CN109078086A - 一种治疗精子dna损伤的中药 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗精子DNA损伤的中药，由以下重量计的原料药物：黄芪30‑50g、枸杞子20‑30g、五味子15‑25g、车前子12‑22g和川牛膝15‑25g制成；本发明采用纯天然的原料中草药物制成，原料丰富，成本低，各药物组分间有机配合，协同增效，配伍合理，益气、补肾类药能清除自由基，抗氧化；活血类药物能够清除自由基，改善组织血液循环，制备方法简单，服用方便，疗效佳，是治疗精子DNA损伤并导致不育症药物上的一大创新，经济和社会效益显著。

Description

一种治疗精子DNA损伤的中药

技术领域

本发明涉及中药，特别是一种治疗精子DNA损伤的中药。

背景技术

育龄夫妇，性生活正常且未采取任何避孕措施，女方正常，由于男方因素致女方在一年内不能自然受孕者，称为男性不育症。在男性不育症患者中，有15％的患者精液常规检查是正常的。精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index，DFI)能够反映遗传物质DNA的完整性或损伤程度，精子DNA损伤能影响卵子受精及胚胎发育，甚至导致不良的妊娠结局，可作为一个新的评价精液质量和预测生育能力的重要指标。精子正常功能的发挥依赖于精子DNA的完整。任何形式精子染色体异常或DNA损伤都会降低男性生育潜能，并能影响后代健康。

研究表明，精子DNA完整性受生活方式、环境、身体健康状况及不明原因等诸多因素的影响，病因复杂。现代医学对本病的治疗多采用抗氧化剂、抗感染等治疗方法，由于用药单一，又不能采取针对性的治疗措施，故临床疗效不佳。中医药在本病的治疗中发挥了较好的作用，但临床各医家对本病的治疗多凭各自经验，采用自拟方药，既无成熟的理论，亦无效果满意的成方，可复制性差，缺乏循证医学支持。

精子DNA损伤性不育病机为“正虚易感”，正气是机体维持自身正常运行(阴阳平衡、脏腑协调)的能力，是机体对抗外界干扰、适应内外环境变化的能力，是机体抗病的能力以及病后康复和预防复发的能力。《黄帝内经·素问》：“正气存内，邪不可干；邪之所凑，其气必虚。”具体到脏腑，肾气是正气在脏腑功能中的具体体现。正气充足与否，决定着肾中精气盛衰。祖国医学认为，肾为先天之本，主人体生长、发育、生殖。《素问·六节脏象论》曰：“肾者主蛰，封藏之本，精之处也。”肾中精气盛衰，决定着人体强弱和生殖机能正常与否。肾主外，藏先天之精，化生元气，有调节机体适应环境、御邪防病的功能。正气维持着精子正常发生与形成的全过程：①正气协调脏腑、经络、气血，为精子生成创造稳定的环境；②正气监视、管理精子的生成过程，维持精子的新陈代谢；③正气可抵抗内外环境变化对精子的影响，保证生精过程的稳定；④正气及时发现生成的畸形率、DNA碎片率高的精子，并进行修复或清除。正气亏虚，肾中精气不足，一则脏腑功能紊乱，经络、气血运行失常，精子生成环境受到影响；二则正气监视、管理功能下降，且不足以抵抗内外环境变化，生精过程受到影响；最后修复或清除功能下降。这些均可致精子DNA碎片率增高，影响生育；因此，提供一种治疗精子DNA损伤的中药是必须要解决的技术问题。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的是提供一种治疗精子DNA损伤的中药，可有效解决由于精子DNA损伤以及造成的不孕不育症的问题。

本发明采用中医中药机理，紧抓精子DNA损伤性不育的主要病机—正虚易感，通过运用扶正益气，补肾活血类药物清除自由基，改善精子生成及成熟微环境，从而达到降低精子DNA损伤，改善生育的目的，据此，本发明解决的技术方案是，一种治疗精子DNA损伤的中药，由以下重量计的原料药物：黄芪30-50g、枸杞子20-30g、五味子15-25g、车前子12-22g和川牛膝15-25g制成；其中，先将车前子用纱布包住，再与其他原料药物混合在一起，加入500-700ml水，浸泡20-30min，武火煮沸，改用文火煎煮30-60min，过滤，得第一滤液，滤渣加500-700ml水，武火煮沸，改用文火煎煮30-60min，过滤，得第二滤液，合并两次滤液，浓缩至200-400ml。

本发明采用纯天然的原料中草药物制成，原料丰富，成本低，各药物组分间有机配合，协同增效，配伍合理，益气、补肾类药能清除自由基，抗氧化；活血类药物能够清除自由基，改善组织血液循环，制备方法简单，服用方便，疗效佳，是治疗精子DNA损伤并导致不育症药物上的一大创新，经济和社会效益显著。

具体实施方式

以下结合具体情况和实施例对本发明的具体实施方式做详细说明。

本发明可由以下实施例给出。

实施例1：本发明一种治疗精子DNA损伤的中药，由以下重量计的原料药物：黄芪35-45g、枸杞子22-28g、五味子18-22g、车前子15-20g和川牛膝18-22g制成；其中，先将车前子用纱布包住，再与其他原料药物混合在一起，加入550-650ml水，浸泡20-30min，武火煮沸，改用文火煎煮30-60min，过滤，得第一滤液，滤渣加550-650ml水，武火煮沸，改用文火煎煮30-60min，过滤，得第二滤液，合并两次滤液，浓缩至200-400ml。

实施例2：本发明一种治疗精子DNA损伤的中药，由以下重量计的原料药物：黄芪30g、枸杞子20g、五味子15g、车前子12g和川牛膝15g制成；制备方法同实施例1。

实施例3：本发明一种治疗精子DNA损伤的中药，由以下重量计的原料药物：黄芪40g、枸杞子25g、五味子20g、车前子17g和川牛膝20g制成；制备方法同实施例1。

实施例4：本发明一种治疗精子DNA损伤的中药，由以下重量计的原料药物：黄芪50g、枸杞子30g、五味子25g、车前子22g和川牛膝25g制成；制备方法同实施例1。

在上述药物中，其中：

黄芪，系豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根，主产于内蒙古、山西、黑龙江等地，春秋二季采挖，除去须根及根头，晒干，切片。本品甘温，归脾、肺经，具有补气健脾、益气固表、利尿消肿等功效。《本草汇言》：“补肺健脾，实卫敛汗，驱风运毒之药也。”主治脾气虚证、肺气虚证、气虚自汗、气血亏虚或疮疡难溃难腐等证。现代研究表明，本品含苷类、多糖、黄酮、氨基酸、微量元素等成分，具有促进机体代谢、增强和调节机体免疫功能、抗菌、抗衰老、抗缺氧、抗辐射、抗疲劳、利尿、兴奋呼吸、降血脂、保肝等多种作用。

枸杞子，系茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实。西枸杞主产于主产宁夏，津枸杞主产于河北。此外，河南、陕西、四川、山西、江苏等地亦产。夏、秋果实成熟时采摘，除去果柄，置阴凉处晾至果皮起皱纹后，再暴晒至外皮干硬、果肉柔软即得。遇阴雨可用微火烘干。本品甘平，归肝、肾经，具有滋补肝肾，益精明目之功效。《药性论》：“能补益精诸不足，易颜色，变白，明目，安神。”用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明等。现代研究表明，本品含枸杞多糖、胡萝卜素、硫胺素、核黄素、烟酸、抗坏血酸等，尚分离出β-谷甾醇、亚油酸等成分，具有调节免疫、保护生殖系统、抗衰老、抗肿瘤、降血糖、抗脂肪肝、降血压、提高视力、保肝等作用。

五味子，为木兰科植物五味子或华中五味子的干燥成熟果实。前者习称“北五味子”，后者习称“南五味子”。产于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、山西、宁夏、甘肃、山东等地，秋季果实成熟时采摘，晒干或蒸后晒干，除去果梗及杂质。本品酸、甘，温，归肺、心、肾经，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的功效。《本经》：“主益气，咳逆上气，劳伤羸度，补不足，强阴，益男子精。”主治肺虚喘咳，口干作渴，自汗，盗汗，劳伤羸瘦，梦遗滑精，久泻久痢。现代研究表明，本品含挥发性成分、木脂素类和有机酸类。亦含柠檬醛、叶绿素、甾醇、维生素C、维生素E、糖类、树脂和鞣质。药理研究表明，五味子有增强机体免疫力、抗菌、强心、保肝等作用。

车前子，是大车前、车前、平车前、海滨车前、长叶车前的别称；药用车前子为车前科植物车前或平车前的干燥成熟种子。主产于黑龙江、辽宁、河北等地。夏、秋二季种子成熟时采收果穗，晒干，搓出种子。本品性味甘寒，入肾、膀胱、肝、肺经，功能利水通淋、渗湿止泻、清肝明目、清热化痰。《药性论》：“能去风毒，肝中风热，毒风冲眼目，赤痛障翳，脑痛泪出，去心胸烦热。”治小便不通，淋浊，带下，尿血，暑湿泻痢，咳嗽多痰，湿痹，目赤障翳等证。现代研究表明，本品含多量粘液质、桃叶珊瑚甙，并含车前子酸、胆碱、腺嘌呤、琥珀酸、树脂等，尚含维生素A、B₁。药理研究表明，本品有利尿及促进消化液分泌增加、可促进关节囊滑膜结缔组织增生等作用。

川牛膝，系苋科植物川牛膝的干燥根，主要产于四川、云南、贵州、河北等地。秋、冬二季采挖，除去芦头、须根及泥沙，炕干或晒干。本品味甘、微苦，性平，归肝、肾经，有逐瘀通经，通利关节，利尿通淋等功效。《四川中药志》：祛风利湿，通经散血。治寒湿腰腿骨痛，足痿筋挛，妇女经闭及症瘕，淋病，尿血，阴痿、失溺。用于经闭症瘕，胞衣不下，关节痹痛，足痿筋挛，尿血血淋，跌扑损伤等证。现代研究表明，本品含β-蜕皮甾酮及微量元素钛(Ti)等成分。

上述药物，黄芪甘温，归脾、肺经，具有补气健脾、益气固表、利尿消肿等功效，为补中益气，主治脾气虚证、肺气虚证、气虚自汗、气血亏虚或疮疡难溃难腐等，也就是说，黄芪一可补益脾气，改善少气懒言、倦怠乏力等脾气虚衰症状；二可补益肾气，提高精子活力，故为君药。枸杞子甘、平，归肝、肾经，具有滋补肝肾，益精明目之功效，可用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明等，五味子酸、甘，温，归肺、心、肾经，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的功效，主治肺虚喘咳，口干作渴，自汗，盗汗，劳伤羸瘦，梦遗滑精，久泻久痢，车前子性味甘寒，入肾、膀胱、肝、肺经，功能利水通淋、渗湿止泻、清肝明目、清热化痰。治小便不通，淋浊，带下，尿血，暑湿泻痢，咳嗽多痰，湿痹，目赤障翳等证。三者共为臣药，有助君药补益肾精之效；川牛膝，味甘、微苦，性平，归肝、肾经，有逐瘀通经，通利关节，利尿通淋等功效。用于此方能补肝肾、活血化瘀通络、利尿，功兼佐使之药用。全方选药精细、组方严谨、有效组合、配伍得当、协同增效，共奏扶正益气，补肾活血之功。该方并经临床应用，取得了很好的效果，其有关资料如下。

1、西医诊断标准

1.1精子DNA损伤诊断标准

根据《世界卫生组织男性不育标准化检查与诊疗手册》和DFI检测指标执行：育龄夫妇，性生活正常且未采取任何避孕措施，女方正常，由于男方因素致女方在一年内不能自然受孕，并在符合精液分析检查的时间(禁欲2～7天)内所做精液分析报告中，15％≤DFI＜80％的病症。

1.2精子DNA碎片化率异常诊断标准：经稀释、染色、酸处理及AO染色的标本。

依据精子染色质结构分析(SCSA)检测方法的参考标准：DFI＜15％为正常，15％≤DFI＜30％为中度碎片化，DF1≥30％为高度碎片化。

2、中医辨证标准

参照《中药新药临床研究指导原则》及《中医男科学》所述气虚、肾虚、血瘀等辨证要点：主症：不育，性欲淡漠，少气懒言，精子稀少，精子活动力低下；次症：腰膝酸软，夜尿增多，舌淡苔薄白或舌暗红有瘀斑瘀点，脉沉细或弦涩。

以上主症“不育”必须具备，兼具其余各项中1项及次症中的2项(必兼舌脉)，即可诊断。

3、纳入标准

①符合精子DNA损伤的西医诊断标准；

②符合中医证型诊断标准；

③符合年龄在22～45岁之间的患者；

④符合医学伦理学标准；

⑤签署知情同意书。

4、排除标准

①外生殖器先天性器质性病变者；

②泌尿生殖道梗阻及感染者；

③染色体异常者(包括核型异常及Y染色体微缺失)；

④合并有导致内分泌功能异常的疾病者；

⑤配偶有全身严重器质性疾病，不能充分配合者；

⑥合并严重心、脑血管疾病，肝、肾功能不全等严重原发性疾病，及精神病患者；

⑦需同时应用可能影响药品疗效和安全性评价药物者。

5、脱落标准与剔除标准

5.1病例脱落标准

①发生严重不良事件、并发症和特殊生理变化，不宜继续接受试验者；

②试验过程中自行退出者；

③因其他各种原因疗程未结束退出试验、失访的病例；

④未按规定用药，无法判定疗效，或资料不全等影响疗效或安全性判断者。

5.2病例剔除标准

①未按医嘱应用药物治疗者；

②在随机化之后没有任何数据者给予剔除。

6、分组及实验方法

筛选80例合格进入随机化试验的受试者，按随机数字表法随机均分为2组，每组40例，治疗组采用本发明中药治疗，对照组采用左卡尼汀口服液治疗。本研究采用随机、平行、对照的临床试验方法，研究方案报请医院伦理委员会审批后进行。

7、治疗方案

治疗组采用本发明中药治疗，每日2次，分早晚两次饭后温服。对照组采用组卡尼汀口服液，每日3次，每次1支，口服。2组均12周为1个疗程，1个疗程后统计疗效。

注意事项：①治疗前2周开始到治疗结束停用其他治疗本病及影响本病的药物；②若期间有其他疾病必须治疗者，应尽量服用对本病无影响或影响较小的药物；③服药期间一定要戒除烟酒，禁止桑拿及盆(池)浴，尽量避免接触高温、放射线污染、化学毒物污染等环境；④治疗期间不禁房事。

8、疗效评定

8.1主要效应指标：总有效率，中医证候评分(见表1)，治疗前、后精子DNA碎片率及精子活力、配偶妊娠率(包括生化妊娠率和临床妊娠率)。

表1中医证候评分表

8.2安全性评价指标：治疗前后监测患者生命体征及血常规、尿常规、肝肾功、电解质情况。8.3中医证候疗效评定标准：

依据《中药新药临床研究指导原则1993版》进行评定。

痊愈：中医临床症状、次症消失或基本消失，证候总评分减少≥90％；

显效：中医临床症状、次症明显改善，60％≤证候总评分减少＜90％；

有效：中医临床症状、次症均有好转，30％≤证候总评分减少＜60％；

无效：中医临床症状、次症无改善，甚至加重，证候总评分减少＜30％。

积分变化公式(尼莫地平法)为：[(治疗前总评分-治疗后总评分)÷治疗前总评分]

×100％

8.4综合疗效评定标准：

参考《指导原则》中不育症相关内容拟定：

①痊愈：药物治疗期间精子DFI＜15％或治疗期间配偶怀孕；

②显效：配偶未怀孕，但精液分析参数及精子DFI指数恢复正常，15％≤DFI＜30％；

③有效：精液分析主要参数有改善，精子DFI≥30％且下降比例＞30％者；

④无效：精液分析各项参数及DFI与治疗前无明显变化，甚至加重者。

9、统计学处理

①计量资料：先进行正态性检验，符合正态分布者进行t检验或方差计算，方差计算前进行方差齐性检验。两组间比较采用t检验，不符合正态性分布者则采用两组间秩和检验；组内治疗前后自身比较采用配对t检验(Paired-Samples T Test)，不符合正态性分布者则采用配对秩和检验(2Related Samples，Wilcoxon法)。多组间两两比较符合正态性分布、方差齐者采用方差计算(one-way ANOVA)，两两组间比较用LSD法；不符合正态分布或方差不齐者用Wilcoxon秩和检验。

