CN108387671B - 一种筛查保健食品中的非法添加物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明为一种筛查保健食品中的非法添加物的方法，采用高效液相色谱离子阱飞行时间串联质谱对保健食品中的非法添加药物进行了筛查与确认。通过谱库检索、分子式预测、以及多级碎片离子质谱图鉴定，可对已知以及非目标化合物进行检测，并根据碎片离子信息，推断其裂解规律。该方法简单、快速，为“非目标”检测分析，筛查范围广，在不使用标准品或对照品的情况下即可得到准确可靠的结论。适用于食品、药品中减肥类非法添加物以及其他非法添加物的快速筛查与鉴定。

Description

一种筛查保健食品中的非法添加物的方法
技术领域
本发明涉及一种筛查保健食品中的非法添加物的方法，属于食品药品检测技术领域。
背景技术
目前国内外对保健品中非法添加化学物质的检测已有许多的研究报道，主要集中在对已知化合物进行定性和定量分析。分析方法有紫外分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、高效液相-串联质谱法等。保健食品中非法药物添加存在主要的隐患是剂量不明确、配伍关系不确切、药物来源不明、药物杂质不清晰等情况。为筛查的目标选择带来了难度，需要建立灵敏、专属性好的分析方法，对保健食中非法掺入的化学药物进行鉴别检测。高效液相-串联质谱法具有选择性好、抗干扰能力强、灵敏度高等优势，目前在我国滥用药物的定量测定和筛查中已得到广泛应用。但它是一种“目标分析方法”，针对性太强，只能对该方法预设的化合物进行分析。而化学药品种类繁多、数量巨大，不法分子完全还可以寻找限量标准规定之外的其他替代品以逃避法律的监管。因此无法对保健食品中非法添加物进行全面快速筛查，阻碍了保健食品安全监测和预警体系的建立。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种筛查保健食品中的非法添加物的方法。其技术方案如下：
一种筛查保健食品中的非法添加物的方法，包括建立减肥类化合物的名称、对应的分子式、第二级碎片离子、第三级碎片离子、第N级碎片离子的精确分子量，保留时间的高分辨质谱筛查谱库；采用乙腈作溶剂、超声波提取、C18粉末净化进行样品前处理；采用高效液相色谱联合离子阱飞行时间串联质谱进行定性和定量检测；所述的高效液相色谱条件为：色谱柱为安捷伦ZORBAXEclipseAAA柱；流动相体系为A-B，A为0.1%乙酸水溶液，B为乙腈；梯度洗脱程序为0～8min，5%B～20%B；8～26min，20%B～50%B；26～33min，50%B～100%B；100%B保持7min，40～40.1min，100%B～5%B；40.1～45min，5%B，柱温为30℃；进样体积为10μL；检测波长为230nm；所述的离子阱飞行时间串联质谱条件为：离子源为ESI，正负离子同时扫描；扫描范围为MS1m/z150-1000，MS2m/z50-500，MS3m/z50-500；加热模块温度为200℃；CDL温度为200℃；雾化气流速为1.5L/min；干燥气流速为10L/min；离子源电压为正离子模式+4.5kV，负离子模式-3.5kV；检测器电压为1.7kV；质量数校准方法为自动调谐优化电压，外标法校准质量数。
所述减肥类化合物包括比沙可啶、苄氟噻嗪、布美他尼、多虑平、芬氟拉明、呋塞米、氟西汀、甲氯噻嗪、氯噻嗪、氯噻酮、麻黄碱、氢氯噻嗪、去甲麻黄碱、舍曲林、西布曲明、吲达帕胺。
有益效果
本发明采用离子阱飞行时间串联质谱既具备高分辨率和高质量数准确度，又具备多级质谱功能(最多到10级)，能提供未知化合物的结构信息。通过精确质量数的检索匹配及多级特征碎片离子确证，可以快速且方便地对未知化合物实现快速筛查与鉴定。通过自建高分辨质谱筛查谱库，采用离子阱飞行时间串联质谱通过精确质量数的检索匹配对保健食品中非法添加药物实现快速筛查，并使用多级特征碎片离子进行确证。
附图说明
图1为高分辨质谱筛查谱库中16种化合物的分子式、保留时间、精确质量数、主要碎片离子以及胶囊样品中筛查限、平均回收率和精密度图。
图2为样品的总离子流图（A）和多级质谱图（B）的组合图。
具体实施方式
实施例1
1.建立减肥类化合物的名称、对应的分子式、第二级碎片离子、第三级碎片离子、第N级碎片离子的精确分子量，保留时间的高分辨质谱筛查谱库。
2.取市售某减肥胶囊样品，倾出内容物连同胶囊壳一起捣碎，混匀制得样品。
3.采用乙腈作溶剂、超声波提取、C18粉末净化进行样品前处理。
称取1.000g样品置于25mL离心管中，加入15mL乙腈，超声波提取20min，放冷至室温，将样品全部转移至25mL容量瓶中，用10mL乙腈分数次清洗离心管，合并清洗液至容量瓶中，并用乙腈定容至刻度，摇匀后，静置5min。取2mL上清液加入10mgC18粉末（十八烷基键合硅胶吸附剂），充分涡旋后，以18000r/min离心3min，取0.5mL上清液，用流动相稀释至1.0mL，过0.22µm有机微孔滤膜后，供后续上机检测。
4.采用高效液相色谱联合离子阱飞行时间串联质谱进行定性和定量检测。
高效液相色谱条件为：色谱柱为安捷伦ZORBAXEclipseAAA柱；流动相体系为A-B，A为0.1%乙酸水溶液，B为乙腈；梯度洗脱程序为0～8min，5%B～20%B；8～26min，20%B～50%B；26～33min，50%B～100%B；100%B保持7min，40～40.1min，100%B～5%B；40.1～45min，5%B，柱温为30℃；进样体积为10μL；检测波长为230nm；所述的离子阱飞行时间串联质谱条件为：离子源为ESI，正负离子同时扫描；扫描范围为MS1m/z150-1000，MS2m/z50-500，MS3m/z50-500；加热模块温度为200℃；CDL温度为200℃；雾化气流速为1.5L/min；干燥气流速为10L/min；离子源电压为正离子模式+4.5kV，负离子模式-3.5kV；检测器电压为1.7kV；质量数校准方法为自动调谐优化电压，外标法校准质量数。
通过以上4步得到市售某减肥胶囊样品溶液正模式下的离子流图。在23.5min有一个很强的色谱峰，对应的分子离子峰为m/z280.1813、二级碎片离子为m/z235.1248；m/z179.0629、m/z153.0461、m/z139.0314、m/z125.0159，三级碎片离子为m/z103.0543，见图1。根据分子离子峰的精确质量数，采用分子式预测软件预测其对应的分子式，得到C17H26NCl、C12H26N3O2Cl、C2H21N11O5、C18H21N3共4个候选的化合物，其中一种化合物分子式为C17H26NCl，同时由MetIDsolution筛查软件按精确质量数进行自动快速定性筛查，筛查结果为西布曲明。为进一步确证该化合物的存在，将所得的多级高分辨质谱碎片离子，在自建的高分辨质谱筛查谱库中搜索，得到其二级碎片离子与西布曲明的匹配度达到99.4%，且保留时间与西布曲明标准物质的保留时间一致。因而确认该减肥胶囊中含有西布曲明。
根据特征子离子碎片信息推断出该化合物的多级裂解规律，在正电荷中心N+的吸引下，与正电荷中心连接的胺基N—C键断裂，丢失C2H7N，形成m/z为235.1248的中间体，该中间体有三种结构形式：四元环形式以及稳定性更好的五元环和开环结构形式，经分子预测软件可知m/z 179.0629、m/z153.0466、m/z 139.0309和m/z 125.0159，这些碎片离子是由开环结构的中间体分别丢失C4H8、C6H10、C7H12和C8H14得到，m/z 为139.0309的二级碎片离子进一步裂解，丢失HCl得到m/z 为103.0543的碎片离子，这与文献报道的西布曲明裂解规律完全相符，因此进一步确证了保留时间为23.5 min 的化合物为西布曲明。
通过谱库检索、分子式预测、以及多级碎片离子质谱图鉴定，可对已知以及非目标化合物进行检测，并根据碎片离子信息，推断其裂解规律。该方法简单、快速，可以为“非目标物”检测分析，筛查范围广，在不使用标准品或对照品的情况下即可得到准确可靠的结论。适用于食品、药品中减肥类非法添加物以及其他非法添加物的快速筛查与鉴定。

Claims (1)

1.一种筛查保健食品中的非法添加物的方法，其特征在于：包括建立减肥类化合物的名称、对应的分子式、第二级碎片离子、第三级碎片离子、第N级碎片离子的精确分子量，保留时间的高分辨质谱筛查谱库；采用乙腈作溶剂、超声波提取、C18粉末净化进行样品前处理；
称取1.000g样品置于25mL离心管中，加入15mL乙腈，超声波提取20min，放冷至室温，将样品全部转移至25mL容量瓶中，用10mL乙腈分数次清洗离心管，合并清洗液至容量瓶中，并用乙腈定容至刻度，摇匀后，静置5min， 取2mL上清液加入10mgC18粉末，充分涡旋后，以18000r/min离心3min，取0.5mL上清液，用流动相稀释至1.0mL，过0.22µm有机微孔滤膜后，供后续上机检测；
采用高效液相色谱联合离子阱飞行时间串联质谱进行定性和定量检测；所述的高效液相色谱条件为：色谱柱为安捷伦 ZORBAXEclipseAAA 柱；流动相体系为A-B，A为0.1%乙酸水溶液，B为乙腈；梯度洗脱程序为0～8min，5%B～20%B；8～26min，20%B～50%B；26～33min，50%B～100%B；100%B保持7min，40～40.1min，100%B～5%B；40.1～45min，5%B，柱温为30℃；进样体积为10μL；检测波长为230nm；所述的离子阱飞行时间串联质谱条件为：离子源为ESI，正负离子同时扫描；扫描范围为MS1m/z150-1000，MS2m/z50-500，MS3m/z50-500；加热模块温度为200℃；CDL温度为200℃；雾化气流速为1.5L/min；干燥气流速为10L/min；离子源电压为正离子模式+4.5kV，负离子模式-3.5kV；检测器电压为1.7kV；质量数校准方法为自动调谐优化电压，外标法校准质量数；
所述减肥类化合物为西布曲明。
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110907575B (zh) * 2018-09-14 2021-10-08 中国科学院大连化学物理研究所 一种植物中羟基肉桂酸酰胺的深度注释方法
CN109541106A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中呋塞米浓度的方法
CN109738565B (zh) * 2019-01-31 2021-09-24 徐敦明 一种测定保健食品中非法添加化合物的方法
CN110133169A (zh) * 2019-04-16 2019-08-16 天津力生制药股份有限公司 一种采用液质联用检测人血浆中呋塞米的方法及应用
CN111175388B (zh) * 2019-11-18 2022-12-06 远大医药（中国）有限公司 吲达帕胺原料药中dcc含量的测定方法
CN110849995B (zh) * 2019-11-27 2022-12-06 远大医药（中国）有限公司 吲达帕胺原料药中dcu的检测方法
CN110954629A (zh) * 2019-12-24 2020-04-03 南京科宁检测科技有限公司 一种呋塞米中糠胺含量测定的控制方法
CN111289670A (zh) * 2020-01-16 2020-06-16 苏州市药品检验检测研究中心 一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法
CN111208226B (zh) * 2020-01-16 2022-11-01 苏州市药品检验检测研究中心 双去乙酰基比沙可啶和单去乙酰基比沙可啶的检测方法
CN112903890A (zh) * 2021-02-02 2021-06-04 湖北省食品质量安全监督检验研究院 一种基于高分辨质谱技术鉴别食品中中药材成分的方法
CN113307762A (zh) * 2021-03-25 2021-08-27 华南农业大学 一种同时检测减肥类保健食品中三种非法添加物的广谱性抗体的制备和应用
CN113203811A (zh) * 2021-05-06 2021-08-03 无锡市药品安全检验检测中心(无锡市药品检验所) 快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法
CN114002368A (zh) * 2021-12-30 2022-02-01 天津市食品安全检测技术研究院 超高效液相色谱-四级杆-飞行时间高分辨质谱法测定保健食品中非法添加成分的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102901780A (zh) * 2012-10-17 2013-01-30 湖南省食品药品检验研究院 一种在中药、保健食品或化妆品中同时检测七种非法添加减肥类化学成分的方法
CN103323519A (zh) * 2013-06-20 2013-09-25 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法
CN104597165A (zh) * 2015-02-06 2015-05-06 山东省食品药品检验研究院 一种减肥类中成药和保健食品中非法添加物的Q-Orbitrap高分辨质谱检测方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102901780A (zh) * 2012-10-17 2013-01-30 湖南省食品药品检验研究院 一种在中药、保健食品或化妆品中同时检测七种非法添加减肥类化学成分的方法
CN103323519A (zh) * 2013-06-20 2013-09-25 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法
CN104597165A (zh) * 2015-02-06 2015-05-06 山东省食品药品检验研究院 一种减肥类中成药和保健食品中非法添加物的Q-Orbitrap高分辨质谱检测方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
液相色谱-离子阱质谱联用同时检测保健食品中非法添加的10种减肥类化学药物;祝波等;《中国卫生检验杂志》;20091130;第19卷(第11期);第2555～2557页 *
液相色谱-离子阱质谱联用检测减肥类中药及保健食品中28种非法掺加药物的研究;王柯等;《药物分析杂志》;20080831;第28卷(第8期);摘要，第2节，第3.2节，第4节，表1，表2 *
超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法快速筛查及定量分析减肥类保健品中20种非法添加药物;董喆等;《食品安全质量检测学报》;20171031;第8卷(第10期);第4031～4038页 *
高效液相色谱-离子阱飞行时间质谱对保健食品中激素类成分的快速筛查和确证;王美玲等;《色谱》;20121031;第30卷(第10期);摘要，第1.3-1.5节，第2.3节 *

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