CN109111496A - 沙棘中三萜酸的提取纯化方法和三萜酸及三萜皂苷和应用 - Google Patents
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- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
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- C07H15/20—Carbocyclic rings
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- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Abstract
本发明提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法和三萜酸及三萜皂苷和应用,涉及提取纯化技术领域。沙棘中三萜酸的提取纯化方法包括如下步骤:(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物,得到提取液;(b)先用碱溶液处理提取液,再用酸溶液处理提取液,得到熊果酸和齐墩果酸固体,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中,得到混合溶液;(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,吸附结束后用洗脱剂洗脱,浓缩,得到粗品;(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离。本发明对熊果酸和齐墩果酸的分离效果好,熊果酸的纯度高达97.6%以上,齐墩果酸的纯度高达98.2%以上。
Description
技术领域
本发明涉及提取纯化技术领域,尤其是涉及一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法和三萜酸及三萜皂苷和应用。
背景技术
沙棘作为一种地方特色作物品种,其防沙固沙,为当地社会经济发展带来良好的经济学和社会学价值。沙棘中的三萜酸多以游离状态或成苷或成酯的形式存在于植物中,几乎不溶于水或难溶于水。沙棘中的三萜酸主要为熊果酸和齐墩果酸,具有保肝护肝、降低血糖和抗皮肤氧化等功效。但是目前提取纯化沙棘中的熊果酸和齐墩果酸分离效果不好,纯度低。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,以缓解现有技术中存在的提取纯化沙棘中熊果酸和齐墩果酸的分离效果不好,纯度低等技术问题。
本发明提供的沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物,得到提取液;
(b)先用碱溶液处理提取液,再用酸溶液处理提取液,得到熊果酸和齐墩果酸固体,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中,得到混合溶液;
(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,吸附结束后用洗脱剂洗脱,浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离,得到纯化的熊果酸和齐墩果酸。
进一步的,所述步骤(c)中,所述大孔树脂包括D101大孔树脂、HPD500大孔树脂、HPD600大孔树脂、X-5大孔树脂、NKA-9 大孔树脂或S-8大孔树脂中的至少一种;
优选的,所述大孔树脂为D101大孔树脂和X-5大孔树脂,所述 D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为(1-5):(10-15),进一步优选为(1-3):(13-15)。
进一步的,所述步骤(c)中,所述混合溶液流经大孔树脂的流速为3-5BV/h,优选为4-5BV/h;
和/或,所述洗脱剂包括乙醇或甲醇中的至少一种,优选为乙醇,进一步优选为70-90%乙醇;
和/或,所述洗脱剂的pH为6-8,优选为7。
进一步的,所述步骤(d)中,采用HPLC分离,所述HPLC分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为(75-85):(15-25),用三乙胺调节pH至6-8,流速:15-25mL/min,紫外检测波长:205-215nm,柱温:12-18℃;
优选的,所述流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为 (75-80):(20-25),用三乙胺调节pH至7-8,流速:15-20mL/min,紫外检测波长:210-215nm,柱温:15-18℃。
进一步的,所述步骤(a)中,采用回流提取或超声波提取,优选为超声波提取;
优选的,所述超声波提取时间为20-40min,进一步优选为 30-40min;
优选的,所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮或乙醚中的至少一种,进一步优选为乙醇,更进一步优选为70-90%乙醇。
进一步的,所述步骤(b)中,先用1-2mol/L碱溶液调节pH至 10-12,再用1-2mol/L酸溶液调节pH至2-4;
优选的,所述碱溶液包括氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液中的至少一种;
优选的,所述酸溶液包括硫酸、盐酸或磷酸中的至少一种。
进一步的,所述步骤(a)中,所述沙棘果皮经干燥,粉碎得到;
优选的,所述沙棘果皮的干燥温度为60-85℃,干燥时间为 20-40min;进一步优选为所述干燥温度为75-85℃,和/或,所述干燥时间为30-40min;
优选的,所述沙棘果皮粉碎后的粒径为80-100目,优选为90-100 目。
本发明的第二目的在于提供一种沙棘中三萜酸,三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸,熊果酸和齐墩果酸分离效果好,纯度高。
本发明提供的沙棘中三萜酸由上述提取纯化方法得到,所述三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸。
本发明的第三目的在于提供一种三萜皂苷,不仅能够防止三萜酸的活性部位被氧化,还具有良好的溶解性,生物利用度高,在护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等方面具有优异的效果。
本发明提供的三萜皂苷,主要由如下原料制备而成:由上述提取纯化方法得到的三萜酸或上述三萜酸和多羟基糖类,所述多羟基糖类包括葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸中的至少一种;
优选的,所述三萜皂苷包括单糖三萜皂苷、二糖三萜皂苷或三糖三萜皂苷中的至少一种。
本发明的第四目的在于提供一种三萜酸或三萜皂苷在制备药物或保健品中的应用。
本发明将三萜酸或三萜皂苷应用于制备药物或保健品中,可用于护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等,长期服用能够保持体型,延缓衰老,增强机体免疫力。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明提供的沙棘中三萜酸的提取纯化方法采用有机溶剂对沙棘果皮中熊果酸、齐墩果酸及其衍生物进行充分提取,采用碱溶液和酸溶液对提取液进行处理,得到熊果酸和齐墩果酸的混合物,采用大孔树脂富集纯化熊果酸和齐墩果酸,得到纯度较高的熊果酸和齐墩果酸,最后采用HPLC或HSCCC对熊果酸和齐墩果酸进行分离。采用本发明的方法对熊果酸和齐墩果酸的分离效果好,熊果酸的纯度高达 97.6%以上,齐墩果酸的纯度高达98.2%以上。
本发明提供的沙棘中三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸,熊果酸和齐墩果酸分离效果好,纯度高。
本发明提供的三萜皂苷,不仅能够防止三萜酸的活性部位被氧化,还具有良好的溶解性,生物利用度高,在护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等方面具有优异的效果。
本发明将三萜酸或三萜皂苷应用于制备药物或保健品中,可用于护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等,长期服用能够保持体型,延缓衰老,增强机体免疫力。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明的熊果酸的结构式;
图2为本发明的齐墩果酸的结构式;
图3为本发明的熊果酸三糖皂苷的结构式;
图4为本发明的齐墩果酸三糖皂苷的结构式。
具体实施方式
下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
根据本发明的第一个方面,本发明提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物,得到提取液;
(b)先用碱溶液处理提取液,再用酸溶液处理提取液,得到熊果酸和齐墩果酸固体,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中,得到混合溶液;
(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,吸附结束后用洗脱剂洗脱,浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离,得到纯化的熊果酸和齐墩果酸。
在步骤(a)中,由于沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物几乎不溶于水,而熊果酸、齐墩果酸及其衍生物在有机溶剂中的溶解性良好,所以采用有机溶剂对沙棘果皮中熊果酸、齐墩果酸及其衍生物进行充分提取。
在步骤(b)中,由于熊果酸和齐墩果酸的衍生物是以苷或者酯的形式存在,所以为了得到熊果酸和齐墩果酸,先用碱溶液处理提取液,得到熊果酸盐和齐墩果酸盐,并且将其它杂质溶解掉;再用酸溶液处理提取液,得到纯度较高的熊果酸和齐墩果酸固体,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中,得到熊果酸和齐墩果酸的混合溶液。
在步骤(c)中,大孔树脂为具有大孔网状结构的高分子吸附树脂,具有化学性质稳定、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快和再生方便等优点。采用大孔树脂富集纯化熊果酸和齐墩果酸,能够降低熊果酸和齐墩果酸中杂质的含量,有利于后续分离过程中提高熊果酸和齐墩果酸的纯度。
在步骤(d)中,采用(高效液相色谱法)或HSCCC(高速逆流色谱法)对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离,具有操作简便、耗时短、费用低、安全和环保等优点。
本发明提供的沙棘中三萜酸的提取纯化方法采用有机溶剂对沙棘果皮中熊果酸、齐墩果酸及其衍生物进行充分提取,采用碱溶液和酸溶液对提取液进行处理,得到熊果酸和齐墩果酸的混合物,采用大孔树脂富集纯化熊果酸和齐墩果酸,得到纯度较高的熊果酸和齐墩果酸,最后采用HPLC或HSCCC对熊果酸和齐墩果酸进行分离。采用本发明的方法对熊果酸和齐墩果酸的分离效果好,熊果酸的纯度高达 97.6%以上,齐墩果酸的纯度高达98.2%以上。
在一个优选的实施方式中,所述步骤(c)中,所述大孔树脂包括D101大孔树脂、HPD500大孔树脂、HPD600大孔树脂、X-5大孔树脂、NKA-9大孔树脂或S-8大孔树脂中的至少一种。
大孔树脂的吸附量与大孔树脂的空间结构(孔径、比表面积和孔容等)及被吸附物质的性质、分子结构和分子大小等有重要关系。大孔树脂对熊果酸和齐墩果酸的吸附作用主要是通过物理吸附来实现的。熊果酸和齐墩果酸为弱极性物质,有一定的疏水性,生成氢键的能力较弱,容易被非极性树脂吸附,而不易被中极性或极性树脂吸附。大孔树脂对物质吸附是通过大孔树脂的孔径扩散到大孔树脂孔内表面而被吸附的,因此其像“分子筛”一样对被吸附物质有一定的选择性。沙棘中的熊果酸和齐墩果酸分子量均为456.71,因此选择孔径较大的树脂。大孔树脂的比表面积越大,其活性吸附中心越多,越有利于对熊果酸和齐墩果酸的吸附。
大孔树脂在使用前需要进行预处理,包括如下步骤:
将大孔树脂用无水乙醇浸泡24h,使大孔树脂充分溶胀,弃去无水乙醇,用蒸馏水冲洗至大孔树脂无醇味,然后分别用5%盐酸溶液 (w/v)浸泡3h,蒸馏水洗至中性,再用5%氢氧化钠溶液(w/v)浸泡3h,蒸馏水洗至中性,抽滤,备用。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述大孔树脂为D101大孔树脂和X-5大孔树脂,所述D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为(1-5):(10-15),进一步优选为(2-5):(12-15)。
采用特定配比的D101大孔树脂和X-5大孔树脂,对熊果酸和齐墩果酸选择性好和吸附速度快,能够降低熊果酸和齐墩果酸中杂质的含量,有利于后续分离过程中提高熊果酸和齐墩果酸的纯度。
D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比例如可以为,但不限于 1:10、1:11、1:12、1:13、1:14、1:15、2:10、2:11、2: 12、2:13、2:14、2:15、3:10、3:11、3:12、3:13、3:14、 3:15、4:10、4:11、4:12、4:13、4:14、4:15、5:10、5: 11、5:12、5:13、5:14或5:15。
在一个优选的实施方式中,所述步骤(c)中,所述混合溶液流经大孔树脂的流速为3-5BV/h,优选为4-5BV/h。
大孔树脂对熊果酸和齐墩果酸的吸附与混合溶液的流速密切相关,当流速过快,液体与大孔树脂的网格接触不充分,对熊果酸和齐墩果酸的吸附量小;当流速过慢,大孔树脂微孔表面的薄膜不易破坏,导致大孔树脂的利用率降低,对熊果酸和齐墩果酸的吸附量小。
其中,混合溶液流经大孔树脂的流速例如可以为,但不限于 3BV/h、4BV/h或5BV/h。
在一个优选的实施方式中,所述洗脱剂包括乙醇或甲醇中的至少一种,优选为乙醇,进一步优选为70-90%乙醇。
为了实现大孔树脂上吸附的熊果酸和齐墩果酸的洗脱,采用乙醇或甲醇作为洗脱剂,洗脱效果较好,考虑到甲醇有一定的毒性,采用乙醇作为优选提取剂。
洗脱剂具有使大孔树脂溶胀,减弱熊果酸和齐墩果酸与大孔树脂之间的吸附力的作用,并可溶解熊果酸和齐墩果酸。
其中,洗脱剂例如可以为,但不限于70%乙醇、71%乙醇、72%乙醇、73%乙醇、74%乙醇、75%乙醇、76%乙醇、77%乙醇、78%乙醇、79%乙醇、80%乙醇、81%乙醇、82%乙醇、83%乙醇、84%乙醇、85%乙醇、86%乙醇、87%乙醇、88%乙醇、89%乙醇或90%乙醇。
在一个优选的实施方式中,所述洗脱剂的pH为6-8,优选为7。
在酸性条件下,尤其强酸性条件下,因为同离子效应,熊果酸和齐墩果酸在溶液中溶解度下降而析出,而不易被大孔树脂吸附;在碱性条件下,熊果酸和齐墩果酸以离子的形式存在,与大孔树脂的结合力小,而不易被大孔树脂吸附。
其中,洗脱剂的pH例如可以为,但不限于6、6.1、6.2、6.3、 6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、 7.8、7.9、或8。
在一个优选的实施方式中,所述步骤(d)中采用HPLC分离,所述HPLC分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为(75-85):(15-25),用三乙胺调节pH至6-8,流速:15-25mL/min,紫外检测波长:205-215nm,柱温:12-18℃。
采用等度洗脱,在一分析周期内流动相组成保持恒定,稳定性高,色谱重现性好,并且方法操作简单,也易于色谱柱再生,在系统运行时还可以实现流动相的循环利用,节约成本。
流动相流经色谱柱,不仅与样品组分间有亲合作用力,并参与与固定相对样品组分的竞争,选择合适的流动相能提高色谱柱的选择性和改善分离度。本发明采用乙腈-0.6%磷酸水溶液,一方面:粘度低,避免在高粘度时流动相流动缓慢,柱压升高,不利于系统的稳定运行,也不利于色谱柱的保护;另一方面:乙腈具有较低的吸光度,在紫外检测器检测时产生的噪声小,基线平稳,有助于增加对熊果酸和齐墩果酸分析的灵敏度。0.6%磷酸水溶液不仅能与色谱柱的硅胶对产品产生竞争吸附,还能调节流动相的pH值,使产品既能溶解在流动相中,又能与流动相具有很好的吸附作用。
流动相的流速会影响熊果酸和齐墩果酸的分离度。将流动相控制在较低的流速范围内可以使熊果酸和齐墩果酸的保留时间延长,有利于提高分离度,但是由于保留时间延长,所有纵向扩散会明显增加,表现为峰型矮胖,并且流速慢会使峰变宽,使柱效明显下降,大大延长分析时间,提高了分析方法实施的时间成本,本发明将流速控制在一定范围内才能满足熊果酸和齐墩果酸的分离。
检测波长的选择影响对熊果酸和齐墩果酸的分离的灵敏度,降低干扰。熊果酸和齐墩果酸在特定波长下具有良好的紫外吸收,可以有效提高对熊果酸和齐墩果酸的分离效果。
柱温是影响HPLC分离效果的重要因素。柱温影响溶剂的溶解能力、色谱柱的性能和流动相的粘度等。本发明中的柱温在一个相对较宽的温度范围内,既能够保证熊果酸和齐墩果酸的分离效果,还能有效保护色谱柱,降低分离成本。
其中,乙腈与0.6%磷酸水溶液的体积比例如可以为,但不限于 75:25、78:22、80:20、82:18或85:15;流速例如可以为,但不限于15mL/min、16mL/min、17mL/min、18mL/min、19mL/min、 20mL/min、21mL/min、22mL/min、23mL/min、24mL/min或25mL/min;紫外检测波长例如可以为,但不限于205nm、206nm、207nm、208nm、 209nm、210nm、211nm、212nm、213nm、214nm或215nm;柱温例如可以为,但不限于12℃、13℃、14℃、15℃、16℃、17℃或18℃。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为(75-80):(20-25),用三乙胺调节pH至 7-8,流速:15-20mL/min,紫外检测波长:210-215nm,柱温:15-18℃。
在一个优选的实施方式中,所述步骤(a)中,采用回流提取或超声波提取,优选为超声波提取。
采用超声波提取既能保证沙棘中的熊果酸和齐墩果酸充分溶解在有机溶剂中,又能避免熊果酸和齐墩果酸被氧化造成产品损失。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述超声波提取时间为 20-40min,进一步优选为20-30min。
其中,超声波提取时间例如可以为,但不限于20min、21min、 22min、23min、24min、25min、26min、27min、28min、29min、30min、 31min、32min、33min、34min、35min、36min、37min、38min、39min 或40min。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮或乙醚中的至少一种,进一步优选为乙醇,更进一步优选为70-90%乙醇。
其中,有机溶剂例如可以为,但不限于70%乙醇、71%乙醇、72%乙醇、73%乙醇、74%乙醇、75%乙醇、76%乙醇、77%乙醇、78%乙醇、79%乙醇、80%乙醇、81%乙醇、82%乙醇、83%乙醇、84%乙醇、85%乙醇、86%乙醇、87%乙醇、88%乙醇、89%乙醇或90%乙醇。
在一个优选的实施方式中,所述步骤(b)中,采用1-2mol/L碱溶液调节pH至10-12,然后用1-2mol/L酸溶液调节pH至1-2。
由于熊果酸和齐墩果酸的衍生物是以苷或者酯的形式存在,所以为了得到熊果酸和齐墩果酸,先用碱溶液处理提取液,得到熊果酸盐和齐墩果酸盐,并且将其它杂质溶解;再用酸溶液处理提取液,得到熊果酸和齐墩果酸的混合溶液。
其中,碱液调节pH例如可以为,但不限于10、11或12;酸调节pH例如可以为,但不限于2、3或4。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述碱溶液包括氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液中的至少一种。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述酸溶液包括硫酸、盐酸或磷酸中的至少一种。
在一个优选的实施方式中,所述步骤(a)中,所述沙棘果皮经干燥,粉碎得到。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述沙棘果皮的干燥温度为60-85℃,干燥时间为20-40min;进一步优选为所述干燥温度为 75-85℃,和/或,所述干燥时间为30-40min。
其中,干燥温度例如可以为,但不限于60℃、61℃、62℃、63℃、 64℃、65℃、66℃、67℃、68℃、69℃、70℃、71℃、72℃、73℃、 74℃、75℃、76℃、77℃、78℃、79℃、80℃、81℃、82℃、83℃、 84℃或85℃;干燥时间例如可以为,但不限于20min、21min、22min、 23min、24min、25min、26min、27min、28min、29min、30min、31min、 32min、33min、34min、35min、36min、37min、38min、39min或40min。
在本实施方式的一个优选实施方式中,所述沙棘果皮粉碎后的粒径为80-100目,优选为90-100目。
其中,粉碎后的粒径例如可以为,但不限于80目、81目、82 目、83目、84目、85目、86目、87目、88目、89目、90目、91 目、92目、93目、94目、95目、96目、97目、98目、99目或100 目。
需要说明的是,所述三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸;和/或,所述衍生物包括三萜皂苷或三萜酸酯。
根据本发明的第二个方面,本发明提供了一种沙棘中三萜酸,由上述提取纯化方法得到,所述三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸。
本发明提供的沙棘中三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸,熊果酸和齐墩果酸分离效果好,纯度高。
根据本发明的第三个方面,本发明提供了一种三萜皂苷,主要由如下原料制备而成:由上述提取纯化方法得到的三萜酸或上述三萜酸和多羟基糖类,所述多羟基糖类包括葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸中的至少一种;
本发明提供的三萜皂苷,不仅能够防止三萜酸的活性部位被氧化,还具有良好的溶解性,生物利用度高,在护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等方面具有优异的效果。
在一个优选的实施方式中,所述三萜皂苷包括单糖三萜皂苷、二糖三萜皂苷或三糖三萜皂苷中的至少一种。
根据本发明的第四个方面,本发明提供了一种三萜酸或三萜皂苷在制备药物或保健品中的应用。
本发明将三萜酸或三萜皂苷应用于制备药物或保健品中,可用于护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等,长期服用能够保持体型,延缓衰老,增强机体免疫力。
为了有助于更清楚的理解本发明,下面将结合实施例和对比例对本发明的技术方案进行进一步地说明。
实施例一
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)将沙棘果皮在75℃干燥30min,粉碎至粒径为90目,用 75%乙醇作为提取剂,沙棘果皮与75%乙醇质量比为1:10,常温下超声波提取30min,得到提取液;
(b)先用1.5mol/L氢氧化钠溶液处理提取液,调节pH至11,再用1.5mol/L盐酸溶液处理提取液,调节pH至3,得到熊果酸和齐墩果酸固体,用水冲洗熊果酸和齐墩果酸固体3次,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于75%无水乙醇中,得到混合溶液;
(c)将大孔树脂装柱,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为3:13,用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,混合溶液流经大孔树脂的流速为4BV/h,吸附结束后用80%乙醇洗脱得到洗脱液,减压浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC分离粗品中的熊果酸和齐墩果酸,分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为80:20,用三乙胺调节pH至7,流速:20mL/min,紫外检测波长:210nm,柱温:15℃,运行时间25min,依次收集齐墩果酸和熊果酸,其中齐墩果酸的出峰时间为16.6min,熊果酸的出峰时间为18.5min。熊果酸的结构式如图1所示,齐墩果酸的结构式如图2所示。
实施例二
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)将沙棘果皮在75℃干燥30min,粉碎至粒径为90目,用 75%乙醇作为提取剂,沙棘果皮与75%乙醇质量比为1:10,常温下超声波提取30min,得到提取液;
(b)先用1.5mol/L氢氧化钠溶液处理提取液,调节pH至11,再用1.5mol/L盐酸溶液处理提取液,调节pH至3,得到熊果酸和齐墩果酸固体,用水冲洗熊果酸和齐墩果酸固体3次,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于75%无水乙醇中,得到混合溶液;
(c)将大孔树脂装柱,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为3:10,用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,混合溶液流经大孔树脂的流速为3BV/h,吸附结束后用70%乙醇洗脱得到洗脱液,减压浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC分离粗品中的熊果酸和齐墩果酸,分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为75:25,用三乙胺调节pH至6,流速:15mL/min,紫外检测波长:210nm,柱温:12℃,运行时间25min,依次收集齐墩果酸和熊果酸,其中齐墩果酸的出峰时间为16.6min,熊果酸的出峰时间为18.5min。
实施例三
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)将沙棘果皮在75℃干燥30min,粉碎至粒径为90目,用 75%乙醇作为提取剂,沙棘果皮与75%乙醇质量比为1:10,常温下超声波提取30min,得到提取液;
(b)先用1.5mol/L氢氧化钠溶液处理提取液,调节pH至11,再用1.5mol/L盐酸溶液处理提取液,调节pH至3,得到熊果酸和齐墩果酸固体,用水冲洗熊果酸和齐墩果酸固体3次,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于75%无水乙醇中,得到混合溶液;
(c)将大孔树脂装柱,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为1:15,用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,混合溶液流经大孔树脂的流速为5BV/h,吸附结束后用90%乙醇洗脱得到洗脱液,减压浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC分离粗品中的熊果酸和齐墩果酸,分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为85:15,用三乙胺调节pH至8,流速:18mL/min,紫外检测波长:210nm,柱温:13℃,运行时间25min,依次收集齐墩果酸和熊果酸,其中齐墩果酸的出峰时间为16.6min,熊果酸的出峰时间为18.5min。
实施例四
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)将沙棘果皮在75℃干燥30min,粉碎至粒径为90目,用 75%乙醇作为提取剂,沙棘果皮与75%乙醇质量比为1:10,常温下超声波提取30min,得到提取液;
(b)先用1.5mol/L氢氧化钠溶液处理提取液,调节pH至11,再用1.5mol/L盐酸溶液处理提取液,调节pH至3,得到熊果酸和齐墩果酸固体,用水冲洗熊果酸和齐墩果酸固体3次,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于75%无水乙醇中,得到混合溶液;
(c)将大孔树脂装柱,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为5:10,用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,混合溶液流经大孔树脂的流速为3.3BV/h,吸附结束后用73%乙醇洗脱得到洗脱液,减压浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC分离粗品中的熊果酸和齐墩果酸,分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为78:22,用三乙胺调节pH至6.5,流速:22mL/min,紫外检测波长:210nm,柱温:16℃,运行时间25min,依次收集齐墩果酸和熊果酸,其中齐墩果酸的出峰时间为16.6min,熊果酸的出峰时间为18.5min。
实施例五
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)将沙棘果皮在75℃干燥30min,粉碎至粒径为90目,用 75%乙醇作为提取剂,沙棘果皮与75%乙醇质量比为1:10,常温下超声波提取30min,得到提取液;
(b)先用1.5mol/L氢氧化钠溶液处理提取液,调节pH至11,再用1.5mol/L盐酸溶液处理提取液,调节pH至3,得到熊果酸和齐墩果酸固体,用水冲洗熊果酸和齐墩果酸固体3次,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于75%无水乙醇中,得到混合溶液;
(c)将大孔树脂装柱,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为5:15,用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,混合溶液流经大孔树脂的流速为3.8BV/h,吸附结束后用78%乙醇洗脱得到洗脱液,减压浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC分离粗品中的熊果酸和齐墩果酸,分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为82:18,用三乙胺调节pH至6.8,流速:24mL/min,紫外检测波长:210nm,柱温:17℃,运行时间25min,依次收集齐墩果酸和熊果酸,其中齐墩果酸的出峰时间为16.6min,熊果酸的出峰时间为18.5min。
实施例六
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,包括如下步骤:
(a)将沙棘果皮在75℃干燥30min,粉碎至粒径为90目,用 75%乙醇作为提取剂,沙棘果皮与75%乙醇质量比为1:10,常温下超声波提取30min,得到提取液;
(b)先用1.5mol/L氢氧化钠溶液处理提取液,调节pH至11,再用1.5mol/L盐酸溶液处理提取液,调节pH至3,得到熊果酸和齐墩果酸固体,用水冲洗熊果酸和齐墩果酸固体3次,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于75%无水乙醇中,得到混合溶液;
