CN109081879A - 一种提取梵净山红茶多糖的工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：(1)原料预处理：(2)红茶多糖浸提；(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；(4)溶解多糖沉淀；(5)苯酚—浓硫酸显色；(6)测量溶液的吸光度；(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。本发明提出的一种提取梵净山红茶多糖的工艺，本发明以超声辅助浸提法提取红茶中多糖，分别料液比、提取时间、超声功率、提取温度等因素进行单因素探讨，并通过响应面优化法得到的最佳提取工艺条件为：料液比为1:25g/mL、提取时间35min、提取温度49℃、超声功率455W,红茶中多糖的提取率为5.114％。
Description
技术领域
本发明涉及红茶多糖技术领域，尤其涉及一种提取梵净山红茶多糖的工艺。
背景技术
红茶多糖是红茶中的一种功能性碳水化合物，因其水溶性强而被人体的肌肤所吸收，但是到目前为止关于多糖的提取工艺及其抗氧化研究相对较少。传统的茶多糖的提取方式为水溶醇沉法。本实验采用响应面优化法对红茶中的多糖进行超声提取工艺探索，以便为后期的红茶多糖提取提供足够的依据。为此，我们提出一种提取梵净山红茶多糖的工艺。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种提取梵净山红茶多糖的工艺。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
设计一种提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:15、1:20、1:25、1:30、1:35g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取15～75min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度20℃～60℃，超声功率195W～455W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
优选的，当料液比为1:25g/mL、提取时间35min、提取温度49℃、超声功率455W时，红茶中多糖的提取率为5.114％。
优选的，所述提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:25g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取30min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度49℃，超声功率455W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
优选的，所述提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:20g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取15min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度40℃，超声功率325W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
优选的，所述提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:30g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取45min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度60℃，超声功率390W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
本发明提出的一种提取梵净山红茶多糖的工艺，以超声辅助浸提法提取红茶中多糖，分别料液比、提取时间、超声功率、提取温度等因素进行单因素探讨，并通过响应面优化法得到的最佳提取工艺条件为：料液比为1:25g/mL、提取时间35min、提取温度49℃、超声功率455W,红茶中多糖的提取率为5.114％。
附图说明
图1为葡萄糖标准曲线。
图2为料液比对茶多糖提取率的影响数据分析图。
图3为超声时间对茶多糖提取率的影响数据分析图。
图4为超声温度对茶多糖提取率的影响数据分析图。
图5为超声功率对茶多糖提取率的影响数据分析图。
图6任意两个单因素相互作用对红茶中多糖提取率影响的组图。
具体实施方式
下面结合具体实施例来对本发明做进一步说明。
实施例一
一种提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:25g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取30min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度49℃，超声功率455W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
实施例二
一种提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:20g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取15min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度40℃，超声功率325W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
实施例三
一种提取梵净山红茶多糖的工艺，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:30g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取45min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度60℃，超声功率390W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
经测定，当料液比为1:25g/mL、提取时间35min、提取温度49℃、超声功率455W时，实施例一为最佳提取工艺，此时红茶中多糖的提取率为5.114％。
1，1本发明核心工艺的实验方法
1.1.1红茶多糖的提取工艺流程
原料预处理(加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；)→红茶多糖浸提(料液比1:25g/mL、34min、49℃、455W超声浸提，制得游离氨多糖提取液)→真空抽滤，浓缩，醇沉→溶解多糖沉淀(去离子水溶解定容50mL)→苯酚—浓硫酸显色→测量溶液的吸光度→计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
1.1.2红茶多糖的单因素实验
1.1.2.1料液比对提取率的影响
称取5份预处理后的红茶各1.00g，料液比分别为1:15、1:20、1:25、1:30、1:35g/mL料,提取时间为45min,提取温度为40℃，提取功率为325W，按照1.1.1的方法进行实验，探讨不同乙醇体积分数对其提取率的影响。
1.1.2.2提取时间对提取率的影响
称取5份预处理后的红茶各1.00g,提取时间分别为15、30、45、60、75min,料液比为1:30g/mL，提取温度为40℃，提取功率为325W,按照1.1.1的方法进行实验，探讨不同提取时间对其提取率的影响。
1.1.2.3提取温度对提取率的影响
称取5份预处理后的红茶各1.00g,提取温度分别为20、30、40、50、60℃,料液比为1:30g/mL，提取时间为45min提取功率为325W，按照1.1.1的方法进行实验，探讨不同提取温度对其提取率的影响。
1.1.2.4提取功率对提取率的影响
取5份预处理后的茶渣各1.00g,提取功率分别为195、260、325、390、455W,料液比为1:30g/mL，提取时间为45min提取温度为40℃按照1.1.1的方法进行实验，探讨不同提取功率对其提取率的影响。
1.1.3响应面优化实验
根据单因素实验结果,以料液比、提取时间、提取温度、提取功率四个因素为变量,以红茶提取液中多糖含量和提取率为指标值进行优化.采用4因素3水平的响应面优化分析方法求取优化的工艺参数,响应面实验的因素与水平设计见表1.Box-Behnken设计方案和结果见表2。
2结果与分析
2，1单因素实验
2.1.1料液比对提取率的影响
按照1.1.1中的实验方法，探讨料液比对红茶多糖提取率的影响，结果如图2所示。由图2可知，料液比1:30g/mL是一个临界点，在这个点左侧，提取率呈现一种上升的趋势，在这个点右侧，提取率反而呈现一种下降的趋势，出现上面的现象是因为:当水的比例较小时，多糖的溶解度较小，所以溶的就相对少些；当料液比达到1:30时，提取率达到最大，这可能是由于提取出来的多糖已经达到饱和浓度，如果继续增大料液比的量会稀释葡萄糖浓度，导致提取率下降。
2.2.2提取时间对提取率的影响
按照1.1.1中的实验方法，探讨提取时间对红茶多糖提取率的影响，结果如图3所示。由图3可知，30min到60min这段时间内，提取率跟提取时间呈线性关系，45℃是一个临界点，在这个点左侧，提取率呈现一种上升的趋势，在这个点右侧，提取率呈现下降的趋势，原因是时间越长，水中溶的多糖越多，提取率增大，但是时间太长，细胞受到超声波影响，导致提取率降低。所以，最适超声提取时间是45min。
2.2.3提取温度对提取率的影响
按照1.1.1中的实验方法，探讨提取时间对红茶多糖提取率的影响，结果如图4所示。由图3可知，在20℃到40℃时，提取率和温度呈线性关系，40℃是临界温度，在这个点左侧呈现上升趋势，在这个右侧呈现下降的趋势，其原因是温度升高，多糖溶的越多，提取率越大，温度过高，多糖发生水解，提取率下降。所以，最适温度为40℃。
2.2.4超声功率对提取率的影响
按照1.1.1中的实验方法，探讨超声功率对红茶多糖提取率的影响，结果如图5所示。由图4可知，当功率是195W到390W时，提取率和功率呈线性关系，390W是一个临界点，在这个点左侧，提取率呈现上升的趋势，在这个点右侧，提取率呈现下降的趋势，其原因是增大功率，对分子的破坏力就越大，但是如果功率太大，对多糖的结构具有破坏作用，导致了提取率下降。所以，最适功率是390W。
2，3响应面优化及验证性实验
根据单因素实验结果,以料液比、提取时间、提取温度、提取功率四个因素为变量,以红茶提取液中多糖含量和提取率为指标值进行优化。采用4因素3水平的响应面优化分析方法求取优化的工艺参数,响应面实验的因素与水平设计见表1，Box-Behnken设计方案和结果见表2，回归方程的方差分析见表3，回归方程的可靠性分析见表4，验证性实验的结果见表5，任意两个单因素相互作用对红茶中多糖提取率影响见图6。
表1因素与水平设计
表2 Box-Behnken设计方案和结果
表3回归方程的方差分析
表4回归方程的可靠性分析
表5验证性实验的结果见
由表4得当P<0.05时，表明各因素对实验的影响或各因素之间的交互影响对多糖提取率的影响是显著的，与实际的实验拟合相对较好。当P>0.1时则表明各单因素或单因素之间的相互作用对多糖提取率的影响较小。表4显示了C(功率)、A2、B2、C2、D2都显著，说明了各因素对多糖的提取率的影响不是简单的线性关系。此表也显示了模型显著(P<0.05),失拟项不显著，表明了模型的拟合程度很好，受到干扰项的影响很小。由表5得R2(决定系数)＝0.7664，表明了有76.64％的值和此模型恰好吻合。校正决定系数AdjR2＝0.5328，说明了53.28％的实验响应面值的可变性可以用此模型来解释说明。变异系数CV＝2.4566％及其精密度Adeq Precision＝6.1143，这就说明了此线性回归方程的精密度和稳定性良好。所以，可用此方程来很好的描述超声提取红茶中的多糖具有很好的拟合性。
由表5得出根据最佳条件结合实验室的实际操作情况，必须将理论上的最佳工艺条件调整为料液比1:25g/mL，时间35min,功率455W,温度49℃，以此条件开始实验。其得到的结果是理论提取率5.11675％，实际提取率5.114％。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (5)
1.一种提取梵净山红茶多糖的工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:15、1:20、1:25、1:30、1:35g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取15～75min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度20℃～60℃，超声功率195W～455W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
2.根据权利要求1所述的一种提取梵净山红茶多糖的工艺，其特征在于，当料液比为1:25g/mL、提取时间35min、提取温度49℃、超声功率455W时，红茶中多糖的提取率为5.114％。
3.根据权利要求1所述的一种提取梵净山红茶多糖的工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:25g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取30min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度49℃，超声功率455W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
4.根据权利要求1所述的一种提取梵净山红茶多糖的工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:20g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取15min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度40℃，超声功率325W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
5.根据权利要求1所述的一种提取梵净山红茶多糖的工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)原料预处理：将梵净山红茶茶叶烘干，加石油醚浸泡24h，抽滤，滤渣烘干粉碎后室温密封保存；
(2)红茶多糖浸提：
a、将步骤(1)中制得的原料按料液比1:30g/mL加入蒸馏水中震荡均匀，制得固液混合物；
b、将步骤a中得到的固液混合物超声提取45min后即为红茶多糖提取液，其中，浸提温度60℃，超声功率390W；
(3)将红茶多糖提取液抽滤，浓缩，加入95％乙醇过夜；
(4)溶解多糖沉淀：吸取步骤(3)中溶液及沉淀于离心管中离心15min，上清液回收，向离心试管中加入微量的去离子水，之后轻轻地振摇试管，观察试管变化直到多糖溶解完全，将溶液倒入50mL的容量瓶中定容；
(5)苯酚—浓硫酸显色：将步骤(4)中处理后的样品，用移液管吸取1mL溶液于试管中，滴加1mL去离子水，再吸取1mL浓度为5％的苯酚溶液加入试管中，移取5mL浓度为98％的硫酸溶液于试管中，最后，滴加2mL去离子水，用胶头滴管吸取使其上下层完全混合，加完后放入沸腾的恒温水浴锅中15min，取出冷却；
(6)测量溶液的吸光度：用蒸馏水作为对比，将步骤(5)样品中在波长为490nm处测量溶液的吸光度；
(7)制作葡萄糖标准曲线，计算提取率，得出最佳提取工艺条件，工艺完成。
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