CN108291188B - 细胞培养容器及观察用样品室 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种从各种角度观察三维培养的细胞的细胞培养容器/观察用样品室。本发明的细胞培养容器/观察用样品室的特征在于，包括包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶，和内包所述培养凝胶的第一容器，所述培养凝胶充满第一容器内的空间，第一容器具有由水凝胶构成的透光性的窗部。
Description
技术领域
本发明涉及细胞培养容器及观察用样品室，特别涉及能够观察三维培养的细胞的细胞培养容器。
背景技术
进行有通过在培养凝胶中三维培养细胞组织形成血管组织、支气管组织等的研究(例如，参照专利文件1-3)。这些研究，通常在皿中或孔中形成厚的培养凝胶层，在该培养凝胶层包埋细胞或者细胞组织进行细胞组织的培养。采用以倒立型显微镜或者直立型显微镜从培养凝胶层的下侧或者上侧观察细胞组织的方法，作为培养的细胞组织的观察方法。另外，使用激光显微镜取得培养的细胞组织的三维图像(例如，参照非专利文件1)。
现有技术文件
专利文件
专利文件1：特开2009-213716号公报
专利文件2：WO2004/084967A
专利文件3：WO2012/147878A
非专利文件
非专利文件1：科学，2004年8月13日，第305卷，第1007-1009页
发明内容
发明所要解决的技术问题
但是，过去的三维培养细胞组织的研究，只能够获得从上侧或者下侧的细胞组织的明视野图像，因而在明视野图像的细胞组织的三维构造的认知是困难的。另外，在具有高度方向的厚度的细胞组织的情况下，光不透过细胞密度大的部分，因而细胞组织的观察是困难的。
另外，在激光显微镜的观察中，因激光对细胞组织造成损伤，有难以进行长时间的活体观察这样的问题。另外，激光显微镜的价格高。进而，通过激光显微镜取得三维图像在Z轴方向的分辨率有限。
本发明基于上述情况，提供一种能够从各种角度观察三维培养的细胞的细胞培养容器/观察用样品室。
解决技术问题的技术手段
本发明提供一种细胞培养容器，其特征在于，该细胞培养容器包括包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶，和内包所述培养凝胶的第一容器，所述培养凝胶充满第一容器内的空间，第一容器具有由水凝胶构成的透光性的窗部。
另外，本发明提供一种观察用样品室，其特征在于，该观察用样品室包括包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶，和内包所述培养凝胶的第一容器，所述培养凝胶充满第一容器内的空间，第一容器具有由水凝胶构成的透光性的窗部。
进而，本发明还提供一种细胞培养容器，其特征在于，该细胞培养容器包括第一容器，所述第一容器具有被包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶所填充的内部空间，第一容器具有由水凝胶构成的透光性的窗部。
发明的效果
本发明的细胞培养容器/观察用样品室，具有包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶，因而能够在培养凝胶中三维培养细胞组织。
本发明的细胞培养容器/观察用样品室具有内包培养凝胶的第一容器，培养凝胶充满第一容器内的空间，因而能够将培养凝胶及细胞组织封入在第一容器中，能够抑制培养凝胶在第一容器内的流动以及细胞组织的相对位置的偏移。由此，抑制细胞组织的相对位置的偏移，第一容器能够向水平方向、竖直方向、或者倾斜方向旋转。
第一容器有具有透光性的窗部，因而能够通过显微镜等从窗部观察第一容器内部的细胞组织。另外，抑制组织细胞的相对位置的偏移而能够旋转第一容器，因而能够从各种角度观察细胞组织，能够使细胞组织的三维的立体形状容易地清楚地被认知。另外，利用激光显微镜从各种角度观察细胞组织变得可能，因而在X轴方向、Y轴方向、Z轴方向的全部有高分辨率的细胞组织的三维图像的取得变得可能。
第一容器的窗部由水凝胶构成，因而培养所需的蛋白质(分子量：数万～数十万)等能够从第一容器的外部的液体培养基通过窗部向培养凝胶及细胞组织供给。由此，长期维持第一容器的内部的细胞组织的活性变得可能。另外，能够抑制培养凝胶吸收液体培养基而润胀，能够抑制细胞组织的相对位置的偏移。
本发明的细胞培养容器/观察用样品室能够应用在例如生物学、医学、药学等相关研究、再生医疗、药物开发等。
附图说明
图1为本发明的第一实施方式的细胞培养容器/观察用样品室的概要立体图。
图2为基于图1的虚线X-X的细胞培养容器/观察用样品室的概要剖视图。
图3为本发明的第二实施方式的细胞培养容器的概要剖视图。
图4为本发明的第三实施方式的细胞培养容器/观察用样品室的概要剖视图。
图5中的(a)～(c)分别为本发明的第四～六实施方式的细胞培养容器/观察用样品室的概要立体图。
图6为在实验中制作的细胞培养容器/观察用样品室的照片。
图7为从在实验中制作的细胞培养容器/观察用样品室的下面拍摄的细胞组织的照片。
图8为从在实验中制作的细胞培养容器/观察用样品室的前面拍摄的细胞组织的照片。
图9为从在实验中制作的细胞培养容器/观察用样品室的右面拍摄的细胞组织的照片。
图10为本发明的一种实施方式的细胞培养容器的概要立体图。
图11为基于图10的虚线Y-Y的细胞培养容器的概要剖视图。
具体实施方式
本发明的细胞培养容器/观察用样品室的特征在于，该细胞培养容器包括包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶，和内包培养凝胶的第一容器，所述培养凝胶充满第一容器内的空间，第一容器具有由水凝胶构成的透光性的窗部。
本发明的细胞培养容器/观察用样品室所包括的窗部，优选含有琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、海藻酸钠或胶原凝胶。
由此，窗部能够具有透光性。另外，第一容器外部的液体培养基所含有的蛋白质等营养能够透过窗部，能够向培养凝胶及细胞组织供给营养。另外，即使在旋转第一容器的情况下也能够抑制窗部变形。
本发明的细胞培养容器/观察用样品室所包括的第一容器的形状，优选为以立方体为代表的长方体，优选第一容器在各面具有窗部。
由此，能够从上下左右前后的六个面观察第一容器内部的细胞组织，能够掌握三维培养的细胞组织的三维构造。另外，能够将第一容器容易地设置在显微镜的工作台，能够容易地观察细胞组织。
本发明的细胞培养容器/观察用样品室所包括的第一容器，优选具有包围窗部的框部。
由此，能够提高第一容器的强度，使细胞培养容器/观察用样品室的操作变得容易。另外，能够抑制窗部的损伤。
优选本发明的细胞培养容器/观察用样品室还具有储存液体培养基的第二容器，优选第一容器配置在液体培养基中。
由此，储存在第二容器的液体培养基所含有的蛋白质等营养能够通过窗部向培养凝胶及细胞组织供给。由此，长期维持第一容器的内部的细胞组织的活性变得可能。另外，能够从第二容器容易地取出第一容器，能够容易地更换第一容器的外部容器。由此，在培养时和观察时改变外部容器变得可能，使用分别适于培养和观察的外部容器成为可能。
下面结合附图说明本发明的一种实施方式。附图或以下说明中所显示的构成，为示例，本发明的范围并不被附图或以下说明中所显示的构成所限制。
图1为第一实施方式的细胞培养容器/观察用样品室的概要立体图，图2为基于图1的虚线X-X的细胞培养容器/观察用样品室的概要剖视图。图3为第二实施方式的细胞培养容器的概要剖视图。图4为第三实施方式的细胞培养容器/观察用样品室的概要剖视图。图5中的(a)～(c)分别为第四～六实施方式的细胞培养容器/观察用样品室的概要立体图。另外，本实施方式的细胞培养容器包括第一～六实施方式的细胞培养容器。