(c)将大孔树脂装柱,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为3:15,用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,混合溶液流经大孔树脂的流速为4.5BV/h,吸附结束后用85%乙醇洗脱得到洗脱液,减压浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC分离粗品中的熊果酸和齐墩果酸,分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为76:24,用三乙胺调节pH至7.5,流速:25mL/min,紫外检测波长:210nm,柱温:18℃,运行时间25min,依次收集齐墩果酸和熊果酸,其中齐墩果酸的出峰时间为16.6min,熊果酸的出峰时间为18.5min。
实施例七本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,大孔树脂中不包括D101大孔树脂。
实施例八
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,大孔树脂中不包括X-5大孔树脂。
实施例九
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为1: 20。
实施例十
本实施例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,大孔树脂中D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为10: 1。
实施例十一
本实施例提供了一种熊果酸三糖皂苷,以熊果酸和葡萄糖为原料制备而成。熊果酸三糖皂苷的结构式如图3所示。
实施例十二
本实施例提供了一种齐墩果酸三糖皂苷,以齐墩果酸和葡萄糖为原料制备而成。齐墩果酸三糖皂苷的结构式如图4所示。对比例一
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,不包括步骤(c)大孔树脂吸附。
对比例二
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,步骤(d)中混合溶液流经大孔树脂的流速为1BV/h。
对比例三
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,步骤(d)中混合溶液流经大孔树脂的流速为10BV/h。
对比例四
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,不包括步骤(d)HPLC分离。
对比例五
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,步骤(d)中流动相为甲醇-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为80:20,用三乙胺调节pH至7。
对比例六
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,步骤(d)中流速:10mL/min。
对比例七
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,步骤(d)中流速:30mL/min。
对比例八
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,步骤(d)中柱温:10℃
对比例九
本对比例提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,与实施例一不同的是,步骤(d)中柱温:25℃。
试验例
采用HPLC法对各实施例和对比例所提供的方法得到的熊果酸和齐墩果酸的含量进行测定,具体方法如下:
色谱条件:
采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:甲醇-水,两者体积比为 50:50,流速:0.5mL/min,紫外检测波长:210nm,柱温:18℃,进样量:10μL。绘制标准曲线:
精密称取标准品(熊果酸或齐墩果酸),用无水乙醇溶解,制成浓度为2.032g/L的标准溶液,精密吸取标准溶液0.5mL,置于10mL 容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,制成浓度为101.60mg/L 的溶液。
精密称取标准溶液0.2mL、0.35mL、0.5mL、0.65mL和0.8mL,分别置于10mL容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,制成浓度为40.64mg/L、71.12mg/L、101.6mg/L、132.1mg/L和162.6mg/L的溶液,进样10μL,测定峰面积,以峰面积平均值为纵坐标,进样质量浓度为横坐标,得回归方程。
其中,熊果酸的回归方程为:Y=10.046C+0.0453,r=0.9998,熊果酸在10.4-105.2mg/L呈良好的线性关系。
齐墩果酸的得回归方程为:Y=0.0049C+0.0041,r=0.9992,齐墩果酸在40.64-162.6mg/L呈良好的线性关系。
制备待测样品:
精密称取待测样品(熊果酸或齐墩果酸的分离液体),蒸干溶剂。取10mg蒸干后的样品,置于10mL容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,制成浓度为100mg/L的待测溶液,用0.45μm微孔滤膜过滤,精密吸取10μL,按照上述色谱条件进行测定,根据回归方程计算熊果酸和齐墩果酸的含量。
测定结果见表1。
表1齐墩果酸和熊果酸的含量测定
分组 | 熊果酸含量(%) | 齐墩果酸含量(%) |
实施例一 | 99.6 | 99.5 |
实施例二 | 98.7 | 99.1 |
实施例三 | 98.9 | 99.3 |
实施例四 | 99.3 | 99.2 |
实施例五 | 99.1 | 99.4 |
实施例六 | 98.8 | 99.0 |
实施例七 | 98.6 | 99.3 |
实施例八 | 97.6 | 98.2 |
实施例九 | 97.8 | 98.3 |
实施例十 | 98.0 | 98.5 |
