CN108949606A - 一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺 - Google Patents

一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN108949606A
CN108949606A CN201710517663.4A CN201710517663A CN108949606A CN 108949606 A CN108949606 A CN 108949606A CN 201710517663 A CN201710517663 A CN 201710517663A CN 108949606 A CN108949606 A CN 108949606A
Authority
CN
China
Prior art keywords
virus mycoplasma
chicken virus
culture
high density
chicken
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710517663.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108949606B (zh
Inventor
丁美娟
张小飞
尹秀凤
卢凤英
严鹏
许秀梅
汪爱芬
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NANJING TIANBANG BIO-INDUSTRY Co Ltd
Original Assignee
NANJING TIANBANG BIO-INDUSTRY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NANJING TIANBANG BIO-INDUSTRY Co Ltd filed Critical NANJING TIANBANG BIO-INDUSTRY Co Ltd
Priority to CN201710517663.4A priority Critical patent/CN108949606B/zh
Publication of CN108949606A publication Critical patent/CN108949606A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108949606B publication Critical patent/CN108949606B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本发明公开了一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，属于农业微生物领域，依次通过鸡毒支原体培养基复苏冻干菌种、种子扩大培养、发酵培养得到鸡滑液囊支原体发酵高密度抗原。本发明通过发酵过程中添加鸡毒支原体培养基，调节PH，进行工业放大生产，为鸡毒支原体提供了充分的营养成分，降低了生产成本，抗原含量高，适于规模应用，具有广阔前景。

