CN107290400B - 测定全血样本中特定成分的组合物和电化学测试条 - Google Patents
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Abstract
一种测定全血样本中特定成分或所述特定成分发生反应后的中间产物的组合物和电化学测试条，包括氧化脱氢酶、表面活性剂和电子媒介体，所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物。本发明所述组合物及其测试条测定特定成分能产生明显的电流梯度且测试的背景电流较低，让检测结果更为准确。
Description
技术领域
本发明涉及医学检测领域，特别涉及测定全血样本中特定成分的组合物、电化学测试条、制备测试条的方法和检测全血样本中特定成分的方法。
背景技术
电化学试剂条检测法能用少量的样品在很短的时间内获得被检测样品的多种化学和生物学信息。作为筛选试验被广泛的应用于医学检验、食品安全检测等的判断。例如，利用电化学测试条检测血样中的葡萄糖、总胆固醇、血红蛋白、尿酸含量等。
电化学试剂条检测法包括“吸”与“读”两个检测步骤。根据不同的检测项目，反应试剂被预先干燥固定在电化学试剂条的电极表面。检测时，将试剂条插入测试仪器后，再将需检测的液体样本直接加到试剂条的吸样孔中，通过虹吸原理将其吸入，被测物质与试剂条中预先处理的试剂发生生物化学反应，仪器向试剂条提供工作电压，并起到收集试剂条表面反应信号、进行数据采集和处理并读出结果，从而对被测物进行定量分析。在其检测过程中电子媒介体(mediator)的应用是至关重要的，电流变化的产生需要电子媒介体的参与。媒介体在近十年来得到了迅速的发展，其种类也越来越多。按作用的机理主要可分为两大类：(1)含有过渡金属元素的化合物或配合物，通过过渡金属元素的价态变化来传递电子；(2)通过分子中特殊官能团的结构变化来传递电子。这些化合物的共同特点是都含有大π键的环及与环相联的双键，这些双键容易打开与再形成，电子的传递就是靠这些双键的打开与再形成来实现。
甘油三酯(Triglyceride，缩写TG)是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子。甘油三酯是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成，在脂肪组织中贮存。高甘油三酯是作为高血脂症的一种，对人体的危害主要是引起动脉粥样硬化、造成血管堵塞和形成血栓，引发心脑血管疾病。理想的甘油三酯水平应低于1.70mmol/L，超过1.70mmol/L则需要改变生活方式，控制饮食，增加运动，高于2.26mmol/L则表示甘油三酯偏高，需要吃药，以防病变。
在检测血液中的甘油三酯含量时，通常利用脂蛋白脂肪酶(LPL)与样品中的甘油三酯(TG)作用生成甘油和脂肪酸：
反应过程中产生的甘油被甘油激酶(GYK)催化与ATP和镁离子作用生成3-磷酸甘油和ADP：
新生成的3-磷酸甘油与氧化态的电子媒介体(mediator(ox))在甘油磷酸氧化酶(G3O)或甘油磷酸脱氢酶(G3D)的作用下生成磷酸二羟丙酮和还原态的电子媒介体(mediator(red))。
在给定电压的条件下，产生还原态电子媒介体的多少和电流大小呈正相关，而电流大小和甘油三酯浓度呈正相关。通过上述几步反应就能准确测定甘油三酯含量。
对于应用电化学的方法检测甘油三酯含量的电子媒介体报道的较少，铁氰化钾(Potassium ferricyanide)可以和葡萄糖氧化酶反应，可以作为检测葡萄糖的电子媒介体，但不能应用于检测甘油三酯。因为脂蛋白脂肪酶和表面活性剂均能使红细胞破裂放出血红蛋白，导致铁氰化钾和亚铁血红蛋白反应生成亚铁氰化钾和高铁血红蛋白，亚铁氰化钾的生成使测试的背景电流太高，导致在检测甘油三酯时测试的电流梯度较小。作为电子媒介体的三氯化六铵合钌(Hexaammineruthenium chloride)在检测葡萄糖的应用中是较好的，但是在氧分压较高的情况下，3-磷酸甘油和甘油磷酸氧化酶并不能很好的利用三氯化六铵合钌，而是较多的和氧气反应，这导致氧分压较高时测试的电流梯度较低。二茂铁、醌类、有机介体、有机导电盐和亚甲基蓝均不能很好的与3-磷酸甘油和甘油磷酸氧化酶反应。因此迫切需要找到一种测试甘油三酯浓度较好的电子媒介体。
发明内容
为了解决现有技术中的问题，本发明提供了一种测定全血样本中特定成分或所述特定成分发生反应后的中间产物的组合物，包括氧化脱氢酶、表面活性剂和电子媒介体，所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物。
其中所述吩噻嗪衍生物选自通式V，所述吩噁嗪衍生物选自通式VI
其中R1至R9选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳氧基、杂芳香基、杂环胺基、醛基、酮基、羧基、烃羧基、烷氧羰基、酯基、卤素、卤代烷基、亚硝基、硝基、环基、氨基、亚磷酸基团及其盐或磺酸基团及其盐，所述R1至R9基团可以相同或不同。
更具体的，吩噻嗪衍生物选自通式I、通式II或通式III：
所述氧化脱氢酶选自甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶。
当特定成分为甘油三酯时，组合物还包括脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、ATP和镁离子。优选的，组合物各组分的含量分别为：脂蛋白脂肪酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油激酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶的含量为100ku/L-1000ku/L，ATP的含量为2g/L-16g/L，吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物的含量为1g/L-25g/L，镁离子的含量为0.5g-40g，表面活性剂的含量为1g/L-100g/L。
本发明提供一种测定全血样本中特定成分或所述特定成分发生反应后的中间产物的电化学测试条，所述测试条包括绝缘性底板，覆盖层，样品入口和位于绝缘性底板上的电极系统，其中所述电极系统至少包括一个工作电极和一个对电极，至少在工作电极上包括一种测定组合物，所述组合物包括氧化脱氢酶、表面活性剂和电子媒介体，所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物。
其中所述吩噻嗪衍生物选自通式V，所述吩噁嗪衍生物选自通式VI：
其中R1至R9选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳氧基、杂芳香基、杂环胺基、醛基、酮基、羧基、烃羧基、烷氧羰基、酯基、卤素、卤代烷基、亚硝基、硝基、环基、氨基、亚磷酸基团及其盐或磺酸基团及其盐，所述R1至R9基团可以相同或不同。
更具体的，所述吩噻嗪衍生物选自通式I、通式II或通式III：
其中所述氧化脱氢酶选自甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶。
本发明还提供了一种测定全血中甘油三酯含量的电化学测试条，包括绝缘性底板，覆盖层，样品入口和位于绝缘性底板上的电极系统，其中所述电极系统至少包括一个工作电极和一个对电极，至少在工作电极上包括一种测定组合物，所述组合物包括脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶、ATP、表面活性剂、镁离子和电子媒介体，所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物。
其中所述吩噻嗪衍生物选自通式V，所述吩噁嗪衍生物选自通式VI：
其中R1至R9选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳氧基、杂芳香基、杂环胺基、醛基、酮基、羧基、烃羧基、烷氧羰基、酯基、卤素、卤代烷基、亚硝基、硝基、环基、氨基、亚磷酸基团及其盐或磺酸基团及其盐，所述R1至R9基团可以相同或不同。
更具体的，所述吩噻嗪衍生物选自通式I、通式II或通式III：
更具体的，组合物中各组分的含量为：脂蛋白脂肪酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油激酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶的含量为100ku/L-1000ku/L，ATP的含量为2g/L-16g/L，吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物的含量为1g/L-25g/L，镁离子的含量为0.5g-40g，表面活性剂的含量为1g/L-100g/L。
本发明还提供了一种用于甘油三酯含量测定的电化学测试条的制备方法，所述制备方法包括：提供绝缘性底板，覆盖层，样品入口，在绝缘性底板上制备电极系统，所述电极系统至少包括工作电极和对电极，至少在工作电极上添加测定用组合物，所述组合物包括脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶、ATP、表面活性剂、镁离子和电子媒介体，所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物。
其中，所述吩噻嗪衍生物选自通式V，所述吩噁嗪衍生物选自通式VI
其中R1至R9分别选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳氧基、杂芳香基、杂环胺基、醛基、酮基、羧基、烃羧基、烷氧羰基、酯基、卤素、卤代烷基、亚硝基、硝基、环基、氨基、亚磷酸基团及其盐或磺酸基团及其盐，所述R1至R9基团可以相同或不同。
更具体的，所述吩噻嗪衍生物选自通式I、通式II或通式III：
更具体的，组合物中各组分的含量为：脂蛋白脂肪酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油激酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶的含量为100ku/L-1000ku/L，ATP的含量为2g/L-16g/L，吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物的含量为1g/L-25g/L，镁离子的含量为0.5g-40g，表面活性剂的含量为1g/L-100g/L。
本发明还提供了一种测定全血样本中甘油三酯含量的方法，包括以下步骤：(1)提供一种电化学测试条，所述测试条包括工作电极和对电极；至少在工作电极上包括一种测定组合物包括脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶、ATP、表面活性剂、镁离子和电子媒介体，所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物。(2)将步骤(1)中的电化学测试条与电子测量仪连接。(3)将全血样本加入电化学测试条中；(4)测定全血中的甘油三酯含量。
更具体的，脂蛋白脂肪酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油激酶的含量为100ku/L-1000ku/L，甘油磷酸氧化酶的含量为100ku/L-1000ku/L，ATP的含量为2g/L-16g/L，吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物的含量为1g/L-25g/L，镁离子的含量为0.5g-40g，表面活性剂的含量为1g/L-100g/L。
所述吩噻嗪衍生物选自通式V，所述吩噁嗪衍生物选自通式VI
其中R1至R9分别选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳氧基、杂芳香基、杂环胺基、醛基、酮基、羧基、烃羧基、烷氧羰基、酯基、卤素、卤代烷基、亚硝基、硝基、环基、氨基、亚磷酸基团及其盐或磺酸基团及其盐，所述R1至R9基团可以相同或不同。
更具体的，所述吩噻嗪衍生物选自通式I、通式II或通式III：
本发明的有益效果是：本发明包含吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物的组合物，能很好地和3-磷酸甘油与甘油磷酸氧化酶反应产生较好电流梯度。在甘油三酯的含量测定中能产生明显的电流梯度且测试的背景电流较低，让甘油三酯的检测结果更为准确。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细的说明。这些具体的实施例仅仅是在不违背本发明精神下的有限列举，并不排除本领域的一般技术人员把现有技术和本发明结合而产生的其他具体的实施方案。
一种测定全血样本中特定成分或所述特定成分发生反应后的中间产物的含量的组合物，包括氧化脱氢酶、表面活性剂和电子媒介体。其中所述氧化脱氢酶选自胆固醇氧化酶、葡萄糖氧化酶或葡萄糖脱氢酶、尿酸氧化酶、丙酮酸氧化酶、甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶等。所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物等。
所述全血中特定成分选自血液样本中的胆固醇、葡萄糖、尿酸、丙酮酸、肌酐、甘油三酯等。所述特定成分发生反应后的中间产物选自肌酐的中间产物肌氨酸、甘油三酯的中间产物3-磷酸甘油等。
测定全血样本中甘油三酯含量的组合物，所述组合物包括氧化脱氢酶、表面活性剂、电子媒介体、脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、ATP和镁离子。其中所述氧化脱氢酶选自甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶，所述电子媒介体选自吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物。
在一个实施方案中，本发明所述测定甘油三酯含量的组合物包括：100ku/L-1000ku/L的脂蛋白脂肪酶，100ku/L-1000ku/L的甘油激酶，100ku/L-1000ku/L的甘油磷酸氧化酶，2g/L-16g/L的ATP，1g/L-25g/L的吩噻嗪衍生物或吩噁嗪衍生物，0.5g-40g，的Mg2+，1g/L-100g/L的表面活性剂。
本发明所述的表面活性剂选自聚氧乙烯基联苯乙烯化苯基醚、失水山梨醇三油酸酯、失水山梨醇三硬脂酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯壬基苯基醚、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯十六烷基醚、聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯失水山梨醇三硬脂酸酯或聚氧乙烯单油酸酯等。
本发明所述的镁离子来自于镁盐中的镁离子，所述的镁盐可以选自氯化镁、硫酸镁、醋酸镁、铬酸镁、硝酸镁等合适的镁盐或它们的任一组合。所述的镁离子还可以来自于非镁盐中的镁离子。
本发明所述吩噻嗪衍生物选自通式V，所述吩噁嗪衍生物选自通式VI，其中R1至R9分别选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳氧基、杂芳香基、杂环胺基、醛基、酮基、羧基、烃羧基、烷氧羰基、酯基、卤素、卤代烷基、亚硝基、硝基、环基、氨基、亚磷酸基团及其盐、磺酸基团及其盐，所述R1至R9基团可以相同或不同：
更具体的，所述吩噻嗪衍生物选自通式I、通式II或通式III：
实施例1含铁氰化钾电子媒介体的组合物用于检测血样中甘油三酯的含量
将以下组合物在不加入酶之前用NaOH调整其pH为6.5后加入酶备用，将溶液I点液在丝网印刷电极上，将其置于65℃烘箱中烘20分钟后取出。
溶液I：
将以上点液烘干后的丝网印刷电极用双面胶和上盖黏贴，钢滚压实后用滚刀切割成每个电化学测试条的尺寸为35mm*6mm，将测试条插到测试的仪器上自动开机，分别在虹吸通道处加入甘油三酯含量为45-60mg/dL、300-330mg/dL或625-685mg/dL，红细胞比容调整到42％的全血标本，全血标本的真实值参考生化分析仪测试(HITACHI 7100AutomaticAnalyzer)。电化学测试条可以在100-1000mV范围的测试电压，室温环境下测量样本中特定成分的含量。本申请所述实施例中的电化学测试条均选用250mV的电压，且是工作电极相对于对电极的电压为正的250mV，并在室温条件下测量样本中特定成分的含量。每个浓度的全血标本分别进行50次重复实验，测得的电流值的CV(变异系数)均在1％到3％范围内，每个浓度的测定平均值如下表1所示。
表1
实施例1的测定结果表明，含有铁氰化钾作为电子媒介体的组合物测试的背景电流较高。这是由于组合物中的表面活性剂或酶类等物质导致测试的血样溶血，溶血后红细胞中的血红蛋白被释放出来，铁氰化钾会和亚铁血红蛋白反应生成高铁血红蛋白和亚铁氰化钾，亚铁氰化钾的生成促使测试的背景电流较高。且铁氰化钾作为电子媒介体的组合物与3-磷酸甘油和甘油磷酸氧化酶反应能力较差导致测试无明显的电流梯度，因此无法准确测定甘油三酯从45mg/dL到650mg/dL范围内的含量。
实施例2含三氯化六铵合钌电子媒介体的组合物用于检测血样中甘油三酯的含量
将以下组合物在不加入酶之前用NaOH调整其pH为6.5后加入酶备用，将溶液II点液在丝网印刷电极上，在65℃烘箱中烘20分钟后取出。
溶液II:
将以上点液烘干后的丝网印刷电极用双面胶和上盖黏贴，钢滚压实后用滚刀切割成每个电化学测试条的尺寸为35mm*6mm，将测试条插到测试的仪器上自动开机，分别在虹吸通道处加入甘油三酯含量为45-60mg/dL、300-330mg/dL或625-685mg/dL，红细胞比容调整到42％的全血标本，全血标本的真实值参考生化分析仪测试(HITACHI 7100AutomaticAnalyzer)，其一份三个浓度的全血标本氧分压控制在40mmHg以下，另一份三个浓度的全血标本氧分压控制在100mmHg以上。氧分压在100mmHg以上的全血标本可以采用如下方式或其他方式配制：将血样标本放在2mL的离心管中摇晃20分钟备用。
在250mV的测试电压室温下进行测试。每个浓度的全血标本分别进行50次重复实验，测得的电流值的CV(变异系数)均在1％到3％范围内，每个浓度的测定平均值如下表2所示。
表2
实施例2的测定结果表明，含有三氯化六铵合钌作为电子媒介体的组合物测试的背景电流较低，当全血标本中的氧分压较低时有明显的电流梯度，而氧分压较高时测试的电流梯度较小。这是由于3-磷酸甘油和甘油磷酸氧化酶既能和氧气反应也能和三氯化六铵合钌反应。氧分压的大小影响3-磷酸甘油和甘油磷酸氧化酶与氧气或三氯化六铵合钌的反应程度。当全血标本中的氧分压较高时，3-磷酸甘油和甘油磷酸氧化酶与氧气反应优于其与三氯化六铵合钌的反应，导致测试的电流梯度较低。因此只有当全血标本中的氧分压较低时，三氯化六铵合钌才能很好地与3-磷酸甘油和甘油磷酸氧化酶反应产生较高的电流梯度。而实际检测过程中，往往会采用指尖血和经过摇晃的静脉血标本进行甘油三酯含量的测定，由于指尖血和摇晃过程与氧气接触的静脉血的氧分压均比较高，这样就会导致使用三氯化六铵合钌作为电子媒介体的组合物测试时，不能准确区分甘油三酯45mg/dL到650mg/dL范围内的含量。因此实施例2中的作为电子媒介体的三氯化六铵合钌在氧分压较高的情况下，无法准确测定甘油三酯45mg/dL到650mg/dL范围内的含量。
实施例3含吩噻嗪衍生物通式I作为电子媒介体的组合物用于检测血样中甘油三酯的含量
将以下组合物在不加入酶之前，用NaOH调整其pH为6.5后加入酶备用，将溶液III点液在丝网印刷电极上，在65℃烘箱中烘20分钟后取出。
溶液III:
将以上点液烘干后的丝网印刷电极用双面胶和上盖黏贴，钢滚压实后用滚刀切割成每个电化学测试条的尺寸为35mm*6mm，将测试条插到测试的仪器上自动开机，分别在虹吸通道处加入实施例2的全血标本，在250mV的测试电压室温下进行测试。每个浓度的全血标本分别进行50次重复实验，测得的电流值的CV(变异系数)均在1％到3％范围内，每个浓度的测定平均值如下表3所示。
表3
实施例3的测定结果表明，含有吩噻嗪衍生物通式I做为电子媒介体的组合物测试的背景电流较低，有明显的电流梯度且不受全血标本中溶血后血红蛋白的影响也不受氧分压的影响，能准确地测量出样品中甘油三酯的含量。
实施例4含有不同含量吩噻嗪衍生物通式I的组合物用于检测血样中甘油三酯的含量
将以下组合物在不加入酶之前，用NaOH调整其pH为6.5后加入酶备用，
将溶液Ⅳ点液在丝网印刷电极上，在65℃烘箱中烘20分钟后取出。
溶液IV
将以上点液烘干后的丝网印刷电极用双面胶和上盖黏贴，钢滚压实后用滚刀切割成每个电化学测试条的尺寸为35mm*6mm，将测试条插到测试的仪器上自动开机，分别在虹吸通道处加入甘油三酯含量为45-60mg/dL、300-330mg/dL或625-685mg/dL，红细胞比容调整到42％的全血标本(即实施例1中的全血标本)，全血标本的真实值参考生化分析仪测试(HITACHI 7100Automatic Analyzer)，在250mV的测试电压室温下进行测试，每个浓度的全血标本分别进行50次重复实验，测得的电流值的CV(变异系数)均在1％到3％范围内，每个浓度的测定平均值如下表4所示。
表4
实施例4的测定结果表明含有不同含量吩噻嗪衍生物通式I作为电子媒介体的组合物测定甘油三酯时，测量电流具有较好的电流梯度，能准确地测量出样品中甘油三酯的含量。
实施例5不同吩噻嗪衍生物作为电子媒介体的组合物用于检测血样中甘油三酯的含量
将以下组合物在不加入酶之前，用NaOH调整其pH为6.5后加入酶备用，将溶液V-1点液在丝网印刷电极上，在65℃烘箱中烘20分钟后取出。
溶液V-1
将以下组合物在不加入酶之前，用NaOH调整其pH为6.5后加入酶备用，将溶液V-2点液在丝网印刷电极上，在65℃烘箱中烘20分钟后取出。
溶液V-2
将以下组合物在不加入酶之前，用NaOH调整其pH为6.5后加入酶备用，将溶液V-3点液在丝网印刷电极上，在65℃烘箱中烘20分钟后取出。
溶液V-3
将以上V-1，V-2和V-3分别点液到丝网印刷电极上烘干后用双面胶和上盖黏贴，钢滚压实后用滚刀切割成每个电化学测试条的尺寸为35mm*6mm，将测试条插到测试的仪器上自动开机，分别在虹吸通道处加入甘油三酯含量为45-60mg/dL、300-330mg/dL或625-685mg/dL，红细胞比容调整到42％的全血标本，全血标本的真实值参考生化分析仪测试(HITACHI 7100Automatic Analyzer)，在250mV的测试电压室温下进行测试，每个浓度的全血标本分别进行50次重复实验，测得的电流值的CV(变异系数)均在1％到3％范围内，每个浓度的测定平均值如下表5所示。
表5
实施例5的测定结果表明不同种类的吩噻嗪衍生物作为电子媒介体的组合物可以准确测定甘油三酯浓度从45mg/dL-650mg/dL范围内的含量，测试结果有明显的电流梯度，能准确地测量出样品中甘油三酯的含量。
实施例6稳定性试验
利用实施例5中制备得到的测试条进行稳定性试验，所述测试条中的吩噻嗪衍生物选自通式1。分别在试纸条制备完成时和试纸条存放两年后，在250mV的测试电压下测试，甘油三酯含量为45-60mg/dL、300-330mg/dL或625-685mg/dL，红细胞比容调整到42％的全血标本，全血标本的真实值参考生化分析仪测试(HITACHI 7100Automatic Analyzer)，每个浓度的全血标本分别进行50次重复实验，测得的电流值的CV(变异系数)均在1％到3％范围内，每个浓度的测定平均值如下表6所示。
表6
实施例6的测定结果测试条在放置两年后其测试电流基本没有变化，因此本发明所述电化学测试条的稳定性好。
Claims (6)
1.一种测定全血样本中甘油三酯含量的组合物，包括氧化脱氢酶、表面活性剂、电子媒介体、脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、ATP和镁离子，其特征在于，所述电子媒介体选自通式I、通式II或通式III：
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述氧化脱氢酶为甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物在加入氧化脱氢酶、脂蛋白脂肪酶和甘油激酶之前，用NaOH调整pH为6.5后加入氧化脱氢酶、脂蛋白脂肪酶和甘油激酶。
4.一种在高氧分压的全血样本测试中获得明显电流梯度的方法，包括，在反应试剂中添加通式V的吩噻嗪衍生物选自通式I、通式II或通式III：
其中所述高氧分压是指氧分压≥100mmHg。
5.一种用于测定全血样本中甘油三酯含量的电化学测试条，包括绝缘性底板，覆盖层，样品入口和位于绝缘性底板上的电极系统，其中所述电极系统至少包括一个工作电极和一个对电极，其特征在于，至少在工作电极上包括测定组合物，所述组合物包括脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、甘油磷酸氧化酶或甘油磷酸脱氢酶、ATP、表面活性剂、镁离子和电子媒介体，所述电子媒介体选自通式I、通式II或通式III：
6.根据权利要求5所述的电化学测试条，其特征在于，所述组合物点液在丝网印刷电极上，在65℃烘箱中烘20分钟后取出。
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- 2016-03-31 CN CN201610199897.4A patent/CN107290400B/zh active Active
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