CN108721274B - 牛蒡子苷元在制备治疗慢性萎缩性胃炎药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药领域，涉及牛蒡子苷元的医药用途，具体涉及牛蒡子苷元在制备治疗慢性萎缩性胃炎药物中的用途。研究证明：本发明的牛蒡子苷元能够减轻慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃粘膜上皮的病理变化、显著减轻萎缩，提高血清胃泌素水平；本发明的牛蒡子苷元能够增加腺体厚度，增加腺体数目，降低炎症指数，提高血清胃泌素水平。牛蒡子苷元用于慢性萎缩性胃炎的治疗时，具有疗效确切，毒副作用低的优点，因此具有广阔的应用前景。

Description

牛蒡子苷元在制备治疗慢性萎缩性胃炎药物中的用途

技术领域

本发明涉及牛蒡子苷元在制备治疗慢性萎缩性胃炎药物中的用途，属于医药领域。

背景技术

慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis，CAG)是消化系统常见病与疑难病，是重要的胃癌前疾病(每年的癌变率为0.5％～1％)，病理检查胃粘膜萎缩变薄、腺体成分减少或消失，临床表现为胃脘胀满或胀痛、暖气、嘈杂、食欲不振、消瘦等，属于中医学痞满、嘈杂、胃痛等病证范畴。长期以来均认为慢性萎缩性胃炎的发生是多种因素综合作用的结果，如幽门螺杆菌感染、消化性溃疡，且它还与其活动性改变及反复难愈有关，此外与环境因素、宿主对感染反应性、胆汁反流、自身免疫、遗传、年龄、高盐及低维生素饮食等因素有关。

当前，西医主要采用清除幽门螺旋杆菌(HP)、保护胃粘膜、增强胃动力等治疗处理，然而，西医对慢性萎缩性胃炎的疗效并不理想，还未发现针对该疾病的特效药；而中医药、藏医药可以改善临床症状、减轻粘膜病变，通过增强胃粘膜保护功能而发挥作用，甚至可以阻止CAG癌变的发生，不良反应相对很少，具有巩固疗效、防止复发以及全身调整等综合作用，在慢性萎缩性胃炎的治疗中有明显的优势。因此，从中药、民族药物中开发治疗慢性萎缩性胃炎的药物，显得尤为必要。

牛蒡子为菊科二年生草本植物牛蒡的干燥成熟果实，又名大力子、鼠粘子、恶实等。牛蒡子属于常用中药，中医认为它具有疏散风热、宣肺透疹、利咽散结、解毒消肿之功效，用于风热感冒、咳嗽痰多、麻疹、风疹、咽喉肿痛、痄腮丹毒、痈肿疮毒。西医认为它除了具有利尿、消积、祛痰止泻等药理作用外，还用于便秘、高血压、高胆固醇症的食疗。牛蒡主要含有木质素类化合物，以牛蒡子苷和牛蒡子苷元为主。根据实验研究发现，牛蒡子苷元比牛蒡子苷具有更强的生理活性，牛蒡子苷在体内被分解为牛蒡子苷元而产生众多药理作用。目前，已有文献报道牛蒡子苷元具有如下药理活性：1)抗炎及免疫调节作用；2)抗病毒作用，包括HIV-1与流感病毒；3)诱导肿瘤细胞凋亡的作用；4)肾病及糖尿病、糖尿病并发症治疗作用；5)热休克反应抑制作用；6)神经保护作用；7)扩张血管作用；8)血小板活化因子拮抗作用；9)抗老年痴呆的作用；10)抑制K₊挛缩的作用等。

目前，还未见将牛蒡子苷元治疗慢性萎缩性胃炎的相关报道。

发明内容

本发明人长期致力于牛蒡子苷元的药理活性的研究，近期本发明人经过大量的药理学实验研究意外地发现，牛蒡子苷元在制备预防或治疗慢性萎缩性胃炎药物方面具有意想不到的活性。

本申请的目的之一在于提供一种牛蒡子苷元的新用途，即牛蒡子苷元在制备预防或治疗慢性萎缩性胃炎药物中的应用。

上述所述的医药用途中，牛蒡子苷元可以制备成合适的药物剂型口服给药或注射给药，其适用对象可以为人或其他恒温动物。当适用对象为人时，牛蒡子苷元的用量优选为0.001mg/kg·d～50mg/kg·d，进一步优选为0.01mg/kg·d～10mg/kg·d。对于本发明预防或治疗慢性萎缩性胃炎的药物的给药时间和给药次数需要根据病情的具体诊断结果而定，这在本领域技术人员掌握的技术范围之内。例如，将对大鼠预防或治疗慢性萎缩性胃炎的治疗方案应用于人身上，所用药物对人的有效剂量可以通过该药物对大鼠的有效剂量进行换算，这对于本领域的普通技术人员来说是显而易见的。

上述所述的医药用途中，根据动物病情以及用药部位可以将牛蒡子苷元制备成合适的药物制剂以方便用药，如牛蒡子苷元可以开发成口服制剂、舌下含服制剂或注射制剂方便患者的使用，其中所述口服制剂可以为片剂、胶囊剂或微乳制剂，优选为片剂；所述舌下含服制剂为含有牛蒡子苷元并适用舌下给药的药物制剂，优选为其舌下片；所述注射制剂可以为其注射液、注射微乳等，优选为注射液。当牛蒡子苷元制备成注射液时，药物可接受的载体可以为注射用水、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸、甘油、乙醇、丙二醇等。上述所述牛蒡子苷元注射液还可以根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、治疗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等，其中所述增溶剂为聚乙二醇400、吐温-80中的任意一种或两种。

上述药物制剂的制备方法均可采用本领域技术人员制备该种剂型常规使用制备方法制得。上述药物制剂中，每一制剂单位中含有牛蒡子苷元的含量为0.001mg～50mg。

与现有技术相比，本发明的优势在于：

1、本发明所述的牛蒡子苷元具有显著的预防或治疗慢性萎缩性胃炎的作用。本发明实施例10显示本发明的牛蒡子苷元能够减轻慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃粘膜上皮的病理变化、显著减轻萎缩，提高血清胃泌素水平。本发明实施例11显示本发明的牛蒡子苷元能够增加腺体厚度，增加腺体数目，降低炎症指数，提高血清胃泌素水平。

2、本发明所述牛蒡子苷元是从传统中药牛蒡子中提取得到的天然中药单体，其对人体毒副作用低，可以显著提高患者的用药安全性和用药依从性，进而大幅度改善了慢性萎缩性胃炎患者的治疗效果和生活质量，为临床用药提供了新的选择。

具体实施例

以下通过具体实施例进一步描述本发明，但本发明并不仅仅限于以下实施例，任何形式的等同替换对本领域普通技术人员来说都是显而易见且包含在本发明之中的。

实施例1牛蒡子苷元注射剂

制备工艺：将处方量的PEG-400与乙醇混合，加入牛蒡子苷元，搅拌溶解后加入0.9％氯化钠溶液至10000ml，搅拌均匀，加入0.5％针用活性炭搅拌脱炭后分装即得。

实施例2牛蒡子苷元注射剂

制备工艺：将处方量的乙醇和吐温-80混合均匀，加入牛蒡子苷元，搅拌溶解，加入注射用水至10000ml，搅拌均匀，加入0.5％针用活性炭搅拌脱炭后分装即得。

实施例3牛蒡子苷元注射剂

制备工艺：将处方量的丙二醇和乙醇混合均匀，加入牛蒡子苷元，搅拌溶解，加入处方量的0.9％氯化钠溶液，搅拌均匀，加入0.5％针用活性炭搅拌脱炭后分装即得。

实施例4牛蒡子苷元片剂

制备工艺：牛蒡子苷元溶解在二乙二醇单乙基醚中，加入羟丙基纤维素，搅拌使溶解，再加入处方量的硅藻土吸附，然后和乳糖、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁混合均匀，采用直接压片工艺压制而成。

实施例5牛蒡子苷元片剂

制备工艺：上述组分烘干、粉碎过筛预处理后混匀直接压片制得。

实施例6牛蒡子苷元片剂

制备工艺：将主药及各辅料成分烘干、粉碎过筛预处理，将主药与糖分、乳糖、羧甲基纤维素钠混匀，以纯水作为粘合剂将混匀的物料制备软材，过20目筛制粒并于60℃下干燥制备干颗粒，将硬脂酸镁加入到上述干颗粒总混，压片即得。

实施例7牛蒡子苷元片剂

制备工艺:将牛蒡子苷元和辅料微晶纤维素、羧甲基淀粉钠混合均匀，加入适量的淀粉浆制软材，然后过16目筛制粒。湿颗粒在60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，筛出干粒中的细粉，与硬脂酸镁混匀，然后再与干颗粒混匀，压片，每片约200mg，即得。

实施例8微乳浓缩物

制备工艺：称取处方量中链脂肪酸甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油EL-40、1，2-丙二醇、无水乙醇，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡子苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡子苷元微乳浓缩物。上述微乳浓缩物可进一步稀释用于注射或口服。实施例9微乳浓缩物

制备工艺：称取处方量PEG-2-硬脂酸酯、吐温-20、1-己醇、PEG3350混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡子苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡子苷元微乳浓缩物。上述微乳浓缩物可进一步稀释用于注射或口服。

实施例10牛蒡子苷元对慢性萎缩性胃炎大鼠作用的研究

1、实验分组及方法：大鼠72只，实验室饲养3天后开始实验，随机分为6组，其中5组按文献法每日饮用0.02％氨水造大鼠慢性萎缩性胃炎模型，另设1空白对照组，仅给同体积的生理盐水。造模型5组分牛蒡子苷元高、低剂量组、牛蒡子苷组、三九胃泰组。各造模组灌胃给予相应药物，空白对照组灌服同体积的生理盐水(2ml/kg体重)。每天1次，连续给药30天。末次给药后1h，大鼠眼眶取血，分离血清，用放免法按试剂盒说明书应用γ计数器测定血清中胃泌素水平。然后处死大鼠，取胃用福尔马林固定，石蜡包埋，切片，HE染色，观察胃粘膜形态学变化。

2.结果：

2.1对大鼠慢性萎缩性胃炎模型胃粘膜上皮细胞萎缩情况的影响

大鼠胃粘膜组织切片观察可见：空白对照组胃粘膜上皮细胞及腺体基本正常，未见上皮细胞萎缩等病理改变，粘膜下层也未见有炎细胞浸润和充血现象均正常；模型组胃粘膜上皮细胞及腺体出现明显萎缩、变性、坏死脱落等病理改变，粘膜上皮明显变薄，粘膜下层均未见充血及炎细胞浸润；三九胃泰组胃粘膜仅在胃粘膜皱折处粘膜上皮细胞出现局灶性萎缩；牛蒡子苷组胃粘膜出现深到粘膜基底部和皱折处较深的粘膜萎缩；牛蒡子苷元高剂量组胃粘膜上皮出现轻度的粘膜浅表处和粘膜皱折处萎缩；牛蒡子苷元低剂量组胃粘膜出现不同程度的粘膜较深处和粘膜皱折处的萎缩。结果见表1

表1牛蒡子苷元对大鼠慢性萎缩性胃炎模型胃粘膜上皮细胞萎缩情况的影响

"-"胃粘膜腺上皮细胞正常未出现萎缩现象，"+"胃粘膜腺上皮细胞呈出局灶性的浅表或皱折处的浅表粘膜萎缩，"++"胃粘膜腺上皮细胞呈现较深层的或皱折处浅表粘膜萎缩，"+++"胃粘膜腺上皮细胞呈现深到基底部和皱折处较深的粘膜萎缩。

上表结果经Ridit检验，与空白对照组比，模型组胃粘膜上皮萎缩，病变显著，说明造大鼠慢性萎缩性胃炎模型成功。与模型组比，牛蒡子苷元高剂量组和三九胃泰组均可显著减轻大鼠胃粘膜上皮的病理变化、显著减轻萎缩(P<0.01)，牛蒡子苷元低剂量组可以明显减轻大鼠胃粘膜上皮病变、明显减轻萎缩(P<0.05)。牛蒡子苷元高、低剂量组减轻大鼠胃粘膜上皮病变、减轻萎缩的效果明显优于牛蒡子苷组(P<0.01，P<0.05)。

2.2对大鼠慢性萎缩性胃炎模型血清胃泌素和胃粘膜匀浆中IL-2水平的影响

结果见表2。

表2牛蒡子苷元对大鼠慢性萎缩性胃炎模型血清胃泌素水平的影响(x±s)

与模型对照组相比，^#p＜0.05，^##p＜0.01；与牛蒡子苷组相比，^&p＜0.05，^&&p＜0.01。

与空白对照组比，模型组血清胃泌素水平显著降低，说明造模型病变成功。与模型组比，牛蒡子苷元高、低剂量组和三九胃泰组均可显著提高血清胃泌素水平(P<0.01)。牛蒡子苷元高、低剂量组提高血清胃泌素水平的效果明显优于牛蒡子苷组(P<0.01，P<0.05)。

实施例11牛蒡子苷元对慢性萎缩性胃炎大鼠作用的研究

1、实验分组及方法：

采用主动免疫+去氧胆酸钠和30％～60％乙醇联合刺激造模，具体方法如下：主动免疫：以6周龄Wistar大鼠，♀♂兼备，体质量180～200g，用同种大鼠的胃黏膜，生理盐水匀浆液，与完全福氏佐剂以1∶1比例配成乳剂，每只大鼠皮下注射0.3mL进行免疫，隔30d再以相同剂量皮下注射1次。去氧胆酸钠、乙醇联合刺激：用去氧胆酸钠和30％～60％乙醇联合刺激，连续3个月，步骤如下：第1个月：每日以20mmol·L^-1去氧胆酸钠水溶液代替自来水自由饮用，同时每10d灌胃60％乙醇1次(2mL·只^-1)；第2，3个月：每日以10mmol·L^-1去氧胆酸钠水溶液及30％乙醇代替自来水自由饮用，每7d轮换1次。

实验造模周期共90d，造模结束后进行病理证实。造模成功后，将造模成功的大鼠随机分为5组，每组12只，分别为牛蒡子苷元高、低剂量组、牛蒡子苷组、胃养舒组及模型对照组(生理盐水10mL·kg^-1)，另取12只正常大鼠作为正常空白对照组(未造模)。

大鼠在造模成功后，按体质量随机分组，各组动物均每日灌胃相应药物1次，实验同时观察并记录各组大鼠的活动，体质量情况。给药6周后，禁食不禁水12h，1％戊巴比妥钠腹腔麻醉，腹主动脉取血，分离血清，用放射免疫法检测血清胃泌素水平；同时取胃组织(标本为全胃，上段留0.5cm食管，下段留1.5cm十二指肠；沿胃大弯剪开，用大头针，塑料板固定)浸于10％中性福尔马林固定。常规病理切片，观察胃黏膜炎症情况、胃黏膜腺体厚度、胃腺体数目等指标。胃黏膜炎症情况用半定量法，即在低倍镜下观察整个胃黏膜，然后在胃窦部取10个视野，参照1994年美国休斯顿提出的胃炎诊断标准，按炎症细胞浸润的程度分为0～3七个级别。具体如下：0级：无炎症；0.5级：镜下观察炎症介于0与1之间；1级：在胃小凹区或固有腺底部可见多个慢性炎细胞浸润；1.5级：镜下观察炎症介于1与2之间；2级：在胃黏膜小凹至黏膜肌层均有较多炎细胞浸润；2.5级：镜下观察炎症介于2与3之间；3级：胃黏膜内可见成堆炎细胞聚集灶。

2.结果：

2.1对慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃粘膜病理组织的影响

与空白对照组大鼠比较，慢性萎缩性胃炎模型大鼠的腺体厚度有明显下降(P<0.05)，腺体数目较正常组有明显下降(P<0.01)，炎症指数较正常组有明显升高(P<0.001)；牛蒡子苷元高、低剂量组和养胃舒组大鼠腺体厚度有明显增加(P<0.05，P<0.01)，腺体数目有明显增加(P<0.05，P<0.01)，炎症指数有明显下降(P<0.05，P<0.01)。由结果可知，牛蒡子苷元对慢性萎缩性胃炎模型大鼠的胃组织有明显的康复作用。牛蒡子苷元高、低剂量组增加腺体厚度，增加腺体数目，降低炎症指数的效果明显优于牛蒡子苷组(P<0.01，P<0.05)。结果见表3。

表3牛蒡子苷元对慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃粘膜固有腺体厚度、腺体数目、炎症指数的影响

与模型对照组相比，^#p＜0.05，^##p＜0.01；与牛蒡子苷组相比，^&p＜0.05，^&&p＜0.01。

空白对照组大鼠胃黏膜上皮细胞排列整齐，无缺损或脱落，腺体形态规则，大小形态基本一致，上皮细胞多呈单层排列，细胞质透明或呈小空泡状，腺上皮与腺管间分界较清楚；模型对照组大鼠胃黏膜萎缩变薄，腺体数量减少，上皮有碎片脱落(糜烂)，间质内有多量急、慢性炎细胞浸润，有些炎细胞成团聚集，毛细血管扩张充血，黏膜肌层增厚，结缔组织及平滑肌组织增生并向黏膜层腺体间伸延。给予牛蒡子苷元后病变略为减轻，黏膜层仍有少量急、慢性炎细胞浸润，黏膜排列规整，腺体、细胞大小、形态一致，无明显变性坏死。。

2.2对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清胃泌素水平的影响

表4牛蒡子苷元对大鼠慢性萎缩性胃炎模型血清胃泌素水平的影响(x±s)

与模型对照组相比，^#p＜0.05，^##p＜0.01；与牛蒡子苷组相比，^&p＜0.05，^&&p＜0.01。

与空白对照组比，模型组血清胃泌素水平显著降低，说明造模型病变成功。与模型组比，牛蒡子苷元高、低剂量组和养胃舒组均可显著提高血清胃泌素水平(P<0.01)。牛蒡子苷元高、低剂量组提高血清胃泌素水平的效果明显优于牛蒡子苷组(P<0.01，P<0.05)。

Claims (8)

1.牛蒡子苷元在制备治疗慢性萎缩性胃炎药物中的用途。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于牛蒡子苷元的人用给药量为0.01mg/kg·d~50mg/kg·d。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于牛蒡子苷元的人用给药量为0.01mg/kg·d~10mg/kg·d。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于牛蒡子苷元制备为其口服制剂或注射制剂。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于所述牛蒡子苷元口服制剂为其片剂、胶囊剂或口服微乳制剂；所述牛蒡子苷元注射制剂为其注射液或注射微乳制剂。

6.如权利要求5所述的用途，其特征在于所述牛蒡子苷元注射制剂由牛蒡子苷元和药用载体组成。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于牛蒡子苷元注射制剂中牛蒡子苷元的含量为0.01mg~50mg。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于所述药用载体为注射用水、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸，甘油、乙醇或丙二醇。