②计数资料：采用秩和检验，两两比较用Wilcoxon秩和检验；两个以上组间比较用Kruskal-Wallis检验。两个总体率(或构成比)之间比较，用χ²检验或确切概率法，多个样本率或构成比之间比较，采用列联表χ²检验。

③等级资料：采用Kruskal-Wallis H检验。α取0.05标准，以P＜α为有显著性差异。

总有效率＝(痊愈+显效+有效)/总例数×100％

两组患者总体疗效比较(见表2)

表2两组患者总体疗效比较(％)

组别	n(例)	痊愈	显效	有效	无效	总有效率(％)
							治疗组	40	11	16	10	3	92.50
对照组	40	6	11	12	11	72.50

注：两组总有效率比较，对照组为72.50％，治疗组为92.50％，χ²＝5.541，P＜0.05，有统计学意义。

两组患者治疗前后中医证候总评分比较(见表3)

表3两组患者治疗前后中医证候总评分比较

组别	n(例)	治疗前	治疗后
				治疗组	40	13.50±4.70	5.10±2.80
对照组	40	12.80±5.20	9.50±3.30

注：两组于治疗前中医症候总评分比较无显著性差异，t＝2.832，P＞0.50；治疗后两组中医症候积分比较，t＝0.159，P＜0.05，故治疗后两组差别有统计学意义。

安全性指标异常率情况

经统计学处理，治疗组和对照组各项安全性指标血压、脉搏、心电图、血、尿常规化验，肝、肾功能，治疗前后比较均无显著差异(P＞0.05)。

两组患者不良反应观察(见表4)

表4治疗组和对照组患者不良反应观察(％)

组别	n(例)	恶心、呕吐	头晕	口干	不良反应发生率(％)
						治疗组	40	0(0.0)	0(0.0)	0(0.0)	0.0
对照组	40	2(5.0)	0(0.0)	3(7.5)	12.5

注：两组患者治疗后的不良反应观察，对照组为12.5％，治疗组为0.0％，χ²＝5.333，P＜0.05，有统计学意义。

结论

由上述表明，本发明中药稳定可靠，治疗效果好，不良反应小，无毒副作用，在治疗精子DNA损伤性不育上，能明显改善患者精液质量及精子DNA碎片率，减少少气懒言、腰膝酸软等症状，降低中医证候总评分，增加综合疗效评分总评分，为精子DNA损伤性不育提供了良好的治疗条件，有效率达到92％以上，是中医药学上的一大创造，有实际的临床意义，是治疗精子DNA损伤药物上的一大创新，有良好的社会和经济效益。

Claims (5)

1.一种治疗精子DNA损伤的中药，其特征是：由以下重量计的原料药物：黄芪30-50g、枸杞子20-30g、五味子15-25g、车前子12-22g和川牛膝15-25g制成；其中，先将车前子用纱布包住，再与其他原料药物混合在一起，加入500-700ml水，浸泡20-30min，武火煮沸，改用文火煎煮30-60min，过滤，得第一滤液，滤渣加500-700ml水，武火煮沸，改用文火煎煮30-60min，过滤，得第二滤液，合并两次滤液，浓缩至200-400ml。

2.根据权利要求1所述的治疗精子DNA损伤的中药，其特征是：由以下重量计的原料药物：黄芪35-45g、枸杞子22-28g、五味子18-22g、车前子15-20g和川牛膝18-22g制成。

3.根据权利要求1所述的治疗精子DNA损伤的中药，其特征是：由以下重量计的原料药物：黄芪30g、枸杞子20g、五味子15g、车前子12g和川牛膝15g制成。

4.根据权利要求1所述的治疗精子DNA损伤的中药，其特征是：由以下重量计的原料药物：黄芪40g、枸杞子25g、五味子20g、车前子17g和川牛膝20g制成。

5.根据权利要求1所述的治疗精子DNA损伤的中药，其特征是：由以下重量计的原料药物：黄芪50g、枸杞子30g、五味子25g、车前子22g和川牛膝25g制成。