CN108107038A - 一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物分析领域,具体涉及一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法。本发明包括以下步骤:a)以pH值为0.5~2.5的盐酸溶液作为溶出介质;b)将溶出介质预热至37.0±0.5℃,溶出介质的加入量在500~1000mL之间;c)将一粒胶囊加入溶出度试验仪的转篮中,进行溶出度实验,设定转篮的转速在50~100rpm之间;d)在设定的时间点抽取溶出液,过滤,采用酸性染料比色法测定溶出液中总生物碱的量;e)检测对照品的吸光度,计算夏天无胶囊中总生物碱类成分的溶出度。本发明通过优化夏天无胶囊中总生物碱的溶出度检测中的条件参数,获得最优检测条件,提高了检测准确度和重复性。
Description
技术领域
本发明属于药物分析领域,具体涉及一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法。
背景技术
中药固体制剂应用广泛,但目前尚缺乏有效、可靠的中药固体制剂评价技术,通常是根据《中国药典》选择某一种或几种成分进行定量测定来控制其质量。但中药复方固体制剂的药效是多成分协同作用的结果,单纯检测一种或几种指标成分会导致与整体药效的偏差,不能完全衡量中药固体制剂的质量,并且这些定量测定的指标不一定是在生物体内发挥药效的物质,所以中药固体制剂质量的评价方法有待进一步提升。
药物溶出度是指药物从片剂、胶囊剂等固体制剂在规定的介质中溶出的速度和程度。药物的溶出度直接影响药物在体内的吸收和利用,是评价药物质量的一个内在指标,也是一种控制药物制剂质量的体外检测方法。目前化学药的许多制剂如:片剂、胶囊剂等早已将溶出度测定作为常规质控方法,但许多中药制剂的质量控制没有溶出度测定的要求。现行的中药制剂质量标准中,多数都是依靠崩解时限检查作为所有片剂、胶囊等在体内吸收的评定标准。这显然是不够完善的,因为崩解仅仅是药物溶出的最初阶段,而后面的继续分散和溶解过程,崩解时限检查是无法控制的,而溶出度检查却包括了崩解及溶解过程溶出度检测已成为评价制剂处方和生产工艺的重要手段,也是评价制剂活性成分生物利用度和药物质量的内在指标。
中药固体制剂的溶出度评价研究较少,通常是借鉴化学药质量控制模式对单个或少数指标成分的量进行分析测定。中药制剂往往是多种成分发挥综合作用,单一成分的溶出不能全面反应中药固体制剂的溶出行为。由于中药制剂中所含有的成分较多,因此很难对每一个单一成分的溶出行为进行研究,但是中药制剂多数以有效部位的形式发挥作用,即相似的一类成分含有相类似的结构,例如中药制剂中常常发挥作用的生物碱类、黄酮类、皂苷类、多糖类等成分。对有效部位的溶出行为进行研究,可以较为全面的反应中药制剂的溶出行为,从而对其质量进行控制。
夏天无为罂粟科植物伏生紫堇Corydalis decumbens(Thunb.)Pers.的干燥块茎,又名一粒金丹、野延胡、洞里神仙、伏地延胡索、落水珠等。性味甘、微辛、温,归肝经。其能行气活血、通络止痛。临床上常用于治疗腰椎间盘突出症、坐骨神经痛、风湿性关节炎等。目前已开发出的夏天无制剂很多,其中,夏天无胶囊是临床常用品种。夏天无主要含生物碱类成分,总生物碱含量为1.71%-2.88%。迄今为止已从夏天无中分离到30多种生物碱,多属于苄基异喹啉类。夏天无中生物碱是夏天无胶囊的主要有效成分,目前证实其药理作用包括降血压作用、抗心律失常作用、对脑和下肢循环的作用、解痉作用、镇痛作用、抗凝血作用、抗炎作用、保肝作用、促智作用、有抗疟疾作用等。《中国药典》2015年版收载的夏天无口服固体制剂标准中,并未有溶出度项目的检测,因此,采用夏天无总生物碱的溶出度对夏天无胶囊的质量进行控制,具有明显的创新性和合理性。
夏天无总生物碱含量测定方法,主要有重量法、酸碱滴定法、酸性染料比色法等。重量法需要药品质量比较大,误差较大,重现性差。酸碱滴定法灵敏度较低,所需样品量很大。而酸性染料比色法是以嗅甲酚紫作为反离子,用磷酸盐缓冲液作水相,氯仿作有机相,采用离子对。提取比色法抽提形成呈色离子对化合物,以原阿片碱为对照,处测定夏天无中总生物碱含量,该法灵敏度较高、专属性强、重现性好,操作方便。
发明内容
针对现有技术中存在的上述不足,本发明提供一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法。
为了达到上述发明目的,本发明采用以下技术方案:
一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,所述方法包括以下步骤:
a)配置盐酸溶液,以盐酸溶液作为溶出介质;
b)将溶出介质加入溶出杯中,并将溶出介质预热至预设温度;
c)将一粒胶囊加入溶出度试验仪的转篮中,将转篮置于所述溶出介质中进行溶出度实验,设定转篮的转速在50~100rpm之间;
d)在设定的时间点抽取溶出液,过滤,采用酸性染料比色法测定溶出液中总生物碱的量;
e)检测对照品的吸光度,计算夏天无胶囊中总生物碱类成分的溶出度。
作为优选方案,所述溶出介质的pH值为0.5~2.5。
作为优选方案,所述预设温度为37.0±0.5℃。
作为优选方案,所述溶出介质的加入量为500~1000mL。
作为优选方案,所述溶出介质的加入量为500mL。
作为优选方案,转篮在溶出介质中浸泡时间为30~60min。
作为优选方案,检测吸光度的方法为紫外-可见分光光度法。
作为优选方案,所述酸性染料比色法所采用的酸性染料为澳甲酚紫、溴甲酚绿、香草醛中的一种。
作为优选方案,所述酸性染料比色法所采用的水相为磷酸盐缓冲溶液,萃取所采用的有机试剂为氯仿。
作为优选方案,所述抽取溶出液的体积为0.5~10mL。
本发明与现有技术相比,有益效果是:本发明采用酸性染料比色法,利用紫外-可见分光光度计对夏天无胶囊中的总生物碱的溶出度进行测定,快速简便、结果准确,能够有效的控制夏天无胶囊的质量。
附图说明
图1是本发明实施例的溶出度线性试验图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的技术方案作进一步描述说明,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明提供一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,本发明所提供的方法包括以下步骤:
a)以pH值为0.5~2.5的盐酸溶液作为溶出介质;
b)将溶出介质预热至37.0±0.5℃,溶出介质的加入量在500~1000mL之间;
c)将一粒胶囊加入溶出度试验仪的转篮中,进行溶出度实验,设定转篮的转速在50~100rpm之间;
d)在设定的时间点抽取溶出液,过滤,采用酸性染料比色法测定溶出液中总生物碱的量;
e)检测对照品的吸光度,计算夏天无胶囊中总生物碱类成分的溶出度。
在本发明中,首先应配制溶出介质,所述的溶出介质为盐酸溶液,盐酸溶液的pH值应与人体的胃酸环境pH相同或相近,设定在0.5~2.5之间,优选为pH1.2的盐酸溶液,以模拟夏天无胶囊在胃中的溶出。溶出介质在配制的过程中应符合常规的配制要求,包括混合均匀以及应排除空气等要求。将溶出介质装入溶出度试验仪的溶出杯中,本发明所述的溶出度试验仪是指的符合《中国药典》2015年版要求的溶出试验装置,对该装置的具体厂家并未限定。装入溶出杯中的溶出介质的体积为500~1000mL之间,优选为500mL,具体用量应满足漏槽条件及检测限的要求。开启溶出度试验仪的加热装置,使溶出介质保持在37.0±0.5℃,该温度与人体体温相同或相近。采用转篮法测定夏天无胶囊中总生物碱的溶出度,本发明中所述的转篮法特指《中国药典》2015年版第四部中特性检查法中0931溶出度和释放度测定法中的第一法(篮法)。取一粒夏天无胶囊放置在转蓝中,并将转篮浸入保温的溶出介质中,浸入的程度应符合《中国药典》对溶出度试验的要求。设定转篮的转速在50~100rpm之间,优选的转速为50rpm,转篮的转动模拟人体胃部的蠕动。试验维持时间在30~60min以内,抽取溶出液,抽取溶出液的位置应符合《中国药典》对溶出度试验的要求,抽取的溶出液的量应满足检测的需求。将溶出液用过滤器过滤,过滤装置可以是微孔滤膜或者滤纸及其他合适的装置。将过滤后的溶出液置于分液漏斗中,加一定体积的溴甲酚紫溶液及磷酸盐缓冲液,再精密加入一定体积的氯仿,振摇提取后,静置分层,分取澄清的氯仿层溶液,照紫外-可见分光光度法,于409nm处测定吸收度。以原阿片碱为对照品,同法制备对照品溶液,检测,计算夏天无胶囊中总生物碱的溶出度。
在本发明中,下述实施例涉及使用以下仪器和试剂:
1、仪器
RCZ-8M智能溶出仪(天津天大天发)、TU-1810系列紫外可见分光光度计(普析通用)
2、试剂
夏天无胶囊(批号:160404、160801、161001;洛阳天生药业有限责任公司);原阿片碱(批号:110853-201404,含量:99.7%;中国食品药品检定研究院);盐酸、溴甲酚紫、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯仿均为分析纯,水为纯化水。
实施例1
检测波长的选择
空白辅料溶液的配制:去空白辅料,加pH1.2的盐溶液溶解,备用。
对照品溶液配制:精密称取干燥至恒重的原阿片碱,加适量甲醇制成质量浓度为0.124mg·ml-1的对照品溶液,摇匀,即得。
供试品溶液配制:取夏天无胶囊一粒,按溶出度试验法进行溶出试验,取溶出液,加溴甲酚紫溶液及磷酸盐缓冲液各5mL,再精密加入氯仿10mL,振摇提取后,静置分层,分取澄清的氯仿层溶液,得供试品溶液,空白辅料溶液和对照品溶液同法处理。
取上述溶液,照紫外-可见分光光度法,在190~400nm波长范围内扫描。
表1 波长扫描结果
结论:对照品和供试品均在409nm±2nm处有最大吸收,辅料在此范围内无明显吸收峰,因此,将409nm作为溶出度测定的检测波长。
实施例2
线性关系和范围
储备液:精密称取原阿片碱15.09mg,置100ml量瓶中,加甲醇适量溶解,用溶出介质稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液:精密量取储备液2.5ml、4ml、5ml、6ml、7.5ml,分别置50ml量瓶中,用溶出介质稀释至刻度,摇匀,即得。
照紫外-可见分光光度法,在409nm的波长处测定吸收度。以吸光度对浓度进行线性回归,得出线性回归方程和相关系数,线性方程为Y=0.031X+0.003,相关系数R=0.9999;图1为溶出度线性试验图,表明在7.54μg/ml至22.64g/ml的范围内有良好的线性,相关系数0.9999(>0.9990)。
实施例3
精密度实验
重复性
对照品溶液:精密称取原阿片碱对照品15.10mg、15.08mg,分别置10ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取1.0ml,置100ml量瓶中,用溶出介质稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液:取本品6粒,照溶出方法检测。
将对照品溶液和供试品溶液分别采用酸性染料法处理,照紫外-可见分光光度法,在409nm的波长处测定吸收度,计算RSD,结果见表2。
表2 重复性试验结果
实施例4
取重复性项下对照品溶液和供试品溶液,分别在0h、2h、4h、6h测定其吸收度,结果见表3。
表3 溶液稳定性试验结果
从表3可知,供试品溶液、对照品溶液峰面积RSD均小于2.0%,在6小时内稳定。
实施例5
取6粒夏天无胶囊(批号:160404),按溶出度测定法(《中国药典》2015年版第四部通则0931第一法),以pH值1.2的盐酸500ml为溶出介质,设定温度37℃,转速50r/min,待温度达到后于每个转蓝中投入一粒胶囊,45min后取样,经滤纸过滤,取溶出液,加溴甲酚紫溶液及磷酸盐缓冲液各5mL,再精密加入氯仿10mL,振摇提取后,静置分层,分取澄清的氯仿层溶液,对照品溶液同法处理,采用紫外.可见分光光度法在409nm下进行测定,计算总生物碱成分的溶出度,结果见表4。
表4 160404批溶出度结果
杯号 | 杯1 | 杯2 | 杯3 | 杯4 | 杯5 | 杯6 | RSD% |
总生物碱溶出度 | 88.4 | 87.6 | 89.9 | 91.5 | 88.3 | 91.2 | 1.82 |
实施例6
取6粒夏天无胶囊(批号:160801),按溶出度测定法(《中国药典》2015年版第四部通则0931第一法),以pH值1.2的盐酸500ml为溶出介质,设定温度37℃,转速50r/min,待温度达到后于每个转蓝中投入一粒胶囊,45min后取样,经滤纸过滤,取溶出液,加溴甲酚紫溶液及磷酸盐缓冲液各5mL,再精密加入氯仿10mL,振摇提取后,静置分层,分取澄清的氯仿层溶液,对照品溶液同法处理,采用紫外一可见分光光度法在409nm下进行测定,计算总生物碱成分的溶出度,结果见表5。
表5 160801批溶出度结果
杯号 | 杯1 | 杯2 | 杯3 | 杯4 | 杯5 | 杯6 | RSD% |
总生物碱溶出度(%) | 90.3 | 91.7 | 88.8 | 87.6 | 90.6 | 89.4 | 1.61 |
实施例7
取6粒夏天无胶囊(批号:161001),按溶出度测定法(《中国药典》2015年版第四部通则0931第一法),以pH值1.2的盐酸500ml为溶出介质,设定温度37℃,转速50r/min,待温度达到后于每个转蓝中投入一粒胶囊,45min后取样,经滤纸过滤,取溶出液,加溴甲酚紫溶液及磷酸盐缓冲液各5mL,再精密加入氯仿10mL,振摇提取后,静置分层,分取澄清的氯仿层溶液,对照品溶液同法处理,采用紫外-可见分光光度法在409nm下进行测定,计算总生物碱成分的溶出度,结果见表6。
表6 161001批溶出度结果
杯号 | 杯1 | 杯2 | 杯3 | 杯4 | 杯5 | 杯6 | RSD% |
总生物碱溶出度(%) | 87.5 | 86.4 | 88.9 | 90.4 | 89.7 | 91.7 | 2.17 |
通过表1~6可以看出,本发明采用紫外.可见分光光度法对夏天无胶囊中总生物碱类成分的溶出进行检测,样品处理方法为酸性染料法。所建立的方法准确可靠,操作简单,重复性好,通过对三批夏天无胶囊中总生物碱类成分的溶出度检测,结果表明,三批夏天无胶囊中总生物碱类成分的溶出度结果稳定,批间差异下,方法可靠,可作为夏天无胶囊质量控制方法。
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种修改或补充或采用类似的方式替代,但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。
尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实施例,但是对本领域熟练技术人员来说,只要不离开本发明的精神和范围可作各种变化或修正是显然的。
Claims (10)
1.一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
a)配置盐酸溶液,以盐酸溶液作为溶出介质;
b)将溶出介质加入溶出杯中,并将溶出介质预热至预设温度;
c)将一粒胶囊加入溶出度试验仪的转篮中,将转篮置于所述溶出介质中进行溶出度实验,设定转篮的转速在50~100rpm之间;
d)在设定的时间点抽取溶出液,过滤,采用酸性染料比色法测定溶出液中总生物碱的量;
e)检测对照品的吸光度,计算夏天无胶囊中总生物碱类成分的溶出度。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述溶出介质的pH值为0.5~2.5。
3.根据权利要求1所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述预设温度为37.0±0.5℃。
4.根据权利要求1所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述溶出介质的加入量为500~1000mL。
5.根据权利要求1或4所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述溶出介质的加入量为500mL。
6.根据权利要求1所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,转篮在溶出介质中浸泡时间为30~60min。
7.根据权利要求1所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,检测吸光度的方法为紫外-可见分光光度法。
8.根据权利要求1所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述酸性染料比色法所采用的酸性染料为澳甲酚紫、溴甲酚绿、香草醛中的一种。
9.根据权利要求1或8所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述酸性染料比色法所采用的水相为磷酸盐缓冲溶液,萃取所采用的有机试剂为氯仿。
10.根据权利要求1所述的一种快速检测夏天无胶囊中总生物碱类成分溶出度的方法,其特征在于,所述抽取溶出液的体积为0.5~10mL。
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CN110954613A (zh) * | 2019-12-06 | 2020-04-03 | 浙江仙琚医药科技有限公司 | 一种改进后的软胶囊制剂的溶出度的测定方法 |
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