CN107466864A - 一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法 - Google Patents
一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107466864A CN107466864A CN201710938303.1A CN201710938303A CN107466864A CN 107466864 A CN107466864 A CN 107466864A CN 201710938303 A CN201710938303 A CN 201710938303A CN 107466864 A CN107466864 A CN 107466864A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dendrobium candidum
- stem
- sprouting
- vegetative propagation
- explant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000026010 Dendrobium candidum Species 0.000 title claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 24
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 19
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 9
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims abstract description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 11
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000005631 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Substances 0.000 claims description 5
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 5
- -1 0~5mg/L Substances 0.000 claims description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 3
- 229960002523 mercuric chloride Drugs 0.000 claims description 3
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 3
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 claims 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 claims 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 claims 1
- 240000004638 Dendrobium nobile Species 0.000 abstract description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 11
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 7
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 7
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 241001076416 Dendrobium tosaense Species 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- RYAHJFGVOCZDEI-UFFNCVEVSA-N Dendrobine Chemical compound C([C@H]1CC[C@@H]2[C@@]31C)N(C)[C@@H]3[C@H]1[C@@H](C(C)C)[C@@H]2C(=O)O1 RYAHJFGVOCZDEI-UFFNCVEVSA-N 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- RYAHJFGVOCZDEI-CZKZLRAZSA-N dendrobine Natural products O=C1O[C@@H]2[C@H](C(C)C)[C@H]1[C@H]1[C@@]3(C)[C@@H]2N(C)C[C@H]3CC1 RYAHJFGVOCZDEI-CZKZLRAZSA-N 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012090 tissue culture technique Methods 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明涉及石斛无性繁殖技术领域。目的是提供一种育苗周期短、幼苗形成率高、操作流程简单的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法。采用的技术方案是：通过植株筛选，从长势健壮的铁皮石斛上取茎尖或是带一个茎节的茎段作为外植体。制备培养基：以MS或者改良MS作为基本培养基，添加NAA、6‑BA、2,4‑D、琼脂粉、蔗糖、活性炭和土豆汁，调节pH值至5.8，于121℃，102.9kPa条件下灭菌30min。将外植体接种在培养基中，可直接从外植体中培育长出完整的幼苗植株。本发明育苗周期短，成本低，操作流程简单，培育的幼苗形成率高，能够保持母株的优良性状。
Description
技术领域
本发明属于石斛无性繁殖技术领域，具体涉及一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法。
背景技术
石斛，是一种药用植物，味甘淡微咸，性寒，归胃、肾、肺经，具有益胃生津、滋阴清热的功效。现代药理学研究证明石斛中所含的石斛碱是良好的退热剂、镇痛剂，具有增强免疫力、延缓衰老、抗肿瘤等作用。石斛不仅具有极高的药用价值，还具有一定的观赏价值，在国际花卉市场占据重要的地位。
我国铁皮石斛资源丰富，以野生为主，但由于人为长期无节制地开采和破坏，以及自然环境的不断改变，近年来野生铁皮石斛资源急剧减少。同时,由于石斛种子无胚乳，自然萌发率很低，在野生条件下通常要在共生菌的帮助下才能萌发。且石斛种苗分株能力弱，繁殖系数低导致繁殖速度慢，进而致使野生铁皮石斛资源面临濒危。目前铁皮石斛已被列为国家重点保护药用植物、中国珍稀濒危二级保护植物和世界二类保护植物。
随着科学技术的不断进步，近年来，组织快繁、低温贮藏和低温保存已经成为实现繁殖和资源保存的重要手段。通过采用组织培养技术对铁皮石斛进行快速繁殖是现下保护铁皮石斛野生资源的研究热点。据外文杂志《In vitro Cellular&DevelopmentalBiology--Plant》(2008，4卷3期)公开的名为“Protocorm-like body(PLB)formation andplant regeneration from the callus culture of Dendrobium candidum Wall exLindl”以及“Zhao,P.,Wu,F.,Feng,F.S.S.,Wang,W.J.J.,2008.Protocorm-like body(PLB)formation and plant regeneration from the callus culture of Dendrobiumcandidum Wall ex Lindl.In Vitro Cellular&Developmental Biology:Plant 44,178–185.”的期刊论文中报道，愈伤组织在石斛组织培养过程中生长缓慢且容易褐化，难以实现铁皮石斛的大规模繁殖。现有技术中，公告号为102499092的专利公开了一种石斛的细胞组织繁育繁殖培养方法，该方法要通过多次转接培养，制备多个不同配方的培养基，培养周期长，这样难以通过该培养方法取得相应的经济效益，不利于实现对铁皮石斛优良品种进行保育和扩繁。
发明内容
本发明的目的是提供一种育苗周期短、幼苗形成率高、操作流程简单的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法。
为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，包括以下步骤：
1)、植株筛选：在生长期1年以上的铁皮石斛植株上，取带一个茎节的茎尖或是至少带一个茎节的茎段作为外植体；
2)、制备培养基：以MS或者改良MS作为基本培养基，添加NAA 0.2～3mg/L、6-BA0.5～1mg/L、2,4-D 0～5mg/L、琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L，调节pH值至5.8，于121℃，102.9kPa条件下灭菌30min；所述的改良MS为钙离子含量加倍的MS培养基；
3)、接种外植体：将步骤1)中的茎尖和茎段洗净、消毒，然后置于培养基中培养20～40d，培养温度为25±1℃，日光灯照射，光周期为12h，光照强度为2500±300lx。
优选的，所述步骤1)中，选用生长期1-2年的铁皮石斛植株，取其茎尖带一个茎节，不带叶片，茎尖长度为0.5-1cm的茎尖或是长度为0.5～1cm带一个茎节的茎段作为外植体。
优选的，所述的外植体为取自生长期1-2年的铁皮石斛植株上，茎尖带一个茎节，不带叶片，长度为0.5-1cm的茎尖。
优选的，所述的步骤3)中，茎尖和茎段先用清水冲洗2-3小时，再分别用0.1％升汞和75％酒精消毒。
优选的，所述的土豆汁为土豆洗净、去皮，切块，用蒸馏水煮熟后用纱布过滤所得的滤液。
优选的，所述的土豆汁为土豆洗净、去皮，切成1-1.5cm见方的小方块，用蒸馏水煮沸20min，用三层纱布过滤所得的滤液。
优选的，所述的培养基为以改良MS为基本培养基，添加NAA 0.5～1.5mg/L、6-BA0.5mg/L、2,4-D 0～1.5mg/L、琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L。
优选的，所述的培养基为以改良MS为基本培养基，添加NAA 1.5mg/L、6-BA 0.5mg/L、琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L。
本发明具有以下有益效果：育苗周期短，成本低，操作流程简单，培育的幼苗形成率高，因是无性繁殖而能够保持母株的优良性状。具体来说，本发明解决了石斛组织培育过程中，组织褐化的问题，利用茎尖、茎段直接诱导形成再生幼苗，不需要转接培养，直接一步成苗，形成的幼苗在接种的40d内就可生根，大大缩短了石斛快繁的周期。同时，在省去转接培养的基础上，该培养方法节省了大量的人力和原材料，节约了育苗成本，显著提高了培育石斛的经济效益，这样能够促进企业扩大对铁皮石斛的培养规模，以实现对铁皮石斛优良品种进行保育和扩繁，也缓解了目前铁皮石斛野生资源濒临绝迹的现状。
附图说明
图1为本发明培养的铁皮石斛再生植株照片；
图2为实施例三的幼苗再生率直方图。
具体实施方式
下面具体提供优选的实施例，以使本领域技术人员更加清楚本发明的技术方案和效果。实施例中所用的材料均是取自中国科学院成都生物所保存的铁皮石斛植株。
实施例一
1)、植株筛选：选用生长期1-2年的铁皮石斛植株，分别取茎尖带一个茎节，不带叶片，茎尖的长度为0.5-1cm的茎尖，或者长度为0.5～1cm带一个茎节的茎段作为外植体。
2)、制备培养基：以改良MS，即添加二倍钙离子的MS作为基本培养基，并向培养基中添加NAA 1.5mg/L、6-BA 0.5mg/L、琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L，调节pH值至5.8，于121℃，102.9kPa条件下灭菌30min。
3)、接种外植体：将步骤1)中的茎尖、茎段置于培养基中，在组织培养间内培养20～40d，培养温度为25℃，日光灯照射，光周期为12h，光照强度为2500lx。
观察、记录茎尖、茎段在培养基上的生长情况；茎尖再生植株的形成率为84.12％，茎段的形成率为45.83％，幼苗长势分别如图1中d、e所示。
实施例二
制备土豆汁：
按比例(每1L培养基200g土豆)称取土豆，将土豆清洗干净、除去外皮，切成1～1.5cm见方的小块，将土豆块置于煮沸的蒸馏水，煮20min，再分别用0.1％升汞和75％酒精消毒。用三层纱布对煮好的土豆和蒸馏水进行过滤，收集滤液，即为土豆汁。
实施例三
1)、分别取生长期1-2年植株上的，茎尖带一个茎节，不带叶片，茎尖长度为0.5-1cm的茎尖，或者长度为0.5～1cm带一个茎节的茎段作为外植体。
2)、按照表1中的添加配比制备培养基，除表1中成分外，培养基中还包括琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L。
表1培养基中添加不同浓度的激素配比
| 培养基编号 | 基本培养基 | NAA(mg/L) | 6-BA(mg/L) | 2,4-D(mg/L) |
| 1 | MS | 2.0 | 0.5 | 0 |
| 2 | MS | 1.5 | 0.5 | 0 |
| 3 | MS | 1.0 | 0.5 | 0 |
| 4 | MS | 0.5 | 0.5 | 1.5 |
| 5 | MS | 1.0 | 0.5 | 1.5 |
| 6 | MS | 0.5 | 0.5 | 2.0 |
| 7 | MS | 0.4 | 1.0 | 5.0 |
| 8 | MS | 0.2 | 0.5 | 2.5 |
| 9 | 改良MS(2倍Ca2+) | 3.0 | 1.0 | 0 |
| 10 | 改良MS(2倍Ca2+) | 1.5 | 0.5 | 0 |
3)、分别将茎尖和茎段置于上述培养基中，培养方法与实施例一相同。
观察、记录茎尖在培养基上的生长情况，茎段和茎尖在10d萌生黄绿色嫩芽，在30d左右形成幼苗。如图1a、1b所示，少量茎段在培养基几上形成愈伤组织。茎尖和茎段的再生植株形成率如表2和图2所示。
表2茎尖和茎段在不同培养基上再生幼苗形成情况
注：表中字母是显著性差异标记使用的字母。将全部平均数从大到小依次排列，最大的平均数用a标记，依次类推。在各平均数间，凡有一个相同标记的字母的即为差异不显著，凡具有不同标记字母的即为差异显著。
由表2可见，茎尖的再生植株形成率较茎段更高，在30d左右就可长成幼苗。如图1所示，图1f为茎尖在编号7的培养基上通过萌生侧芽获得再生幼苗；图1g为茎尖在编号5的培养基上通过萌生丛生芽获得再生幼苗；图1h为再生幼苗生出的根系；图1i为茎段在编号10的培养基上诱导产生丛生芽获得再生幼苗。
Claims (8)
1.一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)、植株筛选：在生长期1年以上的铁皮石斛植株上，取带一个茎节的茎尖或是至少带一个茎节的茎段作为外植体；
2)、制备培养基：以MS或者改良MS作为基本培养基，添加NAA 0.2～3mg/L、6-BA 0.5～1mg/L、2,4-D 0～5mg/L、琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L，调节pH值至5.8，于121℃，102.9kPa条件下灭菌30min；所述的改良MS为钙离子含量加倍的MS培养基；
3)、接种外植体：将步骤1)中的茎尖和茎段洗净、消毒，然后置于培养基中培养20～40d，培养温度为25±1℃，日光灯照射，光周期为12h，光照强度为2500±300lx。
2.根据权利要求1所述的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：所述步骤1)中，选用生长期1-2年的铁皮石斛植株，取其茎尖带一个茎节，不带叶片，茎尖长度为0.5-1cm的茎尖或是长度为0.5～1cm带一个茎节的茎段作为外植体。
3.根据权利要求2所述的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：所述的外植体为取自生长期1-2年的铁皮石斛植株上，茎尖带一个茎节，不带叶片，长度为0.5-1cm的茎尖。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：所述的步骤3)中，茎尖和茎段先用清水冲洗2-3小时，再分别用0.1％升汞和75％酒精消毒。
5.根据权利要求1所述的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：所述的土豆汁为土豆洗净、去皮，切块，用蒸馏水煮熟后用纱布过滤所得的滤液。
6.根据权利要求5所述的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：所述的土豆汁为土豆洗净、去皮，切成1-1.5cm见方的小方块，用蒸馏水煮沸20min，用三层纱布过滤所得的滤液。
7.根据权利要求1所述的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：所述的培养基为以改良MS为基本培养基，添加NAA 0.5～1.5mg/L、6-BA 0.5mg/L、2,4-D 0～1.5mg/L、琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L。
8.根据权利要求4所述的铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法，其特征在于：所述的培养基为以改良MS为基本培养基，添加NAA 1.5mg/L、6-BA 0.5mg/L、琼脂粉6g/L、蔗糖30g/L、活性炭2g/L和土豆汁200g/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710938303.1A CN107466864B (zh) | 2017-09-30 | 2017-09-30 | 一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710938303.1A CN107466864B (zh) | 2017-09-30 | 2017-09-30 | 一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107466864A true CN107466864A (zh) | 2017-12-15 |
| CN107466864B CN107466864B (zh) | 2019-10-08 |
Family
ID=60605292
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710938303.1A Expired - Fee Related CN107466864B (zh) | 2017-09-30 | 2017-09-30 | 一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107466864B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109548624A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-02 | 苏州天成新农生物科技有限公司 | 多糖类液体培养基及制备方法 |
| CN117044509A (zh) * | 2023-09-21 | 2023-11-14 | 龙岩市农业科学研究所 | 一种提高铁皮石斛传统育苗腋芽萌发成苗率的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103718951A (zh) * | 2012-10-10 | 2014-04-16 | 天津市北方园林生态科学技术研究所 | 一种控制玻璃化苗的有效途径 |
| CN106342687A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-01-25 | 柳州市泓吉农业科技有限公司 | 一种铁皮石斛的快速繁殖方法 |
-
2017
- 2017-09-30 CN CN201710938303.1A patent/CN107466864B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103718951A (zh) * | 2012-10-10 | 2014-04-16 | 天津市北方园林生态科学技术研究所 | 一种控制玻璃化苗的有效途径 |
| CN106342687A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-01-25 | 柳州市泓吉农业科技有限公司 | 一种铁皮石斛的快速繁殖方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 琚淑明: "铁皮石斛茎段离体培养一次成苗技术研究", 《甘肃农业大学学报》 * |
| 袁云香等: "《金属元素与植物组织培养》", 31 July 2013 * |
| 郑黎文等: "芍药 "种生粉"离体芽培养基玻璃化苗复壮研究", 《林业科学研究》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109548624A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-02 | 苏州天成新农生物科技有限公司 | 多糖类液体培养基及制备方法 |
| CN117044509A (zh) * | 2023-09-21 | 2023-11-14 | 龙岩市农业科学研究所 | 一种提高铁皮石斛传统育苗腋芽萌发成苗率的方法 |
| CN117044509B (zh) * | 2023-09-21 | 2024-04-12 | 龙岩市农业科学研究所 | 一种提高铁皮石斛传统育苗腋芽萌发成苗率的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107466864B (zh) | 2019-10-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103348917B (zh) | 生姜一步成脱毒苗快速繁殖方法 | |
| CN106106181A (zh) | 一种白鹤芋的组培快繁方法 | |
| CN105325301A (zh) | 一种心叶小花苣苔两步成苗组培快速繁殖的方法 | |
| CN104396742B (zh) | 用五步法诱导淡黄花百合珠芽愈伤组织再分化出无菌苗的方法 | |
| CN102217550A (zh) | 红芽芋脱毒苗快繁技术及培养基组成 | |
| CN104813939A (zh) | 一种荷花再生体系的构建方法 | |
| CN102090327A (zh) | 三叶木通果种苗试管快速繁殖方法 | |
| Patil et al. | In vitro micropropagation of Lilium candidum bulb by application of multiple hormone concentrations using plant tissue culture technique | |
| CN105706933B (zh) | 一种滁菊株系离体再生的方法 | |
| CN107466864B (zh) | 一种铁皮石斛无性繁殖快速成苗的方法 | |
| CN102487829A (zh) | 一种粉用型荸荠综合脱毒快繁的方法 | |
| CN102960243A (zh) | 一种利用中国石蒜不带基盘鳞片组培快繁的方法 | |
| CN108719058B (zh) | 沙棘组培快繁培养基及组培快繁方法 | |
| CN106900548A (zh) | 一种金枝玉叶彩叶品种的育种方法 | |
| CN106165648B (zh) | 一种紫荆组培培养基及培养方法 | |
| CN106718875B (zh) | 石斛育苗方法 | |
| CN102907325B (zh) | 利用薄片培养技术生产所罗门姜黄和红艳郁金花卉苗的方法 | |
| CN105145358A (zh) | 一种黄藤组织培养快繁方法 | |
| CN105165609A (zh) | 一种高效获得非洲菊脱毒幼苗的方法 | |
| CN105594596A (zh) | 一种用于规模化生产的草莓脱毒快繁的组培方法 | |
| CN103202228B (zh) | 紫背天葵叶片一步成苗高效离体繁殖方法 | |
| KR101887221B1 (ko) | 기내배양에 의한 대나무 대량증식 방법 | |
| CN104920218A (zh) | 地皮消的繁殖方法 | |
| CN108719067A (zh) | 一种滇重楼的组培快繁方法 | |
| CN108094200A (zh) | 一种热处理结合茎尖剥离获得安祖花脱毒苗的培育方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20191008 |