CN108290925A - 明胶酶抑制剂及其用途 - Google Patents

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Abstract

公开了新的明胶酶抑制剂、其制备方法、包括其的药物组合物和其在治疗和/或预防其中明胶酶的抑制是有用的病症中的用途，比如癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，心境障碍比如双相性精神障碍、压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症。

Description

明胶酶抑制剂及其用途
技术领域
本发明涉及明胶酶抑制剂、其制备方法、包括其的药物组合物和其在治疗和/或预防其中明胶酶的抑制是有用的病症中的用途，比如癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症。
背景技术
存在大量证据，细胞外基质(ECM)不仅充当支撑结构，而且对神经元发育和再生、突触可塑性、神经元兴奋性和网络活动的稳态调节具有显著的作用。的确，ECM对网络行为，因此对生理学过程比如认知，具有重要影响。明胶酶属于Matrixines家族(MMP)，其由能够降解ECM蛋白以及大量非ECM蛋白的锌依赖性肽链内切酶形成，比如生长因子、细胞因子、趋化因子、细胞表面受体、丝氨酸蛋白酶抑制剂以及其它MMP。MMP是分泌的或膜结合的蛋白酶并且在繁殖、生长、发育、血管生成、免疫应答、创伤愈合以及脑生理学中发挥重要的生理学作用。在许多病理学病症(包括肿瘤进展、神经变性、中风、炎症和病毒感染)期间，存在MMP具体而言明胶酶(MMP-2或明胶酶A和MMP-9或明胶酶B)的增强表达。
在脑中对明胶酶MMP-9的最初研究起初集中于其在具有变性成分的各种病理学病症中的可能作用。最近，MMP-9已经用作脑病理学中的重要扮演者，尤其用作突触可塑性中的关键分子。这些发现导致证明MMP-9在神经精神病学病症中的可能牵连的研究，所述神经精神病学病症比如癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，和药瘾。
已经描述了精神分裂症中谷氨酸信号传导的改变，其导致异常的突触可塑性。MMP-9已经显示为调节谷氨酸受体，以及调制生理学和形态学突触可塑性。借助于功能性基因多态性、抗精神病药的基因响应和血浆水平，MMP-9最近已经与精神分裂症相关。该疾病涉及感知和认知的损伤，以据信反映神经元电路中的修饰的三种阳性、阴性和认知症状告终，突触连通性的扰动，和树突棘的改变。显著地，染色体区20q11-13，在该处定位MMP-9基因，已经在精神障碍方面被广泛地研究并且与精神分裂症有关。MMP-9影响海马和前额皮质功能并且是在精神分裂症(一种其中前额皮质损伤是最普遍的病理学发现之一的病症)中潜在地涉及的感兴趣候选分子。而且，与精神分裂症有关的靶候选蛋白的一些具有与MMP-9或MMP-9-相互作用蛋白(比如脑源性神经营养因子(BDNF)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体等)的功能联系。异常升高的MMP-9水平已经在由几个作者(Yamamori，H.et al.，Neurosci Lett.，2013，(556)：37-41)报道的精神分裂症患者的血浆中发现。
在癫痫的发病机理中存在涉及MMP的大量证据。该疾病是脑功能障碍，其特征在于生成癫痫发作的持久性倾向和该病症的神经生物学、认知学、生理学和社会学结果。已经证明了延长的发作与高血清MMP-9水平有关。更重要地，在癫痫手术期间在脑组织中获得的最近研究报道了在局灶性皮质发育不良的致癫痫病灶(Konopka，A.et al.，Epilepsy Res.，2013，(1-2)：45-58)和结节性硬化症(Li，S.et al.，Brain Res，2012，(1453)：46-55)中以及在患者(其患有颞叶癫痫，没有潜在的细胞结构异常)的致癫痫皮质或海马病灶中增加的MMP-9免疫反应性。使用抗体微阵列的无偏见途径，已经在来自患有局灶性皮质发育不良的患者的组织中发现了MMP-1、-2、-3、-8、-10和-13的升高表达，不包括MMP-9(Konopka，A.etal.，EpilepsyRes.，2013，(1-2)：45-58)。但是，这些蛋白酶的表达在患者之中不与MMP-9的表达一样显著和/或一致。在这些其它MMP之中，特别突出的是在成人患者中MMP-2的上调。
自闭症谱系障碍(ASD)通过一系列症状在三个核心结构域中鉴定：社会互助、语言和感兴趣的范围，但是在大多数情况下它们的病因学是未知的。脆性X染色体综合征(FXS)是孤独症的主要遗传原因，因为大百分比的患有FXS的个体(46％)被共诊断患有ASD。MMP-9的高血浆活性已经在患有FXS的个体中被报道(Leigh，M.J.et al.，J Dev Behav Pediatr，2013，(34)：1849-1857)，而升高蛋白质量的MMP-9在来自ASD母亲的羊水中被检测到(Abdallah，M.W.et al.，Autism Res，2012，(5)：428-433)。因此，在高水平的MMP-9和ADS之间存在明确的联系。
MMP-9也已经在人药瘾、双相性精神障碍和压抑中涉及。由于在功能性的C(-1562)T处的MMP-9基因多态性的分析而提供一种联系，因为其导致较高的或较低的MMP-9表达。已经报道，该多态性频繁地在健康对象或者患有双相性精神障碍或精神分裂症的患者之间有区别(Han，H.et al.，Psychiatry Res，2011，(190)：163-164)。该多态性也已经与酒精成瘾有关(Samochowiec A et al，Brain Res，2010，1327：103-6)。除此之外，已经发现MMP-9基因多态性调节双相性精神障碍患者中的前额认知。已经报道了在双极性压抑期间在青年患者中增加的MMP-9水平(Rybakowski，J.K.，et al.，J Affect Disord，2013，(146)：286-289)。血浆中高水平的MMP-9已经在压抑中被检测到，这种血清水平与压抑的严重性有关(Yoshida，T.et al.，PLoS One，2012，(7)：e42676)。
MMP-9也被称为与变性疾病比如阿耳茨海默病(AD)有关联。已经显示了MMP参与AD中Aβ肽的形成和清除。事实上，增加的MMP-9水平已经在患有AD的患者的脑组织和血液中，具体地在淀粉样蛋白斑周围的反应性星形胶质细胞中被观察到，这暗示对斑积累的局部组织响应。几种研究已经证明了该金属蛋白酶参与体外和体内的Aβ分解代谢并且其是能够体外降解Aβ原纤维和原位降解Aβ斑的仅有的酶。此外，已经报道，在受体介导的sAPP-α释放中涉及MMP-9，并且MMP-9在体内在脑中展现α-分泌酶样活性(Fragkouli，A.，et al.，JNeurochem，2012，(121)：239-251)。MMP-2/MMP-9的合成抑制剂在原代培养中降低Aβ-介导的神经元死亡(Mizoguchi，H.，et al.，J Pharmacol Exp Ther，2009，(331)：14-22)。在相同研究中，GM60001治疗在脑室内施用Aβ之后是神经保护的并且改善小鼠中的认知。而且，MMP-9 KO小鼠不经历在野生型小鼠中通过Aβ注射诱发的记忆缺失。
MMP-9也已经被鉴定为在除了与突触可塑性有关的那些之外的过程和疾病病症中涉及。这些病症包括血管、肺和炎性疾病和癌症。在这方面，MMP-9，并且在较小程度下MMP-2，已经与血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，神经性疼痛，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，多发性硬化，脓毒症，癌症，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病相关联。
缺血性发作是血液供给不足的结果(起因于局部血栓形成或动脉栓塞)，产生降低的组织氧合并且因此生物能学扰动，其可能导致坏死和凋亡特性二者的细胞死亡。在暂时的血流灌注不足之后血液循环的恢复导致可能使组织损伤恶化的强健的炎性应答。然后炎性细胞的积累是缺血性组织中活性氧和氮种类以及促炎性细胞因子的高水平的原因。在其表达和活性的所有水平下MMP-9的急剧增加是中风结果的标志。MMP-9在中风后事件比如长期可塑性、血管重组和血管生成、免疫应答和炎症反应中涉及。阻断MMP(具体而言MMP-9，包括KO小鼠)已经被证明为针对缺血性发作和其结果是保护性的(Chaturvedi，M.，et al.，Mol.Neurobiol.，2014，(49)：563-573)。
通过对神经系统的多重损害(insult)触发的神经性疼痛的治疗是临床挑战，因为神经性疼痛发展的潜在机制仍然知之甚少。但是，最近的研究报道，在神经损伤之后在大鼠和小鼠中早期和晚期神经性疼痛发展需要不同的MMP。在脊髓神经损伤之后，MMP-9显示了与神经性疼痛的早期一致的在受伤的背根神经节(DRG)初级感觉神经元中快速的和短暂的上调，而MMP-2显示了与神经性疼痛的晚期一致的在DRG卫星细胞和脊髓星形胶质细胞中延迟的应答。鞘内施用MMP-9抑制剂或TIMP-1(一种MMP-9的内源组织抑制剂)在损伤之后的前几天(＜10)延迟机械性触摸痛(在痛刺激之后的中枢疼痛敏化)的发展。但是，当在脑损伤之后10天给予时，MMP-9的抑制对触摸痛没有作用，显示了MMP-9在神经性疼痛的早期发展中的关键作用。与MMP-9相比，在脊髓神经损伤之后的MMP-2上调显示了延迟模式。鞘内施用TIMP-2(一种MMP-2的内源抑制剂)或MMP-2的小合成抑制剂在损伤之后第1天时部分地减弱触摸痛，但是在之后的10天中几乎完全阻断触摸痛。这显示了在神经性疼痛的晚期中涉及MMP-2(Kawasaki，Y.，et al.，Nature Medicine，2008，(3)：331-336)。
在炎症应答期间，如果细胞装备有可以改造ECM的酶，则仅可能的是白细胞行进通过组织屏障，包括基底屏障膜。MMP因此是炎症细胞的关键效应分子。当在炎症之后在血管病中和在再生阶段中触发时，在自身免疫疾病期间，MMP可以在急性和慢性炎症中充当开关或充当精致的转变器(tuner)。因而，MMP生物学在急性和慢性炎症性和缺血性过程的定义、执行和分辨期中是重要的，并且因此，MMP抑制剂可以干扰这些。MMP抑制剂已经在急性和慢性炎症的许多动物模型中被测试，比如内霉素休克、多发性硬化和类风湿性关节炎。菌血症、脓毒性休克和内霉素休克是现代医院中最频繁的死亡原因。细菌细胞壁成分通过toll样受体的激活诱发全身应答，导致炎性细胞因子和酶的过多产生。缺乏MMP-9的小鼠具有改变的耐受细菌诱发的毒性，而缺乏蛋白酶抑制剂的小鼠更易受内霉素休克的影响。
多发性硬化是受遗传倾向、环境因素和损害中枢神经系统的免疫学效应机制影响的多因素疾病。MMP-9是多发性硬化中的免疫效应分子(Opdenakker，G.，et al.，LancetNeurol.，2003，(2)：747-756)。其在细胞迁移通过结蹄组织和血管壁中起作用并且损伤血脑屏障。其还溶解在多发性硬化和其它神经疾病中相关的蛋白质基底，比如髓鞘蛋白质、细胞粘附分子、细胞因子和趋化因子。已经在动物模型中获得了支持MMP-9在炎症性CNS损伤中的有害作用的证据。鼠科实验性自身免疫性脑炎(EAE)(一种多发性硬化的模型)，明胶酶MMP-2和MMP-9二者在疾病综合征的发展期间变得上调(Gijbels，k.，et al.，J.Neurosci.Res.，1993，(36)：432-440)。幼年MMP-9缺陷型小鼠具有对EAE的发展的抗性。双MMP2/MMP9敲除小鼠完全抵抗EAE的发展。MMP活性的药理学抑制在使用MMP抑制剂的几种实验中改善EAE的过程(Hewson，A.，et al.，Inflamm.Res.，1995，(44)：345-349)。使用MMP抑制剂在类风湿性关节炎的治疗中也可以是有用的。在类风湿性关节炎期间在胶原蛋白II的降解中涉及MPP-9，导致免疫显性表位的暴露和释放。此外，MMP对于炎症性白细胞的迁移是重要的。这暗示MMP抑制剂在类风湿性关节炎的治疗中可以是有用的，该想法已经在不同的动物模型中被确认(Agrawal，S.，et al.，J.Exp.Med.，2006，(203)：1007-1019)。
动脉粥样硬化和相关疾病，包括心肌梗塞和中风，常常与慢性炎性疾病比较。这基于组织病理学发现，比如泡沫状巨噬细胞的活化、细胞因子和趋化因子的局部产生、和MMP的涉及。使用具有遗传改变的小鼠的动物模型(转基因和敲除二者)已经加强了观点：MMP在血管病理学中是关键扮演者(Janssens，S.，et al.，Cardiovsac.Res.，2006，(69)：585-594和Tayebjee，M.H.，et al.，Curr.Med.Chem.，2005，(12)：917-925)。已经报道了MMP-9水平随着特发性心房颤动的进展增加(Li，M.et al.，J.Int.Med.Res.，2014，(1)：224-230)并且与主动脉瘤的发展相关联(Newman，K.M.，et al.，Arteriosclerosis and thrombosis：ajournal of vascular biology，1994，(8)：1315-1320)。MMP-9的抑制遏制主动脉瘤的生长(Lindeman，J.H.，et al.，Circulation，2009，(119)：2209-2216)。心肌梗塞之后的突然死亡可能于心脏破裂(一种涉及MMP的过程)发生。在小鼠研究中，证明了明胶酶在平衡金属蛋白酶的内源组织抑制剂(TIMP)中的关键作用。心肌梗塞可以通过利用MMP-2的口服抑制剂治疗小鼠逆转(Matsumura，S.，et al.，J.Clin.Invest.，2005，(115)：559-609)。
MMP-9在慢性炎性疾病包括溃疡性结肠炎和克罗恩病的发病机理中发挥着关键作用(Abraham，C.，et al.，N Eng J Med.，2009，(361)：2066-2078)，并且其在结肠组织中的上调已经显示为与人中的炎症性肠病的主动加剧(flare)一致(Gao，Q.，et al.，Dig LiverDis.，2005，(37)：584-592)。与来自人样本的数据一致，已经观察到在炎症性肠病的小鼠模型中的发炎结肠组织中升高的MMP-2和MMP-9蛋白表达和活化。而且，已经显示了结肠炎在MMP-9敲除小鼠，以及MMP-2和MMP-9双敲除小鼠中衰减。因而，MMP-2和MMP-9的伴随抑制在炎症性肠病中是治疗有效的(Grag，P.，et al.，Am J Physiol Gastrointest LiverPhysiol.，2009，(284)：15353-15357)。
癌症的死亡率主要由于不能阻止转移。新出现的证据已经强调了MMP在癌症散播的早期方面中的作用(Kessenbrock，K.，et al.，Cell，2010，(141)：52-67)。降解ECM的酶已经长期被视为肿瘤进展必需的。设想肿瘤细胞产生破坏肿瘤周围的基质屏障的酶，允许侵入周围的结蹄组织，进入和离开血管，并且转移至远部器官。MMP具有降解ECM的所有结构成分的能力。而且，MMP在几乎所有人和动物肿瘤中以及在大多数肿瘤细胞系中上调(Coussens，L.M.，et al.，Science，2002，(295)：2387-2392)。MMP-9与癌症侵入相关联。组织和血液中MMP-9的升高水平在癌症患者中被观察到，因而使得MMP-9对于癌症治疗是有吸引力的靶标，这是由于MMP-9降解胶原蛋白和层粘连蛋白的能力与其调节细胞迁移、增加血管生成和肿瘤生长的能力相关联(Bjorklund，M.，et al.，Biochim Biophys Acta，2005，(1755)：37-69)。
在病理学肺病症中，MMP和其生理学抑制剂(TIMP)异常地过表达并且在呼吸道中由一组不同的结构细胞产生。这些生物学活性的交替在创伤愈合和细胞运输中具有一些惊人效果。通过刺激的结构或炎性细胞引起的各种MMP的放松管制被认为参与许多肺病包括哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、肺纤维化和肺癌的病理生理学(Demedts，I.K.，et al.，Curr Opin Pharmacol，2005，(5)：257-63)。炎症过程的特征在于细胞外基质重塑和胶原沉积，其又要求增加水平的MMP-9(Kelly，E.A.，et al.，Am J Respir Crit Care Med，2000，(162)：1157-1161)。MMP-9的选择性抑制被认为促进这些相关的慢性炎性肺病中的治疗益处，因为其最近已经在COPD的治疗中被证明(Xie，S.S.，et al.，J Int Med Res，2014，(42)：1272-1284)。
根据这些实验证据，当前存在发现新化合物的需要，这些新化合物与其它MMP比如胶原酶(MMP-1)、溶基质蛋白酶(stromlysin)(MMP-3)和基质金属蛋白酶(matrylisin)(MMP-7)相比将是MMP-2和MMP-9的强力抑制剂并且将是选择性的。
发明内容
本发明人已经成功地发现，与抑制其它MMP比如胶原酶(MMP-1)、溶基质蛋白酶(MMP-3)和基质金属蛋白酶(MMP-7)的能力相比，式(I)的化合物家族能够以高效能抑制明胶酶MMP-2和MMP-9并且是选择性的。这两种性质使得本发明的化合物成为用于治疗癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症的理想候选，因为如上面所解释的，MMP-2和MMP-9已知在所述疾病中涉及并且还已知，选择性是降低当使用非选择性明胶酶抑制剂时产生的继发效应的水平的期望性质。
因此，本发明的一个方面涉及具有式(I)的化合物：
或其盐，
其中
AA1不存在或者是衍生自选自N-甲基-苯丙氨酸、N-甲基-色氨酸、N-甲基-酪氨酸和N-甲基-异亮氨酸的氨基酸的残基(rest)，
AA2不存在或者是衍生自选自N-甲基-苯丙氨酸、N-甲基-丙氨酸、N-甲基-β-丙氨酸和N-甲基-亮氨酸的氨基酸的残基，
G是包括1至10个碳原子的直链或支链亚烷基残基，其中所述残基中的一个或多个非邻近的亚甲基部分(-CH2-)可以被相应的氧原子(-O-)取代，
R1选自氢和苯基，
R2、R3和R4独立地选自氢和氟，
R5和R6独立地选自氢和氟。
本发明的另一个方面涉及用于制备如上面所限定的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物的方法。
本发明的另一个方面涉及药物组合物，其包括如上面所限定的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物，和药学上可接受的运载体、佐剂或媒介。
本发明的另一个方面涉及如上面所限定的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其用作药物，具体地用于预防和/或治疗癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症。
本发明的另一个方面涉及用于治疗或预防癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症的方法，优选地在哺乳动物中的，其中治疗量的如上面所限定的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物被施用至需要所述治疗的患者。
本发明的另一个方面涉及如上面所限定的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物用于制备药物的用途，所述药物具体地用于预防和/或治疗选自下列的疾病：癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症。
具体实施方式
在本发明的背景下，术语“衍生自式N(Me)H-R-COOH的氨基酸的残基”将被理解为双基-N(Me)-R-CO-。
在本发明的背景下，术语“亚烷基”被用于指式-CnH2n-的直链或支链烃残基。
在本发明的背景下，当在亚烷基中时，一个或多个非邻近亚甲基(-CH2-)据说被相应的氧原子(-O-)取代，其意思是所述亚甲基中的一个或多个不存在并且其位置被相应的氧原子(-O-)占据，形成醚(-O-)键，条件是两个邻近的亚甲基基团不能同时被氧原子取代，即得到的链不能包含过氧基(-O-O-)。因此，所述修饰的亚烷基残基的经验式将是CmH2mOx。所述基团的非限制性实例是正丙氧基、1-[2-(2-乙氧基-乙氧基)-乙氧基]-丙基和2-甲氧基-乙氧基甲基。
在本发明的背景下，当没有指出氨基酸或氨基酸残基的立体异构性时，将理解提及了所述氨基酸或氨基酸残基的可能立体异构体中的任一种。例如，提及异亮氨酸(Ile)包括D-异亮氨酸和L-异亮氨酸。
在本发明的背景下，使用一些缩写词和首字母缩略词并且它们的含义在下面提供：
Alloc：烯丙氧基羰基
Dab：2，4-二氨基丁酸
DBU：1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯
DCM：二氯甲烷
DIEA：N，N-二异丙基乙胺
DMF：二甲基甲酰胺
DMSO：二甲基亚砜
DIC：N，N′-二异丙基碳二亚胺
EDC：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
Fmoc：芴甲氧羰基
HFIP：六氟-2-丙醇或六氟异丙醇
HOAt：1-羟基-7-氮杂苯并三唑
HPLC：高效液相色谱
HPLC-MS：高效液相色谱-质谱
MeOH：甲醇
Oxyma pure：氰基(异亚硝基)乙酸乙酯
PyBOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷
TBTU：O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸
TFA：三氟乙酸
TIS：三异丙基硅烷
Tris：三(羟甲基)氨基甲烷或2-氨基-2-羟甲基-丙烷-1，3-二醇
术语“盐”必须被理解为根据本发明使用的活性化合物的任何形式，其中所述化合物处于离子形式或者是带电荷的并被偶联(缔合)至反荷离子(阳离子或阴离子)或在溶液中。该定义也包括季铵盐和活性分子与其它分子和离子的复合物，具体地，经由离子相互作用形成的复合物。定义具体包括生理学上可接受的盐；该术语必须被理解为等价于“药理学上可接受的盐”或“药学上可接受的盐”。
在本发明的背景下的术语“药学上可接受的盐”意思是当以用于治疗的适合方式使用，具体地在人和/或哺乳动物中应用或使用时，生理学上耐受(通常意思是其是无毒的，具体地，由于反荷离子)的任何盐。这些生理学上可接受的盐可以利用阳离子或碱形成，并且在本发明的背景下，被理解为由根据本发明的至少一种化合物(一般地为酸(去质子化的)，比如阴离子)形成的盐，具体地当在人和/或哺乳动物上使用时。这些生理学上可接受的盐也可以利用阴离子或酸形成，并且在本发明的背景下，被理解为由根据本发明的至少一种化合物(一般地质子化的，例如质子化的氮，比如阳离子)和至少一种生理学上耐受的阴离子形成的盐，具体地当在人和/或哺乳动物上使用时。在本发明的背景下，该定义具体包括由生理学上耐受的酸形成的盐，即特定活性化合物与生理学上耐受的有机或无机酸的盐，具体地当在人和/或哺乳动物上使用时。
药学上可接受的酸包括无机酸，比如盐酸、硫酸、磷酸、焦磷酸、氢溴酸、氢碘酸和硝酸，和有机酸，比如柠檬酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、抗坏血酸、草酸、琥珀酸、酒石酸、乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸和对甲苯磺酸。药学上可接受的碱包括碱金属(例如钠或钾)、碱土金属(例如钙或镁)的氢氧化物和有机碱(例如烷基胺、芳烷基胺(arylalkyilamine)和杂环胺)。
根据本发明的其它优选的盐是季铵化合物，其中阴离子(X-)的等价物与N原子的正电荷缔合。X-可以是各种无机酸的阴离子，比如，例如氯根、溴根、碘根、硫酸根、硝酸根、磷酸根，或有机酸的阴离子，比如乙酸根、马来酸根、富马酸根、柠檬酸根、草酸根、琥珀酸根、酒石酸根、苹果酸根、扁桃酸根、三氟乙酸根(trifluoracetate)、甲磺酸根和对甲苯磺酸根。X-优选地是选自氯根、溴根、碘根、硫酸根、硝酸根、乙酸根、马来酸根、草酸根、琥珀酸根和三氟乙酸根的阴离子。更优选地，X-是氯根、溴根、三氟乙酸根或甲磺酸根。
根据本发明的术语“溶剂化物”应当被理解为意思是根据本发明的活性化合物的任何形式，其中所述化合物通过非共价键结合至另一个分子(通常地极性溶剂)，特别地包括水合物和醇化物，例如，甲醇化物。优选的溶剂化物是水合物。
为式(I)的化合物的前药的任何化合物也在本发明的范围内。术语“前药”以其最宽泛的意义使用并且涵盖在体内转化为本发明的化合物的那些衍生物。前药的实例包括但不限于式(I)的化合物的衍生物和代谢物，包括可生物水解的部分，比如可生物水解的酰胺类、可生物水解的酯类、可生物水解的氨基甲酸酯类、可生物水解的碳酸酯类、可生物水解的酰脲类和可生物水解的磷酸酯类似物。具有羧基官能团的化合物的前药是羧酸的低级烷基酯。羧酸酯便利地通过使存在于分子上的羧酸部分的任一个酯化形成。前药通常使用熟知的方法制备，比如由Burger″Medicinal Chemistry and Drug Discovery 6th ed.(Donald，J.，Abraham ed.，2001，Wiley)，″Design and Applications of Prodrugs″(H.Bundgaard ed.，1985，Harwood Academic Publishers)和Krogsgaard-Larsen et al.″Textbook of Drug design and Discovery″Taylor&Francis(April 2002)描述的那些。
由上面描述的式(I)表示的本发明的化合物可以包括对映异构体和/或非对映异构体，这取决于手性中心是否存在。单一同分异构体、对映异构体或非对映异构体和其混合物落入本发明的范围内。
而且，本文提及的任何化合物可以作为互变异构体存在。具体地，术语互变异构体指的是在平衡状态下存在的化合物的两种或多种结构异构体中的一种并且容易地从一种同分异构体形式转化为另一种。一般的互变异构体对是胺-亚胺、酰胺-亚胺酸、酮-烯醇、内酰胺-内酰亚胺等。
除非另有说明，本发明的化合物也旨在包括同位素标记的形式，即区别仅在于存在一个或多个富同位素的原子的化合物。例如，如下化合物也在本发明的范围内：其具有呈现的结构，除了至少一个氢原子被氘或氚替换，或至少一个碳被富13C或14C的碳替换，或至少一个氮被富15N的氮替换。
式(I)的化合物，或其盐或溶剂化物优选地处于药学上可接受的或基本上纯的形式。药学上可接受的形式意思是，除其它方面外，具有药学上可接受水平的纯度，排除正常的药物添加剂比如稀释剂和运载体，并且不包括在正常剂量水平下被视为有毒的物质。药物物质的纯度水平优选地高于50％、更优选地高于70％、最优选地高于90％。在优选的实施方式中，其是高于95％的式(I)的化合物，或其盐、溶剂化物或前药。
如上面所指出的，术语“药学上可接受的盐、溶剂化物、前药”指的是任何盐、溶剂化物或任何其它化合物，其在施用至接收者之后能够提供(直接地或间接地)如本文描述的化合物。但是，将领会，式(I)的化合物的非药学上可接受的盐、溶剂化物和前药也落入本发明的范围内，因为那些在所述化合物的药学上可接受的盐、溶剂化物和前药的制备中可以是有用的。盐、溶剂化物和前药的制备可以通过本领域中已知的方法实施。
在本发明的一个实施方式中，基团AA1是衍生自选自N-甲基-色氨酸和N-甲基-异亮氨酸的氨基酸的残基。
在本发明的一个实施方式中，基团AA1和AA2不存在。
在本发明的另一个实施方式中，G选自-CH2-、-(CH2)3-、-(CH2)5-、-CH2-CH(CH3)-CH2-、-(CH2)7-、-CH2-CH2-CH2-CH(CH2-CH2-CH3)-、-O(CH2)3-、-(CH2)13-和-CH2-O-(CH2)2-O-CH2-。
在本发明的另一个实施方式中，R1-G选自CH3-、CH3-(CH2)2-、CH3-CH(CH3)-CH2-、-CH3-(CH2)6-、CH3-(CH2)4-、CH3-CH2-CH2-CH(CH2-CH2-CH3)-、苯基-O-(CH2)3-、CH3-(CH2)6-O-(CH2)3-和-CH2-O-(CH2)2-O-CH2。
在本发明的另一个实施方式中，R1-G选自CH3-(CH2)2-、CH3-CH(CH3)-CH2-、苯基-O-(CH2)3-、CH3-(CH2)6-、CH3-(CH2)4-和CH3-CH2-CH2-CH(CH3-CH2-CH3)-。在该实施方式中限定的化合物在穿过血脑屏障中是特别良好的。
在本发明的另一个实施方式中，R2、R3和R4中的一个是氢。
在本发明的另一个实施方式中，R2、R3和R4中的一个是氢并且另外两个是氟原子。
在本发明的另一个实施方式中，由R2、R3和R4取代的苯基是3，5-二氟苯基。
在本发明的另一个实施方式中，R5和R6二者是氢。
在本发明的一个实施方式中，如上文所限定的式(I)的化合物具有在下面的式中示出的立体异构体：
在另外优选的实施方式中，组合了不同取代基的上面描述的优选项。本发明也涉及在上面的式中的优选取代的这样的组合。
落入式(I)的本发明的具体单个化合物包括在下面列举的化合物：
●(2S)-1-乙酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(4-氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-1-乙酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-1-己酰基-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-1-丁酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-辛酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S，2S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4，4-二氟-1-己酰基-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(2-丙基戊酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(4-苯氧基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4，4-二氟-N-甲基-1-(4-苯氧基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-1-[(2S)-2-[乙酰基(甲基)氨基]-3-苯基-丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-1-[(2S)-2-[乙酰基(甲基)氨基]丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-1-[3-[乙酰基(甲基)氨基]丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-1-[(2S)-2-[[2-[丁酰基(甲基)氨基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基]-甲基-氨基]-4-甲基-戊酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-苯甲酰氨基-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-己酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
●(2S，4R)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-苯甲酰氨基-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4-氟-N-甲基-1-戊酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
或其药学上可接受的盐、同分异构体、前药或溶剂化物。
上面限定的式(I)的化合物可以通过由下面的一般方案说明的可用合成程序获得：
式(I)的化合物的合成途径的详细描述：
可选方案I：
将适合于通过其羰基偶联至Nα-Fmoc-Nγ-Alloc-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-Dab(Alloc)-OH)并且在裂解之后获得C-端羧酸基团的聚合物载体，比如2-氯三苯甲基树脂(III)，置于装备有聚乙烯多孔隔膜的注射器(反应容器)中。通过利用适合有机溶剂比如二氯甲烷(DCM)和二甲基甲酰胺(DMF)洗涤使树脂膨胀。
在聚合物载体膨胀之后，使用胺碱比如N，N-二异丙基乙胺(DIEA)在适合有机溶剂比如DMF中将Fmoc-Dab(Alloc)-OH附接至树脂。搅拌混合物1小时。其后，在不过滤混合物的情况下，加入无水甲醇以加帽(cap)树脂的剩余未反应部位。在过滤和洗涤之后，通过利用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶溶液和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物处理去除Fmoc以获得式(IV)的产物。一旦第一氨基酸被锚固，在容量瓶中收集滤液和洗涤液以通过UV测量量化树脂的所得装载量。也使用Kiser测试评估Fmoc去除。
在存在或不存在添加物比如1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAt)的情况下，使用活化剂比如六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)和胺碱比如在适合有机溶剂比如DMF中的DIEA，将式(V)的化合物：
附接至式(IV)的化合物以得到式(VI)的产物
在1至2小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。
使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶溶液和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除式(VI)的化合物中的Fmoc保护基团以得到式(VIIa)的化合物。
然后，将式(VIIa)的化合物首先与氨基保护基团比如邻硝基苯磺酰(oNBS)氯反应以得到式(VIII)的化合物。
然后使用甲基化试剂比如7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和对硝基苯磺酸盐的混合物甲基化上述化合物以得到式(IX)的产物。
随后，通过利用β-巯基乙醇和DBU处理树脂去除邻硝基苯磺酰(oNBS)保护基团以得到式(VII)的化合物。
一旦式(V)的化合物被偶联和甲基化，在存在或不存在添加物比如HOAt的情况下，使用活化剂比如PyBOP和胺碱比如在适合有机溶剂比如DMF中的DIEA，将式(X)的Fmoc-脯氨酸-OH衍生物偶联以得到式(XI)的化合物
其中R5和R6如上面所限定。在1至2小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶溶液和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除式(X)的脯氨酸衍生物中的Fmoc保护基团以得到式(XI)的化合物。
在存在或不存在添加物比如HOAt的情况下，使用活化剂比如PyBOP和胺碱比如DIEA在适合有机溶剂比如DMF中的DIEA，将Fmoc-AA2-OH锚固至式(XI)的产物上以得到式(XII)的产物，其中AA2如上面所限定。
在1至2小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用氯醌测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶溶液和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除AA2的Fmoc保护基团以得到式(III)的化合物。
在存在或不存在添加物比如HOAt的情况下，使用活化剂比如PyBOP和胺碱比如DIEA在适合有机溶剂比如DMF中的DIEA，将Fmoc-AA1-OH附接至式(XII)的产物上以得到式(XIV)的产物，其中AA1如上面所限定。
在1至2小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶溶液和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除AA1的Fmoc保护基团以得到式(XV)的化合物。
利用基团R1-G-CO-加帽式(XV)的化合物的氨基以得到式(XVI)的化合物。加帽过程利用羧酸R1-G-COOH的活化形式比如式R1-G-CO-O-CO-G-R1的酸酐或式R1-G-CO-X的羰基卤化物(其中R1和G如上面所限定并且X优选地是Cl、Br或I)在存在胺碱比如DIEA的情况下，在存在或不存在活化剂比如PyBOP的情况下，在存在或不存在活化物比如HOAt的情况下进行。反应的程度使用kasier测试监测。
通过在有机溶剂比如DCM中悬浮式(XVI)的化合物并且向其中加入苯基硅烷去除式(XVI)的化合物中的alloc保护基团，同时在悬浮过程中使N2冒气泡，以得到式(XVII)的化合物。然后，加入四(三苯基膦)钯(0)，并且N2冒气泡维持5分钟。然后，密封反应容器并且轨道振荡15min。在该时间之后，过滤反应并且彻底洗涤树脂。相同处理重复多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、甲醇(MeOH)和DMF彻底洗涤树脂。使用kasiser测试监测alloc保护基团的去除程度。
随后，使用3eq的式(XVIII)的化合物、3eq的N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIPCDI)和3eq的HOAt在DMF中将式(XVIII)的产物
偶联至式(XVII)的化合物的二氨基丁酸部分的侧链的氨基，其中R2、R3和R4如上面所限定。将混合物间歇地手动搅拌1小时。然后，滤出反应混合物并且利用DMF、MeOH和DCM彻底地洗涤树脂。使用Kasiser测试监测偶联反应的程度。当比色测试显示偶联反应没有完全完成时，实施式(XVIII)的化合物的再偶联步骤。该步骤得到式(XIX)的化合物。
使用六氟-2-丙醇(HFIP)从树脂裂解式(XIX)的化合物。将树脂利用DCM洗涤几次并干燥。通过将HFIP/DCM(1∶4)混合物加入式(XIX)的化合物获得式(XX)的化合物。在室温下搅拌混合物15min。过滤反应混合物并利用HFIP/DCM然后DCM清洗。在相同条件下重复裂解和洗涤步骤额外两次。其后，合并获得的滤液并且在真空下蒸发溶剂以得到式(XX)的化合物。
式(I)的化合物可以通过不同过程由式(XX)的化合物获得，下面显示了用于实施例的合成的两步过程：
过程A：
使用1.3eq的盐酸1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC·HCl)和1.3eq的添加物HOAt在存在5eq的胺碱比如N-甲基吗啉的情况下在DCM或等价有机溶剂中将3.5eq的中间体O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺与1eq的式(XX)的化合物反应。使得混合物在室温下反应20小时以得到式(XXI)的化合物。反应的程度使用HPLC和HPLC-MS监测。一旦反应完全，利用KHSO4、NaHCO3和盐水(每种3次)洗涤反应混合物。使用硫酸镁干燥获得的有机层，过滤并且在真空下蒸发。
最后，通过利用三氟乙酸(TFA)/水/三异丙基硅烷(TIS)(95∶2.5∶2.5)的混合物处理式(XXI)的化合物1小时获得式(I)的化合物。反应的完成程度使用HPLC和HPLC-MS监测。必要时，式(I)的化合物的粗品使用HPLC纯化。
过程B：
在胺碱比如N-甲基吗啉的存在下在冷的(-20℃)干燥四氢呋喃中将1eq的式(XX)的化合物与1.1eq的氯甲酸异丁酯和2.5eq的新鲜制备的羟胺溶液(*)反应。在-20℃下搅拌反应2小时，在2小时内使得反应达到0℃，然后使其在5℃下过夜。反应的进展通过薄层色谱(TLC)监测。一旦完成，反应的溶剂在真空下蒸发以得到式(I)的化合物。其后，将获得的粗品溶解在乙酸乙酯中并利用KHSO4、NaHCO3和盐水洗涤。然后，有机层利用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。
(*)通过利用1eq的KOH在MeOH中在0℃下溶解3eq的盐酸羟胺制备羟胺溶液。所得到的混合物在0℃下搅拌15分钟。KCl沉淀析出并且通过过滤去除。所得到的滤液这样被使用。
可选方案II：
将适合于通过其醇基团偶联至Fmoc-NH-OH并且在裂解之后获得异羟肟酸基团的聚合物载体，比如2-氯三苯甲基树脂(III)，置于装备有聚乙烯多孔隔膜的注射器(反应容器)中。通过利用适合有机溶剂比如二氯甲烷(DCM)和二甲基甲酰胺(DMF)洗涤使树脂膨胀。
在聚合物载体膨胀之后，使用酰胺碱比如N，N-二异丙基乙胺(DIEA)在适合有机溶剂比如DCM中将Fmoc-NH-OH附接至树脂。间歇地搅拌混合物24小时。其后，在不过滤混合物的情况下，加入无水甲醇以加帽树脂的剩余未反应部位。在过滤和洗涤之后，通过利用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物处理去除Fmoc以获得式(XXII)的产物。一旦连接体被锚固至聚合物载体，在容量瓶中收集滤液和洗涤液以通过UV测量量化树脂的所得装载量。也使用Kiser测试评估Fmoc去除。
使用偶联剂比如N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，在存在或不存在添加物比如氰基(异亚硝基)乙酸乙酯(Oxyma pure)的情况下在适合的有机溶剂比如DMF中将Nα-Fmoc-Nγ-Alloc-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-Dab(Alloc)-OH)附接至式(XXII)的聚合物载体以得到式(XXIII)的产物。在1小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。
使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除式(XXIII)的化合物中的Fmoc保护基团以获得式(XXIV)的化合物。
使用活化剂比如N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，在存在或不存在添加物比如氰基(异亚硝基)乙酸乙酯(Oxyma pure)的情况下在适合的有机溶剂比如DMF中将Nα-Fmoc-甲基异亮氨酸(Fmoc-NMeIle-OH)附接至式(XXIV)的化合物以得到式(XXV)的产物。在1小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。
使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除式(XXV)的化合物中的Fmoc保护基团以获得式(XXVI)的化合物。
一旦已经获得式(XXVI)的化合物，使用偶联剂比如N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，在存在或不存在添加物比如氰基(异亚硝基)乙酸乙酯(Oxyma pure)的情况下在适合的有机溶剂比如DMF中将式(X)的Nα-Fmoc-脯氨酸衍生物
偶联以获得式(XXVII)的产物，其中R5和R6如上面所限定。在1小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除式(X)的化合物中的Fmoc保护基团以获得式(XXVII)的化合物。
使用偶联剂比如N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，在存在或不存在添加物比如氰基(异亚硝基)乙酸乙酯(Oxyma pure)的情况下在适合的有机溶剂比如DMF中将Fmoc-AA2-OH锚固至式(XXVII)的产物以获得式(XXVIII)的产物，其中AA2如上面所限定。
在1小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用氯醌测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除AA2的Fmoc保护基团以获得式(XXIX)的化合物。
使用偶联剂比如N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，在存在或不存在添加物比如氰基(异亚硝基)乙酸乙酯(Oxyma pure)的情况下在适合的有机溶剂比如DMF中将Fmoc-AA1-OH锚固至式(XXIX)的产物以得到式(XXX)的产物，其中AA1如上面所限定。
在1小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联。使用胺碱溶液比如在DMF中的哌啶和/或哌啶/DBU/甲苯/DMF的混合物去除式(XXX)的化合物中的Fmoc保护基团以获得式(XXXI)的化合物。
使用偶联剂比如N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，在存在或不存在添加物比如氰基(异亚硝基)乙酸乙酯(Oxyma pure)的情况下在适合的有机溶剂比如DMF中将R1-G-部分附接至式(XXXI)的化合物，其中R1和G如上面所限定。在1小时的总反应时间期间搅拌混合物。偶联的程度可以使用Kaiser测试监测，并且如果需要，在相同的条件下进行再偶联以得到化合物(XXXII)。
通过在有机溶剂比如DCM中悬浮式(XXXII)的化合物并且向其中加入苯基硅烷去除式(XXXII)的化合物中的alloc保护基团，同时在悬浮过程中使N2冒气泡，以得到式(XXXIII)的化合物。然后，加入四(三苯基膦)钯(0)，并且N2冒气泡维持5分钟。然后，密封反应容器并且轨道地振荡15min。在该时间之后，过滤反应并且彻底洗涤树脂。相同处理重复多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。使用kasiser测试监测alloc保护基团的去除程度。
随后，使用偶联剂比如N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)，在存在或不存在添加物比如氰基(异亚硝基)乙酸乙酯(Oxyma pure)的情况下在适合的有机溶剂比如DMF中将式(XVIII)的产物偶联至化合物(XXXIII)的二氨基丁酸部分的侧链的氨基，其中R2、R3和R4如上面所限定。
在1小时的总反应时间期间搅拌混合物。然后，滤出反应混合物并且利用DMF、MeOH和DCM彻底洗涤树脂。使用kasiser测试监测偶联反应的程度。当比色测试显示偶联反应没有完全完成时，实施式(XVIII)的化合物的再偶联步骤。该步骤得到式(XXXIV)的化合物。
通过加入酸比如三氟乙酸(TFA)在DCM(TFA/DCM 5∶95)中从树脂裂解式(XXXIV)的化合物。在室温下搅拌混合物15min。在该时间之后，滤出树脂并且利用TFA/DCM(5∶95)并且然后DCM洗涤几次。然后，合并获得的滤液并且在真空下蒸发溶剂以得到式(I)的化合物。
实施例
实施例1：
(2S)-1-乙酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(4-氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-Dab(Alloc)-OH和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂中。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-L-异亮氨酸(Fmoc-L-Ile-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-Pro-OH，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理，去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在Dab部分的侧链上偶联4-氟苯甲酸，将在DMF中的3eq的所述酸、3eq的TBTU和6eq的DIEA加入至树脂。使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解直链侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸(hydroxamide)。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例1。使用反向色谱纯化化合物。
实施例2：
