CN107362061A - 一种海胆多糖护肤精华液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于化妆品技术领域,具体涉及一种海胆多糖护肤精华液,还涉及该精华液的制备方法。一种含海胆多糖护肤精华液包括下述组分:海胆多糖、增稠剂、防腐剂、蒸馏水。本发明的有益效果在于,将海胆加工废弃内脏进行酶解、分离、纯化等处理,提取分子大小为100kD~500kD的海胆多糖,再将其与其他组分相混合,制备出的护肤精华液具有无异味、高保湿、抗氧化的优点,能促进皮肤细胞的新陈代谢,保持皮肤水分及弹性。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域,具体涉及一种海胆多糖护肤精华液及其制备方法。
背景技术
海胆属于棘皮动物门(Echinodermata)海胆纲(Echinoidea),生活于岩礁、砾砂石等浅海海底。一般以褐藻、绿藻和红藻等为食,同时也杂食一些小型底栖生物如贝类、多毛类等,在我国沿海均有分布,具一定经济价值可食用的大型海胆约10种。近几年,随着海胆的关注度和认可度的提高,其需求量不断增加。
雌海胆的生殖腺即海胆黄为名贵的海产营养品,含有丰富的蛋白、多糖、脂肪酸、维生素及各种微量元素,对人体十分有益。海胆的壳是一味重要的中药,具有多种药用功效,如《本草原始》谓其有“治心疼”的作用,《中药志》主载有“软坚散结,化痰消肿,治瘰疬痰核,积痰不化,胸胁胀痛等证”的功用。加工过程中,取海胆生殖腺进行加工,海胆壳用作药用,而海胆其他内脏则作为废弃物丢弃,约占海胆总重的2~5%,我国目前海胆年捕捞量约为300吨,初步估计每年有约6~15吨海胆内脏被直接丢弃,造成了大量的资源浪费。
国内外对丢弃的海胆内脏研究不多,国内张忠玲等研究了海胆肠提取物的抗肿瘤作用,采用丙酮脱水、水提、醇沉、层析后,冷冻干燥获得多糖粉末,并证明其在体内和体外都有明显的抗肿瘤作用,此研究为海胆内脏的开发利用提供了一种可能,但是此研究使用了有机溶剂,不利于环保。本发明的目的一是为了提高海胆加工废弃物的利用率,使海洋资源得到充分的开发利用,提高渔民收入;二是为了制备出性能优异的海胆多糖护肤精华液。
发明内容
本发明的目的在于将海胆加工废弃内脏进行回收利用,生产多糖化妆品。
本发明的目的是通过如下措施来达到的:
一种含海胆多糖护肤精华液,含有以下重量配比的原料:
海胆多糖15~20份、增稠剂1~5份、防腐剂0.05~0.1份、蒸馏水70~85份。
所述的增稠剂为羧甲基纤维素、十六/十八醇、海藻酸、瓜尔胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的一种以上。
所述的防腐剂为苯氧乙醇、甲基异噻唑啉酮中的一种。
所述海胆多糖通过以下步骤制得:
a) 原料收集:人工取海胆黄时,从海胆口部剪开海胆壳,移除海胆嘴,暴露出海胆内部结构,使用工具将海胆内部结构全部挖出,放入清水中,将海胆黄洗净后捞出,海胆废弃物在清水中洗净泥沙后,进行收集;
b) 匀浆:将收集的海胆加工废弃物使用胶体磨进行匀浆,获得匀浆液;
c) 匀质:为能够增加酶解作用位点而使酶解反应更充分,将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中,设定压力60mpa,收集匀质液;
d) 第一次酶解:使用一种或两种蛋白酶对匀质液进行酶解,按照说明书进行温度及料液比设定,酶解至无明显残渣,灭酶,即为第一次酶解液;
e) 第二次次酶解:使用脂肪酶对步骤d)的第一次酶解液继续酶解,按照说明书进行温度及料液比设定,灭酶,即为第二次酶解液;
f) 提取:将第二次酶解液与15~20%Na2CO3溶液等比例混合,使用HSCT-G超声波提取设备,设定提取温度50℃,提取30~60min,获得超声提取液;
g) 过滤:使用200目尼龙网对超声提取液进行过滤,保留滤出液;
h) 超滤:使用截留量为500kD中空纤维超滤膜对步骤g)中的滤出液进行超滤,添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中,至超滤液体积为原滤出液体积1/5~1/2时,停止超滤,保留滤出液;
i) 浓缩:使用截留量为100kD中空纤维超滤膜对步骤h)中的滤出液进行浓缩,以除去大部分氨基酸和脂肪酸,添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中,浓缩至其体积的1/20~1/10时停止浓缩,获得浓缩液;
j)干燥:冷冻干燥;
k) 纯化:将冷冻干燥干粉配置成100mg/ml的水溶液,上平衡好的DEAE SepharoseFast Flow离子交换柱,进行蒸馏水洗脱,后用0~1.0mol/L的NaCl梯度洗脱,流速20ml/min,对120min之后的洗脱液进行收集,收集至150min止,获得收集液;
l) 除盐:使用截留量为10kD中空纤维超滤膜对步骤K)中的收集液进行超滤浓缩及脱盐,向超滤液中添加其2~5倍体积蒸馏水,浓缩至原体积1/3~1/2时止;
m)干燥:冷冻干燥。
一种海胆多糖护肤精华液的制备方法,包括以下步骤:
n)将海胆多糖、增稠剂使用蒸馏水充分溶胀,搅拌加温至80℃,保温备用;
o)将步骤n)中的混合物转入真空匀质乳化机中,转速为2000~2800r/min,温度70℃,匀质30~60min,备用;
p)待步骤o)中的匀质乳冷却至50℃时,加入防腐剂,保持温度为50℃,2000~2800r/min,匀质30~60min,即为海胆多糖护肤精华液。
本发明反应条件温和可控,便于大规模工业化生产,获得的海胆废弃内脏多糖分子量为100kD~500kD,致敏性低。使用总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒对其抗多糖氧化能力进行了检测,其抗氧化能力为15.20U/ml,表明海胆多糖存在一定的抗氧化能力。使用苯酚-硫酸法对多糖成分进行检测,结果其多糖肽含量为93.4%,纯度较高。
本发明的有益效果在于,将海胆加工废弃内脏高值化再利用,不使用有机溶剂,生产出的海胆多糖护肤精华液具有无异味、高保湿、抗氧化的优点,具有很好的护肤效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明,以便本领域的技术人员更了解本发明,但并不因此限制本发明。
实施例1
步骤一:海胆多糖制备
于养殖场厂购买马粪海胆500kg,人工取海胆黄时,从海胆口部剪开海胆壳,移除海胆嘴,暴露出海胆内部结构,使用工具将海胆内部结构全部挖出,放入清水中,将海胆黄洗净后捞出,海胆废弃物在清水中洗净泥沙后,进行收集,称量共17.3kg。对其使用胶体磨进行匀浆处理,获得匀浆液17.2kg。将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中,设定压力60mpa,收集到匀质液17.2kg。向匀质液中添加蒸馏水20kg,转入酶解罐,加入诺维信风味蛋白酶粉150g,50℃原始pH值酶解24h,90℃灭酶10min,降温至50℃时加入诺维信碱性内切酶粉150g,酶解24h,90℃灭酶10min。降温至45℃时加入诺维信435脂肪酶150g,酶解24h,90℃灭酶10min,加入37.2kg浓度为20%的Na2CO3溶液,使用HSCT-G超声波提取设备,设定提取温度50℃,提取30min, 使用200目尼龙网对提取液进行过滤,保留滤出液71.3L,使用截留量为500kD中空纤维超滤膜对过滤液进行超滤,添加142.6L蒸馏水到超滤液中,至超滤液体积为16L时停止超滤,保留滤出液197.6L。使用截留量为100kD中空纤维超滤膜对197.6L滤出液进行浓缩,以除去Na2CO3和大部分氨基酸,向浓缩液中加入蒸馏水395.2L,浓缩至12L时停止浓缩,获得浓缩液,冷冻干燥获得干粉217.6g,加蒸馏水2176ml配置成100mg/ml的水溶液,上平衡好的DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱,流速20ml/min,加入蒸馏水500ml,后用0~1.0mol/L的NaCl梯度洗脱,流速20ml/min,对120min之后的洗脱液进行收集,收集至150min止,获得收集液600ml,使用截留量为10kD中空纤维超滤膜进行浓缩脱盐,加入蒸馏水1.5L,浓缩至200ml停止超滤,获得浓缩液,对其进行冷冻干燥,获得海胆多糖干粉121.5g。
步骤二:海胆多糖护肤精华液的制备方法
上述海胆多糖干粉100g、十六/十八醇 10g、海藻酸10g、苯氧乙醇0.25g、蒸馏水400g。
将海胆多糖、十六/十八醇、海藻酸、蒸馏水加入不锈钢容器内搅拌加温至80℃,保温24h溶胀备用,将混合物转入真空匀质乳化机中,转速为2500r/min,温度70℃,匀质40min,待其冷却至40℃时,加入苯氧乙醇,保持温度为40℃,2500r/min,匀质30min,既为海胆多糖护肤精华液。
对比例1
与实施例1相比,海胆多糖以黄芪多糖为替换,其余同实施例1,制备护肤精华液。
对比例2
与实施例1相比,海胆多糖以透明质酸为替换,其余同实施例1,制备护肤精华液。
对比例3
与实施例1相比,未加入海胆多糖,其余同实施例1,制备护肤精华液。
实验例1
随机选取女性志愿者100名,年龄20~50岁,随机分成4组,每组25人,实验期间,停用任何外物或化妆品,将实施例和对比例分别涂于不同组志愿者面部,每天一次,连涂8周,采用硅橡胶覆膜方法复制受试者的脸颊及眼角部位的皮肤皱纹,肉眼观察,按照规定的评估标准对皱纹改善进行评分,评分小组由2人组成,采用双盲法。
皱纹深度改善人数为使用前后皱纹抚平的使用者。
皱纹深度改善%=(使用前皱纹深度-使用后皱纹深度)/使用前皱纹深度×100%
结果如下表:
组别 | 受试人数 | 皱纹深度改善人数 | 皱纹深度改善% |
实施例1 | 25 | 23 | 41.4 |
对比例1 | 25 | 14 | 15.9 |
对比例2 | 25 | 20 | 30.4 |
对比例3 | 25 | 5 | 5.6 |
从以上比较中可以看出,本发明的护肤精华液抗皱纹效果最显著,明显优于3例对比例。
实施例2
步骤一:海胆多糖制备
于养殖场厂购买光棘球海胆500kg,人工取海胆黄时,从海胆口部剪开海胆壳,移除海胆嘴,暴露出海胆内部结构,使用工具将海胆内部结构全部挖出,放入清水中,将海胆黄洗净后捞出,海胆废弃物在清水中洗净泥沙后,进行收集,称量共20.8kg。对其使用胶体磨进行匀浆处理,获得匀浆液20.7kg。将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中,设定压力60mpa,收集到匀质液20.6kg。向匀质液中添加蒸馏水21kg,转入酶解罐,加入诺维信风味蛋白酶粉150g,50℃原始pH值酶解24h,90℃灭酶10min,降温至50℃时加入诺维信碱性内切酶粉150g,酶解24h,90℃灭酶10min。降温至45℃时加入诺维信435脂肪酶150g,酶解24h,90℃灭酶10min,加入42kg浓度为20%的Na2CO3溶液,使用HSCT-G超声波提取设备,设定提取温度50℃,提取50min, 使用200目尼龙网对提取液进行过滤,保留滤出液80.3L,使用截留量为500kD中空纤维超滤膜对过滤液进行超滤,添加160.6L蒸馏水到超滤液中,至超滤液体积为18L时停止超滤,保留滤出液222.5L。使用截留量为100kD中空纤维超滤膜对222.5L滤出液进行浓缩,以除去Na2CO3和大部分氨基酸,向浓缩液中加入蒸馏水445L,浓缩至12L时停止浓缩,获得浓缩液,冷冻干燥获得干粉276.5g,加蒸馏水2765ml配置成100mg/ml的水溶液,上平衡好的DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱,流速20ml/min,加入蒸馏水500ml,后用0~1.0mol/L的NaCl梯度洗脱,流速20ml/min,对120min之后的洗脱液进行收集,收集至150min止,获得收集液600ml,使用截留量为10kD中空纤维超滤膜进行浓缩脱盐,加入蒸馏水1.5L,浓缩至200ml停止超滤,获得浓缩液,对其进行冷冻干燥,获得海胆多糖干粉126.5g。
步骤二:海胆多糖护肤精华液的制备方法
上述海胆多糖干粉100g、瓜尔胶5g、聚乙二醇15g、甲基异噻唑啉酮0.3g、蒸馏水400g。
将海胆多糖、瓜尔胶、聚乙二醇、蒸馏水加入不锈钢容器内搅拌加温至80℃,保温24h溶胀备用,将混合物转入真空匀质乳化机中,转速为2800r/min,温度70℃,匀质40min,待其冷却至40℃时,加入苯氧乙醇,保持温度为40℃,2800r/min,匀质40min,既为海胆多糖护肤精华液。
对比例4
与实施例2相比,海胆多糖以黄芪多糖为替换,其余同实施例2,制备护肤精华液。
对比例5
与实施例2相比,海胆多糖以透明质酸为替换,其余同实施例2,制备护肤精华液。
对比例6
与实施例2相比,未加入海胆多糖,其余同实施例2,制备护肤精华液。
实验例2
随机选取女性志愿者100名,年龄20~50岁,随机分成4组,每组25人,实验期间,停用任何外物或化妆品,将实施例和对比例分别涂于不同组志愿者面部,每天一次,连涂8周,采用硅橡胶覆膜方法复制受试者的脸颊及眼角部位的皮肤皱纹,肉眼观察,按照规定的评估标准对皱纹改善进行评分,评分小组由2人组成,采用双盲法。
皱纹深度改善人数为使用前后皱纹抚平的使用者。
皱纹深度改善%=(使用前皱纹深度-使用后皱纹深度)/使用前皱纹深度×100%
结果如下表:
组别 | 受试人数 | 皱纹深度改善人数 | 皱纹深度改善% |
实施例2 | 25 | 19 | 28.9 |
对比例4 | 25 | 9 | 15.6 |
对比例5 | 25 | 13 | 19.4 |
对比例6 | 25 | 3 | 3.1 |
从以上比较中可以看出,本发明的护肤精华液抗皱纹效果最显著,明显优于3例对比例。
Claims (2)
1.一种海胆多糖护肤精华液,其特征是:
海胆多糖15~20份、增稠剂1~5份、防腐剂0.05~0.1份、蒸馏水70~85份;
所述海胆多糖通过以下步骤制得:
a) 原料收集:人工取海胆黄时,从海胆口部剪开海胆壳,移除海胆嘴,暴露出海胆内部结构,使用工具将海胆内部结构全部挖出,放入清水中,将海胆黄洗净后捞出,海胆废弃物在清水中洗净泥沙后,进行收集;
b) 匀浆:将收集的海胆加工废弃物使用胶体磨进行匀浆,获得匀浆液;
c) 匀质:为能够增加酶解作用位点而使酶解反应更充分,将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中,设定压力60mpa,收集匀质液;
d) 第一次酶解:使用一种或两种蛋白酶对匀质液进行酶解,按照说明书进行温度及料液比设定,酶解至无明显残渣,灭酶,即为第一次酶解液;
e) 第二次次酶解:使用脂肪酶对步骤d)的第一次酶解液继续酶解,按照说明书进行温度及料液比设定,灭酶,即为第二次酶解液;
f) 提取:将第二次酶解液与15~20%Na2CO3溶液等比例混合,使用HSCT-G超声波提取设备,设定提取温度50℃,提取30~60min,获得超声提取液;
g) 过滤:使用200目尼龙网对超声提取液进行过滤,保留滤出液;
h) 超滤:使用截留量为500kD中空纤维超滤膜对步骤g)中的滤出液进行超滤,添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中,至超滤液体积为原滤出液体积1/5~1/2时,停止超滤,保留滤出液;
i) 浓缩:使用截留量为100kD中空纤维超滤膜对步骤h)中的滤出液进行浓缩,以除去大部分氨基酸和脂肪酸,添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中,浓缩至其体积的1/20~1/10时停止浓缩,获得浓缩液;
j)干燥:冷冻干燥;
k) 纯化:将冷冻干燥干粉配置成100mg/ml的水溶液,上平衡好的DEAE SepharoseFast Flow离子交换柱,进行蒸馏水洗脱,后用0~1.0mol/L的NaCl梯度洗脱,流速20ml/min,对120min之后的洗脱液进行收集,收集至150min止,获得收集液;
l) 除盐:使用截留量为10kD中空纤维超滤膜对步骤K)中的收集液进行超滤浓缩及脱盐,向超滤液中添加其2~5倍体积蒸馏水,浓缩至原体积1/3~1/2时止;
m)干燥:冷冻干燥;
一种海胆多糖护肤精华液的制备方法,包括以下步骤:
n)将海胆多糖、增稠剂使用蒸馏水充分溶胀,搅拌加温至80℃,保温备用;
o)将步骤n)中的混合物转入真空匀质乳化机中,转速为2000~2800r/min,温度40℃,匀质30~60min,备用;
p)待步骤o)中的匀质乳冷却至50℃时,加入防腐剂,保持温度为50℃,2000~2800r/min,匀质30~60min,即为海胆多糖护肤精华液。
2.根据权利要求1所述的一种海胆多糖护肤精华液及其制备方法,所述的增稠剂为羧甲基纤维素、十六/十八醇、海藻酸、瓜尔胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的一种以上;
所述的防腐剂为苯氧乙醇、甲基异噻唑啉酮中的一种。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WW01 | Invention patent application withdrawn after publication | ||
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Application publication date: 20171121 |