CN111296848A - 一种食用凝结芽孢杆菌菌粉及其制备工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明属于微生物发酵技术领域，特别涉及一种食用凝结芽孢杆菌菌粉及其制备工艺，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮0.5‑2份、蜂花粉0.25‑1.5份、蚕蛹0.5‑2份、小麦胚芽0.5‑1.5份、碳源0.5‑2份；其制备方法，包括如下步骤：S1原料配备、S2超微粉碎、S3混合原料和接种、S4发酵并浓缩、S5真空干燥和粉碎。本发明采用完全食品级和食物来源的原料进行凝结芽孢杆菌菌粉的生产，为提高凝结芽孢杆菌的利用度，进行超微粉碎，破坏这些原料的细胞，让凝结芽孢杆菌更好的吸收利用，提高凝结芽孢杆菌的活菌数和芽孢转化率，同时维持了菌粉的稳定性和较长保质期，能有效改善人们的便秘和腹泻次数，并改善进食。

Description

一种食用凝结芽孢杆菌菌粉及其制备工艺
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，特别涉及一种食用凝结芽孢杆菌菌粉及其制备工艺。
背景技术
凝结芽孢杆菌为兼性厌氧菌，当其进入肠道后会消耗游离氧而进行肠道繁殖，有利于厌氧微生物乳酸菌和双歧杆菌的生长，从而调节肠道内微生物菌群的平衡，提高机体的免疫力和抗病力，减少肠道疾病的发生。凝结芽孢杆菌在肠道繁殖的过程中还会分泌淀粉酶和蛋白酶，促进机体对营养物质的消化和吸收；其产生的B族维生素、氨基酸、短链脂肪酸等物质能增加小肠的蠕动速度，从而改善肠道的消化功能。另外，凝结芽孢杆菌在肠道内定居后还能产生大量抑制有害菌的凝固素(Coagulin)和L(+)乳酸等抑菌物质，因此，对胃肠道炎症有一定的治疗作用。
2016年国家卫生和计划生育委员会批准将凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)列入《可用于食品的菌种名单》。
但现有报道和专利，凝结芽孢杆菌的发酵大都使用酵母膏、蛋白胨、牛肉膏等生化原料，但这些原料目前不是食品添加剂或者有明确的法规可用于食品益生菌的生产，通过这些原料生产的益生菌是否可直接用于人服用的产品，有待商榷。
申请人通过大量的研究和试验,旨在提供一种食用凝结芽孢杆菌菌粉及其制备方法。
发明内容
本发明的目的是，提供一种食用凝结芽孢杆菌菌粉及制备方法，采用完全食品级和食物来源的原料进行凝结芽孢杆菌菌粉的生产，获得性能更好的凝结芽孢杆菌菌粉，为提高凝结芽孢杆菌的利用度，将燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，破坏这些原料的细胞，让凝结芽孢杆菌更好的吸收利用，提高凝结芽孢杆菌的活菌数和芽孢转化率，同时维持了菌粉的稳定性和较长保质期，能有效改善便秘和腹泻次数，并改善进食。
为实现以上目的，本发明采用的技术方案是：
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮0.5-2份、蜂花粉0.25-1.5份、蚕蛹0.5-2份、小麦胚芽0.5-1.5份、碳源0.5-2份。
进一步的，所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为1-3:1。
进一步的，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，所述食品添加剂包括碳酸钙、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰，其质量比为3-15：2-8：0.5-5：0.1-1；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的1-31％。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
S2、超微粉碎：将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，使原料的粒度小于300目；
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为0.5-2％；将搅拌均布的浆液均质后，调节PH值为6.5-7.0，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；
S5、真空干燥和粉碎：将温度设为40-60℃，干燥24-36h，然后利用粉碎机粉碎，得到粒度小于300目的本发明的凝结芽孢杆菌菌粉。
进一步的，S3中包括在浆液均质后进行90-120℃高温杀菌；将高温杀菌后的浆液进行冷却至35-50℃时进行凝结芽孢杆菌接种。
进一步的，S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为0.5～10％，摇床转速180～220r/min，于40～45℃培养,48～60h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。
进一步的，S4的发酵结束，镜检芽孢率达到100％，发酵液活菌数和芽孢数达到2.0×109cfu/ml以上。
进一步的，S4中放罐浓缩温度为60-70℃，压强为-0.095～-0.075MPa，真空浓缩至膏状。
