CN108103128A - 一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，包括以下步骤：将奶粉或奶制品加水混匀，或直接使用液态牛奶，向其中添加糖蜜1～3％，酵母膏0.2～0.8％，调节pH在6～7之间，制成混合液；混合液进行间歇灭菌处理，接种乳酸菌进行发酵；定期搅拌或者震荡发酵混合液，发酵3～5天即制得用于治疗仔猪腹泻的液态乳酸菌素。本发明发酵过程和原料处理简单，生产设备要求低，制备的产品富含高浓度有机酸、乳酸菌菌体细胞及乳酸菌素，对病原性大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有良好的抑制效果，能够提高仔猪肠道健康水平，作为一种绿色可行的抗生素替代品在实际生产中有较好的应用前景。

Description

一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法
技术领域
本发明属于饲料制造领域，具体涉及一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法。
背景技术
牛奶是一种营养价值极高的食品，也是乳酸菌适宜的培养基。所谓的废弃牛奶是指不可作为食品的牛奶或奶制品，主要来自两个方面，一是乳品企业或食品企业在生产加工过程中产生的残次品，二是过期的液态奶、奶粉或者奶制品。若将液态废弃奶直接处理丢弃，则造成有机物的浪费，同时增加了企业成本，常见的做法是将液态奶干造成奶粉，用于动物饲料中。而糖蜜是制糖工业的副产物，在欧洲及亚洲一些国家使用非常普遍，常作为作为一种物美价廉的原料用于饲料行业中；但是在我国饲料行业中，由于其流动性差，不利于饲料加工，其使用量很有限。
乳酸菌素是一类由质粒DNA编码形成的，在细胞溶解时释放并通过专一位点结合而对近缘相关种有致死作用的活性蛋白类物质，产生菌对其乳酸菌素具有自身免疫性。乳酸菌素主要可分为：羊毛硫细菌素、热稳定的小分子肽、热敏感大分子细菌素、复合型的大分子复合物。乳酸菌素与抗生素相比的不同是：传统的抗生素由某些微生物经过复杂酶促反应产生一类次级代谢产物，不存在结构基因，而乳酸菌素由基因编码，可以通过基因工程加以改造；长期滥用抗生素会造成菌株的耐药性，而细菌素敏感菌株对乳酸菌素不会产生耐药性。
常见的乳酸菌素产品大致分为两类：一是根据卫生部药品标准(二部)第六册，脱脂牛奶经嗜酸乳杆菌(Lacidophilus)发酵后干燥制成的粉末；二是牛奶经处理、脱脂去除蛋白后得到乳清液，经乳酸菌深度发酵，与葡萄糖和淀粉混合液等载体混合干燥制成粉末，或者直接干燥制得乳酸菌素酸化粉。乳酸菌素主要应用于食品行业和医药行业：食品行业常用于食品的防腐与保鲜；医药行业常用于治疗腹泻，改善肠道环境，提高肠道免疫力，并应用于阴道用药，抑制或消除阴道中的有害菌的生长。
仔猪腹泻是一种典型的多因素疾病，是引起仔猪生长受阻甚至死亡的重要原因，给养猪业带来巨大损失。而引起仔猪腹泻的原因主要包括两个方面：第一，为非传染性腹泻，原因有仔猪消化机能不全，日粮中存在过敏性抗原，饲养管理不当和其他一些应激因素，如仔猪断奶应激造成的腹泻。第二，为病原性腹泻，多为大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌引起的腹泻，如仔猪的黄白痢现象。为了防止病原性腹泻常在饲料中添加抗生素，而猪场应对仔猪腹泻常见的办法是通过灌服或者肌注的方式使用抗生素，杀灭致病菌的同时造成猪只自身益生菌群紊乱，且不符合国家安全健康养殖的要求。
给腹泻仔猪灌服乳酸菌素产品，抑制肠道中致病菌生长，促进益生菌的增殖，是一种治疗病原性腹泻的方式。
目前乳酸菌素的生产工艺有如下几个缺陷：
第一，由于发酵时间较长，原料需要进行高温高压灭菌处理，确保杀灭原料中微生物芽孢，规模化生产过程中，需要耐高温高压的发酵罐，且需要冷冻干燥设备，生产设备成本较高。
第二，发酵原料和载体多为脱脂牛奶，目前市场上人用乳酸菌素产品均按照卫生部药品标准要求使用脱脂牛奶，动物用乳酸菌素无相关产品标准。对于动物用乳酸菌素产品，发酵原料营养优良影响最终发酵效果。有学者通过获取乳清液，添加蛋白胨或酵母膏等氮源，发酵后添加葡萄糖和淀粉液等作为载体，冷干燥获得活性较高的乳酸菌素粉末，此方法在大规模生产过程中操作繁琐，成本较高；而使用乳清液或其他原料作为发酵培养基，营养水平较低，发酵效果不理想。
第三，为了保证乳酸菌素的活性，干燥方式采用冷冻干燥成粉末，设备成本较高；作为口服治疗腹泻类产品在猪场应用时，操作繁琐，增加了劳动强度。
发明内容
为解决以上技术问题，本发明提出一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，发酵设备简单，发酵产品营养丰富，可直接给仔猪灌服。
本发明以废弃牛奶或者奶制品和糖蜜作为发酵原料和载体，采用常压间歇式灭菌方法，降低了设备要求，减少生产成本，发酵产生液态乳酸菌素，在实际猪场应用方面操作方便，且发酵产品营养丰富，富含高浓度有机酸、乳酸菌菌体细胞及乳酸菌素，对病原性大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有良好的抑制效果。
为实现上述目的，本发明的技术方案是：一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，包括以下步骤：
1)将奶粉或奶制品加水混匀，或直接使用液态牛奶，按照质量分数，向其中添加糖蜜1～3％，酵母膏0.2～0.8％，调节pH至6～7之间，制成混合液；
2)将混合液进行间歇灭菌处理，接种乳酸菌进行发酵；
3)定期搅拌或者震荡发酵混合液，发酵3～5天制得用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤1)中，所述奶粉或奶制品加水混匀后的混合液干物含量为8～12％。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤2)中，将混合液进行间歇灭菌处理为：95℃灭菌10～30min，冷却至37～42℃，保温1～2h，再进行95℃灭菌10～30min。其有益效果是，在混合液中芽孢营养体生长后，再进行二次灭菌从而达到杀灭耐热芽孢杆菌的目的。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤2)中，所述乳酸菌为干酪乳杆菌，经过脱脂牛奶活化，接种乳酸菌母发酵液，接种量为1～10％。
在本发明的一些实施例中，所述乳酸菌的活化方法是，取脱脂牛奶在121℃灭菌10～20分钟，冷却至30～37℃后，接种乳酸菌母发酵液，接种量为1～10％。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤2)中，发酵温度为30～37℃。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤3)中，所述定期搅拌或者震荡的时间间隔为12～24h。其有益效果是，促进乳酸菌的生长代谢活动，提高发酵效果。
本发明制得的用于治疗仔猪腹泻的液态乳酸菌素可直接给动物灌服。
本发明作为原料的奶粉或奶制品可以是过期产品，液态牛奶可以是废弃牛奶。
所述糖蜜为市售液体糖蜜。
本发明提供的生产液态乳酸菌素的方法使用过期牛奶或者奶制品和糖蜜作为发酵原料，是一种营养丰富的廉价培养基及载体，经乳酸菌深度发酵后，产生高浓度有机酸和活性乳酸菌素，改善产品风味的同时降低发酵体系pH值，抑制其他微生物的生长繁殖，延长了其保存期。
本发明方法所制得的液态乳酸菌素产品中，富含乳酸菌菌体细胞及活性代谢产物乳酸菌素，抑制肠道中致病性大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的生长，同时促进仔猪肠道中益生菌的生长繁殖；乳酸菌菌体细胞及乳酸菌素可在动物肠道形成生物膜，阻挡病原菌的入侵，防止致病菌和病毒对胃肠道上皮细胞的结合，提高肠道黏膜免疫水平。
本发明的有益效果是：
本发明发酵时间适中，原料处理简单，生产设备要求较低，保证了乳酸菌素活性的同时，降低了发酵工艺成本。
本发明采用废弃牛奶或奶制品和糖蜜作为发酵原料，相比以脱脂牛奶作为发酵原料，原料中营养更加丰富，具有更好的发酵效果，无须另外添加氮源和载体，在大规模生产过程中步骤简单，成本大大降低。
本发明的液态发酵产品中富含休眠状态的乳酸菌活菌体，可直接给仔猪灌服，在治疗细菌性病原腹泻疾病方面可完全取代抗生素的使用，且在猪场操作应用时省时省力。
本发明发酵时间适中，原料处理简单，生产设备要求低，制备的液态乳酸菌素具有安全有效、无污染、适口性好、无抗药性等特点，使用方便，促进肠道中益生菌生长的同时抑制病原菌生长，提高益生菌菌群优势，改善仔猪肠道健康，增强仔猪机体免疫力，可大大减少并取代抗生素的使用，为生态环保养殖提供有力条件。
具体实施方式
下面将结合实例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，包括以下步骤：
1)将奶粉或奶制品加水混匀，或直接使用液态牛奶，按照质量分数，向其中添加糖蜜1～3％，酵母膏0.2～0.8％，调节pH至6～7之间，制成混合液；
2)将混合液进行间歇灭菌处理，接种乳酸菌进行发酵；
3)定期搅拌或者震荡发酵混合液，发酵3～5天即制得用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤1)中，所述奶粉或奶制品加水混匀后的混合液干物含量为8～12％。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤2)中，将混合液进行间歇灭菌处理为：95℃灭菌10～30min，冷却至37～42℃，保温1～2h，再进行95℃灭菌10～30min。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤2)中，所述乳酸菌为干酪乳杆菌，经过脱脂牛奶活化，接种乳酸菌母发酵液，接种量为1～10％。
在本发明的一些实施例中，所述乳酸菌的活化方法是，取脱脂牛奶在121℃灭菌10～20分钟，冷却至30～37℃后，接种乳酸菌母发酵液，接种量为1～10％。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤2)中，发酵温度为30～37℃。
在本发明的一些实施例中，在所述步骤3)中，所述定期搅拌或者震荡的时间间隔为12～24h。
本发明制得的用于治疗仔猪腹泻的液态乳酸菌素可直接给动物灌服。
本发明作为原料的奶粉或奶制品可以是过期产品，液态牛奶可以是废弃牛奶。
实施例1：作为本发明的一个实施例，所述用于治疗仔猪腹泻乳酸菌素的制备方法包括以下步骤：
(1)一级种子平板培养：
将乳酸菌甘油管用生理盐水将其稀释合适的梯度，倾注含1％CaCO3的MRS平板，于33～37℃培养24～36小时。
在本实施例中，所述乳酸菌为干酪乳杆菌。
(2)二级种子培养
挑步骤(1)得到的乳酸菌平板中生长较快、溶钙圈大、处于平板底层的单菌落，接种至脱脂牛奶培养基中，摇匀，使用无菌封口膜封口，于33～37℃恒温培养箱中静置培养6～12h，中间每两小时摇动一次，使菌体与培养基混合均匀，得到一级种子液；取一级种子液，按1～10％的比例接种至脱脂牛奶培养基中，在相同条件下培养，得到二级种子液。
在本实施例中，所述脱脂牛奶培养基经121℃灭菌10～20分钟后，冷却至30～37℃。
(3)原料间歇式灭菌处理
将过期奶粉或者奶制品与水充分混合，使固形物完全溶解，或者直接使用液态废弃牛奶，制成干物质含量为8～12％的奶液；向其中添加糖蜜1.5％，酵母膏0.4％，经搅拌充分溶解，调节奶液的pH值在6～7，制得混合液。
将混合液在95℃条件下灭菌15min，冷却至37～42℃，保温2h，再进行95℃灭菌15min，制得待发酵液。
(4)接种发酵
将乳酸菌二级种子液接种至待发酵液中，接种量为8％，发酵温度34～37℃，密封条件下发酵；每隔12～24h搅拌或者震荡发酵混合液。
(5)发酵结束
厌氧发酵3天后，搅拌均匀，使用无菌瓶或者无菌包装袋直接进行包装，1公斤/袋，即得到最终产品。
实施例2：
作为本发明的一个实施例，所述用于治疗仔猪腹泻乳酸菌素的制备方法包括以下步骤：
(1)一级种子平板培养：
将乳酸菌甘油管用生理盐水将其稀释合适的梯度，倾注含1％CaCO3的MRS平板，于33～37℃培养24～36小时。
在本实施例中，所述乳酸菌为干酪乳杆菌。
(2)二级种子液体培养
挑步骤(1)得到的乳酸菌平板中生长较快、溶钙圈大、处于平板底层的单菌落，接种至脱脂牛奶培养基中，摇匀，使用无菌封口膜封口，于33～37℃恒温培养箱中静置培养6～12h，中间每两小时摇动一次，使菌体与培养基混合均匀，得到一级种子液；取一级种子液，按1～10％的比例接种至脱脂牛奶培养基中，在相同条件下培养，得到二级种子液。
在本实施例中，所述脱脂牛奶培养基经121℃灭菌10～20分钟后，冷却至30～37℃。
(3)原料间歇式灭菌处理
将过期奶粉或者奶制品与水充分混合，使固形物完全溶解，或者直接使用液态废弃牛奶，制成干物质含量为10～12％的奶液；向其中添加糖蜜1％，酵母膏0.8％，经搅拌充分溶解，调节奶液的pH值在6～7，制得混合液。
将混合液在95℃条件下灭菌15min，冷却至37～42℃，保温1h，再进行95℃灭菌30min，制得待发酵液。
(4)接种发酵
将乳酸菌二级种子液接种至待发酵液中，接种量为5％，发酵温度30～33℃，密封条件下发酵；每隔12～24h搅拌或者震荡发酵混合液。
(5)发酵结束
厌氧发酵5天后，搅拌均匀，使用无菌瓶或者无菌包装袋直接进行包装，1公斤/袋，即得到最终产品。
实施例3：
作为本发明的一个实施例，所述用于治疗仔猪腹泻乳酸菌素的制备方法包括以下步骤：
(1)一级种子平板培养：
将乳酸菌甘油管用生理盐水将其稀释合适的梯度，倾注含1％CaCO3的MRS平板，于33～37℃培养24～36小时。
在本实施例中，所述乳酸菌为干酪乳杆菌。
(2)二级种子液体培养
挑步骤(1)得到的乳酸菌平板中生长较快、溶钙圈大、处于平板底层的单菌落，接种至脱脂牛奶培养基中，摇匀，使用无菌封口膜封口，于33～37℃恒温培养箱中静置培养6～12h，中间每两小时摇动一次，使菌体与培养基混合均匀，得到一级种子液；取一级种子液，按1～10％的比例接种至脱脂牛奶培养基中，在相同条件下培养，得到二级种子液。
在本实施例中，所述脱脂牛奶培养基经121℃灭菌10～20分钟后，冷却至30～37℃。
(3)原料间歇式灭菌处理
将过期奶粉或者奶制品与水充分混合，使固形物完全溶解，或者直接使用液态废弃牛奶，制成干物质含量为8～10％的奶液；向其中添加糖蜜2.5％，酵母膏0.3％，经搅拌充分溶解，调节奶液的pH值在6～7，制得混合液。
将混合液在95℃条件下灭菌30min，冷却至37～42℃，保温2h，再进行95℃灭菌15min，制得待发酵液。
(4)接种发酵
将乳酸菌二级种子液接种至待发酵液中，接种量为7％，发酵温度33～36℃，密封条件下发酵；每隔12～24h搅拌或者震荡发酵混合液。
(5)发酵结束
厌氧发酵3天后，搅拌均匀，使用无菌瓶或者无菌包装袋直接进行包装，1公斤/袋，即可得到最终产品。
实施例4
作为本发明的一个实施例，所述用于治疗仔猪腹泻乳酸菌素的制备方法包括以下步骤：
(1)一级种子平板培养：
将乳酸菌甘油管用生理盐水将其稀释合适的梯度，倾注含1％CaCO3的MRS平板，于33～37℃培养24～36小时。
