CN108324939A - 一种棒状纳米氢氧化铝佐剂的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
一种棒状纳米氢氧化铝佐剂的制备方法及应用，其基本特征在于它的形状为实心棒状氢氧化铝化合物，其直径50‑300nm、长度0.8‑3um，具有分散性好、不含杂质、能够吸附大分子抗原等优点，所用设备易购、涉及的工艺简单，具有很好的应用前景，棒状纳米氢氧化铝佐剂除适用于病毒或类病毒成分(蛋白、DNA、RNA)所制备的抗原物质，还特别适用于菌苗等大分子抗原物质。这为大分子抗原的佐剂提供客观依据，使棒状纳米氢氧化铝可以作为菌苗的新型佐剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种棒状纳米氢氧化铝佐剂的制备方法及该棒状纳米氢氧化铝佐剂在菌苗上的应用。
背景技术
自1926年A.T.Glenny和同事们展示了铝化合物的佐剂效应以来。佐剂辅助疫苗来扩增、引导和加速免疫应答成了不争的事实。而且涌现了大量新型疫苗佐剂的研究报道，包含铝盐类矿物质、油乳剂、细胞因子等。随着纳米技术的发展，佐剂纳米化也成了疫苗佐剂的一种发展趋势，相继出现了像纳米氢氧化铝、纳米磷酸铝、纳米金、介孔二氧化硅、聚合物纳米颗粒(PLGA、PLA、r-PGA)、脂质体等一系列纳米佐剂。截止2011年，报道的佐剂达103种，其中98种佐剂已被用于384种针对81种病原体、癌症和过敏性疾病的疫苗。尽管佐剂种类很多，但是大部分佐剂仍在临床前试验阶段，很少有佐剂已被许可用于美国或欧洲的人类疫苗。目前，铝佐剂是人类和兽用疫苗制剂中最常用的佐剂。
铝佐剂主要有氢氧化铝、磷酸铝和明矾三种，而通常所说的铝佐剂是指氢氧化铝佐剂。氢氧化铝为两性化合物，等电点pI＝11.4，在pH＝7.4的溶液中以阳离子形式存在，是阴离子抗原的良好吸附剂。铝佐剂也存在一些不良反应，如：只能较弱或中度增强抗原特异性免疫应答，不能诱导细胞免疫应答；不适用于针对病毒、胞内细菌和寄生虫的疫苗抗原；诱导IgE介导的变态反应及注射局部有炎症反应，出现红斑、皮下结节、肉芽肿等。
金黄色葡萄球菌隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)，硬壁菌门(Firmicutes)，革兰氏染色阳性，直径0.8um左右，显微镜下排列成葡萄串状，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适生长pH＝7.4。血平板上菌落较厚、具有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，可有荚膜,能产生金黄色色素，能分解甘露醇,血浆凝固酶实验、乳糖发酵实验及脱氧核糖核酸酶实验阳性。金黄色葡萄球菌是一种在环境中普遍存在的细菌，在人体中，常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。约有20％的人群为金黄色葡萄球菌的长期携带者，并且大部分人不表现出临床症状，但是金黄色葡萄球菌仍是人类的重要致病菌。
铜绿假单胞菌，曾称绿脓杆菌，是一种无荚膜、无芽孢、可运动的革兰氏阴性专性需氧小杆菌，广泛存在于土壤、水、污物、植物和动物体中，常定植于生物体上呼吸道、泌尿道，消化道和皮肤等处，是机会致病菌。铜绿假单胞菌因具有天然的抵抗力和非凡的适应能力，其可以通过多种机制获得耐药性，故其有效治疗和控制仍然是一个长期存在的问题。长期以来人们一直关注铜绿假单胞菌菌苗作为有效的防治手段，有众多铜绿假单胞菌候选疫苗抗原和抗原的输送系统研究已经过实验室研究检测，正在进行I-III期临床试验评估。尽管这对研制铜绿假单胞菌疫苗有广泛而深远的意义，但迄今市场上还没有有效的对抗铜绿假单胞菌感染的疫苗面市。
鸭疫里默式菌(RA)，菌体呈杆状或椭圆形，大小在0.3-0.5um×0.7-6.5um,且RA的血清型较多，各个国家和地区流行的主要血清型有所不同，在不同时期流行的血清型也可能不同，而且在同一鸭场，甚至是同一批鸭群可能同时存在多个血清型，并且各血清型之间缺乏交叉保护。因此，选用整个菌株才能确保有效的免疫应答。但菌苗分子量过大，目前普通铝佐剂及油佐剂难以实现。纳米铝佐剂之所以具有比普通佐剂更好的效果不仅在于纳米粒子自身独特的物理化学特性，即尺寸、形状、表面化学和粗糙度等，且纳米铝佐剂可以避免载体效应的发生，保护疫苗，延长疫苗在体内的存在时间，还是巨噬细胞、树突状细胞的首选吞噬目标，而棒状纳米氢氧化铝佐剂由于其相对特殊的形状使得菌苗等大分子抗原的有效吸附成为可能，有效提高菌苗类抗原的吸附能力和吸附效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种棒状纳米氢氧化铝佐剂材料，其特征为，棒状纳米氢氧化铝佐剂除可吸附小分子病毒或类病毒类(蛋白、DNA、RNA)抗原外，还可有效的吸附菌苗等大分子抗原，且效果优于常规铝佐剂和球形纳米铝佐剂。
本发明的发明人发现，通过加入特定比例的表面活性剂和助表面活性剂并在设定合适温度控制反应条件下，将铝盐的水溶液与氢氧化钠或氨水溶液通入反应器中进行接触反应，并控制pH、搅拌转速等反应条件，可以获得形状为棒状的纳米氢氧化铝。
本发明还提供一种由上述制备方法得到的棒状纳米氢氧化铝佐剂及该氢氧化铝佐剂在疫苗上的应用。
本发明制备的棒状纳米氢氧化铝佐剂可以负载菌苗类大分子抗原并且此复合物疫苗可在第一次接种后能够快速产生免疫应答，产生的抗体滴度较高,可有效避免因血清型不同而造成的交叉保护缺失，达到全面预防接种的目的。
本发明与现有技术不同的是：Al(OH)3佐剂的制备方法不同于传统的单相微乳液体系制备，而是先将AlCl3和氢氧化钠或氨水分别配置成单相微乳液体系，之后再将两单相微乳液体系混合获得双相微乳液，通过两相微乳液体系在缓慢混合过程中物质成核规律即获得棒状纳米氢氧化铝。反应获得的棒状氢氧化铝能够有效的吸附大分子菌苗抗原，当其接种到机体内后可形成一个“抗原储存库”，缓慢释放出抗原，充分延长了抗原的作用时间，起到长期保护的作用。同时还能促进局部(注射部位)巨噬细胞的免疫应答。
本发明的技术方案具体为：
1)将表面活性剂和助表面活性剂苯扎溴铵和甘油按一定比例(1:3、2:5、1:2、2:3、1:1、3:2、2:1、5:2、3:1，最优配比为3:2)混合，加入环己烷10mL混合后，按照体积比加入无水三氯化铝1mL(1moL/mL)和一定量的双蒸水备用；
2)将表面活性剂和助表面活性剂苯扎溴铵和甘油按一定比例(1:3、2:5、1:2、2:3、1:1、3:2、2:1、5:2、3:1，最优配比为3:2)混合，加入环己烷10mL混合后，按照体积比加入氢氧化钠或氨水3mL和一定量的双蒸水备用；
3)将上述步骤1)中的溶液置于反应容器中，控制一定的反应温度(30-60℃，优化温度为50℃)，高速搅拌(搅拌转速为500-1500rpm/min，优化转速600rpm/min)，同时将2)中的混合溶液以5-30mL/h的速度滴入反应1)中，其中优化速度为20mL/h，搅拌到无氨水味为止，保持体系pH大于7，其中最佳pH为9，继续高速搅拌一定时间(反应时间为2.0-5.0h，优化时间为2.5h)后获得棒状纳米氢氧化铝佐剂。
4)所述菌苗抗原为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鸭疫里默氏菌，按照常规技术制备或购买获得；
5)将步骤3)获得的纳米氢氧化铝佐剂溶液处理为浓度为1mg/mL的半成品待用；
6)将步骤4)获得的各种菌苗取对数期，并用0.4％的多聚甲醛处理48h后，PBS清洗2次，以PBS重悬调整至一定浓度待用；
7)将步骤5)获得的纳米氢氧化铝佐剂溶液和步骤6)获得的各种菌苗按体积比1:1吸附，制备成疫苗待用。
8)分别在棒状纳米氢氧化铝佐剂、弗氏佐剂和普通铝佐剂辅佐下，用各种菌苗对分组后的BALB/c小鼠(金葡菌、铜绿菌)和雏鸭(鸭疫里默氏菌)分别进行四肢肌肉注射免疫和颈部皮下注射，分别于第0d、14d、28d免疫接种，每只免疫剂量相同。
9)末次免疫1周后，各组小鼠摘眼球取血，随后予脱颈椎处死；雏鸭直接处死取血，取脾脏及肺组织。血液标本于37℃静置30min，8000rpm/min 10min，收集血清，分装于-20℃保存。
10)用ELISA法检测小鼠及雏鸭的抗血清滴度，分析各组疫苗免疫后特异性抗体的效价。
11)分离小鼠及雏鸭的脾脏，并培养脾细胞，观察脾细胞的增值效应。
本发明方法制备的金黄色葡萄球菌疫苗、铜绿假单胞菌疫苗、鸭疫里默氏菌疫苗半成品，按照常规技术加工处理后制成金黄色葡萄球菌疫苗、铜绿假单胞菌疫苗、鸭疫里默氏菌疫苗；
本发明的有益效果为:与传统工艺相比，本发明所获得佐剂为棒状纳米尺寸且制作方法简单有效，生产成本可控；本发明中的Al(OH)3佐剂为双连续反相微乳液反应生成，棒状的规格介于纳米和微米尺寸间，能有效的负载大分子类抗原，从而提高了抗原的免疫原性，疫苗的ELISA法检测结果也显著优于普通铝佐剂和弗氏佐剂组，能更有效地引起机体产生免疫反应，产生更多的保护性抗体和细胞因子。表明此方法获得棒状纳米氢氧化铝佐剂辅佐的金黄色葡萄球菌疫苗、铜绿假单胞菌疫苗、鸭疫里默氏菌疫苗具有接种量小，不良反应少，效率高的特点。
附图说明
图1为实例1中制备的棒状纳米氢氧化铝的扫描电镜图。
图2为实例1中制备的棒状纳米氢氧化铝的能谱分析图。
图3为实例1中制备的棒状纳米氢氧化铝的原子力显微镜图。
具体实施方式
实施例1本发明所涉及的棒状纳米氢氧化铝佐剂的制备
1)将表面活性剂和助表面活性剂苯扎溴铵和甘油按一定比例(1:3、2:5、1:2、2:3、1:1、3:2、2:1、5:2、3:1，最优配比为3:2)混合，加入环己烷10mL混合后，按照体积比加入无水三氯化铝1mL(1moL/mL)和一定量的双蒸水备用；
2)将表面活性剂和助表面活性剂苯扎溴铵和甘油按一定比例(1:3、2:5、1:2、2:3、1:1、3:2、2:1、5:2、3:1，最优配比为3:2)混合，加入环己烷10mL混合后，按照体积比加入氢氧化钠或氨水3mL和一定量的双蒸水备用；
3)将上述步骤1)中的溶液置于反应容器中，控制一定的反应温度(30-60℃，优化温度为50℃)，高速搅拌(搅拌转速为500-1500rpm/min，优化转速600rpm/min)，同时将2)中的混合溶液以5-30mL/h的速度滴加进入反应1)中，其中优化速度为20mL/h，搅拌到无氨水味为止，保持体系pH大于7，其中最佳pH为9，继续高速搅拌一段时间(反应时间为2.0-5.0h，优化时间为2.5h)；
4)将反应后的溶液用2倍体积无水乙醇破乳处理后，10000rpm/min离心10min弃去上清，加入无水乙醇重悬，超声仪分散15min，10000rpm/min离心10min弃去上清，重复3次。将得到的沉淀物悬浮于无菌水中即为棒状纳米氢氧化铝佐剂。
实施例2新型金黄色葡萄球菌菌体灭活疫苗的制备方法
1)将制备好的棒状纳米氢氧化铝佐剂配置成1mg/mL，超声分散30min，于4℃冰箱备用。
2)将金黄色葡萄球菌二次活化后取对数期，并用0.4％的多聚甲醛处理48h后，PBS/生理盐水清洗2次，以PBS重悬调整浓度为108/mL-1010/mL待用；
3)将制备好的菌苗按照体积比1：1比例混合棒状纳米氢氧化铝佐剂(自制)、弗氏佐剂和普通铝佐剂，使用漩涡混合器，以5000rpm/min的速度将其涡旋振荡30min，充分混匀，即得金黄色葡萄球菌菌体灭活疫苗。
实施例3新型铜绿假单胞菌菌体灭活疫苗的制备方法
1)将制备好的棒状纳米氢氧化铝佐剂配置成1mg/mL，超声分散30min，于4℃冰箱备用。
2)将铜绿假单胞菌二次活化后取对数期，并用0.4％的多聚甲醛处理48h后，PBS/生理盐水清洗2次，以PBS重悬调整细菌细胞浓度为109cells/mL待用；
3)将制备好的菌苗按照体积比1：1比例混合棒状纳米氢氧化铝佐剂(自制)、弗氏佐剂和普通铝佐剂，使用漩涡混合器，以5000rpm/min的速度将其涡旋振荡30min，充分混匀，即得铜绿假单胞菌菌体灭活疫苗。
实施例4新型鸭疫里默氏菌菌体灭活疫苗的制备方法
1)将制备好的棒状纳米氢氧化铝佐剂配置成1mg/mL，超声分散30min，于4℃冰箱备用。
2)将鸭疫里默氏菌二次活化后取对数期，并用0.4％的多聚甲醛处理48h后，PBS清洗2次，以PBS重悬调整浓度为107/mL待用；
3)将制备好的菌苗按照体积比1：1比例混合棒状纳米氢氧化铝佐剂(自制)、弗氏佐剂和普通铝佐剂，使用漩涡混合器，以5000rpm/min的速度将其涡旋振荡30min，充分混匀，即得鸭疫里默氏菌菌体灭活疫苗。
实施例5金黄色葡萄球菌菌体灭活疫苗动物免疫
实验动物：50只6-8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为5组,包括4个实验组和1个对照组,每组10只小鼠。免疫抗原总体积为300uL，腿部肌肉注射，分别在第0d、14d、28d免疫三次。
实验组1：每只小鼠后腿肌肉免疫100uL金黄色葡萄球菌菌体抗原疫苗；
实验组2：每只小鼠后腿肌肉免疫100uL金黄色葡萄球菌菌体抗原+棒状纳米氢氧化铝佐剂疫苗；
实验组3：每只小鼠后腿肌肉免疫100uL金黄色葡萄球菌菌体抗原+普通铝佐剂疫苗；
实验组4：每只小鼠后腿肌肉免疫100uL金黄色葡萄球菌菌体抗原+弗氏佐剂疫苗；
对照组1：每只小鼠后腿肌肉免疫100uL生理盐水。
免疫分组及抗原剂量具体见下表：
实施例6铜绿假单胞菌菌体灭活疫苗动物免疫
实验动物：50只6-8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为5组,包括4个实验组和1个对照组,每组10只小鼠。免疫抗原总体积为300uL，腿部肌肉注射，分别在第0d、14d、28d免疫三次。
具体实施方法同例5.
实施例7鸭疫里默氏菌菌体灭活疫苗动物免疫
实验动物：50只3-7日龄健康易感雏鸭，随机分为5组,包括4个实验组和1个对照组,每组10只雏鸭。免疫抗原总体积为0.6mL，颈部皮下注射，分别在第0d、14d、28d免疫三次。
具体实施方法同例5.
免疫分组及抗原剂量具体见下表：
实施例8抗体滴度测定及组织器官检验
1)在首免后的第7d、14d、21d、28d，分别对每个实验组动物进行尾静脉采血，8000rpm离心10min，收集小鼠血清，无菌分装保存于-20℃冰箱备用。
2)末次免疫1周后，各组小鼠摘眼球取血，随后予脱颈椎处死，雏鸭直接处死取血，取脾脏组织。血液标本于37℃静置30min，8000rpm/min 10min，收集血清，分装于-20℃保存备用。
3)用ELISA法测定上述采集血样中抗体滴度。
4)分离取出来的脾脏及脾细胞的培养，观察脾细胞的增值效应。
Claims (10)
1.一种棒状纳米氢氧化铝佐剂的制备方法及应用，其特征在于它的形状为实心棒状氢氧化铝，直径为50-300nm,长度为0.8-3um。
2.根据权利要求1所述的纳米氢氧化铝佐剂，其特征在于，棒状纳米氢氧化铝佐剂适用于病毒、类病毒及菌苗类抗原，而长度为0.8-1.5um特别适用于菌苗类大分子抗原。
3.根据权利要求1所述的制备方法及应用，适用于疫苗中，特别适用于菌苗。
4.根据权利要求3所述的应用，所述疫苗包括人用和动物用疫苗，特别适用于人用和动物用菌苗。
5.根据权利要求4所述的应用，所述菌苗抗原成分选自革兰氏阳性菌：金黄色葡萄球菌、结核杆菌、表皮葡萄球菌；革兰氏阴性菌：铜绿假单胞菌、鸭疫里默氏菌、百日咳杆菌、伤寒杆菌、鸡霍乱弧菌等。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述棒状纳米氢氧化铝佐剂的制备利用双连续反相微乳液体系构建，即：按一定比例制备两单相微乳液体系(铝盐微乳液体系、氢氧化钠或氨水微乳液体系)，先将其中一相置于磁力搅拌器上恒温搅拌，然后再将另一相用注射泵以一定的速度(5-30mL/h，优化速度为20mL/h)滴入其中，反应一段时间(2.0-5.0h，优化时间为2.5h)后经纯化即得棒状纳米氢氧化铝。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述双连续反相微乳液体系构建包括以下步骤：
①铝盐微乳液体系：按公众知识，取苯扎溴铵、甘油、环己烷于烧杯中，磁力搅拌使其分散均匀，并用注射泵将AlCl3以6mL/h的速度滴入烧杯中；
②氢氧化钠或氨水微乳液体系：按公众知识，取苯扎溴铵、甘油、环己烷于烧杯中，磁力搅拌使其分散均匀，并用注射泵将氢氧化钠或氨水以6mL/h的速度滴入烧杯中。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述双连续反相微乳液中的铝盐微乳液体系：
铝盐微乳液体系：按公众知识，取苯扎溴铵、甘油、环己烷于烧杯中，并使加入的乳化剂即苯扎溴铵和甘油,配置比为1:3、2:5、1:2、2:3、1:1、3:2、2:1、5:2、3:1，通过磁力搅拌1000rpm/min加超声100w使其分散均匀，使用注射泵将AlCl3以6mL/h的速度滴入烧杯中，反应温度为30-60℃，优化温度是50℃，搅拌转速为500-1500rpm/min，优化转速是600rpm/min，反应30min。
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述双连续反相微乳液中的氢氧化钠或氨水微乳液体系：
氢氧化钠或氨水微乳液体系：按公众知识，取苯扎溴铵、甘油、环己烷于烧杯中，并使加入的乳化剂即苯扎溴铵和甘油，配置比为1:3、2:5、1:2、2:3、1:1、3:2、2:1、5:2、3:1，通过磁力搅拌1000rpm/min加超声100w使其分散均匀，使用注射泵将氢氧化钠或氨水以6mL/h的速度滴入烧杯中，反应温度为30-60℃，优化的温度是50℃，搅拌转速为500-1500rpm/min，优化的转速是600rpm/min，反应30min。
10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述双连续反相微乳液制备工艺：将上述①中混合溶液于烧杯中，其中苯扎溴铵与甘油质量比为3:2，放置于恒温磁力搅拌器上加热搅拌，并用注射泵将上述②中体系(苯扎溴铵与甘油质量比为3:2)以5-30mL/h的速度滴入①中，其中优化速度为20mL/h，保持体系pH值在8-11范围，优化pH值为9；反应温度为30-60℃，优化温度为50℃；搅拌转速为500-1500rpm/min，优化转速600rpm/min；反应时间为2.0-5.0h，优化时间为2.5h，之后加入2倍体积的无水乙醇破乳,并用95％无水乙醇超声纯化、10000rpm/min离心10min,重复3遍后悬浮于无菌水中，即得棒状纳米氢氧化铝。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112625127A (zh) * | 2021-01-12 | 2021-04-09 | 重庆君同生物技术有限公司 | 抗蜜蜂幼虫芽孢杆菌卵黄抗体及其制备方法和应用 |
| CN112625126A (zh) * | 2021-01-11 | 2021-04-09 | 重庆君同生物技术有限公司 | 抗蜂房哈夫尼菌卵黄抗体及其制备方法和应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2169193C2 (ru) * | 1999-08-12 | 2001-06-20 | Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева | Штамм бактерий pseudomonas aeruginosa 5142, используемый для изготовления вакцины против псевдомоноза пушных зверей |
| CN101991850A (zh) * | 2010-11-05 | 2011-03-30 | 东南大学 | 纳米氢氧化铝佐剂的制备工艺 |
| CN102101687A (zh) * | 2009-12-16 | 2011-06-22 | 国家纳米科学中心 | 制备氢氧化铝纳米棒的设备及制备氢氧化铝纳米棒的方法 |
| CN104189898A (zh) * | 2014-06-27 | 2014-12-10 | 四川大学 | 铜绿假单胞菌疫苗及其制备方法 |
| CN106390111A (zh) * | 2016-11-25 | 2017-02-15 | 于彦强 | 一种水貂出血性肺炎灭活疫苗制备方法及其应用 |
-
2018
- 2018-03-06 CN CN201810184113.XA patent/CN108324939B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2169193C2 (ru) * | 1999-08-12 | 2001-06-20 | Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева | Штамм бактерий pseudomonas aeruginosa 5142, используемый для изготовления вакцины против псевдомоноза пушных зверей |
| CN102101687A (zh) * | 2009-12-16 | 2011-06-22 | 国家纳米科学中心 | 制备氢氧化铝纳米棒的设备及制备氢氧化铝纳米棒的方法 |
| CN101991850A (zh) * | 2010-11-05 | 2011-03-30 | 东南大学 | 纳米氢氧化铝佐剂的制备工艺 |
| CN104189898A (zh) * | 2014-06-27 | 2014-12-10 | 四川大学 | 铜绿假单胞菌疫苗及其制备方法 |
| CN106390111A (zh) * | 2016-11-25 | 2017-02-15 | 于彦强 | 一种水貂出血性肺炎灭活疫苗制备方法及其应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| BINGBING SUN等: "Engineering an Effective Immune Adjuvant by Designed Control of Shape and Crystallinity of Aluminum Oxyhydroxide Nanoparticles", 《ACS NANO》 * |
| XU LI等: "Aluminum (oxy)hydroxide nanosticks synthesized in bicontinuous reverse microemulsion have potent vaccine adjuvant activity", 《ACS APPL MATER INTERFACES》 * |
| YINGLI CHEN等: "Aluminum (oxy) Hydroxide Nanorods Activate an Early Immune Response in Pseudomonas aeruginosa Vaccine", 《ACS APPL. MATER. INTERFACES》 * |
| 徐爱平等: "纳米铝佐剂禽流感疫苗（H5N1）免疫反应性试验", 《中国兽医杂志》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112625126A (zh) * | 2021-01-11 | 2021-04-09 | 重庆君同生物技术有限公司 | 抗蜂房哈夫尼菌卵黄抗体及其制备方法和应用 |
| CN112625127A (zh) * | 2021-01-12 | 2021-04-09 | 重庆君同生物技术有限公司 | 抗蜜蜂幼虫芽孢杆菌卵黄抗体及其制备方法和应用 |
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| Publication number | Publication date |
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