CN107648180A - 一种广谱抗癫痫药物制剂及其制备方法与用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种广谱抗癫痫药物制剂及其制备方法与用途。本发明提供了一种丙戊酸注射液，它是由原料药丙戊酸，加入环糊精、水制备而成。本发明还提供了该丙戊酸注射液的制备方法。本发明丙戊酸注射液，丙戊酸与环糊精在特定的配比下能发挥丙戊酸最佳的药效，制备的注射液具有质量优异、稳定性好、含量均一、杂质极少，保证了药品安全性和质量可控性。

Description

一种广谱抗癫痫药物制剂及其制备方法与用途

技术领域

本发明涉及一种广谱抗癫痫药物制剂，属于药物领域。

背景技术

丙戊酸及其钠盐是一种一线广谱抗癫痫药，用于各种癫痫(小发作、病灶性癫痫、精神运动性发作和混合发作)以及癫痫造成的性格行为障碍的预防和治疗，单独治疗或者辅助治疗单独发作的复杂部分性癫痫或者伴发其他类型癫痫的复杂部分性发作，还适用于单独治疗或者辅助治疗单纯或复杂性癫痫失神发作，以及辅助治疗包括癫痫失神发作在内的多种类型癫痫发作。

丙戊酸因为是油状液体，不易纯化，不易贮藏和运输，同时本身水溶性差，不能做成水溶性注射剂，通常将其制成钠盐，即丙戊酸钠。丙戊酸钠是固体，不仅易于纯化、贮藏和运输，而且具有非常好的水溶性，可以做成水溶性注射剂，在临床上广泛使用。丙戊酸钠冻干制剂是常用的注射用制剂形式，已上市的注射用丙戊酸钠在冻干过程中，能耗较大，且制备的丙戊酸钠粉针剂存在复溶性差、稳定性不好的缺点。冻干是需要由冷凝器、冻干系统、制冷系统等组成的冻干设备运行的过程，从设备运行开始到设备停止运行所耗能是巨大的，且冻干的工艺条件复杂、需要长期反复的摸索，增加了对人力物力的需求，也大大增加了企业的生产成本。其中，复溶性差，即药物溶解缓慢或溶解不完全，容易引发血管阻塞、供血不足、静脉炎、血栓、局部组织坏死等疾病，同时也容易造成病人注射时疼痛，某些症状在突发时期用药达不到治疗所需要的药物浓度，难以实现预期的治疗效果，缺乏明确的限度值来对产品的溶解性指标进行控制。丙戊酸钠吸湿性较强，产品稳定性不好，该冻干产品水分过高，产品在运输、储藏过程中越不稳定，并且会造成最终产品干燥失重值偏大，影响产品质量稳定性，从而引发患者用药安全问题。

即使将丙戊酸钠做成注射液，也同样存在以下缺陷：药品本身就含有较高含量的钠离子，易导致该注射剂pH偏高，注射时产生的局部刺激性大，造成机体疼痛，注射部位肿胀，若不慎漏液还会造成局部组织坏死，从而也会导致患者的用药依从性降低。

因此，急需一种具有性质稳定、刺激性小、生产成本低、适合工业化生产的丙戊酸注射制剂。

有文献DRUG DEVELOPMENT AND INDUSTRIAL PHARMACY1，Vol.30，No.1，pp.53–64，2004报道了丙戊酸与羟丙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精的包合物，采用丙戊酸与环糊精按照等摩尔的比例混合、再冷冻干燥的方法制得冻干制剂。出现的严重缺陷在于，该冻干制剂需要进行复溶，而进行复溶实验后溶液出现乳光或浑浊的现象，大量的不溶性微粒很容易导致毛细血管堵塞、肉芽肿，轻者影响药液质量，重者影响患者的身体健康，甚至危及生命。

发明内容

本发明的目的是提供了一种新的丙戊酸注射液，本发明的另一目的是提供了该注射液的制备方法。

本发明提供了一种丙戊酸注射液，它是由原料药丙戊酸，加入环糊精、水制备而成。

其中，丙戊酸与环糊精的重量配比为：1:2-1:45。进一步优选地，丙戊酸与环糊精的重量配比为：1:3～1:45。更进一步优选地，丙戊酸与环糊精的重量配比为：1:5～1:35。

其中，所述的丙戊酸的含量为2mg/mL～300mg/mL。进一步优选地，所述的丙戊酸的含量为2mg/mL～250mg/mL。更进一步优选地，所述的丙戊酸的含量为5mg/mL～200mg/mL。

其中，所述的环糊精为β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精、甲基化-β-环糊精、6-O-α-D-麦芽糖-β-环糊精、α-环糊精、γ-环糊精或羟丙基-γ-环糊精，进一步优选为羟丙基-β-环糊精或磺丁基醚-β-环糊精。

本发明还提供了一种制备所述的丙戊酸注射液的制备方法，它包括如下步骤：

a.取注射用水，加入环糊精，搅拌溶解；

b.称取处方量丙戊酸，加入a步骤所述的环糊精溶液中；

c.搅拌混合液，至澄清透明，再加入注射用水定容、混合均匀；

d.分装、灌封、灭菌，即得。

本发明还提供了所述的丙戊酸注射液在制备治疗抗癫痫的药物中的用途。

本发明丙戊酸注射液，很好的克服了现有产品中钠离子带来的不良反应，填补了现有技术中以丙戊酸作为主药的水溶液型注射液的空白；生产工艺简单，成本低廉、适用于工业化大生产，避免了生产设备运行所造成的时间、人力、资金的耗费，制备该丙戊酸注射制剂的过程简单、易操作、易实现，提高了生产效率，从而显著节约了物力、人力、时间成本。

本发明丙戊酸注射液，丙戊酸与环糊精在特定的配比下能发挥丙戊酸最佳的药效，制备的注射液具有质量优异、稳定性好、含量均一、杂质极少，保证了药品安全性和质量可控性。

具体实施方式

实施例1本发明丙戊酸与环糊精用量配比实验

称取1.0g丙戊酸20份，分别置于250ml圆底烧瓶中，加入100ml蒸馏水后，可见丙戊酸悬浮于水中。其中十份样品分别加入1.0g、1.5g、2.0g、3.0g、5.0g、10.0g、15.0g、20.0g、30.0g、45.0g羟丙基-β-环糊精；另外的十份样品分别加入1.0g、1.5g、2.0g、3.0g、5.0g、10.0g、15.0g、20.0g、30.0g、45.0g磺丁基醚-β-环糊精。搅拌10分钟，观察溶液状态。结果见表1、表2。

表1羟丙基-β-环糊精丙戊酸水溶液的制备

表2磺丁基醚-β-环糊精丙戊酸水溶液的制备

实验结果表明，羟丙基-β-环糊精和磺丁基醚-β-环糊精对丙戊酸有较好的增溶作用。当丙戊酸与羟丙基-β-环糊精或磺丁基醚-β-环糊精的重量比为1:2时，丙戊酸可全部溶解。

实施例2丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入磺丁基醚-β-环糊精12.0g，搅拌溶解。称取丙戊酸6.0g，加入上述磺丁基醚-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至20mL，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例3丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入羟丙基-β-环糊精6.0g，搅拌溶解。称取丙戊酸2.0g，加入上述羟丙基-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至8mL，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例4丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入磺丁基醚-β-环糊精20.0g，搅拌溶解。称取丙戊酸2.0g，加入上述磺丁基醚-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至100mL，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例5丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入羟丙基-β-环糊精30.0g，搅拌溶解。称取丙戊酸2.0g，加入上述羟丙基-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至100mL，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例6丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入磺丁基醚-β-环糊精20.0g，搅拌溶解。称取丙戊酸1.0g，加入上述磺丁基醚-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至500mL，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例7丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入羟丙基-β-环糊精30.0g，搅拌溶解。称取丙戊酸1.0g，加入上述羟丙基-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至200mL，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例8丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入磺丁基醚-β-环糊精45.0g，搅拌溶解。称取丙戊酸1.0g，加入上述磺丁基醚-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至100mL，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例9丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入磺丁基醚-β-环糊精30.0kg，搅拌溶解。称取丙戊酸6.0kg，加入上述磺丁基醚-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至30L，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例10丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入羟丙基-β-环糊精10.0kg，搅拌溶解。称取丙戊酸1.0kg，加入上述羟丙基-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至20L，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例11丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入磺丁基醚-β-环糊精15.0kg，搅拌溶解。称取丙戊酸1.0kg，加入上述磺丁基醚-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至50L，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例12丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入羟丙基-β-环糊精5.0kg，搅拌溶解。称取丙戊酸0.2kg，加入上述羟丙基-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至20L，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例13丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入磺丁基醚-β-环糊精10.5kg，搅拌溶解。称取丙戊酸0.3kg，加入上述磺丁基醚-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至60L，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

实施例14丙戊酸注射液的配制

取适量注射用水，加入羟丙基-β-环糊精4.5kg，搅拌溶解。称取丙戊酸0.1kg，加入上述羟丙基-β-环糊精溶液中。搅拌至溶液澄清透明，再用注射用水定容至50L，混合均匀。分装、灌封(每瓶20mL)，灭菌，即得。

以下通过稳定性试验及药效试验证明本发明的有益效果。

比较例1

按照文献(DRUG DEVELOPMENT AND INDUSTRIAL PHARMACY1，Vol.30，No.1，pp.53–64，2004)制备丙戊酸与羟丙基-β-环糊精的冻干制剂

取丙戊酸与羟丙基-β-环糊精各0.66mmol于10mL去离子水中，将该混合物于室温条件下搅拌5天，再用0.22μm滤膜过滤，冷冻干燥得冻干制剂。

比较例2

按照文献(DRUG DEVELOPMENT AND INDUSTRIAL PHARMACY1，Vol.30，No.1，pp.53–64，2004)制备丙戊酸与磺丁基醚-β-环糊精的冻干制剂

取丙戊酸与磺丁基醚-β-环糊精各0.46mmol于10mL去离子水中，将该混合物于室温条件下搅拌5天，再用0.22μm滤膜过滤，冷冻干燥得冻干制剂。

实验例1影响因素实验

将本发明实施例2～8和对比例1～2制备的样品进行影响因素实验考察比较，考察条件为(1)高湿RH90±5％30天；(2)光照5000lx 30天；(3)高温40℃30天；检测指标为性状、不溶性微粒、含量和总杂。结果见表3-6。

表3样品0天结果

表4样品高湿RH90±5％30天结果

表5样品光照5000lx 30天结果

表6样品高温40℃30天结果

由以上试验结果可知，经过影响因素条件放置，对比例1～2制备的产品不溶性微粒急剧增加，已不符合2015版中国药典“0903不溶性微粒检查法”中的有关规定；本发明实施例2～8制备的样品的不溶性微粒检查结果均符合规定。且由其他检查项目如性状、含量、总杂质的结果也可得知，本发明实施例2～8制备的样品稳定性远远好于对比例1～2制备的产品。

实验例2配伍稳定性试验

将实施例9～14和比较例1～2样品，分别与100mL0.9％氯化钠注射液、250mL0.9％氯化钠注射液、100mL 5％葡萄糖注射液、250mL 5％葡萄糖注射液、100mL 5％葡萄糖氯化钠注射液、250mL 5％葡萄糖氯化钠注射液进行配伍稳定性试验，样品稀释后，分别于0、2、4、8小时时观察溶液澄清度，结果见表7。

表7配伍稳定性实验结果

从配伍稳定性试验可以看出，采用本发明的处方和工艺制备的样品，采用0.9％氯化钠注射液、5％葡萄糖注射液、5％葡萄糖氯化钠注射液稀释后，溶液澄清，放置2、4、8小时后，溶液仍然澄清；而比较例1和比较例2稀释后，放置2、4、8小时后，溶液均浑浊。因此本发明的注射液在安全性上更加有保障，临床上更加具有优势。

试验例3注射给药部位刺激性试验

采用家兔自身对照法，选用生理盐水作为对照，选取本发明的实施例9～14的样品作为供试品；家兔左耳缘静脉注射供试品(30mg/kg)，家兔右耳缘静脉注射生理盐水，每天给药1次，连续给药4周，每天给药前以及最后一次给药后48h～72h，肉眼观察注射部位及周围组织是否有红肿、充血等刺激现象。观察期结束后，将注射部位及周围组织做病理切片，进行组织学检查，结果见表8。

表8血管刺激性试验结果

实验组	肉眼检查结果	病例组织学检查
			实施例9	未见红肿充血	无变性、坏死和炎症反应
实施例10	未见红肿充血	无变性、坏死和炎症反应
			实施例11	未见红肿充血	无变性、坏死和炎症反应
实施例12	未见红肿充血	无变性、坏死和炎症反应
			实施例13	未见红肿充血	无变性、坏死和炎症反应
实施例14	未见红肿充血	无变性、坏死和炎症反应

从以上结果可以看出，本发明的丙戊酸注射液对机体均无刺激性。

试验例4本发明药物注射液对癫痫大鼠模型的药效学试验

本发明采用LiCl-Pilo致癫痫大鼠模型对本发明实施例9～实施例14的丙戊酸环糊精注射液、市售的注射用丙戊酸钠(沈阳新马药业有限公司，国药准字H20153108，该注射剂未使用辅料)进行盲法药效学试验。具体方法如下：

实验动物分组：健康成年雄性SD大鼠152只，体重(200±20)g，以LiCl-Pilo为致癫剂造癫痫模型，Racine分级法Ⅳ级及Ⅳ级以上视为大鼠癫痫造模成功，14天后选取出现反复自发作(Racine分级法Ⅳ级及Ⅳ级以上动物)，随机分为8组，每组各10～15只：

①实施例9：50mg/kg静脉注射治疗。

②实施例10：50mg/kg静脉注射治疗。

③实施例11：50mg/kg静脉注射治疗。

④实施例12：50mg/kg静脉注射治疗。

⑤实施例13：50mg/kg静脉注射治疗。

⑥实施例14：50mg/kg静脉注射治疗。

⑦市售注射用丙戊酸钠组：50mg/kg静脉注射治疗。

⑧阳性对照药注射组：苯妥英钠(30mg/kg)静脉注射治疗。

⑨癫痫模型组：等体积比生理盐水连续注射28d。

动物模型的制备：取大鼠称重后按氯化锂3mmol/kg腹腔注射预处理；注射匹罗卡品前30min，注射东莨菪碱1mg/kg；18～20h后首剂注射匹罗卡品30mg/kg，此后每隔30min注射10mg/kg追加剂量，极量为60mg/kg，直至出现RacineⅣ级以上无明显间歇的癫痫持续状态(SE)，一般不超过3次；SE后15min，腹腔注射水合氯醛100mg/kg终止SE，如效果不佳可于15min后再注射一次；SE后2h，腹腔注射20％葡萄糖生理盐水2ml/只，1次/天，连续14天，在相同条件(清洁、通风、恒温、恒湿)下饲养。

Racine分级法，大鼠的行为分为五级：0级：无反应；Ⅰ级：节律性嘴和面部抽动；Ⅱ级：点头或甩尾；Ⅲ级：单肢抽动；Ⅳ级：多肢抽动或强直；Ⅴ级：全面性强直－阵挛发作。大鼠的行为表现为Racine分级Ⅳ级或Ⅴ级时可视为造模成功。

造模14天后选取出现反复自发作(Racine分级法Ⅳ级及Ⅳ级以上)的大鼠99只，随机分为9组，每组各10～15只，每天均在同一时间注射：

①实施例9：50mg/kg静脉注射治疗。

②实施例10：50mg/kg静脉注射治疗。

③实施例11：50mg/kg静脉注射治疗。

④实施例12：50mg/kg静脉注射治疗。

⑤实施例13：50mg/kg静脉注射治疗。

⑥实施例14：50mg/kg静脉注射治疗。

⑦市售注射用丙戊酸钠组：50mg/kg静脉注射治疗。

⑧阳性对照药注射组：苯妥英钠(30mg/kg)静脉注射治疗。

⑨癫痫模型组：等体积比生理盐水连续注射28d。

用摄像系统24小时检测录像，大鼠发作计数标准：Racine分级法Ⅳ级及Ⅳ级以上计数。数据分析：数据以均数±标准差(Mean±SD)表示，两组间比较采用T检验，多组间比较采用方差分析，P＜0.05有统计学意义。结果参见表9。

表9抑制率结果(Mean±SD)

注：1)其中n表示试验动物大鼠数量；

2)阳性对照组与模型组比较，P＜0.05；

3)①、②、③、④、⑤、⑥号组分别与⑦号组比较，P＜0.01；

4)①、②、③、④、⑤号组与⑥比较，P＜0.05

由表9实验结果可以看出：

(1)给药后三天、给药后五天、给药后二十八天，本发明的丙戊酸环糊精注射液对癫痫的抑制率明显高于市售注射用丙戊酸钠，有显著差异，并有统计学意义(P＜0.01)。

(2)本发明的实施例9～13对癫痫的抑制率高于实施例14，并有统计学意义(P＜0.05)。也就是说，从丙戊酸与环糊精的用量比例上看，优选为1:5～1:35。

(3)从整体趋势上来看，本发明的丙戊酸环糊精注射液对癫痫的治疗效果明显优于不含环糊精的制剂，且丙戊酸与环糊精的用量比例可进一步优选为1:5～1:35。

Claims (11)

1.一种丙戊酸注射液，其特征在于：它是由原料药丙戊酸，加入环糊精、水制备而成。

2.根据权利要求1所述的丙戊酸注射液，其特征在于：丙戊酸与环糊精的重量配比为：1:2-1:45。

3.根据权利要求2所述的丙戊酸注射液，其特征在于：丙戊酸与环糊精的重量配比为：1:3～1:45。

4.权利要求3所述的丙戊酸注射液，其特征在于：丙戊酸与环糊精的重量配比为：1:5～1:35。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的丙戊酸注射液，其特征在于：所述的丙戊酸的含量为2mg/mL～300mg/mL。

6.根据权利要求5所述的丙戊酸注射液，其特征在于：所述的丙戊酸的含量为2mg/mL～250mg/mL。

7.根据权利要求6所述的丙戊酸注射液，其特征在于：所述的丙戊酸的含量为5mg/mL～200mg/mL。

8.根据权利要求1－7任意一项所述的丙戊酸注射液，其特征在于：所述的环糊精为β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精、甲基化-β-环糊精、6-O-α-D-麦芽糖-β-环糊精、α-环糊精、γ-环糊精或羟丙基-γ-环糊精。

9.根据权利要求8所述的丙戊酸注射液，其特征在于：所述的环糊精为羟丙基-β-环糊精或磺丁基醚-β-环糊精。

10.一种制备权利要求1-9任意一项所述的丙戊酸注射液的制备方法，它包括如下步骤：

a.取注射用水，加入环糊精，搅拌溶解；

b.称取处方量丙戊酸，加入a步骤所述的环糊精溶液中；

c.搅拌混合液，至澄清透明，再加入注射用水定容、混合均匀；

d.分装、灌封、灭菌，即得。

11.权利要求1-9任意一项所述的丙戊酸注射液在制备治疗抗癫痫的药物中的用途。