CN108815201B - 一种防治仔猪白痢的生物兽药及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种防治仔猪白痢的生物兽药及其制备方法，属于生物兽药技术领域，该生物兽药按重量百分比计，由如下组分组成：乳酸菌发酵液5‑10％，酪酸梭状芽孢杆菌发酵液10‑25％，蜡样芽胞杆菌发酵液10‑25％，余量为水，三种发酵液中菌浓度均为107‑109Cfu/mL，该蜡样芽胞杆菌发酵液由如下方法制得：将杨树花粉末加入蜡样芽胞杆菌的扩大培养基中用于所述蜡样芽胞杆菌的发酵培养，所述发酵培养结束后，获得蜡样芽胞杆菌发酵液。该生物兽药具有防效好、安全、环境友好等特点，该兽药的使用可以降低化学抗生素的使用次数，进而减少仔猪对化学抗生素的抗性药，且其制备工艺简单，对设备要求不高，成本低，适合工业化生产。

Description

一种防治仔猪白痢的生物兽药及其制备方法
技术领域
本发明属于生物兽药技术领域，具体涉及一种防治仔猪白痢的生物兽药及其制备方法。
背景技术
猪肉是提高国民生活水平的菜篮子工程的主要指标，也是影响物价波动的重要因素。其中，养猪业发展关键在于仔猪，曾有“养好仔猪大半收”的说法，仔猪健壮，则肉猪出栏率高。仔猪出生后两个月称为仔猪期，此时最易发生白痢症(也属大肠杆菌)。患有“白痢症”的仔猪瘦小，不肯进食，最初拉稀、后变白痢，有传染性，肠黏膜有卡他性炎症，肠系膜淋巴结轻度肿胀，少数病猪腹腔内有少量胶胨样物质，膀胱黏膜轻度出血，若不及时治疗，仔猪就会死亡。仔猪白痢症通常以防为主，且防重于治，目前尚无较好的预防和治疗药物。
随着人们环保意识的增强和对绿色无公害食品需求的扩大，使得动物病害的生物防治越来越受到人们的关注，生物防治因其具有对环境、生态和人类健康安全的优点，在世界各国得到了厂泛的重视并发挥着越来越重要的作用。利用生物兽药防治动物病害是当今动物病界十分活跃的研究领域之一，并已显示出良好的应用前景。生物兽药是公认的很有前途的生防因子。生物兽药以其种类和数量众多、分布广泛、作用方式多样、对非靶标生物安全及不污染环境等优点而倍受重视。在国内外的研究中，利用生物兽药防治动物病害的报道很多且都取得了良好的效果。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种防治仔猪白痢的生物兽药；目的之二在于提供一种防治仔猪白痢的生物兽药的制备方法。
为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
1、一种防治仔猪白痢的生物兽药，按重量百分比计，所述生物兽药由如下组分组成：菌浓度为107-109Cfu/mL的乳酸菌发酵液5-10％，菌浓度为107-109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液10-25％，菌浓度为107-109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液10-25％，余量为水；所述蜡样芽胞杆菌发酵液由如下方法制得：将杨树花粉末加入蜡样芽胞杆菌的扩大培养基中用于所述蜡样芽胞杆菌的发酵培养，所述发酵培养结束后，获得蜡样芽胞杆菌发酵液。
优选的，按重量百分比计，所述生物兽药由如下组分组成：菌浓度为107-109Cfu/mL的乳酸菌发酵液6-8％，菌浓度为107-109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液15-23％，菌浓度为107-109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液12-20％，余量为水。
优选的，按重量百分比计，所述生物兽药由如下组分组成：菌浓度为107-109Cfu/mL的乳酸菌发酵液7％，菌浓度为107-109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液18％，菌浓度为107-109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液15％，余量为水。
优选的，所述蜡样芽胞杆菌发酵液由如下方法制得：首先获取蜡样芽胞杆菌种子液，然后将所述种子液接种于含有杨树花粉末的扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得蜡样芽胞杆菌发酵液，所述含有杨树花粉末的扩大培养基中杨树花粉末的质量分数为1-15％。
优选的，所述杨树花粉末的颗粒大小为80-120目。
2、所述的一种防治仔猪白痢的生物兽药的制备方法，所述方法为：根据所述生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
优选的，所述乳酸菌发酵液的制备方法如下：首先获取乳酸菌种子液，然后将所述种子液接种于扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得乳酸菌发酵液。
优选的，所述乳酸菌发酵液的制备方法如下：将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于液体培养基内，然后在25-35℃下于摇床中培养20-30小时后获得种子液，按所述种子液与扩大培养基的重量比为l:8-20将所述种子液加入所述扩大培养基内，再在25-35℃下于摇床中培养60-80小时得乳酸菌发酵液。
优选的，所述液体培养基和扩大培养基的制备方法如下：按重量份计，将10-30份淀粉，10-30份牛肉膏，10-30份蛋白胨和4-8份NaCl加入1000-3000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7-7.5，过滤，经湿热灭菌后冷却至18-35℃即可。
优选的，所述酪酸梭状芽孢杆菌发酵液的制备方法如下：首先获取酪酸梭状芽孢杆菌种子液，然后将所述种子液接种于扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得酪酸梭状芽孢杆菌发酵液。
优选的，所述酪酸梭状芽孢杆菌发酵液的制备方法如下：将酪酸梭状芽孢杆菌划线培养后挑取单菌落接种于液体培养基内，然后在25-35℃下于摇床中培养20-30小时后获得种子液，按所述种子液与扩大培养基的重量比为l:8-20将所述种子液加入所述扩大培养基内，再在25-35℃下于摇床中培养60-80小时得酪酸梭状芽孢杆菌发酵液。
优选的，所述液体培养基和扩大培养基的制备方法如下：按重量份计，将10-30份淀粉，10-30份牛肉膏，10-30份蛋白胨和4-8份NaCl加入1000-3000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7-7.5，过滤，经湿热灭菌后冷却至18-35℃即可。
优选的，所述蜡样芽胞杆菌发酵液的制备方法如下：首先获取蜡样芽胞杆菌种子液，然后将所述种子液接种于含有杨树花粉末的扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得蜡样芽胞杆菌发酵液。
优选的，所述蜡样芽胞杆菌发酵液的制备方法如下：将蜡样芽胞杆菌划线培养后挑取单菌落接种于液体培养基内，然后在25-35℃下于摇床中培养20-30小时后获得种子液，按所述种子液与含有杨树花粉末的扩大培养基的重量比为l:8-20将所述种子液加入所述含有杨树花粉末的扩大培养基内，再在25-35℃下于摇床中培养60-80小时得蜡样芽胞杆菌发酵液。
优选的，所述液体培养基的制备方法如下：按重量份计，将10-30份淀粉，10-30份牛肉膏，10-30份蛋白胨和4-8份NaCl加入1000-3000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7-7.5，过滤，经湿热灭菌后冷却至18-35℃即可。
优选的，所述含有杨树花粉末的扩大培养基的制备方法如下：按重量份计，将10-30份淀粉，10-30份牛肉膏，10-30份蛋白胨和4-8份NaCl加入1000-3000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7-7.5，过滤，经湿热灭菌后冷却至18-35℃，然后再加入1-15wt％的杨树花粉末，拌匀即可。
本发明的有益效果在于：本发明提供了一种防治仔猪白痢的生物兽药及其制备方法，本发明中的生物兽药具有防效好、安全、环境友好等特点，该兽药的使用可以降低化学抗生素的使用次数，进而减少仔猪对化学抗生素的抗性药。经田间4年，对总计试验示范患有白痢仔猪4000头的验证可知，本发明中生物兽药对仔猪白痢一个疗程治愈率为100％，其中每头仔猪用药三天为一个疗程，足以证明本发明中生物兽药具有极好的防治效果。其原因在于：
首先，本发明的生物兽药中含有乳酸菌、酪酸梭状芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌，三种菌在仔猪体内生长繁殖，能产生有益于机体健康的乳酸、丁酸、酶类、肽类、抗菌素和B族维生素等多种营养成份，不但可以抑制肠道内致病菌和有毒物质的产生，使肠道菌群的构成发生有益变化，改善机体胃肠道功能，恢复机体肠道内菌群平衡，还能够刺激肠道蠕动，润肠通便，而且对溃疡、下痢、腹泻也有显著治疗效果，同时，三种菌通过黏附素与肠黏膜细胞紧密结合，在肠黏膜表面定植占位，成为生理屏障的主要组成部分，从而达到恢复宿主抵抗力，修复肠道菌群屏障、治愈肠道疾病的作用。
其次，该生物兽药中蜡样芽胞杆菌发酵液的制备过程中，以杨树花粉末为其扩大培养基组分之一对其进行培养，可有效增强该菌的抗病能力、在畜禽肠道内的适应能力及稳定性遗传繁殖能力。其中，杨树花粉末中所含水杨苷、有机酸、鞣质等物质在发酵过程中能够提高蜡样芽孢杆菌的抗仔猪白痢能力，减少肠道有害菌的百分比；所含多糖、黄酮类、蛋白质、脂肪油、淀粉、等可提高蜡样芽胞杆菌的繁殖生长能力和在肠道中保持其生物活性的能力；所含内酯及香豆素，蒽醌类化合物、酚类、黄酮等物质能够在蜡样芽胞杆菌发酵中防止其非遗传性变异，使其具有稳定性遗传繁殖能力，并且能够降低蜡样芽胞杆菌代谢产物的毒副作用。相应的，杨树花粉末经蜡样芽胞杆菌发酵后，杨树花中的鞣质、蛋白质、氨基酸、多糖类等物质能够转化为利于仔猪吸收的活性有机物，其中，内酯及香豆素，蒽醌类化合物、酚类、黄酮等物质在发酵过程中产生的酸性物质能够改善胃肠道的酸碱平衡，使其能够在胃肠道保持较高的活性，起到促进消化，减轻仔猪大肠杆菌的感染能力。
最后，该生物兽药的制备工艺简单，对设备要求不高，成本低，适合工业化生产。
具体实施方式
下面将对本发明的优选实施例进行详细的描述。
本发明中使用的菌种中乳酸菌(Lactobacillus，ACCC 11016)，购于中国农业微生物保藏中心；酪酸梭状芽孢杆菌(Clostridium butyricum)，自行分离于山东科兴生物制品有限公司生产的酪酸梭菌二联活菌胶囊(常乐康)，批号为2017120301；蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus.Frankland，ATCC 11778)，购于美国菌种保藏中心。
实施例1
一种防治仔猪白痢的生物兽药，按重量百分比计，由如下组分组成：菌浓度为109Cfu/mL的乳酸菌发酵液7％，菌浓度为109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液18％，菌浓度为109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液15％，余量为水。具体方法如下：
(1)制备液体培养基和扩大培养基
按重量份计，将10份淀粉，10份牛肉膏，10份蛋白胨和4份NaCl加入1000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7，过滤，经湿热灭菌后冷却至20℃即可。
(2)制备含有杨树花粉末的扩大培养基
在步骤的(1)中制得的扩大培养基中再加入10wt％的颗粒大小为80目的杨树花粉末，拌匀即可。
(3)制备乳酸菌发酵液
将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在25℃下于摇床中培养24小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:8将该种子液加入扩大培养基内，再在25℃下于摇床中培养72小时得乳酸菌发酵液。
(4)制备酪酸梭状芽孢杆菌发酵液
将酪酸梭状芽孢杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在25℃下于摇床中培养24小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:8将该种子液加入扩大培养基内，再在25℃下于摇床中培养72小时得酪酸梭状芽孢杆菌。
(5)制备蜡样芽胞杆菌发酵液
将蜡样芽胞杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在25℃下于摇床中培养24小时后获得种子液，按该种子液与步骤(2)中制备的含有杨树花粉末的扩大培养基的重量比为l:8将该种子液加入含有杨树花粉末的扩大培养基内，再在25℃下于摇床中培养72小时得蜡样芽胞杆菌发酵液。
(6)根据该生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
实施例2
一种防治仔猪白痢的生物兽药，按重量百分比计，由如下组分组成：菌浓度为108Cfu/mL的乳酸菌发酵液10％，菌浓度为108Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液25％，菌浓度为108Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液25％，余量为水。具体方法如下：
(1)制备液体培养基和扩大培养基
按重量份计，将20份淀粉，20份牛肉膏，20份蛋白胨和5份NaCl加入2000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7.5，过滤，经湿热灭菌后冷却至30℃即可。
(2)制备含有杨树花粉末的扩大培养基
在步骤的(1)中制得的扩大培养基中再加入5wt％的颗粒大小为100目的杨树花粉末，拌匀即可。
(3)制备乳酸菌发酵液
将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在30℃下于摇床中培养24小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:9将该种子液加入扩大培养基内，再在30℃下于摇床中培养72小时得乳酸菌发酵液。
(4)制备酪酸梭状芽孢杆菌发酵液
将酪酸梭状芽孢杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在30℃下于摇床中培养24小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:9将该种子液加入扩大培养基内，再在30℃下于摇床中培养72小时得酪酸梭状芽孢杆菌。
(5)制备蜡样芽胞杆菌发酵液
将蜡样芽胞杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在30℃下于摇床中培养24小时后获得种子液，按该种子液与步骤(2)中制备的含有杨树花粉末的扩大培养基的重量比为l:9将该种子液加入含有杨树花粉末的扩大培养基内，再在30℃下于摇床中培养72小时得蜡样芽胞杆菌发酵液。
(6)根据该生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
实施例3
一种防治仔猪白痢的生物兽药，按重量百分比计，由如下组分组成：菌浓度为107Cfu/mL的乳酸菌发酵液10％，菌浓度为107Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液15％，菌浓度为107Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液15％，余量为水。具体方法如下：
(1)制备液体培养基和扩大培养基
按重量份计，将30份淀粉，30份牛肉膏，30份蛋白胨和8份NaCl加入3000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7.5，过滤，经湿热灭菌后冷却至35℃即可。
(2)制备含有杨树花粉末的扩大培养基
在步骤的(1)中制得的扩大培养基中再加入8wt％的颗粒大小为120目的杨树花粉末，拌匀即可。
(3)制备乳酸菌发酵液
将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在35℃下于摇床中培养30小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:20将该种子液加入扩大培养基内，再在35℃下于摇床中培养80小时得乳酸菌发酵液。
(4)制备酪酸梭状芽孢杆菌发酵液
将酪酸梭状芽孢杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在35℃下于摇床中培养30小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:20将该种子液加入扩大培养基内，再在35℃下于摇床中培养80小时得酪酸梭状芽孢杆菌。
(5)制备蜡样芽胞杆菌发酵液
将蜡样芽胞杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在35℃下于摇床中培养30小时后获得种子液，按该种子液与步骤(2)中制备的含有杨树花粉末的扩大培养基的重量比为l:20将该种子液加入含有杨树花粉末的扩大培养基内，再在35℃下于摇床中培养80小时得蜡样芽胞杆菌发酵液。
(6)根据该生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
实施例4
一种防治仔猪白痢的生物兽药，按重量百分比计，由如下组分组成：菌浓度为108Cfu/mL的乳酸菌发酵液5％，菌浓度为108Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液10％，菌浓度为108Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液10％，余量为水。具体方法如下：
(1)制备液体培养基和扩大培养基
按重量份计，将15份淀粉，15份牛肉膏，15份蛋白胨和6份NaCl加入2000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7.5，过滤，经湿热灭菌后冷却至18℃即可。
(2)制备含有杨树花粉末的扩大培养基
在步骤的(1)中制得的扩大培养基中再加入3wt％的颗粒大小为80目的杨树花粉末，拌匀即可。
(3)制备乳酸菌发酵液
将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在25℃下于摇床中培养30小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:15将该种子液加入扩大培养基内，再在25℃下于摇床中培养65小时得乳酸菌发酵液。
(4)制备酪酸梭状芽孢杆菌发酵液
将酪酸梭状芽孢杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在25℃下于摇床中培养30小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:15将该种子液加入扩大培养基内，再在25℃下于摇床中培养65小时得酪酸梭状芽孢杆菌。
(5)制备蜡样芽胞杆菌发酵液
将蜡样芽胞杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在25℃下于摇床中培养30小时后获得种子液，按该种子液与步骤(2)中制备的含有杨树花粉末的扩大培养基的重量比为l:15将该种子液加入含有杨树花粉末的扩大培养基内，再在25℃下于摇床中培养65小时得蜡样芽胞杆菌发酵液。
(6)根据该生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
实施例5
一种防治仔猪白痢的生物兽药，按重量百分比计，由如下组分组成：菌浓度为109Cfu/mL的乳酸菌发酵液6％，菌浓度为109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液15％，菌浓度为109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液12％，余量为水。具体方法如下：
(1)制备液体培养基和扩大培养基
按重量份计，将25份淀粉，25份牛肉膏，25份蛋白胨和7份NaCl加入3000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7，过滤，经湿热灭菌后冷却至25℃即可。
(2)制备含有杨树花粉末的扩大培养基
在步骤的(1)中制得的扩大培养基中再加入1wt％的颗粒大小为100目的杨树花粉末，拌匀即可。
(3)制备乳酸菌发酵液
将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在30℃下于摇床中培养26小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:10将该种子液加入扩大培养基内，再在30℃下于摇床中培养75小时得乳酸菌发酵液。
(4)制备酪酸梭状芽孢杆菌发酵液
将酪酸梭状芽孢杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在30℃下于摇床中培养26小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:10将该种子液加入扩大培养基内，再在30℃下于摇床中培养75小时得酪酸梭状芽孢杆菌。
(5)制备蜡样芽胞杆菌发酵液
将蜡样芽胞杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在30℃下于摇床中培养26小时后获得种子液，按该种子液与步骤(2)中制备的含有杨树花粉末的扩大培养基的重量比为l:10将该种子液加入含有杨树花粉末的扩大培养基内，再在30℃下于摇床中培养75小时得蜡样芽胞杆菌发酵液。
(6)根据该生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
实施例6
一种防治仔猪白痢的生物兽药，按重量百分比计，由如下组分组成：菌浓度为107Cfu/mL的乳酸菌发酵液8％，菌浓度为107Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液23％，菌浓度为107Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液20％，余量为水。具体方法如下：
(1)制备液体培养基和扩大培养基
按重量份计，将20份淀粉，20份牛肉膏，20份蛋白胨和5份NaCl加入2000份水中，充分溶解后加入NaOH调pH至7.2，过滤，经湿热灭菌后冷却至30℃即可。
(2)制备含有杨树花粉末的扩大培养基
在步骤的(1)中制得的扩大培养基中再加入15wt％的颗粒大小为120目的杨树花粉末，拌匀即可。
(3)制备乳酸菌发酵液
将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在35℃下于摇床中培养20小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:18将该种子液加入扩大培养基内，再在35℃下于摇床中培养60小时得乳酸菌发酵液。
(4)制备酪酸梭状芽孢杆菌发酵液
将酪酸梭状芽孢杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在35℃下于摇床中培养20小时后获得种子液，按该种子液与步骤(1)中制备的扩大培养基的重量比为l:18将该种子液加入扩大培养基内，再在35℃下于摇床中培养60小时得酪酸梭状芽孢杆菌。
(5)制备蜡样芽胞杆菌发酵液
将蜡样芽胞杆菌划线培养后挑取单菌落接种于步骤(1)中制备的液体培养基内，然后在35℃下于摇床中培养20小时后获得种子液，按该种子液与步骤(2)中制备的含有杨树花粉末的扩大培养基的重量比为l:18将该种子液加入含有杨树花粉末的扩大培养基内，再在35℃下于摇床中培养60小时得蜡样芽胞杆菌发酵液。
(6)根据该生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
以实施例1中制备的防治仔猪白痢的生物兽药为例，验证本发明中防治仔猪白痢的生物兽药对仔猪白痢的防治效果，同时设置四组平行对照试验，分别为对照实验组A、照实验组B、照实验组C、照实验组D。其中，对照实验组A与实施例1的区别在于，生物兽药配方不含乳酸菌发酵液；对照实验组B与实施例1的区别在于，生物兽药配方不含酪酸梭状芽孢杆菌发酵液；对照实验组C与实施例1的区别在于，生物兽药配方不含蜡样芽胞杆菌的发酵液；对照实验组D与实施例1的区别在于，生物兽药配方中蜡样芽胞杆菌发酵液中不含杨树花粉末。
具体试验操作为，每组田间实验4年，总计实验示范4000头患有白痢仔猪，每头仔猪用药3天为一个疗程，试验结果如表1-5。
表1实施例1中制备的生物兽药对仔猪白痢的防治效果统计
年份 患病仔猪数 治愈数 治愈率
2014 992 992 100％
2015 1005 1005 100％
2016 1001 1001 100％
2017 1002 1002 100％
平均 1000 1000 100％
总计 4000 4000 100％
表2对照实验组A中制备的生物兽药对仔猪白痢的防治效果统计
年份 患病仔猪数 治愈数 治愈率
2014 992 886 89.3％
2015 1005 893 88.9％
2016 1001 992 99.1％
2017 1002 987 98.5％
平均 1000 939 93.9％
总计 4000 3756 93.9％
表3对照实验组B中制备的生物兽药对仔猪白痢的防治效果统计
年份 患病仔猪数 治愈数 治愈率
2014 992 889 89.6％
2015 1005 921 91.6％
2016 1001 975 97.4％
2017 1002 986 98.4％
平均 1000 942.75 94.3％
总计 4000 3771 94.3％
表4对照实验组C中制备的生物兽药对仔猪白痢的防治效果统计
年份 患病仔猪数 治愈数 治愈率
2014 992 919 96.8％
2015 1005 931 94.5％
2016 1001 846 96.7％
2017 1002 892 94.8％
平均 1000 897 89.7％
总计 4000 3588 89.7％
表5对照实验组D中制备的生物兽药对仔猪白痢的防治效果统计
年份 患病仔猪数 治愈数 治愈率
2014 992 798 94.0％
2015 1005 825 90.4％
2016 1001 822 89.1％
2017 1002 853 88.8％
平均 1000 824.5 82.5％
总计 4000 3298 82.5％
由表1至表5可知，本发明中的生物兽药治愈率高，复发率低，对仔猪白痢一个疗程治愈率为100％，效果优于均优于四个对照实验组，并且本发明无需长期用药，只需一个疗程即可康复。此外，本发明生物兽药无污染，适合于绿色食品生产，有利于提高动物品质。
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims (9)

1.一种防治仔猪白痢的生物兽药，其特征在于，按重量百分比计，所述生物兽药由如下组分组成：菌浓度为107-109Cfu/mL的乳酸菌发酵液5-10％，菌浓度为107-109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液10-25％，菌浓度为107-109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液10-25％，余量为水；所述蜡样芽胞杆菌发酵液由如下方法制得：将杨树花粉末加入蜡样芽胞杆菌的扩大培养基中用于所述蜡样芽胞杆菌的发酵培养，所述发酵培养结束后，获得蜡样芽胞杆菌发酵液。
2.如权利要求1所述的一种防治仔猪白痢的生物兽药，其特征在于，按重量百分比计，所述生物兽药由如下组分组成：菌浓度为107-109Cfu/mL的乳酸菌发酵液6-8％，菌浓度为107-109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液15-23％，菌浓度为107-109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液12-20％，余量为水。
3.如权利要求1所述的一种防治仔猪白痢的生物兽药，其特征在于，按重量百分比计，所述生物兽药由如下组分组成：菌浓度为107-109Cfu/mL的乳酸菌发酵液7％，菌浓度为107-109Cfu/mL的酪酸梭状芽孢杆菌发酵液18％，菌浓度为107-109Cfu/mL的蜡样芽胞杆菌发酵液15％，余量为水。
4.权利要求1-3任一项所述的一种防治仔猪白痢的生物兽药，其特征在于，所述蜡样芽胞杆菌发酵液由如下方法制得：首先获取蜡样芽胞杆菌种子液，然后将所述种子液接种于含有杨树花粉末的扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得蜡样芽胞杆菌发酵液，所述含有杨树花粉末的扩大培养基中杨树花粉末的质量分数为1-15％。
5.如权利要求4所述的一种防治仔猪白痢的生物兽药，其特征在于，所述杨树花粉末的颗粒大小为80-120目。
6.权利要求1-5任一项所述的一种防治仔猪白痢的生物兽药的制备方法，其特征在于，所述方法为：根据所述生物兽药中各菌液的配比，将乳酸菌发酵液、酪酸梭状芽孢杆菌发酵液和蜡样芽胞杆菌发酵液加入水中，拌匀即可。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述乳酸菌发酵液的制备方法如下：首先获取乳酸菌种子液，然后将所述种子液接种于扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得乳酸菌发酵液。
8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述酪酸梭状芽孢杆菌发酵液的制备方法如下：首先获取酪酸梭状芽孢杆菌种子液，然后将所述种子液接种于扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得酪酸梭状芽孢杆菌发酵液。
9.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述蜡样芽胞杆菌发酵液的制备方法如下：首先获取蜡样芽胞杆菌种子液，然后将所述种子液接种于含有杨树花粉末的扩大培养基中进行发酵培养，所述发酵培养结束后，获得蜡样芽胞杆菌发酵液。
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