CN108887077A - 一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，包括如下步骤：步骤一，选择涨势旺盛、口感苦、带有黄边的七八成熟的野生灵芝作为种源；步骤二，用与野生栽培时栽培基相同的物质作为培养基，制作母种培养基；步骤三，培养种源，获得母种；步骤四，将母种培养成原种，再培养原种获得灵芝栽培种；步骤五，制作段木袋作为菌木的栽培基质；步骤六，培养得到菌木；步骤七，将菌木种植在山场中，仿野生栽培；本方法选择涨势旺盛、无虫蛀、还有少许黄边的七八成熟灵芝作为取种种源，培育出抗病虫害能力更强、更适宜目标栽培基质的菌种；用青冈栎木屑作为母种培养基，确保成活率和栽培基质野外耐腐蚀能力，保障产出灵芝的产量和质量。

Description

一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法

技术领域

本发明涉及栽培方法领域，特别是一种野生赤灵芝的栽培方法。

背景技术

目前林下仿野生栽培灵芝所用的菌种、栽培基质等，和大棚人工栽培灵芝是相同的。林下仿野生栽培只是将栽培场所从田地的大棚里移到了山林中。目前林下仿野生栽培方式的灵芝，其菌种一般都是从人工栽培灵芝中提取制作出来的栽培种，或是用PDA培养基、综合马铃薯培养基等传统方法提取培育的灵芝菌种。所用栽培基质也是人工大棚栽培相同的基质，有木屑、麸皮等代料基质和普通杂木及小枝条制作的段木基质。采用这些菌种和栽培基质在野外林下仿野生栽培灵芝存在抗病能力差、成活率偏低；基质易腐蚀，栽培产量偏低；产出的灵芝质量参差不齐等问题；市场需要一种新的方法，培育出抗病虫害能力更强、在栽培环节更适宜目标栽培基质的菌种；本发明解决这样的问题。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，从采集野生种源开始把控，选择涨势旺盛、无虫蛀、还有少许黄边的七八成熟灵芝作为取种种源，培育出抗病虫害能力更强、在栽培环节更适宜目标栽培基质的菌种；用青冈栎木屑作为母种培养基，确保成活率和栽培基质野外耐腐蚀能力，保障产出灵芝的产量和质量。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，包括如下步骤：

步骤一，选择涨势旺盛、口感苦、带有黄边的七八成熟的野生灵芝作为种源；

步骤二，用与野生栽培时栽培基相同的物质作为培养基，制作母种培养基；

步骤三，将种源接种在母种培养基中，经过培养，待菌丝体成熟，选择洁白、致密、生长旺盛的作为母种；

步骤四，将母种培养成原种，再培养原种获得灵芝栽培种；

步骤五，制作段木袋作为菌木的栽培基质；

步骤六，将灵芝栽培种接种在段木袋中，经过菌丝培养得到菌木；

步骤七，将菌木种植在山场中，仿野生栽培。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，步骤一，在浙江西南部区域，龙泉、景宁、庆元境内采集有黄白边、体壮无虫蛀的七八成熟野生赤灵芝，从灵芝边缘部位剪下3*3mm小片放进嘴里咀嚼，选择口感苦的作为种源。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，

步骤二，用青冈栎木屑作为培养基，制作母种培养基；

1)材料准备；提前一年的时间，将青冈栎木粉碎成3-5mm木屑颗粒，自然堆放在山林中，接受雨淋日晒自然腐蚀；

2)加水备用；将在山中自然堆放一年的青冈栎木屑取回，加水充分搅拌至水分含量达60％，用合适大小的高压铝箔袋装成一袋，真空包装封口采用温度123度高温高压杀菌60分钟，自然冷却后备用；

3)器具准备；将灵芝接种刀，镊子、培养皿用121度杀菌15分钟，备用；

4)将杀菌后的青冈栎颗粒均匀铺在杀菌后的培养皿中备用。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，步骤三，将采集到的种源表面用75％酒精喷洒消毒后，将灵芝菌盖切口撕开，选择黄白色菌肉部位为取种部位，用接种刀和镊子取5*5mm菌肉，放置在铺设好木屑的无菌培养皿中，盖好培养皿盖，放入生化培养箱中培养；培养温度设为26-28度，经过5-7天培养，肉眼可见菌丝体，2周菌丝体可长满培养皿，及时选择洁白、致密、生长旺盛的作为母种。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，步骤四，将母种培养成原种，再培养原种获得灵芝栽培种；

灵芝菌种培养基配方：山林中自然堆放满1年时间的青冈栎木屑90％，麦麸9％，石膏1％，加水拌匀；

将灵芝菌种培养基搅拌均匀后，装在筒袋内，采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入母种，25-28度培养30-35天，以袋内发满菌丝为准，挑选发菌饱满，无杂菌感染的菌包作为原种；

将灵芝菌种培养基搅拌均匀后，装在筒袋内，采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入原种，采用25-28度培养30天，待菌丝发透，获得栽培种。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，步骤五，制作段木袋作为菌木的栽培基质；

选择树龄在10年以上，生长海拔500米以上无污染深山青冈栎木作为栽培基质；

将青冈栎木锯成长度25公分段，直径15公分以上的段木，从中间破开成2半或四半，装进耐高温、抗拉力的聚乙烯筒袋；

装袋完成后，将筒袋两头分别扎活结，以防扎破筒袋；

对装袋完成的椴木进行灭菌，蒸煮椴木时，当锅内温度达100℃后要维持20小时不降温，待停火后温度下降至80℃以下出灶、冷却。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，步骤六，将灵芝栽培种接种在段木袋中，经过菌丝培养得到菌木；

将灵芝栽培种接种在段木袋中的具体步骤为：

选用门窗密封好、场地干燥、清洁的接种室，在接种前8-12小时将接种间及所有接种用具用臭氧消毒30分钟，待杀菌后的段木袋降至28-30℃时控温接种，接种时要用75％酒精对菌种消毒，播种要满断面，口要扎实，两头接种，堆放平稳。

菌丝培养得到菌木的具体步骤为：

选择保温性能好的房间作为培养间，室温要控制在25-28摄氏度，培养间要避光，发菌25天后要进行翻堆，当菌丝长满全袋时增加光照，促进菌丝生长，若发现菌内积水或菌丝萎缩，对筒袋扎小孔放气，以增氧通气，并让积水流失，在25-28℃培养70-80天菌丝成熟，菌木表层菌丝洁白粗壮，菌木间紧连不易掰开，少数菌木断面有豆粒大原基出现，这样的菌木达到可以上山埋土栽培的标准。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，步骤七，将菌木种植在山场中，仿野生栽培；

仿野生栽培的方法包括：

1)选择山场；

选择周边没有矿场等污染源的洁净阔叶林山场，山中有充足的天然水源，阴凉潮湿，6-9月山中温度在20-32度最适宜，潮湿、阴凉的生长环境；

2)山中排场；

阳历五月中旬开始，将发好菌丝体的菌段脱袋，选择用于人工栽培的发好菌包，按照山场地形走势进行林下排场覆土；

3)出芝管理；

发育成熟的菌段埋土后8～12天便可形成原基，待菌盖正常开展后，经过15-20天灵芝就能成熟；成熟的标志是：菌盖边缘黄、白色环圈完全消失，放射出大量的红色烟雾状疱子粉末；待成熟后停止喷水一星期即可采收；

4)采收与加工；

灵芝采收后剪去过长菌柄，清除杂物，排列于竹筛晒干或用烘房烘烤，干燥后及时用聚丙烯袋外套编织袋包装。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，

山中排场的具体方法为；阳历五月中旬开始，将发好菌丝体的菌段脱袋，选择用于人工栽培的发好菌包，按照山场地形走势进行林下排场覆土，沿着山涧溪水，并距离溪水有高度的位置排场覆土；在夏天产生高温天气时用溪水降温喷淋降温，干旱天气用溪水浇灌；在排场覆土菌段的周边位置按照地势挖一些浅沟，以利于大雨天气排水。

前述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，出芝管理的具体方法为：发育成熟的菌段埋土后8-12天便可形成原基，原基开始是一个较光滑的白色肉瘤状，向上伸长形成灵芝菌柄，当山上自然温度还在20度以内时，灵芝只长柄而盖却展不开，当温度达到22℃以上时，菌盖正常开展；灵芝生长最适宜温度是25-28℃，在此条件下经过15-20天灵芝就能成熟，成熟的标志是：菌盖边缘黄、白色环圈完全消失，放射出大量的红色烟雾状疱子粉末；待成熟后停止喷水一星期即可采收；灵芝的盛产期在6-9月，霜降停止出芝；在山场所在地气温降低至0度前，要增加覆土的厚度，或加盖稻草，压细土，使之安全过冬；待第二年清明后气温稳定在15℃以上时清除加盖物，迎接第二轮出芝。

本发明的有益之处在于：

从采集野生种源开始把控，选择涨势旺盛、无虫蛀、还有少许黄边的七八成熟灵芝作为取种种源，培育出的菌种，育种、接种、栽培时成活率更好，更有抗病虫害能力；

用与野生栽培时栽培基相同的物质青冈栎木屑作为母种培养基，确保成活率和栽培基质野外耐腐蚀能力，保障产出灵芝的产量和质量。

附图说明

图1是本发明的一种实施例的流程图。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明作具体的介绍。

如图1所示，一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，包括如下步骤：

步骤一，在浙江西南部区域，龙泉、景宁、庆元境内采集黄白边未完全消失、体壮无虫蛀的七八成熟野生赤灵芝，从灵芝边缘部位剪下3*3mm小片放进嘴里咀嚼，选择口感更苦的作为作为种源。

野生灵芝品种繁多，从野生灵芝的生长环境、多糖、三萜等有效成分含量，以及国家药典的规定，本技术选择的品种为产于海拔500--600米的亚热带地区无污染阔叶林生长的野生紫芝和赤芝。在我国，较易找到亚热带野生紫芝和赤芝的生长区域有安徽西南部山区、浙江西南部山区、江西、四川、贵州、云南等地的阔叶杂木林中。

壮年灵芝判定方法为：灵芝边缘的黄边依然存在，但已经有成熟孢子产生的灵芝。此种灵芝是生命力最强之时，用于做种源可以提高菌种的成活率和深山仿野生栽培的成活率和产量。

作为一种优选，与野生栽培时栽培基相同的物质选用青冈栎木屑，需要说明的是：若选择的栽培地点不同，野生栽培时栽培基也会变化，选用当地的栽培基物质。

步骤二，用与野生栽培时栽培基相同的物质作为培养基，制作母种培养基；

用青冈栎木屑作为培养基，制作母种培养基；

1)材料准备；提前一年的时间，将青冈栎木粉碎成3-5mm木屑颗粒，自然堆放在山林中，接受雨淋日晒自然腐蚀；(注意：木屑堆放的地形应选择坡度在10--20度的缓山坡，并在上方位置及两侧挖出约10公分深，10公分宽排水沟，防止下大雨时木料被冲走。)

2)加水备用；将在山中自然堆放一年左右的青冈栎木屑取回，加山泉水充分搅拌至水分含量达60％，用合适大小的高压铝箔袋装成1KG一袋，真空包装封口采用温度123度高温高压杀菌60分钟，自然冷却后备用；此母种选育办法因用到的培养基是单一青冈栎木屑，养分完全来自木屑，所以木屑必须要提前一年自然堆放腐蚀，以便于吸收。

3)器具准备；将灵芝接种刀，镊子、培养皿用121度杀菌15分钟，备用；

4)将杀菌后的青冈栎颗粒均匀铺在杀菌后的培养皿中备用。

步骤三，将采集到的种源表面用75％酒精喷洒消毒后，将灵芝菌盖切口撕开，选择黄白色菌肉部位为取种部位，用接种刀和镊子取5*5mm菌肉，放置在铺设好木屑的无菌培养皿中，盖好培养皿盖，放入生化培养箱中培养；培养温度设为26-28度，经过5-7天培养，肉眼可见菌丝体，2周菌丝体可长满培养皿，及时选择洁白、致密、生长旺盛的作为母种。暂时多于不用的母种，可以存放在1--3摄氏度保存待用。

步骤四，将母种培养成原种，再培养原种获得灵芝栽培种；

灵芝菌种培养基配方：山林中自然堆放满1年时间的青冈栎木屑90％，麦麸9％，石膏1％，加水拌匀；

将灵芝菌种培养基搅拌均匀后，装在筒袋内，采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入母种，25-28度培养30-35天，以袋内发满菌丝为准，挑选发菌饱满，无杂菌感染的菌包作为原种；

将灵芝菌种培养基搅拌均匀后，装在筒袋内，采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入原种，采用25-28度培养30天，待菌丝发透，获得栽培种。

需要说明的是：菌种在接种前8～12小时将接种室及所有接种用具用臭氧消毒30分钟，待杀菌后的筒袋降至28～30℃时控温接种，接种满断面，口扎实，两头接种，堆放平稳。作为一种优选，水分含量范围为55-60％，木屑一定要自然堆放一年，产生一定程度的腐蚀，以便于吸收利用。

步骤五，制作段木袋作为菌木的栽培基质；

从林业站或农民手中收购许可砍伐的，树龄在10年以上，生长海拔500米以上无污染深山青冈栎木作为栽培基质。(备注：砍伐后为防止木料水分过湿或过干，一般的杂木树以砍后10天左右为宜，青冈栎树因含则需20天才可以装袋制作栽培段。)

将青冈栎木锯成长度25公分段，直径15公分以上的段木，从中间破开成2半或四半。断面要平整，长短要统一。根据椴木直径的大小，分别选用偏径宽度15～30厘米不同规格、厚度5～6丝米的耐高温、抗拉力的聚乙烯筒袋。装袋时将适宜筒袋(长度55～62厘米，以两头扎口合适为度)装放椴木(14～15厘米每袋装两段，28～30厘米每袋装一段)，两头分别扎活结，以防扎破筒袋；装袋、搬袋要轻拿轻放，防止破损。

对装袋完成的椴木进行灭菌，蒸煮椴木时，当锅内温度达100℃后要维持20小时不降温，待停火后温度下降至80℃以下出灶、冷却。

步骤六，将灵芝栽培种接种在段木袋中，经过菌丝培养得到菌木；

将灵芝栽培种接种在段木袋中的具体步骤为：

选用门窗密封好、场地干燥、清洁的接种室，接种室内可用塑料膜制成相等的接种帐，有条件的可以用带风幕流水线；在接种前8～12小时将接种间及所有接种用具用臭氧消毒30分钟，待杀菌后的段木袋降至28～30℃时控温接种，接种时要用75％酒精对菌种消毒，播种要满断面，口要扎实，两头接种，堆放平稳。

菌丝培养得到菌木的具体步骤为：

选择保温性能好的房间作为培养间，室温要控制在25-28摄氏度，培养间要尽量避光，发菌25天后要进行酌情翻堆，当菌丝长满全袋时适当增加光照，促进菌丝生长，若发现菌内积水或菌丝萎缩一定扎小孔放气，以增氧通气，并让积水流失，在25-28℃培养约70-80天菌丝成熟，菌木表层菌丝洁白粗壮，菌木间紧连不易掰开，少数菌木断面有豆粒大原基出现，这样的菌木达到可以上山埋土栽培的标准。培养间作为一种实施例，选用保温想性能好的土墙房间；室温要控制在25-28摄氏度，温度的调节方法为：温度过低要用火盆或或电加温；温度过高要适当通风，防止闷热烧菌。

步骤七，将菌木种植在山场中，仿野生栽培。

仿野生栽培的方法包括：

1)选择山场；

选择周边没有矿场等污染源的洁净阔叶林山场。山中要有充足的天然水源，阴凉潮湿(注意：野生灵芝虽然属于中高温型真菌，但在实际生长中夏天温度高温不超过32度为易，喜欢潮湿、阴凉的生长环境，6--9月山中温度在20--32度最适宜)。所以在选择山场时一定要做好仔细调查，包括周边环境、水源、海拔、朝向、正常状况下夏天的温度等。山场选择是仿野生栽培成功的关键因素。

2)山中排场；

山中排场的具体方法为；阳历五月中旬左右开始，将发好菌丝体的菌段脱袋，选择用于人工栽培的发好菌包，按照山场地形走势进行林下排场覆土，沿着山涧溪水，并距离溪水有高度的位置排场覆土，要有一定高度是为了防止大雨天气溪水漫淹。在夏天，如果遇到高温干旱天气，可以用水泵抽取溪水，通过水管扎孔喷雾浇灌和降温，保持温度和湿度；在排场覆土菌段的周边位置按照地势挖一些浅沟，以利于大雨天气排水。

3)出芝管理；

出芝管理的具体方法为：发育成熟的菌段埋土后8～12天便可形成原基，原基开始是一个较光滑的白色肉瘤状，向上伸长形成灵芝菌柄，当山上自然温度还在20度以内时，灵芝只长柄而盖却展不开，当温度达到22℃以上时，菌盖正常开展；灵芝生长最适宜温度是25～28℃，在此条件下经过15-20天灵芝就能成熟，成熟的标志是：菌盖边缘黄、白色环圈完全消失，放射出大量的红色烟雾状疱子粉末；待成熟后停止喷水一星期即可采收；灵芝的盛产期在6～9月，霜降停止出芝；在山场所在地气温降低至0度前，要增加覆土的厚度，或加盖稻草，压细土，使之安全过冬；待第二年清明后气温稳定在15℃以上时清除加盖物，迎接第二轮出芝。

4)采收与加工；

灵芝采收后剪去过长菌柄，清除杂物，排列于竹筛晒干或用烘房烘烤，干燥后及时用聚丙烯袋外套编织袋包装，以防受潮、虫蛀、霉变。

仿野生栽培灵芝无需使用任何农药，此种方式育种和栽培的灵芝，自身活力强，抗病虫害能力很好。灵芝芽3-5天后就会产生浓郁的苦味，在深山中基本无虫害发生。

实验部分：

为了验证本发明“从采集野生种源开始把控，选择涨势旺盛、无虫蛀、还有少许黄边的七八成熟灵芝作为取种种源，培育出的菌种，育种、接种、栽培时成活率更好，更有抗病虫害能力”的有益效果；作如下实验一：

第一步，在浙江西南部区域，龙泉、景宁、庆元境内采集黄白边未完全消失、体壮无虫蛀的七八成熟野生赤灵芝，从灵芝边缘部位剪下3*3MM小片放进嘴里咀嚼，选择口感更苦的10朵作为目标母种提取种源野生灵芝。另外选择完全成熟，并伴有虫蛀的野生灵芝10朵作为对照母种提取种源野生灵芝。

第二步，用目标培养基和传统培养基分别从野生灵芝中提取母种；

1)制作母种培养基的准备：提前一年左右的时间，将青冈栎木粉碎成3-5mm细小木屑颗粒，自然堆放在山林中，接受雨淋日晒自然腐蚀。(注意：木屑堆放的地形应选择坡度在10-20度的缓山坡，并在上方位置及两侧挖出约10公分深，10公分宽排水沟，防止下大雨时木料被冲走。)

2)将在山中自然堆放一年左右的青冈栎木屑取回，加水充分搅拌至水分含量达60％，用合适大小的高压铝箔袋装成1KG一袋，真空包装封口采用温度123度高温高压杀菌60分钟，自然冷却后备用。

3)将灵芝接种刀，镊子、培养皿用121度杀菌15分钟，备用。

4)将杀菌后的青冈栎颗粒均匀铺在杀菌后的培养皿中备用。

5)将采集到的目标野生灵芝种源和对照野生灵芝种源表面用75％酒精喷洒消毒后，将灵芝菌盖切口撕开，选择黄白色菌肉部位为取种部位，用接种刀和镊子取5*5MM左右小块菌肉，放置在铺设好木屑的无菌培养皿中，盖好培养皿盖，放入生化培养箱中培养。(目标灵芝和对照灵芝相同方法各做30个平板培养皿)

6)培养温度设为26-28度，经过5-7天培养，肉眼可见菌丝体。14天菌丝体可长满培养皿。选择洁白、致密、生长旺盛的作为母种。目标野生灵芝获得可做母种培养皿成功23个，对照灵芝获得可做母种培养皿成功19个。

7)用传统PDA平板培养基(马铃薯葡萄糖琼脂制作平板培养基)，采用以上相同取种和培养方式，经过3-5天培养，肉眼可见菌丝体。10天菌丝体长满培养皿。选择洁白、致密、生长旺盛的作为母种。目标野生灵芝获得可做母种培养皿成功29个，对照灵芝获得可做母种培养皿成功28个。

实验结果如表1：目标和对照灵芝用目标和对照培养基培育母种数据对比表所示：

表1

由表1可以确定：

a)目标灵芝获取母种的成功率比对照灵芝高，验证了涨势好、无虫害的七八分成熟度野生灵芝作为种源，提取母种的成功率更高。

b)用目标培养基青冈栎作为母种提取培养基时，比用对照PDA培养基难度大。但后续的实践证明，这种用目标培养基获得的野生灵芝母种的活力是更好的，野外山林中用目标培养基野生栽培的成活率和产量也更好，品质更均匀有保障。

将以上四种方式获得的四种母种，按相同的方法进行原种、栽培种培育，获得以上四个代码菌种的栽培种。

为了验证本发明“用与野生栽培时栽培基相同的物质青冈栎木屑作为母种培养基，具有优秀的成活率”的有益效果；作如下实验二：

实验二：

将母种培养成原种，再培养原种获得灵芝栽培种：

原种、栽培种培养基配方：山林中自然堆放满1年时间的青冈栎木屑90％，麦麸9％，石膏1％，加适量水拌匀(水分含量约55-60％)。

将以上培养基搅拌均匀后，装在偏径宽度15～20厘米不同规格、厚度5～6丝厚的耐高温、抗拉力的聚乙烯筒袋。采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入母种，25-28度培养30-35天，以袋内发满菌丝为准，挑选发菌饱满，无杂菌感染的菌包作为二级种(原种)。

菌种在接种前8～12小时将接种室及所有接种用具用臭氧消毒30分钟。待杀菌后的筒袋降至28～30℃时控温接种。接种满断面，口扎实，两头接种，堆放平稳。

将以上培养基搅拌均匀后，装在偏径宽度15～20厘米不同规格、厚度5～6丝厚的耐高温、抗拉力的聚乙烯筒袋。采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入原种，采用25--28度培养30天左右(以菌丝发透为准)，获得栽培种。

注意要点：木屑一定要自然堆放一年，产生一定程度的腐蚀，以便于吸收利用。

栽培段木准备和制作；

1)从农民手中收购许可砍伐的，树龄在10年以上，生长海拔500米以上无污染深山青冈栎木作为栽培基质。

2)砍后20天(备注：砍伐后为防止木料水分过湿或过干，一般的杂木树以砍后10天左右为宜，青冈栎树因含则需20天左右才可以装袋制作栽培段)，将青冈栎木锯成长度25公分段，直径15公分以上的段木，从中间破开成2半或四半。断面平整，长短统一。根据椴木直径的大小，分别选用偏径宽度15～30厘米不同规格、厚度5～6丝米的耐高温、抗拉力的聚乙烯筒袋。装袋时将适宜筒袋(长度55～62厘米，以两头扎口合适为度)装放椴木(14～15厘米每袋装两段，28～30厘米每袋装一段)，两头分别扎活结，以防扎破筒袋；装袋、搬袋要轻拿轻放，防止破损。

3)灭菌，用蒸汽灭菌，当锅内温度达100℃后要维持20小时不降温。菌筒上灶后迅速用旺火猛攻，使锅内温度迅速达到100℃，中间火力稳定，待停火后温度下降至80℃以下出灶、冷却。

4)接种，将四个代码栽培种按相同的方法各接种120个青冈栎段木栽培基。菌种在接种前8～12小时将接种室及所有接种用具用臭氧消毒30分钟。待杀菌后的段木袋降至28～30℃时控温接种。接种满断面，口扎实，两头接种，堆放平稳。

5)菌丝培养，培养间选择保温性能好的土墙房间，室温要控制在25--28摄氏度左右。温度过低用电加温；温度过高时适当通风，防止闷热烧菌。培养间尽量避光，发菌25天后要进行翻堆，当菌丝长满全袋时适当增加光照，促进菌丝生长。在25～28℃培养约70--80天菌丝成熟，菌木表层菌丝洁白粗壮，菌木间紧连不易掰开，少数菌木断面有豆粒大原基出现，即上山埋土栽培。

实验结果如表2：不同方法获得的菌种在接种发菌环节成活率对比表所示；

菌种代码	接种段木袋数量	获得成活段木菌袋数	成活率
				MM	120	120	100％
MPDA	120	117	97.5％
				DM	120	117	97.5％
DPDA	120	114	95％

表2

由表2可以确定：

在育种阶段，用与计划野生栽培时栽培基相同的物质作为菌种培育培养基，其接种后的成活率最高。(实验中是100％成活)

为了验证本发明“从采集野生种源开始把控，选择涨势旺盛、无虫蛀、还有少许黄边的七八成熟灵芝作为取种种源，用与野生栽培时栽培基相同的物质青冈栎木屑作为母种培养基，产出的灵芝具有优秀的产量和质量”的有益效果；作如下实验三：

实验三，深山仿野生栽培；

1)山场选址要求：选择周边没有矿场等污染源的洁净阔叶林山场。山中有充足的天然水源，阴凉潮湿(注意：野生灵芝虽然属于中高温型真菌，但在实际生长中夏天温度高温不超过32度为易，喜欢潮湿、阴凉的生长环境，6--9月山中温度在20--32度最适宜)

2)山中排场：阳历五月中旬左右开始，将以上四种方法发好菌丝体的菌段脱袋，各选择110个，同时选择110个用于人工栽培的发好菌包，在相同环境的山林里栽培对比。严格按照山场地形走势进行林下排场覆土。沿着山涧溪水两边距溪水有一定高度的位置排场覆土。在夏天产生高温天气时用溪水降温喷淋降温，干旱天气用溪水浇灌。排场覆土菌段的位置，在周边按照地势简单挖一些小浅沟，以利于大雨天气排水。

3)出芝管理：发育成熟的菌段埋土后8～12天便可形成原基。原基开始是一个较光滑的白色肉瘤状，向上伸长形成灵芝菌柄，当山上自然温度还在20度以内时，灵芝只长柄而盖却展不开(这时不用着急，随着气温的升高会很快展开)。当温度达到22℃以上时，菌盖正常开展。灵芝生长最适宜温度是25～28℃，在此条件下经过15--20天左右灵芝就能成熟。成熟的标志是：菌盖边缘黄、白色环圈完全消失，放射出大量的红色烟雾状疱子粉末，这时停止喷水一星期左右即可采收。灵芝的盛产期在6～9月，霜降停止出芝。冬季在山场所在地气温降低至0度前，要增加覆土的厚度，或加盖稻草，压细土，使之安全过冬。待第二年清明后气温稳定在15℃以上时清除加盖物，迎接第二轮出芝。

(备注：仿野生栽培灵芝无需使用任何农药，此种方式育种和栽培的灵芝，自身活力强，抗病虫害能力很好。灵芝芽3-5天后就会产生浓郁的苦味，在深山中基本无虫害发生。)

4)采收与加工，灵芝采收后剪去过长菌柄，清除杂物，排列于竹筛晒干或用烘房烘烤，干燥后及时用聚丙烯袋外套编织袋包装，以防受潮、虫蛀、霉变。

得到的实验结果如表3：目标灵芝和目标培养基深山野生栽培产出对比表所示；

表3

由表3可以确定：在育种阶段，用与野生栽培时栽培基相同的物质作为菌种培育培养基，在野外栽培时会获得更好的成活率和产量。

本发明提供一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，从采集野生种源开始把控，选择涨势旺盛、无虫蛀、还有少许黄边的七八成熟灵芝作为取种种源，培育出抗病虫害能力更强、在栽培环节更适宜目标栽培基质的菌种；用青冈栎木屑作为母种培养基，确保成活率和栽培基质野外耐腐蚀能力，保障产出灵芝的产量和质量。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，选择涨势旺盛、口感苦、带有黄边的七八成熟的野生灵芝作为种源；

步骤二，用与野生栽培时栽培基相同的物质作为培养基，制作母种培养基；

步骤三，将种源接种在母种培养基中，经过培养，待菌丝体成熟，选择洁白、致密、生长旺盛的作为母种；

步骤四，将母种培养成原种，再培养原种获得灵芝栽培种；

步骤五，制作段木袋作为菌木的栽培基质；

步骤六，将灵芝栽培种接种在段木袋中，经过培养得到菌木；

步骤七，将菌木种植在山场中，仿野生栽培。

2.根据权利要求1所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，步骤一，在浙江西南部区域，龙泉、景宁、庆元境内采集有黄白边、体壮无虫蛀的七八成熟野生赤灵芝，从灵芝边缘部位剪下3*3mm小片放进嘴里咀嚼，选择口感苦的作为种源。

3.根据权利要求1所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，

步骤二，用青冈栎木屑作为培养基，制作母种培养基；

1)材料准备；提前一年的时间，将青冈栎木粉碎成3-5mm木屑颗粒，自然堆放在山林中，接受雨淋日晒自然腐蚀；

2)加水备用；将在山中自然堆放一年的青冈栎木屑取回，加水充分搅拌至水分含量达60％，用合适大小的高压铝箔袋装成一袋，真空包装封口采用温度123度高温高压杀菌60分钟，自然冷却后备用；

3)器具准备；将灵芝接种刀，镊子、培养皿用121度杀菌15分钟，备用；

4)将杀菌后的青冈栎颗粒均匀铺在杀菌后的培养皿中备用。

4.根据权利要求1所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，步骤三，将采集到的种源表面用75％酒精喷洒消毒后，将灵芝菌盖切口撕开，选择黄白色菌肉部位为取种部位，用接种刀和镊子取5*5mm菌肉，放置在铺设好木屑的无菌培养皿中，盖好培养皿盖，放入生化培养箱中培养；培养温度设为26-28度，经过5-7天培养，肉眼可见菌丝体，2周菌丝体可长满培养皿，及时选择洁白、致密、生长旺盛的作为母种。

5.根据权利要求1所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，步骤四，将母种培养成原种，再培养原种获得灵芝栽培种；

灵芝菌种培养基配方：山林中自然堆放满1年时间的青冈栎木屑90％，麦麸9％，石膏1％，加水拌匀；

将所述灵芝菌种培养基搅拌均匀后，装在筒袋内，采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入母种，25-28度培养30-35天，以袋内发满菌丝为准，挑选发菌饱满，无杂菌感染的菌包作为原种；

将所述灵芝菌种培养基搅拌均匀后，装在筒袋内，采用121度60分钟杀菌，冷却后无菌操作接入原种，采用25-28度培养30天，待菌丝发透，获得栽培种。

6.根据权利要求1所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，步骤五，制作段木袋作为菌木的栽培基质；

选择树龄在10年以上，生长海拔500米以上无污染深山青冈栎木作为栽培基质；

将青冈栎木锯成长度25公分段，直径15公分以上的段木，从中间破开成2半或四半，装进耐高温、抗拉力的聚乙烯筒袋；

装袋完成后，将筒袋两头分别扎活结；

对装袋完成的椴木进行灭菌，蒸煮椴木时，当锅内温度达100℃后要维持20小时不降温，待停火后温度下降至80℃以下出灶、冷却。

7.根据权利要求1所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，步骤六，将灵芝栽培种接种在段木袋中，经过菌丝培养得到菌木；

将灵芝栽培种接种在段木袋中的具体步骤为：

选用门窗密封好、场地干燥、清洁的接种室，在接种前8-12小时将接种间及所有接种用具用臭氧消毒30分钟，待杀菌后的段木袋降至28-30℃时控温接种，接种时要用75％酒精对菌种消毒，播种要满断面，口要扎实，两头接种，堆放平稳；

菌丝培养得到菌木的具体步骤为：

选择保温性能好的房间作为培养间，室温要控制在25-28摄氏度，培养间要避光，发菌25天后要进行翻堆，当菌丝长满全袋时增加光照，促进菌丝生长，若发现菌内积水或菌丝萎缩，对筒袋扎小孔放气，以增氧通气，并让积水流失，在25-28℃培养70-80天菌丝成熟，菌木表层菌丝洁白粗壮，菌木间紧连不易掰开，少数菌木断面有豆粒大原基出现，这样的菌木达到可以上山埋土栽培的标准。

8.根据权利要求1所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，步骤七，将菌木种植在山场中，仿野生栽培；

所述仿野生栽培的方法包括：

1)选择山场；

选择周边没有矿场等污染源的洁净阔叶林山场，山中有充足的天然水源，阴凉潮湿，6-9月山中温度在20-32度最适宜，潮湿、阴凉的生长环境；

2)山中排场；

阳历五月中旬开始，将发好菌丝体的菌段脱袋，选择用于人工栽培的发好菌包，按照山场地形走势进行林下排场覆土；

3)出芝管理；

发育成熟的菌段埋土后8-12天便可形成原基，待菌盖正常开展后，经过15-20天灵芝就能成熟；成熟的标志是：菌盖边缘黄、白色环圈完全消失，放射出大量的红色烟雾状疱子粉末；待成熟后停止喷水一星期即可采收；

4)采收与加工；

灵芝采收后剪去过长菌柄，清除杂物，排列于竹筛晒干或用烘房烘烤，干燥后及时用聚丙烯袋外套编织袋包装。

9.根据权利要求8所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，

所述山中排场的具体方法为；阳历五月中旬开始，将发好菌丝体的菌段脱袋，选择用于人工栽培的发好菌包，按照山场地形走势进行林下排场覆土，沿着山涧溪水，并距离溪水有高度的位置排场覆土；在夏天产生高温天气时用溪水降温喷淋降温，干旱天气用溪水浇灌；在排场覆土菌段的周边位置按照地势挖一些浅沟，以利于大雨天气排水。

10.根据权利要求8所述的一种高效育种的野生赤灵芝栽培方法，其特征在于，

所述出芝管理的具体方法为：发育成熟的菌段埋土后8-12天便可形成原基，原基开始是一个较光滑的白色肉瘤状，向上伸长形成灵芝菌柄，当山上自然温度还在20度以内时，灵芝只长柄而盖却展不开，当温度达到22℃以上时，菌盖正常开展；灵芝生长最适宜温度是25-28℃，在此条件下经过15-20天灵芝就能成熟，成熟的标志是：菌盖边缘黄、白色环圈完全消失，放射出大量的红色烟雾状疱子粉末；待成熟后停止喷水一星期即可采收；灵芝的盛产期在6-9月，霜降停止出芝；在山场所在地气温降低至0度前，要增加覆土的厚度，或加盖稻草，压细土，使之安全过冬；待第二年清明后气温稳定在15℃以上时清除加盖物，迎接第二轮出芝。