CN104789629A

CN104789629A - 一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法

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Publication number: CN104789629A
Application number: CN201510218588.2A
Authority: CN
Inventors: 蔡木易; 谷瑞增; 鲁军; 张海欣; 刘艳; 潘兴昌; 董哲; 林峰; 马勇; 徐亚光; 马永庆; 金振涛; 陈亮; 陆路; 刘文颖; 魏颖; 马涛; 曹珂璐; 王憬; 李国明
Original assignee: China National Research Institute of Food and Fermentation Industries
Current assignee: China National Research Institute of Food and Fermentation Industries
Priority date: 2015-04-30
Filing date: 2015-04-30
Publication date: 2015-07-22
Anticipated expiration: 2035-04-30
Also published as: CN104789629B

Abstract

本发明提供一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法。该制备方法包括如下步骤：将鹰嘴豆粉与水混合，调节pH值至8～10，经搅拌、离心，收取上清液；调节上清液的pH值至4～6，搅拌、离心，将沉淀与水混合，再次搅拌、离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白；将鹰嘴豆蛋白制成pH值为8～10的蛋白溶液，加入碱性蛋白酶，得到第一酶解液；调节第一酶解液的pH值至6～8，加入中性蛋白酶和风味蛋白酶，灭酶后，制得低聚肽粗液；采用陶瓷膜对低聚肽粗液进行过滤，浓缩、脱色、干燥，制得鹰嘴豆低聚肽。本发明的制备方法原料易得、工艺简单、得率高；制备的鹰嘴豆低聚肽中分子量小于1000Da的肽的质量含量≥90％，低聚肽的质量含量≥75％。

Description

一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种鹰嘴豆肽，特别是涉及一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法。

背景技术

鹰嘴豆为豆科草本植物，起源于亚洲西部和近东地区，因其种子形似鹰嘴而得名。鹰嘴豆蛋白是一种低过敏性、高生物效价的优质植物蛋白质。鹰嘴豆蛋白含量因品种的不同而有较大差异，在15％～30％之间。

在鹰嘴豆多肽的制备过程中首先需要提取蛋白，专利CN101962399A公开了“从鹰嘴豆豆瓣中提取天然抗肿瘤活性蛋白和多肽的方法”，专利CN101602799A公开了“一种鹰嘴豆中原生抗菌多肽的快速制备方法”，这两项制备方法的步骤中都有用磷酸盐缓冲液提取、硫酸铵沉淀，但都存在蛋白利用率低、制备多肽的效率偏低的缺点。

有关鹰嘴豆多肽类制备方法的研究多采用了酶水解法。例如，专利CN102028036A公开了“一种以鹰嘴豆制备多肽饮料的方法”，主要是用木瓜蛋白酶酶解鹰嘴豆蛋白来生产鹰嘴豆多肽，缺点是：仅仅用发酵、细磨制成豆粉，蛋白利用率低。专利CN103194517A公开了“一种鹰嘴豆短肽混合物及其制备方法”，是用碱性蛋白酶和风味蛋白酶直接酶解鹰嘴豆粉，离心后冷冻干燥制成鹰嘴豆短肽粉。专利CN103168913A公开了“鹰嘴豆短肽混合物及其制备方法”，主要是用纤维素酶、碱性蛋白酶和风味酶共同酶解鹰嘴豆粉，离心后冷冻干燥制成鹰嘴豆短肽粉。这两项现有技术中，没有对鹰嘴豆蛋白进行提纯导致蛋白含量不高，蛋白利用率低，还存在冷冻干燥能耗高、对设备要求高、不利于规模化生产等缺点。

公开号为CN103172706A的专利公开了“一种具有抗氧化作用的鹰嘴豆低聚肽的制备方法”制备方法包括脱脂、碱性蛋白酶水解、凝胶层析分离。若按照这项现有技术记载的方法来处理鹰嘴豆蛋白，所需要的凝胶过滤介质成本之高难以想象，而且产率还比较低，完全没有任何市场价值；同时该现有技术使用石油醚进行除脂，造成其产品根本无法应用于食品和药品开发和生产中。公开号为CN102391361A的专利公开了“一种具有抗氧化作用的鹰嘴豆肽及分离纯化方法及用途”，主要是用碱性蛋白酶和复合风味酶对脱脂鹰嘴豆粉进行酶解，得到的产物通过凝胶柱分离而得到具有抗氧化活性的短肽的方法。这项现有技术中，得到的产品单一，应用范围窄，得率低，凝胶过滤层析处理量小，成本太高，不适用于规模化生产。综上所述，以上专利大多存在原料利用率低，工艺复杂，难以应用于大规模生产的缺点。

因此，本领域需要可以实现蛋白利用率高、成本较低、能规模化生产的鹰嘴豆低聚肽制备方法。

发明内容

本发明提供一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法，用于解决现有技术鹰嘴豆肽的制备方法中蛋白利用率低、成本较高、不能规模化生产等技术缺陷。

本发明提供的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，包括如下步骤：

1)将鹰嘴豆粉与水混合后，调节pH值至8～10，经搅拌、离心，收取上清液；

2)调节所述上清液的pH值至4～6后，搅拌、离心，将沉淀与水混合后，再次搅拌、离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白；

3)将所述鹰嘴豆蛋白制成pH值为8～10的蛋白溶液，加入碱性蛋白酶进行第一酶解，得到第一酶解液；

4)调节所述第一酶解液的pH值为6～8，加入中性蛋白酶和风味蛋白酶进行第二酶解，灭酶后，制得低聚肽粗液；

5)采用孔径为50～1200nm的陶瓷膜对所述低聚肽粗液进行过滤后，对滤液进行浓缩、脱色、干燥，制得鹰嘴豆低聚肽。

在本发明具体方案中，将鹰嘴豆在30～50℃温度下浸泡16～24小时，去皮，30～70℃烘干16～24小时，破碎成粉，过10～100目筛，制得所述鹰嘴豆粉。

进一步地，在步骤1)中，用碱水将蛋白溶出以除去不溶于水的支链淀粉等杂质，具体为：将鹰嘴豆粉与水混合，其中鹰嘴豆粉与水的质量体积比为1：(8～12)，即：1kg的鹰嘴豆粉与8～12L的水进行混合。调节pH值为8～10，优选为9～10；加热至30～80℃，优选在30～50℃的温度下进行；保温搅拌30～180min，优选地30～120min；冷却至室温，离心分离，收取上清液。

在本发明具体方案中，再用酸将蛋白沉淀以除去油脂和部分可溶性直链淀粉，包括在步骤2)中，调节收取的上清液的pH值至4～6，优选为4.5～5.5；加热至30～80℃，保温搅拌的时间为20～60min，离心收集沉淀，将沉淀与水的质量体积比为1：(2～10)，优选为1：(3～5)；继续混合后，再次搅拌，搅拌温度控制在30～80℃，优选在30～50℃的温度下进行，搅拌的时间为20～60min，优选地20～40min；离心分离，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白。

对比现有技术，本发明方案步骤1)和2)发明人采用碱溶酸沉工艺提取蛋白，通过大量的优化工艺参数的实验之后，蛋白提取率大为提升，得到鹰嘴豆蛋白溶液中的蛋白含量达60～70％，其效果是非常明显的。另外发明人实验研究发现在碱溶酸沉法之后增加水洗的步骤，可使鹰嘴豆蛋白溶液中的蛋白含量增加到70～80％，提高最终产品的蛋白纯度。

本发明先采用碱性蛋白酶对鹰嘴豆蛋白进行酶解，然后采用中性蛋白酶和风味蛋白酶对酶解产物进一步进行酶解，两者配合使用能够达到较高的酶解效率，并且酶解液中的活性肽、特别是小分子量的活性肽的含量高。

在本发明中，各酶的用量是基于鹰嘴豆蛋白粉的重量。所述碱性蛋白酶的用量为100～500U/g，即，在采用1g鹰嘴豆蛋白粉制备鹰嘴豆肽时，使用100～500U的碱性蛋白酶。

特别是，在本发明的第一酶解中，将所述鹰嘴豆蛋白与水按质量体积比1：(8～12)的比例搅拌均匀，制成pH值为8～10，优选pH值为9～10的蛋白溶液，蛋白含量达70～80％；将温度升至40～60℃；加入碱性蛋白酶，进行第一酶解，酶用量100～500U/g，优选用量为200～400U/g；酶解时间30～180min，优选在30～60min。碱性蛋白酶对鹰嘴豆蛋白的酶解作用显著高于木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和菠萝蛋白酶。

由于中性蛋白酶与碱性蛋白酶的酶切位点不一致，对于完成了第一次酶解的鹰嘴豆蛋白可以进一步进行有效的酶解。因此在本发明具体方案步骤4)中，将中性蛋白酶和风味蛋白酶联合使用对酶解产物进行第二次酶解。具体地，调节所述第一酶解液的pH值为6～8，优选pH值为6.5～7.5；顺序加入中性蛋白酶和风味蛋白酶，其中中性蛋白酶的用量为100～500U/g，优选用量为200～400U/g；风味蛋白酶的用量为100～500U/g，优选用量为100～300U/g；温度维持在40～60℃；酶解时间240～480min，优选时间240～360min；灭酶后，制得低聚肽粗液。

根据本发明提供的制备方法，最后的步骤为制备粉末状的鹰嘴豆低聚肽。步骤5)中，将低聚肽粗液温度升至85～95℃，维持15～30min，然后冷却至室温，将低聚肽粗液以1000～4000rpm，优选地2000～4000rpm，更优选地3000rpm的转速进行离心分离5～30min，收集离心上清液后，采用孔径为50～1200nm的陶瓷膜对所述低聚肽粗液进行过滤后，收取滤过液。将滤过液蒸发浓缩后，向浓缩液中加入活性炭，添加量为蛋白总量的1～10％，搅拌脱色10～60min，过滤除去活性炭，最后用喷雾干燥器制成鹰嘴豆低聚肽粉。

进一步地，在步骤5)中，所述过滤包括粗滤和精滤，所述粗滤采用孔径为200～1200nm的陶瓷膜进行，所述精滤采用孔径为50～200nm的陶瓷膜进行。

本发明采用两步陶瓷膜过滤，是因为发明人发现直接进行精滤处理时效果较差，由于精滤采用的陶瓷膜膜孔径较小，容易被鹰嘴豆低聚肽中的大分子所堵塞，因此发明人在进行精滤前加入了粗滤的步骤，这样可以先除去鹰嘴豆低聚肽中的大分子，获得较好的精滤效果。

在本发明具体方案中，粗滤采用孔径为200～1200nm，更优选地500nm的陶瓷膜进行，可以去除离心未除去的不溶性杂质；而精滤采用孔径为50～200nm，更优选地50nm的陶瓷膜进行，可以进一步将可溶性大分子杂质去除，保证最终产品分子量1000Da以下大于90％，低聚肽含量≥75％。同时还可以使最终产品可溶性强，澄清度高。另外，两步过滤在提高过滤效率的同时还可以避免：单一大孔径过滤精度不够；单一小孔径过滤工艺时间长，且膜易堵塞的问题。

本发明还提供一种鹰嘴豆低聚肽，按照上述任一所述制备方法制得，所述鹰嘴豆低聚肽中分子量小于1000Da的肽的质量含量≥90％，低聚肽含量≥75％。

本发明方案的实施，至少具有以下优势：

根据本发明提供的制备方法得到的鹰嘴豆低聚肽中分子量小于1000道尔顿的肽的质量含量≥90％，低聚肽含量≥75％；且易于吸收，是一种很好的植物氨基酸补充剂。本发明的制备方法工艺简单、原料易得、蛋白收率高，适合大规模的食品、药品的工业化生产。

附图说明

图1为本发明的实施例1制得的鹰嘴豆低聚肽的分子量检测图谱；

图2为本发明的实施例2制得的鹰嘴豆低聚肽的分子量检测图谱；

图3为本发明的实施例3制得的鹰嘴豆低聚肽的分子量检测图谱。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

将鹰嘴豆用温水浸泡16小时，去皮，37℃烘干20小时，打碎成粉状，过60目筛，得到鹰嘴豆粉；将1kg鹰嘴豆粉与10L水混合均匀，30℃保温搅拌30min，用10％NaOH溶液调pH值至10，离心收集上清液；调节所述上清液用1：1的HCL溶液将pH值调至4，30℃搅拌30min，离心收集沉淀，搅拌、离心，将沉淀与水按质量体积比为1：4混合后，再次在30℃搅拌30min，离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白，其中鹰嘴豆蛋白含量为78％；将鹰嘴豆蛋白按质量体积比为1：10，加水2L搅拌均匀，用10％NaOH溶液调pH值至10，加入碱性蛋白酶(诺维信公司)进行第一酶解，碱性蛋白酶的用量为200U/g，酶解时间60min，得到第一酶解液；调节所述第一酶解液的pH值为7，加入中性蛋白酶(南宁庞博公司)和风味蛋白酶复合酶(诺维信公司)解进行第二酶解，中性蛋白酶用量为200u/g，风味蛋白酶用量为100u/g，酶解时间300min；将酶解液温度升至95℃，维持15min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得低聚肽粗液；低聚肽粗液先经3000rpm的转速进行离心，将清液用500nm陶瓷膜进行粗滤，收取滤过液，再用50nm陶瓷膜进行精滤，收取滤过液。将滤过液蒸发浓缩后，向浓缩液中加入3g活性炭，搅拌脱色30min，过滤除去活性炭，最后用喷雾干燥器制成鹰嘴豆低聚肽粉。

采用国标方法对制得的鹰嘴豆低聚肽中各组分的分子量分布进行检测，其中：鹰嘴豆低聚肽蛋白含量的检测方法为GB/T 5009.5，水分检测方法为GB/T 5009.3，灰分的检测方法GB/T 5009.4，脂肪的检测方法为GB/T 5009.6，低聚肽的检测方法为GB/T 22492-2008。

经检测，本实施例制得的鹰嘴豆肽的蛋白含量为92.05％(干基)，水分5.07％，灰分4.31％，脂肪2.64％，鹰嘴豆低聚肽的质量含量为77.31％，收率68％。GPC分子量分布计算结果见表1。图1为本实施例的鹰嘴豆低聚肽的分子量检测图谱，其中λ＝220nm。结果中分子量小于1000Da的肽的质量含量为91.63％。

表1 GPC分子量分布计算结果

实施例2

将鹰嘴豆用温水浸泡18小时，去皮，37℃烘干22小时，打碎成粉状，过60目筛，制得鹰嘴豆粉；将5kg鹰嘴豆粉与50L水混合均匀，30℃保温搅拌30min，用10％NaOH溶液调pH值至8，离心收集上清液；调节所述上清液用1：1的HCL溶液将pH值调至5，50℃搅拌30min，离心收集沉淀，搅拌、离心，将沉淀与水按质量体积比为1：3,用水15L均匀混合后，再次在50℃搅拌30min，离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白，其中鹰嘴豆蛋白含量为77％；控制鹰嘴豆蛋白与水的质量体积比为1：10，加水10L搅拌均匀，用10％NaOH溶液调pH值至9，加入碱性蛋白酶(诺维信公司)，碱性蛋白酶的用量为200U/g，酶解时间30min，酶解时维持pH值为9，得到第一酶解液；调节所述第一酶解液的pH值为7，加入中性蛋白酶(南宁庞博公司)和风味蛋白酶(诺维信公司)复合酶解进行第二酶解，两种酶的用量均为100U/g，酶解时间360min；将酶解液温度升至90℃，维持30min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得低聚肽粗液；低聚肽粗液先经3000rpm的转速进行离心，将清液用1200nm陶瓷膜进行粗滤，收取滤过液，再用200nm陶瓷膜进行精滤，收取滤过液。将滤过液蒸发浓缩后，向浓缩液中加入15g活性炭，搅拌脱色30min，过滤除去活性炭，最后用喷雾干燥器制成鹰嘴豆低聚肽粉。

经检测，本实施例制得的鹰嘴豆肽的蛋白含量为91.84％(干基)，水分4.42％，灰分3.98％，脂肪2.81％，低聚肽的质量含量为76.44％，收率71％。GPC分子量分布计算结果见表2。图2为本实施例的鹰嘴豆低聚肽的分子量检测图谱，其中λ＝220nm。结果中分子量小于1000Da的肽的质量含量为91.01％。

表2 GPC分子量分布计算结果

实施例3

将鹰嘴豆用温水浸泡18小时，去皮，37℃烘干22小时，打碎成粉状，过60目筛，制得鹰嘴豆粉；将1.2kg鹰嘴豆粉与10L水混合均匀，50℃保温搅拌180min，用10％NaOH溶液调pH值至10，离心收集上清液；调节所述上清液用1：1的HCL溶液将pH值调至6，80℃搅拌60min，离心收集沉淀，搅拌、离心，将沉淀与水按质量体积比为1：10，加水12L均匀混合后，再次在80℃搅拌60min，离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白，其中鹰嘴豆蛋白含量为77％；控制鹰嘴豆蛋白与水的质量体积比为1：12，加水3L搅拌均匀，用10％NaOH溶液调pH值至10，加入碱性蛋白酶(诺维信公司)，碱性蛋白酶的用量为500U/g，酶解时间180min，酶解时维持pH值为10，得到第一酶解液；调节所述第一酶解液的pH值为8，加入中性蛋白酶(南宁庞博公司)和风味蛋白酶(诺维信公司)复合酶解进行第二酶解，两种酶的用量均为500U/g，酶解时间480min；将酶解液温度升至95℃，维持30min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得低聚肽粗液；低聚肽粗液先经4000rpm的转速进行离心，将清液用1200nm陶瓷膜进行粗滤，收取滤过液，再用200nm陶瓷膜进行精滤，收取滤过液。将滤过液蒸发浓缩后，向浓缩液中加入3.6g活性炭，搅拌脱色30min，过滤除去活性炭，最后用喷雾干燥器制成鹰嘴豆低聚肽粉。

经检测，本实施例制得的鹰嘴豆肽的蛋白含量为91.47％(干基)，水分4.25％，灰分4.62％，脂肪2.07％，低聚肽的质量含量为77.03％，收率69％。GPC分子量分布计算结果见表3。图3为本实施例的鹰嘴豆低聚肽的分子量检测图谱，其中λ＝220nm。结果中分子量小于1000Da的肽的质量含量为92.95％。

表3 GPC分子量分布计算结果：

对照例1

将实施例1制备的1kg鹰嘴豆粉与10L水混合均匀，30℃保温搅拌30min，用10％NaOH溶液调pH值至10，离心收集上清液；调节所述上清液用1：1的HCL溶液将pH值调至6，80℃搅拌60min，离心收集沉淀，搅拌、离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白；加水10L搅拌均匀，用10％NaOH溶液调pH值至10，加入木瓜蛋白酶100u/g，酶解时间30min，酶解时维持pH值为9，得到第一酶解液；调节所述第一酶解液的pH值为7，加入中性蛋白酶(南宁庞博公司)和风味蛋白酶(诺维信公司)复合酶解进行第二酶解，两种酶的用量均为100U/g，酶解时间360min；将酶解液温度升至90℃，维持30min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得肽粗液；肽粗液用1200nm陶瓷膜进行过滤，收取滤过液，将滤过液蒸发浓缩后，用喷雾干燥器制成鹰嘴豆肽粉。其中分子量小于1000Da的肽的质量含量为77.34％，低聚肽的质量含量为67.20％。

对照例2

将实施例1制备的1kg鹰嘴豆粉与10L水混合均匀，30℃保温搅拌30min，用10％NaOH溶液调pH值至10，离心收集上清液；调节所述上清液用1：1的HCL溶液将pH值调至6，80℃搅拌60min，离心收集沉淀，搅拌、离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白；加水10L搅拌均匀，用10％NaOH溶液调pH值至10，加入胰蛋白酶100u/g。酶解时间30min，酶解时维持pH值为9，得到第一酶解液；调节所述第一酶解液的pH值为7，加入中性蛋白酶(南宁庞博公司)和风味蛋白酶(诺维信公司)复合酶解进行第二酶解，两种酶的用量均为100U/g，酶解时间360min；将酶解液温度升至90℃，维持30min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得肽粗液；肽粗液用1200nm陶瓷膜进行过滤，收取滤过液，将滤过液蒸发浓缩后，用喷雾干燥器制成鹰嘴豆肽粉。其中分子量小于1000Da的肽的质量含量为79.60％，低聚肽的质量含量为67.55％。

对照例3

将实施例1制备的1kg鹰嘴豆粉与10L水混合均匀，30℃保温搅拌30min，用10％NaOH溶液调pH值至10，离心收集上清液；调节所述上清液用1：1的HCL溶液将pH值调至6，80℃搅拌60min，离心收集沉淀，搅拌、离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白；加水10L搅拌均匀，用10％NaOH溶液调pH值至10，加入胃蛋白酶50u/g，酶解时间180min，酶解时维持pH值为10，得到第一酶解液；调节所述第一酶解液的pH值为8，加入中性蛋白酶(南宁庞博公司)和风味蛋白酶(诺维信公司)复合酶解进行第二酶解，两种酶的用量均为500U/g，酶解时间480min；将酶解液温度升至95℃，维持30min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得肽粗液；肽粗液用1200nm陶瓷膜进行过滤，收取滤过液，将滤过液蒸发浓缩后，用喷雾干燥器制成鹰嘴豆肽粉。其中分子量小于1000Da的肽的质量含量为69.30％，低聚肽的质量含量为58.67％。

对照例4

将实施例1制备的1kg鹰嘴豆粉与10L水混合均匀，30℃保温搅拌30min，用10％NaOH溶液调pH值至10，离心收集上清液；调节所述上清液用1：1的HCL溶液将pH值调至6，80℃搅拌60min，离心收集沉淀，搅拌、离心，收取沉淀，得到鹰嘴豆蛋白；加水10L搅拌均匀，用10％NaOH溶液调pH值至10，加入菠萝蛋白酶100u/g。酶解时间180min，酶解时维持pH值为10，得到第一酶解液；调节所述第一酶解液的pH值为8，加入中性蛋白酶(南宁庞博公司)和风味蛋白酶(诺维信公司)复合酶解进行第二酶解，两种酶的用量均为500U/g，酶解时间480min；将酶解液温度升至95℃，维持30min，然后冷却至室温，离心分离，收取清液，制得肽粗液；肽粗液用1200nm陶瓷膜进行过滤，收取滤过液，将滤过液蒸发浓缩后，用喷雾干燥器制成鹰嘴豆肽粉。其中分子量小于1000Da的肽的质量含量为68.94％，低聚肽的质量含量为57.38％。

Claims

1.一种鹰嘴豆低聚肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，其特征在于，将鹰嘴豆浸泡、去皮、烘干、粉碎、过筛后，制得所述鹰嘴豆粉。

3.根据权利要求1所述的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述鹰嘴豆粉与水的质量体积比为1：(8～12)，所述搅拌在30～80℃的温度下进行，并且所述搅拌的时间为30～180min。

4.根据权利要求1所述的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述沉淀与水的质量体积比为1：(2～10)，所述搅拌在30～80℃的温度下进行，并且所述搅拌的时间为20～60min。

5.根据权利要求1所述的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述得到鹰嘴豆蛋白溶液的蛋白含量达70～80％，所述碱性蛋白酶的用量为100～500U/g，所述第一酶解的温度为40～60℃，酶解时间为30～180min。

6.根据权利要求1所述的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，其特征在于，步骤4)中，所述中性蛋白酶的用量为100～500U/g，所述风味蛋白酶的用量为100～500U/g，所述第二酶解的温度为40～60℃，酶解时间为240～480min。

7.根据权利要求1所述的鹰嘴豆低聚肽的制备方法，其特征在于，步骤5)中，所述过滤包括粗滤和精滤，所述粗滤采用孔径为200～1200nm的陶瓷膜进行，所述精滤采用孔径为50～200nm的陶瓷膜进行。

8.一种鹰嘴豆低聚肽，其特征在于，按照权利要求1至7任一所述的制备方法制得，所述鹰嘴豆低聚肽中分子量小于1000Da的肽的质量含量≥90％，且低聚肽的质量含量≥75％。