CN110897053B - 一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料及其制备方法与用途 - Google Patents

一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料及其制备方法与用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料及其制备方法与用途，属于中药发酵技术领域。该饲料的组成如下：鸡血藤、蛋壳粉、翻白草、益母草、松针粉、红枣粉、薄荷、丁香；同时配合红枣粉、芝麻粕、喷浆玉米皮、玉米胚芽粕、稻壳粉等进行混合，并加入复合益生菌菌剂进行发酵制备获得。本发明中的复合益生菌的发酵菌液中应用到乳酸菌，其菌种保藏号为CGMCCNo.18395，具有显著的胞外酶活性。本发明中发酵中药的活菌数能达到一定的数量级，可以有效的改善动物肠道菌群平衡，饲喂蛋鸡后可以有效改善鸡蛋的品质，包括蛋黄、蛋壳颜色、哈氏单位、提高蛋壳厚度等，同时在提高蛋鸡生产性能的同时也可以减少饲料招蝇的问题。

Description

一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料及其制备方法与用途
技术领域
本发明属于中药发酵技术领域，具体涉及一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料及其制备方法与用途。
背景技术
现代中药发酵技术是以传统的中药炮制发酵法为基础，利用微生态学的特殊性，并结合酶学工程所产生的一种中药高科技制药新工艺，在中药发酵过程中微生物发挥了强大的分解转化能力，产生了多种次生代谢产物，较大幅度地改变了药性，降低毒副作用、提高疗效，产生新药效、利于吸收、改善适口性，极大地丰富充实了中药的基础理论并促进中药在生产实践中的作用，为中药的发展和应用开辟新的研究领域，为新药的研发提供理论支持。
发酵中药提高了药效，改变了药性，降低了毒副作用，甚至有新的功效产生，近年来人们对绿色环保健康的迫切需求，国家对养殖业兽药饲料行业的严控。中药经微生物发酵后一方面可以提高中药的药效，降低其使用量，扩大使用范围；另一方面增加了较多有益物质的含量，因此在生产使用过程中发挥出了独特优势和效果。相信随着多学科的交叉发展及发酵技术的不断成熟，必将加快现代中药发酵工艺技术的研究进程，从而加强中药资源的可持续利用，发酵中药将会在养殖生产中带来更大的社会效益和经济效益，值得推广应用。
目前，抗生素的药物残留严重制约着我国畜牧业的健康快速发展，研究表明，微生物发酵中药应用于畜牧业生产上具有“高效、量少、安全”等特点和优势。应用现代先进的发酵技术，按照目的定向的发酵中药，会成为未来中药发展的主流方向之一。但针对于中药是否合理配伍，应用于饲料中是否在替代抗生素的同时可以提高禽类的品质均是有待解决的问题。同时对于产业化养殖业而言，在饲喂过程中，饲料均处于全部露天开放的状态，特别在夏天蚊虫较多的情况下，饲料已被蚊虫污染，从而造成禽类或牲畜腹泻等问题。常规使用抗生素等处理来快速有效解决其腹泻问题，但同时会带来药物残留等诸多问题。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料及制备方法与用途，该驱蝇中药发酵饲料在蛋鸡饲喂过程中添加有改善鸡蛋品质的效果，同时达到有效驱赶蚊蝇的效果，使饲料免受污染的效果。
本发明的第一个目的是提供一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料，主要由以下原料组成：鸡血藤10-15份，蛋壳粉10-15份，翻白草8-12份，益母草10-15份，松针粉9-15份，红枣粉7-12份，薄荷4-8份、丁香3-6份，红糖4-7份，芝麻粕8-15份，喷浆玉米皮15-40份，玉米胚芽粕10-25份，稻壳粉8-20份，葡萄糖0.4-3份，复合益生菌菌剂3-8份，水25-40份。
优选地，所述发酵饲料中，益母草为11-13份，松针粉为9-12份，红枣粉为7-10份，红糖为5-6份，芝麻粕为9-12份。
更优选地，所述发酵饲料中，益母草为12份，松针粉为10份，红枣粉为8份，红糖为6份，芝麻粕为10份。
优选地，所述发酵饲料中，薄荷为4-6份，丁香为4-5份。
优选地，所述复合益生菌菌剂分别由乳酸菌液与酵母菌液按照体积比(1～3):1组成。所述乳酸菌液与酵母菌液的菌活力均为1.0×(108～1010)CFU/mL。
优选地，所述乳酸菌液包括植物乳杆菌和乳酸片球菌，所述乳酸菌液中，植物乳杆菌和乳酸乳酸片球菌的菌活力均为1.0×(108～1010)CFU/mL；
更优选地，所述乳酸菌液的组成为：植物乳杆菌和乳酸片球菌经过活化后，得到植物乳杆菌种子液和乳酸片球菌种子液，将植物乳杆菌种子液与乳酸片球菌种子液按照体积比(0.5～2)：1的比例混合。
更优选地，所述乳酸菌液的组成为：将所述植物乳杆菌种子液和乳酸片球菌种子液按照体积比(0.5～1)：1的比例混合，并按照接种量3～5％接种于乳酸菌发酵培养基中，37℃，静置培养时间48h。