本实施方式的细胞培养容器10/观察用样品室10包括包埋细胞7或者细胞组织7的培养凝胶6，和内包培养凝胶6的第一容器1，所述培养凝胶6充满第一容器1内的空间，第一容器1具有由水凝胶构成的透光性的窗部4。
另外，本实施方式的细胞培养容器10是用于三维培养细胞组织的容器。另外，本实施方式的细胞培养容器10能够具有作为细胞培养容器的功能和作为观察用样品室的功能这两者。
此外，包埋细胞7或者细胞组织7的培养凝胶6，是指将细胞7或者细胞组织7埋入后的培养凝胶6。
本实施方式的细胞培养容器10可以包括在培养凝胶包埋后的细胞7或者细胞组织7。另外，细胞组织7可以为活细胞、也可以为已用多聚甲醛等进行固定的细胞组织，还可以为已实施渗透处理的细胞组织。
另外，本实施方式的细胞培养容器10也可以像图3所示的第二实施方式的细胞培养容器10那样地具有第二容器2。
本实施方式的细胞培养容器10也可以为观察用样品室10。此时，能够将细胞培养容器10(观察用样品室)置于显微镜，通过显微镜观察在培养凝胶6中培养的细胞组织7。观察细胞组织7的显微镜，可以为光学显微镜，也可以为激光显微镜。
本实施方式的细胞培养容器10也可以为如下所述，细胞培养容器10包括第一容器1，该第一容器1具有被包埋细胞7或者细胞组织7的培养凝胶6所填充的内部空间13，第一容器1具有由水凝胶构成的透光性的窗部4。此时，能够在将培养凝胶6以及细胞7或者细胞组织7填充至细胞培养容器10后，进行细胞7等的培养、观察。另外，该细胞培养容器10具有用于向第一容器1的内部空间13注入凝胶6等的开口12。该开口12，在将培养凝胶6以及细胞7或者细胞组织7填充至细胞培养容器10后，能够形成由水凝胶构成的透光性的窗部4。细胞培养容器10能够为具有例如图10、11所示的构成。
下面对本实施方式的细胞培养容器10/观察用样品室10进行说明。
1、培养凝胶
培养凝胶6为用于培养被包埋在培养凝胶6的细胞7或者细胞组织7的凝胶。包埋在培养凝胶6的细胞既可以为具有以一定模式集合的构造的细胞组织，也可以为不具有上述组织构造的细胞。另外，也可以通过培养不具有组织构造的细胞7，成长为细胞组织7。
通过将细胞7或者细胞组织7包埋在培养凝胶6，能够通过培养凝胶6将营养供给到细胞7或者细胞组织7。另外，培养凝胶6能够成为细胞组织7的支架，细胞组织7能够三维地成长。
培养凝胶6可以含有胶原蛋白、层粘连蛋白、巢蛋白、蛋白聚糖等。另外，培养凝胶6可以含有TGF-β、成纤维细胞生长因子、组织纤溶酶原激活剂等。还有，在培养凝胶6能够利用Matrigel(注册商标)。
培养凝胶6被内包到第一容器，不直接接触外部的液体培养基，因而能够抑制培养凝胶6吸收液体培养基而润胀导致的细胞组织7的相对位置的偏移。
2、第一容器
第一容器1以内包培养凝胶的方式设置。另外，已包埋细胞组织7的培养凝胶6充满第一容器1内的空间。由此，能够将培养凝胶6及细胞组织7封入在第一容器1中，能够抑制培养凝胶6在第一容器1内的流动以及细胞组织7的相对位置的偏移。另外，抑制细胞组织的相对位置的偏移，第一容器能够向水平方向、竖直方向、或者倾斜方向旋转。进而，通过设置第一容器1，能够使已包埋细胞组织7的培养凝胶的操作变得容易。由此，能够容易地更换放入第一容器1的外部容器。例如，在将第一容器1放入具有多个孔的塑料材质的孔板中培养细胞组织7，取得组织细胞7的荧光图像等的情况下，能够将第一容器1从孔板取出，放入光透过性高的玻璃底面的外部容器。由此，能够取得清楚的荧光图像等。此外，塑料材质的孔板，从光透过性的观点看，不适于取得荧光图像。另外，能够在拍摄后将第一容器放回到孔板。
第一容器可以具有，即使旋转第一容器形状也不变的强度。另外，第一容器1可以具有封闭构造，培养凝胶6及细胞组织7可以充满其内部的空间。
例如，第一容器1的形状可以为多面体。由此，第一容器1能够具有作为基准的面，使确定细胞组织7的观察面成为可能。由此，能够决定用于确定细胞组织7的三维构造的坐标系。以决定三维正交坐标为例，例如以多面体中的一个平面作为基准面，能够沿该平面获得X-Y坐标，垂直该平面获得Z坐标。另外，在多角形带有相互正交的三个面时，也可以以该三个面作为基准面决定三维正交坐标系。
第一容器1的形状，可以如图1～4所示的第一容器1那样为立方体，也可以如图5中的(a)所示那样为长方体，还可以如图5中的(b)所示的那样为六角柱。另外，第一容器1的形状可以如图5中的(c)所示那样为圆柱。
另外，第一容器1的形状，可以为四面体(三角锥)、五面体(三角柱、四角锥等)，也可以为长方体以外的六面体(平行六面体、双三角锥等)、七面体(五角柱、六角锥等)、八面体(双四角锥等)。另外，也可以为十面体(双五角锥等)、十二面体(正十二面体、菱形十二面体、立方十二面体等)。虽然在第一容器1的面的数量也可更多，基于较大地确保各窗部4的面积的观点，面的数量不要太多为宜，优选为四面体、五面体、六面体、七面体、八面体。特别是六面体的情况在三个方向面向面积大的窗，适宜于三维观察。
第一容器1例如可以为各边长度在1mm以上且5cm以下的大小。另外，第一容器1的容量例如可以为1μL以上且10mL以下。
第一容器1具有透光性的窗部4。因此，能够从窗部4通过显微镜等观察第一容器1内部的细胞组织7。另外，第一容器1的形状如图1～4，图5中的(a)、(b)所示那样为多面体时，能够在第一容器1的各面设置窗部4。由此，能够从第一容器1的各面分别观察第一容器1内部的细胞组织7。例如，如图1～4所示，窗部4能够设置在第一容器1的各面。此外，从窗部4观察细胞组织时，能够将第一容器1放入光透过性高的玻璃容器观察细胞组织。由此，能够防止液体培养基等附着到显微镜。
例如，窗部4的形状可以为膜状。另外，窗部4的形状也可以为平板状。窗部4的厚度可较厚，但是，如上所述设为膜状或平板状，通过将其厚度设定地较小，能够提高窗部4的透光性和蛋白质渗透性。
另外，第一容器1能够抑制细胞组织7的相对位置的偏移进行旋转，因而能够旋转第一容器1以使第一容器1的设置有窗部的各面作为观察用样品室10的观察面。特别是，旋转第一容器1以使第一容器1的上面和下面交换，或旋转到第一容器1横倒变得可能。因此，使从第一容器1的各面观察内部的细胞组织7变得可能，能够使细胞组织7的三维的立体形状容易地清楚地被认知。还有，在细胞组织7的观察所使用的显微镜，可以为光学显微镜，也可以为激光显微镜。
第一容器1的形状如图5中的(c)所示那样为圆柱时，能够在圆柱的侧面设置窗部4。由此，能够利用激光显微镜取得细胞组织7的三维图像。另外，窗部4也能够设置在圆柱的上面以及下面。由此，从上面和下面也能够观察细胞组织7，能够提高三维图像的分辨率。
第一容器1的窗部4由水凝胶构成，由此，培养所需的蛋白质(分子量：数万～数十万)等能够从第一容器1的外部的液体培养基等通过窗部4向培养凝胶6及细胞组织7供给。另外，细胞培养容器10能够具有储存液体培养基9的第二容器2，第一容器1能够配置在液体培养基9中。例如，如图3所示第二实施方式的细胞培养容器，能够具有第二容器2。由此，储存在第二容器2的液体培养基9所含有的蛋白质等的营养能够通过窗部4供给到培养凝胶6以及细胞组织7。由此，使长期维持第一容器1的内部的细胞组织7的活性变得可能。另外，培养凝胶6不直接接触外部的液体培养基，因而能够抑制培养凝胶6吸收液体培养基而润胀，能够抑制细胞组织7的相对位置的偏移。例如，第二容器2能够为具有多个孔的孔板。由此，多个第一容器1能够分别放入不同孔中进行培养，使培养大量的细胞组织7成为可能。
储存在第二容器2的液体培养基9也可以定期更换。另外，胞培养容器10能够具有储存新的液体培养基的第三容器，也可在第二容器2内将第一容器1内的细胞组织培养一定时间后，将第一容器1从第二容器2取出，将第一容器1放入储存在第三容器的液体培养基中。另外，第二容器2也可具有多个孔。也可在一个孔内将第一容器1内的细胞组织7培养一定时间后，将第一容器1从孔取出，将第一容器1放入不同的孔。由此，能够抑制第一容器1的周围的液体培养基的营养成分降低，能够长期维持细胞组织7的活性。
构成窗部4的水凝胶，只要能供蛋白质穿过，且具有能够自立的硬度即可，并没有特别限定。水凝胶为水中的分散介质相连形成网，作为体系整体成为固体状。
