CN107549554A - 具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，所述果汁发酵液由桑葚和山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，本发明还公开了一种包括该果汁发酵液和辅料的果汁发酵饮品及其制备方法。本发明采用食品级的植物乳杆菌和发酵乳杆菌的混合菌种作为发酵菌种，发酵生成SOD酶等营养物质，可以全面的补充人体内的SOD，可以增强细胞的新陈代谢，具有显著的美容祛斑功能，还可以增强人体抵抗力；采用的食品级发酵菌种在发酵过程中不会出现细菌和病毒污染的问题，解决了发酵液的安全问题；添加具有保健功能的桑葚和山楂，为桑葚和的山楂综合利用提供了新的途径，大大提升了经济价值。
Description
技术领域
本发明涉及保健饮品技术领域，具体涉及一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品及其制备方法，该果汁发酵饮品主要包括桑葚和山楂混合发酵液和辅料。
背景技术
黄褐斑(Cholasma)属中医学黑斑、肝斑、面尘、蝴蝶斑范畴，是皮肤黑色素增加而形成的一种常见面部呈褐色或黑色色素沉着性损容性的皮肤病，是皮肤科疑难病症之一。其主要表现为额、眉、颊、上唇等处出现局限性淡褐色或褐色斑片，境界清楚，表面光滑，呈对称性分布，多发于孕妇及经血不调的妇女，且女性患者与男性患者之比约为9:1。此病呈慢性过程，病程顽固，缠绵难愈，严重影响患者美观，给其精神和生活方面带来诸多烦恼和痛苦。该病发病率一直很高，近年来由于多种因素的影响，其发病呈逐年增多的趋势，就诊人数越来越多。随着人们生活环境的变化及生活水平的提高，黄褐斑日渐成为当今医学界、美容界共同关注和研究的热点之一。
黄褐斑的发病原因和机理复杂，与口服避孕药、遗传因素、氧自由基蓄积、微量元素含量异常、肝功能异常等诸多因素是否相关，目前尚不十分明确。现代医学认为其与内分泌失调、妊娠、子宫软巢疾病等因素有关。中医认为本病多与肝脾肾三脏关系密切，多因肝郁化火，或肝肾不足，或脾失健运，导致气滞淤血，气血不能上荣于面所致。目前，多数研究认为，黄褐斑是由于黄褐斑患者皮损部位黑色素细胞活性增强，黑素和黑素小体均增加，进而表现色斑，病理状态下，真皮内巨噬细胞可吞噬滴落入真皮黑色素体，或沉着于真皮上层，或在细胞内降解，一部分经淋巴转移。色素的产生和排泄失去平衡，并过剩的聚集在表皮细胞内的部分，就形成色素沉着。黑色素的排泄有两条途径：一是从肾内排泄，另一是从皮肤排出，即黑色素被转移到角质蛋白中，随表皮生长移行到角质层，最后随角质层周期换新而脱落。现代医学治疗黄褐斑的原理主要是抑制黑色素细胞活性、抑制黑色素合成、去除已经生成的黑色素、破坏黑色素颗粒及运用具有防光效应的遮光剂等。目前主要有以下几种治疗方法：(1)内服或静脉给与维生素C，同时配合维生素E使用，可阻止黑色素代谢的氧化过程，抑制黑色素形成；(2)局部外用氢醌霜，抑制黑色素颗粒的形成并增加其降解，抑制黑色素细胞DNA和RNA的合成，不影响黑色素细胞，结合广谱遮光剂治疗表皮型和混合型黄褐斑有一定疗效，或局部外用维甲酸霜，可抑制体外培养的黑素瘤细胞酪氨酸酶活性，阻止黑色素向角质层细胞的转运，同时减少角质形成，增加药物渗透。上述临床西药虽然对治疗黄褐斑具有一定的疗效，但效果往往欠佳，且存在不同程度的副作用，长期应用易引起严重的并发症。然而中医药在治疗黄褐斑方面有完整的治疗理论体系和丰富的临床经验，有整体调整脏腑功能独特的优势，因此中医药在治疗黄褐斑方面有着广阔的前景。
黑色素是在酪氨酸酶的作用下由无色的酪氨酸生成多巴，多巴又在酪氨酸酶的作用下变成多巴醌，再经一系列氧化过程，最后形成黑色素。正常情况下，黑色素形成以后，一部分会被分解，通过肾脏排出体外，另一部分会随着表皮的脱落而脱落。但是，若酪氨酸活力增强，黑色素增多，激增的黑色素又因代谢的迟缓而无法排出体外，就会淤积在脸上形成斑点。斑是五脏六腑功能紊乱、气血不和、肝郁气滞、气滞血瘀、气血津液流通不畅及内分泌失调在面部的反映。中医治斑标本兼治，从五脏论治，通过调节气血津液以求平衡阴阳，达到祛斑养颜的目的，阻止黄褐斑复发。
目前，临床上治疗黄褐斑多采用具有抗氧化的多酚，皂甙等生物抗氧化剂为主要成分的外用涂敷药，治愈率低，复发率高，疗效不明显，用药不方便。未能从调节内分泌平衡，促进新陈代谢，抗氧化清除自由基的人体内在因素结合抗疲劳的原则进行保健治疗。
目前已报道或已上市的具有祛斑(如黑斑、黄褐斑)功能的保健食品，如中国专利申请CN200710065545.0或CN 201110341598报道的配方，这些配方成分复杂，至少要9种成分以上且制备工艺复杂，均是中药成分，熬制过程比较麻烦，口感也不好。
此外，还有一些关于祛斑的配方，例如：
1、配方：珍珠母20克，玫瑰花3朵，大枣10枚，白菊花、丝瓜络、白僵蚕、白茯苓各10克制法：将上各味切碎，放入锅内，加入3碗清水，用文火煎至1碗，用法：每日1剂，2次水煎服，连服10天为1疗程，如有效可长期服用。功效：清热排毒，养颜祛斑备注：适用于蝴蝶斑。
2、配方：当归、白芍、旱莲草各10克，熟地、菟子丝各15克，女贞子、何首乌各12克，枸杞子、阿胶(另包，分2次服)各9克。制法：将上(除阿胶外)各味切碎，放入锅内，加入3-4碗清水，用文火煎至1碗，备用用法：每日1剂，2次水煎服，服前加入阿胶，烊化后服，连服3-6个月，若用效可长期服用。功效：兹肾泻火，排毒消斑备注：适用于黄褐斑。
3、配方：茵陈、六月雪、夏枯草、白茯苓(去黑皮)各12克，白菊花、白僵蚕、赤白芍、丝瓜络各9克，珍珠母20克，生甘草3克。制法：将上各味切碎，放入锅内，倒入3-4碗清水，用文火煎至1碗。用法：每日1剂，2次水煎服，连服2周为1疗程，如有效果要坚持服用至痊愈，不可中途停药，以免复发。功效：清郁热，排内毒，祛褐斑。
4、配方：党参、川芎、生地、茯苓、炒白术各12克，当归、赤芍各15克，红花、桃仁各10克，炙黄芪18克，红枣10枚，甘草6克制法：将上各味切碎，放入锅内，加入4碗清水，用文火煎至1碗。用法：每日1剂，2次水煎服，连服10天为1疗程，服用2疗程后有效者，应继续服用。功效：补气血，健脾胃，排内毒，除褐斑。
5、配方：桃花40克，冬瓜子仁50克，橘皮30克。制法：将上各味焙干，研为细末，装瓶。用法：每日3次，每次1克，饭后用温酒送服，连服30天。功效：活雪化瘀，排毒祛斑备注：适用于气滞血瘀，痰湿内蕴引起的黄褐斑。
上述配方成分复杂，均是中药成分，熬制过程比较麻烦，口感也不好，黑斑患者服用上述的配方长达一个月，其效果甚微。
因此，需要提供一种制备简单、饮用方便，口感好，具有美容祛斑功能还兼具其它营养成分的祛斑产品。
发明内容
本发明提供了一种果汁发酵液，其通过在桑葚和山楂混合浆中接入一定量的植物乳杆菌和发酵乳杆菌，接入的混合菌种的总质量是桑葚和山楂总质量的0.01-0.1％，搅拌均匀，发酵6-8周，发酵生成营养物质而制得。使用的是食品级发酵菌种，在发酵过程中不会出现细菌和病毒污染的问题，解决了植物酵素的安全问题。而且该植物酵素的制备方法发酵时间短，操作简单，成本低，有利于该方法的工业化生产。经临床试验证明，本发明提供的植物酵素具有很好的美容祛斑作用。
本发明的目的在于提供一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品及其制备方法，该果汁发酵饮品主要包括桑葚和山楂混合发酵液和辅料，含有丰富的超氧化物岐化酶，饮用方便，口感好，还兼具其它营养成分。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，所述果汁发酵液由桑葚和山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，其中，桑葚和山楂的重量份数为：10-20份桑葚和2-4份山楂；添加的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.01-0.1％。
桑葚有改善皮肤(包括头皮)血液供应，营养肌肤，使皮肤白嫩及乌发等作用，并能延缓衰老。桑葚是中老年人健体美颜、抗衰老的佳果与良药。桑椹具有生津止渴、促进消化、帮助排便等作用，适量食用能促进胃液分泌，刺激肠蠕动及解除燥热。我国医学认为，桑葚性味甘寒，具有补肝益肾、生津润肠、乌发明目等功效。
桑葚含有大量的原花青素和白黎芦醇，果穗含糖鞣酸、苹果酸、维生素B1、维生素B2和胡萝卜素等。每100克桑葚的营养成分能量为48千卡，蛋白质1.6克、脂肪0.4克、碳水化合物12.9克、膳食纤维3.3克、维生素A3微克、胡萝卜素20微克、核黄素0.05毫克、维生素E12.78毫克、钙30毫克、磷33毫克、钾32毫克、钠1.9毫克、铁0.3毫克、锌0.25毫克、硒6.5微克、铜0.06毫克和锰0.29毫克。
桑椹中的脂肪酸具有分解脂肪、降低血脂防止血管硬化等作用；桑椹含有乌发素能使头发变的黑而亮泽；桑椹有改善皮肤包括头皮血液供应营养肌肤使皮肤白嫩及乌发等作用并能延缓衰老；桑椹具有免疫促进作用可以防癌抗癌；桑椹主入肝肾善滋阴养血、生津润燥适于肝肾阴血不足及津亏消渴肠燥等症；常食桑椹可以明目缓解眼睛疲劳干涩的症状。一般人群均可食用，尤其适合肝肾阴血不足者少年发白者病后体虚、体弱、习惯性便秘者。
山楂主要含有脂肪酶、黄酮类和有机酸等有效成份。山楂通过活血化瘀，加速血液循环，促进新陈代谢，有助于体内黑色素分解，使之不能沉淀形成色斑。临床报道山楂粉外敷能促进面部血液循环，改善面部皮肤代谢，使面部色素逐渐消散。临床应用表明，选用山楂经配伍组成美容祛斑复方治疗黄褐斑可取得满意疗效。
本发明制备得到的果汁发酵液的滴定酸为15-20g/L，超氧化物岐化酶的含量为500-1000U/g。
超氧化物岐化酶(SOD)是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，对人体不断地补充SOD，具有抗衰老、抗氧化、调节人体内分泌系统，提高免疫力等功效。
优选的，所述混合乳酸菌包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:0.8-1.5，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度均为1.0×1011-1.5×1011cfu/g。
本发明还提供了一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品，包括果汁发酵液和辅料，其中各组分的重量份数为：
优选的，所述水溶性膳食纤维是聚葡萄糖。
本发明利用现代生物技术酿制而成的果汁发酵液兼具养血和美容的双重价值。发酵液由桑葚和山楂原汁通过接入植物乳杆菌和发酵乳杆菌发酵而成。该果汁发酵液为富含SOD成分的酸性发酵液。在该果汁发酵液中，添加胶原蛋白肽、聚葡萄糖(水溶性膳食纤维)、木糖醇、乳酸钙、烟酸、维生素B6可以制成果汁发酵饮品，其对美容祛斑起到辅助作用。
胶原蛋白是人体的一种非常重要的蛋白质，主要存在于结缔组织中。它具有很强的伸张能力，是韧带和肌键的主要成份，胶原蛋白还是细胞外基质的主要组成成分。它使皮肤保持弹性，而胶原蛋白的老化，则使皮肤出现皱纹。
胶原蛋白是一种生物性高分子物质，是一种白色、不透明、无支链的纤维性蛋白质。它可以补充皮肤各层所需的营养，使皮肤中胶原活性增强，有滋润皮肤，延缓衰老、美容、消皱、养发等功效。
胶原蛋白是人体延缓衰老必须补足的营养物质，占人体全身总蛋白质的30％以上，一个成年人的身体内约有3公斤胶原蛋白。它广泛地存在于人体的皮肤、骨骼、肌肉、软骨、关节、头发组织中，起着支撑、修复、保护的作用，胶原蛋白主要分布在哺乳动物的结缔组织中，对动物和人体的皮肤、血管、骨骼、筋腱、牙齿和软骨的形成都十分重要，是这些结缔组织的主要物质基础。我们可以毫不夸张的说，胶原蛋白是一切动物的生命支架。
胶原蛋白是皮肤真皮层中最主要的结构，完整的胶原结构影响肌肤的弹性与并且帮助肌肤支撑着立体的空间。当胶原蛋白随年龄增长而减少时，真皮层的支撑力将会减弱，肌肤就会出现缺损与凹陷，皱纹也就随之出现，另外大面积的肌肤弹性也会降低，肌肤将呈现明显的老化状况。
根据《肽营养学》(北京大学公共卫生学院营养与食品卫生学系教材)，分子量在1000道尔顿以下的胶原蛋白称为胶原蛋白肽，无需分解可被人体直接吸收，在口服吸收及外用护肤方面效果明显。这是目前最为成熟和最为有效的胶原蛋白补充方法，但需要注意的是最好是纯天然无添加的小分子胶原蛋白肽(分子量小于1000道尔顿)，才能真正进入真皮层帮助修护肌肤，重建胶原蛋白层。