所述乳酸菌活化培养基组成为：蛋白胨10g/L，牛肉膏粉8g/L，酵母浸粉4g/L，葡萄糖20g/L，磷酸氢二钾2g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.04g/L，余量为水。
所述乳酸菌发酵培养基组成为：葡萄糖15g/L，酵母浸粉8g/L，玉米浆粉10g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，余量为水。
优选地，所述酵母菌液包括酿酒酵母菌和热带假丝酵母菌，所述酵母菌液中，酿酒酵母菌和热带假丝酵母菌的菌活力均为1.0×(108～1010)CFU/mL。
优选地，所述酵母菌液的组成为：将酿酒酵母和热带假丝酵母经过活化后，得到酿酒酵母种子液和热带假丝酵母种子液，将酿酒酵母种子液和热带假丝酵母种子液按照体积比(0.5～2)：1的比例混合。
更优选地，所述酵母菌菌液的组成为：将所述酿酒酵母种子液和热带假丝酵母种子液按照体积比(0.5～2)：1的比例混合，并按照接种量3～5％接种于酵母菌发酵培养基中，37℃，180rpm，震荡培养48h。
所述酵母菌活化培养基组成为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，余量为水。
所述酵母菌发酵培养基组成为：葡萄糖15g/L，酵母浸粉4g/L，马铃薯10g/L，余量为水。
更优选地，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌FML-1，菌种保藏号为CGMCC No.18395。
所述植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)FML-1，于2019年8月19日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.18395，所述菌种是从酸菜发酵中提取出来的。
本发明的另一目的是提供所述中药发酵饲料的制备方法，步骤如下：
(1)将所述芝麻粕、喷浆玉米皮、玉米胚芽粕分别进行粉碎，粉碎通过10-20目的筛孔，所述鸡血藤、翻白草、益母草、丁香、薄荷分别进行粉碎，粉碎通过20-30目的筛孔，将粉碎的原料与所述蛋壳粉、松针粉、红枣粉、稻壳粉、红糖以及葡萄糖进行混合；
(2)向所述步骤(1)的混合物中加入复合益生菌菌剂和水，混合4-8分钟后，20-30℃，封闭、静止发酵3-5天。
优选地，所述步骤(2)中，发酵最终pH为4.5-4.8。
本发明的另一目的是提供所述中药发酵饲料在蛋鸡养殖中的用途。
优选地，所述中药发酵饲料在基础日粮中的混合添加量为3-5％(质量百分比)。
有益效果：
1、本发明提供的驱蝇中药发酵饲料具有(1)改善蛋鸡对饲料的消化率，降低料蛋比，提高蛋鸡产蛋率；
(2)改善鸡蛋的品质，包括鸡蛋的重量、蛋壳强度、厚度、蛋黄品质、哈氏单位等指标。
(3)相对减少饲料招蝇的问题，同时对病原性微生物有一定的抑制作用。
2、本发明提供的驱蝇中药发酵饲料的制备配方温和，方便操作控制，能够实现工业化生产。
3、本发明中原料以及原料和发酵过程中的协同功能：
益母草为唇形科植物，全草性微寒，具有祛痰生新，活血调经等功能，能够增强子宫肌肉的收缩力和紧张性，益母草中含有水苏碱、益母草定、益母宁等多种生物碱，可使蛋黄颜色明显加深，明显提高产蛋率，增加动物的抗病能力，受精率也能提高。
鸡血藤性温，有补血行血之功能，微有香气，微淡、含有蛋白质、多种维生素和血质红色素、矿物质、以及未知因子和具有生物活性的激素或类激素作用的物质，对控制机体正常的新陈代谢起着重要的作，在一定程度上达到维护动物体内生物的正常平衡，促进动物健康、防治疾病。
松针粉中含有多种氨基酸、微量元素，能够有效的刺激蛋鸡的排卵功能，受精率提高，提高产蛋率，且蛋黄颜色较深，松针粉中含有植物杀菌素和维生素，具有防病抗病的功效，能有效的抵御动物疾病的发生。
枣粉含有丰富的营养物质，主要能量物质主要是糖类，总糖含量占50％-85％，以还原糖为主，主要为葡萄糖和果糖，同时枣粉中含有多种生物活性物质，如皂苷类化合物、黄酮类、生物碱等，这些物质具有抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、增强免疫、保护肝脏等作用。
蛋壳粉对钙具有较强的保持率，食用后吸收、消化率高，目前作为一种天然钙源及营养强化剂在国内外各领域中得到了广泛的应用。
本发明中，益母草、松针粉、红枣粉、红糖、芝麻粕在经过发酵后具有显著的协同性，可显著提高蛋鸡对于蛋氨酸的消化吸收率，维持蛋重，减少破蛋率，维持蛋鸡正常的生产性能。
薄荷中含有的薄荷油、薄荷酮和薄荷醇容易被发散，在一定的程度上能将蚊蝇驱散。其次薄荷中还含有驱虫精油，这种精油气味十分温和，对人体是无害的。
丁香真含有一种叫做丁香酚的成分，具有良好的驱蚊蝇效果，而且毒性低，使用安全，对皮肤和眼睛仅有轻度刺激性，具有良好的推广应用性，同时丁香酚除了可以驱蚊还有许多其他好处。其抑菌效果显著，而且有很好的抗氧化活性。
本发明中，薄荷和丁香经过微生物的发酵，在驱逐蚊蝇和抑菌功能上具有显著的协同作用，具有可以达到显著驱蝇的效果，同时可以有效减少饲料中大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原性微生物的含量。
具体实施方式
下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
本发明提供的改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料是通过以下技术方案制备而成。
一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料，主要由以下原料组成：鸡血藤10-15份，蛋壳粉10-15份，翻白草8-12份，益母草10-15份，松针粉9-15份，红枣粉7-12份，薄荷4-8份、丁香3-6份，红糖4-7份，芝麻粕8-15份，喷浆玉米皮15-40份，玉米胚芽粕10-25份，稻壳粉8-20份，葡萄糖0.4-3份，复合益生菌菌剂3-8份，水25-40份。
本发明实施例中，益母草可以为10份、11份、12份、13份、14份、15份，松针粉可以为9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份，红枣粉可以为7份、8份、9份、10份、11份、12份，红糖可以为4份、5份、6份、7份，芝麻粕可以为8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份。
作为本发明优选地实施例，益母草为11-13份，松针粉为9-12份，红枣粉为7-10份，红糖为5-6份，芝麻粕为9-12份。
作为本发明更优选地实施例，益母草为12份，松针粉为10份，红枣粉为8份，红糖为6份，芝麻粕为10份。
本发明中，益母草、松针粉、红枣粉、红糖、芝麻粕在经过发酵后具有显著的协同性，可显著提高蛋鸡对于蛋氨酸的消化吸收率，维持蛋重，减少破蛋率，维持蛋鸡正常的生产性能。
本发明实施例中，薄荷可以为4份、5份、6份、7份、8份，丁香可以为3份、4份、5份、6份。
作为本发明优选地实施例，薄荷为4-6份，丁香为4-5份。
作为本发明优选地实施例，薄荷为5份，丁香为4份。
本发明中，薄荷和丁香经过微生物的发酵，在驱逐蚊蝇和抑菌功能上具有显著的协同作用，具有可以达到显著驱蝇的效果，
本发明中，菌株的代谢产物可以有效的抑制大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌等病原性微生物。
本发明的实施例中，所述复合益生菌菌剂分别由乳酸菌液与酵母菌液的体积比可以为1：1、2：1、3：1组成。所述乳酸菌液与酵母菌液的菌活力可以为1.0×108CFU/mL，5.0×108CFU/mL，1.0×109CFU/mL，5.0×109CFU/mL，1.0×1010CFU/mL。
本发明的实施例中，所述乳酸菌液是由植物乳杆菌和乳酸片球菌菌液的体积比可以为0.5：1、1.0：1，1.5：1，2.0：1。
本发明的实施例中，所述酵母菌液是由酿酒酵母和热带假丝酵母菌液的体积比可以为0.5：1、1.0：1，1.5：1，2.0：1。
本发明的实施例中，所述植物乳杆菌、乳酸片球菌菌、酿酒酵母以及热带假丝酵母菌的菌活力可以为1.0×108CFU/mL，5.0×108CFU/mL，1.0×109CFU/mL，5.0×109CFU/mL，1.0×1010CFU/mL。
本发明的实施例中，将上述植物乳杆菌和乳酸片球菌菌液按照体积比混合的乳酸菌按照接种量3％接种于乳酸发酵培养基，于37℃条件下进行扩大培养，静置培养时间48h。
本发明的实施例中，将上述酿酒酵母和热带假丝酵母菌液按照体积比混合的酵母菌液按照接种量3％接种于酵母菌发酵培养基中，于37℃条件下进行扩大培养，180rpm，震荡培养时间48h。
本发明的实施例中，所述植物乳杆菌优选为菌种保藏号为CGMCC No.18395的植物乳杆菌FML-1。
本发明提供的驱蝇中药发酵饲料，发酵选用的植酸乳杆菌(保藏编号CGMCCNo.18395)，该菌能够产生胞外酶，通过水解作用，可以将蛋白质、多糖等逐步变为可利用吸收的小分子物质，其中产生的胞外酶的活性如表1所示。
表1.MRS培养基条件下产胞外酶的酶活
Figure BDA0002327431920000071
该酶粗酶液酶活的pH一般在4.0，最适pH值大都在酸性范围内，能耐受的pH值范围在3.8-7.5，由此该酶可以在酸性的胃肠道中仍然保持较高的酶活力，继续发挥其酶解消化原料的性能，同时维持胃肠道的健康。
本发明菌株所产胞外酶的最适温度为37℃，且该胞外酶在温度达到80℃仍具有酶活，酶活能达到原有酶活的80％，由此可以看出，发酵饲料即使在炎热的夏季，或者经过加热处理，仍然可以保持显著的酶活性。
该驱蝇中药发酵饲料在有益复合微生物的作用下，以中药的不同比例组合，加上饲料底物进行发酵获得。
所述中药发酵饲料的制备方法，步骤如下：
(1)将所述芝麻粕、喷浆玉米皮、玉米胚芽粕分别进行粉碎，粉碎通过10-20目的筛孔，所述鸡血藤、翻白草、益母草、丁香、薄荷分别进行粉碎，粉碎通过20-30目的筛孔，将粉碎的原料与所述蛋壳粉、松针粉、红枣粉、稻壳粉、红糖以及葡萄糖进行混合；