Description

一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺
技术领域
本发明涉及一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，属于农业微生物领域。
背景技术
鸡毒支原体MG是鸡慢性呼吸道病CRD的病原，且感染率很高，CRD可通过水平和垂直方式传播并在鸡群中长期存在和蔓延，鸡场感染MG后，雏鸡的弱雏率升高，蛋鸡的产蛋率、肉鸡的体重及饲料转化率均下降，对养鸡业的发展造成严重危害，目前，各鸡场对鸡毒支原体的治疗主要是使用抗生素，而鸡毒支原体易产生耐药性，效果也不理想，免疫疫苗是控制鸡毒支原体病的最好措施，然而，鸡毒支原体的高密度培养非常困难，例如对营养需求高，尤其是对PH要求严格，现有技术中，常用的培养基为改良Frey氏培养基，但是并不能满足大规模的培养。
发明内容
本发明的主要目的是为了提供一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，用于解决鸡毒支原体难以大规模生产的问题，能够提高发酵终点的活菌密度，提高菌株的免疫原性，提高疫苗的保护效果。
本发明的目的可以通过采用如下技术方案达到：
一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，包括如下步骤：
步骤1：取冻干的鸡毒支原体生产用种子接种于鸡毒支原体培养基中培养，获得培养液，以同样方法将获得的培养液再接种传代1次；
步骤2：将上述传代后的菌液接种于发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，培养过程中，在线流加NaOH溶液控制PH值，添加鸡毒支原体培养，待PH值下降至6.4～6.6时，停止发酵，得到菌液，得到鸡毒支原体发酵高密度抗原。
进一步的，所述步骤1中，取冻干的鸡毒支原体生产用种子按1:10的比例接种于鸡毒支原体培养基中，在36～37℃的条件下，培养18～24h，获得培养液，以同样方法将获得的培养液按1:10的比例再接种传代1次。
进一步的，所述步骤2中，将上述传代后的菌液按1％～5％/V/V的比例接种于20L发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，发酵罐的培养工艺条件为：温度为35～38℃，罐压为0.03～0.1Mpa，溶氧为30～60％，PH值为7.6～7.8，搅拌速度为80～160rpm。
进一步的，所述步骤2中，培养过程中，在线流加20％NaOH溶液控制PH值至7.2时，添加鸡毒支原体培养基为原培养体积的30％，培养48h，停止在线流加20％NaOH溶液，待PH值下降至6.4～6.6时，停止发酵。
进一步的，还包括步骤3：将所述步骤2中发酵后得到的菌液以1％～5％V/V的比例接种于体积大于20L的发酵罐中进行扩大培养。
进一步的，所述扩大培养所用发酵罐的体积为200L～1500L。
进一步的，所述步骤3中，扩大培养的条件包括：温度为35～38℃，罐压为0.03～0.1Mpa，溶氧为30～60％，PH值为7.6～7.8，搅拌速度为80～160rpm。
进一步的，每升所述鸡毒支原体培养基按如下成分配制：
进一步的，所述鸡毒支原体培养基在121℃温度条件下，高压灭菌15min，在4℃温度条件下保存。
进一步的，所述鸡毒支原体培养基在培养时，再加150～200ml猪血清和1000单位/ml青霉素，加20％NaOH溶液调pH值至7.6～7.8。
本发明的有益技术效果：按照本发明的鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，本发明提供的鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，通过优化培养基组成，同时通过培养基、PH值、最适温度、通气量、罐压、溶氧浓度DO等方面进行探索，优化高密度发酵培养工艺的各种条件，进行工业放大研究，获得了一种适用于200L～1500L发酵罐高密度培养鸡毒支原体的培养工艺，且可进一步提高菌体密度，最终可实现规模化示范生产线，培养过程中，为鸡毒支原体提供了充分的营养成分，鸡毒支原体为兼性厌氧，发酵罐溶氧范围的控制对鸡毒支原体起着重要作用，培养基的PH也是一个关键因素，通过前期PH优化试验，筛选出适合鸡毒支原体生长的PH范围，最终通过发酵培养基、PH、溶氧等条件控制，实现了鸡毒支原体高密度发酵培养工艺的放大优化，从而解决了鸡毒支原体难以大规模生产的技术难题，进一步提高发酵终点的活菌密度，同时提高菌株的免疫原性，提高疫苗的保护效果。
具体实施方式
为使本领域技术人员更加清楚和明确本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：
本实施例1提供的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，包括如下步骤：
步骤1：取冻干的鸡毒支原体生产用种子按1:10的比例接种于鸡毒支原体培养基中，在36～37℃的条件下，培养18～24h，获得培养液，以同样方法将获得的培养液按1:10的比例再接种传代1次；
步骤2：将上述传代后的菌液按3％/V/V的比例接种于20L发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，发酵罐的培养工艺条件为：温度为37℃，罐压为0.03Mpa，溶氧为40％，PH值为7.7，搅拌速度为100rpm，培养过程中，在线流加20％NaOH溶液控制PH值至7.2时，所述在线流加是通过向灭菌鸡毒支原体培养基中添加NaOH溶液来随时控制灭菌鸡毒支原体培养基的PH值，添加鸡毒支原体培养基为原培养体积的30％，培养48h，停止在线流加20％NaOH溶液，待PH值下降至6.5时，停止发酵，得到菌液，得到鸡毒支原体发酵高密度抗原；
步骤3：将所述步骤2中发酵后得到的菌液以3％V/V的比例接种于体积为200L～1500L的发酵罐中进行扩大培养，扩大培养的条件包括：温度为37℃，罐压为0.03Mpa，溶氧为40％，PH值为7.7，搅拌速度为100rpm；取样计数，活菌数为1010CCU/ml。
进一步的，在本实施例1中，每升所述鸡毒支原体培养基按如下成分配制：
进一步的，在本实施例1中，所述鸡毒支原体培养基在121℃温度条件下，高压灭菌15min，在4℃温度条件下保存，所述鸡毒支原体培养基在培养时，再加180ml猪血清和1000单位/ml青霉素，加20％NaOH溶液调pH值至7.7。
实施例2：
本实施例2提供的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，包括如下步骤：
步骤1：取冻干的鸡毒支原体生产用种子按1:10的比例接种于鸡毒支原体培养基中，在36～37℃的条件下，培养18～24h，获得培养液，以同样方法将获得的培养液按1:10的比例再接种传代1次；
步骤2：将上述传代后的菌液按4％/V/V的比例接种于20L发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，发酵罐的培养工艺条件为：温度为37℃，罐压为0.05Mpa，溶氧为40％，PH值为7.7，搅拌速度为100rpm，培养过程中，在线流加20％NaOH溶液控制PH值至7.2时，所述在线流加是通过向灭菌鸡毒支原体培养基中添加NaOH溶液来随时控制灭菌鸡毒支原体培养基的PH值，添加鸡毒支原体培养基为原培养体积的30％，培养48h，停止在线流加20％NaOH溶液，待PH值下降至6.5时，停止发酵，得到菌液，得到鸡毒支原体发酵高密度抗原；
步骤3：将所述步骤2中发酵后得到的菌液以2％V/V的比例接种于体积为200L～1500L的发酵罐中进行扩大培养，扩大培养的条件包括：温度为36.5℃，罐压为0.06Mpa，溶氧为35％，PH值为7.8，搅拌速度为110rpm；取样计数，活菌数为1010CCU/ml。
进一步的，在本实施例2中，每升所述鸡毒支原体培养基按如下成分配制：
进一步的，在本实施例2中，所述鸡毒支原体培养基在121℃温度条件下，高压灭菌15min，在4℃温度条件下保存，所述鸡毒支原体培养基在培养时，再加150ml猪血清和1000单位/ml青霉素，加20％NaOH溶液调pH值至7.8。
实施例3：
本实施例3提供的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，包括如下步骤：
步骤1：取冻干的鸡毒支原体生产用种子按1:10的比例接种于鸡毒支原体培养基中，在36～37℃的条件下，培养18～24h，获得培养液，以同样方法将获得的培养液按1:10的比例再接种传代1次；
步骤2：将上述传代后的菌液按3％/V/V的比例接种于20L发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，发酵罐的培养工艺条件为：温度为37℃，罐压为0.03Mpa，溶氧为40％，PH值为7.7，搅拌速度为100rpm，培养过程中，在线流加20％NaOH溶液控制PH值至7.2时，所述在线流加是通过向灭菌鸡毒支原体培养基中添加NaOH溶液来随时控制灭菌鸡毒支原体培养基的PH值，添加鸡毒支原体培养基为原培养体积的30％，培养48h，停止在线流加20％NaOH溶液，待PH值下降至6.5时，停止发酵，得到菌液，得到鸡毒支原体发酵高密度抗原；
步骤3：将所述步骤2中发酵后得到的菌液以1％～5％V/V的比例接种于体积为200L～1500L的发酵罐中进行扩大培养，扩大培养的条件包括：温度为35～38℃，罐压为0.03～0.1Mpa，溶氧为30～60％，PH值为7.6～7.8，搅拌速度为80～160rpm；取样计数，活菌数为1010CCU/ml。
进一步的，在本实施例3中，每升所述鸡毒支原体培养基按如下成分配制：
进一步的，在本实施例3中，所述鸡毒支原体培养基在121℃温度条件下，高压灭菌15min，在4℃温度条件下保存，所述鸡毒支原体培养基在培养时，再加180ml猪血清和1000单位/ml青霉素，加20％NaOH溶液调pH值至7.7。
对比例1：
本对比例1提供的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，包括如下步骤：
步骤1：取冻干的鸡毒支原体生产用种子按1:10的比例接种于鸡毒支原体培养基中，在36～37℃的条件下，培养18～24h，获得培养液，以同样方法将获得的培养液按1:10的比例再接种传代1次；
步骤2：将上述传代后的菌液按10％/V/V的比例接种于20L发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，发酵罐的培养工艺条件为：温度为37℃，罐压为0.03Mpa，溶氧为40％，PH值为7.7，搅拌速度为100rpm，待PH值下降至6.5时，停止发酵，得到菌液，得到鸡毒支原体发酵高密度抗原。
进一步的，在本对比例1中，每升所述鸡毒支原体培养基按如下成分配制：
进一步的，在本对比例1中，所述鸡毒支原体培养基在121℃温度条件下，高压灭菌15min，在4℃温度条件下保存，所述鸡毒支原体培养基在培养时，再加180ml猪血清和1000单位/ml青霉素，加20％NaOH溶液调pH值至7.7。
实施例1所得发酵抗原与对比例1所得发酵抗原分别配制鸡毒支原体灭活疫苗进行40-60日宁SPF鸡的免疫，按照现行《中国兽药典》的《鸡毒支原体灭活疫苗制造及检验规程》进行效力检验，结果如表1和表2所示。
表1：实施例1鸡毒支原体攻毒保护效率检验，免疫保护率：88％
免疫保护率＝(对照组攻毒均分-免疫组攻毒均分)/对照组攻毒均分
＝(15/6—2/6)/(15/6)
＝(2.5—0.3)/2.5
＝88％
表2：对比例1鸡毒支原体攻毒保护效率检验，免疫保护率：69.6％
免疫保护率＝(对照组攻毒均分-免疫组攻毒均分)/对照组攻毒均分
＝(14/6—4/6)/(14/6)
＝(2.3—0.7)/2.3
＝69.6％
由表1和表2可知，实施例1发酵工艺所得抗原的免疫原性明显改善，提高了疫苗的保护效果。
表3为普通发酵工艺与本发明发酵工艺发酵最终培养液培养滴度测定比较。
表3两种工艺培养的支原体培养滴度比较
综上所述，在本实施例中，按照本实施例的鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，本实施例提供的鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，通过优化培养基组成，同时通过培养基、PH值、最适温度、通气量、罐压、溶氧浓度DO等方面进行探索，优化高密度发酵培养工艺的各种条件，进行工业放大研究，获得了一种适用于200L～1500L发酵罐高密度培养鸡毒支原体的培养工艺，且可进一步提高菌体密度，最终可实现规模化示范生产线，培养过程中，为鸡毒支原体提供了充分的营养成分，鸡毒支原体为兼性厌氧，发酵罐溶氧范围的控制对鸡毒支原体起着重要作用，培养基的PH也是一个关键因素，通过前期PH优化试验，筛选出适合鸡毒支原体生长的PH范围，最终通过发酵培养基、PH、溶氧等条件控制，实现了鸡毒支原体高密度发酵培养工艺的放大优化，从而解决了鸡毒支原体难以大规模生产的技术难题，进一步提高发酵终点的活菌密度，同时提高菌株的免疫原性，提高疫苗的保护效果。
以上所述，仅为本发明进一步的实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明所公开的范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：取冻干的鸡毒支原体生产用种子接种于鸡毒支原体培养基中培养，获得培养液，以同样方法将获得的培养液再接种传代1次；
步骤2：将上述传代后的菌液接种于发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，培养过程中，在线流加NaOH溶液控制PH值，添加鸡毒支原体培养，待PH值下降至6.4～6.6时，停止发酵，得到菌液，得到鸡毒支原体发酵高密度抗原。
2.根据权利要求1所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，所述步骤1中，取冻干的鸡毒支原体生产用种子按1:10的比例接种于鸡毒支原体培养基中，在36～37℃的条件下，培养18～24h，获得培养液，以同样方法将获得的培养液按1:10的比例再接种传代1次。
3.根据权利要求1所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，所述步骤2中，将上述传代后的菌液按1％～5％/V/V的比例接种于20L发酵罐的灭菌鸡毒支原体培养基中，发酵罐的培养工艺条件为：温度为35～38℃，罐压为0.03～0.1Mpa，溶氧为30～60％，PH值为7.6～7.8，搅拌速度为80～160rpm。
4.根据权利要求3所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，所述步骤2中，培养过程中，在线流加20％NaOH溶液控制PH值至7.2时，添加鸡毒支原体培养基为原培养体积的30％，培养48h，停止在线流加20％NaOH溶液，待PH值下降至6.4～6.6时，停止发酵。
5.根据权利要求1所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，还包括步骤3：将所述步骤2中发酵后得到的菌液以1％～5％V/V的比例接种于体积大于20L的发酵罐中进行扩大培养。
6.根据权利要求5所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，所述扩大培养所用发酵罐的体积为200L～1500L。
7.根据权利要求5所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，所述步骤3中，扩大培养的条件包括：温度为35～38℃，罐压为0.03～0.1Mpa，溶氧为30～60％，PH值为7.6～7.8，搅拌速度为80～160rpm。
8.根据权利要求1-7任一项所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，每升所述鸡毒支原体培养基按如下成分配制：
9.根据权利要求8所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，所述鸡毒支原体培养基在121℃温度条件下，高压灭菌15min，在4℃温度条件下保存。
10.根据权利要求8所述的一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺，其特征在于，所述鸡毒支原体培养基在培养时，再加150～200ml猪血清和1000单位/ml青霉素，加20％NaOH溶液调pH值至7.6～7.8。
CN201710517663.4A 2017-06-29 2017-06-29 一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺 Active CN108949606B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710517663.4A CN108949606B (zh) 2017-06-29 2017-06-29 一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710517663.4A CN108949606B (zh) 2017-06-29 2017-06-29 一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108949606A true CN108949606A (zh) 2018-12-07
CN108949606B CN108949606B (zh) 2021-08-27

Family

ID=64495079

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710517663.4A Active CN108949606B (zh) 2017-06-29 2017-06-29 一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108949606B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112342158A (zh) * 2020-11-09 2021-02-09 山东滨州博莱威生物技术有限公司 一种鸡毒支原体培养基及其制备方法
CN114752541A (zh) * 2022-06-16 2022-07-15 佛山科学技术学院 鸡毒支原体感染鸡模型的构建方法及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102168073A (zh) * 2010-11-30 2011-08-31 瑞普（保定）生物药业有限公司 一种提高疫苗生产中鸡毒支原体增殖能力的方法
CN102220272A (zh) * 2011-06-01 2011-10-19 武汉科前动物生物制品有限责任公司 一种高密度培养副猪嗜血杆菌用于疫苗制备的方法
CN103060221A (zh) * 2012-08-31 2013-04-24 南京天邦生物科技有限公司 一种连续增菌培养鸡毒支原体培养基及制备方法
CN103074246A (zh) * 2012-08-31 2013-05-01 南京天邦生物科技有限公司 一种低血清高效培养鸡毒支原体弱毒株培养基及其制备方法
CN103479995A (zh) * 2013-10-08 2014-01-01 南京天邦生物科技有限公司 鸡毒支原体、鸡滑液囊支原体二联灭活疫苗的制备方法
CN106434479A (zh) * 2016-10-26 2017-02-22 武汉科前生物股份有限公司 一种副猪嗜血杆菌5型500l发酵罐的高密度培养方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102168073A (zh) * 2010-11-30 2011-08-31 瑞普（保定）生物药业有限公司 一种提高疫苗生产中鸡毒支原体增殖能力的方法
CN102220272A (zh) * 2011-06-01 2011-10-19 武汉科前动物生物制品有限责任公司 一种高密度培养副猪嗜血杆菌用于疫苗制备的方法
CN103060221A (zh) * 2012-08-31 2013-04-24 南京天邦生物科技有限公司 一种连续增菌培养鸡毒支原体培养基及制备方法
CN103074246A (zh) * 2012-08-31 2013-05-01 南京天邦生物科技有限公司 一种低血清高效培养鸡毒支原体弱毒株培养基及其制备方法
CN103479995A (zh) * 2013-10-08 2014-01-01 南京天邦生物科技有限公司 鸡毒支原体、鸡滑液囊支原体二联灭活疫苗的制备方法
CN106434479A (zh) * 2016-10-26 2017-02-22 武汉科前生物股份有限公司 一种副猪嗜血杆菌5型500l发酵罐的高密度培养方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JAMES W.GILL等: "Culture and metabolism of Mycoplasma gallisepticum", 《JOURNAL OF BACTERIOLOGY》 *
臧学丽等: "《实用发酵工程技术》", 31 January 2017, 中国医药科学出版社 *
邬行彦等: "《抗生素生产工艺学》", 31 May 1985, 化学工业出版社 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112342158A (zh) * 2020-11-09 2021-02-09 山东滨州博莱威生物技术有限公司 一种鸡毒支原体培养基及其制备方法
CN114752541A (zh) * 2022-06-16 2022-07-15 佛山科学技术学院 鸡毒支原体感染鸡模型的构建方法及其应用
CN114752541B (zh) * 2022-06-16 2022-09-13 佛山科学技术学院 鸡毒支原体感染鸡模型的构建方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN108949606B (zh) 2021-08-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106906159B (zh) 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法
CN103060221A (zh) 一种连续增菌培养鸡毒支原体培养基及制备方法
CN102851249B (zh) 一种副猪嗜血杆菌lz-20100109株及其应用
CN109913404A (zh) 鸡传染性法氏囊病毒活疫苗的制备方法
CN104338127A (zh) 一种h9n2亚型禽流感灭活疫苗的生产方法及其制品
CN108949619A (zh) 一种鸭疫里默氏杆菌的发酵工艺
CN108949606A (zh) 一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺
CN103333849B (zh) 金黄色葡萄球菌突变株及其制备方法和应用
CN110643522A (zh) 禽多杀性巴氏杆菌的培养基、培养方法及其应用
CN106434502A (zh) 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用
CN105925517B (zh) 马链球菌兽疫亚种无血清厌氧高密度发酵培养工艺
CN101732706B (zh) 仔猪副伤寒活疫苗的制备方法及其产品
US11883477B2 (en) Triple vaccine for diseases caused by Salmonella typhimurium, Riemerella anatipestifer and Escherichia coli
CN110669684A (zh) 一种猪丹毒疫苗增菌培养基
CN113957007B (zh) 一种鸡滑液囊支原体灭活疫苗
RU2649754C2 (ru) Способ изготовления формолвакцины гидроокисьалюминиевой полиштаммной против стрептококковых заболеваний крупного рогатого скота
CN105420153B (zh) 一种绿脓杆菌发酵培养基及其发酵培养方法、疫苗制备方法
CN104212736A (zh) 一种副鸡嗜血杆菌、灭活疫苗及其制备方法
CN101648013B (zh) 鸡传染性鼻炎灭活疫苗的制备方法
CN110448690B (zh) 一种鸡传染性鼻炎(a型+b型+c型)、鼻气管鸟疫杆菌病(a型)二联灭活疫苗
CN106367399B (zh) 一种使用全悬浮技术生产猪细小病毒病疫苗的方法
CN106867973A (zh) 一种使用全悬浮技术生产猪伪狂犬病疫苗的方法
CN106318899B (zh) 一株牛睾丸传代细胞株的建立及其应用
CN109602900A (zh) 鸡马立克氏病毒活疫苗的制备方法及其产品
CN110237247A (zh) 一种利用细胞工厂生产ⅰ群禽腺病毒灭活疫苗的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information

Address after: No.999 qingshuiting East Road, economic and Technological Development Zone, Jiangning District, Nanjing City, Jiangsu Province

Applicant after: Zhaofenghua Biotechnology (Nanjing) Co., Ltd

Address before: No.999 qingshuiting East Road, economic and Technological Development Zone, Jiangning District, Nanjing City, Jiangsu Province

Applicant before: NANJING TIANBANG BIO-INDUSTRY Co.,Ltd.

CB02 Change of applicant information
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant