CN108840888A - 罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途 - Google Patents

罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途 Download PDF

Info

Publication number
CN108840888A
CN108840888A CN201810914952.2A CN201810914952A CN108840888A CN 108840888 A CN108840888 A CN 108840888A CN 201810914952 A CN201810914952 A CN 201810914952A CN 108840888 A CN108840888 A CN 108840888A
Authority
CN
China
Prior art keywords
neoflavonoid
preparation
ethyl alcohol
grosvenor momordica
momordica leaf
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201810914952.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108840888B (zh
Inventor
唐其
陆英
朱仕豪
吴长桥
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hunan Agricultural University
Original Assignee
Hunan Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hunan Agricultural University filed Critical Hunan Agricultural University
Priority to CN201810914952.2A priority Critical patent/CN108840888B/zh
Publication of CN108840888A publication Critical patent/CN108840888A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108840888B publication Critical patent/CN108840888B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07HSUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06Separation; Purification
    • C07H1/08Separation; Purification from natural products
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06Free radical scavengers or antioxidants
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07HSUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C07H17/06Benzopyran radicals
    • C07H17/065Benzo[b]pyrans
    • C07H17/07Benzo[b]pyran-4-ones

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

一种罗汉果叶新黄酮类化合物,结构式如下,其是以罗汉果叶为原料,采用水‑正丁醇‑正己烷‑乙醇‑冰乙酸(5:3:1:1:0.001,v/v)为两相溶剂体系进行高速逆流色谱分离得到。该化合物清除DPPH自由基活性的IC50为0.20mg/mL,抗氧化活性好,为罗汉果进一步开发利用奠定了基础。