在本实施例中，所述乳酸菌为干酪乳杆菌。
(2)二级种子液体培养
挑步骤(1)得到的乳酸菌平板中生长较快、溶钙圈大、处于平板底层的单菌落，接种至脱脂牛奶培养基中，摇匀，使用无菌封口膜封口，于33～37℃恒温培养箱中静置培养6～12h，中间每两小时摇动一次，使菌体与培养基混合均匀，得到一级种子液；取一级种子液，按1～10％的比例接种至脱脂牛奶培养基中，在相同条件下培养，得到二级种子液。
在本实施例中，所述脱脂牛奶培养基经121℃灭菌10～20分钟后，冷却至30～37℃。
(3)原料间歇式灭菌处理
将过期奶粉或者奶制品与水充分混合，使固形物完全溶解，或者直接使用液态废弃牛奶，制成干物质含量为8～10％的奶液；向其中添加糖蜜1.5％，酵母膏0.6％，经搅拌充分溶解，调节奶液的pH值在6～7，制得混合液。
将混合液在95℃条件下灭菌20min，冷却至37～42℃，保温2h，再进行95℃灭菌20min，制得待发酵液。
(4)接种发酵
将乳酸菌二级种子液接种至待发酵液中，接种量为3％，发酵温度32～35℃，密封条件下发酵；每隔12～24h搅拌或者震荡发酵混合液。
(5)发酵结束
厌氧发酵4天后，搅拌均匀，使用无菌瓶或者无菌包装袋直接进行包装，1公斤/袋，即可得到最终产品。
实施例5
本发明所得液态乳酸菌素对病原性大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果
大肠杆菌和沙门氏菌是引起仔猪腹泻常见的两种致病菌，实施例1～4制备方法得到的液态乳酸菌素，在8000rpm下离心5min收集上清液，采用打孔法测定对病原性大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌性，指示菌为大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115。
具体操作为：取经MHB液体培养的新鲜指示菌大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115，用无菌生理盐水稀释至108cfu/mL，无菌操作取1mL细菌菌液加入20mL50±1℃的MHA培养基，然后倾注灭菌平板，混合均匀，置于水平台面，待其凝固。用无菌外径8mm打孔器在完全凝固的含菌平板上打孔，用灭菌牙签挑出孔中培养基，将上述处理的上清液加入孔中，每孔约加100μL，36±1℃培养箱内培养16～18h，测量抑菌圈大小。
表1本发明产品对大肠埃希氏菌和鼠伤寒沙门氏菌抑菌效果
结果显示本发明4个实施例制备得到的液态乳酸菌素对大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115均表现良好的抑菌效果。
实施例6选择江苏某猪场仔猪群进行灌服试验
实施例1～4方法制备的产品分别是液态酸菌素1～4。
选择8～10日龄发生黄白痢腹泻仔猪50头，分为5组，每组10头。对照组灌服硫酸庆大霉素，灌服量为5mL/头/天；试验组1～4分别灌服液态乳酸菌素1～4，灌服量为10g/头/次，每天早晚各一次，即20g/头/天，试验期为7天，仔猪腹泻治愈后即停止灌服，每日观察记录试验猪只腹泻情况。
试验仔猪腹泻情况为：水粪便呈稀水样和浆状样，有腥臭味，污染肛门周围及后肢，仔猪精神不振，畏寒，脱水，食少或不食，呈典型黄白痢症状，不及时治愈可能造成死亡。
表2试验期间腹泻治愈率
试验天数 对照组 组1 组2 组3 组4
1天 0 0 5 5 5
2天 0 0 5 5 5
3天 0 0 20％ 20％ 20％
4天 20％ 100％ 100％ 90％ 90％
5天 40％ 100％ 100％ 100％ 100％
6天 40％ 100％ 100％ 100％ 100％
7天 80％ 100％ 100％ 100％ 100％
由表2可以看出，与试验组相比，对照组猪只腹泻治愈时间长，效率低，试验组1～4平均治愈天数为4天，且治愈率高。说明本发明制备的乳酸菌素能够对仔猪黄白痢腹泻具有良好的治愈效果，能够提高仔猪肠道健康，具有部分替代抗生素特点。
综上所述，本发明液态乳酸菌素体外抑制病原性大肠杆菌和沙门氏菌效果明显，体内试验表明，对于发生黄白痢腹泻仔猪的治疗效果，与抗生素相比，具有疗程短，治愈率高，安全无毒的特点，能够提高仔猪肠道健康水平，作为一种绿色可行的抗生素替代品在实际生产中有较好的应用前景。
本发明发酵时间适中，原料处理简单，生产设备要求较低，保证了乳酸菌素活性的同时，降低了发酵工艺成本。本发明采用废弃牛奶或奶制品和糖蜜作为发酵原料，相比以脱脂牛奶作为发酵原料，原料中营养更加丰富，具有更好的发酵效果，无须另外添加氮源和载体，在大规模生产过程中步骤简单，成本大大降低。本发明的液态发酵产品中富含休眠状态的乳酸菌活菌体，可直接给仔猪灌服，在治疗细菌性病原腹泻疾病方面可完全取代抗生素的使用，且在猪场操作应用时省时省力。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (9)

1.一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
1)将奶粉或奶制品加水混匀，或直接使用液态牛奶，按照质量分数，向其中添加糖蜜1～3％，酵母膏0.2～0.8％，调节pH至6～7之间，制成混合液；
2)将混合液进行间歇灭菌处理，接种乳酸菌进行发酵；
3)定期搅拌或者震荡发酵混合液，发酵3～5天制得用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素。
2.根据权利要求1所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，在所述步骤1)中，所述奶粉或奶制品加水混匀后的混合液干物含量为8～12％。
3.根据权利要求1所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，在所述步骤2)中，将混合液进行间歇灭菌处理为：95℃灭菌10～30min，冷却至37～42℃，保温1～2h，再进行95℃灭菌10～30min。
4.根据权利要求1所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，在所述步骤2)中，所述乳酸菌为干酪乳杆菌，经过脱脂牛奶活化，接种乳酸菌母发酵液，接种量为1～10％。
5.根据权利要求4所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，所述乳酸菌的活化方法是，取脱脂牛奶在121℃灭菌10～20分钟，冷却至30～37℃后，接种乳酸菌母发酵液，接种量为1～10％。
6.根据权利要求1所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，在所述步骤2)中，发酵温度为30～37℃。
7.根据权利要求1所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，在所述步骤3)中，所述定期搅拌或者震荡的时间间隔为12～24h。
8.根据权利要求1所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，所述用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素可直接给仔猪灌服。
9.根据权利要求1所述的用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法，其特征在于，所述作为原料的奶粉或奶制品可以是过期产品，液态牛奶可以是废弃牛奶。
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