CN107779488A - 一种蛋白核小球藻活性肽、组合物及制备方法 - Google Patents
一种蛋白核小球藻活性肽、组合物及制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107779488A CN107779488A CN201711068402.5A CN201711068402A CN107779488A CN 107779488 A CN107779488 A CN 107779488A CN 201711068402 A CN201711068402 A CN 201711068402A CN 107779488 A CN107779488 A CN 107779488A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chlorella pyrenoidosa
- active peptide
- preparation
- chlorella
- powder
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 95
- 235000007091 Chlorella pyrenoidosa Nutrition 0.000 title claims abstract description 93
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 60
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 241000195652 Auxenochlorella pyrenoidosa Species 0.000 title abstract 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 44
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 43
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 43
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims abstract description 43
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 34
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 14
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 244000249214 Chlorella pyrenoidosa Species 0.000 claims description 89
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 18
- 244000119298 Emblica officinalis Species 0.000 claims description 16
- 235000015489 Emblica officinalis Nutrition 0.000 claims description 16
- 244000223014 Syzygium aromaticum Species 0.000 claims description 16
- 235000016639 Syzygium aromaticum Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 15
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 15
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 8
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 7
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- 239000003595 mist Substances 0.000 claims description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 2
- 244000189799 Asimina triloba Species 0.000 claims 1
- 235000006264 Asimina triloba Nutrition 0.000 claims 1
- 235000009467 Carica papaya Nutrition 0.000 claims 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 claims 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 claims 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 abstract description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 241000195649 Chlorella <Chlorellales> Species 0.000 description 16
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 13
- RRAFCDWBNXTKKO-UHFFFAOYSA-N eugenol Chemical compound COC1=CC(CC=C)=CC=C1O RRAFCDWBNXTKKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 8
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- SHFGJEQAOUMGJM-UHFFFAOYSA-N dialuminum dipotassium disodium dioxosilane iron(3+) oxocalcium oxomagnesium oxygen(2-) Chemical compound [O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[Na+].[Na+].[Al+3].[Al+3].[K+].[K+].[Fe+3].[Fe+3].O=[Mg].O=[Ca].O=[Si]=O SHFGJEQAOUMGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 7
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 6
