CN107884503A - 蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法 - Google Patents

蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107884503A
CN107884503A CN201711059432.XA CN201711059432A CN107884503A CN 107884503 A CN107884503 A CN 107884503A CN 201711059432 A CN201711059432 A CN 201711059432A CN 107884503 A CN107884503 A CN 107884503A
Authority
CN
China
Prior art keywords
asthma
relieving
hydrochloride
kinds
reference substance
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201711059432.XA
Other languages
English (en)
Inventor
张涛
甘勇强
冯枫
何颂华
谷立勍
吴桂凡
罗轶
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute Of Food And Drug Control
Original Assignee
Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute Of Food And Drug Control
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute Of Food And Drug Control filed Critical Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute Of Food And Drug Control
Priority to CN201711059432.XA priority Critical patent/CN107884503A/zh
Publication of CN107884503A publication Critical patent/CN107884503A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明公开了蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，采用液相色谱‑串联质谱进行检测分析，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱为MGII C18柱，柱温28～33℃，流速0.8～1.0ml/min；以乙腈（A）‑0.1%甲酸溶液（B）为流动相，梯度洗脱；质谱条件为：采用电喷雾电离源，正离子方式扫描，MRM方式检测，干燥气温度350℃，干燥气流速5L/min，雾化气压力40（psi），鞘流气温度400℃，鞘流气流速9L/min，毛细管电压4.0KV，喷嘴电压1500V，驻留时间25ms。该法具有操作简便、准确度高、精密度高、稳定性好的优点，可同时检测22种止咳平喘类药物种的一种或者多种，适用于实验室对于蛤蚧定喘丸的质量控制，可批量进行检测，检测效率高。

Description

蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法
技术领域
本发明涉及药品检测领域，具体是蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法。
背景技术
蛤蚧定喘丸，中成药名。为补益剂，具有滋阴清肺，止咳定喘之功效。主要由蛤蚧，瓜蒌子，紫菀，麻黄，鳖甲（醋制），黄芩，甘草，麦冬，黄连，百合，紫苏子（炒），石膏，苦杏仁（炒），石膏（煅）等组成。其品种主要有水蜜丸、小蜜丸和大蜜丸等。主治虚劳久咳，年老哮喘，气短发热，胸满郁闷，自汗盗汗，不思饮食。
近年来，某些生产企业为片面追求治疗效果和经济利益，在没有经过任何药理和毒理研究的基础上，擅自非法添加化学药物，严重危害人民群众的用药安全。
目前公开文献中也有关于蛤蚧定喘丸中物质含量的检测技术，但还没有关于蛤蚧定喘丸中非法添加的止咳平喘类药物的相关检测技术。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，以考察蛤蚧定喘丸是否添加此类止咳平喘类药物。该法操作简便，检测效率高，一次过柱，一次色谱过程，可同步检测22种止咳平喘类药物，检测成本较低；且该法具有准确率高、重现性好、灵敏度高等优点。
本发明通过以下技术方案实现：
蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，其中所述的非法添加的止咳平喘类药物为茶碱、盐酸氯丙那林、盐酸妥洛特罗、沙丁胺醇、马来酸氯苯那敏、盐酸克伦特罗、地西泮、盐酸丙卡特罗、磷酸苯丙哌林、枸橼酸喷托维林、富马酸福莫特罗、氢化可的松、醋酸泼尼松、昔萘酸沙美特罗、丙酸倍氯米松、盐酸异丙嗪、甲氧苄氨嘧啶、盐酸去氯羟嗪、盐酸溴己新、咖啡因、右美沙芬和福尔可定等22种止咳平喘类化学药物；其检测方法包括以下步骤：
（1）混合对照品溶液的制备：分别精密称取茶碱、盐酸氯丙那林、盐酸妥洛特罗、沙丁胺醇、马来酸氯苯那敏、盐酸克伦特罗、地西泮、盐酸丙卡特罗、磷酸苯丙哌林、枸橼酸喷托维林、富马酸福莫特罗、氢化可的松、醋酸泼尼松、昔萘酸沙美特罗、丙酸倍氯米松、盐酸异丙嗪、甲氧苄氨嘧啶、盐酸去氯羟嗪、盐酸溴己新、咖啡因、右美沙芬和福尔对照品适量，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液，制成每种物质含量均为100ng/ml的混合溶液；
（2）样品溶液的制备：取蛤蚧定喘丸样品1～2g，打碎，精密称定，置50 ml量瓶中，加入乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液45～55 ml，超声处理1～1.5小时，放冷，加乙腈-0.1%甲酸溶液（90：10）混合溶液至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液1ml，置20 ml量瓶中，加入乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液至刻度，过0.2μm滤膜；
（3）进行液相色谱-串联质谱分析：分别精密吸取同样体积的混合对照品溶液与样品溶液2～5μl，注入高效液相色谱-串联质谱联用仪，按照一定的色谱条件和质谱条件进行测定，得到LC-MS／MS 谱图；
（4）结果分析：将样品溶液的谱图与混合对照品溶液的谱图进行比较，若样品谱图中存在保留时间与某对照品的保留时间一致的色谱峰，并且扣除背景后的紫外吸收图谱与该标准物质的吸收图谱一致，则认定样品中存在该止咳平喘类药物。
所述超声处理条件为：功率550～580W，频率40～45kHz；
所述色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱：MGII C18柱（5µm，4.6mm×250mm），柱温28～33℃，流速0.8～1.0ml/min；以乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按下列程序进行梯度洗脱：
时间（分钟） 　 流动相A（%） 　流动相B（%）
0～5　　　　　5　　　　　　 　95
5～10　　　　 5→10　　　　 　 95→90
10～25　　　 10→90　　　　 　90→10
25～30　　　 90　　　　　 10
30～32　　　　95→5　　　　　 5→95
32～42　　　　5 　　　　　 95
所述质谱条件为：采用电喷雾电离源（ESI），正离子方式扫描，多反应监测（MRM）方式检测；干燥气温度：350℃；干燥气流速：5L/min；雾化气压力：40（psi）；鞘流气温度：400℃；鞘流气流速：9L/min；毛细管电压：4.0KV；喷嘴电压：1500V；驻留时间：25ms。
本发明采用的检测条件和方法是在查阅大量文献的基础上，经过多次实验探索研究之后筛选出来的，能够达到准确度高、稳定性好的目的。以下为本发明的检测方法的方法学验证试验。试验所用的仪器和试剂如下：
Agilent 1200快速高分离液相色谱系统，配MGII C18（250×4.6mm,5μm），Agilent6460Triple Quad LC/MS/MS液相色谱/质谱联用仪，配电喷雾电离源（ESI）。茶碱对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100121-199903含测用，盐酸氯丙那林对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100220-199401含测用，盐酸妥洛特罗对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100472-200401含测用，沙丁胺醇对照品：中国药品生物制品检定所，批号：0204-9701含测用，马来酸氯苯那敏对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100047-200606含测用，盐酸克伦特罗对照品：中国药品生物制品检定所，批号：0072-8501含测用，地西泮对照品：中国药品生物制品检定所，批号：171225-200302含测用，盐酸丙卡特罗对照品：中国药品生物制品检定所，批号：10275-0101含测用，磷酸苯丙哌林对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100237-199701含测用，枸橼酸喷托维林对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100432-200401含测用，富马酸福莫特罗对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100633-200401含测用，氢化可的松对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100152-200206含测用，醋酸泼尼松对照品：中国药品生物制品检定所，批号：10012-0105含测用，昔萘酸沙美特罗对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100567-200501含测用，丙酸倍氯米松对照品：中国药品生物制品检定所，批号：1504-200001含测用，盐酸异丙嗪对照品：USP对照品，批号：K，甲氧苄氨嘧啶对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100031-200304含测用，盐酸去氯羟嗪对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100262-200301含测用（纯度以98.6%计），盐酸溴己新对照品：中国药品生物制品检定所，批号：100427-200301含测用，咖啡因对照品：中国药品生物制品检定所，批号：171215-200507含测用，右美沙芬对照品：Sigma，批号：46H9440含测用，福尔可定对照品：中国药品生物制品检定所，批号：1205-200203含测用。乙腈为色谱纯，甲酸为色谱纯，水为高纯水。
（1）准确度试验
精密称取已知含量（22种化学药物成分均未检出）的蛤蚧定喘丸样品 (广州市中一药业有限公司，批号P00016)1g，共6份，每份分别加入混合对照品溶液5ml，按本发明所述方法进行提取、测定，计算6份样品的加样回收率，取平均值。计算结果：茶碱、盐酸氯丙那林、盐酸妥洛特罗、沙丁胺醇、马来酸氯苯那敏、盐酸克伦特罗、地西泮、盐酸丙卡特罗、磷酸苯丙哌林、枸橼酸喷托维林、富马酸福莫特罗、氢化可的松、醋酸泼尼松、昔萘酸沙美特罗、丙酸倍氯米松、盐酸异丙嗪、甲氧苄氨嘧啶、盐酸去氯羟嗪、盐酸溴己新、咖啡因、右美沙芬和福尔等22种化学药物成分的加样回收率分别为：94.58%、93.80%、96.72%、95.78%、96.89%、97.87%、92.95%、93.07%、98.63%、95.46%、106.12%、96.40%、91.90%、100.49%、103.87、95.24、95.15%、88.55%、95.06%、93.63%、94.24%、98.60%， 22种化学药物成分的加样回收率均较高，说明本发明所述检测方法准确度较好。
（2）精密度试验
取准确度试验中的一份加样回收样品溶液，按本发明所述色谱条件，连续测定6次，求出平均峰面积，计算RSD，试验结果如表1所示。实验表明，22种药物成分的RSD均保持在较小的范围内波动，本发明所述方法精密度良好。
表1 精密度试验结果
（3）线性关系的考察
精密称取茶碱21.31 mg，盐酸妥洛特罗22.06mg，马来酸氯苯那敏21.39mg，地西泮21.94mg，磷酸苯丙哌林20.56mg，氢化可的松19.31mg，醋酸泼尼松21.89mg，丙酸倍氯米松21.70mg，右美沙芬20.66mg，分别置20ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；再精密称取盐酸氯丙那林10.26mg，沙丁胺醇10.23mg，盐酸克伦特罗10.08mg，盐酸丙卡特罗10.98mg，枸橼酸喷托维林10.37mg，富马酸福莫特罗10.12mg，昔萘酸沙美特罗10.71mg，盐酸异丙嗪9.85mg，甲氧苄氨嘧啶11.34mg，盐酸去氯羟嗪10.24mg（纯度98.6%），盐酸溴己新11.05mg，咖啡因10.43mg，福尔可定11.70mg分别置20ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
精密吸取上述单个对照品溶液各1 ml，置同一50 ml量瓶中，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液稀释至刻度，摇匀，再精密吸取1 ml，置20 ml量瓶中，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液稀释至刻度，作为混合对照品贮备液。精密量取混合对照品取贮备液1.0、1.0、1.0、2.0、5.0ml，分别置50、20、10、5、5ml的量瓶中，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得混合标准曲线溶液1、2、3、4、5。
将上述对照品溶液按本发明所述色谱条件分别进样2μl，以对照品进样浓度(ng/ml)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并求出回归方程（曲线强制过0点）。结果表明：
茶碱对照品进样浓度在21.31～426.2 ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=254.7042X， r=0.9994；
盐酸氯丙那林对照品进样浓度在20.52～410.4 ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=16608.7737X， r=0.9997；
盐酸妥洛特罗对照品进样浓度在22.06～441.2ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=24759.7908X， r=0.9996；
沙丁胺醇对照品进样浓度在20.46～109.2ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=17664.8964X， r=0.9996；
马来酸氯苯那敏对照品进样浓度在21.39～427.8ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=516.6685X， r=0.9990；
盐酸克伦特罗对照品进样浓度在20.16～403.2 ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=15045.8031X， r=0.9994；
地西泮对照品进样浓度在21.94～438.8ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=3795.5361X， r=0.9996；
盐酸丙卡特罗对照品进样浓度在21.96～439.2ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=6425.7553X， r=0.9998；
磷酸苯丙哌林对照品进样浓度在20.56～411.2ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=997.9192X， r=0.9998；
枸橼酸喷托维林对照品进样浓度在20.74～414.8ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=46315.1032X， r=0.9999；
富马酸福莫特罗对照品进样浓度在20.24～404.8ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=240.6543X， r=0.9995；
氢化可的松对照品进样浓度在19.31～386.2ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=20.31037X， r=0.9977；
醋酸泼尼松对照品进样浓度在20.89～437.8ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=201.2333X， r=0.9991；
昔萘酸沙美特罗对照品进样浓度在21.42～428.4ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=172.2984X， r=0.9984；
丙酸倍氯米松对照品进样浓度在21.7～434.0 ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=1018.2708X， r=0.9994；
盐酸异丙嗪对照品进样浓度在19.70～394.0ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=40889.9390X， r=0.9995；
甲氧苄氨嘧啶(甲氧苄啶）对照品进样浓度在22.68～453.60ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=412.6285X， r=0.9988；
盐酸去氯羟嗪对照品进样浓度在20.19～43.8656ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=19861.0609X， r=0.9985；
盐酸溴己新对照品进样浓度在22.10～442.0ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=4520.0172X， r=0.9999；
咖啡因对照品进样浓度在20.86～417.2ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=274.6809X， r=0.9994；
右美沙芬对照品进样浓度在20.66～413.2ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=12309.1387X， r=0.9997；
福尔可定对照品进样浓度在23.40～117.0ng/ml范围内时，进样浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为：Y=4259.8101X， r=0.9951。
（4）检出限、定量限试验
精密吸取上述单个对照品溶液各1 ml，置同一100 ml量瓶中，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液稀释至刻度，摇匀，再精密吸取1 ml，置100 ml量瓶中，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液稀释至刻度，作为混合对照品贮备液。
精密量取混合对照品取贮备液1.00、0.10、0.10ml，分别置10、10、100ml的量瓶中，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得检出限测定溶液1、2、3。将上述对照品溶液按本发明所述色谱条件分别进样2μl，测定，各成分检出限、定量限计算结果如表2所示：
表2 检出限、定量限试验
对照品名称 加入对照品浓度（ng/mL） 样品稀释倍数（ml） 取样量（g） 信噪比 检出限（μg/g) 定量限（μg/g)
茶碱 10.6550 1000 1 10.39 3.08 10.26
氯丙那林 0.0874 1000 1 3.10 0.08 0.28
妥洛特罗 0.0954 1000 1 3.06 0.09 0.31
沙丁胺醇 0.1023 1000 1 12.88 0.02 0.08
苯那敏 0.7501 1000 1 4.13 0.54 1.82
克伦特罗 0.0887 1000 1 8.72 0.03 0.10
地西泮 0.1097 1000 1 3.41 0.10 0.32
丙卡特罗 0.9748 1000 1 13.26 0.22 0.74
苯丙哌林 0.7801 1000 1 12.54 0.19 0.62
枸橼酸喷托维林 0.1037 1000 1 4.30 0.07 0.24
福莫特罗 7.4666 1000 1 20.56 1.09 3.63
氢化可的松 96.5500 1000 1 5.59 51.82 172.72
醋酸泼尼松 1.0945 1000 1 2.32 1.42 4.72
昔萘酸沙美特罗 10.7100 1000 1 7.34 4.38 14.59
丙酸倍氯米松 1.0850 1000 1 4.53 0.72 2.40
异丙嗪 0.0873 1000 1 4.50 0.06 0.19
甲氧苄氨嘧啶(甲氧苄啶） 1.1340 1000 1 4.97 0.68 2.28
去氯羟嗪 0.0912 1000 1 3.04 0.09 0.30
溴己新 0.1007 1000 1 4.62 0.07 0.22
咖啡因 10.4300 1000 1 3.80 8.23 27.45
右美沙芬 0.1033 1000 1 8.53 0.04 0.12
福尔可定 0.1170 1000 1 5.34 0.07 0.22
本发明的有益效果：
本发明所述蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，该法操作简便，检测效率高，一次过柱，一次色谱过程，可同步检测22种止咳平喘类药物，检测成本较低；该法具有操作简便、准确度高、精密度高、稳定性好的优点，可同时检测22种止咳平喘类药物种的一种或者多种，适用于实验室对于蛤蚧定喘丸的质量控制，可批量进行检测，检测效率高。此外，本发明所述方法可以为企业标准或者行业标准的建立提供重要的参考依据。
附图说明
图1是混合对照品、蛤蚧定喘丸（广州市中一药业有限公司，批号P00016）加样回收LC-MS/MS总离子流图。
图2是混合对照品、蛤蚧定喘丸（吉林省银诺克药业有限公司，批号20120304）加样回收LC-MS/MS总离子流图。
具体实施方式
为了更加详 细的介绍本发明所述检测方法，下面结合实施例，对本发明做进一步说明。
实施例1
所用仪器和试剂与上述方法学验证实验所用的相同。通过以下技术方案实现：
（1）混合对照品溶液的制备：分别精密称取茶碱、盐酸氯丙那林、盐酸妥洛特罗、沙丁胺醇、马来酸氯苯那敏、盐酸克伦特罗、地西泮、盐酸丙卡特罗、磷酸苯丙哌林、枸橼酸喷托维林、富马酸福莫特罗、氢化可的松、醋酸泼尼松、昔萘酸沙美特罗、丙酸倍氯米松、盐酸异丙嗪、甲氧苄氨嘧啶、盐酸去氯羟嗪、盐酸溴己新、咖啡因、右美沙芬和福尔对照品适量，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液，制成每种物质含量均为100ng/ml的混合溶液；
（2）样品溶液的制备：取蛤蚧定喘丸样品1g，打碎，精密称定，置50 ml量瓶中，加入乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液45 ml，超声处理1小时，放冷，加乙腈-0.1%甲酸溶液（90：10）混合溶液至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液1ml，置20 ml量瓶中，加入乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液至刻度，过0.2μm滤膜；
（3）进行液相色谱-串联质谱分析：分别精密吸取同样体积的混合对照品溶液与样品溶液2μl，注入高效液相色谱-串联质谱联用仪，按照一定的色谱条件和质谱条件进行测定，得到LC-MS／MS 谱图；
（4）结果分析：将样品溶液的谱图与混合对照品溶液的谱图进行比较，若样品谱图中存在保留时间与某对照品的保留时间一致的色谱峰，并且扣除背景后的紫外吸收图谱与该标准物质的吸收图谱一致，则认定样品中存在该止咳平喘类药物。
所述超声处理条件为：功率560W，频率40kHz；
所述色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱：MGII C18柱（5µm，4.6mm×250mm），柱温30℃，流速0.8ml/min；以乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按下列程序进行梯度洗脱：
时间（min）　 流动相A（%） 　流动相B（%）
0～5　　　　　　5　　　　　　 　95
5～10　　　　 　5→10　　　　 　 95→90
10～25　　　 　10→90　　　　 　90→10
25～30　　　　　90　　　　　 10
30～32　　　　　95→5　　　　 　 5→95
32～42　　　　 5 　　　　　 95
所述质谱条件为：采用电喷雾电离源（ESI），正离子方式扫描，多反应监测（MRM）方式检测；干燥气温度：350℃；干燥气流速：5L/min；雾化气压力：40（psi）；鞘流气温度：400℃；鞘流气流速：9L/min；毛细管电压：4.0KV；喷嘴电压：1500V；驻留时间：25ms。
结合下列案例，对本发明做进一步说明。
按照上述实施例1所述检测方法，对11家企业的32批样品进行检测，结果均未检出以上22种化学药物，如表3所示；实验结果表明抽取的样品原料未添加有该22种止咳平喘类药物。
表3 样品检测结果
序号 厂家 抽样批数 测定批数 测定批号 不合格批数 不合格率
1 长春海外制药集团有限公司 1 1 20110901 0 0%
2 长春经开药业有限公司 1 1 20100701 0 0
3 长春人民药业集团有限公司 10 3 20120302、20120201、20120301 0 0%
4 广东华天宝药业集团有限公司 1 1 100901 0 0
5 广州中一药业有限公司 27 7 P000016、P00005、R00001、P00019、R00003、、R00004、P000011 0 0
6 吉林济邦药业有限公司 18 3 20120302、20120202、20120401 0 0%
7 吉林省华侨药业有限公司 1 1 20100601 0 0
8 吉林省银诺克药业有限公司 11 4 20120202、20120304、20111002、20120304 0 0
9 吉林市鹿王制药股份有限公司 56 8 120402、120306、100602、120302、111203、120401、120502、111203 0 0%
10 吉林一正药业集团有限公司 3 2 110201、120301（2批批号一致) 0 0
11 天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂 2 1 498006（2批批号一致) 0 0

Claims (4)

1.蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，其特征在于：其中所述的非法添加的止咳平喘类药物为茶碱、盐酸氯丙那林、盐酸妥洛特罗、沙丁胺醇、马来酸氯苯那敏、盐酸克伦特罗、地西泮、盐酸丙卡特罗、磷酸苯丙哌林、枸橼酸喷托维林、富马酸福莫特罗、氢化可的松、醋酸泼尼松、昔萘酸沙美特罗、丙酸倍氯米松、盐酸异丙嗪、甲氧苄氨嘧啶、盐酸去氯羟嗪、盐酸溴己新、咖啡因、右美沙芬和福尔可定等22种止咳平喘类化学药物；其检测方法包括以下步骤：
（1）混合对照品溶液的制备：分别精密称取茶碱、盐酸氯丙那林、盐酸妥洛特罗、沙丁胺醇、马来酸氯苯那敏、盐酸克伦特罗、地西泮、盐酸丙卡特罗、磷酸苯丙哌林、枸橼酸喷托维林、富马酸福莫特罗、氢化可的松、醋酸泼尼松、昔萘酸沙美特罗、丙酸倍氯米松、盐酸异丙嗪、甲氧苄氨嘧啶、盐酸去氯羟嗪、盐酸溴己新、咖啡因、右美沙芬和福尔对照品适量，加乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液，制成每种物质含量均为100ng/ml的混合溶液；
（2）样品溶液的制备：取蛤蚧定喘丸样品1～2g，打碎，精密称定，置50 ml量瓶中，加入乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液45～55 ml，超声处理1～1.5小时，放冷，加乙腈-0.1%甲酸溶液（90：10）混合溶液至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液1ml，置20 ml量瓶中，加入乙腈-0.1%甲酸（90：10）混合溶液至刻度，过0.2μm滤膜；
（3）进行液相色谱-串联质谱分析：分别精密吸取同样体积的混合对照品溶液与样品溶液2～5μl，注入高效液相色谱-串联质谱联用仪，按照一定的色谱条件和质谱条件进行测定，得到LC-MS／MS 谱图；
（4）结果分析：将样品溶液的谱图与混合对照品溶液的谱图进行比较，若样品谱图中存在保留时间与某对照品的保留时间一致的色谱峰，并且扣除背景后的紫外吸收图谱与该标准物质的吸收图谱一致，则认定样品中存在该止咳平喘类药物。
2.根据权利要求1所述蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，其特征在于：所述超声处理条件为：功率550～580W，频率40～45kHz。
3.根据权利要求1所述蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，其特征在于：所述色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱：MGII C18柱（5µm，4.6mm×250mm），柱温28～33℃，流速0.8～1.0ml/min；以乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱。
4.根据权利要求1所述蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法，其特征在于：所述质谱条件为：采用电喷雾电离源（ESI），正离子方式扫描，多反应监测（MRM）方式检测；干燥气温度：350℃；干燥气流速：5L/min；雾化气压力：40（psi）；鞘流气温度：400℃；鞘流气流速：9L/min；毛细管电压：4.0KV；喷嘴电压：1500V；驻留时间：25ms。
CN201711059432.XA 2017-11-01 2017-11-01 蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法 Pending CN107884503A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711059432.XA CN107884503A (zh) 2017-11-01 2017-11-01 蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711059432.XA CN107884503A (zh) 2017-11-01 2017-11-01 蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107884503A true CN107884503A (zh) 2018-04-06

Family

ID=61783489

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711059432.XA Pending CN107884503A (zh) 2017-11-01 2017-11-01 蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107884503A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113791162A (zh) * 2021-11-16 2021-12-14 潍坊市检验检测中心 一种测定小儿止咳平喘贴剂中非法添加35种化学成分的方法
CN114487179A (zh) * 2022-01-20 2022-05-13 广西壮族自治区食品药品检验所 天王补心丸中山麦冬的掺伪检测方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102973861A (zh) * 2012-12-21 2013-03-20 广西健丰药业有限公司 无糖型复方罗汉果止咳颗粒的制备方法及质量控制方法
CN103760245A (zh) * 2013-12-18 2014-04-30 重庆市食品药品检验所 一种非法添加止咳平喘类化学成分的液-质多指标快速检测方法
CN105606739A (zh) * 2016-02-25 2016-05-25 山东省食品药品检验研究院 一种无对照品下鉴定中成药中非法添加二氧丙嗪的Q-Orbitrap高分辨质谱法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102973861A (zh) * 2012-12-21 2013-03-20 广西健丰药业有限公司 无糖型复方罗汉果止咳颗粒的制备方法及质量控制方法
CN103760245A (zh) * 2013-12-18 2014-04-30 重庆市食品药品检验所 一种非法添加止咳平喘类化学成分的液-质多指标快速检测方法
CN105606739A (zh) * 2016-02-25 2016-05-25 山东省食品药品检验研究院 一种无对照品下鉴定中成药中非法添加二氧丙嗪的Q-Orbitrap高分辨质谱法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HU, TINGTING 等: "Rapid screening and confirmation of illegally added anti- impotence preparations in health care products by high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry", 《CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY》 *
SONG, NINGNING 等: "Determination of twelve chemical drugs illegally added in herbal tea by ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry coupled with modified QuEChERS", 《CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY》 *
沈于兰 等: "HPLC法同时测定止咳平喘类中成药中非法添加的9种化学成分", 《中国药品标准》 *
王贞媛 等: "LC-MS /MS 法快速筛选保健食品中非法添加的18种止咳平喘化学成分", 《中华中医药学刊》 *
罗轶 等: "蛤蚧定喘丸中十种非法染色物的检测", 《中国医药导报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113791162A (zh) * 2021-11-16 2021-12-14 潍坊市检验检测中心 一种测定小儿止咳平喘贴剂中非法添加35种化学成分的方法
CN114487179A (zh) * 2022-01-20 2022-05-13 广西壮族自治区食品药品检验所 天王补心丸中山麦冬的掺伪检测方法
CN114487179B (zh) * 2022-01-20 2024-03-19 广西壮族自治区食品药品检验所 天王补心丸中山麦冬的掺伪检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Li et al. Pre-column derivatization and gas chromatographic determination of alkaloids in bulbs of Fritillaria
CN109324126B (zh) 一种利用uplc-ms/ms同时测定酸枣仁中9种化学成分的方法
CN108152399B (zh) 一种柏子仁药材uplc特征图谱的构建及其检测方法
CN113049720A (zh) 复方鲜竹沥液中乙醇残留量的检测方法
CN113514584A (zh) 一种对食品中非法添加的托拉塞米进行定性、定量检测的方法及应用
CN107884503A (zh) 蛤蚧定喘丸中22种非法添加止咳平喘类药物的检测方法
WO2022156241A1 (zh) 苯佐那酯中有关物质mpeg的检测方法
CN113655135A (zh) 一种马兜铃酸i的定量检测方法与限量方法
CN107884508B (zh) 银黄清肺胶囊的质量检测方法
CN105699510B (zh) 一种绵马贯众药材中山柰苷的含量测定方法
CN112014480B (zh) 一种uplc-ms/ms检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法
CN110988198A (zh) 一种痹痛宁胶囊的含量测定方法
CN113759011B (zh) 一种银柴胡及其制剂特征图谱的建立方法
CN112924583B (zh) 佩兰中吡咯里西啶生物碱的测定方法
CN113984918B (zh) 炒九香虫或其提取物的高效液相特征图谱及其构建方法和用途
CN114563497A (zh) 一种小柴胡胶囊成分的定量指纹图谱检测方法
CN111537653B (zh) 一种测定菊花中化学成分含量的方法
CN114487180A (zh) 天王补心制剂中理枣仁的掺伪检测方法
CN110082460B (zh) 一种颈舒颗粒的质量检测方法
CN113791162B (zh) 一种测定小儿止咳平喘贴剂中非法添加35种化学成分的方法
CN105911187A (zh) 液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法
CN114487179B (zh) 天王补心丸中山麦冬的掺伪检测方法
CN111398505A (zh) 同时检测一种治疗小儿遗尿症中药的五种成分含量的方法
CN111175427A (zh) 参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法
CN109632993B (zh) 一种木蝴蝶配方颗粒中6种化学成分的含量测定方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20180406

RJ01 Rejection of invention patent application after publication