一种食用营养粉，包括上述的食用凝结芽孢杆菌菌粉或包括上述的食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺制备的凝结芽孢杆菌菌粉。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌的含量为2.0×1010cfu/g～2.4×1010cfu/g。
本发明的有益效果：
1、本发明的原料都是初级原料，为提高凝结芽孢杆菌的利用度，将燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，破坏这些原料的细胞，让凝结芽孢杆菌更好的吸收利用，提高凝结芽孢杆菌的活菌数和芽孢转化率。
2、本发明中食用凝结芽孢杆菌菌粉在进行超微粉碎后，蜂花粉、蚕蛹与凝结芽孢杆菌相互作用使食用凝结芽孢杆菌菌粉具有可靠的稳定性和较长保质期，能有效改善便秘和腹泻次数，并改善进食；凝结芽孢杆菌菌粉具有良好的抑菌效果；同时其中所述凝结芽孢杆菌的含量为2.0×1010cfu/g～2.4×1010cfu/g。
3、本发明的制备过程进行超微粉碎，使原料中的纤维素和半纤维素大幅度的降解，使其在作为发酵凝结芽孢杆菌的培养基时，更容易被吸收，不再需要灭菌处理或灭菌处理可选择进行；同时，在发酵放罐的过程中，凝结芽孢杆菌生成了一定的抗氧化物质，使发酵过程更加稳定且生产的抑菌素和酸性环境使本发明的菌粉具有更长的保质期；真空干燥的过程也有利于凝结芽孢杆菌在生长代谢过程中同时产生的蛋白酶、淀粉酶、有机酸、凝结素、维生素等生物活性物质的保留，这些物质能与凝结芽孢杆菌同时作用就更能促进人体对营养物质的消化吸收，有效调节肠道微生物菌群，从而也提高了本发明凝结芽孢杆菌产品的应用优势。
4、本发明中蜂花粉与食用凝结芽孢杆菌及其产生的活性物质在40-60℃的真空调节下进行干燥，没有失去其活性，保持了菌种及活性物质的活性，有利于营养物质的吸收和调节人体的机能。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面对本发明进行详细描述，本部分的描述仅是示范性和解释性，不应对本发明的保护范围有任何的限制作用。
本发明所使用凝结芽孢杆菌菌种，购买自市场，为通用的菌种。
其他原料或仪器设备等均可通过市售途径获得，其中原料和食品添加剂的来源厂家要具备食品生产许可或者食品添加剂生产许可。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮0.5-2份、蜂花粉0.25-1.5份、蚕蛹0.5-2份、小麦胚芽0.5-1.5份、碳源0.5-2份。
优选的，所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为1-3:1。
优选的，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，所述食品添加剂包括碳酸钙、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰，其质量比为3-15：2-8：0.5-5：0.1-1；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的1-31％。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
S2、超微粉碎：将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，使原料的粒度小于300目；
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为0.5-2％；将搅拌均布的浆液均质后，调节PH值为6.5-7.0，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；
S5、真空干燥和粉碎：将温度设为40-60℃，干燥24-36h，然后利用粉碎机粉碎，得到粒度小于300目的本发明的凝结芽孢杆菌菌粉。
优选的，S3中包括进行90-120℃高温杀菌；将高温杀菌后的浆液进行冷却至35-50℃时进行凝结芽孢杆菌接种。
优选的，S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为0.5～10％，摇床转速180～220r/min，于40～45℃培养,48～60h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。
优选的，S4的发酵结束，镜检芽孢率达到100％，发酵液活菌数和芽孢数达到2.0×109cfu/ml以上。
优选的，S4中放罐浓缩温度为60-70℃，压强为-0.095～-0。075MPa，真空浓缩至膏状。
一种食用营养粉，包括上述的食用凝结芽孢杆菌菌粉或包括上述的食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺制备的凝结芽孢杆菌菌粉。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌的含量为2.0×1010cfu/g～2.4×1010cfu/g。
实施例1
