CN108624589B - 环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用 - Google Patents

环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108624589B
CN108624589B CN201810347924.7A CN201810347924A CN108624589B CN 108624589 B CN108624589 B CN 108624589B CN 201810347924 A CN201810347924 A CN 201810347924A CN 108624589 B CN108624589 B CN 108624589B
Authority
CN
China
Prior art keywords
erbb2
circular rna
circ
probe
rna circ
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201810347924.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108624589A (zh
Inventor
张茂雷
赖炳权
罗景燕
吴洁
赵发兰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Forevergen Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Guangzhou Forevergen Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Forevergen Biotechnology Co ltd filed Critical Guangzhou Forevergen Biotechnology Co ltd
Priority to CN201810347924.7A priority Critical patent/CN108624589B/zh
Publication of CN108624589A publication Critical patent/CN108624589A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108624589B publication Critical patent/CN108624589B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1135—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against oncogenes or tumor suppressor genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/50—Physical structure
    • C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
    • C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/178—Oligonucleotides characterized by their use miRNA, siRNA or ncRNA

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种环状RNA circ‑ERBB2及其检测试剂与应用，属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，所述环状RNA circ‑ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生；本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测引物如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示；本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测探针如SEQ ID NO:4所示，所述探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑ERBB2，并以该环状RNA circ‑ERBB2作为分子标志物诊断乳腺癌；本发明还设计针对环状RNA circ‑ERBB2分子的荧光定量检测引物及taqman探针，通过该探针和引物申请人在多个乳腺癌细胞及正常乳腺细胞中检测到了circ‑ERBB2分子的表达情况。

