CN104151389A - 一种快速提取纯化甘草酸及其盐类的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种快速提取纯化甘草酸及其盐类的方法，以甘草根茎为原料，采用闪式提取技术获得甘草酸，以甘草酸粉为原料，采用闪式提取技术获得甘酸酸盐。本发明的方法，实现室温下快速提取，与现有工艺相比，能实现溶剂的循环利用，显著减少废液量、降低能耗、缩短提取时间、提高产品质量。

Description

一种快速提取纯化甘草酸及其盐类的方法

技术领域

本发明涉及中草药活性成分分离纯化领域，具体涉及一种快速提取纯化甘草酸及其盐类的方法。 

背景技术

甘草是我国常用的中药品种之一，富含三萜皂苷类、黄酮类、多糖等活性成分，具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药等功效。甘草中含量最高的活性组分为甘草酸。甘草酸是一种三萜皂苷类化合物，也是研究较为透彻、应用最广的甘草活性组分。尤其是高纯度甘草酸及其盐类，经过化学反应可以制备成甘草次酸、异甘草酸镁、甘草酸二铵等畅销药(CN200410083052.6)，市场需求巨大。 

甘草酸的提取工艺研究较多，已见报道的工艺主要包括：传统方法(如冷浸、渗漉、热浸、热回流等)、微波辅助提取法(CN03105372.6)、超声波辅助提取法(CN02109474.8)、超临界萃取法(CN00105599.2)等。冷浸和渗漏等方法提取效率非常低，提取时间往往需要24小时以上，而且提取液用量大，浓缩提取液所耗能量较大。热浸和热回流等方法通过加热提取液(一般40-80℃)将提取时间缩短为2-5小时，但所得提取液中蛋白质、淀粉、多糖等含量增多，从而影响产物的纯度与色泽。微波辅助提取法和超声波辅助提取法通过微波、超声等强化传质过程，使提取时间进一步缩短至20-60分钟，提取温度也降至30-50℃，但仍然存在提取液用量大，浓缩提取液所耗能量较大等缺点。超临界萃取法以超临界二氧化碳作为提取溶剂，常加入甲醇、乙醇等改性剂以增大其极性，由于溶剂极性较低，对甘草酸提取效果有限，提取时间常需2-6小时，且需使用高压设备(压力一般大于100大气压)，投资成本较高。 

鉴于以上方法的不足，本领域亟需开发新的提取技术，实现室温条件下快速提取纯化甘草酸及其药学上可接受的盐，以提高产品质量，降低能源消耗，减少废液排放。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速提取纯化甘草酸及其盐类的方法。 

本发明的第一方面，提供一种甘草酸盐的提取方法，所述方法以甘草酸为原料，采用闪式提取技术进行提取获得所述甘草酸盐。 

在另一优选例中，所述甘草酸盐选自：甘草酸单铵盐、甘草酸单钾盐、甘草酸单钠盐。 

在另一优选例中，所述甘草酸是以甘草根茎为原料，采用闪式提取技术进行提取获得，包括以下步骤： 

a)将所述甘草根茎干燥粉碎后过筛，得到甘草粉； 

b)以水作为溶剂，对所述甘草粉进行闪式提取，得到甘草酸水提液； 

c)将所述甘草酸水提液的pH调节为1.5-2.5，分离沉淀物，并经洗涤、干燥后得到所述甘草酸。 

在另一优选例中，所述步骤c)中，采用浓硫酸调节甘草酸水提液的pH值为1.5-2.5。 

在另一优选例中，所述方法具有以下一个或多个特征： 

(1)所述步骤a)中过10-100目筛，较佳地过20-80目筛，更佳地过40目筛； 

(2)所述步骤b)中，所述甘草粉和所述溶剂的固液比为1:10-1:40g/mL； 

(3)所述步骤b)中，所述闪式提取所用的转速为10000-16000转/分钟； 

(4)所述步骤b)中，所述闪式提取的提取时间为0.5-5分钟； 

(5)所述步骤b)中，所述闪式提取的提取温度为15-30℃，较佳地为15-25℃，更佳地为20℃； 

(6)所述步骤c)中，采用水进行洗涤； 

(7)所述步骤c)中，所述干燥是在30-50℃进行真空干燥。 

在另一优选例中，所述方法还包括以下步骤：将所述步骤c)中分离沉淀物后得到的上清液调节至中性，沉降去除固体，取上清液与水混合后，作为步骤b)中的溶剂，用于闪式提取，循环利用。 

