰基)乙基、3-(甲基磺酰基)丙基或2-(1-羟基环丙基)乙基；

R⁴为二氟甲基、三氟甲基或甲基；且

R⁵为氢或氟。

18.根据权利要求17的通式(III)的化合物，其为以下化合物：

5-{[(5-氟-6-甲基吡啶-2-基)羰基]氨基}-2-(3-羟基-3-甲基丁基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯，以及

2-(3-羟基-3-甲基丁基)-5-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-2H-吲唑-6-甲酸甲酯。