CN109111495B - 一种降低甘草酸单铵盐中相关物质含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种降低甘草酸单铵盐中相关物质含量的方法，经过多次小试和中试实验，我们可将最大杂控制在4.2%左右，同时将次大杂控制在3.0%以内，总杂质含量低于8%。经过一次纯化，甘草酸单铵盐纯度由73.0%提高到80%以上（HPLC法），得率大于60%。与国内十一家公司提供的技术参数进行统计，目前经纯化后的样品，其最大杂含量、次大杂含量和总杂质含量均具有明显的优势。本发明工艺简单，步骤少，对设备要求低，具有较高的适用性和大规模用于工业生产的前景，显著的降低了甘草酸单铵盐精品中相关物质的含量。

Description

一种降低甘草酸单铵盐中相关物质含量的方法

技术领域

本发明涉及甘草酸盐技术领域，是一种对甘草酸单铵盐进行提纯并有效降低相关物质含量的方法。

背景技术

中国传统中药甘草来源于豆科植物乌拉尔甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根和茎，其化学成分复杂，主要为黄酮和皂苷类化合物。目前甘草主要用来生产甘草浸膏、甘草甜味素和甘草酸盐等。甘草酸单铵盐的主要成分为甘草酸经氨化后的一铵盐，具有激素样活性，但无激素的副作用，不仅对气管炎、支气管炎、咳嗽、哮喘等呼吸系统疾病有显著疗效，而且对消化道感染、乙肝、口腔溃疡、胃溃疡等也有奇效。对于多种毒素如白喉毒素、河豚毒素、破伤风毒素和蛇毒等有着较强的解毒功效。同时还具有类似肾上腺皮质激素的作用。

甘草酸单铵盐有关物质主要是起始原料和在生产过程中带入的中间体、聚合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物等。甘草酸单铵盐是经酸粉醇提、添加氨水合成而成的一个产品，随后粗品铵盐经过多次重结晶，而达到S级或更高级标准，在重结晶过程中，各类杂质逐渐减少，当前所描述的甘草酸单铵盐有关物质，是指甘草酸单铵盐s在液相图谱中，产品主峰前面的2个杂质峰和后面的1个杂质峰，主峰前面的2个杂质峰，其中靠近主峰的物质为18-α甘草酸单铵盐，此物质经后期重结晶可有效去除或降低，另一个杂质峰称之为有关物质A，也称最大杂，主峰后面的杂质峰称之为有关物质B，也称次大杂，这两个杂质不能通过反复重结晶来降低含量。这是行业内一个难题，而A、B杂质的含量对甘草酸单铵盐的应用影响很大，产品附加值也有很大的不同。

国家标准WS-10001-(HD-1269)-2002中规定18β-甘草酸的含量应该达到73.0%。但目前的甘草酸单铵盐的生产中存在生产成本过高和杂质含量有效无法降低等问题，对进一步的工业生产造成了巨大影响。范晓雯等人通过工艺研究，通过改变单铵盐重结晶过程中溶质液料比、活性炭的种类及用量、再结晶溶剂种类及浓度，检测不同条件下杂质A的含量，最终得到的最优条件下杂质A的含量在7.5%左右（新疆中草药，2015，VoL33，NO.6,45-48）。苗现义等人改变醇提温度，发现在醇提温度在30至35℃，45至50℃下得到甘草酸单铵盐的杂质A的平均质量百分比为5.96%、6.25%(专利号：CN105237609A）。王哲等人低醇溶解、调高醇度、降温结晶等一系列生产工艺得到甘草酸单铵盐，其中杂质A和B的百分比分别为5.13%、4.42%（专利号：CN106565815A）。

从上述叙述与举例中可以看出，甘草酸单铵盐中相关物质的纯化方法很多，但大多工艺复杂，成本高。本申请与上述介绍不同，发明人采用简单的混合溶剂在室温下进行重结晶，能有效降低甘草酸单铵盐中相关杂质A和B的含量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简单易行的甘草酸单铵盐的提纯方法，有效降低最大杂A和次大杂B，适用于工业上的大规模生产，提高产品纯度，扩大了甘草酸单铵盐的应用范围，增加产品附加值。

本发明是通过以下措施来实现有关物质含量的有效降低，包括以下步骤：

第一步：取原料甘草酸单铵盐，加入6倍量的50%乙醇溶液，搅拌混合均匀，加热同时进行搅拌使其溶解，形成澄清溶液。

第二步：将第一步得到的溶液在室温下进行冷却，待冷却至室温后加入16倍量冰醋酸，并混合搅拌均匀。

第三步：对第二步中得到的混合溶液有以下两种处理方式：方案一：使用旋转蒸发仪对混合溶液进行真空浓缩，待混合溶液开始出现浑浊后停止浓缩，倒出混合溶液在室温下进行静 24 h； 方案二：将混合溶液直接在室温下静置24 h。

