CN108219510A - 基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的制备和应用 - Google Patents

基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的制备和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及了一种基于半花菁染料的过氧化亚硝基(ONOO‑)荧光探针的制备和应用，该荧光探针的结构式为：本发明提供了以IR‑780、3‑硝基苯酚、氯化亚锡等为原料合成该荧光探针的制备方法；该荧光探针是一种近红外、高选择性的比率过氧化亚硝基荧光探针；首先，该荧光探针对ONOO‑表现出很高的灵敏度，荧光强度比值(F460/F708)增强153倍；其次，该荧光探针对ONOO‑表现出很高的选择性，不受其他活性氧、活性氮、活性硫以及生物硫醇的干扰；并且，该荧光探针与ONOO‑作用迅速，响应时间在80秒以内；此外，该荧光探针已成功应用于细胞成像研究，可以检测细胞内ONOO‑含量的变化。

Description

基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的制备和应用
技术领域
本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的制备和应用。
背景技术
过氧化亚硝基(ONOO-)是一种重要的活性氧，是由一氧化氮(NO)和超氧阴离子(O2.-)反应生成的产物(R.Radi,J.Biol.Chem.,2013,288,26464-26472)。作为一种强氧化剂和强亲核试剂，ONOO-能够与多种生物分子发生反应，比如蛋白质、脂质、核酸等，最终导致细胞死亡(L.Liaudet,G.Vassalli,P.Pacher,Front.Biosci.,2009,14,4809-4814)。并且，ONOO-还可作为信号分子参与信号传导过程(B.C.Dickinson,C.J.Chang,Nat.Chem.Biol.,2011,7,504-511)。此外，过氧化亚硝基的水平异常和一些常见的疾病相关，如心血管疾病，神经退行性疾病，炎症和糖尿病(J.S.Beckman,M.Carson,C.D.Smithand W.H.Koppenol,Nature,1993,364,584–585；H.Wiseman and B.Halliwell,Biochem.J.,1996,313,17–29；S.M.Schieke,K.Briviba,L.O.Klotz and H.Sies,FEBSLett.,1999,448,301–303；P.Pacher,J.S.Beckman and L.Liaudet,Physiol.Rev.,2007,87,315–424)。由于过氧化亚硝基有着重要的生理及临床意义，因此设计有效的方法去精确检测它的含量就显得非常必要。
近年来，由于荧光探针具有操作简单，灵敏度高，对生物样品无损害、可实现的时空分辨等优点，引起了人们的广泛关注(H.Zhu,J.L.Fan,J.J.Du,X.Peng,J.Acc.Chem.Res.,2016,49,2115-2126)。到目前为止，利用ONOO-的强氧化性和亲核性，开发了许多荧光探针来检测ONOO-(J.Zhou,Y.Li,J.N.Shen,Q.Li,R.Wang,Y.F.Xu,X.H.Qian,RSC Adv.,2014,4,51589-51592；X.F.Yang,X.Q.Guo,Y.B.Zhao,Talanta.,2002,57,883-890；F.B.Yu,P.Li,B.S.Wang,K.L.Han,J.Am.Chem.Soc.,2013,135,7674-7680；T.Peng,N.K.Wong,X.Chen,Y.K.Chan,D.H.Ho,Z.Sun,J.J.Hu,J.Shen,H.EI-Nezami,D.Yang,J.Am.Chem.Soc.,2014,136,11728-11734；Z.N.Sun,H.L.Wang,F.Q.Liu,Y.Chen,P.K.H.Tam,D.Yang,Org.Lett.,2009,11,1887-1890；Y.Li,X.Xie,X.Yang,M.Li,X.Jiao,Y.Sun,X.Wang,B.Tang,Chem.Sci.,2017,8,4006-4011)。但是，这些探针存在一些问题：(1)探针的荧光团(如荧光素、萘酰亚胺、氟硼吡咯等)的发射波长较短，这限制了这些探针在生物体内的应用；(2)以前所报道的这些探针对于高反应活性氧的选择性较低，这是因为ONOO-与ClO-和H2O2都属于高反应活性氧，有效区分ONOO-与ClO-、H2O2是非常困难的；(3)这些荧光探针大多是以单个荧光发射峰强度变化作为响应信号的，容易受到一些环境因素(如设备效率，温度，探针浓度等)的影响。因此，设计和合成具有长波长发射，高选择性的比率型荧光探针是非常有意义的。
花菁染料是目前荧光探针领域中应用比较广泛的一类染料，它具有摩尔吸光系数大、荧光量子产率高等优点。特别是，基于花菁类的探针具有近红外发射，因此组织穿透力强，不易受到生物自体荧光的干扰，对生物成像更有利。据文献报道，花菁类荧光探针已被用来检测生物硫醇、H2O2和HNO(C.Han,H.Yang,M.Chen,Q.Su,W.Feng,F.Li,ACS appliedmaterials&interfaces.,2015,7,27968-27975；H.Chen,W.Lin,H.Cui,W.Jiang,Chem.Eur.J.,2015,21,733-745；L.Yuan,W.Lin,S.Zhao,W.Gao,B.Chen,L.He,S Zhu,J.Am.Chem.Soc.,2012,134,13510-13523；A.T.Wrobel,T.C.Johnstone,S.J.Lippard,J.Am.Chem.Soc.,2014,136,4697-4705)。但是，还没有基于花菁类染料的探针被用于检测ONOO-，因此设计和合成一个花菁类探针来检测ONOO-是非常必要的。
发明内容
根据所提出的要求，本发明人对此进行了深入研究，在付出了大量创造性劳动后，提供了一种基于半花菁的近红外，高选择性的比率型过氧化亚硝基荧光探针。
本发明的技术方案是，一种基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针，其结构式如下：
一种基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的制备方法。步骤如下：
在100mL圆底烧瓶中,将2.5当量的3-硝基苯酚，2.5当量的氢化钠(60％，在矿物油中)溶于无水DMF中，室温下，在氮气中搅拌10分钟。然后，通过注射器加入1当量IR-780，继续在室温下搅拌12小时。减压浓缩，将剩余物溶于CH2Cl2，用去离子水洗涤三次，无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，所得物质溶解在甲醇中。加入20当量SnCl2和2mL浓HCl，将反应溶液加热至70℃并搅拌过夜。然后，用饱和Na2CO3中和，过滤除去沉淀物，并用CH2Cl2洗涤。将收集的滤液和洗涤液用水处理三次，并用无水Na2SO4干燥。通过减压蒸馏除去溶剂，粗产品用CH2Cl2/CH3OH体积比为50:1的洗脱剂进行柱层析，得到绿色固体产物(产率70％)，即为荧光探针。
一种基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的性能研究。首先，研究了该探针的荧光光谱性质，加入ONOO-之前，荧光探针有近红外(708nm)的荧光发射峰；加入ONOO-之后，在可见区(460nm)出现了蓝色发射峰。并且随着ONOO-浓度的增大，探针分子的近红外荧光强度不断降低，蓝色荧光强度不断增强。当加入50μM的ONOO-时，荧光强度比值(F460/F708)增强153倍，因此可以比率检测ONOO-。该探针的检测范围从0.04μM到50μM，检测限为13nM，这说明该探针可以高灵敏的检测ONOO-。其次，研究了探针的紫外吸收光谱，在没有加入ONOO-时，探针在680nm处有吸收带；加入ONOO-后，680nm处的吸收峰逐渐减小，在360nm附近出现新的吸收峰，溶液颜色从蓝色变为无色。接着，研究了探针的选择性，考察了探针与活性氧(OCl-,H2O2,1O2,ROO·,·OH)，活性氮(NO,NO2 -,NO3 -)，活性硫(SO3 2-,HSO3 -)以及生物硫醇(Cys,GSH)的荧光响应情况。结果发现，只有ONOO-能引起荧光光谱的改变，其他检测物对探针的荧光光谱没有明显的影响。最后，研究了pH值对荧光探针测定ONOO-的影响，当pH值在7.0到8.0之间时，不影响荧光探针对ONOO-的测定。此外，该荧光探针响应迅速，响应时间在80秒以内。
一种基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的应用。在细胞中加入荧光探针，红色通道可以观察到的较强的荧光，而在蓝色通道几乎没有荧光，这说明细胞中的ONOO-较低。细胞用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)处理，然后用探针染色，发现蓝色通道荧光明显增强，而红色通道荧光减弱；用氨基胍盐酸盐(AG)处理抑制细胞内ONOO-的产生，发现蓝色通道的荧光减弱，红色通道的荧光增强。这些结果说明荧光探针Cy-NH2能监控细胞内ONOO-含量的变化，这为监控人体内和过氧化亚硝基相关病变提供一种可靠的手段。
附图说明
图1为荧光探针的合成路线。
图2为荧光探针与不同浓度的ONOO-作用后的荧光光谱图。
横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。荧光探针的浓度均为5μM，ONOO-浓度分别为：0,5,10,15,20,25,30,35,40,50μM。发射波长为708nm对应的激发波长为680nm,发射波长为460nm对应的激发波长为360nm。插图为荧光探针与ONOO-作用前后的荧光图片。
图3为荧光探针对不同ONOO-浓度的荧光线性响应图。
图4为荧光探针与ONOO-作用后的紫外可见吸收光谱图。
横坐标为波长，纵坐标为吸光度。荧光探针的浓度均为5μM，ONOO-浓度为0,5,10,15,20,25,30,35,40,50μM。插图为ONOO-作用前后探针在日光灯下的图片。
图5为荧光探针的选择性图。
荧光探针的浓度均为5μM，ONOO-浓度为50μM，其它分析物浓度均为500μM。
图6为pH对荧光探针的影响图。
图7为荧光探针与ONOO-作用后荧光强度随时间变化的关系曲线图。
图8为细胞毒性试验。横坐标为荧光探针的浓度，纵坐标为细胞的存活率。
图9荧光探针与ONOO-作用的细胞成像图。(a)细胞用探针染色0.5h。(b)细胞用LPS和IFN-γ处理10h，然后用探针染色0.5h。(c)细胞用LPS、IFN-γ和AG处理10h，然后用探针染色0.5h。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明，但不限于此。
实施例1：
荧光探针的合成
合成路线如图1。在100mL圆底烧瓶中，将3-硝基苯酚(174mg,1.25mmol)和氢化钠(30.8mg,1.25mmol)溶于6mL无水DMF中，室温下，在氮气中搅拌10分钟。然后，通过注射器加入IR-780(334mg,0.5mmol)，继续在室温下搅拌12小时。减压浓缩，将剩余物溶于CH2Cl2，用去离子水洗涤三次，无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，所得物质溶解在30mL甲醇中。加入SnCl2(2g,10mmol)和浓HCl(2mL)，将反应溶液加热至70℃并搅拌过夜。然后，用饱和Na2CO3中和，过滤除去沉淀物，并用CH2Cl2洗涤。将收集的滤液和洗涤液用水处理三次，并用无水Na2SO4干燥。通过减压蒸馏除去溶剂，粗产品用CH2Cl2/CH3OH体积比为50:1的洗脱剂进行柱层析，得到绿色固体产物(144mg，产率70％)，即为荧光探针。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝13.6Hz,1H),7.41-7.34(m,3H),7.25-7.22(m,2H),7.05(d,J＝9.6Hz 1H),6.94(d,J＝8.4Hz,1H),6.68(s,1H),5.92(d,J＝14.0Hz,1H),3.98(s,2H),2.74(m,2H),2.63(m,2H),1.91(m,4H),1.24(s,6H),1.07-1.05(m,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ172.6,163.8,156.7,156.1,141.3,140.9,140.1,129.5,128.5,125.0,122.6,121.8,116.7,114.6,114.1,110.1,98.8,98.0,49.4,45.7,29.7,28.8,24.4,20.6,11.7.MS(TOF):411.1.
实施例2：
荧光探针和ONOO-溶液配制
探针溶液的制备：称取一定量探针溶解在DMF中，配成1×10-3M的探针溶液。ONOO-溶液的配制：将0.70M的H2O2溶液、0.60M的HCl溶液、0.60M的NaNO2溶液混合，并迅速加入1.5M的NaOH溶液，过量的H2O2用二氧化锰除去，保存在-20℃的冷冻环境中。使用前化冻使用，ONOO-浓度的确定，需要测定该溶液在302nm处的吸光度A，计算公式为:C ONOO-＝A/1.67(mM)。
实施例3：
荧光探针与ONOO-作用的荧光光谱的测定
图2为荧光探针与ONOO-作用的荧光光谱，荧光探针的浓度为5μM，ONOO-的浓度依次为0,5,10,15,20,25,30,35,40,50μM。第一个激发波长为680nm，发射波长范围为690～750nm；第二个激发波长为360nm，发射波长范围为420～520nm。狭缝宽度为5.0nm/5.0nm，所用的荧光测定仪器为日立F4600荧光分光光度计。从图2可以看出，加入ONOO-之前，荧光探针有近红外(708nm)的荧光发射峰；加入ONOO-之后，在可见区(460nm)出现了蓝色发射峰。这是因为探针分子被ONOO-氧化，导致断裂，共轭结构变小，从而产生短波长的蓝色荧光。并且随着ONOO-浓度的增大，探针分子的近红外荧光强度不断降低，蓝色荧光强度不断增强。当加入50μM的ONOO-时，荧光强度比值(F460/F708)增强153倍，因此可以比率检测ONOO-。图3为探针对不同ONOO-浓度的线性响应图。荧光强度跟ONOO-的浓度呈现线性关系，线性范围是4.0×10-9～50.0×10-6M，检测限是13nM。这说明该探针可以高灵敏的检测ONOO-。
实施例4：
荧光探针与ONOO-作用的紫外可见吸收光谱的测定
图4为荧光探针与ONOO-作用后的紫外可见吸收光谱图，荧光探针的浓度为5μM，ONOO-的浓度依次为0,5,10,15,20,25,30,35,40,50μM。紫外可见吸收光谱测定用的仪器为安捷伦Cary60紫外可见分光光度计。从图2中可以看出，在没有加入ONOO-时，探针在680nm处有吸收带；加入ONOO-后，680nm处的吸收峰逐渐减小，在360nm附近出现新的吸收峰，溶液颜色从蓝色变为无色。
实施例5：
荧光探针对ONOO-测定的选择性
图5为荧光探针对ONOO-测定的选择性图。考察在浓度为5μM的荧光探针溶液中加入ONOO-(50μM)及其活性氧(OCl-,H2O2,1O2,ROO·,·OH)，活性氮(NO,NO2 -,NO3 -)，活性硫(SO3 2-,HSO3 -)以及生物硫醇(Cys,GSH)(500μM)的荧光响应情况。从图5中可以看出，只有ONOO-能引起荧光光谱的改变，其他检测物对探针的荧光光谱没有明显的影响。这些结果表明，荧光探针对ONOO-有较好的选择性。
实施例6：
溶液pH值对荧光探针测定ONOO-的荧光性质的影响
考察pH值对荧光探针测定ONOO-的荧光光谱的影响，其结果如图6。我们研究的pH范围为2.0～12.0，荧光探针的浓度为5μM，ONOO-的浓度为50μM。从图中可以看出，荧光探针随着pH的变化，荧光强度比值(F460/F708)基本不变，说明pH对探针本身没有很大的影响。然而，加入ONOO-之后，当pH<6，荧光强度也基本不变，这是因为在酸性条件下，ONOO-不能稳定存在；在pH在7～8范围内，荧光强度比值显著增强。当pH>7，荧光强度比值有所下降。综上所述，当pH值在7.0到8.0之间时，不影响荧光探针对ONOO-的测定，是比较合适的pH值范围，这非常有利于该探针用于实际样品中ONOO-的测定。
实施例7：
荧光探针与ONOO-作用的响应时间的测定
我们研究了荧光探针对ONOO-的响应时间，其结果如图7。从图中可以看出，该探针对ONOO-的响应时间不到80秒，这能够满足在实际样品中进行实时监测时对响应时间的要求。从图7我们还可以看出，荧光强度达到最大值后，在之后的时间里，荧光强度不再发生变化，这表明此荧光探针光稳定性较好。
实施例8：
荧光探针在活细胞中的应用
首先，我们做了细胞毒性试验，如图8所示。当加入0～50μM ONOO-探针，细胞的成活率均在90％以上，因此可以说明，该荧光探针毒性较小，可应用于检测活细胞内的ONOO-。然后，我们研究荧光探针在活细胞中的应用，选择巨噬细胞RAW264.7进行共聚焦显微成像，结果如图9所示。在细胞中加入荧光探针，红色通道可以观察到的较强的荧光，而在蓝色通道几乎没有荧光，这说明细胞中的ONOO-较低(图9a)。文献报道脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)可以共同刺激巨噬细胞释放OONO-。细胞用LPS和IFN-γ预先处理10小时，然后用探针染色0.5h，蓝色通道荧光明显增强，而红色通道荧光减弱(图9b)；细胞用LPS、IFN-γ和AG处理10h，然后用探针染色0.5h，蓝色通道的荧光减弱，红色通道的荧光增强(图9c)。这些结果说明荧光探针能监控细胞内ONOO-含量的变化，这为监控人体内和过氧化亚硝基相关病变提供一种可靠的手段。

Claims (3)

1.一种基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的结构如下：
。
2.根据权利要求1所述的一种基于半花菁染料的过氧化亚硝基荧光探针的制备方法，其特征在于，反应步骤如下：
在100 mL圆底烧瓶中，将2.5当量的3-硝基苯酚，2.5当量的氢化钠溶于无水DMF中，室温下，在氮气中搅拌10分钟，然后，通过注射器加入1当量IR-780，继续在室温下搅拌12小时，减压浓缩，将剩余物溶于CH2Cl2，用水洗涤三次，无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，所得物质溶解在甲醇中，加入20当量SnCl2和2mL浓HCl，将反应溶液加热至70℃并搅拌过夜，然后，用饱和Na2CO3中和，过滤除去沉淀物，并用CH2Cl2洗涤，将收集的滤液和洗涤液用水处理三次，并用无水Na2SO4干燥，通过减压蒸馏除去溶剂，粗产品用体积比为50:1的CH2Cl2/CH3OH洗脱剂进行柱层析，得到绿色固体产物，即为所述的荧光探针。
3.根据权利要求1所述的一种基于半花菁的过氧化亚硝基荧光探针的应用，其特征在于，所述荧光探针已成功应用于细胞成像研究，可以检测细胞内过氧化亚硝基含量的变化。
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Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109929548A (zh) * 2019-04-15 2019-06-25 济南大学 一种用于羧肽酶a检测的新型近红外荧光探针
CN110128414A (zh) * 2019-05-16 2019-08-16 湘潭大学 一种基于半花菁染料的缺氧荧光探针的制备和应用
CN110128435A (zh) * 2019-06-03 2019-08-16 湘潭大学 一种过氧化亚硝基比率型荧光探针的制备和应用
CN110669503A (zh) * 2019-11-07 2020-01-10 湘潭大学 一种一氧化碳近红外荧光探针的制备和应用
CN111995745A (zh) * 2020-08-25 2020-11-27 华南理工大学 一种双锁型聚合物及其制备方法和应用
CN113278304A (zh) * 2021-07-07 2021-08-20 广西师范大学 一种双比率型半花菁类染料分子及其合成方法和应用
CN113583013A (zh) * 2021-08-31 2021-11-02 南通大学 一种pH敏感的比率型半花菁-罗丹明染料及其制备方法
CN113801105A (zh) * 2021-09-30 2021-12-17 山西医科大学第一医院 线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针
CN114295569A (zh) * 2022-01-21 2022-04-08 中国药科大学 半花菁分子光学探针在检测亚硫酸氢根的应用
CN114591633A (zh) * 2022-01-23 2022-06-07 大连理工大学 一类氧杂蒽-半花菁近红外荧光染料，其合成方法及应用
CN114591632A (zh) * 2022-01-23 2022-06-07 大连理工大学 一类氮杂吲哚-半花菁染料、其合成方法及应用
CN114874639A (zh) * 2022-05-12 2022-08-09 大连理工大学 一类新型半花菁近红外荧光染料，其合成方法及应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104946240A (zh) * 2015-05-28 2015-09-30 中国科学院海洋研究所 一种硫化物荧光探针及其制备方法
CN106753341A (zh) * 2016-12-27 2017-05-31 湘潭大学 一种近红外碱性磷酸酶荧光探针的制备方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104946240A (zh) * 2015-05-28 2015-09-30 中国科学院海洋研究所 一种硫化物荧光探针及其制备方法
CN106753341A (zh) * 2016-12-27 2017-05-31 湘潭大学 一种近红外碱性磷酸酶荧光探针的制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
XINYUAN HE等: "Design, synthesis and application of a near-infrared fluorescent probe for in vivo imaging of aminopeptidase N", 《CHEM.COMMUN.》 *

Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109929548B (zh) * 2019-04-15 2020-10-09 济南大学 一种用于羧肽酶a检测的新型近红外荧光探针
CN109929548A (zh) * 2019-04-15 2019-06-25 济南大学 一种用于羧肽酶a检测的新型近红外荧光探针
CN110128414B (zh) * 2019-05-16 2022-04-01 湘潭大学 一种基于半花菁染料的缺氧荧光探针的制备和应用
CN110128414A (zh) * 2019-05-16 2019-08-16 湘潭大学 一种基于半花菁染料的缺氧荧光探针的制备和应用
CN110128435A (zh) * 2019-06-03 2019-08-16 湘潭大学 一种过氧化亚硝基比率型荧光探针的制备和应用
CN110128435B (zh) * 2019-06-03 2021-07-27 湘潭大学 一种过氧化亚硝基比率型荧光探针的制备和应用
CN110669503A (zh) * 2019-11-07 2020-01-10 湘潭大学 一种一氧化碳近红外荧光探针的制备和应用
CN110669503B (zh) * 2019-11-07 2022-10-28 湘潭大学 一种一氧化碳近红外荧光探针的制备和应用
CN111995745A (zh) * 2020-08-25 2020-11-27 华南理工大学 一种双锁型聚合物及其制备方法和应用
CN111995745B (zh) * 2020-08-25 2021-07-20 华南理工大学 一种双锁型聚合物及其制备方法和应用
CN113278304A (zh) * 2021-07-07 2021-08-20 广西师范大学 一种双比率型半花菁类染料分子及其合成方法和应用
CN113583013B (zh) * 2021-08-31 2022-05-17 南通大学 一种pH敏感的比率型半花菁-罗丹明染料及其制备方法
CN113583013A (zh) * 2021-08-31 2021-11-02 南通大学 一种pH敏感的比率型半花菁-罗丹明染料及其制备方法
CN113801105A (zh) * 2021-09-30 2021-12-17 山西医科大学第一医院 线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针
CN114295569A (zh) * 2022-01-21 2022-04-08 中国药科大学 半花菁分子光学探针在检测亚硫酸氢根的应用
CN114591633A (zh) * 2022-01-23 2022-06-07 大连理工大学 一类氧杂蒽-半花菁近红外荧光染料，其合成方法及应用
CN114591632A (zh) * 2022-01-23 2022-06-07 大连理工大学 一类氮杂吲哚-半花菁染料、其合成方法及应用
CN114874639A (zh) * 2022-05-12 2022-08-09 大连理工大学 一类新型半花菁近红外荧光染料，其合成方法及应用

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