CN108354172B - 一种樟芝蘑菇酵素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，包括如下步骤：将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用；将菌菇洗净打浆，胶体磨均质后添加纤维素酶、蛋白酶以及果胶酶在第一酶解温度下酶解第一酶解时间，得到菌菇酶解液；在灭过菌的容器中将菌菇酶解液与浓缩樟芝发酵液混合后接种酿酒酵母BR30以及植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液；将混合发酵液放置于培养箱中在主发酵温度下进行主发酵后静置培养第一静置培养时间，得到主发酵混合液；将主发酵混合液在后发酵温度下进行后发酵后静置培养第二静置培养时间，得到发酵醪液；将发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素。
Description
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种樟芝蘑菇酵素的制备方法。
背景技术
随着现代人生活节奏加快以及老龄化问题不断凸显，高血压、肥胖、肠道功能紊乱等代谢性疾病问题越来越严重。许多学者研究利用植物酵素去缓解代谢性疾病，采用加强膳食纤维、活性多糖以及其他生物活性因子的摄入来疏解。酵素是一种天然的、无添加的保健饮品，一般采用植物性原料，富含低聚糖、黄酮以及皂苷等活性成分，对调节免疫力、治疗便秘等具有一定效果。
樟芝，又名红樟芝，在我国拥有悠久应用历史的食药用菌。樟芝发酵液中富含有活性多糖、超氧化物歧化酶、免疫蛋白等多种功能因子，具有良好的抗氧化、抗炎以及调节免疫的活性。蘑菇富含蛋白质、氨基酸以及膳食纤维，也是良好的功能食品原料。本专利采用樟芝发酵液以及蘑菇酶解产物作为酵素发酵原料，以优良酵母以及益生菌为发酵剂，通过低温长时发酵，使得原料中生物活性因子充分释放，并且在发酵剂作用下产生大量活性多糖(可溶性膳食纤维)、抗氧化酶系以及有机酸，从而增强酵素活性。本专利提供的樟芝蘑菇酵素制备方法，工艺简单，可行性高，能够实现工业化生产。
发明内容
本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一种樟芝蘑菇酵素的制备方法。
本发明提供了一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，具有这样的特征，采用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BR30和植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum)AR495进行发酵，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BR30已于2015年01月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.10378，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)AR495已于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14004，樟芝蘑菇酵素的制备方法包括如下步骤：
步骤1，将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩至一定体积，并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用；
步骤2，将菌菇洗净打浆，胶体磨均质后添加第一质量比的纤维素酶、第二质量比的蛋白酶以及第三质量比的果胶酶在第一酶解温度下酶解第一酶解时间，得到菌菇酶解液；
步骤3，在灭过菌的容器中将菌菇酶解液与浓缩樟芝发酵液按照第一混合比例进行混合，混合后接种第一接种量的酿酒酵母BR30以及第二接种量的植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液；
步骤4，将混合发酵液放置于培养箱中在主发酵温度下进行主发酵，然后静置培养第一静置培养时间，得到主发酵混合液；
步骤5，将主发酵混合液在后发酵温度下进行后发酵，然后静置培养第二静置培养时间，得到发酵醪液；
步骤6，将发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素。
在本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法中，还可以具有这样的特征：其中，步骤1中，樟芝发酵液浓缩后体积为原体积的30-60％。
在本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法中，还可以具有这样的特征：其中，步骤2中，菌菇为猴头菇、灵芝、平菇以及香菇中的一种或多种。
在本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法中，还可以具有这样的特征：其中，步骤2中，第一质量比为0.2-1.5％(m/v)，第二质量比为0.2-1.5％(m/v)，第三质量比为0.2-1.5％(m/v)，第一酶解温度为 30-55℃，第一酶解时间为0.5-4h。
在本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法中，还可以具有这样的特征：其中，步骤3中，第一混合比例为1:2-4:1，第一接种量为1-5％ (v/v)，第二接种量为1-5％(v/v)。
在本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法中，还可以具有这样的特征：其中，步骤4中，主发酵温度为25-32℃，第一静置培养时间为2-5d。
在本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法中，还可以具有这样的特征：其中，步骤5中，后发酵温度为15-22℃，第二静置培养时间为10-30d。
发明的作用与效果
根据本发明所涉及的樟芝蘑菇酵素的制备方法，通过低温真空浓缩，使得樟芝发酵液中活性多糖、免疫蛋白以及超氧化物歧化酶等抗氧化酶系保留完好，同时酶解后的蘑菇会释放出大量活性多肽、膳食纤维以及氨基酸等营养活性成分，并利用高产胞外多糖植物乳杆菌 AR495以及酿酒酵母BR30协同发酵，使得樟芝蘑菇酵素富含活性多糖(可溶性膳食纤维)、抗氧化酶系以及有机酸，显著提升其酵素活性。本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法，工艺简单，可行性高，能够实现工业化生产。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段与功效易于明白了解，以下结合实施例对本发明作具体阐述。
一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，采用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BR30和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)AR495进行发酵，酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)BR30已于2015年01月20 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC No.10378，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)AR495已于2017年04月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，其保藏编号为CGMCCNo.14004，樟芝蘑菇酵素的制备方法包括如下步骤：
步骤1，将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩至一定体积，并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用。
樟芝发酵液浓缩后体积为原体积的30-60％。
步骤2，将菌菇洗净打浆，胶体磨均质后添加第一质量比的纤维素酶、第二质量比的蛋白酶以及第三质量比的果胶酶在第一酶解温度下酶解第一酶解时间，得到菌菇酶解液。
菌菇为猴头菇、灵芝、平菇以及香菇中的一种或多种。
第一质量比为0.2-1.5％(m/v)，第二质量比为0.2-1.5％(m/v)，第三质量比为0.2-1.5％(m/v)，第一酶解温度为30-55℃，第一酶解时间为0.5-4h。
步骤3，在灭过菌的容器中将菌菇酶解液与浓缩樟芝发酵液按照第一混合比例进行混合，混合后接种第一接种量的酿酒酵母BR30以及第二接种量的植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液。
第一混合比例为1:2-4:1，第一接种量为1-5％(v/v)，第二接种量为1-5％(v/v)。
步骤4，将混合发酵液放置于培养箱中在主发酵温度下进行主发酵，然后静置培养第一静置培养时间，得到主发酵混合液。
主发酵温度为25-32℃，第一静置培养时间为2-5d。
步骤5，将主发酵混合液在后发酵温度下进行后发酵，然后静置培养第二静置培养时间，得到发酵醪液。
后发酵温度为15-22℃，第二静置培养时间为10-30d。
步骤6，将发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素。
实施例一：
一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，包括如下步骤：
步骤1，将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩至原体积的30％，并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用；
步骤2，将秀珍菇洗净打浆，胶体磨均质后添加0.2％(m/v)的纤维素酶、0.2％(m/v)的蛋白酶以及0.2％(m/v)的果胶酶在30℃下酶解0.5h，得到秀珍菇酶解液；
步骤3，在灭过菌的容器中将菌菇酶解液与浓缩樟芝发酵液按照 4:1进行混合，混合后接种1％(v/v)的酿酒酵母BR30以及1％(v/v) 的植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液；
步骤4，将混合发酵液放置于培养箱中在25℃下进行主发酵，然后静置培养2d，得到主发酵混合液；
步骤5，将主发酵混合液在25℃下进行后发酵，然后静置培养 10d，得到发酵醪液；
步骤6，将发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素。
根据本实施例的制备方法所得的樟芝蘑菇酵素，具有樟芝芳香，口感清淡，总酸含量为7.74g/L，总抗氧化性为350U/mL，活性多糖含量为740mg/L。
实施例二：
一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，包括如下步骤：
步骤1，将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩至原体积的40％，并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用；
步骤2，将秀珍菇洗净打浆，胶体磨均质后添加1％(m/v)的纤维素酶、1％(m/v)的蛋白酶以及1％(m/v)的果胶酶在45℃下酶解3h，得到秀珍菇酶解液；
步骤3，在灭过菌的容器中将菌菇酶解液与浓缩樟芝发酵液按照1:1进行混合，混合后接种3％(v/v)的酿酒酵母BR30以及3％(v/v) 的植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液；
步骤4，将混合发酵液放置于培养箱中在30℃下进行主发酵，然后静置培养3d，得到主发酵混合液；
步骤5，将主发酵混合液在18℃下进行后发酵，然后静置培养 20d，得到发酵醪液；
步骤6，将发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素。
根据本实施例的制备方法所得的樟芝蘑菇酵素，具有樟芝芳香，口感清淡，总酸含量为12.24g/L，总抗氧化性为670U/mL，活性多糖含量为820mg/L。
实施例三：
一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，包括如下步骤：
步骤1，将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩至原体积的60％，并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用；
步骤2，将秀珍菇洗净打浆，胶体磨均质后添加1.5％(m/v)的纤维素酶、1.5％(m/v)的蛋白酶以及1.5％(m/v)的果胶酶在55℃下酶解4h，得到秀珍菇酶解液；
步骤3，在灭过菌的容器中将菌菇酶解液与浓缩樟芝发酵液按照 1:2进行混合，混合后接种5％(v/v)的酿酒酵母BR30以及5％(v/v) 的植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液；
步骤4，将混合发酵液放置于培养箱中在32℃下进行主发酵，然后静置培养5d，得到主发酵混合液；
步骤5，将主发酵混合液在22℃下进行后发酵，然后静置培养 30d，得到发酵醪液；
步骤6，将发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素。
根据本实施例的制备方法所得的樟芝蘑菇酵素，具有樟芝芳香，口感清淡，总酸含量为14.64g/L，总抗氧化性为520U/mL，活性多糖含量为770mg/L。
实施例四：
步骤1，将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩至原体积的40％，并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用；
步骤2，将猴头菇洗净打浆，胶体磨均质后添加1％(m/v)的纤维素酶、1％(m/v)的蛋白酶以及1％(m/v)的果胶酶在45℃下酶解3h，得到猴头菇酶解液；
步骤3，在灭过菌的容器中将菌菇酶解液与浓缩樟芝发酵液按照 1:1进行混合，混合后接种3％(v/v)的酿酒酵母BR30以及3％(v/v) 的植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液；
步骤4，将混合发酵液放置于培养箱中在30℃下进行主发酵，然后静置培养3d，得到主发酵混合液；
步骤5，将主发酵混合液在18℃下进行后发酵，然后静置培养 20d，得到发酵醪液；
步骤6，将发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素。
根据本实施例的制备方法所得的樟芝蘑菇酵素，具有樟芝芳香，口感清淡，总酸含量为11.85g/L，总抗氧化性为690U/mL，活性多糖含量为830mg/L。
实施例的作用与效果
由实施例1至实施例3可知，随着樟芝发酵液浓缩体积的增加，纤维素酶、蛋白酶和果胶酶质量比的增加，秀珍菇酶解液与浓缩樟芝发酵液的混合比例的增加以及酿酒酵母BR30和植物乳杆菌AR495 接种量的增加，制备得到的樟芝蘑菇酵素具有的樟芝芳香从浓郁到清淡，口感从清淡变为醇厚再变为酸味突出，总酸含量越来越高，总抗氧化性先升高后降低，活性多糖含量先升高后降低，其中，实施例二制备得到的樟芝蘑菇酵素具有浓郁樟芝芳香，口感醇厚，总抗氧化性和活性多糖含量均最高。由实施例二和实施例四可知，在上述实施例的制备条件下制备得到的樟芝蘑菇酵素具有浓郁樟芝芳香，口感醇厚，其中，实施例四采用猴头菇制备得到的樟芝蘑菇酵素总酸含量为 11.85g/L，总抗氧化性为690U/mL，活性多糖含量为830mg/L。
由上述实施例提及的一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，通过低温真空浓缩，使得樟芝发酵液中活性多糖、免疫蛋白以及超氧化物歧化酶等抗氧化酶系保留完好，同时酶解后的蘑菇会释放出大量活性多肽、膳食纤维以及氨基酸等营养活性成分，并利用高产胞外多糖植物乳杆菌AR495以及酿酒酵母BR30协同发酵，使得樟芝蘑菇酵素富含活性多糖(可溶性膳食纤维)、抗氧化酶系以及有机酸，显著提升其酵素活性。本发明提供的樟芝蘑菇酵素的制备方法，工艺简单，可行性高，能够实现工业化生产。
上述实施方式为本发明的优选案例，并不用来限制本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种樟芝蘑菇酵素的制备方法，其特征在于，采用酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)BR30和植物乳杆菌AR495进行发酵，所述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)BR30已保藏于中国普通微生物保藏中心，保藏编号为CGMCC 10378，所述植物乳杆菌AR495已保藏于中国普通微生物保藏中心，保藏编号为CGMCC 14004，所述樟芝蘑菇酵素的制备方法包括如下步骤：
步骤1，将樟芝发酵液在低温真空环境下浓缩至一定体积，并进行巴氏杀菌后，得到杀菌后的浓缩樟芝发酵液备用；
步骤2，将菌菇洗净打浆，胶体磨均质后添加第一质量比的纤维素酶、第二质量比的蛋白酶以及第三质量比的果胶酶在第一酶解温度下酶解第一酶解时间，得到菌菇酶解液；
步骤3，在灭过菌的容器中将所述菌菇酶解液与所述浓缩樟芝发酵液按照第一混合比例进行混合，混合后接种第一接种量的所述酿酒酵母BR30以及第二接种量的所述植物乳杆菌AR495，得到混合发酵液；
步骤4，将所述混合发酵液放置于培养箱中在主发酵温度下进行主发酵，然后静置培养第一静置培养时间，得到主发酵混合液；
步骤5，将所述主发酵混合液在后发酵温度下进行后发酵，然后静置培养第二静置培养时间，得到发酵醪液；
步骤6，将所述发酵醪液离心后经过巴氏杀菌，得到樟芝蘑菇酵素，
其中，所述步骤1中，所述樟芝发酵液浓缩后体积为原体积的30-60％。
2.根据权利要求1所述的樟芝蘑菇酵素的制备方法，其特征在于：
其中，所述步骤2中，所述菌菇为猴头菇、灵芝、平菇以及香菇中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的樟芝蘑菇酵素的制备方法，其特征在于：
其中，所述步骤2中，所述第一质量比为0.2-1.5％m/v，所述第二质量比为0.2-1.5％m/v，所述第三质量比为0.2-1.5％m/v，所述第一酶解温度为30-55℃，所述第一酶解时间为0.5-4h。
4.根据权利要求1所述的樟芝蘑菇酵素的制备方法，其特征在于：
其中，所述步骤3中，所述第一混合比例为1:2-4:1，所述第一接种量为1-5％v/v，所述第二接种量为1-5％v/v。
5.根据权利要求1所述的樟芝蘑菇酵素的制备方法，其特征在于：
其中，所述步骤4中，所述主发酵温度为25-32℃，所述第一静置培养时间为2-5d。
6.根据权利要求1所述的樟芝蘑菇酵素的制备方法，其特征在于：
其中，所述步骤5中，所述后发酵温度为15-22℃，所述第二静置培养时间为10-30d。
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