CN108484343A - 一种薏米多酚提取物及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及薏米多酚制备技术领域，具体涉及一种薏米多酚提取物及制备方法，所述薏米多酚提取物包括N1‑N5‑双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸，所述制备方法包括菌体培养物的制备、薏米粗粉的制备和薏米多酚提取物的制备；本发明通过根霉C‑24促使薏米中的脂肪酸和多糖转化为可溶于水的化合物并离心除去，并使用超声微波协同乙醇溶液提取工艺优化薏米多酚提取物的制备效果，最大限度使多酚类物质溶出，提高制备的效率，提取完成后，调节溶剂的pH，通过等电点沉淀法除去溶于溶剂中的小分子蛋白质，减少薏米多酚提取物中蛋白质的残留；本发明提高有效成分化合物的提取效率，过程简单易于操作，解决薏米多酚提取得率低、杂质多的问题。
Description
技术领域
本发明涉及薏米多酚制备技术领域，具体涉及一种薏米多酚提取物及制备方法。
背景技术
薏米是未本科植物薏苡的干燥成熟种仁，又名薏苡仁、薏仁。薏米主产福建、江苏、河北、辽宁、广西、贵州等地，自然资源十分丰富。薏米主要适合在温暖湿润的气候下生长，分布在海拔的丘陵地带，多数在河边、溪水边生长，对土壤无特殊要求。薏米是是一种珍贵的滋补食品，是各种营养均衡丰富的药食兼用谷物，其营养价值和保健价值远超其它谷物，被誉为“世界禾本科植物之王”。由于独特的保健价值，使其成为当前食品领域研究和开发的热点。植物多酚是植物体内广泛分布的重要次生代谢产物，具有抗氧化、抗肿瘤等生理功能，对植物多酚进行深入的研究具有重要社会意义和经济效益。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种薏米多酚提取物及制备方法，提高有效成分化合物的提取效率，过程简单易于操作。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
一种薏米多酚提取物，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸，所述N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺占薏米多酚提取物的质量分数大于1.20％
进一步的，所述香豆酸占薏米多酚提取物的质量分数大于4.62％，所述阿魏酸占薏米多酚提取物的质量分数大于4.10％。
进一步的，所述香草酸占薏米多酚提取物的质量分数大于3.00％。
上述薏米多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化2-3h，再50-60℃振荡转化6-8h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至0-5℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉；
(3)向薏米粗粉中加入乙醇溶液，常温浸提1h后，继续35-40℃超声提取30-40min，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
进一步的，所述步骤(1)中玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3。
进一步的，所述步骤(2)中薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：15。
进一步的，所述步骤(3)中薏米粗粉与乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：10-15，所述超声的功率是500W。
进一步的，所述乙醇溶液的质量分数是50-60％。
由于采用上述的技术方案，本发明的有益如下：
本发明首先通过根霉C-24促使薏米中的脂肪酸和多糖转化为可溶于水的化合物并离心除去，减少薏米多酚提取物中脂肪酸的残留；然后使用超声微波协同合适的溶剂提取工艺优化薏米多酚提取物的制备效果，不仅最大限度使多酚类物质溶出，而且缩短提取时间，提高制备的效率。超声波空化时产生的压力提高细胞壁的通透性，加快细胞内成分的释放并溶解在溶剂中，提高活性成分的溶解效率，50-60％乙醇浓度使得蛋白质等生物大分子不会过早发生变性沉淀反应阻止多酚类物质扩散到提取溶剂中，提高多酚类物质的得率，缩短了提取时间，工艺简单可行，对环境无不良性影响。提取完成后，调节溶剂的pH，通过等电点沉淀法除去溶于溶剂中的小分子蛋白质，减少薏米多酚提取物中蛋白质的残留。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种薏米多酚提取物，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸。
上述薏米多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化2h，再60℃振荡转化6h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至0℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉，其中，薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：5；
(3)向薏米粗粉中加入50％的乙醇溶液，薏米粗粉与50％的乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：10，常温浸提1h后，继续35℃超声提取30min，超声的功率是500W，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
实施例2：
一种薏米多酚提取物，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸。
上述薏米多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化3h，再50℃振荡转化6h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至4℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉，其中，薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：5；
(3)向薏米粗粉中加入55％的乙醇溶液，薏米粗粉与50％的乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：15，常温浸提1h后，继续40℃超声提取30min，超声的功率是500W，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
实施例3：
一种薏米多酚提取物，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸。
上述薏米多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化2h，再60℃振荡转化8h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至5℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉，其中，薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：5；
(3)向薏米粗粉中加入50％的乙醇溶液，薏米粗粉与50％的乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：10，常温浸提1h后，继续35℃超声提取40min，超声的功率是500W，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
实施例4：
一种薏米多酚提取物，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸。
上述薏米多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化3h，再55℃振荡转化6h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至0℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉，其中，薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：5；
(3)向薏米粗粉中加入60％的乙醇溶液，薏米粗粉与50％的乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：12，常温浸提1h后，继续35℃超声提取30min，超声的功率是500W，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
实施例5：
一种薏米多酚提取物，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸。
上述薏米多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化2h，再50℃振荡转化6h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至4℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉，其中，薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：5；
(3)向薏米粗粉中加入50％的乙醇溶液，薏米粗粉与50％的乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：15，常温浸提1h后，继续40℃超声提取30min，超声的功率是500W，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
实施例6：
一种薏米多酚提取物，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸。
上述薏米多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化2h，再60℃振荡转化6h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至5℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉，其中，薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：5；
(3)向薏米粗粉中加入55％的乙醇溶液，薏米粗粉与50％的乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：12，常温浸提1h后，继续35℃超声提取40min，超声的功率是500W，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
以普通回流法为对照(对照组1：50％的乙醇溶液回流1.5h，对照组2：50％的乙醇溶液回流8h，对照组3：60％的乙醇溶液回流8h，对照组4：按照实施例1根霉C-24转化后60％的乙醇溶液回流1.5h)，通过液质联用结合核磁共振的方法测得每种制备方法中薏米多酚提取物的得率(以S1表示，单位mg/100g)以及N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸所占的质量分数(分别以S2、S3、S4、S5表示，单位％)，数据如表1所示：
表1薏米多酚提取物的得率以及N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺
等的质量分数
| S1 | S2 | S3 | S4 | S5 | |
| 对照组1 | 35 | 1.01 | 4.55 | 3.92 | 2.80 |
| 对照组2 | 39 | 0.99 | 4.42 | 3.98 | 2.85 |
| 对照组3 | 39 | 0.99 | 4.44 | 3.90 | 2.87 |
| 对照组4 | 37 | 0.98 | 4.50 | 3.88 | 3.01 |
| 实施例1 | 49 | 1.25 | 4.66 | 4.13 | 3.08 |
| 实施例2 | 49 | 1.25 | 4.66 | 4.11 | 3.06 |
| 实施例3 | 52 | 1.24 | 4.67 | 4.13 | 3.06 |
| 实施例4 | 55 | 1.26 | 4.66 | 4.12 | 3.08 |
| 实施例5 | 52 | 1.25 | 4.64 | 4.13 | 3.06 |
| 实施例6 | 54 | 1.26 | 4.67 | 4.12 | 3.07 |
从表1可见，本发明实施例1-6的薏米多酚提取物的得率以及N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸所占的质量分数稳定，且优于对照组1-4。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (8)
1.一种薏米多酚提取物，其特征在于，包括N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺、香豆酸、阿魏酸和香草酸，所述N1-N5-双(对香豆酰)亚精胺占薏米多酚提取物的质量分数大于1.20％。
2.如权利要求1所述的薏米多酚提取物，其特征在于，所述香豆酸占薏米多酚提取物的质量分数大于4.62％，所述阿魏酸占薏米多酚提取物的质量分数大于4.10％。
3.如权利要求1所述的薏米多酚提取物，其特征在于，所述香草酸占薏米多酚提取物的质量分数大于3.00％。
4.一种如权利要求1-3任一项所述的薏米多酚提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将玉米粉在蒸馏水中分散均匀，调节pH至7.0，灭菌，制得培养基，将根霉C-24接种于培养基上，26℃振荡培养36h后，真空60℃干燥，粉碎过100目筛，制得菌体培养物；
(2)向粉碎的薏米中加入1/3的蒸馏水，薏米分散均匀后再加入菌体培养物，先室温避光静置转化2-3h，再50-60℃振荡转化6-8h，冷却至室温，将剩余2/3的蒸馏水冷却至0-5℃，加入薏米和菌体培养物的混合转化产物，离心取沉淀物，灭菌，制得薏米粗粉；
(3)向薏米粗粉中加入乙醇溶液，常温浸提1h后，继续35-40℃超声提取30-40min，冷却至室温，调节pH至5.0，过滤，浓缩干燥制得薏米多酚提取物。
5.如权利要求4所述的薏米多酚提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中玉米粉与蒸馏水的料液比(g/ml)为4：3。
6.如权利要求4所述的薏米多酚提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中薏米与蒸馏水的料液比(g/ml)为3：15。
7.如权利要求4所述的薏米多酚提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中薏米粗粉与乙醇溶液的料液比(g/ml)为1：10-15，所述超声的功率是500W。
8.如权利要求4所述的薏米多酚提取物的制备方法，其特征在于，所述乙醇溶液的质量分数是50-60％。
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