CN105285399A - 一种仔猪用液态复合微生态制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种仔猪用液态复合微生态制剂及其制备方法。每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌≥2*10⁷CFU、壳寡糖30-60毫克、维生素C？0-60毫克、丁酸钠0-45毫克和L-谷氨酰胺0-60毫克。制备方法为利用MRS培养基培养乳酸菌达到目标活菌含量≥2*10⁹CFU/ml，按配方量将维生素C、丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。本发明针对仔猪肠道菌群发育和乳猪饲养管理的特点，通过壳寡糖来强化微生态制剂的稳定性，尤其是乳酸菌的稳定性，开发了一种高效的液态复合微生态制剂。

Description

一种仔猪用液态复合微生态制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于猪养殖功能性添加剂领域，具体涉及一种仔猪用液态复合微生态制剂及其制备方法。

背景技术

仔猪新生2周内肠道菌群不稳定，容易发生变化，结肠内首先出现杆菌和肠链球菌，随之出现双歧杆菌并成为优势菌；新生2周至断奶前，肠道菌群容易受到食物的影响，以厌氧菌为主，主要为双歧杆菌；在断奶期，肠道菌群很不稳定，乳酸杆菌线性下降，大肠杆菌线性增加；断奶两周后，肠道菌群稳定，以专性厌氧菌为主。针对上述仔猪肠道菌群发育特点，出生至断奶后2周的肠道菌群体系极不完善，极易发生应激肠道菌群失衡，均匀肠道受损，消化能力减少，发生腹泻。

研究显示，为乳仔猪补饲微生态制剂，将有助于改善肠道菌群平衡，预防腹泻，提高生产性能。然而，微生态制剂的使用效果与微生态制剂的种类、含量和使用方式有密切关系。目前的微生态制剂多为固态制制，适合于添加在饲料中，对于未采食固体饲料的新生仔猪而言，存在补饲困难的问题。

如201310601030.3，名称为“一种降低仔猪应激的微生物饲料添加剂及其制备方法”的发明专利申请，由枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母菌与培养基、无菌水等原料进行发酵，然后将发酵液经过喷雾干燥与保护剂混合得到成品；201410167179.X，名称为“一种复合微生态制剂、添加剂及其预混料”的发明专利申请，该复合微生态制剂包含枯草芽孢杆菌CGMCCNo.8148菌粉和植物乳杆菌CGMCCNo.8150菌粉；200510097047.5，名称为“一种增进仔猪肠道功能的饲料添加剂”的发明专利，该饲料添加剂将谷氨酰胺、甘氨酰-L-谷氨酰胺、丁酸钠、维生素C和葡萄糖五种物质中的三种或三种以上物质按一定比例配伍加工而成。

以上专利均为固体产品，固体形式下的乳杆菌处于休眠状态，容易存活。然而，对于未采食固体饲料的新生仔猪而言，补饲困难；同时，在添加剂量上范围较广，当仔猪发生疾病时采食量下降，按饲料比例添加将有可能使仔猪无法采食到足够剂量。

发明内容

本发明为了得到乳酸菌活菌含量高的液态微生态制剂，提供了一种仔猪用液态复合微生态制剂及其制备方法。针对仔猪肠道菌群发育和乳猪饲养管理的特点，通过壳寡糖来强化微生态制剂的稳定性，尤其是乳酸菌的稳定性，开发了一种高效的液态复合微生态制剂。

为实现上述发明目的，本发明采用的具体技术方案是：

一种仔猪用液态复合微生态制剂，其特征在于：每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌≥2*10⁷CFU、壳寡糖30-60毫克、维生素C0-60毫克、丁酸钠0-45毫克和L-谷氨酰胺0-60毫克。

乳杆菌对调节肠道健康具有非常重要的作用，但液体形式下的乳酸菌容易发生死亡，通常在常温保存2周，乳酸菌活菌含量低于1*10⁴CFU/ml以下。本发明发现壳寡糖可以促进乳酸杆菌的生长，少量壳寡糖和葡萄糖协同作用时可明显缩短乳酸杆菌的生长适应期，促进生长。因此，本发明加入适量壳寡糖可以改善乳酸菌的适应性，可以保证液态乳酸菌的活菌最低量为2*10⁹CFU，以保证在储存两周后，乳酸活菌含量还能维持在1*10⁷CFU/ml以上，从而维持乳酸菌活性。

优选地，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌≥2*10⁷CFU、壳寡糖30-60毫克、维生素C30-60毫克、丁酸钠20-45毫克和L-谷氨酰胺30-60毫克。

本发明通过进一步研究筛选出既有利于动物健康，又有利于维持液态下乳酸菌活菌含量的微营养物质，包括维生素C、丁酸钠和L-谷氨酰胺。各微营养物质从不同机制发挥作用，对乳酸菌的生长和活性维持起着非常明显的作用，可促进乳酸菌生长，延缓死亡。具体作用如下：

1）在饲料中添加丁酸钠，可以促进肠道乳酸菌的生长，降低大肠杆菌的生长。乳酸菌耐酸性，适宜在酸性条件下生长，然而丁酸钠属于碱性，因此在培养达成一定活菌含量后添加，且添加剂量要适宜。

2）维生素C具有抗氧化性，可以避免培养基中代谢产物和空气对乳酸菌的破坏，保护培养后期乳酸菌的活性，维持生长。

3）在饲料中添加谷氨酰胺，可以提高仔猪肠道内双歧杆菌含量。谷氨酰胺是氨基酸的一种，在细胞中很容易分解成谷氨酸和氨，对细胞分裂增殖起到非常重要的作用。相比与葡萄糖只能为正常细胞提供能量相比，谷氨酰胺可以促进细胞再生。本发明利用谷氨酰胺作为液态乳酸菌后期的营养物质，可以维持乳酸菌的活性和促进生长。

4）配方中的丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖都是作为乳酸菌的营养供应物质发挥作用，分别提供断链脂肪酸、氮、氨基酸和糖，有助于维持液态下乳酸菌的稳定存活。

本发明根据各营养物质的溶解性情况、储存两周后乳酸菌活菌含量以及乳酸水平和动物试验应用效果，对各营养物质的适宜用量进行了优化，得到最优的配方比例。

本发明的仔猪用液体复合微生态制剂的制备方法为：利用MRS培养基（乳酸细菌培养基）培养乳酸菌达到目标活菌含量≥2*10⁹CFU/ml，按配方量将维生素C、丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。以保证在储存两周后，乳酸活菌含量还能维持在1*10⁷CFU/ml以上。

优选地，将乳酸菌菌种接种于MRS液体培养基中，进行发酵，发酵至pH值3.5-4.5，乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU/mL。

由于仔猪胃肠道发育不完善，在pH值3.5-4.5的高酸度下，液态复合微生态制剂更利于仔猪肠道菌群健康，刺激酶活，改善消化性能；同时，酸味更适宜仔猪味觉，利于采食量增加，更利于仔猪使用效果的发挥。

本发明所述的乳酸菌为屎肠球菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的复合菌，三者的比例为1：1：1。

本发明所选用屎肠球菌为国家菌种中心所收藏的菌种，保藏号为1.223；植物乳杆菌菌种保藏号为1.0103。

本发明将复合微生态制剂液真空包装，并安装定量喷嘴，置于阴凉处保存。

优选地，复合微生态制剂液真空包装于棕褐色瓶中。

乳酸菌属于兼性厌氧菌，在有氧的情况下其生长会受到抑制或死亡，真空包装有助于维持乳酸菌的生长。棕褐色瓶有助于避光，光照具有热效应，温度的升高会导致乳酸菌活菌死亡，减少光照有助于维持乳酸菌的生长。

优选地，所述的定量喷嘴每喷一次2mL，可以直接定量喷服乳仔猪，减少操作困难和补饲有效性问题。

本发明带来的有益技术效果如下：

1、本发明的复合微生态制剂呈液态，乳酸菌活菌浓度含量高，储存2周后乳酸菌活菌含量仍保持较高水平，达到10⁷CFU/mL级，液态中含有丰富的乳酸菌代谢产物，乳酸含量达到13%以上，可以喷服乳仔猪或喷洒在饲料表面，在猪场现场使用更为方便。可以直接定量喷服乳仔猪，减少操作困难和补饲有效性问题，乳仔猪应用效果好。在后期仔猪重量逐步增加，抓猪喷服的操作难度增加，最好的补饲方法是将复合微生态制剂与教槽料混合饲喂，同时，针对仔猪肠道菌群发育特点，选择与教槽料中常用抗生素可以配伍使用的乳酸菌菌种，制作一种可在同时使用教槽料时的复合微生态制剂。

2、本发明针对液态乳酸生长容易发生活菌死亡的特点，结合微营养添加剂稳定乳酸菌生长，制作稳定的高浓度复合活菌制剂。在储存2周后乳酸菌活菌含量仍保持较高水平，达到10⁷CFU/mL级，应用效果更好。

3、本发明中使用了功能性营养添加剂溶解于液体微生态制剂当中，包括维生素C、丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖以溶于液体形式添加，可以作为乳酸菌的营养来源，稳定活性，延缓液体形式下乳酸菌的死亡；同时也可进一步强化机体健康，促进肠道发育，优化产品应用效果。

4、本发明利用功能性营养物质溶解液态生态制剂作为活菌营养物质，延缓储存运输过程中的死亡，保证产品的稳定性。配方中的丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖作为液态下乳酸菌的能量供应物质，维持乳酸菌的稳定存活。少量壳寡糖和培养基中的葡萄糖协同作用时可明显缩短乳酸杆菌的生长适应期，促进生长。谷氨酰胺是氨基酸的一种，在细胞中很容易分解成谷氨酸和氨，对细胞分裂增殖起到非常重要的作用。在液态复合乳酸菌培养后期，通过额外营养物质的添加，改善生长环境，维持活菌含量。

5、本发明针对猪只在14天龄前采食和饮水较少的特点，结合整群抓猪操作时机，在出生吃初乳前以及阉猪保健、注射疫苗，喷服该复合微生态制剂，即可降低抓猪应激又可调整肠道菌群稳定，促进健康生长。

6、本发明针对仔猪14天龄后开始逐步增加了教槽料的采食量，针对仔猪体重逐步增加抓猪操作难度增大的特点，在教槽料中混合复合微生态制剂进行补饲，简化了操作。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的实质性内容作进一步详细的描述。

实施例1

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌2*10⁷CFU和壳寡糖40毫克。

实施例2

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌3*10⁸CFU和壳寡糖50毫克。

实施例3

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌2*10¹⁰CFU、壳寡糖45毫克和L-谷氨酰胺50毫克。

制备方法为：利用MRS培养基培养乳酸菌达到目标活菌含量≥2*10⁹CFU/ml，按配方量将L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。

实施例4

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌3.5*10⁸CFU、壳寡糖48毫克、维生素C50毫克和丁酸钠38毫克。

制备方法为：利用MRS培养基培养乳酸菌达到目标活菌含量≥2*10⁹CFU/ml，按配方量将壳寡糖、维生素C和丁酸钠溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。

实施例5

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌2*10⁹CFU、壳寡糖50毫克、维生素C50毫克，丁酸钠40毫克和L-谷氨酰胺50毫克。

制备方法为：将乳酸菌菌种接种于MRS液体培养基中，进行发酵，发酵至pH值3.5，乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU/mL；按配方量将维生素C、丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。

实施例6

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌5*10⁸CFU、壳寡糖30毫克、维生素C30毫克，丁酸钠20毫克和L-谷氨酰胺30毫克。

制备方法为：将乳酸菌菌种接种于MRS液体培养基中，进行发酵，发酵至pH值4.5，乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU/mL；按配方量将维生素C、丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。

将复合微生态制剂液真空包装，并安装定量喷嘴，置于阴凉处保存。

实施例7

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌6*10¹⁰CFU、壳寡糖60毫克、维生素C60毫克，丁酸钠45毫克和L-谷氨酰胺60毫克。

制备方法为：将乳酸菌菌种接种于MRS液体培养基中，进行发酵，发酵至pH值4，乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU/mL；按配方量将维生素C、丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。

将复合微生态制剂液真空包装，并安装定量喷嘴，置于阴凉处保存。

所述的复合微生态制剂液真空包装于棕褐色瓶中。

实施例8

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌8*10⁹CFU、壳寡糖55毫克、维生素C50毫克和L-谷氨酰胺55毫克。

制备方法为：将乳酸菌菌种接种于MRS液体培养基中，进行发酵，发酵至pH值3.8，乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU/mL；按配方量将维生素C、L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。

将复合微生态制剂液真空包装，并安装定量喷嘴，置于阴凉处保存。

所述的复合微生态制剂液真空包装于棕褐色瓶中。

所述的定量喷嘴每喷一次2mL。

实施例9

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复微生态制剂中含乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU和L-谷氨酰胺48毫克。

该液态复合微生态制剂于阴凉处放置20天后，每毫升液体中仍含乳酸菌10⁷CFU级，乳酸含量达到13.82%。

实施例10

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复微生态制剂中含乳酸菌活菌，≥2*10⁹CFU、壳寡糖50毫克和维生素C42毫克。

该液态复合微生态制剂于阴凉处放置20天后，每毫升液体中仍含乳酸菌10⁷CFU级，乳酸含量达到14.00%。

实施例11

一种仔猪用液体复合微生态制剂，每毫升液体复微生态制剂中含乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU，维生素C50毫克，壳寡糖50毫克和丁酸钠50毫克。

该液态复合微生态制剂于阴凉处放置20天后，其每毫升液体中仍含乳酸菌10⁷CFU级，乳酸含量达到14.45%。

本发明的液体复合微生态制剂针对不同日龄(体重)乳仔猪采用不同的饲喂方法：

在哺乳仔猪14天龄前，在仔猪吃初乳前以及补铁阉猪保健和注射疫苗等生产管理中发生整群抓猪操作时，按2mL/kg体重剂量直接喷服复合微生态制剂。

在14天龄至断奶，按教槽料：复合微生态制剂3:1混合补饲仔猪。

断奶至断奶后1周，按每头仔猪20mL复合微生态定量喷洒在饲料表面或混入饮水中，采用饮水补饲需在停料2小时后饮水，以便所有仔猪能能采食到足量复合微生态制剂。

应用试验一：

试验时间：2014年4月29日—2014年5月28日，共30天。

试验地点：邛崃通威牟礼实验猪场。

选取产仔日龄相近、胎次相近、窝仔数在10头左右的初生仔猪共18窝（根据实际情况进行增加），随机分成2个处理组：对照组和试验组，每个处理9个重复，每窝为一个重复，每个重复10头猪左右，对照组88头，试验组85头。哺乳仔猪期分别于仔猪吃初乳前、补铁阉猪保健（3天）时、注射蓝耳疫苗(7天)时、注射圆环疫苗(14天)、21日龄（断奶）时各灌服一次，共计5次。对照组灌服生理盐水，试验组根据日龄灌服不同剂量的微生态制剂口服液。试验期自由采食、自由饮水。

试验结果显示，（1）在哺乳阶段给哺乳仔猪口服微生态制剂，有助于改善腹泻发生情况，增进肠道健康。（2）在哺乳阶段仔猪口服微生态制剂有提高仔猪断奶重趋势，见下表。

本发明的复合微生态制剂应用于哺乳仔猪提高断奶重250-300克/头，降低腹泻率10-20%，同时改善断奶仔猪均匀度。

应用试验二：

试验时间：2015年3月5日—2014年3月12日，共7天。

试验地点：通威青龙实验猪场。

选取60头21日龄断奶仔猪，随机分成2个处理组：对照组和试验组，每个处理5个重复，每窝为一个重复，每个重复6头猪，对照组30头，试验组30头。试验至断奶后1周，采用喷洒的方式在仔猪教槽料中添加液体微生态制剂（20mL/头·天）。对照组喷洒生理盐水，试验组喷洒微生态制剂。

试验结果显示，液体微生态制剂提高仔猪日增重50%，降低腹泻率60%，同时改善仔猪皮毛外观。

以上试验结果表明，本发明的复合微生态制剂可提高仔猪断奶重250-300克/头，提高断奶后重一周日增重约50%，同时明显改善哺乳期和断奶一周腹泻发生情况。

应用试验三：

试验时间：2014年5月31日—2014年7月12日，共42天。

试验地点：邛崃通威牟礼实验猪场。

选取胎次和出生日龄相近的断奶仔猪90头，按体重、性别相近原则随机分为3组，每组5个重复，每个重复6头仔猪。试验组1、试验组2和对照组仔猪分别饲喂基础日粮、基础日粮+固体微生态制剂(500g/吨)和基础日粮+喷洒液体微生态制剂（20mL/头·天）。自由采食、自由饮水。

试验结果见下表，表明添加微生态制剂可以增加仔猪的采食量和日增重，采食量分别比对照组提高9.61%和4.22%，日增重分别比对照组提高9.31%和3.92%。添加本发明的液态微生态制剂的效果要优于固态微生态制剂的效果。

Claims (8)

1.一种仔猪用液体复合微生态制剂，其特征在于：每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌≥2*10⁷CFU、壳寡糖30-60毫克、维生素C0-60毫克、丁酸钠0-45毫克和L-谷氨酰胺0-60毫克。

2.根据权利要求1所述的一种仔猪用液体复合微生态制剂，其特征在于：每毫升液体复合微生态制剂中含乳酸菌活菌≥2*10⁷CFU、壳寡糖30-60毫克、维生素C30-60毫克、丁酸钠20-45毫克和L-谷氨酰胺30-60毫克。

3.根据权利要求1所述的一种仔猪用液体复合微生态制剂，其特征在于：所述的乳酸菌为屎肠球菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的复合菌，三者的比例为1：1：1。

4.根据权利要求1所述的一种仔猪用液体复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：利用MRS培养基培养乳酸菌达到目标活菌含量≥2*10⁹CFU/ml，按配方量将维生素C、丁酸钠、L-谷氨酰胺和壳寡糖溶于培养基的微生态制剂液中，混匀，得到复合微生态制剂液。

5.根据权利要求4所述的一种仔猪用液体复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：将乳酸菌菌种接种于MRS液体培养基中，进行发酵，发酵至pH值3.5-4.5，乳酸菌活菌≥2*10⁹CFU/mL。

6.根据权利要求4所述的一种仔猪用液体复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：将复合微生态制剂液真空包装，并安装定量喷嘴，置于阴凉处保存。

7.根据权利要求6所述的一种仔猪用液体复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述的复合微生态制剂液真空包装于棕褐色瓶中。

8.根据权利要求6所述的一种仔猪用液体复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述的定量喷嘴每喷一次2mL。