CN107652349A - 一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法 - Google Patents

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黄锁义
喻巧容
李庭树
李津
梁凌玲
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J53/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by condensation with a carbocyclic rings or by formation of an additional ring by means of a direct link between two ring carbon atoms, including carboxyclic rings fused to the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton are included in this class
    • C07J53/002—Carbocyclic rings fused
    • C07J53/004—3 membered carbocyclic rings

Abstract

本发明公开一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，包括以下步骤：将干燥的薏苡茎叶粉碎，加入乙醇加热回流提取，提取液浓缩得浸膏A；浸膏A加水分散后，用石油醚萃取，石油醚部分浓缩得浸膏B；浸膏B先经过硅胶柱层析，采用石油醚‑乙酸乙酯梯度洗脱，收集含分离纯化的成分，再层析，采用纯二氯甲烷洗脱，得到的含分离纯化的成分经制备型高效液相色谱分离纯化，收集tR=34min的组分，浓缩，结晶，即得。本发明从废弃的薏苡茎叶中提取环阿乔醇，减少了环境污染，提高了薏苡茎叶的利用率，延长了薏苡的产业链，增加了薏苡产业的收入，具有较好的经济效益和生态效益。

Description

一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法
技术领域
本发明属于化工领域，具体涉及一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法。
背景技术
薏苡(Coix lachryma－jobi L.)为禾本科(Gramineae)薏苡属，味甘淡，性微寒，具有健脾、补肺、清热、利湿的功效，素有“滋补保健之王”的美誉。薏苡全身是宝，薏苡茎可防治麻疹、湿疹等；薏苡叶中所含的生物碱，有清热利湿、健脾杀虫、暖胃益气、舒盘活血等作用。薏苡的根、茎叶、种仁等药用部位在壮族、蒙古族、藏族等15个民族中均有大量使用。近年来,国内外学者对薏苡的化学成分和药理活性进行了研究,薏苡仁中所含的主要药理活性成分是脂肪酸、脂、甾醇类、三萜类、多糖类化合物以及蛋白质、氨基酸和维生素等，对离体心脏、肠管、子宫有兴奋作用，具有抗肿瘤、免疫调节、抗病毒、降压、降血糖、抗炎镇痛及抑制胰蛋白酶等多方面的药理活性。
目前对薏苡的研究主要在于薏苡仁作为食品保健原料植物开发与研究，薏苡茎叶研究较少。薏苡茎叶没有得到充分的利用，大部分作为废弃物被丢弃，造成资源的极大浪费。如何从薏苡茎叶中提取有效、有价值的成分，提高薏苡的利用率，是一个急需解决的问题。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法。
本发明通过以下技术方案实现：
一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，包括以下步骤：
(1)醇提：将干燥的薏苡茎叶粉碎，加入90％乙醇，加热至60-70℃，回流提取，提取液减压浓缩得浸膏A；
(2)萃取：将步骤(1)的浸膏A加水分散，用石油醚萃取，石油醚萃取部分浓缩得到浸膏B；
(3)一次柱层析：将步骤(2)的浸膏B用200-300目硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(4)二次柱层析：将步骤(3)含有环阿乔醇的洗脱分用200-300目硅胶柱层析，洗脱剂为纯二氯甲烷，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(5)制备型高效液色谱分离纯化：将步骤(4)含有环阿乔醇的洗脱分经制备型高效液相色谱分离纯化，色谱柱为C18柱，直径8cm，流动相为纯甲醇，检测波长为210nm，检测器为ELSD，收集tR＝34min的组分；
(6)结晶：将tR＝34min的组分浓缩，用甲醇-水结晶，得环阿乔醇。
作为本发明的进一步说明，步骤(1)所述加热回流提取的次数为3-5次，每次1.5-2.5h，90％乙醇用量为薏苡茎叶重量的8-12倍。
作为本发明的进一步说明，步骤(2)所述萃取的次数为3-5次，石油醚的用量为浸膏A重量的8-12倍。
作为本发明的进一步说明，步骤(3)所述石油醚-乙酸乙酯的体积比为15∶1～5∶1。
作为本发明的进一步说明，步骤(5)所述流动相的流速为140mL·min-1。
作为本发明的进一步说明，步骤(6)所述甲醇-水的体积比为100∶1。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
1、本发明从废弃的薏苡茎叶中提取环阿乔醇，减少了环境污染，提高了薏苡茎叶的利用率，延长了薏苡的产业链，增加了薏苡产业的收入，具有较好的经济效益和生态效益。
2、本发明浸膏A经过石油醚萃取，可以除去非极性杂质，使混合物的成分得到简化，为后续的分离工作降低难度，并可以保护硅胶柱和色谱图不被污染，延长色谱柱的使用寿命。
3、本发明通过使用不同流动相的硅胶柱层析分离，可以除去大部分杂质，为后续纯化降低难度。
4、本发明使用制备型液相色谱，并通过研究，获得在tR＝34min分离得到环阿乔醇，该方法制备量大，效率高，工艺周期短，获得的环阿乔醇纯度高。
5、本发明的方法操作简单，效率高，得到的环阿乔醇纯度高达98％以上。
附图说明
图1为环阿乔醇的核磁共振氢谱；
图2为环阿乔醇的核磁共振碳谱；
图3为环阿乔醇的异核单量子关系图；
图4为环阿乔醇的二维相关谱；
图5为环阿乔醇的紫外光谱图；
图6为环阿乔醇的正离子源质谱；
图7为环阿乔醇的负离子源质谱。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明进一步详细说明，但不限于本发明的保护范围。
实施例1
一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，包括以下步骤：
(1)醇提：将干燥的薏苡茎叶粉碎，加入8倍重量的90％乙醇，加热至60℃，回流提取3次，每次2.5h，，合并提取液，减压浓缩得浸膏A；
(2)萃取：将步骤(1)的浸膏A加水分散，用8倍重量的石油醚萃取3次，合并石油醚萃取部分，浓缩得到浸膏B；
(3)一次柱层析：将步骤(2)的浸膏B用200-300目硅胶柱层析，用体积比为15∶1～5∶1的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(4)二次柱层析：将步骤(3)含有含有环阿乔醇的洗脱分用200-300目硅胶柱层析，洗脱剂为纯二氯甲烷，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(5)制备型高效液色谱分离纯化：将步骤(4)含有环阿乔醇的洗脱分经制备型高效液相色谱分离纯化，色谱柱为C18柱，直径8cm，流动相为纯甲醇，流速为140mL·min-1，检测波长为210nm，检测器为ELSD，收集tR＝34min的组分；
(6)结晶：将tR＝34min的组分浓缩，用体积比为100∶1的甲醇-水结晶，得环阿乔醇。
实施例2
一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，包括以下步骤：
(1)醇提：将干燥的薏苡茎叶粉碎，加入12倍重量的90％乙醇，加热至70℃，回流提取5次，每次1.5h，，合并提取液，减压浓缩得浸膏A；
(2)萃取：将步骤(1)的浸膏A加水分散，用12倍重量的石油醚萃取5次，合并石油醚萃取部分，浓缩得到浸膏B；
(3)一次柱层析：将步骤(2)的浸膏B用200-300目硅胶柱层析，用体积比为15∶1～5∶1的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(4)二次柱层析：将步骤(3)含有环阿乔醇的洗脱分用200-300目硅胶柱层析，洗脱剂为纯二氯甲烷，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(5)制备型高效液色谱分离纯化：将步骤(4)含有环阿乔醇的洗脱分经制备型高效液相色谱分离纯化，色谱柱为C18柱，直径8cm，流动相为纯甲醇，流速为140mL·min-1，检测波长为210nm，检测器为ELSD，收集tR＝34min的组分；
(6)结晶：将tR＝34min的组分浓缩，用体积比为100∶1的甲醇-水结晶，得环阿乔醇。
实施例3
一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，包括以下步骤：
(1)醇提：将干燥的薏苡茎叶粉碎，加入8-12倍重量的90％乙醇，加热至65℃，回流提取4次，每次2h，，合并提取液，减压浓缩得浸膏A；
(2)萃取：将步骤(1)的浸膏A加水分散，用10倍重量的石油醚萃取4次，合并石油醚萃取部分，浓缩得到浸膏B；
(3)一次柱层析：将步骤(2)的浸膏B用200-300目硅胶柱层析，用体积比为15∶1～5∶1的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(4)二次柱层析：将步骤(3)含有环阿乔醇的洗脱分用200-300目硅胶柱层析，洗脱剂为纯二氯甲烷，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(5)制备型高效液色谱分离纯化：将步骤(4)含有环阿乔醇的洗脱分经制备型高效液相色谱分离纯化，色谱柱为C18柱，直径8cm，流动相为纯甲醇，流速为140mL·min-1，检测波长为210nm，检测器为ELSD，收集tR＝34min的组分；
(6)结晶：将tR＝34min的组分浓缩，用体积比为100∶1的甲醇-水结晶，得环阿乔醇。
实施例4
一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，包括以下步骤：
(1)醇提：将干燥的薏苡茎叶粉碎，加入11倍重量的90％乙醇，加热至65℃，回流提取4次，每次2h，，合并提取液，减压浓缩得浸膏A；
(2)萃取：将步骤(1)的浸膏A加水分散，用11倍重量的石油醚萃取4次，合并石油醚萃取部分，浓缩得到浸膏B；
(3)一次柱层析：将步骤(2)的浸膏B用200-300目硅胶柱层析，用体积比为15∶1～5∶1的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(4)二次柱层析：将步骤(3)含有环阿乔醇的洗脱分用200-300目硅胶柱层析，洗脱剂为纯二氯甲烷，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
(5)制备型高效液色谱分离纯化：将步骤(4)含有环阿乔醇的洗脱分经制备型高效液相色谱分离纯化，色谱柱为C18柱，直径8cm，流动相为纯甲醇，流速为140mL·min-1，检测波长为210nm，检测器为ELSD，收集tR＝34min的组分；
(6)结晶：将tR＝34min的组分浓缩，用体积比为100∶1的甲醇-水结晶，得环阿乔醇。
对图1-图7的1H-NMR、13C-NMR、HSQC、COSY、UV、MS+、MS-进行分析，具体分析如下
注：ol表示信号重叠(signal overlapping)。
由1H-NMR(600MHz,CDCl3)中δH 1.60,s；1.684,s；0.887,s；0.808,s；0.959,s；0.962,s信号为6个甲基信号，δH 5.10,m为一个单独的双键氢信号，δH 3.280,m为连氧原子的碳信号。
由13C-NMR(150MHz,CDCl3))和DEPT 135°，推测该化合物共有30个碳原子信号，其中7个甲基(CH3)，11个亚甲基(CH2)，6个次甲基(CH)，6个季碳(C)推测有30个碳原子，49个氢原子，只有一个连有氧原子的碳信号δC 78.85，说明该碳连有羟基(OH)，综合以上推测分子式为C30H50O，推测为三萜或甾体化合物。计算不饱和度为6，去掉一个双键的不饱和度，还有5个不饱和度，推测有5个环。δC 125.26,130.79为双键信号。
通过HSQC二维核磁谱将碳氢信号一一对应，结合COSY二维核磁谱中δH 5.10,m与δH2.041,ol，δH 2.041,ol与δH 1.437,ol，δH 1.437,ol与δH 1.383,ol，δH 1.383,ol与δH0.879,d,J＝7.3Hz及HMBC二维核磁谱中δC 130.89与δH 5.10,m；1.60,s；1.684,s都有相关，推测存在(1,5-二甲基-4-烯)-己基的官能团，即8个碳原子，其余的碳原子推测由22个碳组成的五环三萜醇类或五环甾醇类化合物，其中有4个甲基，其余18个碳组成五环结构，通过比对文献[1]J.De Pascual Teresa,J.G.Urones,et al.Triterpenes from EuphorbiaBroteri.Phytochemistry,1987,26(6):1767-1776、文献[2]L.Radics,M.Kajtar-peredy.Carbon-13NMR spectra of some polycyclic triterpenoids.Tetrahedronletter,1975,48,4287-4290中相似结构的数据，确定化合物为三萜化合物：Cycloartenol，中文译名为：环阿乔醇，化学结构式为：

Claims (6)

1.一种从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）醇提：将干燥的薏苡茎叶粉碎，加入90%乙醇，加热至60-70℃，回流提取，提取液减压浓缩得浸膏A；
（2）萃取：将步骤（1）的浸膏A加水分散，用石油醚萃取，石油醚萃取部分浓缩得到浸膏B；
（3）一次柱层析：将步骤（2）的浸膏B用200-300目硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
（4）二次柱层析：将步骤（3）含有环阿乔醇的洗脱分用200-300目硅胶柱层析，洗脱剂为纯二氯甲烷，将洗脱液作TLC检测，收集含有环阿乔醇的洗脱分；
（5）制备型高效液色谱分离纯化：将步骤（4）含有环阿乔醇的洗脱分经制备型高效液相色谱分离纯化，色谱柱为C18柱，直径8cm，流动相为纯甲醇，检测波长为210 nm，检测器为ELSD，收集tR=34min的组分；
（6）结晶：将tR=34min的组分浓缩，用甲醇-水结晶，得环阿乔醇。
2.根据权利要求1所述从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，其特征在于，步骤（1）所述加热回流提取的次数为3-5次，每次1.5-2.5h，90%乙醇用量为薏苡茎叶重量的8-12倍。
3.根据权利要求1所述从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，其特征在于，步骤（2）所述萃取的次数为3-5次，石油醚的用量为浸膏A重量的8-12倍。
4.根据权利要求1所述从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，其特征在于，步骤（3）所述石油醚-乙酸乙酯的体积比为15∶1～5∶1。
5.根据权利要求1所述从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，其特征在于，步骤（5）所述流动相的流速为140 mL·min-1。
6.根据权利要求1所述从薏苡茎叶中分离纯化环阿乔醇的方法，其特征在于，步骤（6）所述甲醇-水的体积比为100∶1。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101277705A (zh) * 2005-09-30 2008-10-01 森永乳业株式会社 用于改善胰岛素抗性的药剂
CN102281888A (zh) * 2009-01-16 2011-12-14 花王株式会社 Gip升高抑制剂
CN106380501A (zh) * 2016-08-09 2017-02-08 右江民族医学院 一种从薏苡茎中提取豆甾醇的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101277705A (zh) * 2005-09-30 2008-10-01 森永乳业株式会社 用于改善胰岛素抗性的药剂
CN102281888A (zh) * 2009-01-16 2011-12-14 花王株式会社 Gip升高抑制剂
CN106380501A (zh) * 2016-08-09 2017-02-08 右江民族医学院 一种从薏苡茎中提取豆甾醇的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SUGURU TAKATSUTO等: "Occurrence of Potential Brassinosteroid Precursor Steroids in Seeds of Wheat and Foxtail Millet", 《JOURNAL OF PLANT RESEARCH》 *

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