在另一优选例中，所述固体包括硫酸钙。在另一优选例中，采用氢氧化钙调节所述上清液的pH至中性。 

在另一优选例中，所述方法包括以下步骤： 

ⅰ)将所述甘草酸干燥粉碎后过筛，得到甘草酸粉； 

ⅱ)以90wt％-99wt％的乙醇水溶液作为溶剂，对所述甘草酸粉进行闪式提取，得到甘草酸醇提液； 

ⅲ)将所述甘草酸醇提液的pH调节为7.5-8.5，分离沉淀物； 

ⅳ)将所述沉淀物与酸反应后，经过滤、洗涤滤饼、干燥得到所述甘草酸盐， 

其中，所述步骤ⅲ)中采用氨气、15wt％-30wt％的浓氨水、5wt％-30wt％氢氧化钾乙醇溶液或15wt％-30wt％氢氧化钠水溶液，调节所述甘草酸醇提液的pH值； 

所述酸选自：氢氟酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水杨酸、三氟甲磺酸、萘磺酸、马来酸、柠檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢浆草酸、苹果酸、谷氨酸。 

在另一优选例中，所述方法具有以下一个或多个特征： 

(1)所述步骤ⅰ)中过10-100目筛，较佳地过20-80目筛，更佳地过40目筛； 

(2)所述步骤ⅱ)中，所述甘草酸粉和所述溶剂的固液比为1:10-1:40g/mL； 

(3)所述步骤ⅱ)中，所述闪式提取所用的转速为10000-16000转/分钟； 

(4)所述步骤ⅱ)中，所述闪式提取的提取时间为0.5-5分钟； 

(5)所述步骤ⅱ)中，所述闪式提取的提取温度为15-30℃，较佳地为15-25℃，更佳地为20℃； 

(6)所述步骤ⅲ)中，采用氨气、15wt％-30wt％的浓氨水、5wt％-30wt％氢氧化钾乙醇溶液或15wt％-30wt％氢氧化钠水溶液，调节所述甘草酸醇提液的pH值； 