例如，蛋白质的渗透性与窗部4的强度一并，能够通过调整在窗部4所使用的水凝胶的形成网的分散介质的浓度进行调整。
形成网的分散介质的浓度越高，窗部4的强度越高。作为窗部4的强度，优选为具有50g/cm2以上的凝胶强度，由此，通过第一容器1的内部的培养凝胶的重量能够抑制窗部4的变形。
另一方面，分散介质的浓度过高时，蛋白质渗透性减低，因此，在确保蛋白质渗透性的基础上，优选抑制分散介质的浓度以使窗部4的强度为10000g/cm2以下。
因此，作为窗部4的强度优选为50g/cm2以上且10000g/cm2以下。此外，为了获得上述的凝胶强度，分散介质的适宜浓度因分散介质的种类而异。
例如，窗部4可以含有琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、海藻酸钠或胶原凝胶。由此，窗部能够具有透光性。另外，储存在第二容器2的液体培养基9所含有的蛋白质等营养能够透过窗部4，能够向培养凝胶6及细胞组织7供给营养。另外，通过窗部4包括琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、海藻酸钠或胶原凝胶，即使在旋转第一容器1的情况下也能够抑制窗部4变形。窗部4优选为琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。由此，能够容易地调整窗部4的硬度。另外，能够降低细胞培养容器10的制造成本。
窗部4为琼脂糖凝胶的情况下，琼脂糖凝胶的浓度例如可以为0.5～4.0％。另外，窗部4为聚丙烯酰胺凝胶的情况下，聚丙烯酰胺的浓度例如可以为3～20％。窗部4含有海藻酸钠的情况下，窗部4能够通过在海藻酸钠水溶液中加钙离子进行凝胶化形成。窗部4为胶原凝胶的情况下，能够以高浓度的胶原凝胶形成窗部4。由此窗部4能够具有足够的强度。
第一容器1能够具有包围所述窗部4的框部5。由此，能够提高第一容器1的强度，使细胞培养容器10/观察用样品室10的操作变得容易。另外，能够抑制窗部4的损伤。例如，如图1-3所示的第一容器1那样，第一容器1能够由框部5和窗部4构成。框部5的材料能够为具有生物相容性的树脂。另外，框部5的材料，能够例如为聚碳酸酯。
如图1、2所示那样的细胞培养容器10/观察用样品室10能够如下所述地进行制作。首先，准备在六面分别具有开口的立方体的框部5，使窗部4用溶胶流入框部5的开口使其凝胶化形成由水凝胶构成的膜状或片状的窗部5。依此方式，在框部5的五面分别形成窗部5后，将凝胶化前的培养凝胶以及细胞组织注入到框部5的立方体中使培养凝胶凝胶化。之后，使窗部4用溶胶流入余下的一个框部5的开口使其凝胶化形成由水凝胶构成的膜状或片状的窗部4。依此方式能够形成内包有细胞组织7和培养凝胶6的第一容器1。
第一容器1也可不具有框部5由形成窗部4的水凝胶构成。由此，能够抑制在从窗部4观察细胞组织时产生死角。特别是，在第一容器1的尺寸非常小的情况下(例如，5mm以下)能够将第一容器1构成为不具有框部5的。例如，如图4所示第一容器1那样，第一容器1也可不具有框部5。
如图4所示那样的细胞培养容器10/观察用样品室10能够如下所述地进行制作。首先，使窗部4用溶胶流入模具使其凝胶化，形成在一个面具有开口的中空的立方体凝胶。其后，将凝胶化前的培养凝胶以及细胞组织注入到立方体凝胶使培养凝胶凝胶化。其后，使窗部4用溶胶流入立方体凝胶的开口使其凝胶化形成窗部5。依此方式能够形成内包有细胞组织7和培养凝胶6的第一容器1。
细胞培养实验以及细胞观察实验
制作如图1、2所示那样的内包有支气管组织的第一容器1，如图3所示那样，使第一容器1配置在液体培养基中培养了支气管组织。首先，准备一边1cm的聚碳酸酯制的立方体的框部，以1.5％琼脂糖凝胶形成窗部。其后，将作为培养凝胶的Matrigel(注册商标)以及支气管组织注入到立方体内部中使培养凝胶凝胶化后，通过在余下的开口以1.5％琼脂糖凝胶形成窗部，制作了第一容器1。将该第一容器1配置在液体培养基，将支气管组织进行了10天的三维培养。之后，用光学显微镜观察了培养的支气管组织。
此外，在细胞培养实验中，未观察到第一容器中的培养凝胶的润胀或细胞活性的劣化。
图6为培养的第一容器的照片。图7为从第一容器的下面的窗部拍摄的支气管组织的照片(从图1、2的A方向的照片)，图8为从第一容器的前面的窗部拍摄的支气管组织的照片(从图1、2的B方向的照片)，图9为从第一容器的右面的窗部拍摄的支气管组织的照片(从图1的C方向的照片)。
在图7的从下面的窗部的照片，支气管组织的中心部变暗。这是由于支气管组织沿上下方向成长，照射样品的光无法透过支气管组织。在图7的照片中，能够掌握从支气管组织的中心部向侧面成长的支气管组织的二维形状。另外，虽然未图示，根据从上面的窗部的照片也能够掌握从支气管组织的中心部向侧面成长的支气管组织的二维形状。
在图8的从前面的窗部的照片以及图9的从右面的窗部的照片中，能够掌握向上下方向成长的支气管组织的二维形状。另外，虽然未图示，根据从后面的窗部的照片以及左面的窗部的照片也能够掌握支气管组织的二维形状。
通过对照从这些所有窗部的支气管组织的二维图像，能够掌握三维培养的支气管组织的三维构造。
附图标记
1：第一容器
2：第二容器
4：窗部
5：框部
6：培养凝胶
7：细胞组织(细胞)
9：液体培养基
10：细胞培养容器或观察用样品室
12：开口
13：内部空间
Claims (6)
1.一种细胞培养容器，其特征在于，该细胞培养容器包括包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶，和内包所述培养凝胶的第一容器，
所述培养凝胶充满所述第一容器内的空间，所述第一容器的形状为立方体或长方体，并且，所述第一容器在各面具有一个由水凝胶构成的透光性的窗部，
所述窗部以从所有的面都可以观察到所述细胞或者细胞组织的方式排列，以掌握所述细胞或者细胞组织的三维结构，并且，所述第一容器具有包围所述窗部的框部，
所述窗部具有50g/cm²以上且10000g/cm²以下的凝胶强度。
2.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，所述窗部含有琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、海藻酸钠或胶原凝胶。
3.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，其还包括储存液体培养基的第二容器，第一容器配置在所述液体培养基中。
4.一种观察用样品室，其特征在于，该观察用样品室包括包埋细胞或者细胞组织的培养凝胶，和内包所述培养凝胶的第一容器，所述培养凝胶充满所述第一容器内的空间，所述第一容器的形状为立方体或长方体，并且，所述第一容器在各面具有一个由水凝胶构成的透光性的窗部，
所述窗部以从所有的面都可以观察到所述细胞或者细胞组织的方式排列，以掌握所述细胞或者细胞组织的三维结构，并且，所述第一容器具有包围所述窗部的框部，
所述窗部具有50g/cm²以上且10000g/cm²以下的凝胶强度。
5.一种如权利要求1所述的细胞培养容器的制造方法，其中，该方法包括：从开口向第一容器的内部空间填充培养凝胶以及细胞或细胞组织的工序，
其中，所述第一容器的形状为立方体或长方体，并且，所述第一容器在一个面上具有所述开口，在每个其他面上具有一个由水凝胶构成的透光性的窗部，并且，所述窗部以从所有的面都可以观察到所述细胞或者细胞组织的方式排列，以掌握所述细胞或者细胞组织的三维结构，并且，所述第一容器具有包围所述窗部的框部。
6.根据权利要求5所述的细胞培养容器的制造方法，其中，该方法包括：在所述内部空间被培养凝胶以及细胞或细胞组织填充后，在所述开口形成由水凝胶构成的透光性的窗部的工序。
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