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮1份、蜂花粉1份、蚕蛹1份、小麦胚芽1份、碳源1份。所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为2：1。所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，其质量比为8：5：3：0.5；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的15％。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
S2、超微粉碎：将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，使原料的粒度小于300目；
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为1％；将搅拌均布的浆液均质后，调节PH值为6.8，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为1％，摇床转速210r/min，于45℃培养50h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。S4的发酵结束，镜检芽孢率达到100％，发酵液活菌数和芽孢数达到2.6×109cfu/ml。S4中放罐浓缩温度为65℃，压强为-0.095MPa，真空浓缩至膏状。
S5、真空干燥和粉碎：将温度设为50℃，干燥30h，然后利用粉碎机粉碎，得到粒度小于300目的本发明的凝结芽孢杆菌菌粉。
一种食用营养粉，包括上述的食用凝结芽孢杆菌菌粉或包括上述的食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺制备的凝结芽孢杆菌菌粉。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌的含量为2.4×1010cfu/g。
实施例2
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮0.5份、蜂花粉0.25份、蚕蛹0.5份、小麦胚芽0.5份、碳源0.5份。
所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为1：1。所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，其质量比为3：2：0.5：0.1；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的1％。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
S2、超微粉碎：将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，使原料的粒度小于400目；
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为1％；将搅拌均布的浆液均质后，调节pH值为6.5，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；S3中包括在浆液均质后进行118℃高温杀菌，20min；将高温杀菌后的浆液进行冷却至40℃时进行凝结芽孢杆菌接种。
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为0.5％，摇床转速180r/min，于40℃培养48h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。S4的发酵结束，镜检芽孢率达到100％，发酵液活菌数和芽孢数达到2.0×109cfu/ml以上。S4中放罐浓缩温度为60℃，压强为-0.075MPa，真空浓缩至膏状。
S5、真空干燥和粉碎：将温度设为40℃，干燥36h，然后利用粉碎机粉碎，得到粒度小于400目的本发明的凝结芽孢杆菌菌粉。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌的含量为2.03×1010cfu/g
实施例3
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮2份、蜂花粉1.5份、蚕蛹2份、小麦胚芽1.5份、碳源1份。所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为3:1。所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，其质量比为15：8：5：1；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的31％。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
S2、超微粉碎：将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，使原料的粒度小于400目；
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为2％；将搅拌均布的浆液均质后，调节pH值为7.0，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为10％，摇床转速220r/min，于45℃培养,60h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。S4的发酵结束，镜检芽孢率达到100％，发酵液活菌数和芽孢数达到2.63×109cfu/ml。S4中放罐浓缩温度为70℃，压强为-0.085MPa，真空浓缩至膏状。
S5、真空干燥和粉碎：将温度设为60℃，干燥24h，然后利用粉碎机粉碎，得到粒度小于400目的本发明的凝结芽孢杆菌菌粉。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌的含量为2.38×1010cfu/g
对比例1
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮1份、采用等质量的明胶替代蜂花粉、蚕蛹1份、小麦胚芽1份、碳源1份。所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为2：1。所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，其质量比为8：5：3：0.5；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的15％。
其他成分和制备方法均同实施例1。
对比例2
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮1份、蜂花粉1份、采用等质量的明胶替代蚕蛹、小麦胚芽1份、碳源1份。所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为2：1。所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，其质量比为8：5：3：0.5；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的15％。
其他成分和制备方法均同实施例1。
对比例3
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮1份、蜂花粉1份、蚕蛹1份、小麦胚芽1份、碳源1份。所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为2：1。所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，其质量比为8：5：3：0.5；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的15％。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
不进行S2步骤，直接进行S3，
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为1％；将搅拌均布的浆液均质后，调节pH值为6.8，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为1％，摇床转速210r/min，于45℃培养,50h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。S4中放罐浓缩温度为65℃，压强为-0.09MPa，真空浓缩至膏状。
S5、真空干燥和粉碎：将温度设为50℃，干燥30h，然后利用粉碎机粉碎，得到粒度小于300目的本发明的凝结芽孢杆菌菌粉。
成分和制备方法(不包括S2超微粉碎步骤)均同实施例1。
对比例4
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮1份、蜂花粉1份、蚕蛹1份、小麦胚芽1份、碳源1份。所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为2：1。所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，其质量比为8：5：3：0.5；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的15％。
一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
S2、超微粉碎：将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，使原料的粒度小于300目；
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为1％；将搅拌均布的浆液均质后，调节PH值为6.8，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为1％，摇床转速210r/min，于45℃培养,50h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。S4中放罐浓缩温度为65℃，压强为-0.09MPa，真空浓缩至膏状。
不进行S5步骤，物真空干燥和粉碎。成分和制备方法(不包含S5步骤)均同实施例1。
食用凝结芽孢杆菌菌粉效果试验
将本发明实施例1的原料配备好后，按实施例1的制备工艺进行制备，S2超微粉碎将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，分为四组：原料不超微粉碎一组，100-200目为一组，200-300目为一组，小于300目为一组，测得发酵结束时凝结芽孢杆菌的活菌散、芽孢数和芽孢转化率，如表1。
表1。
物料粒度 原料不超微粉碎 100-200目 200-300目 小于300目
活菌数 1.5*10<sup>9</sup>cfu/ml 1.8*10<sup>9</sup>cfu/ml 2.3*10<sup>9</sup>cfu/ml 2.6*10<sup>9</sup>cfu/ml
芽孢数 1.0*10<sup>9</sup>cfu/ml 1.4*10<sup>9</sup>cfu/ml 2.0*10<sup>9</sup>cfu/ml 2.6*10<sup>9</sup>cfu/ml
芽孢转化率 66.7％ 77.8％ 87.0％ 100％
如表1所示，S2超微粉碎步骤，将凝结芽孢杆菌菌粉的原料粉碎小于300目时，活菌数、芽孢数达到2.6×109cfu/ml和芽孢转化率达到100％，表现为良好水平，满足实验要求。
各实施例与对比例检测试验
将各实施例和对比例中凝结芽孢杆菌的活菌数、芽孢数在不同时期进行检测，并对制成的菌粉和菌剂进行食品稳定性评级和保质期检测，结果如表2。
表2。
Figure BDA0002426108800000091
检测结果说明，本发明中食用凝结芽孢杆菌菌粉在进行超微粉碎蜂花粉、蚕蛹对食用凝结芽孢杆菌菌粉的稳定性和保质期有积极影响，菌粉形态比菌剂形态具有更好的保存效果；且发酵结束时与菌粉中检测时，本发明的凝结芽孢杆菌的含量为2.0×1010cfu/g～2.4×1010cfu/g，相比对比例，具有更高的活菌数、芽孢数。可见，超微粉碎操作，蜂花粉、蚕蛹对本发明的食用凝结芽孢杆菌菌粉具有关键性作用。
真空干燥试验
测试上述实施例1和对比例1-3制备的发酵结束时凝结芽孢杆菌混合液，在真空干燥60℃处理36h后，其中菌种的存活率，结果如表3所示。
表3凝结芽孢杆菌温度试验。
项目 存活率
实施例1 0.98
对比例1 0.68
对比例2 0.72
对比例3 0.65
由表3可知，在真空干燥60℃处理36h后，对比例凝结芽孢杆菌制剂中的菌种数显著降低，但是其存活率低，实施例依旧保持在90％以上，可以满足菌粉制备时真空干燥的要求。
凝结芽孢杆菌菌粉进行腹泻临床试验
1.腹泻病例入选
全部病例来源于某医院诊断出腹泻的患者。分别入选120例患者作为研究对象，年龄20～55岁。将其分为4组，每组30人，组1服用实施例1提供的凝结芽孢杆菌菌粉，组2-4服用对比例1-3的凝结芽孢杆菌菌粉，各组患者的病期等进行无差异统计。
2.治疗方法
患者采用口服的方式服用凝结芽孢杆菌菌粉。组1的患者餐后口服，用40～60℃的温水冲服，每次服用量为0.42-1.25g克(每次服用总活菌数约为1.0*1010cfu)，每日1次，28天为一个疗程。组2-4的服用方法与组1的相同，每组均服用1个疗程。
3.疗效判定标准
治愈：身体健康，回复正常发。
有效：不适感明显减小，腹泻有所缓解。
无效：未见好转。
4.结果及分析
临床疗效结果表：治疗组和对照组的疗效对比结果如表4所示。
表4凝结芽孢杆菌菌粉服用腹泻临床疗效结果表。
项目 治愈 有效 无效 治愈率
组1 86.67％ 10.00％ 3.33％ 96.67％
组2 56.67％ 16.67％ 26.67％ 73.33％
组3 76.67％ 6.67％ 16.67％ 83.33％
组4 66.67％ 13.33％ 20.00％ 80.00％
凝结芽孢杆菌菌粉进行便秘临床试验
1.病例入选
全部病例来源于某医院诊断出便秘的患者。分别入选160例患者作为研究对象，年龄20～55岁。将其分为4组，每组40人，组1服用实施例1提供的凝结芽孢杆菌菌粉，组2-4服用对比例1-3的凝结芽孢杆菌菌粉；各组患者的病期等进行无差异统计。
2.治疗方法
患者采用口服的方式服用凝结芽孢杆菌菌粉。组1的患者餐后口服，用40～60℃的温水冲服，每次服用量为0.42-1.25g克(每次服用总活菌数约为1.0*1010cfu)，每日1次，14天为一个疗程。组2-4的服用方法与组1的相同，每组均服用1个疗程。
3.疗效判定标准
治愈：身体健康，回复正常发。
有效：不适感明显减小，便秘有所缓解。
无效：未见好转。
4.结果及分析
临床疗效结果表:治疗组和对照组的疗效对比结果如表5所示。
表5凝结芽孢杆菌菌粉服用便秘临床疗效结果表。
项目 治愈 有效 无效 治愈率
组1 87.5％ 7.5％ 5.0％ 95.0％
组2 52.5％ 12.5％ 35.0％ 65.0％
组3 70.0％ 7.5％ 22.5％ 77.5％
组4 65.0％ 15.0％ 20.0％ 80.0％
根据表4和表5得：每次服用实施例1提供的凝结芽孢杆菌菌粉有效率较高，说明该剂量和配方组分较为合理。组2～组3的总有效率均较低，说明实施例1的凝结芽孢杆菌菌粉可以治疗腹泻或便秘，治疗效果佳。
根据表4和表5得：每次服用实施例1提供的凝结芽孢杆菌菌粉有效率较高，说明该剂量和配方组分较为合理。组2～组3的总有效率均较低，说明实施例1的凝结芽孢杆菌菌粉可以治疗腹泻或便秘，治疗效果佳。
具体典型病例介绍：
典型病例1：洪某，男，52岁，山东人，便秘一年以上，检查身体，无异常，服用本发明实施例1的凝结芽孢杆菌菌粉，一日二次，每次0.42g(每次服用总活菌数约为1.0*1010cfu)，餐后口服，2周后便秘缓解，4周后，正常。
典型病例2：王某，女，44岁，青岛人，便秘六个月，检查身体，无异常，服用本发明实施例1的凝结芽孢杆菌菌粉，一日二次，每次0.42g(每次服用总活菌数约为1.0*1010cfu)，餐后口服，2周后便秘缓解，后每日服用0.5g，每日一次，2周后，正常。
典型病例3：刘某，男，38岁，青岛人，便秘三个月，检查身体，无异常，为饮食不均，未按时喝水，用本发明实施例1的凝结芽孢杆菌菌粉，一日二次，每次0.42g(每次服用总活菌数约为1.0*1010cfu)，餐后口服，2周后正常。
同时其中所需要说明的是，在本文中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，由于文字表达的有限性，而客观上存在无限的具体结构，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进、润饰或变化，也可以将上述技术特征以适当的方式进行组合；这些改进润饰、变化或组合，或未经改进将发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌菌粉进行超微粉碎后发酵并干燥制得，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括以下重量份的组分燕麦麸皮0.5-2份、蜂花粉0.25-1.5份、蚕蛹0.5-2份、小麦胚芽0.5-1.5份、碳源0.5-2份。
2.根据权利要求1所述的一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，其特征在于，所述碳源包括麦芽糊精、菊粉，其质量比为1-3:1。
3.根据权利要求1所述的一种食用凝结芽孢杆菌菌粉，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料还包括食品添加剂，所述食品添加剂包括碳酸钙、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰，其质量比为3-15：2-8：0.5-5：0.1-1；所述食品添加剂为所述凝结芽孢杆菌菌粉的总原料质量的1-31％。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺，其特征在于，所述方法具体包括以下制备步骤：
S1、原料配备：按上述重量份称取凝结芽孢杆菌菌粉的原料；
S2、超微粉碎：将所述凝结芽孢杆菌菌粉的原料包括燕麦麸皮、蜂花粉、蚕蛹、小麦胚芽进行超微粉碎，使原料的粒度小于300目；
S3、混合原料，接种：将S2获得的超微原料与碳源按上述质量比例混合，可添加上述质量比例的食品添加剂，取一定重量分数的水搅拌均匀；使燕麦麸皮为的质量浓度为0.5-2％；将搅拌均布的浆液均质后，调节PH值为6.5-7.0，在冷却的浆液中接种凝结芽孢杆菌；
S4、发酵并浓缩：进行发酵处理，进行放罐浓缩直到呈现膏状；
S5、真空干燥和粉碎：将温度设为40-60℃，干燥24-36h，然后利用粉碎机粉碎，得到粒度小于300目的本发明的凝结芽孢杆菌菌粉。
5.根据权利要求4所述的一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，S3中包括在浆液均质后进行90-120℃高温杀菌；将高温杀菌后的浆液进行冷却至35-50℃时进行凝结芽孢杆菌接种。
6.根据权利要求4所述的一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，S4的发酵过程为将制得的凝结芽孢杆菌种子液接种至S3制得的冷却浆液中进行摇瓶发酵，接种量为0.5～10％，摇床转速180～220r/min，于40～45℃培养，48～60h，获得凝结芽孢杆菌发酵液。
7.根据权利要求4所述的一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，S4的发酵结束，镜检芽孢率达到100％，发酵液活菌数和芽孢数达到2.0×109cfu/ml以上。
8.根据权利要求4所述的一种食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备方法，其特征在于，S4中放罐浓缩温度为60-70℃，压强为-0.095～-0.075MPa，真空浓缩至膏状。
9.一种食用营养粉，其特征在于，包括如权利要求1-3任意一项所述的食用凝结芽孢杆菌菌粉或包括如权利要求4-8任意一项所述的食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺制备的凝结芽孢杆菌菌粉。
10.如权利要求1-3任意一项所述的食用凝结芽孢杆菌菌粉或包括如权利要求4-8任意一项所述的食用凝结芽孢杆菌菌粉的制备工艺制备的凝结芽孢杆菌菌粉，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌的含量为2.0×1010cfu/g～2.4×1010cfu/g。
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