(2S)-1-乙酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-Dab(Alloc)-OH和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-Ile-OH，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)，实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂，去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-Pro-OH，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理，去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在Dab部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将在DMF中的3eq的所述酸、3eq的TBTU和6eq的DIEA加入至树脂。使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例2。使用反向色谱纯化化合物。
实施例3：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-1-己酰基-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-Dab(Alloc)-OH和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-Ile-OH，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-Pro-OH部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理，去除Fmoc基团。通过向树脂中加入20eq的己酸、10eq的偶联剂DPCDI和10eq的添加物HOAt将该酸偶联至Pro部分。手动地间歇搅拌反应持续60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在Dab部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将在DMF中的3eq的所述酸、3eq的TBTU和6eq的DIEA加入至树脂。使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例3。使用反向色谱纯化化合物。
实施例4：
(2S)-1-丁酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-Dab(Alloc)-OH和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-Ile-OH，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-Pro-OH部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入20eq的己酸、10eq的偶联剂DPCDI和10eq的添加物HOAt将该酸偶联至Pro部分。手动地间歇搅拌反应持续60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在Dab部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将在DMF中的3eq的所述酸、3eq的TBTU和6eq的DIEA加入至树脂。使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例4。使用反向色谱纯化化合物。
实施例5：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-Dab(Alloc)-OH和DIEA(4eq)加入552mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-Ile-OH，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-Pro-OH部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入20eq的3-甲基丁酸、10eq的偶联剂DPCDI和10eq的添加物HOAt将该酸偶联至Pro部分。手动地间歇搅拌反应持续60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在Dab部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将在DMF中的3eq的所述酸、3eq的TBTU和6eq的DIEA加入至树脂。使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解直链侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例5。使用反向色谱纯化化合物。
实施例6：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-辛酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-Dab(Alloc)-OH和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-Ile-OH，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-Pro-OH部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入20eq的辛酸、10eq的偶联剂DPCDI和10eq的添加物HOAt将该酸偶联至Pro部分。手动地间歇搅拌反应持续60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在Dab部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将在DMF中的3eq的所述酸、3eq的TBTU和6eq的DIEA加入至树脂。使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例6。使用反向色谱纯化化合物。
实施例7：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4，4-二氟-1-己酰基-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-Dab(Alloc)-OH和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-Ile-OH，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-(4，4-二氟)Pro-OH部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入20eq的己酸、10eq的偶联剂DPCDI和10eq的添加物HOAr将该酸偶联至Pro部分。手动地间歇搅拌反应持续60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在Dab部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将在DMF中的3eq的所述酸、3eq的TBTU和6eq的DIEA加入至树脂。使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例7。使用反向色谱纯化化合物。
实施例8：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(2-丙基戊酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的添加物oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入3eq的2-丙基戊酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure(其溶解在少量DMF中并且预混合2分钟)将该酸偶联至脯氨酸部分。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例8。使用反向色谱纯化化合物。
实施例9：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(4-苯氧基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-L-NMeIle-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入3eq的4-苯氧基丁酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure(其溶解在少量DMF中并且预混合2分钟)将该酸偶联至脯氨酸部分。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例9。使用反向色谱纯化化合物。
实施例10：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4，4-二氟-N-甲基-1-(4-苯氧基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-4，4-二氟-L-脯氨酸部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入3eq的4-苯氧基丁酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure(其溶解在少量DMF中并且预混合2分钟)将该酸偶联至脯氨酸部分。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。然后，滤出反应并且利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例10。使用反向色谱纯化化合物。
实施例11：
(2S)-1-[(2S)-2-[乙酰基(甲基)氨基]-3-苯基-丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-苯丙氨酸(Fmoc-NMe-L-Phe-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入至树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例11。使用反向色谱纯化化合物。
实施例12：
(2S)-1-[(2S)-2-[乙酰基(甲基)氨基]丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-L-丙氨酸(Fmoc-L-Ala-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ala氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入至树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例12。使用反向色谱纯化化合物。
实施例13：
(2S)-1-[3-[乙酰基(甲基)氨基]丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-β-丙氨酸(Fmoc-β-Ala-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在β-Ala氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入至树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例13。使用反向色谱纯化化合物。
实施例14：
(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[丁酰基(甲基)氨基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基]-甲基-氨基]-4-甲基-戊酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-亮氨酸(Fmoc-NMeLeu-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Nα-Fmoc-N(in)-Boc-N-甲基-L-色氨酸(Fmoc-NMe-L-Trp(Boc)-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x15’)处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入3eq的丁酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure(其溶解在少量DMF中并预处理2分钟)将该酸偶联至色氨酸部分。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。然后滤出反应并利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联3，5-二氟苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例14。使用反向色谱纯化化合物。
实施例15：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-苯甲酰氨基-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-己酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入3eq的己酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure(其溶解在少量DMF中并预处理2分钟)将该酸偶联至脯氨酸部分。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。然后滤出反应并利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例15。使用反向色谱纯化化合物。
实施例16：
(2S，4R)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-苯甲酰氨基-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4-氟-N-甲基-1-己酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
将1.5eq的商业可得的Fmoc-NH-OH和DIEA(10eq)加入至2mL DCM中的2-氯三苯甲基树脂。间歇地手动搅拌混合物24小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nγ-alloc-L-2，4-二氨基丁酸(Fmoc-L-Dab(alloc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-N-甲基-L-异亮氨酸(Fmoc-NMe-L-Ile-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxymapure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理去除Fmoc基团。其后，附接Fmoc-反式-4-氟-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)部分，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入树脂并且使得反应进行60分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。通过向树脂中加入3eq的己酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure(其溶解在少量DMF中并预处理2分钟)将该酸偶联至脯氨酸部分。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。然后滤出反应并利用DMF和DCM彻底地清洗树脂。使用氯醌测试监测反应程度。为了去除Alloc基团，将在DCM中的10eq苯基硅烷加入树脂，同时在混合过程中使N2冒气泡。然后，维持N2冒气泡加入0.1eq的Pd(PPh3)4，同时使每种原料很好地混合。然后，密封反应容器并振荡15分钟。在该时间之后，过滤反应并且彻底地洗涤树脂。重复相同处理多于两次。在最后一次处理之后，利用DCM、MeOH和DMF彻底洗涤树脂。为了在二氨基乙基部分的侧链上偶联苯甲酸，将3eq的所述酸、3eq的偶联剂DIC和3eq的oxyma pure溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。将所得混合物加入至树脂并且使得反应进行60分钟。在该时间之后，利用DMF和DCM洗涤树脂并且使用Kaiser测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入DCM/TFA(95∶5)的溶液从树脂裂解肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用DCM清洗树脂。该裂解过程重复两次。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂，得到实施例16。使用反向色谱纯化化合物。
比较实施例
比较实施例17：
(2S)-2-[[(2S)-1-乙酰基吡咯烷-2-羰基)氨基]-N-[(1S)-2-(羟氨基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基]戊二酰胺
将0.8eq的商业可得的Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-色氨酸(Fmoc-L-Trp(Boc)-OH)和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nδ-三苯甲基-L-谷氨酰胺(Fmoc-L-Gln(Trt)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’)处理去除Fmoc基团。然后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例17。使用反向色谱纯化化合物。
比较实施例18：
(2S)-2-乙酰氨基-N-[(1S)-2-[[(1S)-1-(羟氨基甲酰基)-2-甲基-丁基]氨基]-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基]戊二酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-异亮氨酸(Fmoc-L-Ile-OH)和DIEA(4eq)加入至2mLDMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-色氨酸(Fmoc-L-Trp(Boc)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x5’、1x 10’)处理去除Fmoc基团。然后，附接Fmoc-L-谷氨酸5-叔丁酯(Fmoc-L-Glu(tBu)-OH)，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例18。使用反向色谱纯化化合物。
比较实施例19：
(2S)-1-[(2S)-2-乙酰氨基-5-氨基-5-氧-戊酰基]-N-[(1S)-1-(羟氨基甲酰基)-2-甲基-丁基]吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Fmoc-L-异亮氨酸(Fmoc-L-Ile-OH)和DIEA(4eq)加入至2mLDMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’)处理去除Fmoc基团。然后，附接Nα-Fmoc-Nδ-三苯甲基-L-谷氨酰胺(Fmoc-L-Gln(Trt)-OH)，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。
为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并且通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例19。使用反向色谱纯化化合物。
比较实施例20：
(2S)-2-[[(2S)-1-乙酰基吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-N-[(1S)-2-(羟氨基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基]戊二酰胺
将0.8eq的商业可得的Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-色氨酸(Fmoc-L-Trp(Boc)-OH)和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nδ-三苯甲基-L-谷氨酰胺(Fmoc-L-Gln(Trt)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Gln部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Gln氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例20。使用反向色谱纯化化合物。
比较实施例21：
(2S)-1-乙酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-2-(羟氨基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-色氨酸(Fmoc-L-Trp(Boc)-OH)和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-L-异亮氨酸(Fmoc-L-Ile-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Ile部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Ile氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。为了乙酰化肽的N-部分末端部分，将20eq的乙酸酐和20eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应30分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例21。使用反向色谱纯化化合物。
比较实施例22：
(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-2-(羟氨基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-十四酰-吡咯烷-2-甲酰胺
将0.8eq的商业可得的Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-色氨酸(Fmoc-L-Trp(Boc)-OH)和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Fmoc-L-亮氨酸(Fmoc-L-Leu-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’)处理去除Fmoc基团。然后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。为了加帽肽的N-部分末端部分，将3eq的十四烷酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应60分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1N HCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例21。使用反向色谱纯化化合物。
比较实施例23：
(2S)-2-[[(SS)-1-己酰基吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-N-[(1S)-2-(羟氨基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基]戊二酰胺
将0.8eq的商业可得的Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-色氨酸(Fmoc-L-Trp(Boc)-OH)和DIEA(4eq)加入至2mL DMF中的树脂。间歇地手动搅拌混合物1小时。其后，将0.5mL/g的MeOH加入至反应混合物以加帽树脂的剩余反应点。在15分钟之后，滤出溶液并且利用DCM、DMF和MeOH彻底地洗涤树脂。通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理树脂实现Fmoc去除。为了偶联Nα-Fmoc-Nδ-三苯甲基-L-谷氨酰胺(Fmoc-L-Gln(Trt)-OH)，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入至树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应的程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’)处理去除Fmoc基团。为了N-甲基化Gln部分的氨基，使用可力丁(10eq)作为碱在DMF中利用邻硝基苯磺酰氯(4eq)保护游离氨基，使其与树脂反应30分钟。然后，利用DMF和DCM清洗树脂，并且在相同条件下再次重复保护步骤。使用Kaiser测试监测保护程度。通过利用3eq的7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]十-5-烯和4eq的对硝基苯磺酸盐在DMF中处理树脂30分钟(3次处理)实现氨基的N-甲基化。在处理之间，利用DMF和DCM彻底地洗涤树脂。在Gln氨基的N-甲基化之后，通过利用10eq的β-巯基乙醇和5eq的DBU(1x 10’和1x 40’)处理树脂去除邻硝基苯磺酰基保护基团。邻硝基苯磺酰基的去除使用氯醌测试评估。然后，附接Fmoc-L-脯氨酸(Fmoc-L-Pro-OH)，为了那个目的，将3eq的氨基酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA溶解在少量DMF中并且预混合2分钟。其后，将混合物加入树脂并且使得反应进行90分钟。使用Kaiser测试监测反应程度。然后通过利用在DMF中的20％哌啶(1x 5’、1x 10’和1x 15’)处理和利用哌啶/DBU/甲苯/DMF(5∶5∶20∶70)(1x 5’)的混合物额外处理去除Fmoc基团。为了加帽肽的N-部分末端部分，将3eq的己酸、3eq的偶联剂TBTU和6eq的DIEA加入树脂。使得混合物反应60分钟并且使用氯醌测试监测反应程度。为了裂解肽，利用DCM洗涤树脂几次并通过抽吸干燥。通过加入HFIP/DCM(1∶4)的溶液从树脂裂解线性侧链保护的肽，使得混合物反应15min。然后，过滤反应混合物并利用HFIP/DCM清洗树脂。再次重复该裂解过程。合并所有滤液并在真空下蒸发溶剂。粗品肽被用于在不经过在先纯化的情况下在溶液中形成异羟肟酸。将肽溶解在DCM中。其后，加入3.5eq的O-(2，4-二甲氧基苄基)羟胺、5eq的4-甲基吗啉、1.3eq的偶联剂EDC·HCl和1.3eq的添加物HOAt并且使得混合物在N2气氛下反应过夜。使用HPLC监测反应程度。一旦获得期望的产物，利用1NHCl、水和盐水洗涤混合物。利用硫酸镁干燥有机层，过滤并蒸发。其后，将TFA/水/TIS(95∶2.5∶2.5)的混合物加入肽粗品并且轻微地搅拌混合物2小时。其后，在N2流下蒸发TFA，得到实施例23。使用反向色谱纯化化合物。
实验：
新型化合物对基质MMP-2和MMP-9的抑制效果的测定
一般考虑：所有实验在1X反应缓冲液中进行，该反应缓冲液获得自10X反应缓冲溶液。10X反应缓冲液的内容物为：50mL的0.5M Tris-HCl、1.5M NaCl、50mM CaCl2和2mM叠氮化钠，pH 7.6。为了获得1X反应缓冲液，将4mL的10X反应缓冲液稀释在36mL的H2O中。
MMP-2抑制试验：
在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达的重组MMP-2获得自Merck-Millipore(产品目录号PF023-5UG)。来自缀合的猪皮荧光素的DQ明胶(MMP-2底物)获得自Life Technologies(产品目录号E12055)。
制备MMP-2用于活性试验：MMP-2被提供为原液(0.1mg/mL)。在1X反应缓冲液中稀释酶至5μg/mL的最终浓度。
制备DQ明胶(底物)溶液用于活性试验：将底物的固体形式溶解在水中从而获得1mg/mL的原液。
过程：在96孔微量滴定板中进行酶试验，其允许同时监测多个反应。对于每个反应，将86.3μL的1X反应缓冲液(pH 7.6)、1.7μL的MMP-2(最终浓度85ng/mL)和2μL的相应的新化合物加入每个孔。新化合物的原液在DMSO中制备(100mM)，并且稀释液由该原液利用DMSO制备。最终，将10μL的底物加入在每个孔中的混合物(最终浓度50μg/mL)。在室温下在定轨摇床(100rpm)中培育反应2小时。
新化合物的抑制活性采用荧光测定法测量。激发和发射波长分别为483和525nm。
MMP-9抑制试验：
表达的重组MMP-9获得自Merck-Millipore(产品目录号PF140-5UG，在实施例1-9和比较实施例中使用)和Enzo(产品目录号SE360-0010，在实施例10-16中使用)。来自缀合的猪皮荧光素的DQ明胶(MMP-9底物)获得自Life Technologies(产品目录号E12055)。
制备MMP-9用于活性试验：MMP-9被提供为原液(0.1mg/mL)。在1X反应缓冲液中稀释酶至5μg/mL的最终浓度。
制备DQ明胶(底物)溶液用于活性试验：将底物的固体形式溶解在水中从而获得1mg/mL的原液。
过程：在96孔微量滴定板中进行酶试验，其允许同时监测多个反应。对于每个反应，将84.6μL的1X反应缓冲液(pH 7.6)、3.4μL的MMP-9(最终浓度85ng/mL)和2μL的相应的新化合物加入每个孔。新化合物的原液在DMSO中制备(100mM)，并且稀释液由该原液利用DMSO制备。最终，将10μL的底物加入在每个孔中的混合物(最终浓度50μg/mL)。在室温下在定轨摇床(100rpm)中培育反应4小时。
新化合物的抑制活性采用荧光测定法测量。激发和发射波长分别为483和525nm。
测量每种化合物在几个浓度点(在100pM至200μM MMP的范围内)下的抑制活性。根据方程式1计算对MMP-2和MMP-9的抑制活性。对于每种新化合物，测量在存在(a)和不存在(b)相应MMP的情况下的荧光。最大荧光(0％抑制活性)获得自在不存在抑制化合物的情况下相应MMP的样品。为了估计新化合物的抑制效能，针对化合物的log浓度绘活性，使用GraphPad Prism软件调节至s形曲线，并且从所得曲线测定IC50值，其限定为抑制相应MMP活性的50％需要的化合物浓度。
其中：
a对应于在底物+测试化合物+MMP存在的情况下的荧光强度
b对应于在底物+测试化合物存在的情况下的荧光强度
c对应于在底物+MMP存在的情况下的荧光强度
d对应于在底物存在的情况下的荧光强度
新化合物显示了针对MMP-2和MMP-9的高抑制效能。结果在表1中总结。
表1：MMP-2和MMP-9的抑制
针对相关的MMP-2和MMP-9蛋白酶的抑制活性：MMP-1、MMP-3和MMP-7抑制试验
一般考虑：所有实验在1X反应缓冲液中进行，该反应缓冲液获得自10X反应缓冲溶液。10X反应缓冲液的内容物为：50mL的0.5M Tris-HCl、1.5M NaCl、50mM CaCl2和2mM叠氮化钠，pH 7.6。为了获得1X反应缓冲液，将4mL的10X反应缓冲液稀释在36mL的H2O中。
MMP-1抑制试验：
在大肠杆菌中表达的重组MMP-1获得自Enzo Life Sciences(产品目录号BML-SE180)。Mca-PLGL-Dpa-AR-NH2(荧光肽底物)获得自R&D Systems(产品目录号ES001)。
制备MMP-1用于活性试验：MMP-1被提供为原液(0.55mg/mL)。在1X反应缓冲液中稀释酶至276nM的最终浓度。
MMP-1肽底物被提供为在DMSO中的原液(6mM)。对于试验，在1X反应缓冲液中稀释底物至100μM的浓度。
过程：在96孔微量滴定板中进行酶试验，其允许同时监测多个反应。对于每个反应，将86μL的1X反应缓冲液(pH 7.6)、2μL的MMP-1(最终浓度5.52nM)和2μL的相应的新化合物加入每个孔。新化合物的原液在DMSO中制备(100mM)，并且稀释液由该原液利用DMSO制备。最终，将10μL的底物加入在每个孔中的混合物(最终浓度10μM)。在室温下在定轨摇床(100rpm)中培育反应4小时。
新化合物的抑制活性采用荧光测定法测量。激发和发射波长分别为320和405nm。
MMP-3抑制试验：
在大肠杆菌中表达的重组MMP-3获得自Merck-Millipore(产品目录号44217)。Mca-RPKPVE-Nval-WRK(Dnp)-NH2(荧光肽底物)获得自R&D Systems(产品目录号ES002)。
制备MMP-3用于活性试验：MMP-3被提供为原液(0.1mg/mL)。在水中稀释酶至0.005mg/mL的最终浓度。
MMP-3肽底物被提供为在DMSO中的原液(4.5mM)。对于试验，在1X反应缓冲液中稀释底物至100μM的浓度。
过程：在96孔微量滴定板中进行酶试验，其允许同时监测多个反应。对于每个反应，将84.6μL的1X反应缓冲液(pH 7.6)、3.4μL的MMP-3(最终浓度7.7nM)和2μL的相应的新化合物加入每个孔。新化合物的原液在DMSO中制备(100mM)，并且稀释液由该原液利用DMSO制备。最终，将10μL的底物加入在每个孔中的混合物(最终浓度10μM)。在室温下在定轨摇床(90rpm)中培育反应4小时。
新化合物的抑制活性采用荧光测定法测量。激发和发射波长分别为320和405nm。
MMP-7抑制试验：
在大肠杆菌中表达的重组MMP-7得自Merck-Millipore(产品目录号44270)。Mca-PLGL-Dpa-AR-NH2(荧光肽底物)获得自R&D Systems(产品目录号ES001)。
制备MMP-7用于活性试验：MMP-7被提供为原液(2.1mg/mL)。在水中稀释酶至0.005mg/mL的最终浓度。
MMP-7肽底物被提供为固体(1mg)。通过加入214.7μL的DMSO获得底物在DMSO中的4mM原液。其后，在1X反应缓冲液中制备100μM的底物溶液。
过程：在96孔微量滴定板中进行酶试验，其允许同时监测多个反应。对于每个反应，将84.6μL的1X反应缓冲液(pH 7.6)、3.4μL的MMP-7(最终浓度8.3nM)和2μL的相应的新化合物加入每个孔。新化合物的原液在DMSO中制备(100mM)，并且稀释液由该原液利用DMSO制备。最终，将10μL的底物加入在每个孔中的混合物(最终浓度10μM)。在室温下在定轨摇床(90rpm)中培育反应4小时。
新化合物的抑制活性采用荧光测定法测量。激发和发射波长分别为320和405nm。
测量每种化合物在几个浓度点(1、10、100和200μM)下的抑制活性。根据方程式1计算对MMP-1、MMP-3和MMP-7的抑制活性，并且如上面对于MMP-2和MMP-9所解释的计算IC50值。
IC50值在表2中示出。
表2.对MMP-1、MMP-3和MMP-7的IC50
容易看出，当将表2的值(示出了对于MMP-1、MMP-3和MMP-7的IC50)与表1的那些(示出了对于MMP-2和MMP-9的IC50)相比时，本发明的化合物对于MMP-2和MMP-9是高度选择性的。
化合物的渗透性能的测定
平行人工膜渗透性试验(PAMPA)
在Kansy et al.，J.M.Chem.1998；41(7)：1007-10中描述的平行人工膜渗透性试验(PAMPA)在此被用于测定化合物通过被动扩散穿过血脑屏障(BBB)的能力(Di L et al.，Eur.J.Med.Chem.2003；38(3)：223-32)。化合物的有效渗透率(Pe)在200μM的最初浓度下测量。根据制造商的指示，从商业的浓缩液制备缓冲溶液。使用0.5M NaOH溶液将pH调节至7.4。新化合物的原液在DMSO中制备并且利用缓冲溶液稀释至最终200μM浓度(0.5％DMSO含量)。分离PAMPA夹心物(sandwich)并且将每个供体孔填充200μM的化合物溶液。将受体板置于供体板内，确保膜的下面与缓冲液接触。将4μL的磷脂质在十二烷中的混合物(20mg/ml)加入至每个孔的过滤器，并且将200μL的缓冲溶液加入至每个受体孔。在室温下在饱和湿度气氛中在100rpm的轨道搅拌下覆盖并培育板4小时。在4小时之后，受体和供体隔室的内含物通过HPLC分析：将来自供体板的每个孔的150μL和来自受体板的每个孔的150μL转移至HPLC小瓶，将每种样品注入反向C18柱(150mm x 4.6mm x 5μm， )(来自受体孔的100μL/注射，来自供体板的10μL/注射，和对于t0参考)。也使用质谱法(MALDI-TOF)确认运输。
使用的磷脂质混合物是猪极性脑脂质提取物，由Avanti polar lipids提供，具有下列组成：12.6％磷脂酰胆碱(PC)、33.1％磷脂酰乙醇胺(PE)、18.5％磷脂酰丝氨酸(PS)、4.1％磷脂酰肌醇(PI)、0.8％磷脂酸和30.9％的其它化合物。
4小时之后的有效渗透率(Pe)使用方程式2计算并且运输的百分比(T％)使用方程式3计算：
其中：
t是时间(h)
Ca(t)是在时间t时受体孔中的化合物浓度
并且Cd(t0)是在t0时供体孔中的化合物浓度。
基于在表4中示出的指示性Pe值，新型化合物显示了穿越BBB的良好渗透性(表5)。
表4：指示性Pe值
指示性Pe值(cm/s) 在CNS内的运输
Pe≥4·10-6 良好
2·10-6≤Pe＜4·10-6 中等
Pe＜2·10-6 低
表5：新化合物的有效渗透率(Pe)和运输百分比

Claims (15)

1.式(I)的化合物：
或其盐，
其中
AA1不存在或者是衍生自选自N-甲基-苯丙氨酸、N-甲基-色氨酸、N-甲基-酪氨酸和N-甲基-异亮氨酸的氨基酸的残基，
AA2不存在或者是衍生自选自N-甲基-苯丙氨酸、N-甲基-丙氨酸、N-甲基-β-丙氨酸和N-甲基-亮氨酸的氨基酸的残基，
G是包括1至10个碳原子的直链或支链亚烷基残基，其中所述残基中的一个或多个非邻近的亚甲基部分(-CH2-)可以被相应的氧原子(-O-)取代，
R1选自氢和苯基，
R2、R3和R4独立地选自氢和氟，
R5和R6独立地选自氢和氟。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中AA1和AA2不存在。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中G选-CH2-、-(CH2)3-、-(CH2)5-、-CH2-CH(CH3)-CH2-、-(CH2)7-、-CH2-CH2-CH2-CH(CH2-CH2-CH3)-、-O(CH2)3-、-(CH2)13-和-CH2-O-(CH2)2-O-CH2-。
4.根据权利要求3所述的化合物，其中R1-G选自CH3-(CH2)2-、CH3-CH(CH3)-CH2-、苯基-O-(CH2)3-、CH3-(CH2)6-、CH3-(CH2)4-和CH3-CH2-CH2-CH(CH3-CH2-CH3)-。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中R2、R3和R4中的一个为氢。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中R2、R3和R4中的一个是氢并且其余两个为氟原子。
7.根据权利要求6所述的化合物，其中由R2、R3和R4取代的苯基是3，5-二氟苯基。
8.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其中R5和R6二者是氢。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其具有下式：
10.根据权利要求1所述的化合物，其选自：
·(2S)-1-乙酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(4-氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-1-乙酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-1-己酰基-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-1-丁酰基-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-辛酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S，2S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4，4-二氟-1-己酰基-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(2-丙基戊酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-(4-苯氧基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4，4-二氟-N-甲基-1-(4-苯氧基丁酰基)吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-1-[(2S)-2-[乙酰基(甲基)氨基]-3-苯基-丁酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-1-[(2S)-2-[乙酰基(甲基)氨基]丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-1-[3-[乙酰基(甲基)氨基]丙酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-1-[(2S)-2-[[2-[丁酰基(甲基)氨基]-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基]-甲基-氨基]-4-甲基-戊酰基]-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-苯甲酰氨基-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-N-甲基-1-己酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
·(2S，4R)-N-[(1S)-1-[[(1S)-3-苯甲酰氨基-1-(羟氨基甲酰基)丙基]氨基甲酰基]-2-甲基-丁基]-4-氟-N-甲基-1-戊酰基-吡咯烷-2-甲酰胺
或其药学上可接受的盐、同分异构体、前药或溶剂化物。
11.药物组合物，其包括根据权利要求1-10中任一项所述的化合物和药学上可接受的运载体、佐剂或媒介。
12.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物，其用作药物。
13.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物，其用于预防和/或治疗癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症。
14.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物用于制造预防和/或治疗下列疾病的药物中的用途：癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症。
15.用于预防和/或治疗癫痫，精神分裂症，阿耳茨海默病，孤独症(具体地与脆性X染色体综合征相关联)，智力迟钝，双相性精神障碍，心境障碍比如双相性精神障碍，压抑，血管病比如缺血性发作和动脉粥样硬化，炎性疾病比如多发性硬化、类风湿性关节炎和炎症性肠病，药瘾，神经性疼痛，肺病比如哮喘和慢性阻塞性肺疾病，癌症和脓毒症的方法，其中治疗量的权利要求1-10中任一项所述的化合物被施用至需要所述治疗的患者。
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107987126B (zh) * 2017-12-18 2018-10-02 哈尔滨工业大学 4位苯丙酰胺羟基化修饰的内吗啡肽类似物及其合成方法和应用
JPWO2022097540A1 (zh) * 2020-11-05 2022-05-12

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0345359A1 (en) * 1987-12-17 1989-12-13 Fuji Yakuhin Kogyo Kabushiki Kaisha Novel hydroxamic acid derivative
WO1992022523A2 (en) * 1991-06-14 1992-12-23 Research Corporation Technologies, Inc. Peptide derivatives of collagenase inhibitor
WO1998015525A1 (fr) * 1996-10-07 1998-04-16 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Acides hydroxamiques

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009097893A1 (en) * 2008-02-04 2009-08-13 Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. Methods for the treatment of cardiac disease associated to myocardial fibrosis using an inhibitor of pcp

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0345359A1 (en) * 1987-12-17 1989-12-13 Fuji Yakuhin Kogyo Kabushiki Kaisha Novel hydroxamic acid derivative
WO1992022523A2 (en) * 1991-06-14 1992-12-23 Research Corporation Technologies, Inc. Peptide derivatives of collagenase inhibitor
WO1998015525A1 (fr) * 1996-10-07 1998-04-16 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Acides hydroxamiques

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MARK WHITTAKER等: "Design and Therapeutic Application of Matrix Metalloproteinase Inhibitors", 《CHEM. REV.》 *
P SERRA等: "MMP-2 selectivity in hydroxamate-type inhibitors", 《CURR MED CHEM.》 *
SHINJIRO ODAKE等: "Vertebrate Collagenase Inhibitor. I. Tripeptidyl Hydroxamic", 《CHEM. PHARM. BULL.》 *
SNEHASIKTA SWARNAKAR等: "The Gelatinases and Their Inhibitors:The Structure–Activity Relationships", 《MATRIX METALLOPROTEINASE INHIBITORS》 *

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