CN107827768B - 一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法，包括以下步骤：将板栗壳清洗后粉碎，加入板栗壳重量3~5倍的水，加入乳酸菌发酵；将发酵液离心分离，取清液备用；将所得清液经微孔滤膜过滤除菌；将所得滤液经连续色谱选择分离得神经酰胺。本发明利用乳酸菌发酵板栗壳能分泌大量神经酰胺类物质到发酵液中，故不需要任何衍生化过程，操作简单，提取方便；发酵周期短、见效快且不受地区气候限制；将板栗壳变废为宝，充分利用资源；利用本发明工艺生产神经酰胺，溶剂可重复使用，减少环境影响，降低经济成本。

Description

一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法
技术领域
本发明属于发酵工业领域，具体涉及一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法。
背景技术
板栗，有“干果之王”的美称，又名栗子、大栗、栗果，气味芳香，是一种健胃补肾的上等果品。板栗坚果紫褐色，被黄褐色茸毛，或近光滑，果肉淡黄，味道甘甜可口。板栗生食、炒食皆宜，糖炒板栗、拌烧子鸡，喷香味美，可磨粉，亦可制成多种菜肴、糕点、罐头食品等。但人们在制作加工、食用板栗时往往将板栗壳丢弃，造成浪费。
板栗壳为板栗的外果皮，药性甘、涩、平，具有降逆、止血的功效，主治反胃、鼻衄、便血等症。近年来发现板栗壳中含有神经酰胺的分子结构，但如何提取还是一大难题。
神经酰胺又称神经鞘脂类，是存在于皮肤的一种脂类，在表皮角质层形成过程中发挥着重要作用。近年研究表明，当皮肤出现干燥、脱屑、开裂现象，其屏障功能明显降低时，皮肤补充神经酰胺可迅速恢复保湿和屏障功能。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种从废弃的板栗壳中通过的发酵的手段提取神经酰胺的方法。
为达到上述目的，本发明是通过以下的技术方案来实现的。
一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法包括以下步骤：
（1）将板栗壳清洗后粉碎，加入板栗壳重量3~5倍的水，加入乳酸菌发酵；
（2）将步骤（1）所得发酵液离心分离，取清液备用；
（3）将步骤（2）所得清液经微孔滤膜过滤除菌；
（4）将步骤（3）所得滤液经连续色谱选择分离得神经酰胺。
进一步地所述步骤（1）中乳酸菌的用量为板栗壳重量的1~5%，发酵温度控制在26~34℃，发酵24~72小时。
进一步地所述步骤（1）中乳酸菌为嗜酸乳秆菌、乳酸链球菌、肠膜明串珠菌、短双歧秆菌中的一种。
进一步地所述步骤（1）中板栗壳先经过盐水浸泡1~5min，然后用水洗净，盐水的重量百分比浓度为0.5~1.5%，用量为板栗壳重量的2~5倍。
进一步地所述步骤（3）中采用孔径为0.5~1μm的微孔滤膜。
进一步地所述步骤（4）中连续色谱采用大孔树脂连续色谱柱，先用体积浓度为20%乙醇除去杂质，再用体积浓度为40~50%乙醇洗脱，最后用体积浓度为60~90%乙醇洗脱，收集洗脱液，即得富含神经酰胺的溶液，神经酰胺含量5~10wt%。
进一步地将富含神经酰胺的溶液于0.001~0.01MPa，30~40℃减压浓缩至溶液浑浊，常压下冷却结晶，可得神经酰胺固体。
进一步地所述步骤（4）中，所述树脂为HPD100 型或 DA201 型中的一种。
有益效果：与现有技术相比，本发明的优点在于：
1）利用乳酸菌发酵板栗壳能分泌大量神经酰胺类物质到发酵液中，故不需要任何衍生化过程，操作简单，提取方便；
2）发酵周期短、见效快且不受地区气候限制；
3）将板栗壳变废为宝，充分利用资源；
4）利用本发明工艺生产神经酰胺，溶剂可重复使用，减少环境影响，降低经济成本。
具体实施方式
下面结合实例对本发明作进一步的详细说明。本发明所用的原料均为市售产品。
实施例1
一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法包括以下步骤：
（1）将板栗壳盐水浸泡1min，然后用水洗净，盐水的重量百分比浓度为1.5%，用量为板栗壳重量的2倍，然后粉碎至目数小于1mm，在板栗壳粉中加入板栗壳重量3倍的水，加入板栗壳重量1%的嗜酸乳秆菌发酵，发酵温度控制在34℃，发酵72小时；
（2）将步骤（1）所得发酵液高速离心分离，提取上层清液备用；
（3）将步骤（2）所得清液经孔径为0.5μm的微孔滤膜过滤除菌；
（4）将步骤（3）所得滤液采用HPD100 型大孔树脂连续色谱柱，先用体积浓度为20%乙醇除去杂质，再用体积浓度为40%乙醇洗脱，最后用体积浓度为60%乙醇洗脱，收集洗脱液，即得富含神经酰胺的溶液，神经酰胺含量5~10wt%。将富含神经酰胺的溶液于0.001MPa，30~40℃减压浓缩至溶液浑浊，常压下冷却结晶，可得神经酰胺固体。能从每公斤板栗壳中提取神经酰胺79g。
实施例2
一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法包括以下步骤：
（1）将板栗壳盐水浸泡2min，然后用水洗净，盐水的重量百分比浓度为1.2%，用量为板栗壳重量的3倍，然后粉碎至目数小于1mm，在板栗壳粉中加入板栗壳重量4倍的水，加入板栗壳重量2%的乳酸链球菌发酵，发酵温度控制在30℃，发酵60小时；
（2）将步骤（1）所得发酵液高速离心分离，提取上层清液备用；
（3）将步骤（2）所得清液经孔径为1μm的微孔滤膜过滤除菌；
（4）将步骤（3）所得滤液采用DA201 型大孔树脂连续色谱柱，先用体积浓度为20%乙醇除去杂质，再用体积浓度为43%乙醇洗脱，最后用体积浓度为70%乙醇洗脱，收集洗脱液，即得富含神经酰胺的溶液，神经酰胺含量5~10wt%。将富含神经酰胺的溶液于0.001~0.01MPa，30~40℃减压浓缩至溶液浑浊，常压下冷却结晶，可得神经酰胺固体。能从每公斤板栗壳中提取神经酰胺83mg。
实施例3
一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法包括以下步骤：
（1）将板栗壳盐水浸泡4min，然后用水洗净，盐水的重量百分比浓度为0.8%，用量为板栗壳重量的4倍，然后粉碎至目数小于1mm，在板栗壳粉中加入板栗壳重量4倍的水，加入板栗壳重量4%的肠膜明串珠菌发酵，发酵温度控制在28℃，发酵36小时；
（2）将步骤（1）所得发酵液高速离心分离，提取上层清液备用；
（3）将步骤（2）所得清液经孔径为0.5μm的微孔滤膜过滤除菌；
（4）将步骤（3）所得滤液采用HPD100 型大孔树脂连续色谱柱，先用体积浓度为20%乙醇除去杂质，再用体积浓度为47%乙醇洗脱，最后用体积浓度为80%乙醇洗脱，收集洗脱液，即得富含神经酰胺的溶液，神经酰胺含量5~10wt%。将富含神经酰胺的溶液于0.001~0.01MPa，30~40℃减压浓缩至溶液浑浊，常压下冷却结晶，可得神经酰胺固体。能从每公斤板栗壳中提取神经酰胺80mg。
本发明按照上述实施例进行了说明，应当理解，上述实施例不以任何形式限定本发明，凡采用等同替换或等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将板栗壳清洗后粉碎，加入板栗壳重量3~5倍的水，加入乳酸菌发酵；
（2）将步骤（1）所得发酵液离心分离，取清液备用；
（3）将步骤（2）所得清液经微孔滤膜过滤除菌；所述微孔滤膜的孔径为0.5~1μm；
（4）将步骤（3）所得滤液经连续色谱选择分离得神经酰胺；所述连续色谱采用大孔树脂连续色谱柱，先用体积浓度为20%乙醇除去杂质，再用体积浓度为40~50%乙醇洗脱，最后用体积浓度为60~90%乙醇洗脱，收集洗脱液得富含神经酰胺的溶液；所述树脂为HPD100 型或DA201 型中的一种。
2.根据权利要求1所述的一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法，其特征在于，所述步骤（1）中乳酸菌的用量为板栗壳重量的1~5%，发酵温度控制在26~34℃，发酵24~72小时。
3.根据权利要求1所述的一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法，其特征在于，所述步骤（1）中乳酸菌为嗜酸乳秆菌、乳酸链球菌、肠膜明串珠菌中的一种。
4.根据权利要求1所述的一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法，其特征在于，所述步骤（1）中板栗壳先经过盐水浸泡1~5min，然后用水洗净，盐水的重量百分比浓度为0.5~1.5%，用量为板栗壳重量的2~5倍。
5.根据权利要求1所述的一种从板栗壳中提取神经酰胺的方法，其特征在于，所述步骤（4）中将富含神经酰胺的溶液减压浓缩，冷却结晶，得神经酰胺固体。
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