(7)所述步骤ⅳ)中，所述干燥是在30-50℃进行真空干燥； 

(8)所述步骤ⅳ)中，所述沉淀物与所述酸的重量体积比为1g:1.5-5ml； 

(9)所述步骤ⅳ)中，所述沉淀物与所述酸在30-60℃反应20-90min； 

(10)所述步骤ⅳ)中，所述洗涤滤饼是依次采用所述酸、乙醇进行洗涤。 

在另一优选例中，依次用两倍量(mL/g)冰醋酸、两倍量(mL/g)无水乙醇各洗涤滤饼一次。 

在另一优选例中，将所述步骤ⅲ)中分离沉淀物后得到的上清液调节至中 性，沉降去除固体，取上清液与乙醇混合后，作为步骤ⅱ)中的溶剂，用于闪式提取，循环利用。 

在另一优选例中，采用浓硫酸调节所述上清液的pH至中性。 

在另一优选例中，所述方法还包括步骤ⅴ)：对步骤ⅳ)获得的所述甘草酸盐进行结晶纯化。 

在另一优选例中，所述结晶纯化包括以下步骤： 

ⅴ1)将所述甘草酸盐溶于75-95wt％的乙醇水溶液中，固液比为1:10-1:20g/mL，加热至50-60℃，加入0.5-2倍重量的活性炭粉末脱色2-5小时； 

ⅴ2)对步骤ⅴ1)得到的混合物进行过滤，将滤液置于0-5℃进行冷却结晶； 

ⅴ3)冷却结晶8-24hr后，再冷却至-40℃～-10℃至少8hr，过滤得到甘草酸盐湿晶体； 

ⅴ4)将所述甘草酸盐湿晶体进行干燥后得到甘草酸盐纯品。 

在另一优选例中，所述步骤ⅴ2)中将滤液置于4℃进行冷却结晶。 

在另一优选例中，所述步骤ⅴ3)中再冷却至-15～-30℃，较佳地冷却至-20℃进行冷却结晶。 

在另一优选例中，所述方法还包括将步骤ⅴ4)获得的甘草酸盐纯品进行重结晶的步骤。 

在另一优选例中，所述重结晶是指重复步骤ⅴ1)-ⅴ4)对甘草酸盐纯品进行重结晶。 

在另一优选例中，采用乙醇水溶液稀释步骤ⅴ3)中过滤得到的结晶母液，用作步骤ⅴ1)中的溶剂溶解甘草酸盐，循环利用。 

本发明的第二方面，提供一种甘草酸的提取方法，以甘草根茎为原料，采用闪式提取技术进行提取获得所述甘草酸。 

在另一优选例中，所述方法包括以下步骤： 

a)将所述甘草根茎干燥粉碎后过筛，得到甘草粉； 

b)以水作为溶剂，对所述甘草粉进行闪式提取，得到甘草酸水提液； 

c)将所述甘草酸水提液的pH调节为1.5-2.5，分离沉淀物，并经洗涤、干燥后得到所述甘草酸。 

在另一优选例中，所述步骤c)中，采用浓硫酸调节甘草酸水提液的pH值为1.5-2.5。 

在另一优选例中，所述方法具有以下一个或多个特征： 

(1)所述步骤a)中过10-100目筛，较佳地过20-80目筛，更佳地过40目筛； 

(2)所述步骤b)中，所述甘草粉和所述溶剂的固液比为1:10-1:40g/mL； 

(3)所述步骤b)中，所述闪式提取所用的转速为10000-16000转/分钟； 

(4)所述步骤b)中，所述闪式提取的提取时间为0.5-5分钟； 

(5)所述步骤b)中，所述闪式提取的提取温度为15-30℃，较佳地为15-25℃，更佳地为20℃； 

(6)所述步骤c)中，采用水进行洗涤； 

(7)所述步骤c)中，所述干燥是在30-50℃进行真空干燥。 

在另一优选例中，所述方法还包括以下步骤： 

将所述步骤c)中分离沉淀物后得到的上清液调节至中性，沉降去除固体，取上清液与水混合后，作为步骤b)中的溶剂，用于闪式提取，循环利用。所述固体包括硫酸钙。在另一优选例中，采用氢氧化钙调节所述上清液的pH至中性。 

本发明的方法，实现室温下快速提取，与现有工艺相比，能实现溶剂的循环利用，显著减少废液量、降低能耗、缩短提取时间、提高产品质量。 

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。 

附图说明

图1为甘草酸提取纯化工艺流程图。 

图2为HPLC谱图，其中(a)为甘草酸单铵盐标准品HPLC图谱，甘草酸出峰时间16.27min；和(b)实施例5获得的甘草酸单铵盐产品HPLC图谱，甘草酸出峰时间与标准品一致。 

具体实施方式

本申请的发明人经过广泛而深入地研究，首次意外研发出一种快速提取纯 化甘草酸及其盐类的方法，以甘草根茎为原料，采用闪式提取技术获得甘草酸，以甘草酸粉为原料，采用闪式提取技术获得甘酸酸盐。本发明的方法，实现室温下快速提取，与现有工艺相比，能实现溶剂的循环利用，显著减少废液量、降低能耗、缩短提取时间、提高产品质量。在此基础上，完成了本发明。 

提取方法 

如图1所示，本发明的甘草酸盐的提取纯化方法包括以下步骤： 

a’)将甘草根茎干燥粉碎后过筛，得到甘草粉； 

b’)以水作为溶剂，对所述甘草粉进行闪式提取，得到甘草酸水提液； 

c’)将所述甘草酸水提液的pH调节为1.5-2.5，分离沉淀物，并经洗涤、干燥后得到甘草酸； 

其中，将所述步骤c’)中分离沉淀物后得到的上清液调节至中性，沉降去除固体，取上清液与水混合后，作为步骤b’)中的溶剂，用于闪式提取，循环利用。所述固体包括硫酸钙。在另一优选例中，采用氢氧化钙调节所述上清液的pH至中性； 

d’)将所述甘草酸干燥粉碎后过筛，得到甘草酸粉； 

e’)以90wt％-99wt％的乙醇水溶液作为溶剂，对所述甘草酸粉进行闪式提取，得到甘草酸醇提液； 

f’)采用氨气、15wt％-30wt％的浓氨水、5wt％-30wt％氢氧化钾乙醇溶液或15wt％-30wt％氢氧化钠水溶液，将所述甘草酸醇提液的pH调节为7.5-8.5，分离沉淀物； 

g’)将所述沉淀物与酸反应后，经过滤、洗涤滤饼、干燥得到所述甘草酸盐粗品，其中，所述酸选自：氢氟酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水杨酸、三氟甲磺酸、萘磺酸、马来酸、柠檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢浆草酸、苹果酸、谷氨酸； 

其中，将所述步骤f’)中分离沉淀物后得到的上清液调节至中性，沉降去除固体，取上清液与乙醇混合后，作为步骤e’)中的溶剂，用于闪式提取，循环利用。在另一优选例中，采用浓硫酸调节所述上清液的pH至中性， 

h’)将所述甘草酸盐粗品溶于75-95wt％的乙醇水溶液中，固液比为1:10-1:20g/mL，加热至50-60℃，加入0.5-2倍重量的活性炭粉末脱色2-5小时； 

i’)对步骤ⅴ1)得到的混合物进行过滤，将滤液置于0-5℃进行冷却结晶； 

j’)冷却结晶8-24hr后，再冷却至-40℃～-10℃至少8hr，过滤得到甘草酸盐湿晶体； 

k’)将所述甘草酸盐湿晶体进行干燥后得到甘草酸盐纯品，较佳地，经步骤h’)-k’)进行重结晶得到甘草酸盐精品， 

其中，采用乙醇水溶液稀释步骤j’)中过滤得到的结晶母液，用作步骤h’)中的溶剂溶解甘草酸盐，循环利用。 

在另一优选例中，所述方法包括以下步骤： 

(1)闪式水提制备甘草酸粉： 

①.甘草根据经风干、粉碎后过40目标准筛，得到甘草粉； 

②.将甘草粉加入闪式提取器中；以水作为溶剂，固液比1:10～1:40(g/mL)；闪式提取转速10000～16000转/分钟，提取时间0.5～5分钟，提取温度为室温(20℃左右)；过滤得到甘草酸水提液； 

③.使用浓硫酸调节甘草酸水提液的pH值1.5-2.5，静置半小时，离心得沉淀，加入少量水洗涤沉淀几次，30-50℃真空干燥沉淀，得到甘草酸粉。 

④.步骤③中离心所得上清液，用氢氧化钙调节至中性后，沉降一段时间去除硫酸钙等固体颗粒物，取上层清液与一定量水混合后，运送至步骤②中作为提取溶剂，循环利用。 

(2)闪式醇提制备粗甘草酸盐： 

①.甘草酸粉经粉碎后过40目标准筛； 

②.将甘草酸粉加入闪式提取器中；以95％乙醇作为溶剂，固液比1:10～1:40(g/mL)；闪式提取转速10000～16000转/分钟，提取时间0.5～5分钟，提取温度为室温(20℃左右)；过滤得到甘草酸醇提液； 

③.使用氨气、浓氨水(22-25wt％)、氢氧化钾乙醇溶液(10-20wt％)或氢氧化钠溶液(22-25wt％)，调节甘草酸醇提液的pH值7.5-8.5，静置半小时，离心得沉淀，加入两倍量(mL/g)的冰醋酸，30-60℃反应半小时，过滤，滤饼依次用两倍量(mL/g)冰醋酸、两倍量(mL/g)无水乙醇各洗涤一次，30-50℃真空干燥滤饼，得到甘草酸盐粗粉。 

④.步骤③中离心所得上清液，用浓硫酸调节至中性后，沉降一段时间去除硫酸氨、硫酸钾、硫酸钠等固体颗粒物，取上层清液与少量乙醇混合后，运送至步骤②中作为提取溶剂，循环利用。 

(3)结晶纯化甘草酸盐： 

①.将甘草酸盐粗粉溶于75-95wt％的乙醇中，固液比为1:10-1:20(g/mL)，加热至50-60℃，加入0.5-2倍量(g/g)活性炭粉末脱色至少2小时； 

②.趁热过滤去除不溶物与活性炭，将滤液放置4℃环境中冷却结晶至少8小时，后置于-20℃环境中进一步长晶； 

③.过滤得到甘草酸盐湿晶体，经30-60℃真空干燥，得到高纯度甘草酸盐； 

④.步骤③中所得高纯度甘草酸盐，可根据产品要求运送至步骤①中进行重结晶，进一步提高纯度； 

⑤.步骤③中过滤所得结晶母液，加入乙醇水溶液稀释后运送至步骤①中作为溶剂，循环利用。 

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。 

本发明的有益之处在于： 

(1)能实现溶剂的循环利用，显著减少废液量。现有技术会产生大量废液，需配套的废液处理系统。而本发明能实现溶剂的循环利用，实现废液的零排放。 

(2)显著降低能耗。现有技术提取溶剂需加热到40-60℃，且提取液浓度较低，需浓缩以提高回收率，能耗巨大。而本发明所用的闪式提取法，在室温下就能完成高效提取，且提取液不需浓缩，因此显著降低了能耗。 

(3)显著缩短提取时间。现有技术提取过程需时几小时甚至几天。而本发明所用的闪式提取法，在5分钟之内就能实现高效提取，大大缩短了提取时间，提高了生产效率。 

(4)提高产品质量。现有技术提取温度较高，提取液中蛋白质、多糖等成分含量较高，所得产品甘草酸及其盐类含量较低，颜色较深。而本发明所用的闪式提取法，在室温下仅需几分钟就能完成提取过程，所得产品甘草酸及其盐类纯度较高，颜色较浅。 

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。 

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。 

通用方法 

甘草酸及其盐类纯度的测试方法： 

(1)标准曲线的建立 

称取0.0692g甘草酸单铵盐标准品(纯度大于98％)，溶于60wt％乙醇水溶液，定容至100mL。使用HPLC装置，使用碳十八反相色谱柱，流动相乙腈:0.05％三氟乙酸水溶液(35:65)，流速0.8mL/min，进样量10微升。所得色谱图如图2中(a)。 

(2)甘草酸单铵盐纯度的计算 

称取约60mg的样品，溶于60wt％乙醇水溶液中，定容至100mL。使用HPLC装置，色谱条件同前，根据甘草酸的峰面积计算样品中甘草酸的纯度。 

甘草酸纯度的计算公式如下， 

式中，S₀、S₁分别为标准品和样品HPLC图谱中甘草酸峰面积。 

以上以甘草酸单铵盐为例给出甘草酸盐纯度的检测计算方法。甘草酸纯度测定方法同甘草酸盐类纯度的测定方法，仅计算时将甘草酸的质量转化为等摩尔甘草酸盐的质量进行计算。 

实施例1 

闪式水提制备甘草酸粉 

甘草根茎经粉碎后，过40目标准筛，得甘草粉。取20g甘草粉，用400mL 去离子水分散后，置于闪式提取器中，室温10000转/分钟下提取5分钟，得到提取液。过滤得到滤液，用浓硫酸调节pH至2.0-2.5；甘草酸沉淀析出，离心，所得沉淀物用少量水洗涤后，再次离心，将沉淀物于35℃真空干燥，得到甘草酸粉。HPLC分析其甘草酸纯度为25.3％。 

上述离心过程所得上清液合并后，加入氢氧化钙粉末，调节pH至7.0-7.5，生成硫酸钙沉淀，沉降半小时，取上层清液；向上层清液中加入去离子水至400mL，加入20g甘草粉。按照上述流程完成第二次提取。所得甘草酸粉纯度为22.8％。 

重复上述过程，完成第三、四、五次提取；所得甘草酸粉纯度依次为28.2％、19.0％、15.6％。 

对比例1 

传统热浸方法制备甘草酸粉 

甘草经粉碎后，过40目标准筛。取100g甘草粉，加入800mL提取溶液(0.5％氨、10％乙醇水溶液)，加热至60℃，搅拌速度200转/分，提取两小时。过滤后，将滤渣再加入700mL提取溶液重新提取一次，过滤，合并两次提取液。浓缩至500mL左右，用浓硫酸调节pH至2.0-2.5，离心，所得沉淀物用少量水洗涤后，再次离心，将沉淀物于35℃真空干燥，得到甘草酸粉。HPLC分析其甘草酸纯度为11.7％。 

将本对比例与实施例1相比，将闪式提取改为传统热浸提取，所得产品纯度明显较低。 

实施例2 

闪式醇提制备甘草酸单铵盐粗粉 

闪式提取法制备的甘草酸粉经粉碎后，过40目标准筛。取5g甘草酸粉，用100mL的95wt％乙醇分散后，置于闪式提取器中，室温10000转/分钟下提取5分钟，得到提取液。过滤得到滤液，用22-25％的浓氨水调节pH至8.0-8.5；甘草酸三铵盐沉淀析出，过滤，所得滤饼约3g，用6mL冰醋酸于60℃加热溶解。冷却后，有甘草酸单铵盐析出。过滤，得到甘草酸单铵盐粗品湿晶体，依次用3mL冰醋酸、3mL无水乙醇洗涤各洗涤一次，再置于35℃真空干燥器中干燥8小时以上。HPLC分析甘草酸单铵盐粗品的纯度为78.6％。 

上述提取液过滤所得滤液，滴加浓硫酸，调节pH至7.0-7.5，生成硫酸铵沉淀，沉降半小时，取上层清液；向上层清液中加入无水乙醇至100mL，再加入5g甘草酸粉。按照上述流程完成第二次提取。HPLC分析所得甘草酸单铵盐粗品的纯度为73.6％。 

对比例2 

传统热浸方法制备甘草酸单铵盐粗粉 

传统热浸法提取的甘草酸粉经粉碎后，过40目标准筛。取5g甘草酸粉，加入100mL的95wt％乙醇，加热至50℃，200转/分搅拌提取2小时，过滤，所得滤渣再加入100mL的95wt％乙醇提取第二次。合并两次滤液，浓缩至50mL。用浓氨水调节pH至8.0-8.5；甘草酸三铵盐沉淀析出，过滤，所得滤饼约3g，用6mL冰醋酸于60℃加热溶解。冷却后，有甘草酸单铵盐析出。过滤，得到甘草酸单铵盐粗品湿晶体，依次用3mL冰醋酸、3mL无水乙醇洗涤各洗涤一次，再置于35℃真空干燥器中干燥8小时以上。HPLC分析甘草酸单铵盐粗品的纯度为60.1％。 

将本对比例与实施例2相比，将闪式提取改为传统热浸提取，所得产品纯度明显较低，颜色较深。 

实施例3 

闪式醇提制备甘草酸单钾盐粗粉 

闪式提取法制备的甘草酸粉经粉碎后，过40目标准筛。取5g甘草酸粉，用100mL的95wt％乙醇分散后，置于闪式提取器中，室温10000转/分钟下提取5分钟，得到提取液。 

过滤得到滤液，用20wt％氢氧化钾乙醇溶液调节pH至8.0-8.5；甘草酸三钾盐沉淀析出，过滤，所得滤饼约3g，用6mL冰醋酸于60℃加热溶解。冷却后，有甘草酸单钾盐析出。 

过滤，得到甘草酸单钾盐粗品湿晶体，依次用3mL冰醋酸、3mL无水乙醇洗涤各洗涤一次，再置于35℃真空干燥器中干燥8小时以上。HPLC分析甘草酸单钾盐粗品的纯度为74.3％。 

上述提取液过滤所得滤液，滴加浓硫酸，调节pH至7.0-7.5，生成硫酸钾沉淀，沉降半小时，取上层清液；向上层清液中加入无水乙醇至100mL，再加 入5g甘草酸粉。按照上述流程完成第二、三、四次提取。HPLC分析所得甘草酸单钾盐粗品的纯度为75.1％、74.8、76.2％。 

实施例4 

闪式醇提制备甘草酸单钠盐粗粉 

闪式提取法制备的甘草酸粉经粉碎后，过40目标准筛。取5g甘草酸粉，用100mL的95wt％乙醇分散后，置于闪式提取器中，室温16000转/分钟下提取5分钟，得到提取液。 

过滤得到滤液，用30wt％氢氧化钠水溶液调节pH至8.0-8.5；甘草酸三钠盐沉淀析出，过滤，所得滤饼约3g，用6mL冰醋酸于60℃加热溶解。冷却后，有甘草酸单钠盐析出。 

过滤，得到甘草酸单钠盐粗品湿晶体，依次用3mL冰醋酸、3mL无水乙醇洗涤各洗涤一次，再置于35℃真空干燥器中干燥8小时以上。HPLC分析甘草酸单钠盐粗品的纯度为76.1％。 

实施例5 

结晶纯化甘草酸单铵盐 

取实施例2中闪式提取制备的甘草酸单铵盐粗粉2g，加入30mL75wt％的乙醇，加热至60℃。待完全溶解后，加入医用活性炭粉末(200目)2g，60℃保温2小时。趁热过滤，将滤液置于4℃环境中冷却结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC分析所得甘草酸单铵盐的纯度为95.5％。 

取上述产品0.5g，加入95wt％乙醇10mL，60℃加热溶解后，置于4℃环境中冷却重结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC(图2中(b))分析所得甘草酸单铵盐的纯度>98％。 

对比例3 

传统工艺结晶纯化甘草酸单铵盐 

取对比例2中传统热浸法制备甘草酸单铵盐粗粉2g，加入30mL80wt％的乙醇，加热至60℃。待完全溶解后，加入医用活性炭粉末(200目)2g，60℃ 保温2小时。趁热过滤，将滤液置于4℃环境中冷却结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC分析所得甘草酸单铵盐的纯度为85.5％。 

取上述产品0.5g，加入95wt％乙醇10mL，60℃加热溶解后，置于4℃环境中冷却重结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC分析所得甘草酸单铵盐的纯度92.5％。 

将本对比例与实施例5相比，操作流程不变，仅改变了所用甘草酸单铵盐粗品原料，所得产品纯度明显较低。 

实施例6 

结晶纯化甘草酸单钾盐 

取实施例3中闪式提取制备的甘草酸单钾盐粗粉5g，加入30mL75wt％的乙醇，加热至60℃。待完全溶解后，加入医用活性炭粉末(200目)5g，60℃保温2小时。趁热过滤，将滤液置于4℃环境中冷却结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC分析所得甘草酸单钾盐的纯度为96.2％。 

取上述产品0.5g，加入95wt％乙醇10mL，60℃加热溶解后，置于4℃环境中冷却重结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC分析所得甘草酸单钾盐的纯度98.3％。 

实施例7 

结晶纯化甘草酸单钠盐 

取实施例4中闪式提取制备的甘草酸单钠盐粗粉5g，加入30mL75wt％的乙醇，加热至60℃。待完全溶解后，加入医用活性炭粉末(200目)5g，60℃保温2小时。趁热过滤，将滤液置于4℃环境中冷却结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC分析所得甘草酸单钠盐的纯度为95.2％。 

取上述产品0.5g，加入95wt％乙醇10mL，60℃加热溶解后，置于4℃环境中冷却重结晶12小时，后转置-20℃环境中进一步长晶8小时。过滤，将滤 饼置于35℃真空干燥箱中，干燥8小时。HPLC分析所得甘草酸单钠盐的纯度98.1％。 

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。 

Claims (10)

1.一种甘草酸盐的提取方法，其特征在于，所述方法以甘草酸为原料，采用闪式提取技术进行提取获得所述甘草酸盐。

2.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述甘草酸是以甘草根茎为原料，采用闪式提取技术进行提取获得，包括以下步骤：

a)将所述甘草根茎干燥粉碎后过筛，得到甘草粉；

b)以水作为溶剂，对所述甘草粉进行闪式提取，得到甘草酸水提液；

c)将所述甘草酸水提液的pH调节为1.5-2.5，分离沉淀物，并经洗涤、干燥后得到所述甘草酸。

3.如权利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述方法具有以下一个或多个特征：

(1)所述步骤a)中过10-100目筛，较佳地过20-80目筛，更佳地过40目筛；

(2)所述步骤b)中，所述甘草粉和所述溶剂的固液比为1:10-1:40g/mL；

(3)所述步骤b)中，所述闪式提取所用的转速为10000-16000转/分钟；

(4)所述步骤b)中，所述闪式提取的提取时间为0.5-5分钟；

(5)所述步骤b)中，所述闪式提取的提取温度为15-30℃，较佳地为15-25℃，更佳地为20℃；

(6)所述步骤c)中，采用水进行洗涤；

(7)所述步骤c)中，所述干燥是在30-50℃进行真空干燥。

4.如权利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：

将所述步骤c)中分离沉淀物后得到的上清液调节至中性，沉降去除固体，取上清液与水混合后，作为步骤b)中的溶剂，用于闪式提取，循环利用。

5.如权利要求1-4任一项所述的提取方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

ⅰ)将所述甘草酸干燥粉碎后过筛，得到甘草酸粉；

ⅱ)以90wt％-99wt％的乙醇水溶液作为溶剂，对所述甘草酸粉进行闪式提取，得到甘草酸醇提液；

ⅲ)将所述甘草酸醇提液的pH调节为7.5-8.5，分离沉淀物；

ⅳ)将所述沉淀物与酸反应后，经过滤、洗涤滤饼、干燥得到所述甘草酸盐，

其中，所述步骤ⅲ)中采用氨气、15wt％-30wt％的浓氨水、5wt％-30wt％氢氧化钾乙醇溶液或15wt％-30wt％氢氧化钠水溶液，调节所述甘草酸醇提液的pH值；

所述酸选自：氢氟酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水杨酸、三氟甲磺酸、萘磺酸、马来酸、柠檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢浆草酸、苹果酸、谷氨酸。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法具有以下一个或多个特征：

(1)所述步骤ⅰ)中过10-100目筛，较佳地过20-80目筛，更佳地过40目筛；

(2)所述步骤ⅱ)中，所述甘草酸粉和所述溶剂的固液比为1:10-1:40g/mL；

(3)所述步骤ⅱ)中，所述闪式提取所用的转速为10000-16000转/分钟；

(4)所述步骤ⅱ)中，所述闪式提取的提取时间为0.5-5分钟；

(5)所述步骤ⅱ)中，所述闪式提取的提取温度为15-30℃，较佳地为15-25℃，更佳地为20℃；

(6)所述步骤ⅲ)中，采用氨气、15wt％-30wt％的浓氨水、5wt％-30wt％氢氧化钾乙醇溶液或15wt％-30wt％氢氧化钠水溶液，调节所述甘草酸醇提液的pH值；

(7)所述步骤ⅳ)中，所述干燥是在30-50℃进行真空干燥；

(8)所述步骤ⅳ)中，所述沉淀物与所述酸的重量体积比为1g:1.5-5ml；

(9)所述步骤ⅳ)中，所述沉淀物与所述酸在30-60℃反应20-90min；

(10)所述步骤ⅳ)中，所述洗涤滤饼是依次采用所述酸、乙醇进行洗涤。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，将所述步骤ⅲ)中分离沉淀物后得到的上清液调节至中性，沉降去除固体，取上清液与乙醇混合后，作为步骤ⅱ)中的溶剂，用于闪式提取，循环利用。

8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法还包括步骤ⅴ)：对步骤ⅳ)获得的所述甘草酸盐进行结晶纯化。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述结晶纯化包括以下步骤：

ⅴ1)将所述甘草酸盐溶于75-95wt％的乙醇水溶液中，固液比为1:10-1:20g/mL，加热至50-60℃，加入0.5-2倍重量的活性炭粉末脱色2-5小时；

ⅴ2)对步骤ⅴ1)得到的混合物进行过滤，将滤液置于0-5℃进行冷却结晶；

ⅴ3)冷却结晶8-24hr后，再冷却至-40℃～-10℃至少8hr，过滤得到甘草酸盐湿晶体；

ⅴ4)将所述甘草酸盐湿晶体进行干燥后得到甘草酸盐纯品。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将步骤ⅴ4)获得的甘草酸盐纯品进行重结晶的步骤。