CN107478755B - 用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法 - Google Patents

用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，包括如下步骤：(1)检测缴获甲基苯丙胺样品中甲基苯丙胺的纯度，选择甲基苯丙胺质量分数大于或等于70wt％的缴获甲基苯丙胺样品作为纯化制备甲基苯丙胺标准物质的原料；(2)利用高效液相色谱制备甲基苯丙胺标准物质；所得甲基苯丙胺的纯度高，可以直接作为标准品使用。本发明制备纯化方法得到的甲基苯丙胺经核磁共振、液相色谱‑串联质谱联用、红外光谱分析确认，其纯度经液相色谱、气相色谱确认定值，并对色谱无响应杂质进行测定；根据标准物质研制要求，其稳定性、均匀性、定值、总不确定度的估计均符合相关规定，达到预期指标。

Description

用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备 方法
技术领域
本发明涉及法庭科学毒品检测。更具体地，涉及一种用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法。
背景技术
目前，日趋严重的毒品问题已成为全球性的灾难。毒品的泛滥直接危害人民的身心健康，并给经济发展和社会进步带来巨大威胁。因此，建立法庭科学毒品检测量值溯源体系，提高毒品成份量测量技术，保证测量结果的可靠性和可比性，建立测量数据的共享与互认，为法庭提供准确可靠的证据，已成为世界各国毒品鉴定机构普遍关注的问题。
毒品成份量测量技术及溯源性保障是一个有机的整体，是核心测量能力在法庭科学毒品成份量测量领域的重要体现。标准物质是贯穿于这个整体的骨架，是量值的载体，是毒品成份量溯源体系的关键要素，是保证测量结果在时间和空间上的准确性和可比性的重要基础，是实现有效测量即准确、可比、可溯源测量的根本保证。
欧美等国家技术先进的毒品检测实验室大多采用Sigma等公司生产的国际上公认的标准物质，但在我国只能依赖进口的标准物质，量少价高，有许多还不能向中国提供。目前国内毒品分析中使用的“对照品”不仅种类极为有限，而且普遍缺乏完善的结构鉴定、纯度测定、均匀性和稳定性等相应的技术指标。这些都给涉毒案件检测带来一定的不确定性，直接影响到定量结果的准确性。而且，国内毒品标准物质的匮乏，已经成为制约我国实现法庭科学毒品检测化学测量方法标准化、测量结果的溯源和互认的主要障碍。因此，能够制备出用于法庭科学毒品检测的毒品标准物质已经成为我国毒品研究领域亟需解决的问题。
甲基苯丙胺又称甲基安非他明、冰毒、去氧麻黄素、脱氧麻黄碱。英文通用名称：Methamphetamine hydrochloride，化学名称：1-苯基-2-甲氨基丙烷，Chemical Name：Dimethylphenylethylamine hydrochloride，甲基苯丙胺盐酸盐分子式：C10H15N·HCl，分子量：185.70(anhyd.)，CA登记号：51-57-0结构式为：
理化性质：微带苦味，是一种无色片状结晶，熔点172℃～174℃，易溶于水(50mg/mL)、乙醇、不溶于乙醚，游离碱有氨臭。由于甲基苯丙胺分子中存在一个手性碳原子，因此甲基苯丙胺又分为左旋光学异构体和右旋光学异构体，二者等量混合物形成外消旋体。光学结构不同，其药性效果有很大差异，根据文献，右旋甲基苯丙胺比左旋甲基苯丙胺高几倍。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法。
为达到上述目的，本发明采用下述技术方案：
用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，包括如下步骤：
(1)检测缴获甲基苯丙胺样品中甲基苯丙胺的纯度，选择甲基苯丙胺质量分数大于或等于70wt％的缴获甲基苯丙胺样品作为纯化制备甲基苯丙胺标准物质的原料；
(2)利用高效液相色谱制备甲基苯丙胺标准物质。
上述用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，在步骤(1)中，包括如下步骤：
(1.1)样品溶液的制备：称取1mg甲基苯丙胺样品溶于1mL甲醇中，配成质量体积浓度为1mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于高效液相色谱分析，使用前，样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤。
(1.2)确定液相色谱条件：色谱柱为Shim-pack HRC-ODS柱(250mm×4.6mm I.D.，5μm)；流动相为甲醇：0.05％三氟乙酸/水＝25:75，等度洗脱；紫外检测波长220nm；流速1.0mL/min；柱温为室温；
(1.3)计算标准曲线的回归方程及确定线性范围：用色谱甲醇逐级稀释市售1.0mg/mL甲基苯丙胺甲醇溶液，配制成浓度分别为1.0,0.5,0.1,0.05,0.01,0.005,0.001mg/mL的甲基苯丙胺标准溶液，按步骤(1.2)中选定的色谱条件测定，每个浓度重复3次，以平均值计算，记录甲基苯丙胺色谱峰面积，以标准品的进样浓度(μg/mL)为横坐标，色谱峰面积值为纵坐标作图，并计算标准曲线的回归方程，标准曲线的回归方程为：Y＝1930+5×106C，R2＝1.0000；确定线性范围：甲基苯丙胺在0.001～1mg/mL的范围内线性关系良好；
(1.4)准确称取甲基苯丙胺白色晶体样品10mg于10mL容量瓶中，用色谱甲醇定容并混匀，配成质量浓度为1mg/mL的样品溶液；取该溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后进行HPLC分析，连续测定3次，记录甲基苯丙胺峰面积并计算其平均值，按峰面积外标法计算样品中的甲基苯丙胺含量。
上述用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，在步骤(2)中，包括如下步骤：
(2.1)样品溶液的制备：640mg甲基苯丙胺样品置于2mL容量瓶中，加入甲醇/水(体积比为1:1)至刻度线，超声5min，至样品全部溶解，配制成320mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于制备型高效液相色谱分离制备甲基苯丙胺标准品。使用前样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤；
(2.2)确定液相色谱条件：色谱柱为Shim-pack PRC-ODS(H)制备柱(250mm×20mmI.D.，5μm)；流动相为甲醇：水＝5:95，并将甲醇和水充分混匀脱气后使用，等度洗脱；紫外检测波长220nm；流速10mL/min；上样量160μL；柱温为室温；收集信号阈值高于75mAu范围内的馏分；
(2.3)将收集到的馏分经减压旋蒸后得到无色透明晶体，用蒸馏水溶解并调节溶液pH为12；加入正己烷，萃取2次，每次萃取时水相与有机相体积比为1：1，合并有机相，往有机相中加入有机相体积的二分之一的水，逐滴滴加0.01NHCl溶液直至溶液pH为4-5，旋转蒸发去除正己烷，剩余水相经过冷冻干燥或旋转蒸发获得最终制备产物甲基苯丙胺盐酸盐晶体，置于真空干燥箱室温下干燥。
上述用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，在步骤(2.1)中，首先对甲基苯丙胺样品进行手性分析，并选择只含有单一异构体构型的样品作为制备原料得到相应的异构体标准物质。
上述用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，对甲基苯丙胺样品进行手性分析包括如下步骤：
(2.1.1)按体积比正己烷：异丙醇：三氟乙酸：二乙胺＝92:8:0.1:0.05配制手性分析用流动相；
(2.1.2)1mg甲基苯丙胺样品溶于5mL萃取溶剂(按体积比甲醇：乙醇：流动相＝2:3:5)，配成质量体积浓度为0.2mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于手性柱液相色谱分析；使用前样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤；
(2.1.3)色谱柱为CHIRALCEL OZ-H柱，250mm×4.6mm I.D.，5μm；流动相为正己烷：异丙醇：三氟乙酸：二乙胺＝92:8:0.1:0.05，等度洗脱；紫外检测波长214nm；流速1.0mL/min；柱温35℃；
(2.1.4)试验选择的手性柱固定相为表面涂敷了手性多聚物的球形硅胶，手性多聚物为纤维素-三-(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)，甲基苯丙胺的紫外吸收图选择检测波长为214nm。
本发明的有益效果如下：
本发明制备纯化方法得到的甲基苯丙胺晶体中，按照高效液相色谱峰面积归一化法计算甲基苯丙胺纯度大于或等于99.1wt％。
本发明制备纯化方法得到的甲基苯丙胺经核磁共振、液相色谱-串联质谱联用、红外光谱分析确认，其纯度经液相色谱、气相色谱确认定值，并对色谱无响应杂质进行测定；根据标准物质研制要求，其稳定性、均匀性、定值、总不确定度的估计均符合相关规定，达到预期指标。
本发明的制备纯化方法可为我国司法鉴定部门提供量值准确、可溯源的甲基苯丙胺标准物质，填补我国法庭科学领域毒品标准物质空白，以改进分析测量质量，提高定量结果的准确度，最大程度地保证测量结果的有效性。有助于建立法庭科学毒品检测量值溯源体系，有利于实现国内法庭科学毒品检测化学测量方法标准化，实现测量结果的可靠、有效和互认。
克服了现有技术制备纯化方法得到的甲基苯丙胺样品存在的纯度低、稳定性差、均匀性差、制备过程复杂等缺陷，提供了一种利用高效液相色谱分离法获得高纯度、高稳定性、回收率高、便于规模化生产的甲基苯丙胺标准物质制备方法。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。
图1：不同检测波长下甲基苯丙胺样品溶液色谱图；
图2：甲基苯丙胺的紫外光谱图；
图3：甲醇-0.05％TFA(二者体积比为15：85)；
图4：甲醇-0.05％TFA(二者体积比20：80)；
图5：甲醇-0.05％TFA(二者体积比25：75)；
图6：甲醇-0.05％TFA(二者体积比30：70)；
图7：甲醇-0.05％TFA(二者体积比35：65)；
图8：甲醇-0.5％乙酸(二者体积比5：95)；
图9:甲醇-0.5％乙酸(二者体积比15：85)；
图10:甲醇-0.5％乙酸(二者体积比20：80)；
图11:甲醇-0.5％乙酸(二者体积比25：75)；
图12:甲醇-水(二者体积比5：95)；
图13:甲醇-水(二者体积比10：90)；
图14:甲醇-水(二者体积比15：95)；
图15:甲醇-水(二者体积比20：90)；
图16:乙腈-0.05％TFA(二者体积比15：85)；
图17：甲醇-0.05％TFA(二者体积比25：75)；
图18：甲醇-0.05％三氟乙酸/水体系制备液相色谱图；
图19-1：甲醇-0.5％乙酸/水体系制备液相色谱图；
图19-2：图19-1的局部放大图；
图20-1：甲醇-水体系制备液相色谱图；图20-2：图20-1的局部放大图；
图21：利用案件鉴定剩余的晶体样本制备甲基苯丙胺标准物质的工艺流程。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例和附图对本发明做进一步的说明。附图中相似的部件以相同的附图标记进行表示。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
一、仪器、试剂及材料
1.1主要仪器
分析型高效液相色谱仪(日本岛津)，包括：LC-20AD高压输液泵；SIL-10A自动进样器；SPD-20A紫外检测器；CTO-20A柱温箱。RE-2000B旋转蒸发器(巩义市英峪高科仪器厂)。KQ3200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。飞鸽牌TDL-40B台式离心机(上海安亭科学仪器厂)。XS105Dual Range电子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司)。
1.2主要试剂及材料
正己烷、异丙醇、甲醇、乙醇(色谱纯，美国Fisher Scientific公司)，三氟乙酸、二乙胺(色谱纯，中国百灵威公司)，超纯水(经Millipore超纯水制备系统净化，法国Millipore公司)。
1.0mg/mL R(-)-甲基苯丙胺标准溶液、1.0mg/mL S(+)-甲基苯丙胺标准溶液(中国百灵威公司)。
甲基苯丙胺样品(白色晶体)由案件缴获并应用于本研究中。
二、甲基苯丙胺光学异构体的测定及原料筛选
2.1流动相及样品溶液制备
2.1.1手性分析流动相制备
按体积比正己烷：异丙醇：三氟乙酸：二乙胺＝92:8:0.1:0.05配制手性分析用流动相。
2.1.2手性分析样品溶液制备
1mg甲基苯丙胺样品溶于5mL萃取溶剂(按体积比甲醇：乙醇：流动相＝2:3:5)，配成质量体积浓度为0.2mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于手性柱液相色谱分析。使用前样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤。
2.2仪器条件
色谱柱为CHIRALCEL OZ-H柱(250mm×4.6mm I.D.，5μm)；流动相为正己烷：异丙醇：三氟乙酸：二乙胺＝92:8:0.1:0.05(此处为体积比)，等度洗脱；紫外检测波长214nm；流速1.0mL/min；柱温35℃。
2.3高效液相色谱手性分析条件的建立
试验选择的手性柱固定相为表面涂敷了手性多聚物(纤维素-三-(3-氯4-甲基苯基氨基甲酸酯)的球形硅胶，具有高分离选择性和广泛的适用范围，对许多手性化合物有很高的手性识别能力，适用于含氨基化合物的手性拆分。另根据手性柱《使用手册》，涂敷型固定相所用的流动相一般为正己烷/异丙醇混合物，本申请中通过对流动相体系、流速等条件的优化，最终选择流动相为正己烷：异丙醇：三氟乙酸：二乙胺＝92:8:0.1:0.05(此处为体积比)，能够将甲基苯丙胺与样品中的杂质分离开，获得了更好的分离效果。根据甲基苯丙胺的紫外吸收图选择检测波长为214nm。
2.4样品的测定
对2011—2012年度案件缴获的晶体样本用分析型液相色谱进行分析后，选择纯度高于70wt％的238份晶体样本进行手性分析，结果表明，有14份晶体中只含有R(-)methamphetamine，有137份只含有S(+)methamphetamine,R(-)与S(+)共存的晶体样本有87份，说明缴获的晶体样本多数只含有右旋甲基苯丙胺。
表1：238份甲胺晶体样品手性分析结果
2.5R(-)-甲基苯丙胺及S(+)-甲基苯丙胺标准物质制备时原料的选择
从原理上，在甲基苯丙胺制备液相色谱分离过程中，如果没有加入手性衍生化试剂或手性催化剂，整个制备过程不会导致异构体空间构型的改变。因此根据我们对案件缴获晶体的手性分析结果，可以选择只含有单一异构体构型的晶体样本作为制备原料得到相应的异构体标准物质。
根据对案件缴获样本的测定结果，选取只含有R(-)-methamphetamine和S(+)-methamphetamine的晶体样本，分别配制成样品溶液，经制备液相色谱分离可得到不同手性的甲基苯丙胺光学异构体。
三、缴获甲基苯丙胺样品中甲基苯丙胺的纯度检测及甲基苯丙胺标准物质的纯化制备
3.1仪器、试剂及材料
3.1.1主要仪器
分析型高效液相色谱仪(日本岛津)，包括：LC-20AD高压输液泵；SIL-10A自动进样器；SPD-20A二极管阵列检测器；CTO-20A柱温箱。
制备型高效液相色谱仪(Agilent)，包括：G1361A高压输液泵；G2260A自动进样器；G1315D二极管阵列检测器；G1364B自动馏分收集器。
RE-2000B旋转蒸发器(巩义市英峪高科仪器厂)
KQ3200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)
飞鸽牌TDL-40B台式离心机(上海安亭科学仪器厂)
XS105 Dual Range电子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司)
3.1.2主要试剂及材料
甲醇、乙酸(色谱纯，美国Fisher Scientific公司)，三氟乙酸(色谱纯，中国百灵威公司)，超纯水(经Millipore超纯水制备系统净化，法国Millipore公司)。
甲基苯丙胺标准物质1mg/mL(中国百灵威公司)
甲基苯丙胺样品(白色晶体)由案件缴获并应用于本研究中。
3.2样品溶液的制备
分析型：称取约1mg甲基苯丙胺样品溶于1mL甲醇中，配成约1mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于高效液相色谱分析，使用前样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤。
制备型：640mg甲基苯丙胺样品置于2mL容量瓶中，加入甲醇/水(体积比为1:1)置刻度线，超声5min，至样品全部溶解，配制成320mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于制备型高效液相色谱分离制备甲基苯丙胺标准品。使用前样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤。
3.3液相色谱条件
高效液相色谱(RP-HPLC)分析条件：色谱柱为Shim-pack HRC-ODS柱(250mm×4.6mm I.D.，5μm)；流动相为甲醇：0.05％三氟乙酸/水＝25:75(此处为体积比，0.05％三氟乙酸/水含义为三氟乙酸体积分数为0.05％的三氟乙酸水溶液，以下含义均相同)，等度洗脱；紫外检测波长220nm；流速1.0mL/min；柱温为室温。
高效液相色谱(RP-HPLC)制备条件：色谱柱为Shim-pack PRC-ODS(H)制备柱(250mm×20mm I.D.，5μm)；流动相为甲醇：水＝5:95(此处为体积比)，等度洗脱；紫外检测波长220nm；流速10mL/min；上样量160μL；柱温为室温。
3.4高效液相色谱分析条件的优化
3.4.1色谱柱的选择
据文献报导，甲基苯丙胺样品的HPLC分析，多采用反相高效液相色谱方法，利用C18色谱柱进行分析。由于试验中建立的高效液相色谱分析方法既要适合分析甲基苯丙胺晶体样品，又要有利于后期放大建立高效液相色谱制备方法，因此在色谱柱的选择上综合考虑了色谱柱填料、对应制备柱型号、价格等因素，采用shim-pack HRC-ODS(250mm×4.6mmI.D.，5μm)分析型色谱柱对甲基苯丙胺样品进行分析。
3.4.2检测波长的选择
以甲醇-0.05％三氟乙酸/水(V甲醇：V0.05％三氟乙酸/水＝15:85，本申请中0.05％三氟乙酸/水是指三氟乙酸体积分数为0.05％的三氟乙酸水溶液)为流动相，上样体积10μL，样品浓度1mg/mL，流速1.0mL/min，温度为室温，检测波长分别为210nm、215nm、220nm、230nm、235nm、254nm，对甲基苯丙胺样品溶液进行HPLC分析。比较不同检测波长下主成分与杂质响应差异，结果如图1。
由试验结果知，在选定的6个波长条件下，在220nm时，检测出的杂质成分最多，且各杂质成分的响应均较高，其次是254nm、210nm、215nm，在230nm和235nm条件下杂质成分响应最低。结合甲基苯丙胺的最大紫外吸收范围200～220nm(图2)，确定方法的检测波长为220nm。
3.4.3流动相体系的选择
在反相键合相色谱中，通常采用的流动相主体是水，同时加入甲醇、乙腈或四氢呋喃作为改性剂以改善分离的选择性。由于四氢呋喃的紫外吸收波长是220nm，与试验选择的检测波长相同，为避免流动相造成的背景干扰，关于反相液相色谱流动相体系的选择，分别对甲醇-0.05％三氟乙酸(TFA)/水体系、甲醇-0.5％乙酸/水体系(0.5％乙酸/水是指乙酸体积分数为0.5％的乙酸水溶液)、甲醇-水体系、乙腈-水体系以及乙腈-0.05％三氟乙酸(TFA)/水体系进行了考察。
⑴醇-0.05％三氟乙酸(TFA)/水体系考察
上样体积10μL，样品浓度1mg/mL，温度为室温，流速1.0mL/min，检测波长220nm，分别以甲醇体积分数为15％、20％、25％、30％和35％的甲醇-0.05％三氟乙酸水溶液为流动相，考察不同甲醇比例时样品中甲基苯丙胺及其相邻杂质峰分离情况。
由试验知，随着甲醇含量的逐渐增加，流动相极性降低，各杂质峰及甲基苯丙胺的保留时间逐渐提前。在甲醇体积含量为15％和20％(图3、图4)时，虽然相邻杂质峰同甲基苯丙胺色谱峰达到了基线分离，但分析时间较长，超过了40min。30％和35％甲醇含量时，15分钟以内，全部组分被洗脱，甲基苯丙胺与其前面的杂质峰达到了基线分离，但甲醇含量30％时，甲胺与其后面的杂质峰部分重叠(图6)，甲醇含量35％时，后面的杂质峰在甲胺色谱峰上形成一个肩峰(图7)。在25％甲醇含量时(图5)，在30min内全部组分从色谱柱中洗出，甲胺色谱峰同前后杂质峰均达到了基线分离。因此，从试验结果判断，采用甲醇-0.05％三氟乙酸(TFA)/水体系分析甲基苯丙胺样品溶液，25％体积分数甲醇含量时，主成分甲基苯丙胺和相邻杂质成分的分离效果最佳。
⑵醇-0.5％乙酸/水体系考察
上样体积10μL，样品浓度1mg/mL，温度为室温，流速1.0mL/min，检测波长220nm，分别以甲醇体积含量5％、15％、20％、25％甲醇-0.5％乙酸水溶液为流动相，考察不同甲醇比例时样品中甲基苯丙胺及其相邻杂质峰分离情况。
试验结果表明(图8～图11)，以甲醇-0.5％乙酸水溶液为流动相，检测波长为220nm，在改变甲醇体积含量为5％至25％时，均检测不到杂质峰，原因在于流动相中乙酸在220nm时的紫外吸收导致本底干扰增大，基线噪音增加，使杂质和甲基苯丙胺的检测灵敏度降低。
⑶醇-水体系考察
上样体积10μL，样品浓度1mg/mL，温度为室温，流速1.0mL/min，检测波长220nm，分别以甲醇体积含量5％、、10％、15％、20％甲醇-水为流动相，考察不同甲醇比例时样品中甲基苯丙胺及其相邻杂质峰分离情况。由试验结果知(图12～图15)，采用甲醇-水体系作为流动相，甲醇含量的增加使反相色谱中流动相的洗脱强度增大，组分保留时间提前，但主成分和杂质成分不能有效分离。采用甲醇-水体系的分离效果明显低于甲醇-0.05％三氟乙酸/水体系。
⑷腈-水体系考察
上样体积10μL，样品浓度1mg/mL，温度为室温，流速1.0mL/min，检测波长220nm，分别以乙腈体积含量5％、、10％、15％、20％乙腈-水为流动相，考察不同乙腈比例时样品中甲基苯丙胺及其相邻杂质峰分离情况。试验表明，采用乙腈-水体系作为流动相，分离效果同甲醇-水体系类似，但相同比例水含量时，采用乙腈-水体系主成分的保留时间会略有提前。
⑸腈-0.05％三氟乙酸体系考察
上样体积10μL，样品浓度1mg/mL，温度为室温，流速1.0mL/min，检测波长220nm，分别以乙腈体积含量5％、10％、15％、20％乙腈-0.05％三氟乙酸/水为流动相，考察不同乙腈比例时样品中甲基苯丙胺及其相邻杂质峰分离情况。结果表明，采用乙腈-0.05％三氟乙酸/水为流动相分析甲基苯丙胺样品溶液，15％乙腈含量时分离效果最好(图16)，但检测出的杂质数量少于甲醇-0.05％三氟乙酸/水体系(图17)，未检测到甲基苯丙胺右侧相邻杂质峰。
综合以上试验，选择V甲醇：V0.05％三氟乙酸/水＝25:75流动相体系用来分析甲基苯丙胺样品中的各组分。
3.4.4标准曲线和线性关系
用色谱甲醇逐级稀释市售1.0mg/mL甲基苯丙胺甲醇溶液，配制成浓度分别为1.0,0.5,0.1,0.05,0.01,0.005,0.001mg/mL的甲基苯丙胺标准溶液，按选定的色谱条件测定，每个浓度重复3次，以平均值计算，记录甲基苯丙胺色谱峰面积，以标准品的进样浓度(μg/mL)为横坐标，色谱峰面积值为纵坐标作图，并计算标准曲线的回归方程，确定线性范围。结果见表2。
表2：甲基苯丙胺的浓度与对应峰面积值
以峰面积对浓度作标准曲线，标准曲线的回归方程为：
Y＝1930+5×106C，R2＝1.0000
表明甲基苯丙胺在0.001～1mg/mL的范围内线性关系良好。
3.4.5样品中甲基苯丙胺含量的测定
准确称取甲基苯丙胺白色晶体样品9.98mg于10mL容量瓶中，用色谱甲醇定容并混匀，配成质量浓度为0.998mg/mL的样品溶液。取该溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后进行HPLC分析，连续测定3次，记录甲基苯丙胺峰面积并计算其平均值，按峰面积外标法计算样品中的甲基苯丙胺含量。
表3：MA晶体中MA含量的测定结果
由表3可知，通过峰面积外标法由标准曲线方程计算得到0.998mg/mL的MA晶体样品溶液中MA浓度为0.7624mg/mL，进而求得晶体样品中MA纯度为76.39wt％。
3.4.6高效液相色谱制备条件的优化
3.4.6.1流动相流速的选择
理论上，从分析液相色谱条件转化到制备液相色谱条件，填料相同、柱长相同的情况下，制备型色谱柱的流速可以根据以下公式线性放大。
X＝r2 2/r1 2
其中，X----放大系数
r2----制备柱半径
r1----分析柱半径
本试验中分析柱半径为4.6mm，制备柱半径为20mm，若按上述公式计算，放大系数为18.9，则制备柱流量理论计算值为18.9mL/min。但在制备色谱的分离方法建立中，如果流速按理论计算值设定，则色谱柱压力远超过最大压力(20KPa)限制，因此经过试验考察确定流动相流速如下。
表4：不同流动相体系下流速设定值
3.4.6.2流动相体系的考察
关于制备液相色谱流动相体系的选择，我们分别对甲醇-0.05％三氟乙酸(TFA)/水(二者体积比25：75)、甲醇-0.5％乙酸/水(二者体积比25：75)、甲醇-水(二者体积比5：95)体系进行了考察。
采用甲醇-0.05％三氟乙酸/水(二者体积比25:75)体系分离样品中的甲基苯丙胺组分，由试验结果可知(图18)，在分析型高效液相色谱中，甲基苯丙胺能够与样品中的其他杂质组分达到良好分离，但经过制备柱分离后却没有出现与分析柱上类似的谱图，分析柱甲基苯丙胺组分的保留时间为12.15min，制备柱峰开始时间是10min，保留时间提前。同时，分离度降低，色谱峰出现较大扩展，峰开始和峰结束的时间间隔超过10min，杂质峰与甲基苯丙胺色谱峰发生重叠。
采用甲醇-0.5％乙酸/水体系(25:75)分离样品中的甲基苯丙胺组分，结果从图19可见，与分析型色谱分离结果相比，色谱峰未出现较大扩展，组分保留时间延后，分析柱甲基苯丙胺的出峰时间是5.28min，制备柱上是10.31分钟，峰起始时间间隔约为5min。甲基苯丙胺色谱峰两侧有杂质峰出现，甲基苯丙胺与其前后相邻杂质峰的分离度分别为0.72和0.69。
采用甲醇-水(二者体积比5:95)体系分离样品中的甲基苯丙胺组分，从得到的色谱图看(图20)，甲醇-水(二者体积比5:95)体系分离效果好于甲醇-0.5％乙酸/水(25:75)体系，甲基苯丙胺色谱峰与其前面相邻杂质峰分离度为1.19。
综合考虑，如果采用峰重叠法收集馏分，甲醇-0.5％乙酸/水体系(二者体积比25:75)和甲醇-水(5:95)水体系均可以考虑作为流动相分离甲基苯丙胺样品。
3.4.6.3进样量考察及流动相体系确定
通常液相色谱制备是在柱超载的情况下进行，据文献报导，实际应用中在同样上样量时，体积超载对制备分离柱效的影响比质量超载的影响更大，因此在制备型HPLC中，一般采用质量超载的方式。本试验样本浓度为320mg/mL，接近室温条件下样品溶解的饱和状态，分离条件分别选择甲醇-0.5％乙酸/水(二者体积比25：75)体系或甲醇-水(二者体积比5:95)水体系作为流动相，从阈值大于75mAu开始收集馏分，馏分经过分析型液相色谱检测。考察不同流动相体系、不同进样体积时馏分的归一化纯度及回收情况。
表5：不同流动相体系下进样量考察结果
由表5数据可知，采用上述两种流动相体系，收集阈值高于75mAu的馏分，经过分析型高效液相色谱方法检测，馏分的归一化纯度均能达到99.7％以上。
当采用甲醇-0.5％乙酸/水体系进行分离制备时，随着进样量增加，回收率先升后降，100μL进样时回收率达到最高，为80.95％，120μL进样时，虽然进样量增加了20％，但回收率下降并不明显，仅下降了1.64％。而140μL进样时，回收率迅速降低至74.30％。
采用甲醇-水体系进行分离制备，收集阈值高于75Amu的馏分，不同进样体积时均能获得较高的制备回收率，当进样体积为160μL时，制备回收率最高，达到87.84％。
综合考虑，确定甲醇-水(二者体积比5:95)体系作为制备液相色谱分离甲基苯丙胺的流动相，进样体积为160μL。
3.4.6.4馏分收集范围的确定
采用制备液相色谱分离纯化，可以按保留时间收集馏分，也可根据阈值或色谱峰斜率进行收集。考虑到每次进样保留时间很难完全重合，为避免因保留时间的细微变化而引入杂质，实验中采用按信号阈值收集馏分的方式，分别对阈值高于60mAu，70mAu，75mAu，80mAu，85mAu范围内收集馏分进行HPLC分析，结果表明当阈值高于60mAu即可收集到纯度大于99.5wt％的馏分。最终确定收集信号阈值高于75mAu范围内的馏分。
3.4.6.5批处理程序
经过试验考察，在所采用的制备液相色谱条件下，45min内全部组分均能从制备柱中流出，因此在批处理运行过程中我们首先采用流动相中的甲醇和水分别经过A、B泵注入后经制备液相混合进柱。在批处理运行初期分离效果较好，但随后发现，色谱峰出现严重变形，保留时间改变，仪器不能按预先设定的参数收集馏分，经查找原因发现是由于管路中充斥大量气泡导致分离效果降低所致。进一步的试验查明，由于制备分离的流动相体系是由甲醇和水组成，当水与甲醇混合时，将出现放热现象，混合溶剂体积减小，同时有大量气泡释放。因此，试验采用进泵前将甲醇和水(二者体积比5:95)按比例混合，充分混匀脱气后使用。批处理运行可连续进样。
3.4.6.6甲基苯丙胺组分的进一步纯化
自动馏分收集器收集制备液相分离后的甲基苯丙胺组分，经减压旋蒸后得到无色透明晶体。通常可用红外光谱法检测得到的透明晶体是否为甲基苯丙胺盐酸盐。也可通过进一步纯化以获得最终的制备产物甲基苯丙胺盐酸盐。试验采用溶剂萃取的方法，分别对pH值、萃取溶剂、萃取溶剂用量、萃取次数等因素进行了考察。结果表明，在pH值大于12条件下，用正己烷萃取，每次萃取时水相与有机相体积比1：1，2次萃取回收率接近100％。
3.4.6.6.1 pH范围的优化
收集单针进样的馏分，旋转蒸发去除流动相，残渣用蒸馏水溶解定容至5mL后平行分成5份，每份1mL,分别调节水液的pH值为3、7、9～10、11～12、大于12，各加入1mL正己烷提取，振荡5min，静置分层，移出有机相，余水相分别经HPLC分析，计算不同pH值条件下的萃取回收率。
表6：不同pH值条件下甲基苯丙胺的萃取回收率
由表6数据可知，酸性条件下，甲基苯丙胺以成盐的形式溶解在水溶液中，完全不能被正己烷萃取出来。而碱性条件下，甲基苯丙胺以其游离态形式存在，随着pH值的增加，正己烷萃取效率不断提高，在pH大于12条件下，萃取效率最高，达到91.67％。因此确定最佳提取pH值为大于12。
3.4.6.6.2提取溶剂的选择
收集单针进样的馏分，旋转蒸发去除流动相，残渣用蒸馏水溶解定容至5mL，平行量取4份水液，每份1mL,并调节水液的pH值大于12，向4份水液中分别加入乙酸乙酯、环己烷、氯仿、正己烷，溶剂加入体积均为1mL，振荡10min，离心5min，移出有机相，余水相分别经HPLC分析。计算不同溶剂对甲基苯丙胺的萃取回收率。
表7：pH>12条件下不同溶剂对甲基苯丙胺的萃取回收率
表7中是实验条件下几种溶剂对甲基苯丙胺的萃取回收率值。当pH>12时，各溶剂对甲基苯丙胺的萃取效率依次为正己烷>环己烷>三氯甲烷>乙酸乙酯。因此选择正己烷作为实验的萃取溶剂。
3.4.6.6.3溶剂用量及萃取次数的选择
收集单针进样的馏分，旋转蒸发去除流动相，残渣用蒸馏水溶解定容至5mL后平行分成5份，每份1mL,调节溶液的pH值大于12，分别加入正己烷1mL、2mL、3mL、4mL、5mL，振荡10min，离心5min，移出有机相，向水相中再次加入正己烷1mL、2mL、3mL、4mL、5mL进行二次萃取，合并两次提取的有机相，余水相分别经HPLC分析。实验结果见表8。
表8：正己烷用量及萃取次数对甲基苯丙胺萃取回收率结果
实验结果表明，一次萃取，随着正己烷与水相体积比的不断增加，萃取效率缓慢提高，当正己烷用量达到水相体积的5倍时，萃取效率达97.8％，仍不能将水液中的甲基苯丙胺完全萃取出来。但二次萃取后，正己烷与水相体积比为1时，萃取效率已达到100％。因此，试验确定萃取时加入与水相相同体积的正己烷，重复萃取两次。
3.4.6.6.4盐酸溶液加入量的确定
采用正己烷萃取后得到的甲基苯丙胺以其原体形式存在于正己烷溶液中，需要进一步试验以得到最终制备产物甲基苯丙胺盐酸盐。试验采用向正己烷溶液中滴加盐酸溶液的方法，对盐酸溶液的加入量进行了考察。
收集单针进样的馏分，旋转蒸发去除流动相，残渣用蒸馏水溶解定容至5mL,调节溶液的pH值大于12，加入正己烷5mL，振荡10min，离心5min，移出有机相，向水相中再次加入正己烷5mL进行二次萃取，合并两次提取的正己烷溶液，并向其中加入5mL水，之后逐滴加入0.01NHCl溶液，采用差减法记录盐酸溶液的用量。
实验表明，对于单针进样收集的馏分，经过正己烷萃取后，加入2mL0.01NHCl溶液，水相的pH值可以达到4～5,得到最终制备产物甲基苯丙胺盐酸盐水溶液。
3.4.6.6.5制备产物的干燥
馏分经过正己烷提取并进一步转化成甲基苯丙胺盐酸盐后，可以旋转蒸发去除正己烷，剩余水相经过冷冻干燥或旋转蒸发均可获得最终制备产物甲基苯丙胺盐酸盐晶体。但试验证明，旋转蒸发的加热过程中极易引入杂质，使标准物质的纯度降低，因此为获取高纯度的标准物质，应使用冷冻干燥技术以获取最终的制备产物。同时实验也发现，当盐酸溶液加入过量时，经过干燥后最终获得的制备产物颜色泛黄。
冷冻干燥后获得的甲基苯丙胺标准物质通常要经过脱水去除从空气中吸附的水分及残留溶剂，甲基苯丙胺盐酸盐虽然具有很好的热稳定性，标准物质的脱水脱溶剂采用真空干燥箱室温下干燥。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无法对所有的实施方式予以穷举，凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (3)

1.用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)检测缴获甲基苯丙胺样品中甲基苯丙胺的纯度，选择甲基苯丙胺质量分数大于或等于70wt％的缴获甲基苯丙胺样品作为纯化制备甲基苯丙胺标准物质的原料；
(2)利用高效液相色谱制备甲基苯丙胺标准物质；
在步骤(1)中，包括如下步骤：
(1.1)样品溶液的制备：称取1mg甲基苯丙胺样品溶于1mL甲醇中，配成质量体积浓度为1mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于高效液相色谱分析，使用前，样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤；
(1.2)确定液相色谱条件：色谱柱为Shim-pack HRC-ODS柱，250mm×4.6mm I.D.，5μm；流动相为V甲醇：V0.05％三氟乙酸/水＝25:75，0.05％三氟乙酸/水是指三氟乙酸的体积分数为0.05％的三氟乙酸溶液，等度洗脱；紫外检测波长220nm；流速1.0mL/min；柱温为室温；
(1.3)计算标准曲线的回归方程及确定线性范围：用色谱甲醇逐级稀释市售1.0mg/mL甲基苯丙胺甲醇溶液，配制成浓度分别为1.0,0.5,0.1,0.05,0.01,0.005,0.001mg/mL的甲基苯丙胺标准溶液，按步骤(1.2)中选定的色谱条件测定，每个浓度重复3次，以平均值计算，记录甲基苯丙胺色谱峰面积，以标准品的进样浓度为横坐标，色谱峰面积值为纵坐标作图，并计算标准曲线的回归方程，标准曲线的回归方程为：Y＝1930+5×106C，R2＝1.0000；确定线性范围：甲基苯丙胺在0.001～1mg/mL的范围内线性关系良好；
(1.4)准确称取甲基苯丙胺白色晶体样品10mg于10mL容量瓶中，用色谱甲醇定容并混匀，配成质量浓度为1mg/mL的样品溶液；取该溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后进行HPLC分析，连续测定3次，记录甲基苯丙胺峰面积并计算其平均值，按峰面积外标法计算样品中的甲基苯丙胺含量；
在步骤(2)中，包括如下步骤：
(2.1)样品溶液的制备：640mg甲基苯丙胺样品置于2mL容量瓶中，加入甲醇和水至刻度线，V甲醇：V水＝1:1，超声5min，至样品全部溶解，配制成320mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于制备型高效液相色谱分离制备甲基苯丙胺标准品；使用前样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤；
(2.2)确定液相色谱条件：色谱柱为Shim-pack PRC-ODS(H)制备柱，250mm×20mmI.D.，5μm；流动相为V甲醇：V水＝5:95，并将甲醇和水充分混匀脱气后使用，等度洗脱；紫外检测波长220nm；流速10mL/min；上样量160μL；柱温为室温；收集信号阈值高于75mAu范围内的馏分；
(2.3)将收集到的馏分经减压旋蒸后得到无色透明晶体，用蒸馏水溶解并调节溶液pH为12；加入正己烷，萃取2次，每次萃取时水相与有机相体积比为1：1，合并有机相，往有机相中加入有机相体积的二分之一的水，逐滴滴加HCl溶液直至溶液pH为4-5，旋转蒸发去除正己烷，剩余水相经过冷冻干燥或旋转蒸发获得最终制备产物甲基苯丙胺盐酸盐晶体，置于真空干燥箱室温下干燥。
2.根据权利要求1所述的用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，其特征在于，在步骤(2.1)中，首先对甲基苯丙胺样品进行手性分析，并选择只含有单一异构体构型的样品作为制备原料得到相应的异构体标准物质。
3.根据权利要求2所述的用于法庭科学毒品检测的甲基苯丙胺标准物质的纯化制备方法，其特征在于，对甲基苯丙胺样品进行手性分析包括如下步骤：
(2.1.1)按体积比正己烷：异丙醇：三氟乙酸：二乙胺＝92:8:0.1:0.05配制手性分析用流动相；
(2.1.2)1mg甲基苯丙胺样品溶于5mL萃取溶剂，萃取溶剂按体积比甲醇：乙醇：流动相＝2:3:5配制 ，配成质量体积浓度为0.2mg/mL甲基苯丙胺样品溶液用于手性柱液相色谱分析；使用前样品溶液经过0.45μm微孔滤膜过滤；
(2.1.3)色谱柱为CHIRALCEL OZ-H柱，250mm×4.6mm I.D.，5μm；流动相为V正己烷：V异丙醇：V三氟乙酸：V二乙胺＝92:8:0.1:0.05，等度洗脱；紫外检测波长214nm；流速1.0mL/min；柱温35℃；
(2.1.4)试验选择的手性柱固定相为表面涂敷了手性多聚物的球形硅胶，手性多聚物为纤维素-三-(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)，甲基苯丙胺的紫外吸收图选择检测波长为214nm。
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Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110095458A (zh) * 2019-06-05 2019-08-06 公安部禁毒情报技术中心 甲基苯丙胺尿液检测试剂盒质量控制测试盘的制备方法
CN110320170B (zh) * 2019-07-01 2021-10-15 浙江华正新材料股份有限公司 一种测定PP-g-MAH材料中残余MAH单体含量的方法
CN110560002B (zh) * 2019-09-16 2022-02-25 未名环境分子诊断(广东)有限公司 一种用于污水中苯丙胺类精神活性药物被动采集的吸附材料及其制备方法
CN114689757A (zh) * 2022-04-07 2022-07-01 中国计量科学研究院 一种苯丙胺类药物头发标准物质的制备方法及应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104833743A (zh) * 2015-05-18 2015-08-12 公安部物证鉴定中心 一种液质联用分析生物样品中卡西酮、甲卡西酮、4-甲基甲卡西酮的方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160195502A1 (en) * 2014-12-31 2016-07-07 Castle Medical, LLC Method for chiral separation of methamphetamine and amphatamine enantiomers

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104833743A (zh) * 2015-05-18 2015-08-12 公安部物证鉴定中心 一种液质联用分析生物样品中卡西酮、甲卡西酮、4-甲基甲卡西酮的方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
applications on abusers" single hair analyses.《BIOMEDICAL CHROMATOGRAPHY》.2000,第14卷(第5期),
HPLC法测定甲基苯丙胺与苯丙胺;傅强 等;《四川大学学报（医学版）》;20071231;第38卷(第6期);第1025-1028页
Isolation and characterization of a newly identified impurity in methamphetamine synthesized via reductive amination of 1-phenyl-2-propanone (P2P) made from phenylacetic acid/lead (II) acetate;Steven G.Toske 等;《Drug Test. Analysis》;20150601;第9卷(第3期);第453-461页
Osama Y. Al-Dirbashi 等.Quantification of methamphetamine, amphetamine and enantiomers by semi-micro column HPLC with fluorescence detection
Positron Emission Tomography (PET) Study of the Alterations in Brain Distribution of [11C]Methamphetamine in Methamphetamine Sensitized Dog;MICHINAO MIZUGAKI 等;《Nucl.Med.Bid.》;19951231;第22卷(第6期);第804页
分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定尿液中甲基苯丙胺和苯丙胺;朱波 等;《中国卫生检验杂志》;20120630;第22卷(第6期);第1217-1220页

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