聚葡萄糖是一种低热量、无糖、低血糖指数的特殊碳水化合物，具有水溶性膳食纤维和益生元的特点。聚葡萄糖可在小肠内形成一层膜，能包裹部分食物脂肪，吸附胆汁酸、胆固醇等，增加上述物质的排泄，起到调节血脂的作用。
乳酸钙调节血管阻力，抑制脂肪吸收，增加高密度脂蛋白与低密度脂蛋白的比值；相比市面上常用的无机钙具有更好的溶解性和吸收率。
烟酸也称作维生素B3，或维生素PP，烟酸在人体内转化为烟酰胺，烟酰胺是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成部分，参与体内脂质代谢，能抑制甘油三酯脂酶活性，从多方面降低低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白水平、提高高密度脂蛋白水平；促进中性胆固醇经肠道排泄，缓慢地减少胆固醇和低密度脂蛋白含量。
维生素B6(Vitamin B6)又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，参与同型半胱氨酸向蛋氨酸的转化过程，具有降低慢性病的作用，轻度高同型半胱氨酸血症被认为是血管疾病的一种可能危险因素，维生素B6的干预可降低血浆同型半胱氨酸含量。
长期食用本发明的果汁发酵液也是一种有效降低胆固醇的方法，通过桑葚发酵获得的发酵液有更强的美容祛斑作用，这是因为桑葚富含多种酚类化合物，这些物质均为高效SOD的抗氧化剂，可以保护血液中低密度脂蛋白免受氧化损伤，从而减少动脉硬化的发生。发酵液不仅营养成分丰富，还具有很好的营养价值，具有缓解疲劳、调节血糖及脂质代谢、抗氧化等功效。
本发明还提供了果汁发酵饮品的制备方法，包括以下步骤：
1)将桑葚和山楂清洗，离心去水分，放入打浆机中打浆，得混合浆液；
2)将步骤1)得到的混合浆液通过无菌管道输送到发酵罐中，接种入混合乳酸菌种，搅拌均匀，发酵6-8周，得果汁发酵液；
3)在步骤2)得到的果汁发酵液中，依次添加入胶原蛋白肽、水溶性膳食纤维、木糖醇、乳酸钙、烟酸和维生素B6，混合，分装成30ml小瓶，在121℃下灭菌20min，得到果汁发酵饮品。
优选的，步骤2)中接种的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂质量和的0.01-0.1％。
优选的，所述混合乳酸菌包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:0.8-1.5，优选的，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的的浓度均为1.0×1011-1.5×1011cfu/g。
优选的，步骤2)中的发酵条件控制为：混合乳酸菌种接种后的第1周内，温度设置为30-32℃；混合乳酸菌种接种后的第2周开始，温度设置为26-30℃。
本发明采用的是食品级发酵菌种，可从市场上直接购买菌粉，使用前要将菌粉保存在冷库中，使用前12小时将菌粉从冷库中移至室温。
本发明还提供了果汁发酵液在辅助美容祛斑保健食品中的应用，所述果汁发酵液作为活性成分添加于辅助美容祛斑保健食品中。例如，可以添加于食物中，例如饼干、蛋糕，或添加于饮品中等。
与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果：1)本发明采用食品级的植物乳杆菌和发酵乳杆菌的混合菌种作为发酵菌种，发酵生成SOD酶等营养物质，可以全面的补充人体内的SOD，可以增强细胞的新陈代谢，具有显著的美容祛斑功能，还可以增强人体抵抗力；2)采用的食品级发酵菌种在发酵过程中不会出现细菌和病毒污染的问题，解决了发酵液的安全问题；3)添加具有保健功能的桑葚和山楂，解决了桑葚和山楂深加工发酵物的保健功能不足，难以形成高附加值产品的问题，为桑葚和的山楂综合利用提供了新的途径，大大提升了经济价值。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的解释。
实施例1
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，所述果汁发酵液由10份质量份桑葚和2份质量份山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，其中，添加的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.02％，所述混合乳酸菌包括质量比为1:0.8的植物乳杆菌和发酵乳杆菌。
制备得到的具有美容祛斑功能的果汁发酵液的滴定酸为17g/L，超氧化物岐化酶的含量为900U/g。
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品，包括果汁发酵液和辅料，其中各组分的重量份数为：
果汁发酵饮品的制备方法，包括以下步骤：
1)将桑葚和山楂清洗，离心去水分，放入打浆机中打浆，得混合浆液；
2)将步骤1)得到的混合浆液通过无菌管道输送到发酵罐中，接种入混合乳酸菌种，所述混合乳酸菌种包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，所述植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:0.8，混合菌种的总质量是桑葚和山楂总质量的0.02％，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度均是1×1011cfu/mL，搅拌均匀，发酵7周，得果汁发酵液；其中发酵过程的条件控制为：混合乳酸菌种接种后的第1周内，温度设置为30℃；混合乳酸菌种接种后的第2周开始，温度设置为26℃。
3)在步骤2)得到的果汁发酵液中，依次添加入胶原蛋白肽、聚葡萄糖、木糖醇、乳酸钙、烟酸和维生素B6，充分混合，分装成30ml小瓶，在121℃下灭菌20min，得到果汁发酵饮品。
实施例2
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，所述果汁发酵液由20份质量份桑葚和4份质量份山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，其中，添加的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.1％，所述混合乳酸菌包括质量比为1:1的植物乳杆菌和发酵乳杆菌。
制备得到的具有美容祛斑功能的果汁发酵液的滴定酸为15g/L，超氧化物岐化酶的含量为500U/g。
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品，包括果汁发酵液和辅料，其中各组分的重量份数为：
果汁发酵饮品的制备方法，包括以下步骤：
1)将桑葚和山楂清洗，离心去水分，放入打浆机中打浆，得混合浆液；
2)将步骤1)得到的混合浆液通过无菌管道输送到发酵罐中，接种入混合乳酸菌种，所述混合乳酸菌种包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，所述植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:1.2，混合菌种的总质量是桑葚和山楂总质量的0.1％，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度均是1.2×1011cfu/mL，搅拌均匀，发酵8周，得果汁发酵液；其中发酵过程的条件控制为：混合乳酸菌种接种后的第1周内，温度设置为31℃；混合乳酸菌种接种后的第2周开始，温度设置为28℃。
3)在步骤2)得到的果汁发酵液中，依次添加入胶原蛋白肽、聚葡萄糖、木糖醇、乳酸钙、烟酸和维生素B6，充分混合，分装成30ml小瓶，在121℃下灭菌20min，得到果汁发酵饮品。
实施例3
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，所述果汁发酵液由13份质量份桑葚和3份质量份山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，其中，添加的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.01％，所述混合乳酸菌包括活质量比为1:1.2的植物乳杆菌和发酵乳杆菌。
制备得到的具有美容祛斑功能的果汁发酵液的滴定酸为19g/L，超氧化物岐化酶的含量为700U/g。
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品，包括果汁发酵液和辅料，其中各组分的重量份数为：
果汁发酵饮品的制备方法，包括以下步骤：
1)将桑葚和山楂清洗，离心去水分，放入打浆机中打浆，得混合浆液；
2)将步骤1)得到的混合浆液通过无菌管道输送到发酵罐中，接种入混合乳酸菌种，所述混合乳酸菌种包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，所述植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:1.2，混合菌种的总质量是桑葚和山楂总质量的0.01％，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度是1.5×1011cfu/mL，搅拌均匀，发酵8周，得果汁发酵液；其中发酵过程的条件控制为：混合乳酸菌种接种后的第1周内，温度设置为32℃；混合乳酸菌种接种后的第2周开始，温度设置为30℃。
3)在步骤2)得到的果汁发酵液中，依次添加入胶原蛋白肽、聚葡萄糖、木糖醇、乳酸钙、烟酸和维生素B6，充分混合，分装成30ml小瓶，在121℃下灭菌20min，得到果汁发酵饮品。
实施例4
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，所述果汁发酵液由17份质量份桑葚和4份质量份山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，其中，添加的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.05％，所述混合乳酸菌包括质量比为1:1的植物乳杆菌和发酵乳杆菌。
制备得到的具有美容祛斑功能的果汁发酵液的滴定酸为20g/L，超氧化物岐化酶的含量为950U/g。
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品，包括果汁发酵液和辅料，其中各组分的重量份数为：
果汁发酵饮品的制备方法，包括以下步骤：
1)将桑葚和山楂清洗，离心去水分，放入打浆机中打浆，得混合浆液；
2)将步骤1)得到的混合浆液通过无菌管道输送到发酵罐中，接种入混合乳酸菌种，所述混合乳酸菌种包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，所述植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:1，混合菌种的总质量是桑葚和山楂总质量的0.05％，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度均是1.3×1011cfu/mL，搅拌均匀，发酵8周，得果汁发酵液；其中发酵过程的条件控制为：混合乳酸菌种接种后的第1周内，温度设置为31℃；混合乳酸菌种接种后的第2周开始，温度设置为27℃。
3)在步骤2)得到的果汁发酵液中，依次添加入胶原蛋白肽、聚葡萄糖、木糖醇、乳酸钙、烟酸和维生素B6，充分混合，分装成30ml小瓶，在121℃下灭菌20min，得到果汁发酵饮品。
实施例5
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，所述果汁发酵液由15份质量份桑葚和3.5份质量份山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，其中，添加的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.01％，所述混合乳酸菌包括质量比为1:1.5植物乳杆菌和发酵乳杆菌。
制备得到的具有美容祛斑功能的果汁发酵液的滴定酸为20g/L，超氧化物岐化酶的含量为1000U/g。
一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品，包括果汁发酵液和辅料，其中各组分的重量份数为：
果汁发酵饮品的制备方法，包括以下步骤：
1)将桑葚和山楂清洗，离心去水分，放入打浆机中打浆，得混合浆液；
2)将步骤1)得到的混合浆液通过无菌管道输送到发酵罐中，接种入混合乳酸菌种，所述混合乳酸菌种包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，所述植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:1.5，混合菌种的总质量是桑葚和山楂总质量的0.01％，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度是1.1×1011cfu/mL，搅拌均匀，发酵8周，得果汁发酵液；其中发酵过程的条件控制为：混合乳酸菌种接种后的第1周内，温度设置为30℃；混合乳酸菌种接种后的第2周开始，温度设置为28℃。
3)在步骤2)得到的果汁发酵液中，依次添加入胶原蛋白肽、聚葡萄糖、木糖醇、乳酸钙、烟酸和维生素B6，充分混合，分装成30ml小瓶，在121℃下灭菌20min，得到果汁发酵饮品。
实施例6
此例为果汁发酵液的急性毒性试验试验
由于主要原料桑葚和山楂经过发酵，存在着某些不确定因素。为安全起见，按《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》毒理学评价程序，对照保健食品安全性毒理学评价实验的四个阶段和内容，对本发明制备的“果汁发酵液”进行了第一急性毒性试验，其LD50为13000mg/kg。按急性毒性(LD50)剂量分级，该果汁发酵液为“实际无毒级”(大鼠口服LD50，mg/kg，5001-15000，相当于人的致死量250-500g/kg)。
实施例7
根据《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》辅助美容祛斑功能检验方法进行人体实验。
1.受试者纳入标准
经体检符合下列条件的志愿受试者：
(1)面部淡褐色至深褐色，界限清楚的斑片，通常对称性分布，无炎性表现及鳞屑；
(2)无明显自觉症状；
(3)主要发生在青春期后，女性多发；
(4)病情有一定的季节性，夏重冬轻；
(5)无明显内分泌疾病，并排除其它疾病引起的色素沉着。
2.受试者排除标准。
(1)年龄在十八岁以下及65岁以上，妊辰和哺乳期妇女，过敏体质；
(2)合并有心血管、脑血管、肝、肾和造血系统等严重疾病及内分泌疾病，精神病患者；
(3)嗜酒者或吸烟者；
(4)短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断。
(5)未按规定服用受试样品，无法判定功效或资料不全影响疗效或安全性判断者。
3.试验设计及分组要求
采用自身和组间两种对照设计。按受试者的黄褐斑颜色，面积情况随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如户外活动情况、性别、年龄等，进行均衡性检验，以确保组间的可比性。
计受试物为按本发明实施例1中的配方、工艺制备的饮液。按自愿原则选择符合以上条件的女性受试者120例。实验组服用受试物，对照组服用相同性状无功效安慰剂(脱离3例)。每次服用果汁发酵饮品1瓶，每日2次，服用量为20ml/日，连续30天，受试者在试食期间停止使用有养颜祛斑的化斑品、药物及保健食品。
4.功效性观察。
按症状轻重(重症3分、中症2分、轻症1分)在试食前后统计积分值，并就其主要症状改善(每一症状改善2分显效，改善1分为有效)，计算改善率。
4.1头面部黄褐斑检测
4.1.1面积大小改变
用标尺测量受试前后同一黄褐斑的长径和宽径，计算面积(cm2)。
4.1.2颜色深浅变化
按照《实用标准色卡》(第一版)中的棕色(Y+M+Bk即黄+品红+黑的叠色)色卡为黄褐斑颜色深浅的判断标准：Ⅰ度(15、20、5)，Ⅱ度(30、40、10)，Ⅲ度(40、60、15)。
5.祛斑功效判定
显效：黄褐斑颜色下降Ⅱ度，或面积缩小≥30％，不产生新黄褐斑。
有效：黄褐斑颜色下降Ⅰ度，或面积缩小<30％，≥10％不产生新的黄褐斑。
无效：黄褐斑面积缩小<10％，颜色无明显变化。
黄褐斑颜色深浅变化如表1所示。
表1 试食组和对照组的黄褐斑颜色深浅变化
| 组别 | 例数 | 试食前 | 试食后 | 差值 |
| 试食组 | 60 | 2.36±0.44 | 2.06±0.30**## | -0.25±0.39** |
| 对照组 | 57 | 2.30±0.45 | 2.29±0.56 | -0.02±0.20 |
黄褐斑面积大小变化如表2所示。
表2 试食组和对照组的黄褐斑面积大小变化
| 组别 | 例数 | 试食前(mm2) | 试食后(mm2) | 差值(mm2) |
| 试食组 | 60 | 6121±2373 | 4963±1680**## | 1158±873** |
| 对照组 | 57 | 2.30±0.45 | 6049±2091 | 88±365 |
注：**组内比较p<0.01，##组内比较p<0.01
试食前后功效判定结果(例，％)如表3所示。
表3 试食组和对照组的试食前后功效判定结果
| 组别 | 例数 | 有效 | 无效 | 有效率 |
| 试食组 | 60 | 43 | 17 | 71.67％ |
| 对照组 | 57 | 0 | 57 | 0 |
注：**组内比较p<0.01
6.结论
60例黄褐斑受试者按要求服用实施例1制备的果汁发酵饮品30d，黄褐斑面积平均缩小1158±873mm2(P<0.01)颜色变浅，色卡平均降低0.23±0.37度(P<0.01)例，其中有效例为43，总效率71.67％，说明祛黄褐斑颗粒有祛黄褐斑的作用。
Claims (10)
1.一种具有美容祛斑功能的果汁发酵液，其特征在于，所述果汁发酵液由桑葚和山楂经过混合乳酸菌发酵制备而得，其中，桑葚和山楂的重量份数为：10-20份桑葚和2-4份山楂；添加的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.01-0.1％。
2.根据权利要求1所述的具有美容祛斑功能的果汁发酵液，其特征在于，所述果汁发酵液的滴定酸为15-20g/L，超氧化物岐化酶的含量为500-1000U/g。
3.根据权利要求1所述的具有美容祛斑功能的果汁发酵液，其特征在于，所述混合乳酸菌包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，植物乳杆菌和发酵乳杆菌质量比为1:0.8-1.5，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度均为1.0×1011-1.5×1011cfu/g。
4.一种具有美容祛斑功能的果汁发酵饮品，其特征在于，包括的权利要求1-3中任一项所述的果汁发酵液和辅料，其中各组分的重量份数为：
5.根据权利要求4所述的果汁发酵饮品，其特征在于，所述水溶性膳食纤维是聚葡萄糖。
6.权利要求4或5所述的果汁发酵饮品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将桑葚和山楂清洗，离心去水分，放入打浆机中打浆，得混合浆液；
2)将步骤1)得到的混合浆液输送到发酵罐中，接种入混合乳酸菌种，搅拌均匀，发酵6-8周，得果汁发酵液；
3)在步骤2)得到的果汁发酵液中，依次添加入胶原蛋白肽、水溶性膳食纤维、木糖醇、乳酸钙、烟酸和维生素B6，混合，分装成小瓶，在121℃下灭菌20min，得到果汁发酵饮品。
7.根据权利要求6所述的果汁发酵饮品的制备方法，其特征在于，步骤2)中接种的混合乳酸菌的质量是桑葚和山楂总质量的0.01-0.1％。
8.根据权利要求6或7所述的果汁发酵饮品的制备方法，其特征在于，所述混合乳酸菌包括植物乳杆菌和发酵乳杆菌，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的质量比为1:0.8-1.5，植物乳杆菌和发酵乳杆菌的浓度均为1.0×1011-1.5×1011cfu/g。
9.根据权利要求6所述的果汁发酵饮品的制备方法，其特征在于，步骤2)中的发酵条件控制为：混合乳酸菌种接种后的第1周内，温度设置为30-32℃；混合乳酸菌种接种后的第2周开始，温度设置为26-30℃。
10.权利要求1-3中任一项所述的果汁发酵液在辅助美容祛斑保健食品中的应用，其特征在于，所述果汁发酵液作为活性成分添加于辅助美容祛斑保健食品中。
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