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 6
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 6
- NPBVQXIMTZKSBA-UHFFFAOYSA-N Chavibetol Natural products COC1=CC=C(CC=C)C=C1O NPBVQXIMTZKSBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000005770 Eugenol Substances 0.000 description 5
- UVMRYBDEERADNV-UHFFFAOYSA-N Pseudoeugenol Natural products COC1=CC(C(C)=C)=CC=C1O UVMRYBDEERADNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 229960002217 eugenol Drugs 0.000 description 5
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 4
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 4
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 4
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 4
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 4
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 3
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical class CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N Gly-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CN=CN1 MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000008469 Peptic Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 241001130943 Phyllanthus <Aves> Species 0.000 description 2
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000767 anti-ulcer Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 2
- 108010038983 glycyl-histidyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 208000011906 peptic ulcer disease Diseases 0.000 description 2
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- SCCDQYPEOIRVGX-UHFFFAOYSA-N Acetyleugenol Chemical compound COC1=CC(CC=C)=CC=C1OC(C)=O SCCDQYPEOIRVGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000298715 Actinidia chinensis Species 0.000 description 1
- 235000009434 Actinidia chinensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000009436 Actinidia deliciosa Nutrition 0.000 description 1
- 208000006770 Ascorbic Acid Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- 208000031361 Hiccup Diseases 0.000 description 1
- 241000521257 Hydrops Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000009233 Morning Sickness Diseases 0.000 description 1
- 229920000715 Mucilage Polymers 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010068319 Oropharyngeal pain Diseases 0.000 description 1
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 208000002474 Tinea Diseases 0.000 description 1
- 241000893966 Trichophyton verrucosum Species 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 206010047623 Vitamin C deficiency Diseases 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 208000034850 Vomiting in pregnancy Diseases 0.000 description 1
- CANRESZKMUPMAE-UHFFFAOYSA-L Zinc lactate Chemical compound [Zn+2].CC(O)C([O-])=O.CC(O)C([O-])=O CANRESZKMUPMAE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000001004 anti-acetylcholinic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000879 anti-atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 239000009609 fructus phyllanthi Substances 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 208000010233 scurvy Diseases 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 235000021055 solid food Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000035922 thirst Effects 0.000 description 1
- 201000004647 tinea pedis Diseases 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 229940050168 zinc lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000011576 zinc lactate Substances 0.000 description 1
- 235000000193 zinc lactate Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明提供了一种蛋白核小球藻活性肽及其组合物和制备方法。该制备方法包括以下步骤：A、将蛋白核小球藻粉加入水，调节pH至8～9，浸泡20～24小时，固液分离，将上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，将固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，将得到的混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由重量比为3～5∶2～4的胃蛋白酶和木瓜蛋白酶组成，酶解温度为40～60℃，酶解时间为2～7h，得到酶解液，将酶解液灭酶处理，制成蛋白核小球藻活性肽粉。本发明的活性肽和组合物具有提高免疫力作用。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种蛋白核小球藻活性肽的制备方法。
背景技术
蛋白核小球藻，是一种全营养补充剂，2012年被中华人民共和国卫生部批准为新资源食品。小球藻含丰富的蛋白质、脂质、食用纤维、生物素、纤维素、不饱和脂肪酸、生物活性多糖、核酸、维生素、微量元素、矿物质、叶酸与叶绿素而且是天然具有。这些特殊的有效成分具有防治消化性溃疡、抗肿瘤、增强免疫、抗辐射、抗病原微生物、防治贫血、降血脂和抗动脉粥样硬化等保健和药理作用。
目前，蛋白核小球藻在食品中的应用，通常是以小球藻活体、粉末(例如破壁粉末)作为食品添加剂添加至固体食品或液体饮料中。
例如，CN201110084190.6公开了小球藻在食品中的应用，包括将小球藻制成破壁小球藻干粉或者破壁小球藻浓缩液，其中破壁小球藻浓缩液或者破壁小球藻干粉占食品组分总重量的0.4～0.8％，活性碳占破壁小球藻浓缩液或者破壁小球藻干粉重量的0.05～0.08％。
CN201510653921.2公开了一种降低大强度运动后呼吸道感染率的保健食品，包括如下重量份的原料：破壁蛋白核小球藻粉20～90份，小麦蛋白9～77份，维生素A 0.0024～0.0075份，维生素B2 0.01～0.03份，维生素C 0.3～2.0份，维生素D 0.000002～0.00001份，乳酸锌0.2～0.8份，富硒酵母0.3～0.87份；其中蛋白核小球藻破壁粉碎制成蛋白核小球藻粉，然后用于制备保健食品。
CN201510733081.0公开了一种小球藻功能饮料，其主要由小球藻活体和鲜榨汁制成；小球藻活体能在鲜榨汁中一直存活，并保持活力。
发明内容
本发明第一目的在于提供一种蛋白核小球藻活性肽的制备方法，该方法制得的蛋白核小球藻活性肽多肽含量高，营养价值丰富，且具有良好的免疫作用。
本发明的另一目的在于提供一种含有蛋白核小球藻活性肽的组合物。
本发明的再一目的在于提供所述含有蛋白核小球藻活性肽的组合物的制备方法。
本发明的蛋白核小球藻活性肽的制备方法，包括如下步骤：
A、将蛋白核小球藻粉加入水，调节pH至8～9，浸泡20～24小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶组成，且所述胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为3～5∶2～4，酶解温度为40～60℃，酶解时间为2～7h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成蛋白核小球藻活性肽粉。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6；所述弱酸选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～120℃，时间为0.5～3h。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到蛋白核小球藻活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到蛋白核小球藻活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行；所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比4～6∶3～4∶1～2组成。
本发明还提供一种蛋白核小球藻活性肽，该蛋白核小球藻活性肽采用上述方法制备得到。
本发明还提供一种含蛋白核小球藻活性肽的组合物，其由蛋白核小球藻活性肽70～90重量份、余甘子5～15重量份和丁香5～15重量份制成。
本发明还提供一种所述含蛋白核小球藻活性肽的组合物的制备方法，所述制备方法包括：(1)采用上述方法制备蛋白核小球藻活性肽粉；(2)将余甘子和丁香混合后用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3)将所述蛋白核小球藻活性肽粉和药材提取物混合均匀，得到所述组合物。
本发明的含蛋白核小球藻活性肽的组合物的制备方法，将蛋白核小球藻活性肽与余甘子、丁香配伍，能够提升制备的蛋白核小球藻活性肽的营养成分保健功能。余甘子和丁香对机体的主要作用如下：
余甘子：余甘果又名牛甘果，油甘果，因其吃起来“先苦后甜”得名。目前市场上也有野生牛甘果卖和水果型牛甘果两种。与野生牛甘果相比，水果型牛甘果具有果大、肉厚、纤维少、营养丰富、产量高、效益好等特点，而且吃起来更加甘甜爽口。具有丰富的维生素C、E、B、多种微量元素及矿物质，同时还含有人体所需的14种氨基酸以及超氧化物歧化酶(SOD)和丰富的有机硒，尤其是维生素C，每100克鲜余甘果中含维生素C500-1841毫克，比素有维生素之王猕猴桃高4倍，比柑桔高25倍，具有多种保健医疗作用。余甘子果实味酸微涩，清热凉血，消食健脾，生津止渴。主治血热血瘀，消化不良，腹胀，咳嗽，喉痛，口干及维生素C缺乏症。近年研究结果表明，余甘子具有抗炎，抗氧化，抗衰老，保肝等作用。丁香：丁香味辛、性温，具有温中降逆、补肾助阳的作用。它还是一味很好的温胃药，对由寒邪引起的胃痛、呕吐、呃逆、腹痛、泄泻以及妇女寒性痛经等，均有良好的疗效，它还可缓解腹部胀气，增强消化能力，减轻恶心呕吐，尤其是孕妇害喜症状。
丁香含有丁香油，对于致病性真菌及葡萄球菌、痢疾和大肠杆菌等有抑制作用，也可作外用，对体癣及足癣都有很好的疗效。抗胃溃疡：可抑制大鼠实验性胃溃疡形成。丁香挥发油和丁香酚可使胃黏液分泌显著增加，而酸度不增加。丁香酚可能是抗溃疡的活性成分。健胃：可缓解腹部胀气，增强消化能力，减轻恶心呕吐。抑制肠兴奋：其水煎剂能抑制离体兔肠自发性收缩，并能对抗乙酰胆碱、组胺等对离体肠管的兴奋作用。抗腹泻：其水提物和丁香酚能拮抗番泻叶或蓖麻油引起的大肠性腹泻与肠腔积液。丁香酚和乙酰丁香酚能抑制花生四烯酸诱导的兔和人血小板聚集和全血聚集，并抑制ATP释放。其抗聚的机制为抑制血小板内TXB的合成。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。
<蛋白核小球藻活性肽的制备方法及蛋白核小球藻活性肽>
本发明的蛋白核小球藻活性肽的制备方法，包括如下步骤：
A、将蛋白核小球藻粉加入水，调节pH至8～9，浸泡20～24小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶组成，且所述胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为3～5∶2～4，酶解温度为40～60℃，酶解时间为2～7h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成蛋白核小球藻活性肽粉。
根据本发明的制备方法，步骤A中，所述蛋白核小球藻粉的粒径为4～70μm。所述蛋白核小球藻粉可以通过将干蛋白核小球藻进行超微粉碎，然后过筛得到，例如过200～600目筛。采用本发明的粒径的蛋白核小球藻粉，能够在后期的酶解步骤中有效提高酶解率，充分利用蛋白核小球藻中的蛋白成分。所述浸泡优选为在搅拌下进行浸泡，从而使蛋白核小球藻粉中的成分充分溶出。步骤A中，加水量为蛋白核小球藻粉重量的3～8倍，优选为3～5倍。优选地，在浸泡工序完成后，进行机械搅拌，从而使液体均匀，便于离心。
步骤A中，所述固液分离方法可以为过滤、离心等，并优选为离心分离。步骤A中，浸泡过程可以加热或在常温下进行，并优选在常温下进行。通常，碱液浸泡过程中需进行加热处理；而发明人发现，在常温下浸泡即可将蛋白核小球藻粉中的成分充分溶出，从而避免进行加热产生的额外能耗，且操作更方便。
根据本发明的制备方法，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6。所述弱酸可以选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。现有的蛋白核小球藻活性肽提取方法中，考虑到调节效率，这一步骤通常采用强酸调节pH值至酸性，所述强酸例如为盐酸、硫酸等，而较少考虑酸的性质对于产品的影响；发明人发现，强酸对于蛋白质成分破坏较大，对最终得到的蛋白核小球藻活性肽产品活性产生不利影响。而采用弱酸调节pH，使蛋白质沉淀出来，减少了对蛋白质营养物质的破坏，且最终得到的蛋白核小球藻活性肽产品活性更好。步骤B中，优选地，所述沉淀时间为8～12h，从而保证上清液中的蛋白质成分在上述pH下充分沉淀出来。优选地，沉淀工序完成后进行机械搅拌在搅拌下进行，从而使液体均匀，便于离心。
根据本发明的制备方法，步骤C中，采用加热方法使蛋白质变性。在所述的加热条件下即能够实现蛋白核小球藻中的蛋白质成分完全变性，且有利于后续步骤中进行充分酶解，同时且避免了化学试剂对产品的污染。在加热变形后进行均质，进一步提高了酶解效率。
根据本发明的制备方法，步骤D中，将所述混悬液调节至pH5～9，优选为pH7～9，更优选为pH7～8。本发明中，将pH调节至上述弱碱性，更有利于本发明的酶制剂进行酶解。本发明中，酶制剂由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为3～5∶2～4组成。根据本发明优选的实施方式，胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为3.3～4.5∶2.5～3.8。根据本发明一个优选的实施方式，胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为3.5∶2.5。本发明的酶解过程一次性加入上述酶制剂，并在上述pH条件下进行酶解，能够得到更佳酶解效果。本发明的酶制剂对于蛋白核小球藻中的蛋白质成分的酶解效率高，明显高于每种酶单用，且高于现有的蛋白核小球藻活性肽用酶。当胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为3.5∶2.5时，酶解效率最高。根据本发明的制备方法，所述酶制剂的加入量可以为所述混悬液中固形物重量的0.5～4wt％，优选为0.7～3.5wt％，更优选为1.2～2.0wt％。本发明中，酶解温度为40～60℃，酶解时间为2～7h；优选地，酶解温度为45～60℃，酶解时间为2～6h。在上述酶制剂的加入量、酶解时间和温度下，蛋白核小球藻蛋白可实现有效酶解。
根据本发明的制备方法，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～120℃，时间为0.5～3h。步骤E中，灭酶处理后的酶解液可以采用常规方法制成蛋白核小球藻活性肽粉。
根据本发明另一优选的实施方式，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到蛋白核小球藻活性肽粉。
本发明中，所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土组成，且活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比4～6∶3～4∶1～2。根据本发明的一个优选的实施方式，所述组合过滤助剂中活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比5.5∶3.5∶2。根据本发明的另一个优选的实施方式，所述组合过滤助剂中活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比5.7∶3.8∶2。本发明的过滤助剂能够有效除去苦味。本发明中，所述陶瓷膜的孔径可以为20～500nm，更优选为20～300mm。采用这样的陶瓷膜孔径，能够实现酶解液的进一步精制。
经过本发明的过滤处理后，得到的蛋白核小球藻活性肽粉中肽含量≥90wt％。
通常，肽的喷雾干燥操作在120～140℃进行，一般认为这样的干燥温度对于肽的活性影响不大。然而，发明人发现，现有的喷雾干燥的温度明显影响肽的活性。而本发明中，优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持蛋白核小球藻活性肽的热敏活性物质。
<含蛋白核小球藻活性肽的组合物及其制备方法>
本发明的含蛋白核小球藻活性肽的组合物可以由包括蛋白核小球藻活性肽70～90重量份、余甘子5～15重量份和丁香5～15重量份的原料制成。
根据本发明的一个实施方式，所述含蛋白核小球藻活性肽的组合物由蛋白核小球藻活性肽70～90重量份、余甘子5～15重量份和丁香5～15重量份的原料制成。
本发明中，蛋白核小球藻活性肽可以采用本发明的上述制备方法制备得到。蛋白核小球藻活性肽溶解性和消化利用率高，无依赖性，可有效提高人体内白细胞水平，从而提高人体免疫功能，延缓人体机能衰老。余甘子具有抗炎，抗氧化，抗衰老，保肝等作用。丁香具有丁香酚，是抗溃疡的活性成分。本发明的蛋白核小球藻活性肽配合少量余甘子与丁香，预防消化性溃疡、调节血脂、防治贫血有辅助作用。
本发明的含蛋白核小球藻活性肽的组合物的制备方法，可以采用多种不同比例的物料配比得到。
根据本发明的一个实施方式，所述组合物的制备方法为：(1)制备蛋白核小球藻活性肽粉；(2)将余甘子和丁香用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3)将所述蛋白核小球藻活性肽粉和药材提取物混合，得到本发明的组合物。其中，步骤(1)采用上述“蛋白核小球藻活性肽的制备方法”制得，这里不再赘述。
以下对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明的保护范围不受此限制。
实施例1
蛋白核小球藻活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将蛋白核小球藻进行超微粉碎，过400目筛，得到蛋白核小球藻粉；将蛋白核小球藻粉加入蛋白核小球藻粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH 8，浸泡20h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于95℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按照重量比3.5∶2.5组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的1wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2.5h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为95℃，时间为1.5h；将灭酶后的酶解液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比5.7∶3.8∶2组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将该活性肽透过液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到蛋白核小球藻活性肽粉。
实施例2
蛋白核小球藻活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将蛋白核小球藻进行超微粉碎，过350目筛，得到蛋白核小球藻粉；将蛋白核小球藻粉加入蛋白核小球藻粉重量3.5倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH 9，浸泡23h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH6，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于90℃下加热25min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至7.5，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按照重量比3.6∶2.7组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的1.2wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为3h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为95℃，时间为1.5h；将灭酶后的酶解液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比5.5∶3.8∶1.5组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将该活性肽透过液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到蛋白核小球藻活性肽粉。
实施例3
除了将实施例1中步骤E不进行过滤操作，而是将步骤E的灭酶后的酶解液直接进行浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到蛋白核小球藻活性肽，其他步骤与实施例1相同。
实施例4
将余甘子8重量份和丁香8重量份混合，加入水作为溶剂加热回流提取3次，每次加水量依次为余甘子和丁香总重量的8倍量、6倍量、6倍量，每次提取时间依次为1.5小时、1.5小时、1小时，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物。将实施例1的蛋白核小球藻活性肽粉84重量份和上述药材提取物混合均匀，得到含蛋白核小球藻活性肽的组合物。
对比例1
除了将实施例1中步骤D的酶制剂替换为由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶按照1∶3组成，其他步骤与实施例1相同。
对比例2
除了将实施例1的步骤B的醋酸溶液替换为盐酸溶液，其他步骤与实施例1相同。
对比例3
除了将实施例1的步骤E的过滤助剂替换为同等重量的活性炭，其他步骤与实施例1相同。
对比例4
除了将实施例1的步骤E的过滤助剂替换为同等重量的珍珠岩，其他步骤与实施例1相同。
对比例5
除了将实施例1中步骤E的过滤助剂替换为同等重量的硅藻土，其他步骤与实施例1相同。
对比例6
除了将实施例1的步骤E的喷雾干燥温度设置为135℃，其他步骤与实施例1相同。
对比例7
根据专利CN201110084190.6中的方法将蛋白核小球藻做成肽。
测定实施例1～3和对比例1～7的蛋白核小球藻活性肽中肽含量以及活性肽的味道，结果见表1。
肽的含量测定方法为：根据GB/T 22492大豆肽粉中肽含量的测定方法进行。
苦味评价方法为：取1g蛋白核小球藻活性肽加入10ml温水中搅拌均匀，将稀释倍数计为苦味值，计算20人的平均苦味值。
表1
实验例1
下面对实施例1的活性肽、实施例4的组合物、对比例7的蛋白核小球藻破壁粉进行小鼠灌胃测试，具体测试方法如下：
将50只小鼠按体重随机分成5组：空白对照组、实施例1、实施例4和对比实施例7，每组10只，用北京维通利华实验动物技术有限公司提供的标准饲料分笼饲养，自由饮食饮水。适应性喂养5天后进行灌胃试验。
每日分别给实验组小鼠灌胃，小鼠定时测定体重，根据体重计算灌胃的量，灌胃量为：1.7g/日/kg，连续灌胃30天。测试细胞免疫功能指标、体液免疫功能指标和NK细胞活性。
表2：空白对照组、实施例、对比实施例小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能和NK细胞活性。
相同列中数据(平均值±标准差)后不同字母表示显著性差异(p＜0.05，n＝3).
结果表明，各组小鼠体重的增长差异不大，动物在试验过程中活动正常，无异常表现，表明各物质对小鼠的生长发育和健康无不良影响。具体小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能和NK细胞活性结果如表2。由表2测试数据可以知道，本实验提供的实施例1的活性肽、实施例4的组合物、对比例7的蛋白核小球藻破壁粉均具有提高免疫作用，且效果上实施例4＞实施例1＞对比例7。
本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员可以想到的任何变形、改进、替换均落入本发明的范围。
Claims (9)
1.一种蛋白核小球藻活性肽的制备方法，其包括如下步骤：
A、将蛋白核小球藻粉加入水，调节pH至8～9，浸泡20～24小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于80～100℃下加热20～40min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～9，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶组成，且所述胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比为3～5∶2～4，酶解温度为40～60℃，酶解时间为2～7h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成蛋白核小球藻活性肽粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6；所述弱酸选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～120℃，时间为0.5～3h。
4.根据权利要求1所述的蛋白核小球藻活性肽的制备方法，其特征在于，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到蛋白核小球藻活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行。
5.根据权利要求1所述的蛋白核小球藻活性肽的制备方法，其特征在于，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到蛋白核小球藻活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行；所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比4～6∶3～4∶1～2组成。
6.一种蛋白核小球藻活性肽，其特征在于，所述蛋白核小球藻活性肽采用根据权利要求1～5任一项所述的方法制备得到。
7.根据权利要求6的蛋白核小球藻活性肽，其特征在于，按照权利要求5所述的制备方法制得，所述蛋白核小球藻活性肽的肽的含量≥90wt％。
8.一种含蛋白核小球藻活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物由蛋白核小球藻活性肽70～90重量份、余甘子5～15重量份和丁香5～15重量份制成；所述蛋白核小球藻活性肽如权利要求6或7所述。
9.根据权利要求8所述的含蛋白核小球藻活性肽的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：(1)根据权利要求1～5任一项所述的方法制备蛋白核小球藻活性肽粉；(2)将余甘子和丁香混合后用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3)将所述蛋白核小球藻活性肽粉和药材提取物混合均匀，得到所述组合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201711068402.5A CN107779488A (zh) | 2017-11-02 | 2017-11-02 | 一种蛋白核小球藻活性肽、组合物及制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201711068402.5A CN107779488A (zh) | 2017-11-02 | 2017-11-02 | 一种蛋白核小球藻活性肽、组合物及制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107779488A true CN107779488A (zh) | 2018-03-09 |
Family
ID=61432350
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201711068402.5A Pending CN107779488A (zh) | 2017-11-02 | 2017-11-02 | 一种蛋白核小球藻活性肽、组合物及制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107779488A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108517342A (zh) * | 2018-04-24 | 2018-09-11 | 陆新军 | 一种多藻蛋白酶解制备多肽的方法 |
| CN109402204A (zh) * | 2018-11-05 | 2019-03-01 | 福建师范大学 | 一种小球藻免疫活性肽的制备方法 |
| CN109497470A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-03-22 | 时代生物科技（深圳）有限公司 | 一种蛋白核小球藻多肽缓解增肥组合物及其制备方法 |
| CN112266944A (zh) * | 2020-10-31 | 2021-01-26 | 润科生物工程（福建）有限公司 | 一种酸酶法获得小球藻蛋白肽的工业生产方法 |
| CN112293635A (zh) * | 2020-11-07 | 2021-02-02 | 润科生物工程（福建）有限公司 | 一种速溶小球藻蛋白肽粉的喷雾干燥工艺及其在固体饮料中的应用 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101701240A (zh) * | 2009-11-12 | 2010-05-05 | 常州康和生物技术有限公司 | 利用组合酶酶解蚕蛹蛋白制取降血压肽的方法 |
| CN101748180A (zh) * | 2010-01-18 | 2010-06-23 | 山东世纪春食品有限公司 | 功能性花生小分子混合多肽及其制备方法和应用 |
| CN102847134A (zh) * | 2012-08-31 | 2013-01-02 | 华南理工大学 | 小球藻多肽微胶囊的制备方法 |
| CN104120160A (zh) * | 2014-06-10 | 2014-10-29 | 中国计量学院 | 一种小球藻抗氧化肽的制备方法 |
| CN104789629A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-07-22 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法 |
| CN105233246A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-01-13 | 安徽生物肽产业研究院有限公司 | 一种用于治疗缺血性中风的土鳖虫小肽药物 |
-
2017
- 2017-11-02 CN CN201711068402.5A patent/CN107779488A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101701240A (zh) * | 2009-11-12 | 2010-05-05 | 常州康和生物技术有限公司 | 利用组合酶酶解蚕蛹蛋白制取降血压肽的方法 |
| CN101748180A (zh) * | 2010-01-18 | 2010-06-23 | 山东世纪春食品有限公司 | 功能性花生小分子混合多肽及其制备方法和应用 |
| CN102847134A (zh) * | 2012-08-31 | 2013-01-02 | 华南理工大学 | 小球藻多肽微胶囊的制备方法 |
| CN104120160A (zh) * | 2014-06-10 | 2014-10-29 | 中国计量学院 | 一种小球藻抗氧化肽的制备方法 |
| CN104789629A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-07-22 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法 |
| CN105233246A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-01-13 | 安徽生物肽产业研究院有限公司 | 一种用于治疗缺血性中风的土鳖虫小肽药物 |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108517342A (zh) * | 2018-04-24 | 2018-09-11 | 陆新军 | 一种多藻蛋白酶解制备多肽的方法 |
| CN109402204A (zh) * | 2018-11-05 | 2019-03-01 | 福建师范大学 | 一种小球藻免疫活性肽的制备方法 |
| CN109402204B (zh) * | 2018-11-05 | 2021-09-14 | 福建师范大学 | 一种小球藻免疫活性肽的制备方法 |
| CN109497470A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-03-22 | 时代生物科技（深圳）有限公司 | 一种蛋白核小球藻多肽缓解增肥组合物及其制备方法 |
| CN112266944A (zh) * | 2020-10-31 | 2021-01-26 | 润科生物工程（福建）有限公司 | 一种酸酶法获得小球藻蛋白肽的工业生产方法 |
| CN112293635A (zh) * | 2020-11-07 | 2021-02-02 | 润科生物工程（福建）有限公司 | 一种速溶小球藻蛋白肽粉的喷雾干燥工艺及其在固体饮料中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107779488A (zh) | 一种蛋白核小球藻活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN104351888B (zh) | 一种果籽原浆液制备方法及其制备的饮料 | |
| CN100381130C (zh) | 蜂花粉营养口服液及其制备方法 | |
| CN103947967A (zh) | 双色黑红果枸杞片及其制备方法 | |
| CN104207150A (zh) | 大豆肽真菌多糖口服液及其制备方法 | |
| CN110269224A (zh) | 一种接骨木果冻及其制备方法 | |
| CN107753927A (zh) | 具有消食化积作用的含鸡内金肽的中药组合物及其制备方法和用途 | |
| CN106689948B (zh) | 一种胶原蛋白复合亚麻酸饮料及其制备方法 | |
| CN107998333A (zh) | 一种阿胶肽制品的制备方法 | |
| CN109601795A (zh) | 以赶黄草为主要原料的组合物解酒饮料及其制备方法 | |
| US20150125558A1 (en) | Pleuropterus multiflorus extract and dipsacus asperoides extract for secreting insulin-like growth factor and promoting bone structure growth, and method for preparing same | |
| CN107674905A (zh) | 螺旋藻活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN109170313A (zh) | 一种抗热应激蛋鸡饲料复合添加剂及其制备方法 | |
| CN107648463A (zh) | 具有潜阳补阴作用的含牡蛎肽的中药组合物及其制备方法和用途 | |
| CN105558260B (zh) | 马铃薯肽营养品及其制备方法 | |
| CN107760749A (zh) | 一种水蛭活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN106561826A (zh) | 一种红枣枸杞功能型调配乳的制备方法 | |
| CN108783159A (zh) | 一种火龙果花保健饮料及其制备方法 | |
| CN106360207B (zh) | 一种制备壳寡糖玛卡人参功能饮料的方法以及由此制得的功能性饮料 | |
| CN110338264A (zh) | 一种五谷复合多肽及其制备方法 | |
| CN107805653A (zh) | 鹰嘴豆活性肽、组合物及制备方法 | |
| CN115644331A (zh) | 一种有效提高抗疲劳功能的海参牡蛎复合肽饮品的制备方法 | |
| CN109090391A (zh) | 一种具有高抗氧化活性的大豆多肽饮料及其制备方法 | |
| CN102174628B (zh) | 一种花生生物活性肽的制备方法 | |
| CN107674904A (zh) | 苦瓜活性肽、组合物及制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20180309 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |