CN107805653A - 鹰嘴豆活性肽、组合物及制备方法 - Google Patents

鹰嘴豆活性肽、组合物及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种鹰嘴豆活性肽及组合物和制备方法。该制备方法包括以下步骤：A、将鹰嘴豆粉加入水，调节pH至8～9，浸泡22～26小时，固液分离，将上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，将固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，将得到的混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由重量比为2～3∶1～2∶1～2的风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶组成，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～7h，得到酶解液，将酶解液灭酶处理，制成鹰嘴豆活性肽粉。本发明的制备方法生产工艺简单，且制得的鹰嘴豆活性肽纯度高，多肽含量高。

Description

鹰嘴豆活性肽、组合物及制备方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鹰嘴豆活性肽的制备方法。
背景技术
鹰嘴豆属野豌豆族，是豆科植物中的稀有品种，因其外形独特，类似鹰嘴而被称为鹰嘴豆。鹰嘴豆富含人体所需的18种氨基酸及蛋白质、膳食纤维、微量元素和维生素等营养物质，被誉为“营养之花、豆子之王”。鹰嘴豆的蛋白及多肽具有天然抗氧化的特点。鹰嘴豆蛋白含量因品种的不同而有较大差异，在15～30％之间。
CN104789629A公开了“一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法”，此制备方法中提取蛋白质直接使用强碱，且提取时间短，不利于保留物质的营养组分，且最后使用高温喷雾干燥，不利于热敏活性物质的保留，且容易使得产品色泽发黑。
CN101962399A公开了从鹰嘴豆豆瓣中提取天然抗肿瘤活性蛋白和多肽的方法”；CN101602799A公开了鹰嘴豆中原生抗菌多肽的快速制备方法，这两项制备方法的步骤中都有用磷酸盐缓冲液提取、硫酸铵沉淀，明显存在蛋白利用率低、制备多肽的效率偏低的缺点。
CN103172706A公开了一种具有抗氧化作用的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，包括脱脂、碱性蛋白酶水解、凝胶层析分离。此方法成本之高，不具备工业化的条件。
发明内容
本发明第一目的在于提供一种鹰嘴豆活性肽的制备方法，该方法工艺简单，且制得的鹰嘴豆活性肽活性高，无异味。
本发明的另一目的在于提供采用上述制备方法制得的鹰嘴豆活性肽，该鹰嘴豆活性肽多肽含量高，无异味。
本发明的再一目的在于提供一种含有鹰嘴豆活性肽的组合物。
本发明的又一目的在于提供所述含有鹰嘴豆活性肽的组合物的制备方法。
本发明的鹰嘴豆活性肽的制备方法，包括如下步骤：
A、将鹰嘴豆粉加入水，调节pH至8～9，浸泡22～26小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2～3∶1～2∶1～2，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～7h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成鹰嘴豆活性肽粉。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6；所述弱酸选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～125℃，时间为0.5～3h。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到鹰嘴豆活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到鹰嘴豆活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行；所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比6～7∶1～2∶2～3组成。
本发明还提供一种鹰嘴豆活性肽，该鹰嘴豆活性肽采用上述方法制备得到。
本发明还提供一种含鹰嘴豆活性肽的组合物，其由鹰嘴豆活性肽80～98重量份、苦荞1～10重量份和椰子汁粉1～10重量份制成。
本发明还提供一种所述含鹰嘴豆活性肽的组合物的制备方法，所述制备方法包括：(1)采用上述方法制备鹰嘴豆活性肽粉；(2)分别将苦荞和椰子汁粉制备为苦荞粉和椰子汁粉；(3)将所述鹰嘴豆活性肽粉、苦荞粉和椰子汁粉混合均匀，得到所述组合物；或者
所述制备方法包括：(1)采用上述方法制备鹰嘴豆活性肽粉；(2)将苦荞和椰子汁混合后用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3)将所述鹰嘴豆活性肽粉和药材提取物混合均匀，得到所述组合物。
本发明还提供另一种含鹰嘴豆活性肽的组合物，其由鹰嘴豆粉80～98重量份、苦荞1～10重量份和椰子汁粉1～10重量份制成。
本发明还提供一种所述含鹰嘴豆活性肽的组合物的制备方法，包括：
A’、将鹰嘴豆粉加入水，调节pH至8～9，浸泡22～26小时，固液分离，取上清液；
B’、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2～3∶1～2∶1～2；酶解温度为40-65℃，酶解时间为1.5～7h，得到酶解液；
D1’、将所述苦荞和椰子汁粉加入所述酶解液中，加热回流提取，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液制成含鹰嘴豆活性肽的组合物。
本发明的鹰嘴豆活性肽的制备方法，首次特定中药组合苦荞和椰子汁粉，可以进一步提升制备的鹰嘴豆活性肽的营养成分保健功能。
苦荞和椰子汁粉对机体的主要作用如下：
苦荞是自然界中甚少的药食两用作物，据《本草纲目》记载：苦荞味苦，性平寒，能实肠胃，益气力，续精神，利耳目，炼五脏渣秽；在《千金要方》、《中药大辞典》及相关文献中对苦荞都有记载：可安神、活气血、降气宽肠、清热肿风痛、祛积化滞、清肠、润肠、通便、止咳、平喘、抗炎、抗过敏、强心、减肥、美容等功效。
椰子汁粉，椰汁含有丰富的钾、镁等矿物质，其成分与细胞内液相似，可纠正脱水和电解质紊乱，达到利尿消肿之效；椰肉及椰汁均有杀灭肠道寄生虫的作用，饮其汁可驱除姜片虫和绦虫，用之于临床，不仅疗效可靠，且无毒副作用，是理想的杀虫消疳食品；另外椰汁含糖类、脂肪、蛋白质、生长激素、维生素和大量的人体必需的微量元素，经常饮用，能益人气力，补充细胞内液，扩充血容量，滋润皮肤，具有驻颜美容作用。
除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将对本发明作进一步详细的说明。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。
本发明中，所述鹰嘴豆为豆科鹰嘴豆属草本植物。
<鹰嘴豆活性肽的制备方法及鹰嘴豆活性肽>
本发明的鹰嘴豆活性肽的制备方法，包括如下步骤：
A、将鹰嘴豆粉加入水，调节pH至8～9，浸泡22～26小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2～3∶1～2∶1～2；酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～7h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成鹰嘴豆活性肽粉。
根据本发明的制备方法，步骤A中，所述鹰嘴豆粉的粒径为2～100μm。所述鹰嘴豆粉可以通过将干鹰嘴豆进行超微粉碎，然后过筛得到，例如过200～600目筛。采用本发明的粒径的鹰嘴豆粉，能够在后期的酶解步骤中有效提高酶解率，充分利用鹰嘴豆中的蛋白成分。所述浸泡优选为在搅拌下进行浸泡，从而使鹰嘴豆粉中的成分充分溶出。步骤A中，加水量为鹰嘴豆粉重量的3～10倍，优选为4～7倍。优选地，在浸泡工序完成后，进行机械搅拌，从而使液体均匀，便于离心。
步骤A中，所述固液分离方法可以为过滤、离心等，并优选为离心分离。步骤A中，浸泡过程可以加热或在常温下进行，并优选在常温下进行。通常，碱液浸泡过程中需进行加热处理；而发明人发现，在常温下浸泡即可将鹰嘴豆粉中的成分充分溶出，从而避免进行加热产生的额外能耗，且操作更方便。
根据本发明的制备方法，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6。所述弱酸可以选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。现有的鹰嘴豆活性肽提取方法中，考虑到调节效率，这一步骤通常采用强酸调节pH值至酸性，所述强酸例如为盐酸、硫酸等，而较少考虑酸的性质对于产品的影响；发明人发现，强酸对于蛋白质成分破坏较大，对最终得到的鹰嘴豆活性肽产品活性产生不利影响。而采用弱酸调节pH，使蛋白质沉淀出来，减少了对蛋白质营养物质的破坏，且最终得到的鹰嘴豆活性肽产品活性更好。步骤B中，优选地，所述沉淀时间为8～12h，从而保证上清液中的蛋白质成分在上述pH下充分沉淀出来。优选地，沉淀工序完成后进行机械搅拌在搅拌下进行，从而使液体均匀，便于离心。
根据本发明的制备方法，步骤C中，采用加热方法使蛋白质变性。在所述的加热条件下即能够实现鹰嘴豆中的蛋白质成分完全变性，且有利于后续步骤中进行充分酶解，同时且避免了化学试剂对产品的污染。在加热变形后进行均质，进一步提高了酶解效率。
根据本发明的制备方法，步骤D中，将所述混悬液调节至pH5～9，优选为pH7～9，更优选为pH7～8。本发明中，将pH调节至上述弱碱性，更有利于本发明的酶制剂进行酶解。本发明中，酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶按照重量比为2～3∶1～2∶1～2组成。根据本发明优选的实施方式，风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2.3～2.8∶1.3～1.8∶1～1.5。根据本发明一个优选的实施方式，风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2.5∶1.5∶1。本发明的酶解过程一次性加入上述酶制剂，并在上述pH条件下进行酶解，能够得到更佳酶解效果。本发明的酶制剂对于鹰嘴豆中的蛋白质成分的酶解效率高，明显高于每种酶单用，且高于现有的鹰嘴豆活性肽用酶。当风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2.5∶1.5∶1时，酶解效率最高。根据本发明的制备方法，所述酶制剂的加入量可以为所述混悬液中固形物重量的0.2～3wt％，优选为0.3～1.5wt％，更优选为0.4～1.2wt％。本发明中，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～7h；优选地，酶解温度为45～60℃，酶解时间为2～6h。在上述酶制剂的加入量、酶解时间和温度下，鹰嘴豆蛋白可实现有效酶解。
根据本发明的制备方法，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～125℃，时间为0.5～3h。步骤E中，灭酶处理后的酶解液可以采用常规方法制成鹰嘴豆活性肽粉。
根据本发明的一个实施方式，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到鹰嘴豆活性肽粉，该鹰嘴豆活性肽粉为全营养鹰嘴豆活性肽。该全营养鹰嘴豆活性肽产品中，肽含量≥40wt％，其中。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持鹰嘴豆活性肽的活性。
根据本发明另一优选的实施方式，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到鹰嘴豆活性肽粉，该鹰嘴豆活性肽粉为精制鹰嘴豆活性肽粉。
本发明中，所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土组成，且活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比6～7∶1～2∶2～3。根据本发明的一个优选的实施方式，所述组合过滤助剂中活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比7∶1.5∶2。根据本发明的另一个优选的实施方式，所述组合过滤助剂中活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比6.7∶1.8∶2。发明人发现，现有方法制备的鹰嘴豆活性肽带有异味，并具有苦味，口感差；多种过滤助剂单用均难以同时将二者脱除。本发明的过滤助剂能够有效除去鹰嘴豆本身带有的异味和苦味，，简化了工艺流程。本发明中，所述陶瓷膜的孔径可以为20～500nm，更优选为20～300mm。采用这样的陶瓷膜孔径，能够实现酶解液的进一步精制。
经过本发明的过滤处理后，得到的精制鹰嘴豆活性肽粉中肽含量≥90wt％。
通常，肽的喷雾干燥操作在120～140℃进行，一般认为这样的干燥温度对于肽的活性影响不大。然而，发明人发现，现有的喷雾干燥的温度明显影响肽的活性。而本发明中，优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持鹰嘴豆活性肽的活性。
<含鹰嘴豆活性肽的组合物及其制备方法>
本发明的含鹰嘴豆活性肽的组合物可以由鹰嘴豆活性肽80～98重量份、苦荞1～10重量份和椰子汁粉1～10重量份制成；或者
本发明的含鹰嘴豆活性肽的组合物可以由鹰嘴豆粉80～98重量份、苦荞1～10重量份和椰子汁粉1～10重量份制成。
本发明的含鹰嘴豆活性肽的组合物的制备方法，可以采用多种制备方法得到。
根据本发明的一个实施方式，所述组合物的制备方法为：(1)制备鹰嘴豆活性肽粉；(2)分别将苦荞和椰子汁粉制备为苦荞粉和椰子汁粉；(3)将所述鹰嘴豆活性肽粉、苦荞粉和椰子汁粉混合均匀，得到本发明的组合物。所述鹰嘴豆活性肽粉优选采用上述的制备方法制备得到。所述苦荞粉优选为将苦荞进行超微粉碎制得。所述椰子汁粉优选为将椰子汁进行超微粉碎制得。其中，步骤(1’)采用上述“鹰嘴豆活性肽的制备方法”制得，这里不再赘述。
根据本发明的另一个实施方式，所述组合物的制备方法为：(1’)制备鹰嘴豆活性肽粉；(2’)将苦荞和椰子汁粉用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3’)将所述鹰嘴豆活性肽粉和药材提取物混合，得到本发明的组合物。其中，步骤(1’)采用上述“鹰嘴豆活性肽的制备方法”制得，这里不再赘述。
本发明的含鹰嘴豆活性肽的组合物可以由鹰嘴豆粉80～98重量份、苦荞1～10重量份和椰子汁粉1～10重量份制成。
优选地，所述含鹰嘴豆肽的组合物的制备方法为：
A’、将鹰嘴豆粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，取上清液；
B’、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2～3∶1～2∶1～2；酶解温度为40-65℃，酶解时间为1.5～7h，得到酶解液；
D1’、将所述苦荞和椰子汁粉加入所述酶解液中，加热回流提取，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液制成含鹰嘴豆活性肽的组合物。
其中，步骤A’～D’的具体操作和参数分别与上述“鹰嘴豆活性肽的制备方法”中A～D相同，这里不再赘述。
步骤D1’中，优选地，所述苦荞和椰子汁以粉末形式加入所述酶解液中，从而提高提取率。加热回流提取时间为1～3小时，优选为1～2小时。所述过滤可采用常规过滤方法，从而滤去药渣，得到混合液。
根据本发明一个优选的实施方式，步骤E’中，可以将步骤D1’得到的混合液进行浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到全营养的含鹰嘴豆活性肽的组合物。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持鹰嘴豆活性肽的活性。
根据本发明另一个优选的实施方式，步骤E’中，将所述混合液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到精制的含鹰嘴豆活性肽的组合物。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持鹰嘴豆活性肽的活性。
本发明中，所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂如上文所述，这里不再赘述。本发明的过滤助剂除了除去鹰嘴豆本身带有的异味和苦味，除去油脂类成分，还除去了混合液中的苦荞和椰子汁粉中的非溶解性成分。本发明中，所述陶瓷膜的孔径可以为20～500nm，更优选为20～300mm。采用这样的陶瓷膜孔径，能够实现混合液的进一步精制。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持鹰嘴豆活性肽的活性。
以下对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明的保护范围不受此限制。
实施例1
全营养鹰嘴豆活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干鹰嘴豆进行超微粉碎，过400目筛，得到鹰嘴豆粉；将鹰嘴豆粉加入鹰嘴豆粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH 8，浸泡24h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于95℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶按照重量比2.5∶1.5∶1组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.5wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2.5h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为90℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液浓缩，均质乳化，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到全营养鹰嘴豆活性肽粉。
实施例2
全营养鹰嘴豆活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干鹰嘴豆进行超微粉碎，过400目筛，得到鹰嘴豆粉；将鹰嘴豆粉加入鹰嘴豆粉重量3.5倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH9，浸泡24h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH6，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于95℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至7.5，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶按照重量比1.4∶1.6∶1.2组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.4wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为95℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液浓缩，均质乳化，在中低温喷雾干燥塔内于100℃喷雾干燥，得到全营养鹰嘴豆活性肽粉。
实施例3
精制鹰嘴豆活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干鹰嘴豆进行超微粉碎，过400目筛，得到鹰嘴豆粉；将鹰嘴豆粉加入鹰嘴豆粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH8，浸泡24h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于95℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶按照2.5∶1.5∶1组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.5wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为90℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比7∶1.5∶2组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将该活性肽透过液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到精制鹰嘴豆活性肽粉。
实施例4
精制鹰嘴豆活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干鹰嘴豆进行超微粉碎，过400目筛，得到鹰嘴豆粉；将鹰嘴豆粉加入鹰嘴豆粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH8，浸泡24h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于95℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶按照2.6∶1.6∶1.2组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.7wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为90℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比6.7∶1.8∶2组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将该活性肽透过液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到精制鹰嘴豆活性肽粉。
实施例5
分别将苦荞和椰子汁粉超微粉碎制成苦荞粉和椰子汁粉。将实施例1的鹰嘴豆活性肽粉92重量份、苦荞粉4重量份和椰子汁粉4份混合均匀，得到全营养的含鹰嘴豆活性肽的组合物。
实施例6
将苦荞3重量份和椰子汁粉3重量份混合，加入水作为溶剂加热回流提取3次，每次加水量依次为苦荞和椰子汁粉总重量的8倍量、6倍量、6倍量，每次提取时间依次为1.5小时、1小时、1小时，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物。将实施例1的鹰嘴豆活性肽粉94重量份和上述药材提取物混合均匀，得到全营养的含鹰嘴豆活性肽的组合物。
实施例7
分别将苦荞和椰子汁粉超微粉碎制成苦荞粉和椰子汁粉。将实施例3的精制鹰嘴豆活性肽粉86重量份、苦荞粉8重量份和椰子汁粉6份混合均匀，得到本实施例的含鹰嘴豆活性肽的组合物。
实施例8
A’、将干鹰嘴豆进行超微粉碎，过400目筛，得到鹰嘴豆粉94重量份；将鹰嘴豆粉加入鹰嘴豆粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH8，浸泡24h；机械搅拌，离心，取上清液；
B’、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于95℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和中性蛋白酶按照2.5∶1.5∶1组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.5wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
D1’、将苦荞3重量份和椰子汁粉3重量份加入所述酶解液中，加热回流提取，提取时间为2h，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比7∶1.5∶2组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，滤液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到含鹰嘴豆活性肽的组合物。
对比例1
除了将实施例3中步骤D的酶制剂替换为由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶按照3∶3∶1组成，其他步骤与实施例3相同。
对比例2
除了将实施例3中步骤B的醋酸溶液替换为盐酸溶液，其他步骤与对比文件3相同。
对比例3
除了将实施例3中步骤E的过滤助剂替换为同等重量的活性炭，其他步骤与实施例3相同。
对比例4
除了将实施例3中步骤E的过滤助剂替换为同等重量的珍珠岩，其他步骤与实施例3相同。
对比例5
除了将实施例3中步骤E的过滤助剂替换为同等重量的硅藻土，其他步骤与实施例3相同。
对比例6
除了将实施例3中步骤E的喷雾干燥温度设置为135℃，其他步骤与实施例3相同。
测定实施例1～4和对比例1～6中鹰嘴豆活性肽中肽含量结果见表1。
测定实施例1～4和对比例1～6中鹰嘴豆活性肽中味道结果见表2。
肽的含量测定方法为：根据GB/T 22492大豆肽粉中肽含量的测定方法进行。
苦味评价方法为：取1g鹰嘴豆活性肽加入10ml温水中搅拌均匀，将稀释倍数计为苦味值，计算20人的平均苦味值，结果见表2。
腥味评价方法为：评价方法为：0-无腥味；1-略有腥味；2-腥味较弱；3-有腥味；4-腥味一般；5-腥味偏重；6-腥味较重；7-腥味很重计算20人的平均腥味值，结果见表2。
表1
表2
本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员可以想到的任何变形、改进、替换均落入本发明的范围。

Claims (10)

1.一种鹰嘴豆活性肽的制备方法，其包括如下步骤：
A、将鹰嘴豆粉加入水，调节pH至8～9，浸泡22～26小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2～3∶1～2∶1～2，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～7h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成鹰嘴豆活性肽粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6；所述弱酸选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～125℃，时间为0.5～3h。
4.根据权利要求1所述的鹰嘴豆活性肽的制备方法，其特征在于，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到鹰嘴豆活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行。
5.根据权利要求1所述的鹰嘴豆活性肽的制备方法，其特征在于，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到鹰嘴豆活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行；所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比6～7∶1～2∶2～3组成。
6.一种鹰嘴豆活性肽，其特征在于，所述鹰嘴豆活性肽采用根据权利要求1～5任一项所述的方法制备得到。
7.一种含鹰嘴豆活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物由鹰嘴豆活性肽80～98重量份、苦荞1～10重量份和椰子汁粉1～10重量份制成。
8.根据权利要求7所述的含鹰嘴豆活性肽的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：(1)根据权利要求1～5任一项所述的方法制备鹰嘴豆活性肽粉；(2)分别将苦荞和椰子汁粉制备为苦荞粉和椰子汁粉；(3)将所述鹰嘴豆活性肽粉、苦荞粉和椰子汁粉混合均匀，得到所述组合物；或者
所述制备方法包括：(1)根据权利要求1～5任一项所述的方法制备鹰嘴豆活性肽粉；(2)将苦荞和椰子汁粉混合后用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3)将所述鹰嘴豆活性肽粉和药材提取物混合均匀，得到所述组合物。
9.一种含鹰嘴豆活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物由鹰嘴豆粉90～98重量份、苦荞1～5重量份和椰子汁粉1～5重量份制成。
10.根据权利要求9所述的含鹰嘴豆活性肽的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
A’、将鹰嘴豆粉加入水，调节pH至8～9，浸泡22～26小时，固液分离，取上清液；
B’、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、菠萝蛋白酶和胃蛋白酶的重量比为2～3∶1～2∶1～2；酶解温度为40-65℃，酶解时间为1.5-7h，得到酶解液；
D1’、将所述苦荞和椰子汁粉加入所述酶解液中，加热回流提取，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液制成含鹰嘴豆活性肽的组合物。
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