对比例一 | 68.5 | 71.2 |
对比例二 | 83.2 | 80.3 |
对比例三 | 81.1 | 82.6 |
对比例四 | 52.3 | 45.6 |
对比例五 | 75.0 | 72.6 |
对比例六 | 77.2 | 74.1 |
对比例七 | 75.6 | 76.3 |
对比例八 | 85.1 | 86.7 |
对比例九 | 83.5 | 84.4 |
由表中数据可知,本发明实施例一至十所提供的提取纯化方法,对熊果酸和齐墩果酸的分离效果好,熊果酸的纯度高达97.6%以上,齐墩果酸的纯度高达98.2%以上,其中实施例一提取纯化得到的熊果酸和齐墩果酸的纯度最高,具有效果最佳的分离效果。
对比例一与实施例一相比,熊果酸和齐墩果酸的纯度均有所下降,说明不包括步骤(c)大孔树脂吸附时,不能对熊果酸和齐墩果酸进行富集,无法将杂质分离出去,导致熊果酸和齐墩果酸的纯度下降。
对比例二和三与实施例一相比,熊果酸和齐墩果酸的纯度均有所下降,说明混合溶液流经大孔树脂的流速过高或过低,都会影响对熊果酸和齐墩果酸的吸附,当流速过快,液体与大孔树脂的网格接触不充分,对三萜酸的吸附量小;当流速过慢,大孔树脂微孔表面的薄膜不易破坏,导致大孔树脂的利用率降低,对三萜酸的吸附量小,导致熊果酸和齐墩果酸的纯度下降。
对比例四与实施例一相比,熊果酸和齐墩果酸的纯度均有所下降,说明不包括步骤(d)HPLC分离,熊果酸和齐墩果酸无法分离,导致熊果酸和齐墩果酸的纯度下降。
对比例五与实施例一相比,熊果酸和齐墩果酸的纯度均有所下降,说明流动相的组成改变,影响流动相与熊果酸和齐墩果酸的亲合作用力,以及与固定相对熊果酸和齐墩果酸的竞争,另外甲醇会使流动相的粘度增加,流动相流动缓慢,柱压升高,不利于系统的稳定运行,也不利于色谱柱的保护。
对比例六和七与实施例一相比,熊果酸和齐墩果酸的纯度均有所下降,说明流动相的流速过高或过低,影响色谱柱的分离度,导致熊果酸和齐墩果酸的纯度下降。
对比例八和九与实施例一相比,熊果酸和齐墩果酸的纯度均有所下降,说明柱温过高或过低,对流动相对熊果酸和齐墩果酸的溶解性、色谱柱的性能和流动相的粘度均有影响,导致熊果酸和齐墩果酸的纯度下降。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (10)
1.一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:
(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物,得到提取液;
(b)先用碱溶液处理提取液,再用酸溶液处理提取液,得到熊果酸和齐墩果酸固体,将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中,得到混合溶液;
(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸,吸附结束后用洗脱剂洗脱,浓缩,得到粗品;
(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离,得到纯化的熊果酸和齐墩果酸。
2.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(c)中,所述大孔树脂包括D101大孔树脂、HPD500大孔树脂、HPD600大孔树脂、X-5大孔树脂、NKA-9大孔树脂或S-8大孔树脂中的至少一种;
优选的,所述大孔树脂为D101大孔树脂和X-5大孔树脂,所述D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为(1-5):(10-15),进一步优选为(1-3):(13-15)。
3.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(c)中,所述混合溶液流经大孔树脂的流速为3-5BV/h,优选为4-5BV/h;
和/或,所述洗脱剂包括乙醇或甲醇中的至少一种,优选为乙醇,进一步优选为70-90%乙醇;
和/或,所述洗脱剂的pH为6-8,优选为7。
4.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(d)中,采用HPLC分离,所述HPLC分离条件包括:采用C18色谱柱,等度洗脱,流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为(75-85):(15-25),用三乙胺调节pH至6-8,流速:15-25mL/min,紫外检测波长:205-215nm,柱温:12-18℃;
优选的,所述流动相:乙腈-0.6%磷酸水溶液,两者体积比为(75-80):(20-25),用三乙胺调节pH至7-8,流速:15-20mL/min,紫外检测波长:210-215nm,柱温:15-18℃。
5.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(a)中,采用回流提取或超声波提取,优选为超声波提取;
优选的,所述超声波提取时间为20-40min,进一步优选为30-40min;
优选的,所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮或乙醚中的至少一种,进一步优选为乙醇,更进一步优选为70-90%乙醇。
6.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(b)中,先用1-2mol/L碱溶液调节pH至10-12,再用1-2mol/L酸溶液调节pH至2-4;
优选的,所述碱溶液包括氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液中的至少一种;
优选的,所述酸溶液包括硫酸、盐酸或磷酸中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(a)中,所述沙棘果皮经干燥,粉碎得到;
优选的,所述沙棘果皮的干燥温度为60-85℃,干燥时间为20-40min;进一步优选为所述干燥温度为75-85℃,和/或,所述干燥时间为30-40min;
优选的,所述沙棘果皮粉碎后的粒径为80-100目,优选为90-100目。
8.一种沙棘中三萜酸,其特征在于,根据权利要求1-7任一项所述的提取纯化方法得到的三萜酸,所述三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸。
9.一种三萜皂苷,其特征在于,主要由如下原料制备而成:根据权利要求1-7任一项所述的提取纯化方法得到的三萜酸或权利要求8所述的三萜酸和多羟基糖类,所述多羟基糖类包括葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸中的至少一种;
优选的,所述三萜皂苷包括单糖三萜皂苷、二糖三萜皂苷或三糖三萜皂苷中的至少一种。
10.根据权利要求1-7任一项所述的提取纯化方法得到的三萜酸或权利要求8所述的三萜酸或权利要求9所述的三萜皂苷在制备药物或保健品中的应用。
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Country Status (1)
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---|---|
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Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110144015A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-08-20 | 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所 | 一种灵芝多糖、灵芝三萜酸及氨基酸的同步提取纯化方法 |
CN110368391A (zh) * | 2019-06-21 | 2019-10-25 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 三萜化合物在制备降血糖相关产品中的用途 |
CN110441410A (zh) * | 2019-06-21 | 2019-11-12 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 沙棘提取物中化合物的色谱分析检测方法 |
CN110508031A (zh) * | 2019-07-30 | 2019-11-29 | 浙江工业大学 | 一种从植物中分离熊果酸和齐墩果酸的方法 |
CN110559688A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-12-13 | 浙江工业大学 | 一种分离同分异构体齐墩果酸和熊果酸的方法 |
CN111789873A (zh) * | 2020-08-04 | 2020-10-20 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 高含量沙棘三萜酸提取物的提取方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101817863A (zh) * | 2009-11-18 | 2010-09-01 | 青海清华博众生物技术有限公司 | 一种从沙棘中提取熊果酸的方法 |
CN101857625A (zh) * | 2009-11-18 | 2010-10-13 | 青海清华博众生物技术有限公司 | 一种从沙棘中提取齐墩果酸的方法 |
US20140086860A1 (en) * | 2011-05-12 | 2014-03-27 | Punam Bandyopadhyay | Skin lightening composition |
CN106749487A (zh) * | 2016-12-14 | 2017-05-31 | 青海伊纳维康生物科技有限公司 | 一种从沙棘果皮中提取分离熊果酸的方法 |
-
2018
- 2018-10-23 CN CN201811236442.0A patent/CN109111496B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101817863A (zh) * | 2009-11-18 | 2010-09-01 | 青海清华博众生物技术有限公司 | 一种从沙棘中提取熊果酸的方法 |
CN101857625A (zh) * | 2009-11-18 | 2010-10-13 | 青海清华博众生物技术有限公司 | 一种从沙棘中提取齐墩果酸的方法 |
US20140086860A1 (en) * | 2011-05-12 | 2014-03-27 | Punam Bandyopadhyay | Skin lightening composition |
CN106749487A (zh) * | 2016-12-14 | 2017-05-31 | 青海伊纳维康生物科技有限公司 | 一种从沙棘果皮中提取分离熊果酸的方法 |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110144015A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-08-20 | 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所 | 一种灵芝多糖、灵芝三萜酸及氨基酸的同步提取纯化方法 |
CN110368391A (zh) * | 2019-06-21 | 2019-10-25 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 三萜化合物在制备降血糖相关产品中的用途 |
CN110441410A (zh) * | 2019-06-21 | 2019-11-12 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 沙棘提取物中化合物的色谱分析检测方法 |
CN110508031A (zh) * | 2019-07-30 | 2019-11-29 | 浙江工业大学 | 一种从植物中分离熊果酸和齐墩果酸的方法 |
CN110559688A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-12-13 | 浙江工业大学 | 一种分离同分异构体齐墩果酸和熊果酸的方法 |
CN111789873A (zh) * | 2020-08-04 | 2020-10-20 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 高含量沙棘三萜酸提取物的提取方法 |
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