Description

环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用
技术领域
本发明涉及一种环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用，具体涉及一种环状RNA circ-ERBB2、其检测引物和探针以及该环状RNA circ-ERBB2在乳腺癌诊断中的应用，属于生物技术领域。
背景技术
环状RNA(circRNA)是一类在生物体内存在的闭合的环状RNA分子，具有多种生物学特性，而且是客观大量存在的。环状RNA由基因组DNA转录加工后，反向拼接产生的一类新颖的核酸分子。对于环化RNA的具体功能机制尚未明确，但在生物体内可以多层次调控基因的表达，比如：环状RNA可以通过海绵作用吸附miRNA，转录后调控基因表达；环状RNA可以和RNA结合蛋白作用调控基因转录；环状RNA可以和基因组DNA结合调控RNA的剪接；另外环状RNA可以直接作为模板翻译蛋白质发挥重要的生物学作用。
ERBB2基因又叫HER2基因，是一个著名的癌基因，在多种肿瘤细胞及临床病理组织中呈现高表达。人类的ERBB2基因定位于17号染色体长臂上，整个转录本基因组跨越28685bp碱基对，全长转录本包含31个外显子。
然而，现有技术暂无关于环状RNA circ-ERBB2的研究。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种环状RNA circ-ERBB2，所述环状RNA circ-ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，所述环状RNA circ-ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生。
本发明的环状RNA circ-ERBB2是申请人检测环状RNA数据库circbase及设计反向扩增PCR引物，经过大量研究，在乳腺癌细胞系BT474细胞中识别鉴定的一个新型环状RNA分子。环状RNA circ-ERBB2是由ERBB2基因的第3和7外显子首位相接连接而成的环状RNA分子，申请人将其命名为circ-ERBB2，成熟circ-ERBB2序列的长度为676nt。
第二方面，本发明提供了上述环状RNA circ-ERBB2作为分子标志物在制备用于诊断乳腺癌的试剂盒中的应用。
经过研究，申请人发现，本发明的环状RNA circ-ERBB2分子在乳腺癌细胞高表达，由此本发明的环状RNA circ-ERBB2可作为分子标志物用于诊断乳腺癌。并且，本发明环状RNA circ-ERBB2具有闭合的环状结构，不容易受核酸外切酶攻击，在生物体内非常稳定，是理想的分子诊断标志物。
第三方面，本发明提供了上述环状RNA circ-ERBB2的检测试剂在制备用于诊断乳腺癌的试剂盒中的应用。
第四方面，本发明提供了上述环状RNA circ-ERBB2的检测引物，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示引物是用于扩增环状RNA circ-ERBB2对应的cDNA的PCR引物。
第五方面，本发明提供了上述环状RNA circ-ERBB2的检测探针，所探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；所述探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。所述探针是taqman探针，该探针能很好的检测生物体内的circ-ERBB2表达情况，可以为疾病的早期诊断和分类提供新的基因检测方案。
第六方面，本发明提供了上述引物和/或上述探针在制备用于检测环状RNA circ-ERBB2或诊断乳腺癌的试剂盒中的应用，所述环状RNA circ-ERBB2对应的cDNA序列如SEQID NO:1所示，所述环状RNA circ-ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生。第七方面，本发明提供了用于检测环状RNA circ-ERBB2或诊断乳腺癌的试剂盒，所述试剂盒包括上述引物和/或上述探针，所述环状RNA circ-ERBB2对应的cDNA序列如SEQID NO:1所示，所述环状RNA circ-ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生。
作为本发明所述试剂盒的优选实施方式，所述试剂盒还包括RNA提取试剂、逆转录反应体系和RCR反应液。
作为本发明所述试剂盒的优选实施方式，所述试剂盒还包括去基因组DNA反应体系。
作为本发明所述试剂盒的更优选实施方式，所述RNA提取试剂为Trizol试剂。
本发明检测环状RNA circ-ERBB2或诊断乳腺癌的方法包括以下步骤：(1)提取乳腺细胞中的总RNA；(2)用DNA酶除去提取的RNA中残留的基因组DNA；(3)将RNA逆转录成cDNA；(4)采用PCR引物和探针进行荧光定量PCR，检测环状RNA circ-ERBB2分子在乳腺细胞中的表达情况。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ-ERBB2，并以该环状RNA circ-ERBB2作为分子标志物诊断乳腺癌。本发明还设计针对环状RNA circ-ERBB2分子的荧光定量检测引物及taqman探针，通过该探针和引物申请人在多个乳腺癌细胞及正常乳腺细胞中检测到了circ-ERBB2分子的表达情况。本发明的taqman探针检测环状RNA circ-ERBB2的方法能很好的检测生物体内的circ-ERBB2表达情况，可以为疾病的早期诊断和分类提供新的基因检测方案。
附图说明
图1为本发明环状RNA circ-ERBB2的分子定位及形成模式图；
图2为本发明环状RNA circ-ERBB2的DNA测序验证环化接口峰图；
图3为本发明Taqman探针荧光定量PCR检测环状RNA circ-ERBB2在正常乳腺及乳腺癌细胞中表达的结果图。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本发明环状RNA circ-ERBB2的一种实施例，本实施例所述环状RNA circ-ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，所述环状RNA circ-ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7五个外显子反向拼接环化产生，其成熟circ-ERBB2序列的长度为676nt，环状RNA circ-ERBB2的分子定位及形成模式图如图1所示。
实施例2
本实施例设计PCR扩增引物并识别鉴定实施例1所述环状RNA circ-ERBB2在乳腺癌细胞中的客观存在。本实施例识别鉴定的方法包括以下步骤：1.Trizol方法提取乳腺癌细胞中的总RNA；2.用DNA酶除去提取的RNA中残留的基因组DNA：3.将RNA逆转录成cDNA；4.设计反向扩增引物PCR扩增，PCR产物经核酸凝胶电泳后，割胶回收目标条带，然后经过sanger法DNA测序验证环状RNA circ-ERBB2的客观存在的接口。本实施例识别鉴定实施例1所述环状RNA circ-ERBB2在乳腺细胞中客观存在的具体方法如下：
1.RNA提取(Trizol方法)
(1)细胞取100万个左右，加入1ml trizol；
(2)加入200μL氯仿，剧烈振荡10秒，室温静置10min；
(3)4℃下，12,000g离心10min，溶液分为三层，RNA溶解在水相中，转移水相至另一个新的RNase free EP管；
(4)加入1倍体积异丙醇，涡旋充分混匀；
(5)4℃下，12,000g离心15min，离心后管底出现RNA沉淀，弃去上清；
(6)加入1ml 75％乙醇，用手轻轻颠倒，12,000g离心5min，弃去上清；
(7)室温晾干，加入20μL DEPC水溶解沉淀。
2.基因组DNA去除
去除总RNA中的基因组DNA的残留，采用DNA消化酶，具体反应体系和条件如下：
反应液总体积为10μL，如下组分组成：
Figure BDA0001631270710000041
Figure BDA0001631270710000051
反应液中于37℃消化40min后，85℃3min灭活DNA消化酶。
3.RNA逆转录成CDNA
将RNA逆转录成cDNA反应体系和条件如下：
Figure BDA0001631270710000052
反应条件为：37℃10min，42℃20min，85℃5min，4℃2min。
4.设计反向扩增PCR引物扩增circ-ERBB2接口及侧翼序列DNA测序验证
根据circbase数据库中提供部分参考序列，设计识别反向PCR扩增引物，扩增circ-ERBB2的接口及侧翼序列引物序列为：F1:5'GGTATACATTCGGCGCCAGC'(如SEQ ID NO:2所示)，R1:5'CACTTGGTTGTGAGCGATGA 3'(如SEQ ID NO:3所示)；引物扩增环状RNAcirc-ERBB2部分序列的大小为87bp；以BT474乳腺癌细胞系cDNA为模板，PCR扩增环状RNA circ-ERBB2的环化接口两侧的部分序列，经2％浓度核酸琼脂糖电泳分离，PCR产物纯化后经DNA测序验证，结果见图2。结果显示环状RNA circ-ERBB2分子是由ERBB2基因的第3和7外显子首位相接连接而成的环状RNA分子。
实施例3
本实施例选用正常乳腺细胞系MCF10A以及乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7、BT474，采用荧光定量PCR扩增检测环状RNA circ-ERBB分子在个细胞中的表达情况。
本实施例根据实施例1所述环状RNA circ-ERBB2成熟序列设计设计荧光定量PCR的引物及taqman探针，引物序列为：F2:5'CTTCAACCACAGTGGCATCT 3'(如SEQ ID NO:5所示)，R2:5'CCTGCACCTCCTGGATATCA 3'(如SEQ ID NO:6所示)；探针circ-ERBB2-probe序列为：5'FAM-CCTGGTCACCTACAACACAGACA-TAMRA 3'(如SEQ ID NO:4所示)，扩增环状circ-ERBB2环化接口区域序列的大小为150bp。
荧光定量PCR扩增检测环状RNA circ-ERBB2分子在各细胞中表达情况的方法为：按照实施例2所述方法提取乳腺细胞中的总RNA，并用DNA酶除去提取的RNA中残留的基因组DNA，将RNA逆转录成cDNA；最后采用荧光定量PCR扩增进行检测，荧光定量PCR扩增检测环状RNA circ-ERBB2分子在各细胞中的表达情况反应体系及反应条件如下：
Figure BDA0001631270710000061
荧光定量PCR反应条件为：95℃5分钟变性；95℃10秒，60℃35秒；40个循环。
Taqman探针荧光定量PCR检测环状RNA circ-ERBB2在正常乳腺及乳腺癌细胞中的表达结果参见图3(图3中，p<0.001表示的是MCF10A细胞分别与MDA-MB-231、MCF-7、BT474细胞比较的结果)，结果显示本方法检测环状RNA circ-ERBB2分子在乳腺癌细胞高表达，环状RNA circ-ERBB2在强阳性ERBB2的乳腺癌细胞系BT474中表达最高。本发明的荧光定量PCR检测方法能够理想的检测环状RNA circ-ERBB2在生物体中的表达情况。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 广州永诺生物科技有限公司
<120> 环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用
<160> 6
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 676
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 1
gatatccagg aggtgcaggg ctacgtgctc atcgctcaca accaagtgag gcaggtccca 60
ctgcagaggc tgcggattgt gcgaggcacc cagctctttg aggacaacta tgccctggcc 120
gtgctagaca atggagaccc gctgaacaat accacccctg tcacaggggc ctccccagga 180
ggcctgcggg agctgcagct tcgaagcctc acagagatct tgaaaggagg ggtcttgatc 240
cagcggaacc cccagctctg ctaccaggac acgattttgt ggaaggacat cttccacaag 300
aacaaccagc tggctctcac actgatagac accaaccgct ctcgggcctg ccacccctgt 360
tctccgatgt gtaagggctc ccgctgctgg ggagagagtt ctgaggattg tcagagcctg 420
acgcgcactg tctgtgccgg tggctgtgcc cgctgcaagg ggccactgcc cactgactgc 480
tgccatgagc agtgtgctgc cggctgcacg ggccccaagc actctgactg cctggcctgc 540
ctccacttca accacagtgg catctgtgag ctgcactgcc cagccctggt cacctacaac 600
acagacacgt ttgagtccat gcccaatccc gagggccggt atacattcgg cgccagctgt 660
gtgactgcct gtccct 676
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
ggtatacatt cggcgccagc 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
cacttggttg tgagcgatga 20
<210> 4
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
cctggtcacc tacaacacag aca 23
<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
cttcaaccac agtggcatct 20
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
cctgcacctc ctggatatca 20

Claims (4)

1.一种用于检测环状RNA circ-ERBB2的试剂在制备乳腺癌诊断的试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂包括环状RNA circ-ERBB2的检测引物和检测探针，
所述环状RNA circ-ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，所述环状RNA circ-ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生；
所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示；
所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；所述探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，还包括RNA提取试剂、逆转录反应体系和RCR反应液。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，还包括去基因组DNA反应体系。
4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述RNA提取试剂为Trizol试剂。
CN201810347924.7A 2018-04-17 2018-04-17 环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用 Active CN108624589B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810347924.7A CN108624589B (zh) 2018-04-17 2018-04-17 环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810347924.7A CN108624589B (zh) 2018-04-17 2018-04-17 环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108624589A CN108624589A (zh) 2018-10-09
CN108624589B true CN108624589B (zh) 2021-12-17

Family

ID=63705514

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810347924.7A Active CN108624589B (zh) 2018-04-17 2018-04-17 环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108624589B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109371030A (zh) * 2018-12-11 2019-02-22 宁夏医科大学总医院 一种环状RNA hsa-circ-0131864及其特异性扩增引物和应用
CN113699221B (zh) * 2021-10-19 2023-10-10 广州吉赛医疗科技有限公司 HER2 mRNA及环状RNA多重荧光定量PCR检测引物探针及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1183117A (zh) * 1995-03-31 1998-05-27 华盛顿大学 用于预防或治疗恶性肿瘤的HER－2/neu蛋白胞内区
WO2012050975A2 (en) * 2010-09-29 2012-04-19 The University Of North Carolina At Chapel Hill Novel circular mammalian rna molecules and uses thereof
CN105256014A (zh) * 2015-09-29 2016-01-20 王义明 乳腺癌联合诊断标志物及检测试剂盒
CN107686861A (zh) * 2017-09-26 2018-02-13 中国人民解放军第四军医大学 Erbb2‑r113q突变基因用于制备评判乳腺癌遗传易感性试剂盒的应用
CN108384785A (zh) * 2018-04-17 2018-08-10 广州永诺生物科技有限公司 环状RNA circ-GPC3及其检测试剂与应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101230390A (zh) * 2007-12-07 2008-07-30 湖北大学 一种用于妇科恶性肿瘤早期筛选的基因芯片及其检测方法
CN102399772B (zh) * 2010-09-15 2013-08-14 中山大学达安基因股份有限公司 乳腺癌分子标志物相关探针的制备方法及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1183117A (zh) * 1995-03-31 1998-05-27 华盛顿大学 用于预防或治疗恶性肿瘤的HER－2/neu蛋白胞内区
WO2012050975A2 (en) * 2010-09-29 2012-04-19 The University Of North Carolina At Chapel Hill Novel circular mammalian rna molecules and uses thereof
CN105256014A (zh) * 2015-09-29 2016-01-20 王义明 乳腺癌联合诊断标志物及检测试剂盒
CN107686861A (zh) * 2017-09-26 2018-02-13 中国人民解放军第四军医大学 Erbb2‑r113q突变基因用于制备评判乳腺癌遗传易感性试剂盒的应用
CN108384785A (zh) * 2018-04-17 2018-08-10 广州永诺生物科技有限公司 环状RNA circ-GPC3及其检测试剂与应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
circular RNA candidates (hsa_circ_0007766);rybak等;《CircBase》;20150303;第1-2页 *
Circular RNAs and their associations with breast cancer subtypes;Asha A. Nair等;《Oncotarget》;20161105;第7卷(第49期);摘要、第80968页左栏、第80969-80971页、表2 *
rybak等.circular RNA candidates (hsa_circ_0007766).《CircBase》.2015,第1-2页. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN108624589A (zh) 2018-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2020133233A1 (zh) 一种成骨发育不全疾病的致病突变及其检测试剂
CN109609635B (zh) 多基因富集的探针库及与多种肿瘤治疗相关的多个基因的检测方法
CN105368930B (zh) 测序基因分型技术中测序酶切组合的确定方法
CN110679548B (zh) 一种自闭症小鼠模型的构建方法
CN105734679B (zh) 核酸靶序列捕获测序文库的制备方法
CN110643680B (zh) 适用于超微量dna测序的接头及其应用
CN108624589B (zh) 环状RNA circ-ERBB2及其检测试剂与应用
CN113584079A (zh) 一种应用于钙离子成像的斑马鱼心脏特异标记品系的建立
CN108315444A (zh) 一种鉴别绿壳蛋鸡基因型的多重pcr引物及鉴别方法
CN108384785B (zh) 环状RNA circ-GPC3及其检测试剂与应用
CN107177676B (zh) 长链非编码rna nonhsat113026用于肾癌诊断分子标志物的用途
CN106337058B (zh) Cryl1-ift88融合基因及其在原发性肝细胞癌诊断和治疗中的应用
CN112342214A (zh) 一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法
CN113980968B (zh) 一种新的ra标志长链非编码rna及其应用
CN114277031A (zh) hsa_circ_0006420环状RNA及其在胶质瘤诊断、预后评估中的应用
CN110438245B (zh) 文蛤的snp标记及其应用
CN111304322B (zh) 四个novel circRNA联合检测食管癌的试剂盒的制备方法
CN112210607B (zh) 与水牛白毛色表型相关的分子标记及应用
CN112553301A (zh) 一种小鼠dna的鉴定方法
CN112094860A (zh) 一种ctcf-eto2血液病的融合基因及其检测引物和应用
CN110016506A (zh) Adipor1基因在肝癌sbrt疗效评估中的应用
CN202658155U (zh) 鸡肉品质性状相关基因—Akirin2基因SNP分型试剂盒
CN111139295B (zh) 一种与非综合征型多生牙诊断相关的snp标志物及其应用
CN109517822B (zh) 人体组织/细胞标本环状RNA的内参基因hsa_circ_0000471及其应用
CN107475367B (zh) 一种评估乳腺癌风险的突变基因及其检测试剂盒

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant