CN114886008A - 一种生物发酵富硒饲料及其制备方法 - Google Patents

一种生物发酵富硒饲料及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114886008A
CN114886008A CN202210516994.7A CN202210516994A CN114886008A CN 114886008 A CN114886008 A CN 114886008A CN 202210516994 A CN202210516994 A CN 202210516994A CN 114886008 A CN114886008 A CN 114886008A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture medium
selenium
feed
fermentation
microbial agent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210516994.7A
Other languages
English (en)
Inventor
彭轶楠
季彬
王治业
叶泽
赵廷伟
梁燕
祁宏山
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences
Original Assignee
Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences filed Critical Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences
Priority to CN202210516994.7A priority Critical patent/CN114886008A/zh
Publication of CN114886008A publication Critical patent/CN114886008A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/12Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A23K10/37Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms from waste material
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/10Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for ruminants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/70Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
    • A23K50/75Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/143Fermentum
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/169Plantarum
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P60/00Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
    • Y02P60/80Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
    • Y02P60/87Re-use of by-products of food processing for fodder production

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

本发明公开了一种生物发酵富硒饲料,包括如下质量份的组分:新鲜玉米、秸秆、豆粕、麸皮和复合微生物菌剂;制备方法,包括以下步骤:步骤1:将新鲜玉米和秸秆一同放入粉碎机粉碎,长度约为2.0‑2.2mm;与豆粕和麸皮按比例混合均匀后得到农作物秸秆细化料;步骤2:将复合微生物菌剂按细化料总重量的0.5‑1%的比例添加并混合均匀,再调节水分使饲料中水分含量为60‑70%;步骤3:将步骤2得到的发酵物料放置于密闭环境发酵25‑30d,即得到生物发酵富硒饲料。本发明不仅提高了饲料发酵速率和饲料适口性,而且通过复合微生物,及其产生的抑菌物质和酸性环境的协同作用,抑制饲料中杂菌和腐败微生物的生长繁殖,提高肠道消化吸收能力,有效预防动物腹泻和肠道炎症的发生。

Description

一种生物发酵富硒饲料及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物饲料制备技术领域,尤其涉及一种生物发酵富硒饲料及其制备方法。
背景技术
生物发酵饲料具有调节肠道菌群平衡、提高动物免疫力的作用。发酵饲料中的乳酸菌进入肠道后,能够粘附在肠粘膜上,阻止致病菌与肠道的粘附和定植,起竞争性占位保护作用。乳酸菌在肠道内能够快速萌发并产生乳酸和细菌素,发酵饲料通过益生菌、抑菌物质以及酸性环境的协同作用,调节肠道菌群平衡,增强动物免疫力,有效预防动物腹泻和肠道炎症的发生。饲料发酵过程中微生物代谢作用能够有效地降低或消除饲料中的抗营养因子,将饲料中的淀粉、蛋白质、粗纤维等大分子有机物降解为动物更容易消化利用的氨基酸、低聚糖、寡糖等小分子物质,利于动物消化吸收,提高饲料利用率。饲料发酵过程中微生物产生芳香类物质,增加饲料的芳香味,具有良好的诱食效果,促进动物生长。动物采食发酵饲料后,益生菌可以抑制肠道内腐败菌,减少粪便中氨气、硫化氢、生物胺等有害物质的产生,改善动物生长环境,减少环境污染。
硒是动物体内谷胱甘肽过氧化酶的活性成分,谷胱甘肽过氧化物酶可通过催化氧化还原反应而保护细胞膜的结构和功能,加强维生素E的抗氧化作用,消除自由基;能有效地提高机体的体液免疫和细胞免疫;补硒可以提高动物繁殖力,可以防止妊娠母体流产,减少胚胎死亡;硒的抗氧化作用使其同时具有提高畜禽肉类产品品质的功能,硒可以通过GSH-Px防止脂质过氧化的发生,保护细胞膜结构的完整性和功能的正常,减少细胞的损伤,从而阻止肌肉细胞液的外流,从而改善畜禽肉类的品质。
但是饲料原料中存在着大量杂菌包括多种细菌、大肠杆菌和霉菌等,其数量和饲料原料的新鲜度有关,菌量级别从千级到千万级,在发酵过程中杂菌生长必然会带来大量次级代谢产物。动物采食含大量杂菌及其代谢产物的发酵饲料就极易出现腹泻等肠道健康问题,安全隐患较大。
发明内容
1.要解决的技术问题
本发明的目的是为了解决现有技术中动物采食含大量杂菌及其代谢产物的发酵饲料就极易出现腹泻等肠道健康问题,安全隐患较大的问题,而提出的一种生物发酵富硒饲料及其制备方法。
2.技术方案
为了实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:
一种生物发酵富硒饲料,包括如下质量份的组分:新鲜玉米45-55%、秸秆10-20%、豆粕8-15%、麸皮5-10%和复合微生物菌剂0.5-1%。
优选地,包括如下质量份的组分:新鲜玉米45%、秸秆20%、豆粕8%、麸皮5%和复合微生物菌剂0.5%。
优选地,包括如下质量份的组分:新鲜玉米55%、秸秆10%、豆粕15%、麸皮5%和复合微生物菌剂1%。
优选地,包括如下质量份的组分:新鲜玉米50%、秸秆15%、豆粕12%、麸皮7%和复合微生物菌剂0.7%。
本发明还提出了一种生物发酵富硒饲料的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:将新鲜玉米和秸秆一同放入粉碎机粉碎,长度约为2.0-2.2mm;与豆粕和麸皮按比例混合均匀后得到农作物秸秆细化料;
步骤2:将复合微生物菌剂按细化料总重量的0.5-1%的比例添加并混合均匀,再调节水分使饲料中水分含量为60-70%;
步骤3:将步骤2得到的发酵物料放置于密闭环境发酵25-30d,即得到生物发酵富硒饲料。
优选地,所述复合微生物菌剂包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YSJ-21、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)JS-7、发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)DF-8、屎肠球菌(Enterococcus Faecium)GY-7和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)BM-6。
本发明还提出了复合微生物菌剂,所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YSJ-21,于2020年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No:20630;
所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)JS-7,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31252;
所述发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)DF-8,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31249;
所述屎肠球菌(Enterococcus Faecium)GY-7,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31227;
所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM-6,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:30234。
本发明还提出了复合微生物菌剂的制备方法,包括以下步骤:
S1:微生物斜面种子的制备:将酿酒酵母YSJ-21接种于YEPD固体斜面培养基,30℃恒温培养36h后,即为种子斜面;将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7接种于MRS固体斜面培养基,37℃恒温培养48h后,将枯草芽孢杆菌BM-6接种于细菌固体斜面培养基,30℃恒温培养36h后,即为种子斜面;
S2:微生物液体种子的培养:将酿酒酵母YSJ-21接种于YEPD液体培养基,在温度为30℃,转速为200r/min震荡培养36h后,即为液体种子;将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7分别接种于MRS液体培养基,在温度为37℃,转速为200r/min震荡培养48h后,即为液体种子;将枯草芽孢杆菌BM-6接种于细菌液体培养基,在温度为30℃,转速为200r/min震荡培养36h后,即为液体种子;
S3:菌株液体扩大培养:将酿酒酵母YSJ-21接种于50L发酵罐中,培养基为YEPD液体培养基,接种量为10%,在温度为30℃,转速为200r/min培养6-8h时加入亚硒酸钠,使Se2+含量为15mg/L,继续培养30h,收集发酵液离心后取菌体生物量,用PBS缓冲液重悬酵母菌体,直至菌液中有效活菌数为5×106CFU/mL,即为酿酒酵母YSJ-21微生物菌剂;
S4:微生物制剂的制备:将S3中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1:1:1:1:1混合均匀,即得到生物发酵富硒饲料复合微生物菌剂。
优选地,所述YEPD固体斜面培养基:葡萄糖20g、蛋白胨20g、酵母浸粉10g、琼脂粉20g、蒸馏水1000mL,pH自然,121℃高压灭菌20min;
优选地,所述MRS固体斜面培养基为:酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母粉5g、葡萄糖5g、乙酸钠5g、柠檬酸二铵2g、Tween 801g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g、碳酸钙20g、琼脂20g、蒸馏水1000mL,pH6.8,在121℃高压蒸汽灭菌20min;
优选地,所述细菌固体斜面培养基为:胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂20g、蒸馏水1000mL、pH至7.0,在121℃高压蒸汽灭菌20min。
优选地,所述步骤3中将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7分别接种于50L发酵罐中,培养基为MRS液体培养基,接种量为10%,在温度为37℃,转速为200r/min培养48h,直至植物乳杆菌JS-7菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL,发酵乳杆菌DF-8菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL,屎肠球菌GY-7菌液中有效活菌数为4×108CFU/mL;将枯草芽孢杆菌BM-6接种于50L发酵罐中,培养基为细菌液体培养基,接种量为10%,在温度为30℃,转速为200r/min培养36h,直至枯草芽孢杆菌BM-6菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL;所述YEPD培养基、MRS培养基和细菌培养基与S2相同。
3.有益效果
相比于现有技术,本发明的优点在于:
(1)本发明中,采用复合微生物菌剂发酵饲料,不仅提高了饲料发酵速率和饲料适口性,而且通过复合微生物,及其产生的抑菌物质和酸性环境的协同作用,抑制饲料中杂菌和腐败微生物的生长繁殖,调节肠道菌群平衡,提高肠道消化吸收能力,维持动物健康,有效预防动物腹泻和肠道炎症的发生。
(2)本发明中,富硒饲料采用生物发酵制备,具有无抗生无添加剂的特点;该富硒饲料通过多种微生物发酵而成,营养成分高,提高动物采食欲,提升饲料品质;该富硒饲料中富硒酵母将无机硒转化成有机硒,有益于动物对硒的吸收,提高动物的生长性能。
(3)本发明中,生物发酵富硒饲料,其制备工艺简便,提高饲料发酵质量,能有效抑制腐败微生物的生长,保证饲料的品质。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。
实施例1:
一种生物发酵富硒饲料,包括如下质量份的组分:新鲜玉米45-55%、秸秆10-20%、豆粕8-15%、麸皮5-10%和复合微生物菌剂0.5-1%。
本发明中,一种生物发酵富硒饲料的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:将新鲜玉米和秸秆一同放入粉碎机粉碎,长度约为2.0-2.2mm;与豆粕和麸皮按比例混合均匀后得到农作物秸秆细化料;
步骤2:将复合微生物菌剂按细化料总重量的0.5-1%的比例添加并混合均匀,再调节水分使饲料中水分含量为60-70%;
步骤3:将步骤2得到的发酵物料放置于密闭环境发酵25-30d,即得到生物发酵富硒饲料。
本发明中,该富硒饲料的发酵包括两个阶段:第一阶段:酿酒酵母YSJ-21和枯草芽孢杆菌BM-6为好氧菌,在发酵早期大量繁殖,产生大量酶类物质并迅速消耗饲料中的氧气,微生物的活动还可以提高饲料的温度,从而抑制其它好氧腐败微生物的生长繁殖;另外,酿酒酵母经过富硒处理后,其菌体不仅含有易于动物吸收的硒代氨基酸,而且酿酒酵母生长过程中产生芳香类物质,增加饲料的芳香味,提高动物采食欲。第二阶段:植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7在无氧环境中迅速生长繁殖成为优势菌群,达到迅速降低pH值,抑制腐败微生物的生长繁殖,保证和提高饲料的营养价值,乳酸菌产生大量的乳酸,进一步提升了饲料的品质。
本发明中,复合微生物菌剂包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YSJ-21、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)JS-7、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)DF-8、屎肠球菌(Enterococcus Faecium)GY-7和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM-6。
本发明中,复合微生物菌剂,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YSJ-21,于2020年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No:20630;
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)JS-7,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31252;
发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)DF-8,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31249;
屎肠球菌(Enterococcus Faecium)GY-7,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31227;
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM-6,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:30234。
本发明中,采用复合微生物菌剂发酵饲料,不仅提高了饲料发酵速率和饲料适口性,而且通过复合微生物,及其产生的抑菌物质和酸性环境的协同作用,抑制饲料中杂菌和腐败微生物的生长繁殖,调节肠道菌群平衡,提高肠道消化吸收能力,维持动物健康,有效预防动物腹泻和肠道炎症的发生。
本发明中,富硒饲料采用生物发酵制备,具有无抗生无添加剂的特点;该富硒饲料通过多种微生物发酵而成,营养成分高,提高动物采食欲,提升饲料品质;该富硒饲料中富硒酵母将无机硒转化成有机硒,有益于动物对硒的吸收,提高动物的生长性能。
实施例2:
其具有上述实施例的实施内容,其中,对于上述实施例的具体实施方式可参阅上述描述,此处的实施例不作重复详述;而在本申请实施例中,其与上述实施例的区别在于:
一种生物发酵富硒饲料,包括如下质量份的组分:包括如下质量份的组分:新鲜玉米45%、秸秆20%、豆粕8%、麸皮5%和复合微生物菌剂0.5%。
实施例3:
其具有上述实施例的实施内容,其中,对于上述实施例的具体实施方式可参阅上述描述,此处的实施例不作重复详述;而在本申请实施例中,其与上述实施例的区别在于:
一种生物发酵富硒饲料,包括如下质量份的组分:包括如下质量份的组分:新鲜玉米55%、秸秆10%、豆粕15%、麸皮5%和复合微生物菌剂1%。
实施例4:
其具有上述实施例的实施内容,其中,对于上述实施例的具体实施方式可参阅上述描述,此处的实施例不作重复详述;而在本申请实施例中,其与上述实施例的区别在于:
一种生物发酵富硒饲料,包括如下质量份的组分:包括如下质量份的组分:新鲜玉米50%、秸秆15%、豆粕12%、麸皮7%和复合微生物菌剂0.7%。
实施例5:
其具有上述实施例的实施内容,其中,对于上述实施例的具体实施方式可参阅上述描述,此处的实施例不作重复详述;而在本申请实施例中,其与上述实施例的区别在于:
本发明中,复合微生物菌剂的制备方法,包括以下步骤:
S1:微生物斜面种子的制备:将酿酒酵母YSJ-21接种于YEPD固体斜面培养基,30℃恒温培养36h后,即为种子斜面;将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7接种于MRS固体斜面培养基,37℃恒温培养48h后,将枯草芽孢杆菌BM-6接种于细菌固体斜面培养基,30℃恒温培养36h后,即为种子斜面;
S2:微生物液体种子的培养:将酿酒酵母YSJ-21接种于YEPD液体培养基,在温度为30℃,转速为200r/min震荡培养36h后,即为液体种子;将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7分别接种于MRS液体培养基,在温度为37℃,转速为200r/min震荡培养48h后,即为液体种子;将枯草芽孢杆菌BM-6接种于细菌液体培养基,在温度为30℃,转速为200r/min震荡培养36h后,即为液体种子;
本发明中,YEPD固体斜面培养基:葡萄糖20g、蛋白胨20g、酵母浸粉10g、琼脂粉20g、蒸馏水1000mL,pH自然,121℃高压灭菌20min;
MRS固体斜面培养基为:酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母粉5g、葡萄糖5g、乙酸钠5g、柠檬酸二铵2g、Tween 80 1g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g、碳酸钙20g、琼脂20g、蒸馏水1000mL,pH6.8,在121℃高压蒸汽灭菌20min;
细菌固体斜面培养基为:胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂20g、蒸馏水1000mL、pH至7.0,在121℃高压蒸汽灭菌20min;
S3:菌株液体扩大培养:将酿酒酵母YSJ-21接种于50L发酵罐中,培养基为YEPD液体培养基,接种量为10%,在温度为30℃,转速为200r/min培养6-8h时加入亚硒酸钠,使Se2+含量为15mg/L,继续培养30h,收集发酵液离心后取菌体生物量,用PBS缓冲液重悬酵母菌体,直至菌液中有效活菌数为5×106CFU/mL,即为酿酒酵母YSJ-21微生物菌剂;
将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7分别接种于50L发酵罐中,培养基为MRS液体培养基,接种量为10%,在温度为37℃,转速为200r/min培养48h,直至植物乳杆菌JS-7菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL,发酵乳杆菌DF-8菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL,屎肠球菌GY-7菌液中有效活菌数为4×108CFU/mL;将枯草芽孢杆菌BM-6接种于50L发酵罐中,培养基为细菌液体培养基,接种量为10%,在温度为30℃,转速为200r/min培养36h,直至枯草芽孢杆菌BM-6菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL;YEPD培养基、MRS培养基和细菌培养基与S2相同;
S4:微生物制剂的制备:将S3中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1:1:1:1:1混合均匀,即得到生物发酵富硒饲料复合微生物菌剂。
实施例6:
其具有上述实施例的实施内容,其中,对于上述实施例的具体实施方式可参阅上述描述,此处的实施例不作重复详述;而在本申请实施例中,其与上述实施例的区别在于:
发酵饲料中硒含量的测定:采用氢化物原子荧光光谱法测定饲料中硒含量。
(1)硒标准溶液的制备
硒标准中间液(100mg/L):准确吸取1.00mL硒标准溶液(1000mg/L)于10mL容量瓶中,加盐酸溶液(5+95)定容至刻度,混匀。
硒标准使用液(1.00mg/L):准确吸取硒标准中间液(100mg/L)1.00mL于100mL容量瓶中,用盐酸溶液(5+95)定容至刻度,混匀。
硒标准系列溶液:分别准确吸取硒标准使用液(1.00mg/L)0mL、0.500mL、1.00mL、2.00mL和3.00mL于100mL容量瓶中,加入铁氰化钾溶液(100g/L)10mL,用盐酸溶液(5+95)定容至刻度,混匀待测。此硒标准系列溶液的质量浓度分别为0μg/L、5.00μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L和30.0μg/L。
(2)饲料样品制备
将富硒饲料样品烘干,研磨成粉状过筛后备用。
(3)样品消解
称取富硒饲料试样0.5g-3g(精确至0.001g)或准确移取液体试样1.00mL-5.00mL,置于锥形瓶中,加10mL硝酸-高氯酸混合酸(9+1)及几粒玻璃珠,盖上表面皿冷消化过夜。次日于电热板上加热,并及时补加硝酸。当溶液变为清亮无色并伴有白烟产生时,再继续加热至剩余体积为2mL左右,切不可蒸干。冷却,再加5mL盐酸溶液(6mol/L),继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现。冷却后转移至10mL容量瓶中,加入2.5mL铁氰化钾溶液(100g/L),用水定容,混匀待测。同时做试剂空白试验。
(4)样品测定
仪器条件:高压340V;灯电流100mA;原子化温度800℃;炉高8mm;载气流速500mL/min;屏蔽气流速1000mL/min;测量方式标准曲线法;读数方式峰面积;延迟时间1s;读数时间15s;加液时间8s;进样体积2mL。
标准曲线的制作:以盐酸溶液(5+95)为载流,硼氢化钠碱溶液(8g/L)为还原剂,连续用标准系列的零管进样,待读数稳定之后,将标硒标准系列溶液按质量浓度由低到高的顺序分别导入仪器,测定其荧光强度,以质量浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标,制作标准曲线。
饲料样品在与测定标准系列溶液相同的实验条件下,将空白溶液和试样溶液分别导入仪器,测其荧光值强度,与标准系列比较定量。
样品中硒的含量按公式计算:X=(ρ-ρ0)×Vm×1000;
式中:X-试样中硒的含量,单位为毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L);
ρ-试样溶液中硒的质量浓度,单位为微克每升(μg/L);
ρ0-空白溶液中硒的质量浓度,单位为微克每升(μg/L);
V-试样消化液总体积,单位为毫升(mL);
m-试样称样量或移取体积,单位为克或毫升(g或mL);
1000-换算系数。
(5)结果
酿酒酵母具有高效富集微量元素硒的功效,在制备酿酒酵母菌剂过程中添加亚硒酸钠,收集发酵液离心后收集酵母菌体生物量,用PBS缓冲液重悬酵母菌体后,获得富硒酵母微生物菌剂;与植物乳杆菌、发酵乳杆菌、屎肠球菌和枯草芽孢杆菌微生物菌剂按体积比1:1:1:1:1混合均匀后,获得生物发酵富硒饲料复合微生物菌剂。复合微生物菌剂按细化料总重量的0.5-1%的比例添加并混合均匀,调节水分含量,置于密闭环境发酵25-30d,即得到生物发酵富硒饲料。取生物发酵富硒饲料烘干并粉碎过筛,采用氢化物原子荧光光谱法测定饲料中硒含量,结果表明,生物发酵富硒饲料总硒含量为0.177mg/Kg。
试验例:
试验选用16只体重相近、健康状况良好的湖羊断奶羔羊,随机分为2组,每组8只,分别为试验组和对照组。试验组饲喂生物发酵富硒饲料,硒含量0.1 77mg/Kg;对照组饲喂生物发酵饲料,硒含量0mg/Kg,即复合微生物菌剂制备过程中不添加硒,其余饲料制备方法与试验组完全相同。每天06:00和18:00饲喂,自由采食,自由饮水。按养殖场常规程序进行日常消毒和免疫。预试期7天,试验期28天。
试验结果:由表1可知,生物发酵富硒饲料可以提高羔羊生长性能,并且明显提高了血清中硒含量。说明富硒酵母中硒以硒代氨基酸为主,硒代氨基酸在肠道中是主动吸收方式,更易被羔羊吸收。
表1
Figure BDA0003640065900000151
以上,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种生物发酵富硒饲料,其特征在于,包括如下质量份的组分:新鲜玉米45-55%、秸秆10-20%、豆粕8-15%、麸皮5-10%和复合微生物菌剂0.5-1%。
2.根据权利要求1所述的一种生物发酵富硒饲料,其特征在于,包括如下质量份的组分:新鲜玉米45%、秸秆20%、豆粕8%、麸皮5%和复合微生物菌剂0.5%。
3.根据权利要求1所述的一种生物发酵富硒饲料,其特征在于,包括如下质量份的组分:新鲜玉米55%、秸秆10%、豆粕15%、麸皮5%和复合微生物菌剂1%。
4.根据权利要求1所述的一种生物发酵富硒饲料,其特征在于,包括如下质量份的组分:新鲜玉米50%、秸秆15%、豆粕12%、麸皮7%和复合微生物菌剂0.7%。
5.根据权利要求1-4任一所述的一种生物发酵富硒饲料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:将新鲜玉米和秸秆一同放入粉碎机粉碎,长度约为2.0-2.2mm;与豆粕和麸皮按比例混合均匀后得到农作物秸秆细化料;
步骤2:将复合微生物菌剂按细化料总重量的0.5-1%的比例添加并混合均匀,再调节水分使饲料中水分含量为60-70%;
步骤3:将步骤2得到的发酵物料放置于密闭环境发酵25-30d,即得到生物发酵富硒饲料。
6.根据权利要求1-4任一所述的一种生物发酵富硒饲料,其特征在于,所述复合微生物菌剂包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YSJ-21、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)JS-7、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)DF-8、屎肠球菌(EnterococcusFaecium)GY-7和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM-6。
7.根据权利要求6所述的复合微生物菌剂,其特征在于,所述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)YSJ-21,于2020年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No:20630;
所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)JS-7,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31252;
所述发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)DF-8,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31249;
所述屎肠球菌(Enterococcus Faecium)GY-7,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:31227;
所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BM-6,于2021年保存于甘肃省工业微生物菌种保藏中心,保藏编号为:GSICC No:30234。
8.根据权利要求6所述的复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:微生物斜面种子的制备:将酿酒酵母YSJ-21接种于YEPD固体斜面培养基,30℃恒温培养36h后,即为种子斜面;将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7接种于MRS固体斜面培养基,37℃恒温培养48h后,将枯草芽孢杆菌BM-6接种于细菌固体斜面培养基,30℃恒温培养36h后,即为种子斜面;
S2:微生物液体种子的培养:将酿酒酵母YSJ-21接种于YEPD液体培养基,在温度为30℃,转速为200r/min震荡培养36h后,即为液体种子;将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7分别接种于MRS液体培养基,在温度为37℃,转速为200r/min震荡培养48h后,即为液体种子;将枯草芽孢杆菌BM-6接种于细菌液体培养基,在温度为30℃,转速为200r/min震荡培养36h后,即为液体种子;
S3:菌株液体扩大培养:将酿酒酵母YSJ-21接种于50L发酵罐中,培养基为YEPD液体培养基,接种量为10%,在温度为30℃,转速为200r/min培养6-8h时加入亚硒酸钠,使Se2+含量为15mg/L,继续培养30h,收集发酵液离心后取菌体生物量,用PBS缓冲液重悬酵母菌体,直至菌液中有效活菌数为5×106CFU/mL,即为酿酒酵母YSJ-21微生物菌剂;
S4:微生物制剂的制备:将S3中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1:1:1:1:1混合均匀,即得到生物发酵富硒饲料复合微生物菌剂。
9.根据权利要求8所述的复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述YEPD固体斜面培养基:葡萄糖20g、蛋白胨20g、酵母浸粉10g、琼脂粉20g、蒸馏水1000mL,pH自然,121℃高压灭菌20min;
所述MRS固体斜面培养基为:酪蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母粉5g、葡萄糖5g、乙酸钠5g、柠檬酸二铵2g、Tween 80 1g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g、碳酸钙20g、琼脂20g、蒸馏水1000mL,pH6.8,在121℃高压蒸汽灭菌20min;
所述细菌固体斜面培养基为:胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂20g、蒸馏水1000mL、pH至7.0,在121℃高压蒸汽灭菌20min。
10.根据权利要求8所述的复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述步骤3中将植物乳杆菌JS-7,发酵乳杆菌DF-8和屎肠球菌GY-7分别接种于50L发酵罐中,培养基为MRS液体培养基,接种量为10%,在温度为37℃,转速为200r/min培养48h,直至植物乳杆菌JS-7菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL,发酵乳杆菌DF-8菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL,屎肠球菌GY-7菌液中有效活菌数为4×108CFU/mL;将枯草芽孢杆菌BM-6接种于50L发酵罐中,培养基为细菌液体培养基,接种量为10%,在温度为30℃,转速为200r/min培养36h,直至枯草芽孢杆菌BM-6菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL;所述YEPD培养基、MRS培养基和细菌培养基与S2相同。
CN202210516994.7A 2022-05-12 2022-05-12 一种生物发酵富硒饲料及其制备方法 Pending CN114886008A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210516994.7A CN114886008A (zh) 2022-05-12 2022-05-12 一种生物发酵富硒饲料及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210516994.7A CN114886008A (zh) 2022-05-12 2022-05-12 一种生物发酵富硒饲料及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114886008A true CN114886008A (zh) 2022-08-12

Family

ID=82722404

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210516994.7A Pending CN114886008A (zh) 2022-05-12 2022-05-12 一种生物发酵富硒饲料及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114886008A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116569989A (zh) * 2023-04-18 2023-08-11 华南理工大学 一种生物有机硒饲料添加剂及其制备方法与应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101791051A (zh) * 2010-03-12 2010-08-04 山西三盟实业发展有限公司 一种复合微生态饲料添加剂的制备方法
CN112244154A (zh) * 2020-09-04 2021-01-22 福建滨海生物科技有限公司 动物微生物饲料生产工艺

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101791051A (zh) * 2010-03-12 2010-08-04 山西三盟实业发展有限公司 一种复合微生态饲料添加剂的制备方法
CN112244154A (zh) * 2020-09-04 2021-01-22 福建滨海生物科技有限公司 动物微生物饲料生产工艺

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116569989A (zh) * 2023-04-18 2023-08-11 华南理工大学 一种生物有机硒饲料添加剂及其制备方法与应用
CN116569989B (zh) * 2023-04-18 2024-04-23 华南理工大学 一种生物有机硒饲料添加剂及其制备方法与应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111363698B (zh) 一种降低发酵饲料霉变及霉菌毒素危害的菌剂与应用
CN108330080B (zh) 一种含有布氏乳杆菌的饲料青贮剂及其制备方法和应用
CN106260504B (zh) 一种利用啤酒酵母泥生产微生物发酵湿饲料的方法
CN110679728A (zh) 一种发酵米糠饲料的制备方法及其应用
CN113774003B (zh) 一种布氏乳杆菌及其在制备低水分发酵饲料中的应用
CN106962594B (zh) 一种富硒发酵豆粕、制备方法及应用
CN107853478B (zh) 一种降低牛甲烷排放的含酶中草药发酵饲料添加剂
CN111534459B (zh) 一株高产淀粉酶的发酵乳杆菌及其在制备发酵饲料中的应用
CN116083262A (zh) 有水产病原菌拮抗特性的植物乳杆菌菌株及其制剂的制备及应用
CN114836342A (zh) 一种乳酸菌gs-3及其在富硒中的应用
CN112961806B (zh) 高产乳酸的凝结芽孢杆菌、生物发酵饲料及其制备方法和应用
CN106387317A (zh) 一种保护猪肝脏的微生物饲料添加剂及其制备方法
CN108277188B (zh) 一种断奶仔猪用复合微生物发酵剂及其应用
CN114304379A (zh) 一种含有复合微生物菌剂的发酵饲料的制备方法
CN114886008A (zh) 一种生物发酵富硒饲料及其制备方法
CN109423466A (zh) 一种复合发酵菌剂及其应用
CN116144555A (zh) 一种拮抗肉鸡肠道损伤的发酵饲料添加剂及其制备方法和应用
CN116478867A (zh) 一种高可溶性蛋白含量的发酵饲料及其制备方法和应用
CN115572691A (zh) 一种含植物乳杆菌的水产发酵剂及其制备方法和应用
CN114190486A (zh) 一种预防和治疗母猪便秘的微生物发酵饲料及母猪养殖方法
CN110897053B (zh) 一种改善蛋鸡鸡蛋品质的驱蝇中药发酵饲料及其制备方法与用途
CN111011632A (zh) 一种可替代抗生素的猪用生物发酵饲料及其制备方法
CN110771723A (zh) 一种木薯渣生物饲料及其发酵方法与应用
CN112899197B (zh) 复合微生物菌剂及其制备和在饲料添加剂中的应用
CN116391793B (zh) 一种微生物发酵饲料的工艺及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20220812