CN107502558A - 一种大球盖菇培养基 - Google Patents

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    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

Abstract

本发明涉及一种大球盖菇培养基，包括固体培养基和液体培养基，固体培养基的组成及含量为：马铃薯100g‑200g，琼脂10g‑20g，海藻糖25g‑50g，加蒸馏水定容至0.5L‑1.0L，液体培养基的组成及含量为：马铃薯100g‑200g，海藻糖25g‑50g，加蒸馏水定容至0.5L‑1.0L。本发明的培养基能为大球盖菇生长提供良好的营养物质和空间环境，制作方法简单，能够显著加快大球盖菇菌丝的生长速度，提高其菌丝生物量，增加经济效益，培养得到的大球盖菇菌落边缘整齐，菌丝长势好。

Description

一种大球盖菇培养基
技术领域
本发明属于大球盖菇培育领域，特别涉及一种大球盖菇培养基。
背景技术
大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)，又名皱球盖菇、酒红色球盖菇。大球盖菇中含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质及多糖等营养成分，是欧美各国人工栽培的著名食用菌之一，也是联合国粮农组织(FAO)向发展中国家推荐栽培的食用菌之一。目前，大球盖菇在中国的市场逐渐被打开，受到人们的喜爱。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种大球盖菇培养基，该培养基制作方法简单，易于推广，能够显著加快大球盖菇菌丝的生长速度，提高大球盖菇菌丝的生物量。
本发明的一种大球盖菇培养基，包括固体培养基和液体培养基，固体培养基的组成及含量为：马铃薯100g-200g，琼脂10g-20g，海藻糖25g-50g，加蒸馏水定容至0.5L-1.0L，液体培养基的组成及含量为：马铃薯100g-200g，海藻糖25g-50g，加蒸馏水定容至0.5L-1.0L。
所述固体培养基、液体培养基均在121℃下灭菌20min，冷却后待接种。
所述接种是在紫外灭菌30min的超净工作台上进行的。
所述液体培养基的接种量为10％。
所述固体培养基、液体培养基均在25℃黑暗条件下进行培养，液体培养基在150rpm转速的25℃恒温摇床中培养，固体培养基在25℃恒温培养箱中培养。
所述液体培养基用250mL三角瓶，每瓶装100mL。
有益效果
本发明的培养基能为大球盖菇生长提供良好的营养物质和空间环境，制作方法简单，能够显著加快大球盖菇菌丝的生长速度，提高其菌丝生物量，增加经济效益，培养得到的大球盖菇菌落边缘整齐，菌丝长势好。
附图说明
图1是大球盖菇培养过程中实施例1的大球盖菇菌丝(实施例)和对比例1的大球盖菇菌丝(对照组)生长情况图；
图2是大球盖菇固体培养过程中实施例1的大球盖菇菌丝(实施例)和对比例1的大球盖菇菌丝(对照组)生长速度图；
图3是大球盖菇液体培养过程中实施例1的大球盖菇菌丝(实施例)和对比例1的大球盖菇菌丝(对照组)干重图；
图4是大球盖菇液体培养得到的实施例1中大球盖菇菌丝(实施例)和对比例1中大球盖菇菌丝(对照组)的蛋白质电泳图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
一种大球盖菇培养基包括固体培养基和液体培养基，固体培养基的组成及含量为：马铃薯200g，琼脂15g，海藻糖50g，加蒸馏水定容至1L，液体培养基的组成及含量为：马铃薯200g，海藻糖50g，加蒸馏水定容至1L，使用250mL三角瓶，每瓶装100mL液体培养基。所有培养基均在121℃下灭菌20min，冷却后待接种。在紫外灭菌30min后的超净工作台上进行大球盖菇菌丝接种，然后在25℃黑暗条件下培养，液体培养基在150rpm转速的25℃恒温摇床中培养，固体培养基在25℃恒温培养箱中培养。对大球盖菇培养过程进行实时监测，观察其生长情况及菌落形态，当菌丝生长到第10d时进行拍照，结果如图1中实施例所示。在固体培养过程中，对大球盖菇菌丝生长速度进行评价，在接种后第4d、10d用十字交叉法测量菌落半径，菌落半径差值(mm)与生长天数(d)的比值即为菌丝生长速度(mm/d)，重复三次，测量平均结果如表1中实施例所示。液体培养基的接种量为10％，在液体培养过程中，在黑暗条件下培养14d时，大球盖菇菌丝球已基本长满三角瓶，处于生长旺盛阶段。用烘干至恒重(M1)的滤纸过滤菌丝球，将菌丝球和滤纸一同烘干至恒重(M2)，计算大球盖菇菌丝球干重M＝(M2-M1)，重复三次，测量的菌丝球干重平均结果如表2中实施例所示。收集液体培养基的大球盖菇菌丝，采用TCA-丙酮法提取其蛋白质，进行SDS-PAGE电泳分析。
对比例1
一种大球盖菇常用培养基包括固体培养基和液体培养基，固体培养基的组成及含量为：马铃薯200g，琼脂15g，葡萄糖20g，加蒸馏水定容至1L，液体培养基的组成及含量为：马铃薯200g，葡萄糖20g，加蒸馏水定容至1L，使用250mL三角瓶，每瓶装100mL液体培养基。所有培养基均在121℃下灭菌20min，冷却后待接种。在紫外灭菌30min后的超净工作台上进行与实施例1生长状态相同的大球盖菇菌丝接种，然后在25℃黑暗条件下培养，液体培养基在150rpm转速的25℃恒温摇床中培养，固体培养基在25℃恒温培养箱中培养。对大球盖菇培养过程进行实时监测，观察其生长情况及菌落形态，当菌丝生长到第10d时进行拍照，结果如图1中对照组所示。在固体培养过程中，对大球盖菇菌丝生长速度进行评价，在接种后第4d、10d用十字交叉法测量菌落半径，菌落半径差值(mm)与生长天数(d)的比值即为菌丝生长速度(mm/d)，重复三次，测量平均结果如表1中对照组所示。液体培养基的接种量为10％，在液体培养过程中，在黑暗条件下培养14d时，大球盖菇菌丝球已基本长满三角瓶，处于生长旺盛阶段。用烘干至恒重(M1)的滤纸过滤菌丝球，将菌丝球和滤纸一同烘干至恒重(M2)，计算大球盖菇菌丝球干重M＝(M2-M1)，重复三次，测量的菌丝球干重平均结果如表2中对照组所示。收集液体培养基的大球盖菇菌丝，采用TCA-丙酮法提取其蛋白质，进行SDS-PAGE电泳分析。
图1表明：与本对比例1的大球盖菇菌丝(对照组)相比，实施例1的大球盖菇菌丝(实施例)生长分支多，菌落边缘更整齐，长势更好。
图2表明：与本对比例1的大球盖菇菌丝(对照组)相比，实施例1的大球盖菇菌丝(实施例)生长速度明显要快，说明实施例1中的培养基对大球盖菇菌丝的生长具有显著的促进作用。
图3表明：实施例1的大球盖菇菌丝(实施例)与本对比例1的大球盖菇菌丝(对照组)干重存在显著性差异，实施例的大球盖菇菌丝干重明显高于对照组，说明实施例1中的培养基能够增加大球盖菇菌丝的生物量。
图4表明：实施例1的大球盖菇菌丝蛋白质条带组成(实施例)与本对比例1的大球盖菇菌丝蛋白质条带组成(对照组)无区别，说明实施例1中的培养基不会改变大球盖菇菌丝的蛋白表达。
表1
表2

Claims (6)

1.一种大球盖菇培养基，其特征在于，包括固体培养基和液体培养基，固体培养基的组成及含量为：马铃薯100g-200g，琼脂10g-20g，海藻糖25g-50g，加蒸馏水定容至0.5L-1.0L，液体培养基的组成及含量为：马铃薯100g-200g，海藻糖25g-50g，加蒸馏水定容至0.5L-1.0L。
2.按照权利要求1所述的一种大球盖菇培养基，其特征在于，所述固体培养基、液体培养基均在121℃下灭菌20min，冷却后待接种。
3.按照权利要求2所述的一种大球盖菇培养基，其特征在于，所述接种是在紫外灭菌30min的超净工作台上进行的。
4.按照权利要求1所述的一种大球盖菇培养基，其特征在于，所述液体培养基的接种量为10％。
5.按照权利要求1所述的一种大球盖菇培养基，其特征在于，所述固体培养基、液体培养基均在25℃黑暗条件下进行培养，液体培养基在150rpm转速的25℃恒温摇床中培养，固体培养基在25℃恒温培养箱中培养。
6.按照权利要求1所述的一种大球盖菇培养基，其特征在于，所述液体培养基用250mL三角瓶，每瓶装100mL。
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