(2)向所述步骤(1)的混合物中加入复合益生菌菌剂和水，混合4-8分钟后，20-30℃，封闭、静止发酵3-5天。
本发明的实施例中，所述步骤(2)中，发酵最终pH可以为4.5、4.6、4.7、4.8。
所述中药发酵饲料在蛋鸡养殖中的用途。
本发明的实施例中，所述中药发酵饲料在基础日粮中的混合添加量为3-5％(质量百分比)。
实施例1驱蝇中药发酵饲料的制备
1、中药及饲料原料的制备：
将芝麻粕10份，喷浆玉米皮20份，玉米胚芽粕12份，分别进行粉碎，粉碎通过15目的筛孔，混合备用；另外将鸡血藤12份，翻白草10份，益母草11份，薄荷5份，丁香4份，分别进行粉碎，粉碎通过25目的筛孔，混合备用；另称取蛋壳粉12份，松针粉9份，红枣粉10份，红糖5份，稻壳粉12份，葡萄糖0.4份，混合备用。
2、复合益生菌剂的制备：
(1)乳酸菌液的制备：菌液由植物乳杆菌(保藏编号CGMCC No.18395)和乳酸片球菌组成，两者作为种子液需要分别活化，将植物乳杆菌和乳酸片球菌分别接入乳酸菌活化培养基中，活化的培养温度为37℃，静置培养时间48h。活化后的植物乳杆菌和乳酸片球菌的种子液的活菌数检测分别为(1.0-2.0)×109CFU/mL和(1.0-2.0)×108CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，用两种菌的种子液进行混合扩大培养，分别将植物乳杆菌种子液和乳酸片球菌种子液按体积比比1：1混合，并按照接种量3％接种于乳酸发酵培养基，扩大培养的温度为37℃，静置培养时间48h，最后获得菌液中菌活力为2.5×109CFU/ml。
其中，乳酸菌活化培养基成分为：蛋白胨10g/L，牛肉膏粉8g/L，酵母浸粉4g/L，葡萄糖20g/L，磷酸氢二钾2g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.04g/L，余量为水。
乳酸菌发酵培养基组成为：葡萄糖15g/L，酵母浸粉8g/L，玉米浆粉10g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，余量为水。
(2)酵母菌液的制备：菌液由酿酒酵母和热带假丝酵母组成，将两种菌分别接种于酵母菌活化培养基，37℃，180rpm，震荡培养时间48h，得到酿酒酵母和热带假丝酵母种子液，活化后的酿酒酵母和热带假丝酵母种子液的活菌数检测均为1.0×(108～1010)CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，将酿酒酵母种子液和热带假丝酵母种子液按照体积比1：1混合，并按照接种量3％接种于酵母菌发酵培养基中，37℃，180rpm，震荡培养时间48h。最后获得菌液中菌活力为3.0×109CFU/ml。
其中，酵母菌活化培养基组成为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，余量为水。
酵母菌发酵培养基组成为：葡萄糖15g/L，酵母浸粉4g/L，马铃薯10g/L，余量为水。
3、发酵：
(1)将步骤1的混合原料在混合机中混合，复合益生菌剂通过液体添加系统加入混合机中，混合机的混合时间为6分钟，复合益生菌剂的接种量为5份，步骤2制备的复合益生菌剂中乳酸菌液与酵母菌液体积比为2：1。
(2)混合后，用单向阀的包装袋包装，竖向放置，25℃，静止发酵4天，最终发酵中药的pH值在4.5-4.8之间为发酵终点。
实施例2驱蝇中药发酵饲料的制备
1、中药及饲料原料的制备：
将芝麻粕10份，喷浆玉米皮18份，玉米胚芽粕20份，分别进行粉碎，粉碎通过10目的筛孔，混合备用；另外将鸡血藤10份，翻白草10份，益母草12份，薄荷4份，丁香6份，分别进行粉碎，粉碎通过20目的筛孔，混合备用；另称取蛋壳粉15份，松针粉10份，红枣粉8份，红糖6份，稻壳粉15份，葡萄糖0.4份，混合备用。
2、复合益生菌剂的制备：
(1)乳酸菌液的制备：菌液由植物乳杆菌(保藏编号CGMCC No.18395)和乳酸片球菌组成，两者作为种子液需要分别活化，将植物乳杆菌和乳酸片球菌分别接入乳酸菌活化培养基中，活化的培养温度为37℃，静置培养时间48h。活化后的植物乳杆菌和乳酸片球菌的种子液的活菌数检测分别为(3.0-4.0)×109CFU/mL和(1.0-2.0)×109CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，用两种菌的种子液进行混合扩大培养，分别将植物乳杆菌种子液和乳酸片球菌种子液按照体积比1：1混合，并按照接种量4％接种于乳酸菌发酵培养基，扩大培养的温度为37℃，静置培养时间48h，最后获得菌液中菌活力为7.5×109CFU/ml。
其中，乳酸菌活化培养基成分同实施例1；乳酸菌发酵培养基成分为：同实施例1。
