CN108077081A - 一种澳洲宝石种苗的组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种繁殖速度快、成本低且能保持澳洲宝石（Austral Gem）优良性状的组培方法。本发明包括以下步骤：（1）从澳洲宝石根状茎上诱导并分化出小颗粒状的原球茎；（2）取上述原球茎置于MS培养基中进行培养，每个原球茎分化出3～4个新的原球茎，进行无菌苗的增殖培养；（3）将原球茎置于第一种MS培养中培养，每颗原球茎长出1～3棵小苗，再将长出的每棵小苗置于第二种MS培养基中培养，即进行移栽驯化，洗净无菌苗根部的培养液并移栽进泥炭土和珍珠岩组成的基质内。本发明可应用于澳洲宝石（Austral Gem）培育领域。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物培养方法，尤其涉及一种澳洲宝石（Austral Gem）种苗的组培快繁方法。
背景技术
澳洲宝石（Austral Gem）这个新产品以其漂亮的株形和容易种植的特性从而成为室内观叶植物家族的新宠。在有空调加温的室内，澳洲宝石（Austral Gem）光滑的叶片可以忍受室内干燥的空气环境。近年来Austral Gem在观叶植物的应用中深受人们的喜爱。除了自然盆栽外，还作为鲜切叶用于插花中供人们观赏。
澳洲宝石（Austral Gem）是Asplenium （铁角蕨属）dimorphum和Asplenium （铁角蕨属）diforme杂交后培育出来的品种，它的孢子不能成熟，因此植株是不育的。在澳洲宝石（Austral Gem）培植方面，只能采用分株进行繁殖的方法。一棵澳洲宝石（Austral Gem）一年只能繁殖出1～3棵，因其繁殖系数低，远不能满足市场的需要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种繁殖速度快、成本低且能保持澳洲宝石（Austral Gem）优良性状的组培方法。
本发明所采用的技术方案是，该方法包括以下步骤：
（1）诱导与分化：取澳洲宝石根状茎为外植体并进行无菌处理，取经过无菌处理的根状茎切成若干块状并放入含有0.5～1.5mg/L 的BA、1～3mg/L 的IAA和0.1～0.5 mg/L 的NAA的MS培养基中进行培养，培养温度为22～26℃，光照1800～2000lux，光照时间为每天12h，培养16～18周时间，可见切口处分化出小颗粒状的原球茎；
（2）无菌苗的增殖培养：取上述原球茎置于含有0.2～1.0mg/L 的BA、0.1～0.5mg/L 的KT和3％的糖的MS培养基中，培养6～12周，培养温度为24～26℃，光照2200～2600lux，光照时间为每天12h，每个原球茎分化出3～4个新的原球茎；
（3）无菌苗的移栽驯化：将原球茎置于含有2g/L 的活性炭和3％的糖的MS培养基中培养6～12周，每颗原球茎长出1～3棵小苗，再将长出的每棵小苗置于含有1mg/L的IBA和3％的糖的MS培养基中培养6～12周，即进行移栽驯化，洗净无菌苗根部的培养液并移栽进泥炭土和珍珠岩的质量比为4:1组成的基质内，保持温度为18～28℃，光照5000～7000Lux。
进一步地，在所述步骤（1）中，对澳洲宝石根状茎进行无菌处理的步骤为：剥干净根状茎外面的叶鞘和毛鳞，用75％的酒精处理10秒，再在0.1％的升汞溶液中浸泡8～10分钟后取出，最后用无菌水冲洗4～5次。
进一步地，所述步骤（1）中，所述澳洲宝石根状茎切成的块状长度为0.3cm。
进一步地，所述步骤（3）中，在移栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件。
进一步地，所述步骤（3）中，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95％，保持叶表面水雾不干。
本发明的有益效果是：本发明先采用加入有BA和IAA和NAA的MS培养基，可以有效促进澳洲宝石（Austral Gem）的根状茎分化出原球茎；采用BA、KT和糖为的MS作为增殖培养基，原球茎能旺盛增殖；最后原球茎置于无激素，含有糖和活性炭的MS培养基中培养四周即可快速长出小苗，小苗置于含有IBA和糖的MS培养基中培养可快速生根。本发明通过利用根状茎直接诱导出原球茎，原球茎又直接快速增殖长出小苗，简化培养条件和培养工艺，可以降低生产成本，因此本发明的澳洲宝石（Austral Gem）的快繁方法繁殖速度快，成本低。
具体实施方式
本发明公开了一种澳洲宝石（Austral Gem）种苗组培快繁方法。以下列出三个试验过程对本发明方法作进一步的说明。
试验一：
（一）诱导和分化
（1）取澳洲宝石（Austral Gem）根状茎作为外植体；
（2）将所述根状茎剥干净外面的叶鞘及毛鳞，先用75%的酒精处理10秒，再在0.1%的升汞溶液中浸泡8～10分钟取出，然后用无菌水冲洗4～5次；
（3）取经升汞消毒后的所述根状茎切成约0.3cm长的小块，放入加有BA 0.5mg/L和IAA1.0mg/L和NAA 0.1mg/L的MS培养基中，培养温度为22～26度，光照1800～2000lux，光照时间每天12小时，培养16～18周后，可见切口处分化出小颗粒的原球茎。
（二）无菌苗的增殖培养
取一颗一颗的原球茎置于BA 0.2mg/L和KT 0.1mg/L，糖为3%的MS培养基中，培养6周后，每个原球茎可多分化出2～4个新的原球茎；培养温度要求：22～26度，光照2500lux，每天光照12小时。
（三）无菌苗的移栽驯化
（1）所述原球茎置于无激素，糖3%，活性炭2g/L的MS培养基中培养6周后，每颗原球茎开始长出1～3棵0.3厘米小苗，再将小苗置于IBA 1mg/L，糖3%的MS培养基中培养4周，每棵苗长成1～1.2厘米的小苗，并有两三条黑色的小须根，可进行移栽驯化；
（2）栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件；
（3）洗净所述无菌苗根部的培养基液并移栽入泥炭土和珍珠岩比例为4:1的基质内；
（4）保持温度为18～28度，光照5000～7000Lux，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95%，保持叶表面水雾不干。
试验二：
（一）诱导和分化
（1）取澳洲宝石（Austral Gem）根状茎作为外植体；
（2）将所述根状茎剥干净外面的叶鞘及毛鳞，先用75%的酒精处理10秒，再在0.1%的升汞溶液中浸泡8～10分钟取出，然后用无菌水冲洗4～5次；
（3）取经升汞消毒后的所述根状茎切成约0.3cm长的小块，放入加有BA 1.0mg/L和IAA2.0mg/L和NAA 0.3mg/L的MS培养基中，培养温度为22～26度，光照1800～2000lux，光照时间每天12小时，培养16～18周后，可见切口处分化出小颗粒的原球茎。
（二）无菌苗的增殖培养
取一颗一颗的原球茎置于BA 0.6mg/L和KT 0.3mg/L，糖为3%的MS培养基中，培养10周后，每个原球茎可多分化出4～6个新的原球茎；培养温度要求：22～26度，光照2500lux，每天光照12小时。
（三）无菌苗的移栽驯化
（1）所述原球茎置于无激素，糖3%，活性炭2g/L的MS培养基中培养10周后，每颗原球茎开始长出1～3棵0.5厘米小苗，再将小苗置于IBA 1mg/L，糖3%的MS培养基中培养10周，每棵苗长成0.8～1.0厘米的小苗，并有两三条黑色的小须根，可进行移栽驯化；
（2）栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件；
（3）洗净所述无菌苗根部的培养基液并移栽入泥炭土和珍珠岩比例为4:1的基质内；
（4）保持温度为18～28度，光照5000～7000Lux，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95%，保持叶表面水雾不干。
试验三：
（一）诱导和分化
（1）取澳洲宝石（Austral Gem）根状茎作为外植体；
（2）将所述根状茎剥干净外面的叶鞘及毛鳞，先用75%的酒精处理10秒，再在0.1%的升汞溶液中浸泡8～10分钟取出，然后用无菌水冲洗4～5次；
（3）取经升汞消毒后的所述根状茎切成约0.3cm长的小块，放入加有BA 1.5mg/L和IAA3.0mg/L和NAA 0.5mg/L的MS培养基中，培养温度为22～26度，光照1800～2000lux，光照时间每天12小时，培养16～18周后，可见切口处分化出小颗粒的原球茎。
（二）无菌苗的增殖培养
取一颗一颗的原球茎置于BA 1.0mg/L和KT 0.5mg/L，糖为3%的MS培养基中，培养12周后，每个原球茎可多分化出4～6个新的原球茎；培养温度要求：22～26度，光照2500lux，每天光照12小时。
（三）无菌苗的移栽驯化
（1）所述原球茎置于无激素，糖3%，活性炭2g/L的MS培养基中培养12周后，每颗原球茎开始长出1～4棵0.3厘米小苗，再将小苗置于IBA 1mg/L，糖3%的MS培养基中培养4周，每棵苗长成0.8～1厘米的小苗，并有两三条黑色的小须根，可进行移栽驯化；
（2）栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件；
（3）洗净所述无菌苗根部的培养基液并移栽入泥炭土和珍珠岩比例为4:1的基质内；
（4）保持温度为18～28度，光照5000～7000Lux，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95%，保持叶表面水雾不干。
本发明可应用于澳洲宝石（Austral Gem）培育领域。
Claims (5)
1.一种澳洲宝石种苗的组培快繁方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）诱导与分化：取澳洲宝石根状茎为外植体并进行无菌处理，取经过无菌处理的根状茎切成若干块状并放入含有0.5～1.5mg/L 的BA、1～3mg/L 的IAA和0.1～0.5 mg/L 的NAA的MS培养基中进行培养，培养温度为22～26℃，光照1800～2000lux，光照时间为每天12h，培养16～18周时间，可见切口处分化出小颗粒状的原球茎；
（2）无菌苗的增殖培养：取上述原球茎置于含有0.2～1.0mg/L 的BA、0.1～0.5mg/L 的KT和3％的糖的MS培养基中，培养6～12周，培养温度为24～26℃，光照2200～2600lux，光照时间为每天12h，每个原球茎分化出3～4个新的原球茎；
（3）无菌苗的移栽驯化：将原球茎置于含有2g/L 的活性炭和3％的糖的MS培养基中培养6～12周，每颗原球茎长出1～3棵小苗，再将长出的每棵小苗置于含有1mg/L的IBA和3％的糖的MS培养基中培养6～12周，即进行移栽驯化，洗净无菌苗根部的培养液并移栽进泥炭土和珍珠岩的质量比为4:1组成的基质内，保持温度为18～28℃，光照5000～7000Lux。
2.根据权利要求1所述的一种澳洲宝石种苗的组培快繁方法，其特征在于，在所述步骤（1）中，对澳洲宝石根状茎进行无菌处理的步骤为：剥干净根状茎外面的叶鞘和毛鳞，用75％的酒精处理10秒，再在0.1％的升汞溶液中浸泡8～10分钟后取出，最后用无菌水冲洗4～5次。
3.根据权利要求1所述的一种澳洲宝石种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述澳洲宝石根状茎切成的块状长度为0.3cm。
4.根据权利要求1所述的一种澳洲宝石种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（3）中，在移栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件。
5.根据权利要求4所述的一种澳洲宝石种苗的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（3）中，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95％，保持叶表面水雾不干。
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