CN109010915A - 有序胶原支架及其在制备修复脊髓损伤的产品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种有序胶原支架及其在制备修复脊髓损伤的产品中的应用。所述有序胶原支架包括有序胶原海绵圆柱体支架，所述有序胶原海绵圆柱体支架包括主要由复数个孔道结构有序排列组成的三维结构，所述有序胶原海绵圆柱体支架内掺杂有脂质体，所述脂质体内包裹具有微管稳定作用的抗癌药物。本发明的有序胶原支架具有有序孔道结构，可为神经轴突生长提供接触诱导作用；更重要的是脂质体中具有微管稳定作用的抗癌药物的缓释可缓解脊髓损伤后微环境中髓鞘蛋白的影响，促进移植的神经干细胞向神经元分化，并促进神经轴突的生长，以达到促进受损伤的脊髓神经再生及其运动功能修复。

Description

有序胶原支架及其在制备修复脊髓损伤的产品中的应用
技术领域
本发明涉及一种用于修复脊髓损伤的有序胶原支架及其制备方法，以及其在制备修复脊髓损伤的产品中的应用，属于生物医学材料技术领域。
背景技术
脊髓损伤是临床上常见的严重中枢神经系统损伤，往往造成损伤平面下永久性感觉和运动功能障碍，给患者和家人带来巨大痛苦。而且，脊髓损伤的治疗仍面临重大挑战。
干细胞移植治疗为脊髓损伤修复带来了希望。神经干细胞具有自我更新，以及向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜能，分化得到的神经元轴突再生，有望与本体实现突触连接，促进神经损伤修复(Axonal growth and connectivity from neuralstem cell grafts in models of spinal cord injury.Current Opinion inNeurobiology,2014,27:103)。但是由于脊髓损伤部位微环境恶化、分泌髓鞘相关蛋白等抑制因子，因此移植到损伤部位的神经干细胞主要向星形胶质细胞分化，却很少向神经元分化，不利于脊髓损伤修复。采用生物支架材料桥接脊髓缺损区，同时构建适宜神经干细胞向神经元分化的微环境，是提高脊髓损伤修复效果的有效方法(A review of the effectsof the cell environment physicochemical nanoarchitecture on stem cellcommitment.Biomaterials,2014,35,5278)。
胶原蛋白具有免疫原性低和生物相容性好的特点，可以作为引导神经再生的生物材料。具有有序孔道结构的神经管道有利于神经轴突的延伸生长，进而与脊髓两断端神经元的连接。功能化的胶原支架可改善损伤微环境，调控神经干细胞体内分化。本案发明人前期研究制备了交联有表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)抗体西妥昔的胶原支架，发现可促进移植到脊髓损伤区的神经干细胞向神经元分化，抑制其向星形胶质细胞分化，提高脊髓损伤大鼠运动功能的恢复(Promotion of neuronaldifferentiation of neural progenitor cells by using EGFR antibodyfunctionalized collagen scaffolds for spinal cord injury repair.Biomaterials,2013,34,5107)。
具有微管稳定作用的多种抗癌药物，例如紫杉醇等，已报道有利于脊髓损伤以及神经退行性疾病的修复。通过鞘内局部注射紫杉醇到脊髓损伤区发现可抑制纤维化瘢痕的形成，促进神经轴突的生长，最终实现了脊髓损伤大鼠运动功能的恢复。但是联合微管稳定药物调控神经干细胞向神经元分化在国内外尚未见有文献资料报道。
研究表明，传统鞘内给药途径取得的临床效果并不理想，因此，亟需找到一种理想的负载小分子药物方式，且能使其在脊髓损伤处微环境一定时间内维持有效浓度的方法。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种用于修复脊髓损伤的有序胶原支架、其制备方法与其在制备修复脊髓损伤的产品中的应用，以克服现有技术中的不足。
为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：
本发明实施例提供了有序胶原支架在制备修复脊髓损伤的产品中的应用，其中，所述有序胶原支架包括有序胶原海绵圆柱体支架，所述有序胶原海绵圆柱体支架包括主要由复数个孔道结构有序排列组成的三维结构，所述有序胶原海绵圆柱体支架内掺杂有脂质体，所述脂质体内包裹具有微管稳定作用的抗癌药物，通过负载包含抗癌药物的脂质体，使得所述有序胶原支架担载神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，从而促进受损伤的脊髓神经再生及功能修复。
本发明实施例还提供了一种有序胶原支架，其包括有序胶原海绵圆柱体支架，所述有序胶原海绵圆柱体支架包括主要由复数个孔道结构有序排列组成的三维结构，所述有序胶原海绵圆柱体支架内掺杂有脂质体，所述脂质体内包裹具有微管稳定作用的抗癌药物，通过负载包含抗癌药物的脂质体，使得所述有序胶原支架担载神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，从而促进受损伤的脊髓神经再生及功能修复。
本发明实施例还提供了一种制备前述的有序胶原支架的方法，其包括：
将胶原原材料溶解于0.2～1mol/L醋酸中并于2～8℃温度中静置过夜，混合均匀后加入2～10mol/L碱液中和，得到的均匀液体放入截留分子量为3000～5000的透析袋中，用去离子水透析4～6天，透析期间每3～6h换一次去离子水，透析后的溶液放入直径为4～10mm的模具中，之后使模具一端处于-150～-80℃，得到有序胶原海绵圆柱体支架；
向所述有序胶原海绵圆柱体支架中滴加包裹具有微管稳定作用的抗癌药物的脂质体，之后于25～37℃孵育1～3h，获得所述有序胶原支架。
本发明实施例还提供了一种修复脊髓损伤的功能产品，其包含所述有序胶原支架。
与现有技术相比，本发明的优点包括：
本发明提供的用于修复脊髓损伤的有序胶原支架具有有序孔道结构，可为神经轴突生长提供接触诱导作用；更重要的是脂质体中具有微管稳定作用的抗癌药物的缓释可缓解脊髓损伤后微环境中髓鞘蛋白的影响，促进移植的神经干细胞向神经元分化，并促进神经轴突的生长，以达到促进受损伤的脊髓神经再生及其运动功能修复，对危害人民健康较大的创伤性中枢神经疾病进行临床前研究，将会有力地推动整个创伤性中枢神经疾病治疗研究领域的发展。
附图说明
图1为本发明一典型实施例提供的有序胶原支架用于脊髓损伤修复的过程示意图；
图2a为本发明一典型实施例中包载紫杉醇的脂质体的原子力显微镜(AFM)照片；
图2b为本发明一典型实施例中包载紫杉醇的脂质体的粒径分布图；
图2c为本发明一典型实施例中的有序胶原支架的扫描电镜(SEM)照片；
图2d为本发明一典型实施例中的有序胶原支架的横截面SEM照片；
图3a-图3d分别为担载紫杉醇的脂质体的浓度为0nM、1nM、5nM、10nM的有序胶原支架的电子显微镜照片；
图3e为担载紫杉醇的脂质体的浓度为0nMol、1nMol、5nMol、10nMol的有序胶原支架对存在髓鞘蛋白的环境中培养的神经干细胞分化比例的统计结果示意图；
图4a为大鼠损伤部位暴露出的脊髓照片；
图4b为大鼠损伤部位4mm缺损脊髓全横断损伤部位照片；
图4c为移植的有序胶原支架材料的照片；
图4d为将有序胶原支架材料的照片植入大鼠脊髓全横断损伤部位的照片；
图4e为大鼠损伤部位治疗2个月后取材照片；
图5a为担载紫杉醇的脂质体的浓度为0nMol、0.3nMol、5nMol、10nMol的有序胶原支架移植入大鼠脊髓全横断部位的NSCs向成熟神经元分化情况照片；
图5b为担载紫杉醇的脂质体的浓度为0nMol、0.3nMol、5nMol、10nMol的有序胶原支架移植入大鼠脊髓全横断部位的NSCs向成熟神经元分化比例的统计结果示意图；
图6为担载不同浓度紫杉醇的脂质体的有序胶原支架复合神经干细胞移植入大鼠脊髓全横断部位的神经纤维生长情况照片；
图7a和图7b为有序胶原支架移植入大鼠脊髓全横断部位2个月后大鼠运动功能恢复情况示意图。
具体实施方式
鉴于现有技术中的不足，本案发明人经长期研究和大量实践，得以提出本发明的技术方案。如下将对该技术方案、其实施过程及原理等作进一步的解释说明。
本发明实施例的一个方面提供的有序胶原支架在制备修复脊髓损伤的材料中的应用。
在上述应用中，所述有序胶原支架包括有序胶原海绵圆柱体支架，所述有序胶原海绵圆柱体支架包括主要由复数个孔道结构有序排列组成的三维结构，所述有序胶原海绵圆柱体支架内掺杂有脂质体，所述脂质体内包裹具有微管稳定作用的抗癌药物，通过负载包含抗癌药物的脂质体，使得所述有序胶原支架担载神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，从而促进受损伤的脊髓神经再生及功能修复。
作为优选方案之一，所述有序胶原海绵圆柱体支架的孔隙率为80～95％。
作为优选方案之一，所述有序胶原海绵圆柱体支架的直径为4～10mm，长度为2～10mm。
作为优选方案之一，所述有序胶原海绵圆柱体支架中孔道结构的孔道直径为30～50μm。
作为优选方案之一，所述脂质体的粒径为40～200nm。
进一步的，所述有序胶原海绵圆柱体支架中抗癌药物的含量为0.01～10nmol。
进一步的，所述抗癌药物包括紫杉醇。
藉由上述技术方案，本发明通过担载包含微管稳定药物的脂质体的有序胶原支架复合神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，构建成有利于受损伤脊髓神经再生及功能修复的有序胶原支架。
在上述应用中，所述有序胶原支架的应用方法包括：将前述的有序胶原支架移植到脊髓横断性损伤处，使得所述有序胶原支架担载神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，从而促进受损伤的脊髓神经再生及功能修复。
本发明实施例的另一个方面还提供了一种有序胶原支架，其包括有序胶原海绵圆柱体支架，所述有序胶原海绵圆柱体支架包括主要由复数个孔道结构有序排列组成的三维结构，所述有序胶原海绵圆柱体支架内掺杂有脂质体，所述脂质体内包裹具有微管稳定作用的抗癌药物，通过负载包含抗癌药物的脂质体，使得所述有序胶原支架担载神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，从而促进受损伤的脊髓神经再生及功能修复。
作为优选方案之一，所述有序胶原海绵圆柱体支架的孔隙率为80～95％。
作为优选方案之一，所述有序胶原海绵圆柱体支架的直径为4～10mm，长度为2～10mm。
作为优选方案之一，所述有序胶原海绵圆柱体支架中孔道结构的孔道直径为30～50μm。
作为优选方案之一，所述脂质体的粒径为40～200nm。
进一步的，所述有序胶原海绵圆柱体支架中抗癌药物的含量为0.01～10nmol。
进一步的，所述抗癌药物包括紫杉醇。
本发明实施例的另一个方面提供的有序胶原支架的制备方法，其包括：
将胶原原材料溶解于0.2～1mol/L醋酸中并于2～8℃温度中静置过夜，混合均匀后加入2～10mol/L碱液中和，得到的均匀液体放入截留分子量为3000～5000的透析袋中，用去离子水透析4～6天，透析期间每3～6h换一次去离子水，透析后的溶液放入直径为4～10mm的模具中，之后使模具一端处于-150～-80℃，得到有序胶原海绵圆柱体支架；
向所述有序胶原海绵圆柱体支架中滴加包裹具有微管稳定作用的抗癌药物的脂质体，之后于25～37℃孵育1～3h，获得所述有序胶原支架。
本发明实施例的另一个方面还提供了一种修复脊髓损伤的功能产品，其包含所述有序胶原支架。
综上所述，本发明提供的有序胶原支架具有有序孔道结构，可为神经轴突生长提供接触诱导作用；更重要的是脂质体中具有微管稳定作用的抗癌药物的缓释可缓解脊髓损伤后微环境中髓鞘蛋白的影响，促进移植的神经干细胞向神经元分化，并促进神经轴突的生长，以达到促进受损伤的脊髓神经再生及其运动功能修复，对危害人民健康较大的创伤性中枢神经疾病进行临床前研究，将会有力地推动整个创伤性中枢神经疾病治疗研究领域的发展。
以下通过若干实施例并结合附图进一步详细说明本发明的技术方案。然而，所选的实施例仅用于说明本发明，而不限制本发明的范围。
一、用于修复脊髓损伤的有序胶原支架的构建
负载微管稳定药物脂质体的有序胶原支架的构建
将胶原原材料溶解于0.5mol/L醋酸中并于4℃温度中静置过夜，混合均匀后加入4mol/L NaOH中和，得到的均匀液体放入截留分子量为3000～5000的透析袋中，用去离子水透析5天，透析期间每3h换一次去离子水，透析后的溶液放入直径为4～10mm的模具中，在模具一侧施加-150～-80℃低温，得到有序胶原海绵圆柱体支架；
向所述有序胶原海绵圆柱体支架中滴加包裹具有微管稳定作用的抗癌药物的脂质体，之后于37℃孵育2h，获得所述有序胶原支架。
二、用于修复脊髓损伤的有序胶原支架的表征
1.原子力显微镜(AFM)观察包载微管稳定药物脂质体大小
将清洗干净的硅片用氮气吹干，滴加包载微管稳定药物脂质体，氮气缓慢吹干后在AFM下观察、拍照。
2.马尔文粒度仪检测包载微管稳定药物脂质体粒径分布
将包载微管稳定药物脂质体逐步稀释，吹打分散均匀，使用马尔文粒度仪检测其粒径分布。
3.扫描电镜(SEM)观察胶原支架形貌及其孔径大小
将胶原海绵支架喷金，在扫描电镜下观察、拍照。
请参阅图1为本发明实施例提供的有序胶原支架用于脊髓损伤修复的示意图，其中，1为有序胶原支架，2为担载微管稳定药物的脂质体，3为髓鞘蛋白，4为神经干细胞，5为神经元细胞。由图1所示，本发明实施例提供的有序胶原支架材料可以缓释微管稳定药物，以实现促进神经干细胞向神经元分化，有促进神经轴突生长的作用。
请参阅图2a～图2d，其中，图2a为包载紫杉醇的脂质体的原子力显微镜(AFM)照片；图2b为包载紫杉醇的脂质体的粒径分布图；图2c为有序胶原支架的总体形貌扫描电镜(SEM)照片；d为有序胶原支架横截面形貌SEM照片。
从图2a～图2d中可以看出，载药脂质体的粒径大小在40～200nm之间，有序胶原海绵圆柱体支架具有有序孔道结构。在本发明提供的实施例中，有序孔道的孔径大小在30～50μm之间，横截面的直径为4mm，长度为4mm。
三、用于修复脊髓损伤的有序胶原支架对NSCs的体外诱导分化作用
1.髓鞘蛋白的提取
采用非连续性蔗糖密度梯度离心法制得。从成年大鼠中取得脊髓，在0.3mol/L蔗糖溶液中匀浆破碎，然后缓慢铺到0.85mol/L的蔗糖上面。样品于27000g高速离心1h，在0.32/0.85mol/L蔗糖分界处收集提取到鞘蛋白片段。样品在去离子水中静置1h，然后于12000g离心收集样品。得到的样品用0.22μm滤膜过滤去除大团聚集物，并且灭菌，放置于-80℃待用。
2.原代NSCs的分离培养及接种到支架材料上
出生12h的ICR乳鼠分离出海马，剪碎，加胰酶替代液用钝头粗口滴管轻轻吹打直到组织团块消失，400目尼龙膜过滤，转移到培养瓶中成球培养。将神经球用胰酶替代液消化15min，消散成单细胞。将细胞接种于灭菌的胶原支架中。
3.支架材料中NSCs分化的免疫荧光染色
担载NSCs的支架材料用4％多聚甲醛室温固定30min，PBS浸洗2次；100％FBS室温封闭1h，PBS洗1次；浸泡抗TUj-1一抗，4℃，过夜，PBS洗3次；二抗孵育37℃，40min，PBS洗3次；DAPI核衬染20min，PBS洗3次，最后观察拍照。
请参阅图3a～图3e，图3a为担载紫杉醇的脂质体的浓度为0nM的有序胶原支架的电子显微镜照片；图3b为培养基中总浓度为1nM的担载紫杉醇脂质体有序胶原支架的电子显微镜照片；图3c为培养基中总浓度为5nM的担载紫杉醇脂质体有序胶原支架的电子显微镜照片；图3d为培养基中总浓度为10nM的担载紫杉醇脂质体有序胶原支架的电子显微镜照片；图3e为TUj-1阳性细胞比例统计结果。
从图3a-图3e中可以看出，培养基中含有髓鞘蛋白的环境下，胶原支架上NSCs向神经元分化比例为18％，负载1nM紫杉醇脂质体胶原支架上NSCs向神经元分化比例为23％，负载5nM紫杉醇脂质体胶原支架上NSCs向神经元分化比例为35％，负载10nM紫杉醇脂质体胶原支架上NSCs向神经元分化比例为24％。因此，负载紫杉醇脂质体胶原支架可缓解髓鞘蛋白的抑制作用，促进NSCs向神经元分化。综上所述，负载适量微管稳定药物的胶原支架可促进神经干细胞向神经元的分化，适于脊髓损伤修复。
四、用于修复脊髓损伤的有序胶原支架对大鼠脊髓全横断损伤的修复效果
1.大鼠脊髓全横断损伤模型的建立
雌性成年SD大鼠，体重为200±25g。腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后，取俯卧位，大鼠腰背部脱毛，消毒，切开T7-T8皮肤和皮下，分离双侧棘突旁肌肉，拉钩拉开棘突旁肌肉，暴露出T7-T8棘突和椎板。小号持针器咬除棘突，再切除左侧椎板，内侧过中线，外侧至关节突内侧面，暴露出半侧脊髓及脊髓后正中静脉为止。用显微刀、显微拉钩、显微剪，沿后正中线纵向打开硬膜。横行切断脊髓，长约4mm。待止血后，将不同组的材料填充。特别注明动物实验中使用的是表达绿色荧光蛋白(GFP)的NSCs。
实验总共分为7组：
(1)空白对照；
(2)胶原支架；
(3)担载NSCs的胶原支架；
(4)负载0.3nmol紫杉醇脂质体的胶原支架；
(5)担载NSCs的负载0.3nmol紫杉醇脂质体的胶原支架；
(6)担载NSCs的负载1.5nmol紫杉醇脂质体的胶原支架；
(7)担载NSCs的负载7.5nmol紫杉醇脂质体的胶原支架。
2.大鼠行为学检测
所有大鼠于移植后每周进行行为学检查，采用BBB评分等级法进行评分，分为0-21级，共22级。21分为功能正常，0分为功能完全丧失。BBB评分采用单盲检测方法，观察动物在空地上的损伤侧下肢即左侧下肢的行为，按照评分标准给分，观察时间为4分钟。
请参阅图4a-图4e，图4a为大鼠损伤部位暴露出的脊髓照片，图4b为大鼠损伤部位4mm缺损脊髓全横断损伤部位照片，图4c为移植的有序胶原支架材料的照片，图4d为支架材料植入大鼠脊髓全横断损伤部位照片，图4e为大鼠损伤部位治疗2个月后取材照片。从图4e可以看出，治疗2个月后胶原支架材料可以本体很好的融合。
图5a和图5b为有序胶原支架移植入大鼠脊髓全横断部位的NSCs向成熟神经元分化情况(MAP2免疫荧光染色)以及分化比例统计结果。
从图5a和图5b中可以看出，治疗2个月后，移植到大鼠脊髓全横断损伤部位的有序胶原支架中NSCs向神经元分化比例为29％，负载0.3nmol紫杉醇脂质体胶原支架组NSCs向神经元的分化比例提高到55％，负载1.5nmol紫杉醇脂质体胶原支架组和负载7.5nmol紫杉醇脂质体胶原支架组NSCs向神经元的分化比例分别为49％和40％。因此，担载NSCs的负载紫杉醇脂质体的有序胶原支架可促进所担载NSCs在大鼠脊髓全横断部位向神经元分化，促进神经轴突生长。
图6为有序胶原支架复合神经干细胞移植入大鼠脊髓全横断部位的神经纤维生长情况。从图6中可以看出，治疗2个月后，担载NSCs的负载紫杉醇脂质体胶原支架可促进神经轴突的生长。因此负载适量微管稳定药物的胶原支架移植到大鼠脊髓全横断损伤区可促进所担载神经干细胞向神经元分化，促进神经轴突生长。
3.大鼠皮层运动诱发电位检测
所有大鼠于移植后2个月进行皮层运动诱发电位检测。将两根刺激电极插于大鼠头部的皮下组织，两根接收电极插入大鼠后肢腓肠肌中，一根参考电极插入一侧腹部的皮下组织中。
4.移植NSCs的免疫荧光染色
在手术后2个月，大鼠用4％多聚甲醛心脏灌注，将大脑和脊髓取出，将脊髓损伤部位冰冻切片。切片在预冷丙酮中固定15min,放置于含有5％BSA和0.1％Trition X-100的PBS溶液中1h，然后用抗MAP2,GFP一抗孵育，4℃过夜，PBS洗3次。相应的二抗Alexa 488标记的驴抗兔二抗和Alexa 594标记的驴抗小鼠二抗室温孵育1h。细胞核用DAPI染色。
5.统计学分析
所有实验数据都是以Mean±SD表示，统计学差异是用SPSS软件分析，两组数据采用独立样本t检测，多组比较采用ANOVA分析，当P<0.05表示有显著差异，P<0.01表示有极显著差异。
5.担载NSCs的负载紫杉醇脂质体胶原支架可促进大鼠脊髓全横断损伤的运动能力恢复
请参阅图7a和图7b，为有序胶原支架移植入大鼠脊髓全横断部位2个月后大鼠运动功能恢复情况。其中，图7a为大鼠皮层运动诱发电位，图7b为BBB评分。
从图7a和图7b中可以看出，担载NSCs的负载0.3nmol紫杉醇脂质体胶原支架处理组老鼠的皮层运动诱发电位和BBB评分大幅提高。
综上所述，藉由本发明的上述技术方案获得的有序胶原支架具有有序孔道结构，可为神经轴突生长提供接触诱导作用；更重要的是脂质体中具有微管稳定作用的抗癌药物的缓释可缓解脊髓损伤后微环境中髓鞘蛋白的影响，促进移植的神经干细胞向神经元分化，并促进神经轴突的生长，以达到促进受损伤的脊髓神经再生及其运动功能修复。
应当理解，以上所述的仅是本发明的一些实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的创造构思的前提下，还可以做出其它变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (16)

1.有序胶原支架在制备修复脊髓损伤的产品中的应用；
所述有序胶原支架包括有序胶原海绵圆柱体支架，所述有序胶原海绵圆柱体支架包括主要由复数个孔道结构有序排列组成的三维结构，所述有序胶原海绵圆柱体支架内掺杂有脂质体，所述脂质体内包裹具有微管稳定作用的抗癌药物，通过负载包含抗癌药物的脂质体，使得所述有序胶原支架担载神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，从而促进受损伤的脊髓神经再生及功能修复。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架的孔隙率为80～95％。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架的直径为4～10mm，长度为2～10mm。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架中孔道结构的孔径为30～50μm。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述脂质体的粒径为40～200nm。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架中抗癌药物的含量为0.01～10nmol。
7.根据权利要求1或6所述的应用，其特征在于：所述抗癌药物包括紫杉醇。
8.一种有序胶原支架，包括有序胶原海绵圆柱体支架，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架包括主要由复数个孔道结构有序排列组成的三维结构，所述有序胶原海绵圆柱体支架内掺杂有脂质体，所述脂质体内包裹具有微管稳定作用的抗癌药物，通过负载包含抗癌药物的脂质体，使得所述有序胶原支架担载神经干细胞以促进移植的神经干细胞向神经元分化，从而促进受损伤的脊髓神经再生及功能修复。
9.根据权利要求8所述的有序胶原支架，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架的孔隙率为80～95％。
10.根据权利要求8所述的有序胶原支架，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架的直径为4～10mm，长度为2～10mm。
11.根据权利要求10所述的有序胶原支架，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架中孔道结构的孔径为30～50μm。
12.根据权利要求8所述的有序胶原支架，其特征在于：所述脂质体的粒径为40～200nm。
13.根据权利要求12所述的有序胶原支架，其特征在于：所述有序胶原海绵圆柱体支架中抗癌药物的含量为0.01～10nmol。
14.根据权利要求13所述的有序胶原支架，其特征在于：所述抗癌药物包括紫杉醇。
15.权利要求8-14中任一项所述有序胶原支架的制备方法，其特征在于包括：
将胶原原材料溶解于0.2～1mol/L醋酸中并于2～8℃温度中静置过夜，混合均匀后加入2～10mol/L碱液中和，得到的均匀液体放入截留分子量为3000～5000的透析袋中，用去离子水透析4～6天，透析期间每3～6h换一次去离子水，透析后的溶液放入直径为4～10mm的模具中，之后使模具一端处于-150～-80℃，得到有序胶原海绵圆柱体支架；
向所述有序胶原海绵圆柱体支架中滴加包裹具有微管稳定作用的抗癌药物的脂质体，之后于25～37℃孵育1～3h，获得所述有序胶原支架。
16.一种修复脊髓损伤的功能产品，其特征在于包含权利要求8-14中任一项所述有序胶原支架。
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