(2)菌液由酿酒酵母和热带假丝酵母组成，将两种菌分别接种于酵母菌活化培养基，37℃，180rpm，震荡培养时间48h，得到酿酒酵母和热带假丝酵母种子液，活化后的酿酒酵母和热带假丝酵母种子液的活菌数检测均为1.0×(108～1010)CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，将酿酒酵母种子液和热带假丝酵母种子按照体积比1：1混合，并按照接种量4％接种于酵母菌发酵培养基中，37℃，180rpm，震荡培养时间48h。最后获得菌液中菌活力为6.0×109CFU/ml。
其中，酵母菌活化培养基成分为：同实施例1；酵母菌发酵培养基成分为：同实施例1。
3、发酵：
(1)将步骤1的混合原料在混合机中混合，复合益生菌剂通过液体添加系统加入混合机中，混合机的混合时间为8分钟，复合益生菌剂的接种量为6份，步骤2制备的复合益生菌剂中乳酸菌液与酵母菌液体积比为3：1。
(2)混合后，用单向阀的包装袋包装，竖向放置，25-26℃，静止发酵4天，最终发酵中药的pH值在4.5-4.8之间为发酵终点。
实施例3驱蝇中药发酵饲料的制备
1、中药及饲料原料的制备：
将芝麻粕9份，喷浆玉米皮16份，玉米胚芽粕18份，分别进行粉碎，粉碎通过20目的筛孔，混合备用；另外将鸡血藤11份，翻白草12份，益母草10份，薄荷4份，丁香6份，分别进行粉碎，粉碎通过30目的筛孔，混合备用；另称取蛋壳粉11份，松针粉15份，红枣粉7份，红糖4份，稻壳粉12份，葡萄糖0.4份，混合备用。
2、复合益生菌剂的制备：
(1)乳酸菌液的制备：菌液由植物乳杆菌(保藏编号CGMCC No.18395)和乳酸片球菌组成，两者作为种子液需要分别活化，将植物乳杆菌和乳酸片球菌分别接入乳酸菌活化培养基中，活化的培养温度为37℃，静置培养时间48h。活化后的植物乳杆菌和乳酸片球菌的种子液的活菌数检测分别为(7.0-8.0)×108CFU/mL和(5.0-7.0)×108CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，用两种菌的种子液进行混合扩大培养，分别将植物乳杆菌种子液和乳酸片球菌种子液按照体积比1：1混合，并按照接种量5％接种于乳酸菌发酵培养基，扩大培养的温度为37℃，静置培养时间48h，最后获得菌液中菌活力为1.5×109CFU/ml。
其中，乳酸菌活化培养基成分同实施例1；乳酸菌发酵培养基成分为：同实施例1。
(2)酵母菌液的制备：菌液由酿酒酵母和热带假丝酵母组成，将两种菌分别接种于酵母菌活化培养基，37℃，180rpm，震荡培养时间48h，得到酿酒酵母和热带假丝酵母种子液，活化后的酿酒酵母和热带假丝酵母种子液的活菌数检测均为1.0×(108～1010)CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，将酿酒酵母种子液和热带假丝酵母种子按照体积比1：1混合，并按照接种量5％接种于酵母菌发酵培养基中，37℃，180rpm，震荡培养时间48h。最后获得菌液中菌活力为2.5×109CFU/ml。
其中，酵母菌活化培养基成分为：同实施例1；酵母菌发酵培养基成分为：同实施例1。
3、发酵：
(1)将步骤1的混合原料在混合机中混合，复合益生菌剂通过液体添加系统加入混合机中，混合机的混合时间为5分钟，复合益生菌剂的接种量为5份，步骤2制备的复合益生菌剂中乳酸菌液与酵母菌液体积比为1：1。
(2)混合后，用单向阀的包装袋包装，竖向放置，25℃，静止发酵4天，最终发酵中药的pH值在4.5-4.8之间为发酵终点。
实施例4驱蝇中药发酵饲料的制备
1、中药及饲料原料的制备：
将芝麻粕11份，喷浆玉米皮25份，玉米胚芽粕15份，分别进行粉碎，粉碎通过15目的筛孔，混合备用；另外将鸡血藤13份，翻白草10份，益母草13份，薄荷6份，丁香4份，分别进行粉碎，粉碎通过25目的筛孔，混合备用；另称取蛋壳粉12份，松针粉13份，红枣粉10份，红糖5份，稻壳粉12份，葡萄糖0.4份，混合备用。
2、复合益生菌剂的制备：
(1)乳酸菌液的制备：菌液由植物乳杆菌(保藏编号CGMCC No.18395)和乳酸片球菌组成，两者作为种子液需要分别活化，将植物乳杆菌和乳酸片球菌分别接入乳酸菌活化培养基中，活化的培养温度为37℃，静置培养时间48h。活化后的植物乳杆菌和乳酸片球菌的种子液的活菌数检测均为1.0×(108～1010)CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，用两种菌的种子液进行混合扩大培养，分别将植物乳杆菌种子液和乳酸片球菌种子液按体积比比1：1混合。
其中，乳酸菌活化培养基成分为：蛋白胨10g/L，牛肉膏粉8g/L，酵母浸粉4g/L，葡萄糖20g/L，磷酸氢二钾2g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.04g/L，余量为水。
(2)酵母菌液的制备：菌液由酿酒酵母和热带假丝酵母组成，将两种菌分别接种于酵母菌活化培养基，37℃，180rpm，震荡培养时间48h，得到酿酒酵母和热带假丝酵母种子液，活化后的酿酒酵母和热带假丝酵母种子液的活菌数检测均为1.0×(108～1010)CFU/mL，为了应用于大批量的生产应用，需要扩大培养，将酿酒酵母种子液和热带假丝酵母种子液按照体积比1：1混合。
其中，酵母菌活化培养基组成为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，余量为水。
3、发酵：
(1)将步骤1的混合原料在混合机中混合，复合益生菌剂通过液体添加系统加入混合机中，混合机的混合时间为6分钟，复合益生菌剂的接种量为5份，复合益生菌剂由步骤2制备的乳酸菌液与酵母菌液按照体积比2：1混合。
(2)混合后，用单向阀的包装袋包装，竖向放置，25℃，静止发酵4天，最终发酵中药的pH值在4.5-4.8之间为发酵终点。
实验例1发酵中药组合物在饲料中的应用实验
以上实例应用在蛋鸡产蛋期期间，检测鸡蛋的品质，进行效果对比试验。
选取同一批的280日龄的海兰褐蛋鸡800只，随机分成4个处理组，即对照组1和实验组1，2，3。对照组饲喂基础日粮，其组成详见表2，实验组1，2，3组的组成分别为在基础日粮(组成同表2)的基础上添加基础日粮3％的(质量百分比)发酵中药，实验组1，2，3添加的发酵中药分别对应本发明实施例1，2，3所制备的发酵中药饲料。对应每个分组总计200只，其中每组包含2个重复，每个重复100只。
饲喂基础日粮参照《家禽营养需要》和海兰公司蛋鸡营养标准配制，日粮组成及营养水平见表2
表2日粮组成及营养水平
Figure BDA0002327431920000131
注：由沈阳丰美生物技术有限公司提供。
试验在同一个鸡舍进行，试验期为30天，供试鸡群在3层全阶梯式笼内饲养，每笼8-9只，日光照16h，自由采食、饮水，饲养管理条件相同。每天喂料6次(6∶00、9∶00、12：00、15∶00、17∶00、19∶00)；每天固定在上午10：30采蛋1次，捡蛋后按照重复分别进行记数、标记、存放，计算产蛋率、总蛋重及检测蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋黄指数及哈氏单位，检测结果如表3。
表3各分组饲养对比结果
Figure BDA0002327431920000132
备注：蛋黄颜色为比色卡评分，1-15分，分值越高，蛋黄颜色越深。
由表3可以看出，跟对照组相比，实验组添加了发酵中药后，鸡蛋的品质能够得到相应的提高，蛋壳强度、厚度、蛋黄颜色和高度、哈氏值都有明显的提升；产蛋率提高，差异显著，相应的破蛋率下降；本发明中应用的中药对蛋鸡的鸡蛋品质能够达到良好的改善，其中发酵中药中红枣粉、松针粉、益母草、红糖和芝麻粕成分等都含有多种氨基酸、微量元素，能够有效的刺激蛋鸡的排卵功能，受精率提高，提高产蛋率、同时能够使鸡蛋品质的各方面指标(蛋壳强度、厚度、蛋黄颜色和高度、哈氏值)都有一定的提高，可有效促进饲料中蛋氨酸的吸收利用。芝麻粕中比较高的蛋氨酸能够适当补充饲料中蛋氨酸的不足，饲料中适量的蛋氨酸会维持蛋重，减少破蛋率，维持蛋鸡正常的生产性能。
实验例2发酵中药组合物在饲料中的应用实验
为了说明此中药发酵饲料中，普通植物乳杆菌和本发明中植物乳杆菌CGMCCNo.18395以及植物乳杆菌CGMCC No.18395与其他菌种混合后应用在发酵中药后，饲喂蛋鸡后的效果的影响，将饲料进行以下分组：
对照组1：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)中药饲料组合(不加微生物，不发酵)；其中，中药饲料成分组合同实施例2步骤(1)中的组合。
对照组2：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)中药发酵饲料组合；
其中，对照组2的发酵饲料组合的制备方法如下：
(1)原料：组成同本发明实施例2步骤(1)制备的中药组合饲料；
(2)植物乳杆菌发酵菌液的制备：
发酵菌种选用植物乳杆菌LP28(菌剂产品购于芯来旺生物科技有限公司，产品批号181116)进行发酵，菌液制备及发酵过程如下：
将植物乳杆菌接入乳酸菌活化培养基中，活化的培养温度为37℃，静置培养时间48h。得到植物乳杆菌种子液，其活菌数检测为1.0×(108～1010)CFU/mL，将植物乳杆菌种子液进行扩大培养，按照接种量4％接种于乳酸发酵培养基，扩大培养的温度为37℃，静置培养时间48h，最后获得菌液中菌活力为(6.0-9.0)×109CFU/mL。
其中，乳酸菌活化培养基成分同实施例2；乳酸菌发酵培养基成分为：同实施例2。
(3)发酵：
将步骤(1)的混合原料在混合机中混合，将步骤制备得到的植物乳杆菌菌液通过液体添加系统加入混合机中，混合机的混合时间为8分钟，植物乳杆菌菌液的接种量为6份。
混合后，用单向阀的包装袋包装，竖向放置，25-26℃，静置发酵4天，最终发酵中药的pH值在4.5-4.8之间为发酵终点，得到中药发酵饲料组合。
对照组3：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)发酵中药饲料组合，其中，对照组3的发酵中药饲料组合的制备方法如下：
(1)原料：组成同本发明实施例2步骤(1)制备的中药组合饲料；
(2)植物乳杆菌发酵菌液的制备：
发酵菌种选用植物乳杆菌CGMCC No.18395进行发酵，菌液制备及发酵过程同本实验例2的对照组2的步骤(2)，最后获得菌液中菌活力为(6.0-8.0)×109CFU/mL；
(3)发酵：同本实验例2的对照组2的步骤(3)。
实验组：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)中药饲料组合，其中，中药发酵饲料为本发明实施例2制备的中药发酵饲料，其中菌种选用本发明中的植物乳杆菌CGMCCNo.18395、乳酸片球菌、酿酒酵母及热带假丝酵母混合菌进行发酵，菌液制备及发酵过程同实施例2。
表4各分组饲养对比结果
Figure BDA0002327431920000151
由表4可以看出，对照组3利用本发明的植物乳杆菌CGMCC No.18395制备的混合饲料在腹泻率上显著低于对照组2，料蛋比同样低于对照组2，而实验组通过乳酸菌和酵母菌复合益生菌中，其腹泻率上显著低于对照组3，料蛋比同样低于对照组3。
植物乳杆菌CGMCC No.18395能够在发酵过程中产生胞外酶，且具有显著的胞外酶活性，其中发酵应用到的植物乳杆菌可以产生胞外β-葡萄糖苷酶，β-葡萄糖苷酶对纤维二糖能表现出酶活性，是纤维素酶的重要组成部分，在很大程度上决定着纤维素酶的活性，纤维素酶作为饲料添加剂，在动物体内的主要作用是增加内源酶、消除饲料中抗营养因子、提高粗蛋白和粗脂肪的消化等作用，从而提高饲料效率，降低料蛋比；同时，发酵后益生菌能够调节鸡群肠道微生物平衡，相对减少蛋鸡的腹泻情况。
实验例3发酵中药组合物在驱蝇过程中的应用
为了说明中药发酵饲料中，丁香和薄荷以及与经过发酵过程的协同性对于驱蝇效果的影响，因此将饲料进行以下分组：
对照组1：基础日粮(组成同表2)；
对照组2：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)中药饲料组合(未接菌、不发酵)；
其中，中药饲料组成与实施例2相近，唯一不同的是缺少薄荷5份，丁香4份的添加，中药饲料的制备方法同实施例2的步骤1，将原料投入混合机的混合6分钟获得该中药饲料；
对照组3：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)中药发酵饲料；
其中，中药发酵饲料组成与实施例2相近，唯一不同的是缺少薄荷5份，丁香4份的添加，中药发酵饲料的制备方法同实施例2的步骤1、2、3，经过发酵获得中药发酵饲料；
对照组4：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)中药饲料(未接菌、不发酵)；
其中，中药饲料组成与实施例2相同，包括薄荷5份，丁香4份的添加，中药饲料的制备方法同实施例2的步骤1，将原料投入混合机的混合6分钟获得该中药饲料。
实验组：基础日粮(组成同表2)+3％(质量百分比)中药发酵饲料，其中，中药发酵饲料为本发明实施例2制备的中药发酵饲料。
将以上分组的饲料分别置于室温条件下且避风处，观察每组饲料上招蚊蝇的数量。
表5.驱蝇效果
Figure BDA0002327431920000161
Figure BDA0002327431920000171
由表5所示，跟对照组比较，由于中药中加入了丁香和薄荷，可以相对减少饲料招蝇的问题。特别是当丁香和薄荷经过本发明的益生菌发酵后，更具有显著的驱蝇效果。在饲喂过程中，饲料容易被苍蝇污染。饲料一污染不仅家禽家畜吃了会生病，也会增加饲料成本。而本发明通过添加丁香和薄荷，并协同益生菌的发酵作用，使得混合饲料具有显著驱蝇的效果，可有效避免饲料被污染，减少家禽的生病。
实验例4益生菌代谢产物在抑菌过程中的应用
为了说明本发明的植物乳杆菌在肠道的消化过程中的抑菌、维护肠道平衡的作用，设置以下对照和实验组。
模拟小肠消化期的肠消化液的组成为：淀粉酶(Sigma A3306)2436U/mL，胰蛋白酶(Amresco 0785)760U/mL，糜蛋白酶(Amresco 0164)95.45U/mL，无水磷酸氢二钠0.031g/mL，无水磷酸二氢钠0.02g/mL，青霉素2400U/mL。
空白对照组：模拟小肠消化期的肠消化液，采用仿生消化仪，向其中加入上述模拟小肠消化期的肠消化液，按照小肠消化期的操作步骤进行培养24h后，将经过消化期的消化液以5000r/m离心5min，取上清液，经滤器过滤(滤膜孔径为200nm)，收集滤液。
实验组1：取活化的单一植物乳杆菌LP28(菌剂产品购于芯来旺生物科技有限公司，产品批号181116)菌液，(菌浓度为(3.0-5.0)×109CFU/mL左右，活化方法同实施例2步骤2-(1))取菌液0.5ml，加入模拟小肠消化期的肠消化液中，采用仿生消化仪按照小肠消化期的操作步骤进行培养24h后，将经过消化期的消化液以5000r/m离心5min，取上清液，经滤器过滤(滤膜孔径为200nm)，收集滤液；
其中植物乳杆菌的活化方法为：将植物乳杆菌接入乳酸活化培养基中，于37℃，静置培养时间48h，乳酸菌活化培养基组成同实施例2。
实验组2：取活化的植物乳杆菌CGMCC No.18395菌液(菌浓度为(3.0-4.0)×109CFU/mL左右，活化方法同实施例2步骤2-(1))，取菌液0.5ml，同样加入模拟小肠消化期的肠消化液中，进行消化、离心处理，具体处理步骤同实验组1，最终获得收集滤液；植物乳杆菌的活化方法同实验组1。
实验组3：取活化的植物乳杆菌CGMCC No.18395菌液、乳酸片球菌菌液、酿酒酵母菌液和热带假丝酵母菌液(各菌的活化方法同实施例2步骤2-(1)，其中，植物乳杆菌和乳酸片球菌的种子液的活菌数检测分别为(3.0-4.0)×109CFU/mL和(1.0-2.0)×109CFU/mL)，各125μl，经过混合后，同样加入模拟小肠消化期的肠消化液中，进行消化、离心处理，具体处理步骤同实验组1，最终获得收集滤液；植物乳杆菌的活化方法同实验组1。
其中，乳酸片球菌的活化方法同植物乳杆菌。
其中，酿酒酵母菌和热带假丝酵母菌的活化方法为：将两种菌分别接种于酵母菌活化培养基，37℃,180rpm，震荡培养时间48h，得到酿酒酵母和热带假丝酵母活化液，酵母菌活化培养基组成同实施例2。
同本发明实施例2的活化方法。
以上是各组实验滤液的制备过程。
指示菌菌液的制备：取保存的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌接种于普通营养琼脂斜面，以37℃，培养24h，然后每支斜面加无菌水5ml，刮下菌苔，搓匀，分别制成菌悬液，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的菌的活力均为(1～9)×104。
首先将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的菌株悬液100微升涂布于普通营养琼脂平板上，自然干燥30min，然后将灭菌好的牛津杯均匀放置在平板上，每个平板放置4个(即4组样品)，最后将上述对照组和实验组的滤液加入上述实验平板的牛津杯中，加入量为20μl/牛津杯，37℃培养18～24h后观察结果，每组样品五组平行，测定抑菌圈直径。
表6.益生菌代谢产物的抑菌结果(mm)
Figure BDA0002327431920000181
在体外消化环境的培养后进行对病原性微生物进行抑菌试验，微生物对病原性微生物均具有抑菌活性，在复合益生菌的作用下，能够更有效的抑制病原性微生物的生长，调节鸡群肠道微生物平衡，具有防病抗病，能有效抵御蛋鸡疾病的发生。

Claims (6)

1.一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料，其特征在于：主要由以下原料组成：鸡血藤10-15份，蛋壳粉10-15份，翻白草8-12份，益母草10-15份，松针粉9-15份，红枣粉7-12份，薄荷4-8份、丁香3-6份，红糖4-7份，芝麻粕8-15份，喷浆玉米皮15-40份，玉米胚芽粕10-25份，稻壳粉8-20份，葡萄糖0.4-3份，复合益生菌菌剂3-8份，水25-40份，
所述复合益生菌菌剂由乳酸菌液与酵母菌液按照体积比(1～3):1组成，
所述乳酸菌液包括植物乳杆菌和乳酸片球菌，所述植物乳杆菌和乳酸片球菌的菌活力均为1.0×(108～1010)CFU/mL；
所述酵母菌液包括酿酒酵母菌和热带假丝酵母菌，所述酿酒酵母菌和热带假丝酵母菌的菌活力均为1.0×(108～1010)CFU/mL；
所述植物乳杆菌的菌种保藏号为CGMCC No.18395，
所述中药发酵饲料的制备方法，步骤如下：
(1)将所述芝麻粕、喷浆玉米皮、玉米胚芽粕分别进行粉碎，粉碎通过10-20目的筛孔，所述鸡血藤、翻白草、益母草、丁香、薄荷分别进行粉碎，粉碎通过20-30目的筛孔，将粉碎的原料与所述蛋壳粉、松针粉、红枣粉、稻壳粉、红糖以及葡萄糖进行混合；
(2)向所述步骤(1)的混合物中加入复合益生菌菌剂和水，混合4-8分钟后，20-30℃，封闭、静止发酵3-5天。
2.如权利要求1所述一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料，其特征在于：益母草为11-13份，松针粉为9-12份，红枣粉为7-10份，红糖为5-6份，芝麻粕为9-12份。
3.权利要求1或2所述中药发酵饲料的制备方法，其特征在于：步骤如下：
(1)将所述芝麻粕、喷浆玉米皮、玉米胚芽粕分别进行粉碎，粉碎通过10-20目的筛孔，所述鸡血藤、翻白草、益母草、丁香、薄荷分别进行粉碎，粉碎通过20-30目的筛孔，将粉碎的原料与所述蛋壳粉、松针粉、红枣粉、稻壳粉、红糖以及葡萄糖进行混合；
(2)向所述步骤(1)的混合物中加入复合益生菌菌剂和水，混合4-8分钟后，20-30℃，封闭、静止发酵3-5天。
4.如权利要求3所述中药发酵饲料的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，发酵最终pH为4.5-4.8。
5.权利要求1或2所述中药发酵饲料在蛋鸡养殖中的用途。
6.如权利要求5所述中药发酵饲料在蛋鸡养殖中的用途，其特征在于：所述中药发酵饲料在基础日粮中的混合添加量为3-5％。
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