CN107375026A - 一种海胆多糖乳液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种海胆多糖乳液，还涉及该乳液的制备方法。一种含海胆多糖乳液包括下述组分：海胆多糖、橄榄油、乳化剂、保湿剂、增稠剂、防腐剂、蒸馏水。本发明的有益效果在于，将海胆加工废弃内脏进行酶解、分离、纯化等处理，提取分子大小为1kD～10kD的海胆多糖，具有无异味、水溶性好、易于被皮肤吸收的特点，再将其与其他组分相混合，制备出的乳液具有无异味、易吸收、抗氧化的优点，能促进皮肤细胞的新陈代谢，保持皮肤水分及弹性。

Description

一种海胆多糖乳液及其制备方法
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种海胆多糖乳液及其制备方法。
背景技术
海胆属于棘皮动物门（Echinodermata）海胆纲(Echinoidea)，是一种常见的无脊椎动物，我国的海胆资源比较丰富，主要分布在黄渤海沿岸、浙江、福建沿海，包括8目，27科，69属共100多种，常见的有球海胆科、刻肋海胆科、长海胆科、毒棘海胆科和蛛网海胆科等，其中具一定经济价值可食用的大型海胆约10种。近几年，随着海胆的关注度和认可度的提高，其需求量不断增加。
雌海胆的生殖腺即海胆黄为名贵的海产营养品，含有丰富的蛋白、多糖、脂肪酸、维生素及各种微量元素，对人体十分有益。海胆的壳是一味重要的中药，具有多种药用功效，如《本草原始》谓其有“治心疼”的作用，《中药志》主载有“软坚散结，化痰消肿，治瘰疬痰核,积痰不化,胸胁胀痛等证”的功用。加工过程中，取海胆生殖腺进行加工，海胆壳用作药用，而海胆其他内脏则作为废弃物丢弃，约占海胆总重的2～5%，我国目前海胆年捕捞量约为300吨，初步估计每年有约6～15吨海胆内脏被直接丢弃，造成了大量的资源浪费。
国内外对丢弃的海胆内脏研究不多，国内张忠玲等研究了海胆肠提取物的抗肿瘤作用，采用丙酮脱水、水提、醇沉、层析后，冷冻干燥获得多糖粉末，并证明其在体内和体外都有明显的抗肿瘤作用，此研究为海胆内脏的开发利用提供了一种可能，但是此研究使用了有机溶剂，不利于环保。本发明的目的一是为了提高海胆加工废弃物的利用率，使海洋资源得到充分的开发利用，提高渔民收入；二是为了制备出性能优异的海胆多糖乳液。
发明内容
本发明的目的在于将海胆加工废弃内脏进行回收利用，生产多糖化妆品。
本发明的目的是通过如下措施来达到的：
一种含海胆多糖乳液，含有以下重量配比的原料：
海胆多糖2～5份、橄榄油10～15份、乳化剂1～5份、保湿剂1～5份、增稠剂1～5份、防腐剂0.05～0.1份、蒸馏水70～85份。
所述乳化剂为异硬脂酰基乳腺乳酸钠、16-18醇醚-20、PEG-7聚氧乙烯橄榄油甘油酯、PEG-4聚氧乙烯橄榄油甘油酯、月桂酸、棕榈酸、甘油、丙二醇、乙二醇、山梨醇中的一种以上。
所述的保湿剂为透明质酸、氢化聚异丁烯、月桂醇、鲸醇、硬脂醇、库拉索芦荟凝胶中的一种以上。
所述的增稠剂为羧甲基纤维素、十六/十八醇、海藻酸、瓜尔胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的一种以上。
所述的防腐剂为苯氧乙醇、甲基异噻唑啉酮中的一种。
所述海胆多糖通过以下步骤制得：
a) 原料收集：人工取海胆黄时，从海胆口部剪开海胆壳，移除海胆嘴，暴露出海胆内部结构，使用工具将海胆内部结构全部挖出，放入清水中，将海胆黄洗净后捞出，海胆废弃物在清水中洗净泥沙后，进行收集；
b) 匀浆：将收集的海胆加工废弃物使用胶体磨进行匀浆，获得匀浆液；
c) 匀质：为能够增加酶解作用位点而使酶解反应更充分，将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中，设定压力60mpa，收集匀质液；
d) 第一次酶解：使用一种或两种蛋白酶对匀质液进行酶解，按照说明书进行温度及料液比设定，酶解至无明显残渣，灭酶，即为第一次酶解液；
e) 第二次次酶解：使用脂肪酶对步骤d)的第一次酶解液继续酶解，按照说明书进行温度及料液比设定，灭酶，即为第二次酶解液；
f) 提取：将第二次酶解液与15～20%Na2CO3溶液等比例混合，使用HSCT-G超声波提取设备，设定提取温度50℃，提取30～60min，获得超声提取液；
g) 过滤：使用200目尼龙网对超声提取液进行过滤，保留滤出液；
h) 超滤：使用截留量为10kD中空纤维超滤膜对步骤g）中的滤出液进行超滤，添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中，至超滤液体积为原滤出液体积1/5～1/2时，停止超滤，保留滤出液；
i) 浓缩：使用截留量为1kD中空纤维超滤膜对步骤h）中的滤出液进行浓缩，以除去大部分氨基酸和脂肪酸，添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中，浓缩至其体积的1/20～1/10时停止浓缩，获得浓缩液；
j）干燥：冷冻干燥；
k） 纯化：将冷冻干燥干粉配置成100mg/ml的水溶液，上平衡好的DEAE SepharoseFast Flow离子交换柱，进行蒸馏水洗脱，后用0～1.0mol/L的NaCl梯度洗脱，流速10ml/min，对60min之后的洗脱液进行收集，收集至90min止，获得收集液；
l) 除盐：使用截留量为1kD中空纤维超滤膜对步骤K）中的收集液进行超滤浓缩及脱盐，向超滤液中添加其2～5倍体积蒸馏水，浓缩至原体积1/10～1/5时止；
m）干燥：冷冻干燥。
一种海胆多糖乳液的制备方法，包括以下步骤：
n)将海胆多糖、保湿剂、增稠剂使用蒸馏水充分溶胀，加入乳化剂、蒸馏水搅拌加温至80℃，保温备用；
o)将步骤n）中的混合物转入真空匀质乳化机中，转速为2000～2800r/min，温度70℃，匀质30～60min，备用；
p）待步骤o）中的匀质乳冷却至40℃时，加入橄榄油、防腐剂，保持温度为40℃，2000～2800r/min，匀质30～60min，既为海胆多糖乳液。
本发明反应条件温和可控，便于大规模工业化生产，获得的海胆废弃内脏多糖分子量为1kD～10kD，致敏性低。使用总抗氧化能力（T-AOC）检测试剂盒对其抗多糖氧化能力进行了检测，其抗氧化能力为19.07U/ml，表明海胆多糖存在一定的抗氧化能力。使用苯酚-硫酸法对多糖成分进行检测，结果其多糖肽含量为89.3%，纯度较高。
本发明除采用海胆多糖作为原料，还采用橄榄油作为原料，因为橄榄油含有的亚油酸较少，不易氧化，不易发生腐败，且含有丰富的脂肪酸和维生素及酚类抗氧化物质，具有较好的护肤功效。
本发明的有益效果在于，将海胆加工废弃内脏高值化再利用，生产出的海胆多糖乳液具有无异味、低致敏、高保湿、抗氧化的优点，具有很好的护肤效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。
实施例1
步骤一：海胆多糖制备
于养殖场厂购买紫海胆500kg，人工取海胆黄时，从海胆口部剪开海胆壳，移除海胆嘴，暴露出海胆内部结构，使用工具将海胆内部结构全部挖出，放入清水中，将海胆黄洗净后捞出，海胆废弃物在清水中洗净泥沙后，进行收集，称量共16.8kg。对其使用胶体磨进行匀浆处理，获得匀浆液16.7kg。将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中，设定压力60mpa，收集到匀质液16.5kg。向匀质液中添加蒸馏水20kg，转入酶解罐，加入诺维信风味蛋白酶粉100g，50℃原始pH值酶解12h，90℃灭酶10min，降温至50℃时加入诺维信碱性内切酶粉100g，酶解5h，90℃灭酶10min。降温至45℃时加入诺维信435脂肪酶50g,酶解10h，90℃灭酶10min，加入32.5kg浓度为20%的Na2CO3溶液，使用HSCT-G超声波提取设备，设定提取温度50℃，提取30min, 使用200目尼龙网对提取液液进行过滤，保留滤出液60.2L，使用截留量为10kD中空纤维超滤膜对过滤液进行超滤，添加120.4L蒸馏水到超滤液中，至超滤液体积为15L时停止超滤，保留滤出液165.6L。使用截留量为1kD中空纤维超滤膜对165.6L滤出液进行浓缩，以除去Na2CO3和大部分氨基酸，向浓缩液中加入蒸馏水331.2L，浓缩至9L时停止浓缩，获得浓缩液，冷冻干燥获得干粉112.9g，加蒸馏水1129ml配置成100mg/ml的水溶液，上平衡好的DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱，流速10ml/min，加入蒸馏水400ml，后用0～1.0mol/L的NaCl梯度洗脱，流速10ml/min，对60min之后的洗脱液进行收集，收集至90min止，获得收集液300ml，使用截留量为1kD中空纤维超滤膜进行浓缩脱盐，加入蒸馏水1.5L，浓缩至60ml停止超滤，获得浓缩液，对其进行冷冻干燥，获得海胆多糖干粉13.7g。
步骤二：海胆多糖乳液的制备方法
上述海胆多糖干粉100g、橄榄油500g、16-18醇醚-20 30g、月桂酸30g、鲸醇10g、库拉索芦荟凝胶40g、十六/十八醇 50g、海藻酸10g、苯氧乙醇3g、蒸馏水4kg。
将海胆多糖、16-18醇醚-20、月桂酸、鲸醇、库拉索芦荟凝胶、十六/十八醇、海藻酸、蒸馏水加入不锈钢容器内搅拌加温至80℃，保温备用，将混合物转入真空匀质乳化机中，转速为2500r/min，温度70℃，匀质40min，待其冷却至40℃时，加入橄榄油、苯氧乙醇，保持温度为40℃，2500r/min，匀质30min，既为海胆多糖乳液。
对比例1
与实施例1相比，海胆多糖干粉以黄芪多糖为替换，其余同实施例1，制备乳液。
对比例2
与实施例1相比，未加入橄榄油，其余同实施例1，制备乳液。
对比例3
与实施例1相比，海胆多糖干粉以黄芪多糖为替换，未加入橄榄油，其余同实施例1，制备乳液。
实验例1
随机选取女性志愿者100名，年龄20～50岁，随机分成4组，每组25人，实验期间，停用任何外物或化妆品，将实施例和对比例分别涂于不同组志愿者面部，每天一次，连涂8周，采用硅橡胶覆膜方法复制受试者的脸颊及眼角部位的皮肤皱纹，肉眼观察，按照规定的评估标准对皱纹改善进行评分，评分小组由2人组成，采用双盲法。
皱纹深度改善人数为使用前后皱纹抚平的使用者。
皱纹深度改善%=（使用前皱纹深度-使用后皱纹深度）/使用前皱纹深度×100%
结果如下表：
组别 受试人数 皱纹深度改善人数 皱纹深度改善%
实施例1 25 23 30.4
对比例1 25 14 17.8
对比例2 25 15 13.9
对比例3 25 6 6.5
从以上比较中可以看出，本发明的乳液抗皱纹效果最显著，明显优于3例对比例。
实施例2
步骤一：海胆多糖制备
于养殖场厂购买马粪海胆600kg，人工取海胆黄时，从海胆口部剪开海胆壳，移除海胆嘴，暴露出海胆内部结构，使用工具将海胆内部结构全部挖出，放入清水中，将海胆黄洗净后捞出，海胆废弃物在清水中洗净泥沙后，进行收集，称量共23.2kg。对其使用胶体磨进行匀浆处理，获得匀浆液23.1kg。将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中，设定压力60mpa，收集到匀质液23kg。向匀质液中添加蒸馏水23kg，转入酶解罐，加入诺维信风味蛋白酶粉100g，50℃原始pH值酶解14h，90℃灭酶10min，降温至50℃时加入诺维信碱性内切酶粉100g，酶解10h，90℃灭酶10min。降温至45℃时加入诺维信435脂肪酶50g,酶解8h，90℃灭酶10min，加入46kg浓度为20%的Na2CO3溶液，使用HSCT-G超声波提取设备，设定提取温度50℃，提取60min, 使用200目尼龙网对提取液进行过滤，保留滤出液90L，使用截留量为10kD中空纤维超滤膜对过滤液进行超滤，添加180L蒸馏水到超滤液中，至超滤液体积为20L时停止超滤，保留滤出液250L。使用截留量为1kD中空纤维超滤膜对250L滤出液进行浓缩，以除去Na2CO3和大部分氨基酸，向浓缩液中加入蒸馏水500L，浓缩至13L时停止浓缩，获得浓缩液，冷冻干燥获得干粉152.2g，加蒸馏水1522ml配置成100mg/ml的水溶液，上平衡好的DEAESepharose Fast Flow离子交换柱，流速10ml/min，加入蒸馏水450ml，后用0～1.0mol/L的NaCl梯度洗脱，流速10ml/min，对60min之后的洗脱液进行收集，收集至90min止，获得收集液300ml，使用截留量为1kD中空纤维超滤膜进行浓缩脱盐，加入蒸馏水1.5L，浓缩至60ml停止超滤，获得浓缩液，对其进行冷冻干燥，获得海胆多糖干粉16.9g。
步骤二：海胆多糖乳液的制备方法
上述海胆多糖干粉100g、橄榄油600g、甘油50g、棕榈酸40g、透明质酸30g、氢化聚异丁烯50g、库拉索芦荟凝胶50g、瓜尔胶60g、聚乙二醇30g、甲基异噻唑啉酮3g、蒸馏水4.25kg。
将海胆多糖、甘油、棕榈酸、鲸醇、透明质酸、氢化聚异丁烯、库拉索芦荟凝胶、瓜尔胶、聚乙二醇、蒸馏水加入不锈钢容器内搅拌加温至80℃，保温备用，将混合物转入真空匀质乳化机中，转速为2800r/min，温度70℃，匀质40min，待其冷却至40℃时，加入橄榄油、甲基异噻唑啉酮，保持温度为40℃，2800r/min，匀质30min，既为海胆多糖乳液。
对比例4
与实施例2相比，海胆多糖干粉以黄芪多糖为替换，其余同实施例2，制备乳液。
对比例5
与实施例2相比，未加入橄榄油，其余同实施例2，制备乳液。
对比例6
与实施例2相比，海胆多糖干粉以黄芪多糖为替换，未加入橄榄油，其余同实施例2，制备乳液。
实验例2
随机选取女性志愿者100名，年龄20～50岁，随机分成4组，每组25人，实验期间，停用任何外物或化妆品，将实施例和对比例分别涂于不同组志愿者面部，每天一次，连涂8周，采用硅橡胶覆膜方法复制受试者的脸颊及眼角部位的皮肤皱纹，肉眼观察，按照规定的评估标准对皱纹改善进行评分，评分小组由2人组成，采用双盲法。
皱纹深度改善人数为使用前后皱纹抚平的使用者。
皱纹深度改善%=（使用前皱纹深度-使用后皱纹深度）/使用前皱纹深度×100%
结果如下表：
组别 受试人数 皱纹深度改善人数 皱纹深度改善%
实施例2 25 21 28.7
对比例4 25 16 19.6
对比例5 25 14 15.4
对比例6 25 7 7.2
从以上比较中可以看出，本发明的乳液抗皱纹效果最显著，明显优于3例对比例。

Claims (2)

1.一种海胆多糖乳液，其特征是：
海胆多糖2～5份、橄榄油10～15份、乳化剂1～5份、保湿剂1～5份、增稠剂1～5份、防腐剂0.05～0.1份、蒸馏水70～85份；
所述海胆多糖通过以下步骤制得：
a) 原料收集：人工取海胆黄时，从海胆口部剪开海胆壳，移除海胆嘴，暴露出海胆内部结构，使用工具将海胆内部结构全部挖出，放入清水中，将海胆黄洗净后捞出，海胆废弃物在清水中洗净泥沙后，进行收集；
b) 匀浆：将收集的海胆加工废弃物使用胶体磨进行匀浆，获得匀浆液；
c) 匀质：为能够增加酶解作用位点而使酶解反应更充分，将匀浆液转入高压匀质机GJJ-0.1/100中，设定压力60mpa，收集匀质液；
d) 第一次酶解：使用一种或两种蛋白酶对匀质液进行酶解，按照说明书进行温度及料液比设定，酶解至无明显残渣，灭酶，即为第一次酶解液；
e) 第二次次酶解：使用脂肪酶对步骤d)的第一次酶解液继续酶解，按照说明书进行温度及料液比设定，灭酶，即为第二次酶解液；
f) 提取：将第二次酶解液与15～20%Na2CO3溶液等比例混合，使用HSCT-G超声波提取设备，设定提取温度50℃，提取30～60min，获得超声提取液；
g) 过滤：使用200目尼龙网对超声提取液进行过滤，保留滤出液；
h) 超滤：使用截留量为10kD中空纤维超滤膜对步骤g）中的滤出液进行超滤，添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中，至超滤液体积为原滤出液体积1/5～1/2时，停止超滤，保留滤出液；
i) 浓缩：使用截留量为1kD中空纤维超滤膜对步骤h）中的滤出液进行浓缩，以除去大部分氨基酸和脂肪酸，添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中，浓缩至其体积的1/20～1/10时停止浓缩，获得浓缩液；
j）干燥：冷冻干燥；
k） 纯化：将冷冻干燥干粉配置成100mg/ml的水溶液，上平衡好的DEAE SepharoseFast Flow离子交换柱，进行蒸馏水洗脱，后用0～1.0mol/L的NaCl梯度洗脱，流速10ml/min，对60min之后的洗脱液进行收集，收集至90min止，获得收集液；
l) 除盐：使用截留量为1kD中空纤维超滤膜对步骤K）中的收集液进行超滤浓缩及脱盐，向超滤液中添加其2～5倍体积蒸馏水，浓缩至原体积1/10～1/5时止；
m）干燥：冷冻干燥；
一种海胆多糖乳液制备方法，包括以下步骤：
n)将海胆多糖、保湿剂、增稠剂使用蒸馏水充分溶胀，加入乳化剂、蒸馏水搅拌加温至80℃，保温备用；
o)将步骤n）中的混合物转入真空匀质乳化机中，转速为2000～2800r/min，温度70℃，匀质30～60min，备用；
p）待步骤o）中的匀质乳冷却至40℃时，加入橄榄油、防腐剂，保持温度为40℃，2000～2800r/min，匀质30～60min，既为海胆多糖乳液。
2.根据权利要求1所述的一种海胆多糖乳液及其制备方法，所述乳化剂为异硬脂酰基乳腺乳酸钠、16-18醇醚-20、PEG-7聚氧乙烯橄榄油甘油酯、PEG-4聚氧乙烯橄榄油甘油酯、月桂酸、棕榈酸、甘油、丙二醇、乙二醇、山梨醇中的一种以上；
所述的保湿剂为透明质酸、氢化聚异丁烯、月桂醇、鲸醇、硬脂醇、库拉索芦荟凝胶中的一种以上；
所述的增稠剂为羧甲基纤维素、十六/十八醇、海藻酸、瓜尔胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的一种以上；
所述的防腐剂为苯氧乙醇、甲基异噻唑啉酮中的一种。
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