第四步：对第三步中静置24 h后的混合溶液进行抽滤，分离得到甘草酸单铵盐晶体，在70℃下烘干两小时即得到提纯后的甘草酸单铵盐。

相比于现有的甘草酸单铵盐纯化技术，本发明大大降低了纯化工艺的复杂性和生产成本，且相关物质的含量得到了明显的降低。

附图说明

图1为实施方案一得到的甘草酸单铵盐检测后得到的高效液相色谱图；

图2为实施方案二得到的甘草酸单铵盐检测后得到的高效液相色谱图。

具体实施方式

以下结合实例对本发明做出具体的说明：

实施例1 甘草酸单铵盐的制备方案一

首先称取73.0%的甘草酸单铵盐10.0 g至烧杯中，加入60 ml的50.0%乙醇水溶液，搅拌混合均匀后，在磁力搅拌器上边搅拌边进行加热，在65 ℃时溶解形成澄清溶液。将溶液在室温下冷却，无任何结晶析出。取160 ml冰醋酸加入冷却后的溶液中同时搅拌，将溶液加入旋转蒸发仪在45℃下进行真空浓缩，待溶液出现浑浊时停止加热，将得到的溶液在室温下静置24 h后进行抽滤分离，将得到的甘草酸单铵盐在70℃下烘干2 h，即得到纯化后的甘草酸单盐，其中折算后的甘草酸含量为80.2%，甘草酸单铵盐的回收率为63.0%。精密称量纯化后的甘草酸单铵盐10 mg，以乙腈-0.01 mol/L的磷酸水溶液（38:62）为溶剂配制成含量为0.2 mg/ml的供试品溶液，同样取10 mg甘草酸单铵盐标准品制成含量为0.2 mg/ml的对照品溶液。按以下色谱条件进行检测：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.011mol/L磷酸溶液（38:62）为流动相，检测波长为252 nm，理论板数按甘草酸单铵盐峰计算不低于2000。

重结晶后甘草酸单铵盐的相关物质百分比含量见下表：

相关物质	最大杂质	次大杂质	杂质总和
				标准	≤8.0%	≤5.0%	≤15.0%
重结晶	4.18%	2.99%	7.17%

实施例2 甘草酸单铵盐的制备方案二

首先称取73%的甘草酸单铵盐10.0 g至烧杯中，加入60 ml的50%乙醇水溶液搅拌混合均匀后，在磁力搅拌器上边搅拌边进行加热，在65℃时溶解形成澄清溶液。将溶液在室温下冷却，无任何结晶析出。取160 ml冰醋酸加入冷却后的溶液中同时搅拌，将得到的混合溶液直接静置在室温下24 h后进行抽滤分离，将得到的甘草酸单铵盐在70℃下烘干2 h,即得到纯化后的甘草酸单铵盐，其中折算后的甘草酸含量为80.1%，甘草酸单铵盐的回收率为55.0%。精密称量纯化后的甘草酸单铵盐10 mg，以乙腈-0.01mol/L的磷酸水溶液（38:62）为溶剂配制成含量为0.2 mg/ml的供试品溶液，同样取10 mg甘草酸单铵盐标准品制成含量为0.2 mg/ml的对照品溶液。按以下色谱条件进行检测：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.01 mol/L磷酸溶液（38:62）为流动相，检测波长为252 nm，理论板数按甘草酸单铵盐峰计算不低于2000。

重结晶后甘草酸单铵盐的相关物质、含量和得率见下表：

相关物质	最大杂质	次大杂质	杂质总和
				标准	≤8.0%	≤50.%	≤15.0%
重结晶	4.35%	2.21%	6.56%

Claims (1)

1.一种降低甘草酸单铵盐中相关物质含量的方法，其特征在于按下述步骤得到：

第一步：取原料甘草酸单铵盐，加入6倍量的50%乙醇溶液，搅拌混合均匀，加热同时进行搅拌使其溶解，形成澄清溶液,

第二步：将第一步得到的溶液在室温下进行冷却，待冷却至室温后加入16倍量冰醋酸，并混合搅拌均匀,

第三步：对第二步中得到的混合溶液有以下两种处理方式：方案一：使用旋转蒸发仪对混合溶液进行真空浓缩，待混合溶液开始出现浑浊后停止浓缩，倒出混合溶液在室温下进行静置24 h;方案二：将混合溶液直接在室温下静置24 h,

第四步：对第三步中静置24 h后的混合溶液进行抽滤，分离得到甘草酸单铵盐晶体，在70℃下烘干两小时即得到提纯后的甘草酸单铵盐。

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