Description

罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途
技术领域
本发明涉及一种新黄酮类化合物,具体涉及一种从罗汉果叶分离制备得到的新黄酮类化合物,同时涉及该化合物的制备以及其抗氧化活性。
背景技术
罗汉果(Siraitia grosvenorii)是双子叶植物葫芦科罗汉果属植物,是我国药食两用的植物。近年来,罗汉果作为一种天然甜味剂,在世界范围内得到广泛应用,其需求量也是与日剧增,因此种植面积也是逐年增加。在罗汉果种植中产生大量的茎叶,在民间也常用作类茶使用。
现代研究表明,罗汉果叶中含有较高的黄酮类化合物,具有抗氧化、抗癌、抗心脑血管疾病、抗炎、抗病毒、免疫调节等多种生理功能及药理作用,其功能已得到广泛认可,因此将罗汉果叶中的黄酮开发应用于食品、药品、化妆品等产品,不但可以充分开发利用罗汉果资源,提高农业产业附加值,更可研制有益人们健康的多种大健康产品,促进人类健康。
发明内容
本发明的目的是从罗汉果叶中分离制备一种新的黄酮类化合物,同时提供该化合物的制备方法及其抗氧活化,为其罗汉果叶进一步开发利用奠定基础。
为达上述目的,本发明所采用的技术方案是:一种新黄酮类化合物,其结构式如下:
本发明同时提供上述新黄酮类化合物的制备方法,该方法步骤如下:
A.高速逆流上样原料的制备:取干燥的罗汉果叶,粉碎,用60-80%质量浓度的乙醇超声提取,提取液过滤,减压回收乙醇,水层用石油醚萃取至醚层色浅,调pH为2-4后,上AB-8大孔吸附树脂,依次用水、60-80%质量浓度的乙醇进行洗脱,收集洗脱液,浓缩后冷冻干燥得高速逆流上样原料;
B.高速逆流色谱分离:按体积比取水:正丁醇:正己烷:甲醇:冰乙酸=5:3:1:1:0.001作为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,将步骤A的高速逆流上样原料进样,收集300-325min的流出液,旋转蒸发浓缩后冷冻干燥,即得。
上述步骤B中高速逆流色谱分离条件为:流速2mL/min、主机转速850rpm/min,分离温度25℃,检测波长254nm,在该条件下固定相的保留率为42%,上样量为270mg。
上述步骤A中用60-80%质量浓度的乙醇超声提取时,按每1g罗汉果叶粉加10-15ml 60-80%质量浓度的乙醇的比例加入乙醇,提取次数为3次,每次20-40min。提取时,提取前加入乙醇后先浸泡罗汉果叶粉12-24h。
上述步骤A中减压回收乙醇的温度为50-60℃。上述步骤B中旋转蒸发浓缩的温度为50-60℃。
本发明还提供上述的新黄酮类化合物在制备抗氧化剂中的应用。
本发明以罗汉果叶为原料,通过溶剂提取、大孔吸附树脂纯化后利用高速逆流色谱制备分离得到一种新黄酮类化合物,该制备方法稳定、重现性好,可用于化合物大量制备。抗氧化活性研究表明,该化合物活性高于罗汉果叶中其他黄酮类化合物,具有较好的开发利用前景,同时制备方法也为化合物进一步活性研究奠定了物质基础。
具体实施方式
实施例1新化合物的制备
高速逆流(HSCCC)上样原料的制备:取60℃烘干后粉碎的罗汉果叶原料600g,用9000ml 70%质量浓度的乙醇浸泡12h,超声提取三次,每次30min,提取液过滤,55℃减压回收乙醇,水层用石油醚萃取至醚层色浅,将pH调到3,通过AB-8大孔吸附树脂进行吸附,静置30min后水洗3000ml,然后用70%质量浓度的乙醇洗脱3600ml,收集乙醇洗脱液,浓缩后冷冻干燥得高速逆流上样原料。
高速逆流色谱(HSCCC)分离:以水:正丁醇:正己烷:甲醇:冰乙酸(v/v,5:3:1:1:0.001,V/V)作为溶剂体系上样操作。配置溶剂体系2000ml,静置过夜,两相分离后超声脱气30min。上相作固定相,下相作流动相。考察流动相流速、转速及上样量对分离效果的影响,选择流速2mL/min、主机转速850rpm/min,分离温度25℃,检测波长254nm,在该条件下固定相的保留率为42%,上样量270mg,收集300-325min的流出液,55℃旋转蒸发浓缩后冷冻干燥得3.16mg化合物。
实施例2新化合物的结构鉴定
新化合物为淡黄色粉末,Q-TOF MS分析化合物的[M+H]+为723.2128,分子式为C33H38O18,根据1H和13C NMR数据,并结合文献,确定化合物为:山奈酚-3-O-α-L-[4-O-(4-羧基-3-羟基-3-甲基-丁酰基)]鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷,化合物结构如下,NMR信号归属见表1。
山奈酚-3-O-α-L-[4-O-(4-羧基-3-羟基-3-甲基-丁酰基)]鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷
表1新化合物核磁共振H谱与C谱归属表
实施例3 DPPH自由基清除活性测定
四种待测化合物皆为黄酮类化合物,分别为:化合物1:山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-[β-D-葡萄糖基-(1-2)-α-L-鼠李糖苷],化合物2:山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷,化合物3:山奈酚-3-O-α-L-[4-O-(4-羧基-3-羟基-3-甲基-丁酰基)]鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷,化合物4:山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷。化合物1、化合物2及化合物4皆为罗汉果叶中分离出的其他黄酮类化合物。
准确称取10.00mgDPPH溶于250mL无水乙醇制得0.04mg/mL DPPH·乙醇溶液,另将四个待测化合物配置成系列溶液。将不同质量浓度的待测化合物0.1mL加到3.9mL 0.04mg/mL DPPH·乙醇溶液中,常温下避光反应30min,测定其在517nm处的吸光值,重复3次取平均值。按下式计算DPPH自由基的清除率:清除率(%)=[1-(A1-A2)/A0]×100%,其中抗氧化剂的清除自由基能力采用清除DPPH自由基的IC50值表示,即DPPH自由基清除率为50%时所对应的抗氧化剂溶液浓度。式中,A0为3.9mL 0.04mg·mL-1DPPH·乙醇溶液+0.1mL无水乙醇溶液的吸光值;A1为3.9mL 0.04mg·mL-1DPPH·乙醇溶液+0.1mL待测样液的吸光值;A2为3.9mL无水乙醇溶液+0.1mL待测样液的吸光值。四种化合物清除DPPH自由基能力的测定结果见表2。由表2可知,4个化合物清除DPPH自由基活性的IC50分别为:0.23mg/mL、22.24mg/mL、0.20mg/mL、0.34mg/mL,表明本发明的新化合物的抗氧化活性最好,要强于其他3种黄酮类化合物。
表2 4种化合物质量浓度与清除率之间的线性关系和IC50
化合物 线性方程 R2(相关系数) IC50值(mg/mL)
1 y=7.3058ln(x)+27.337 0.9783 0.23
2 y=18.614ln(x)+77.108 0.9945 22.24
3 y=17.413ln(x)+68.593 0.9861 0.20
4 y=25.323ln(x)+90.94 0.9938 0.34

Claims (8)

1.一种新黄酮类化合物,其结构式如下:
2.权利要求1所述的新黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,该方法步骤如下:
A.高速逆流上样原料的制备:取干燥的罗汉果叶,粉碎,用60-80%质量浓度的乙醇超声提取,提取液过滤,减压回收乙醇,水层用石油醚萃取至醚层色浅,调pH为2-4后,上AB-8大孔吸附树脂,依次用水、60-80%质量浓度的乙醇进行洗脱,收集洗脱液,浓缩后冷冻干燥得高速逆流上样原料;
B.高速逆流色谱分离:按体积比取水:正丁醇:正己烷:甲醇:冰乙酸=5:3:1:1:0.001作为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,将步骤A的高速逆流上样原料进样,收集300-325min的流出液,旋转蒸发浓缩后冷冻干燥,即得。
3.如权利要求2所述的新黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,所述步骤B中高速逆流色谱分离条件为:流速2mL/min、主机转速850rpm/min,分离温度25℃,检测波长254nm,在该条件下固定相的保留率为42%,上样量为270mg。
4.如权利要求2或3所述的新黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,所述步骤A中用60-80%质量浓度的乙醇超声提取时,每1g罗汉果叶粉加10-15ml乙醇,提取次数为3次,每次20-40min。
5.如权利要求4所述的新黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,用乙醇超声提取时,提取前加入乙醇后先浸泡罗汉果叶粉12-24h。
6.如权利要求2或3所述的新黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,所述步骤A中减压回收乙醇的温度为50-60℃。
7.如权利要求2或3所述的新黄酮类化合物的制备方法,其特征在于,所述步骤B中旋转蒸发浓缩的温度为50-60℃。
8.权利要求1所述的新黄酮类化合物在制备抗氧化剂中的应用。
CN201810914952.2A 2018-08-13 2018-08-13 罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途 Active CN108840888B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810914952.2A CN108840888B (zh) 2018-08-13 2018-08-13 罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810914952.2A CN108840888B (zh) 2018-08-13 2018-08-13 罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108840888A true CN108840888A (zh) 2018-11-20
CN108840888B CN108840888B (zh) 2021-04-02

Family

ID=64193029

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810914952.2A Active CN108840888B (zh) 2018-08-13 2018-08-13 罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108840888B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111560046B (zh) * 2020-06-01 2021-02-05 湖南华诚生物资源股份有限公司 一种作为护肤品抗氧剂的11-o-罗汉果醇肟酯衍生物以及一种护肤品
CN114516893A (zh) * 2022-03-09 2022-05-20 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 罗汉果新黄酮类化合物、其制备方法及在蜜蜂引诱剂中的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101353363A (zh) * 2008-09-09 2009-01-28 广西师范大学 高速逆流色谱分离纯化罗汉果叶黄酮化合物的方法及产品
CN102464685A (zh) * 2010-11-09 2012-05-23 杨国栋 从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法及其产品
US9029518B2 (en) * 2012-06-27 2015-05-12 King Saud University Method of extracting kaempferol-based antioxidants from Solenostemma arghel
JP2016113370A (ja) * 2014-12-11 2016-06-23 寿スピリッツ株式会社 フラボノイド化合物、フラボノイド化合物の製造方法およびHMG−CoA還元酵素阻害剤

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101353363A (zh) * 2008-09-09 2009-01-28 广西师范大学 高速逆流色谱分离纯化罗汉果叶黄酮化合物的方法及产品
CN102464685A (zh) * 2010-11-09 2012-05-23 杨国栋 从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法及其产品
US9029518B2 (en) * 2012-06-27 2015-05-12 King Saud University Method of extracting kaempferol-based antioxidants from Solenostemma arghel
JP2016113370A (ja) * 2014-12-11 2016-06-23 寿スピリッツ株式会社 フラボノイド化合物、フラボノイド化合物の製造方法およびHMG−CoA還元酵素阻害剤

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
OANA-CRINA BUJOR ET AL.: ""Phenolic compounds and antioxidant activity of lingonberry (Vaccinium vitis-idaea L.) leaf, stem and fruit at different harvest periods"", 《FOOD CHEMISTRY》 *
张晶 等主编: "《中药化学》", 30 April 2015, 中国农业大学出版社 *
陈全斌 等: ""罗汉果叶黄酮抗氧化能力研究"", 《食品研究与开发》 *
陈功锡 等编著: "《湘西药用植物资源开发与可持续利用》", 31 May 2015, 西南交通大学出版社 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111560046B (zh) * 2020-06-01 2021-02-05 湖南华诚生物资源股份有限公司 一种作为护肤品抗氧剂的11-o-罗汉果醇肟酯衍生物以及一种护肤品
CN114516893A (zh) * 2022-03-09 2022-05-20 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 罗汉果新黄酮类化合物、其制备方法及在蜜蜂引诱剂中的应用
CN114516893B (zh) * 2022-03-09 2022-07-26 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 罗汉果新黄酮类化合物、其制备方法及在蜜蜂引诱剂中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN108840888B (zh) 2021-04-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102796066B (zh) 一种黄酮类化合物及其制备方法与应用
CN104861019B (zh) 高速逆流色谱制备油茶籽壳中黄酮类化合物1、2的方法
CN105884621B (zh) 一种倍半萜类化合物及其制备方法和应用
CN103919712B (zh) 北虫草提取物及其制备方法和应用
US10196417B2 (en) Baicalin magnesium compound and its preparation method and application
CN101863871A (zh) 蔷薇红景天总苷及其医药用途和制备方法
CN108840888A (zh) 罗汉果叶新黄酮类化合物及其制备、用途
CN107698458A (zh) 一种n1,n5‑双(对香豆酰)亚精胺的提取方法
CN103169727B (zh) 流苏花总黄酮类化合物及其制备方法和应用
CN103113433B (zh) 一种从巧玲花中提取橄榄苦苷的方法
CN108997296B (zh) 几种异戊烯基二氢茋和异戊烯基黄酮的结构和用途
CN112898357B (zh) 金莲花中一种二萜苷类新化合物及其分离纯化方法和应用
CN111018877B (zh) 一种土木香中倍半萜类衍生物、其制备方法及应用
KR101737556B1 (ko) 법제 하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 스트레스 개선용 조성물
CN103232427A (zh) 一种呫吨酮类化合物及其制备方法和应用
US20240270779A1 (en) Novel phenylpropanoid compound
CN102772501A (zh) 一种藏边大黄提取物及其制备方法
CN103191143B (zh) 一种强心苷化合物的用途
CN106565444B (zh) 山药地上部分菲类化合物的提取方法及应用
CN103113439A (zh) 从对叶大戟中制备山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法
CN102603833B (zh) 透骨草中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷的提取分离工艺
CN107698637B (zh) 一种白檀果化合物高速逆流色谱制备方法
CN107235893B (zh) 3,5-二(3,4-二羟基苯基)吡啶及其提取方法和应用
CN106045951B (zh) 一种云实内酯及其制法和用途
CN105399784B (zh) 一种新苯丙素苷类化合物及其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant