CN102266298A - 一种培美曲塞二钠的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种培美曲塞二钠的冻干药物组合物及其制备方法。本发明提供一种含有培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂的培美曲塞二钠冻干组合物，质量份数为培美曲塞二钠110份、海藻糖60～105份，冻干赋形剂0～40份。制备过程为：将培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂溶解在水中，搅拌至溶液澄清，用氢氧化钠或盐酸溶液调节pH至7.5～8.0，将上述澄清液除去热原并过滤除菌，冷冻干燥制成无菌粉状固体药物组合物，在氮气保护下密封容器，包装得成品。本发明药物组合物可明显改善培美曲塞二钠输注时的不适、疼痛甚至炎性反应等局部刺激作用，提高患者顺应性。

Description

一种培美曲塞二钠的药物组合物

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种培美曲塞二钠可供注射的冻干药用组合物。

背景技术

培美曲塞二钠(Pemetrexed disodium)，化学名称为N-[4-[2-(2-氨基-4，7-二氢-4-氧-1H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-烷基)乙基]苯甲酰基]-L-谷氨酸二钠。

培美曲塞二钠为多靶点叶酸拮抗剂，由美国礼来公司开发用于治疗肿瘤，联合顺铂可治疗无法手术的恶性胸膜间皮瘤(MPM)，目前，培美曲塞二钠是世界上唯一治疗恶性胸膜间皮瘤的药物，同时用于转移性非小细胞肺癌二线治疗。培美曲塞单药或联合化疗对多种肿瘤有明显的治疗作用，尤其对既往治疗失败的患者带来了新的康复希望。

培美曲塞二钠早期的研究结果均以专利形式公开，1994年9月6日，礼来公司的US5344932公开了培美曲塞二钠的结构，其制备方法及抗癌活性。在随后的研究中，礼来公司在其多篇专利中公开了培美曲塞二钠的多种制备方法，以及与其他抗癌剂联用治疗不同癌症的用途。

一种药物应用于临床，必须要采取某种制剂形式给药，由于培美曲塞二钠作为抗癌药物对胃肠道有较大刺激，因此该药物首选采用注射方式给药，2003年2月12日，礼来公司公开了培美曲塞二钠药物组合物专利CN1396828A，名称为“含有培美西德以及一硫代甘油L-半胱氨酸或巯乙酸的药物组合物”，该申请涉及一种适合非肠道给药的液体制剂，采用培美曲塞、抗氧剂及药学上可接受的赋形剂组成，其中，抗氧剂选自一硫代甘油、L-半胱氨酸和巯乙酸中的一种或多种，但以上三种抗氧剂被后来研究认为并非最佳选择，并且还存在在中国境内不易购得的缺点。

由于培美曲塞二钠不稳定易降解的特点，国内外医药行业对于其制剂学的研究一直集中于如何提高其制剂稳定性方面。海南天源康泽医药科技有限公司于2007年12月5日公开了专利CN101081301，该专利在前述专利CN1396828A的基础上进行了研究，保护一种培美曲塞的药物组合物，该药物组合物同样为适合非胃肠道给药的液体制剂组合物，其中所使用的抗氧剂选自L-精氨酸、L-谷胱甘肽、L-蛋氨酸和L-色氨酸中的一种或多种，该专利宣称以上抗氧剂比CN1396828A中采用的抗氧剂更有利于产品稳定。

然而，尽管注射液中加入了各种抗氧剂，溶液稳定性仍难以达到制剂学要求，培美曲塞二钠以液体形式保存易出现有效成分降解及有关物质增加的问题，导致药品疗效下降及不良反应风险大大增加，因而，礼来公司的培美曲塞二钠上市制剂没有采用其专利CN1396828A保护的注射液形式，而是以注射用冻干粉末制剂形式上市。冻干粉末制剂同样为注射给药，既避免了胃肠道刺激，又解决了注射液不稳定的问题，是目前培美曲塞二钠临床应用最合理的制剂形式。

礼来公司并未申请注射用冻干组合物有关的专利保护，但其处方信息已在美国食品药品管理局(FDA)网站的注册信息中公开。礼来公司上市的注射用培美曲塞二钠，采用冷冻干燥工艺制备，作为赋形剂的甘露醇是唯一的辅料，2004年上市至今，该产品疗效确切，质量稳定。

2008年彭苏等公开的期刊文献(注射用培美曲塞二钠在冷冻干燥过程中异常问题的产生原因及解决办法.彭苏等.药学与临床研究.2008，4(17)：349-351.)对上市培美曲塞二钠冻干制剂的冷冻干燥过程参数进行了优化，并对容易出现的问题进行了分析。

2007年2月7日，南京依诺维医药科技有限公司公开的专利CN1907284A在礼来公司上市制剂基础上做了进一步研究，专利保护一种含有培美曲塞的药物组合物，组合物中含有培美曲塞和稳定剂，重量比为5∶2～7，其中稳定剂为精氨酸、蛋氨酸或甘氨酸中的一种或几种，组合物可制备成冻干粉针剂。

2009年4月22日，江苏奥赛康药业有限公司公开了专利CN101411710，发明涉及一种培美曲塞二钠冻干粉针剂，由培美曲塞二钠、甘露醇和亚硫酸钠组成，亚硫酸钠作为抗氧剂，质量份配比为培美曲塞二钠50，甘露醇10～50，亚硫酸钠0.1～1。

以上的两件专利，均是在礼来公司培美曲塞二钠上市制剂组方基础上，增加抗氧剂，或者说是稳定剂，以提高产品稳定性的发明。

培美曲塞二钠注射用冻干粉针剂上市后，在癌症治疗领域发挥了很大的作用，但是也存在一些不足，在临床应用过程当中，培美曲塞二钠常发生输注疼痛的情况，有时甚至引起患者局部炎性反应，给患者带来很大痛苦。有报道称，临床应用培美曲塞二钠有时需要与激素类药物或局麻药配合使用以降低患者的不适感，或减轻局部炎性症状。

出现药物局部刺激作用大多是由于主药本身具强刺激性，但也有部分情况是由于主药与辅料之间存在配伍问题，而后者可以通过改变辅料种类和配比的方式来解决。但现有技术中尚没有出现减小局部刺激，改善患者用药顺应性的培美曲塞二钠制剂学研究报道。

因此可知，现有技术中缺少一种可以有效改善培美曲塞二钠注射时输注疼痛，减轻其局部刺激的不良反应的制剂组合物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种可有效改善培美曲塞二钠输注时疼痛的药物组合物，此外本发明还提供制备所述培美曲塞二钠药物组合物的方法。

海藻糖是由两个葡萄糖分子以α，α，1，1-糖苷键构成的非还原性双糖，性质稳定，海藻糖在冻干制剂中作为赋形剂使用时，具有良好的增强生物制品稳定性的作用。但现有技术并没有采用海藻糖作为冻干辅料可改善药品输注时痛感及炎症的报道。

本发明通过试验意外地发现，在培美曲塞二钠注射用冻干粉末制剂中加入一定比例的海藻糖，可明显缓解所制成制剂的输注疼痛感，减轻输注局部炎性症状，并降低炎症发生率。

因此，本发明提供一种培美曲塞二钠注射用冻干药物组合物，其中含有培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂。

本发明提供的培美曲塞二钠注射用冻干药物组合物中，培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂的质量份数为：培美曲塞二钠110份，海藻糖60～105份，冻干赋形剂0～40份。

优选地，上述药物组合物的质量份数为：培美曲塞二钠110份，海藻糖60～75份，冻干赋形剂25～40份。

本发明提供的培美曲塞二钠注射用冻干药物组合物中，所述冻干赋形剂选自甘露醇、山梨醇和乳糖中的一种或多种，优选甘露醇。

本发明还提供一种培美曲塞二钠冻干药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂溶解在水中，搅拌至溶液澄清；

(2)用氢氧化钠或盐酸溶液调节pH至7.5～8.0；

(3)将上述澄清液除去热原并过滤除菌；

(4)冷冻干燥制成无菌粉状固体药物组合物；

(5)在氮气保护下密封容器。

本发明所述组合物改善培美曲塞二钠输注时局部刺激的效果，可以通过血管刺激试验和肌肉刺激试验来说明。

血管刺激试验中，新西兰兔耳缘静脉注射给予各种处方比例的培美曲塞二钠产品配制的输注溶液，结果显示，培美曲塞二钠冻干产品中加入海藻糖，所得产品与未加入海藻糖的其他冻干产品相比刺激作用更小，海藻糖加入份数与血管刺激作用有明显量效关系，加入海藻糖质量份数增加，刺激作用减轻，当海藻糖质量份数在60及以上时，制得培美曲塞二钠冻干制剂对兔耳缘静脉观察不到明显的血管刺激作用；采用其他常规冻干辅料制备的产品均产生不同程度的血管刺激作用。

另外肌肉刺激试验结果显示，新西兰兔股四头肌注射给予各种处方比例的培美曲塞二钠产品配制的输注溶液后，加入海藻糖的培美曲塞二钠冻干产品与未加入海藻糖的其他冻干产品相比刺激作用更小，海藻糖加入份数与肌肉刺激作用有明显量效关系，加入海藻糖质量份数增加，刺激作用减轻，当海藻糖质量份数在60及以上时，制得培美曲塞二钠冻干制剂对兔耳缘静脉观察不到明显的肌肉刺激作用；采用其他常规冻干辅料制备的产品均产生不同程度的肌肉刺激作用。

本发明提供的冻干组合物的质量可以通过对产品外观、复溶性及水分含量来说明。结果显示，本发明所述组合物符合冻干制剂要求，优选地，当质量份数为培美曲塞二钠110份，海藻糖60～75份，冻干赋形剂25～40份时，制成的冻干药物组合物水分含量更低，更有利于产品质量稳定，其中，冻干赋形剂优选甘露醇。

本发明所述的药物组合物适合于静脉滴注给药，可单独或与其他抗癌剂合用治疗癌症。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的具体说明，而不应构成对本发明的限制。

实施例1～9及对比例1～8：

按照如下方法制备实施例1～9和对比例1～8的冻干产品。

制备方法：按表1所示称取相应的培美曲塞二钠原料及辅料，加灭菌注射用水至2.5L，搅拌溶解，用0.1N的氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节溶液的pH值为7.5，加入针用活性炭2.29g，搅拌，过滤，滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，并分装至I型玻璃瓶中。冻干柜中冷冻到-40℃左右保持4小时，-30～-20℃升华干燥30小时，25℃再干燥12小时后，充氮，加塞，出箱，压盖封口，包装即得实施例1～9和对比例1～8的注射用培美曲塞二钠冻干粉针剂。

表1实施例1～9、对比例1～8及上市制剂的处方量(单位：g)

注：上市制剂由市场购得，为礼来公司生产的注射用培美曲塞二钠(批号：A642590A，规格：0.1g)。

实施例10：按实施例1～9、对比例1～8制备的粉针剂及上市培美曲塞二钠冻干粉针剂的血管刺激试验

1.试验方法：取检疫合格的新西兰兔108只，体重2.5～3kg，雌雄各半，平均分为18组，每组6只，分别给予按照实施例1～9、对比例1～8方法制备的粉针剂及上市培美曲塞二钠粉针剂，采用同体左右侧自身对比法，兔左耳缘静脉给予相应的注射用培美曲塞二钠溶液，浓度为1mg/ml，约相当于临床拟用最大静脉给药浓度的1.2倍，兔右耳缘静脉给予生理盐水，给药容积均为5ml/kg，静脉给药速度拟定约1.3mL/分钟，输注约10分钟，间隔2日给药一次，共2次。

2.观察指标：末次给药后48小时和14天均对动物进行称重。动物状态观察：给药期间，每天给药前观察并记录动物的状态和给药部位的情况，注射部位肉眼观察指标见表2；停药期间，每天观察1次各例动物的状态。

3.动物取材：给药后48小时，肉眼观察并记录动物给药部位的情况后，每组取其中3例新西兰兔用25％乌来糖腹腔注射麻醉(麻醉剂量为1.5g/kg·bw，6mL/kg)后放血处死，从耳根部剪下双兔耳，分别在各耳的远心端第一针和近心端第一针皮肤处剪一小口作标记，然后固定在10％中性福尔马林溶液中。每组余下3例动物继续观察至末次给药后14天，再对动物的给药部位取材。

表2兔耳缘静脉注射部位肉眼观察指标

注：进针部位指自穿刺点沿静脉走向约1cm；给药部位指进针部位沿静脉走向至耳根部的范围。

4.病理检查：于兔耳末次注射针眼至近心端0.5cm～1.0cm间、1.5cm～2.0cm间、2.5cm～3.0cm间各切取一段组织，分别用“近端1”、“近端2”、“近端3”表示，以组织块不同长度加以区分(病理组织制片区分上述三段部位的方法为：最长取材段为“近端3”，最短取材段为“近端1”，余下的取材段为“近端2”)。取材时将兔耳横切，常规石蜡制片，切片厚度约2-3μm，H-E染色，用光学显微镜(OLYMPUS)观察。

5.动物处死方法：选用颈总动脉放血处死的方法。

6.结果判定：根据肉眼观察和病理检查的结果进行综合判断。

7.试验结果

(1)一般状况观察

实施例1～9组各例动物，给药过程未出现挣扎、嘶叫现象，试验期间外观特征、行为活动、呼吸及粪便性状等均未见明显异常。

对比例1、2、3、4、5、6、7、8及上市制剂组动物，分别有4/6例，1/6例，2/6例，2/6例，4/6例，4/6例，6/6例，5/6例，4/6例在给药过程中出现挣扎、嘶叫，试验期间外观特征、行为活动、呼吸及粪便性状等均未见明显异常。

(2)肉眼观察

末次药后48小时及14天，实施例1～9组各例动物左右侧进针和给药部位血管轮廓较清晰，兔耳厚薄均匀，均未见明显改变；对比例1～8及上市制剂组动物，耳部均有不同程度的异常变化，末次给药后48小时肉眼观察结果见表3，末次给药后14天的肉眼观察结果见表4。

表3血管刺激反应肉眼观察结果一览表(末次药后48小时)

表4血管刺激反应肉眼观察结果一览表(末次药后14天)

(3)病理组织学镜检结果

末次药后48小时和14天：实施例1～9组各例动物左右侧兔耳各段皮肤、附件和软骨结构完好，未见引起各组兔耳静脉血管及周围组织刺激性病理改变。

末次药后48小时：对比例1～8及上市制剂组动物，病理组织学检查可见：血管壁不同程度水肿，管壁内皮细胞损伤，周围组织发生炎细胞浸润，或有血管内栓塞，出血，停药后14天有一定程度的减轻，镜下可见肉芽组织生成，炎细胞不同程度减少，管壁水肿有所减轻，但仍有部分未完全恢复。

结论：在本实验条件下，新西兰兔耳缘静脉注射给予浓度为1mg/ml的相应的培美曲塞二钠溶液，实施例1～9的产品不产生血管刺激作用。

按对比例1～8方法制备的产品及上市制剂对新西兰兔耳缘静脉均能产生不同程度的刺激性，经14天的恢复期，刺激病变有一定程度的恢复。

实施例11：按实施例1～9及对比例1～8制备的粉针剂及上市制剂的肌肉刺激试验

1.试验方法：与血管刺激试验共用新西兰白兔108只，分组同血管刺激实验，采用同体左右侧肌肉自身对比法，左侧股四头肌给予受试物，给药浓度为1mg/mL(约相当于临床拟用静脉给药浓度的1.2倍)，给药体积为1.0mL/侧，右侧给予等体积的生理盐水作对照，间隔2日给药一次，共2次。分别于末次给药后48小时和14天进行剖检。

2.观察指标

动物称重：检疫期结束动物分组、末次给药后48小时和14天分别对动物进行称重。

动物状态观察：给药期间，每天给药前观察并记录动物的状态和给药部位的情况，注射部位肉眼观察指标见表5；停药期间，每天观察1次各例动物的状态。

表5肌肉刺激反应分级标准

3.动物取材：末次给药后48小时，肉眼观察并记录所有动物给药部位的情况后，每组取3例新西兰兔，用25％乌来糖腹腔注射麻醉后放血处死，解剖暴露股四头肌，纵向切开，记录注射部位肉眼观察结果，然后固定在10％中性福尔马林溶液中。每组余下动物观察至末次给药后14天再对动物的给药部位进行取材。

4.病理检查：

病理改变和正常组织的交界处垂直于肌纤维方向横切，平行于肌纤维纵切各取一块。常规石蜡制片，切片厚度约2-3μm，H-E染色，然后进行注射部位病理检查。

5.动物处死方法：选用颈总动脉放血处死的方法。

6.结果判定：根据肉眼观察和组织病理学的检查结果进行综合判断。

7.试验结果

(1)一般状况观察：实施例1～9组各例动物，给药过程未出现挣扎、嘶叫现象，试验期间外观特征、行为活动、呼吸及粪便性状等均未见明显异常。

对比例1、2、3、4、5、6、7、8及上市制剂组动物，分别有4/6例，1/6例，2/6例，2/6例，3/6例，3/6例，5/6例，4/6例，4/6例在给药过程中出现挣扎、嘶叫，试验期间外观特征、行为活动、呼吸及粪便性状等均未见明显异常。

(2)肉眼观察

i.给药期间：末次给药后24、48小时，分别对每组各例动物左右侧给药部位进行肉眼观察，均未见明显异常。

ii.第一批剖检动物(末次给药后48小时)：实施例1～9组各例动物，左右侧给药部位肌肉均未见明显异常变化。对比例1～8及上市制剂组动物，左侧给药部位肌肉出现明显异常现象，见表6。

iii.第二批剖检动物(末次给药后14天)：剖检结果见表7。

表6肌肉刺激反应肉眼观察结果一览表(末次药后48小时剖检)

表7肌肉刺激性反应肉眼观察一览表(末次药后14天)

(3)镜检结果

i.第一批剖检动物(末次给药后48小时)

实施例1～9组各例动物，左右侧给药部位股四头肌组织结构正常，肌纤维排列整齐，未见异常改变。对比例1～8及上市制剂组动物，左侧给药部位肌肉出现明显异常：左侧股四头肌注射部位局部肌纤维排列稀疏，有断裂，细胞肿胀，间隙增宽，间质内散在分布大量炎细胞(以巨噬细胞与淋巴细胞为主)，有出血，上述动物右侧注射部位的肌纤维结构正常，排列整齐，未见异常改变。

ii.第二批剖检动物(末次给药后14天)

实施例1～9组各例动物，左右侧给药部位股四头肌组织结构正常，肌纤维排列整齐，未见异常改变。对比例1、5～8及上市制剂组动物，左侧注射部位的局部肌纤维间纤维组织增生，伴炎细胞浸润，其中部分动物出现可以形成肉芽组织的多核巨细胞，间隙稍增宽，纤维细胞增生，有逐步恢复趋势，对比例2～4已基本恢复正常。上述动物右侧注射部位的肌纤维结构正常，排列整齐，未见异常改变。

结论：在本实验条件下，新西兰兔股四头肌注射给予浓度为1mg/ml的相应的培美曲塞二钠溶液，实施例1～9的产品不产生肌肉刺激作用。

按对比例1～8制备的产品及上市制剂对新西兰兔股四头肌均能产生不同程度的刺激性，经14天恢复期，刺激病变有一定程度的恢复。

实施例10～11说明，培美曲塞二钠冻干粉针剂处方中加入海藻糖能明显改善培美曲塞二钠的输注局部刺激，局部刺激随海藻糖质量份数增加而减轻，当海藻糖质量份数为60及以上时，输注时无明显局部刺激发生，海藻糖质量份数低于60，则会出现不同程度的输注局部刺激反应。

实施例12：按实施例1～9制备的粉针剂质量对比

以产品外观、复溶性及水分为评价指标，对实施例1～9制备的粉针剂进行以下对比，结果见表8：

表8产品外观、复溶性及水分

以上结果说明，实施例1～9制备的产品均符合规定(水分含量限度为4％)。本领域技术人员都知道含水量与冻干产品稳定性有反比例关系，本实施例中，实施例1、2、5、8、9制得产品水分含量明显低于其它组产品，因此，优选以下组方及质量份数使培美曲塞二钠冻干粉针剂具有更好的质量稳定性：

培美曲塞二钠110份，海藻糖60～75份，冻干赋形剂25～40份。

其中冻干赋形剂优选甘露醇。

Claims (6)

1.一种治疗癌症的培美曲塞二钠的冻干药物组合物，其特征在于所述药物组合物含有培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂的质量份数为培美曲塞二钠110份，海藻糖60～105份，冻干赋形剂0～40份。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂的质量份数为培美曲塞二钠110份，海藻糖60～75份，冻干赋形剂25～40份。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述冻干赋形剂选自甘露醇、山梨醇和乳糖中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述冻干赋形剂为甘露醇。

6.一种制备权利要求1～5中任一项所述的药物组合物的方法，包括以下步骤：

(1)将培美曲塞二钠、海藻糖和冻干赋形剂溶解在水中，搅拌至溶液澄清；

(2)用氢氧化钠或盐酸溶液调节pH至7.5～8.0；

(3)将上述澄清液除去热原并过滤除菌；

(4)冷冻干燥制成无菌粉状固体药物组合物；

(5)在氮气保护下密封容器。