CN108611298B - 一种深海芽孢杆菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 - Google Patents
一种深海芽孢杆菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108611298B CN108611298B CN201810423184.0A CN201810423184A CN108611298B CN 108611298 B CN108611298 B CN 108611298B CN 201810423184 A CN201810423184 A CN 201810423184A CN 108611298 B CN108611298 B CN 108611298B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacillus
- mytilus coruscus
- deep
- juvenile
- inducing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000143233 Mytilus coruscus Species 0.000 title claims abstract description 25
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 title claims abstract description 24
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 title claims abstract description 19
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 7
- 241000194110 Bacillus sp. (in: Bacteria) Species 0.000 claims abstract description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 11
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 7
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 description 7
- 241000237536 Mytilus edulis Species 0.000 description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 5
- 235000020638 mussel Nutrition 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- 241000237525 Mytilidae Species 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 241000237519 Bivalvia Species 0.000 description 1
- DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N acridine orange free base Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3C=C21 DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N benzoquinolinylidene Natural products C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009193 crawling Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
- A01K61/50—Culture of aquatic animals of shellfish
- A01K61/54—Culture of aquatic animals of shellfish of bivalves, e.g. oysters or mussels
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
一种深海芽孢杆菌，保藏编号为：CCTCC M 2018065，分类命名：芽孢杆菌Bacillus sp.。该细菌形成的微生物被膜对厚壳贻贝稚贝的附着具有相对较高的诱导活性。还涉及一种深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及一株深海细菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着方面的应用，具体涉及深海细菌芽孢杆菌(Bacillus sp.29R7-12)的分离、纯化、鉴定和保藏以及其在不同初始细菌密度条件下形成的微生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的影响作用。
背景技术
厚壳贻贝(Mytilus coruscus)，隶属于软体动物门(Mollusca)，双壳纲(Bivalvia)，贻贝目(Mytilodia)，贻贝科(Mytilidae)，是我国重要的海产贝类养殖品种，分布于黄海、渤海和东海沿岸。厚壳贻贝营养价值较高，具有开阔的养殖前景和市场开发潜力。在厚壳贻贝生活史中，浮游生活阶段的后期，眼点幼虫会附着变态成为稚贝，并最终发育为成贝。在稚贝生长为成贝的过程中，当环境发生变化，厚壳贻贝稚贝能够自行切断足丝，开始爬行并重新选择适宜的附着基进行再次附着。厚壳贻贝作为一种重要的海水贝类养殖品种，其苗种主要依靠天然苗种和半人工采苗获得。近年来，渔业资源的过度开发，天然苗种无法满足厚壳贻贝养殖产业的发展。因此，解决种苗问题、探索利用细菌形成微生物被膜诱导厚壳贻贝附着技术等生物工程技术显得尤为必要。
发明内容
本发明涉及的深海芽孢杆菌(Bacillus sp.29R7-12)来源于下北半岛附近海域大洋沉积物(E 142.20°，N 41.18°)，海拔-1180米。利用ZoBell 2216E固体培养基分离、纯化得到纯种菌落，并通过16S rRNA基因测序与GENEBANK(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中核酸数据进行比对后上传至NCBI数据库。最终确定菌名为芽孢杆菌，获取序列号为MG252257，该细菌保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2018年1月29日，保藏号为CCTCC M 2018065。
还涉及一种上述深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用。
进一步地，将纯种的芽孢杆菌菌株接到海水2216E液体培养基中扩大培养，离心后得到细菌沉淀，用灭菌海水洗涤并制成悬浮液，制得深海芽孢杆菌的菌液初始细菌密度为1-500×106cells/ml。
该细菌形成的微生物被膜对厚壳贻贝稚贝的附着具有相对较高的诱导活性。
附图说明
图1为不同初始细菌密度形成的微生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的诱导作用
具体实施方式
下面通过对最优实施例的描述，对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。
菌株的分离及保藏：
本发明涉及的深海芽孢杆菌(Bacillus sp.29R7-12)来源于下北半岛附近海域大洋沉积物(E 142.20°，N 41.18°)，海拔-1180米。利用ZoBell 2216E固体培养基分离、纯化得到纯种菌落，并通过16S rRNA基因测序与GENEBANK(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中核酸数据进行比对后上传至NCBI数据库。最终确定菌名为芽孢杆菌，获取序列号为MG252257，该细菌保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2018年1月29日，保藏号为CCTCC M 2018065。
本发明涉及的深海芽孢杆菌对厚壳贻贝稚贝附着的诱导实验。将纯种的芽孢杆菌菌株接到海水2216E液体培养基中扩大培养，离心后得到细菌沉淀，用灭菌海水洗涤并制成悬浮液，重复多次实验。最后将得到的菌液稀释后用吖啶橙染色并在荧光显微镜1000倍镜头下随机选取10个点进行计数，确定菌液总密度为4×109cells/ml。每个培养皿中放入一枚灭菌载玻片，向培养皿中加入灭菌海水及菌液，使细菌初始密度分别为1.0×106cells/ml、1.0×107cells/ml、1.0×108cells/ml和5×108cells/ml。在18℃下避光条件培养48h形成微生物被膜。最后将附有微生物被膜的载玻片及10只厚壳贻贝稚贝(壳长1.31±0.02mm；壳高0.89±0.02mm)放入含有灭菌过滤海水的培养皿中，在12h时记录稚贝的附着率，即载玻片上附着的稚贝个数占该培养皿中稚贝总个数的百分比。
研究发现该细菌形成的微生物被膜具有诱导厚壳贻贝稚贝附着的活性，实验结果如图1所示，不同初始密度条件下形成的微生物被膜对稚贝的诱导活性也有所不同，在初始密度为1×108cells/ml时，形成的微生物被膜对稚贝附着的诱导率为44.4％，初始密度为1.0×106cells/ml时形成的微生物被膜对稚贝的诱导活性仅为33.3％。由此可得，深海细菌Bacillus sp.29R形成的微生物被膜具有诱导稚贝附着的作用，本研究成果对于阐明厚壳贻贝稚贝附着机制以及对厚壳贻贝的人工养殖均具有重要的意义。
上面对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一株深海芽孢杆菌(Bacillus sp.)，其特征在于，保藏编号为：CCTCC NO:M2018065。
2.一种根据权利要求1所述的深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，将纯种的芽孢杆菌菌株接到海水2216E液体培养基中扩大培养，离心后得到细菌沉淀，用灭菌海水洗涤并制成悬浮液，制得深海芽孢杆菌的菌液初始细菌密度为1-500×106cells/ml。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810423184.0A CN108611298B (zh) | 2018-05-05 | 2018-05-05 | 一种深海芽孢杆菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810423184.0A CN108611298B (zh) | 2018-05-05 | 2018-05-05 | 一种深海芽孢杆菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108611298A CN108611298A (zh) | 2018-10-02 |
| CN108611298B true CN108611298B (zh) | 2021-03-23 |
Family
ID=63662139
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810423184.0A Active CN108611298B (zh) | 2018-05-05 | 2018-05-05 | 一种深海芽孢杆菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108611298B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112442467A (zh) * | 2020-12-15 | 2021-03-05 | 上海海洋大学 | 一株深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101429508A (zh) * | 2007-12-13 | 2009-05-13 | 厦门大学 | 一种海洋贻贝粘附蛋白防水生物粘合剂的制备方法 |
| CN102199559A (zh) * | 2011-01-21 | 2011-09-28 | 贵州大学 | 一种枯草芽孢杆菌菌种及其用途 |
| CN103740605A (zh) * | 2013-10-31 | 2014-04-23 | 华南理工大学 | 海水芽孢杆菌及其应用 |
| CN104531560A (zh) * | 2014-12-09 | 2015-04-22 | 上海海洋大学 | 一株海洋希瓦氏细菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 |
| EP2885968A1 (en) * | 2012-08-14 | 2015-06-24 | The Chugoku Electric Power Co., Inc. | Method for stopping attachment-period larvae from swimming or crawling |
| CN106995494A (zh) * | 2016-06-22 | 2017-08-01 | 天津科技大学 | 一种新型抗菌肽Mytichitin‑A在毕赤酵母中的高效制备 |
| CN107647113A (zh) * | 2017-10-13 | 2018-02-02 | 宁波市鄞州区超锐食品科技有限公司 | 促进淡水养殖鱼生长饲料的制备方法 |
| CN107660652A (zh) * | 2017-08-24 | 2018-02-06 | 浦江县协盈动物饲料技术开发有限公司 | 对虾繁殖期强化饲料的制备方法 |
| CN107988105A (zh) * | 2017-12-15 | 2018-05-04 | 中国科学院海洋研究所 | 一种海洋芽孢杆菌及其应用 |
-
2018
- 2018-05-05 CN CN201810423184.0A patent/CN108611298B/zh active Active
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101429508A (zh) * | 2007-12-13 | 2009-05-13 | 厦门大学 | 一种海洋贻贝粘附蛋白防水生物粘合剂的制备方法 |
| CN102199559A (zh) * | 2011-01-21 | 2011-09-28 | 贵州大学 | 一种枯草芽孢杆菌菌种及其用途 |
| EP2885968A1 (en) * | 2012-08-14 | 2015-06-24 | The Chugoku Electric Power Co., Inc. | Method for stopping attachment-period larvae from swimming or crawling |
| CN103740605A (zh) * | 2013-10-31 | 2014-04-23 | 华南理工大学 | 海水芽孢杆菌及其应用 |
| CN104531560A (zh) * | 2014-12-09 | 2015-04-22 | 上海海洋大学 | 一株海洋希瓦氏细菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 |
| CN106995494A (zh) * | 2016-06-22 | 2017-08-01 | 天津科技大学 | 一种新型抗菌肽Mytichitin‑A在毕赤酵母中的高效制备 |
| CN107660652A (zh) * | 2017-08-24 | 2018-02-06 | 浦江县协盈动物饲料技术开发有限公司 | 对虾繁殖期强化饲料的制备方法 |
| CN107647113A (zh) * | 2017-10-13 | 2018-02-02 | 宁波市鄞州区超锐食品科技有限公司 | 促进淡水养殖鱼生长饲料的制备方法 |
| CN107988105A (zh) * | 2017-12-15 | 2018-05-04 | 中国科学院海洋研究所 | 一种海洋芽孢杆菌及其应用 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| Complete Genome Sequence of Bacillus subtilis Strain 29R7-12, a Piezophilic Bacterium Isolated from Coal-Bearing Sediment 2.4 Kilometers below the Seafloor.;Yuli Wei 等;《Genome Announc.》;20170223;第5卷(第8期);第1-2页 * |
| Effects of natural biofilms on settlement of plantigrades of the mussel Mytilus coruscus;Jin-Long Yang 等;《Aquaculture》;20140116;第228–233页 * |
| Predominance of Viable Spore-Forming Piezophilic Bacteria in High-Pressure Enrichment Cultures from -1.5 to 2.4km-Deep Coal-Bearing Sediments below the Ocean Floor;Jiasong Fang 等;《FrontiersinMicrobiology》;20170206;第8卷;第1-10页 * |
| 不同来源海洋弧菌微生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的影响;黄道芬 等;《水产学报》;20170715;第41卷(第7期);第1140-1147页 * |
| 微生物膜对厚壳贻贝稚贝附着的影响;杨金龙 等;《水产学报》;20130615;第37卷(第6期);第904-909页 * |
| 肠道细菌对厚壳贻贝稚贝附着的作用研究;杨娜 等;《水产科学》;20171115;第41卷(第11期);第45-54页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108611298A (zh) | 2018-10-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Linke et al. | Microhabitat preferences of benthic foraminifera—a static concept or a dynamic adaptation to optimize food acquisition? | |
| CN104531560B (zh) | 一株海洋希瓦氏细菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| Bahnweg et al. | Four new species of Thraustochytrium from Antarctic regions, with notes on the distribution of zoosporic fungi in the Antarctic marine ecosystems | |
| CN109777755A (zh) | 一株暹罗芽孢杆菌dh35及其发酵上清液的应用 | |
| CN108531423B (zh) | 一种深海盐单胞菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| CN106754546A (zh) | 一株溶解甲藻的盐单胞菌菌株及含有其的固定化菌剂 | |
| CN108611298B (zh) | 一种深海芽孢杆菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| Gómez et al. | Morphology and molecular phylogeny of epizoic araphid diatoms on marine zooplankton, including Pseudofalcula hyalina gen. & comb. nov.(Fragilariophyceae, Bacillariophyta) | |
| CN103484412B (zh) | 一株少动鞘氨醇单胞菌 | |
| Lai et al. | Methanofollis aquaemaris sp. nov., a methanogen isolated from an aquaculture fish pond. | |
| Francis | Bryozoan statoblasts | |
| JP5374750B2 (ja) | 難培養性微生物の培養方法 | |
| CN108315280B (zh) | 一种海洋除烃海杆细菌及其在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| CN112458025B (zh) | 一株深海亚硫酸杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| CN112442467A (zh) | 一株深海芽孢杆菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| CN112574913B (zh) | 深海玫瑰变色菌及其在诱导厚壳贻贝附着中的应用 | |
| CN112458024B (zh) | 深海短波单胞菌及其在诱导厚壳贻贝附着中的应用 | |
| CN112574912B (zh) | 一株深海中度嗜盐菌在诱导厚壳贻贝稚贝附着中的应用 | |
| Ahn et al. | Effects of the gem clam Gemma gemma on early post-settlement emigration, growth and survival of the hard clam Mercenaria mercenaria | |
| CN114214204B (zh) | 聚氨酯降解真菌菌株及其分离方法和用途 | |
| CN112456649A (zh) | 一种利用变形虫富集固定水体中微塑料的方法 | |
| CN103404464A (zh) | 一种海水养殖扇贝笼和贝壳上污损生物的生物清除方法 | |
| CN112574914A (zh) | 深海嗜盐单胞菌及其在诱导厚壳贻贝附着中的应用 | |
| US20080102513A1 (en) | Methods and mediums for cultivating dinophysis acuminata | |
| CN116711659B (zh) | 假交替单胞菌在促进珊瑚幼虫高产生物膜和诱导珊瑚幼虫附着生长中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |