CN107286268A - 一种桃胶多糖提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及天然活性成分提取技术领域，具体涉及一种桃胶多糖提取方法。步骤如下：胶干去杂粉碎，在60‑65℃下处理后，与蒸馏水混合搅拌提取，高速离心机离心获得上清液，真空浓缩，向浓缩液中充入液氮，将浓缩液置于2‑3℃下存放去沉淀，向去除沉淀的浓缩液中加入无水乙醇，沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖，较于现有Sevage法去除桃胶中的蛋白质，本发明采用向浓缩液中按10:1‑2的体积比充入液氮方式去除桃胶多糖中的蛋白质，去除率达到99.5%，且去除过程对桃胶多糖无污染性，最终得到高品质桃胶多糖。
Description
技术领域
本发明涉及天然活性成分提取技术领域，具体涉及一种桃胶多糖提取方法。
背景技术
桃胶为蔷薇科植物桃或山桃等树皮中分泌出来的树脂。植物形态详"桃仁"条。 夏季采收，用刀切割树皮，待树脂溢出后收集。水浸，洗去杂质，晒干。树胶的主要组成为半乳糖、鼠李糖、α-葡萄糖醛酸等。炼制后服，具有保中不饥，忍风寒，下尿道结石，破血，治中恶疰忤，和血益气，治下痢，止痛的功效，桃胶中的多糖具有降血糖的功效，目前桃胶多糖在提取过程中一般采用Sevage法，即将氯仿和丁醇溶液按v:v=5:1的比例加入多糖中，混合物剧烈镇摇5分钟后静置萃取，多次分去水层和溶液层中的蛋白质，至无明显沉淀为止，此种去除多糖中蛋白质方式复杂，需反复处理且很难完全去除，另外，采用氯仿和丁醇去除多糖中蛋白质同时对多糖也具有一定污染性。
发明内容
为解决现有采用Sevage法去除多糖中蛋白质存在的缺点，本发明的目的在于提供一种桃胶多糖提取方法。
本发明采用的技术方案为，一种桃胶多糖提取方法，步骤如下：
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末在60-65℃下处理25-30分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，60-80分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将浓缩液置于40-45℃下，向浓缩液中按10:1-2的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2-3℃下存放30-35分钟后，去沉淀，再进行下次充入；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.25-1.3MPa下静置40-50分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
优选的，将桃胶粉末在60-65℃下处理25分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，80分钟搅拌提取。
优选的，将浓缩液置于40℃下，向浓缩液中按10:2的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2℃下存放35分钟后，去沉淀，再进行下次充入。
优选的，向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.25MPa下静置50分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀。
本发明有益效果在于，较于现有Sevage法去除桃胶中的蛋白质，本发明采用向浓缩液中按10:1-2的体积比充入液氮方式去除桃胶多糖中的蛋白质，去除率达到99.5%，且去除过程对桃胶多糖无污染性，最终得到高品质桃胶多糖，另外，在具体获得桃胶多糖过程中，将桃胶粉末在60-65℃下处理25-30分钟后再与蒸馏水混合浸提，能显著提高桃胶多糖得率，醇沉获得桃胶多糖时，在1.25-1.3MPa下静置相较于常压静置，能显著缩短醇沉时间。
具体实施方式
实施例1、一种桃胶多糖提取方法，具体的，
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末在60℃下处理25分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，60分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将浓缩液置于40℃下，向浓缩液中按10:1的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2℃下存放30分钟后，去沉淀，再进行下次充入；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.25MPa下静置40分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
实施例2、一种桃胶多糖提取方法，具体的，
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末在65℃下处理30分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，80分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将浓缩液置于45℃下，向浓缩液中按10:2的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于3℃下存放35分钟后，去沉淀，再进行下次充入；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.3MPa下静置50分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
实施例3、一种桃胶多糖提取方法，具体的，
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末在62℃下处理28分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将浓缩液置于42℃下，向浓缩液中按10:1.5的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2.8℃下存放32分钟后，去沉淀，再进行下次充入；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.28MPa下静置45分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
以下结合具体对比例对本发明进一步说明：
对比试验分为3组，各组所用桃胶采购于同一产地，随机等分得到；
其中，实验组按照以下方式获得桃胶多糖，
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末在62℃下处理28分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将浓缩液置于42℃下，向浓缩液中按10:1.5的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2.8℃下存放32分钟后，去沉淀，再进行下次充入；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.28MPa下静置45分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
其中，对照组1按照以下方式获得桃胶多糖，
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将浓缩液置于42℃下，向浓缩液中按10:1.5的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2.8℃下存放32分钟后，去沉淀，再进行下次充入；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.28MPa下静置45分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
其中，对照组2按照以下方式获得桃胶多糖，
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末在62℃下处理28分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将氯仿和丁醇溶液按V;V=5;1的比例加入到多糖中，混合物剧烈镇摇5分钟后静置萃取，分去水层和溶液层交界处的变性蛋白质，得到脱蛋白糖液，反复多次至水与溶液层交界处无明显蛋白沉淀为止；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.28MPa下静置45分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
统计各组多糖得率，多糖中蛋白质去除率，结果见下表1：
| 组别 | 实验组 | 对照组1 | 对照组2 |
| 多糖得率（%） | 72.5 | 55.4 | 72.6 |
| 蛋白质去除率（%） | 99.58 | 99.52 | 83.66 |
由表1可知，将桃胶粉末在62℃下处理28分钟后，再与蒸馏水混合提取，对于提高多糖得率作用显著，采用将浓缩液置于42℃下，向浓缩液中按10:1.5的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2.8℃下存放32分钟后，去沉淀，再进行下次充入，对去除桃胶中蛋白质作用显著。
Claims (4)
1.一种桃胶多糖提取方法，其特征在于，步骤如下：
（1）将桃胶干去杂，粉碎过80目筛，得到桃胶粉末；
（2）将桃胶粉末在60-65℃下处理25-30分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，60-80分钟搅拌提取；
（3）浸提液用高速离心机离心20分钟，速度为4000r/min，获得上清液，上清液于60℃真空浓缩至原体积的1/5；
（4）将浓缩液置于40-45℃下，向浓缩液中按10:1-2的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2-3℃下存放30-35分钟后，去沉淀，再进行下次充入；
（5）向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.25-1.3MPa下静置40-50分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀；
（6）沉淀经真空干燥，研磨，得到桃胶多糖。
2.根据权利要求1所述的一种桃胶多糖提取方法，其特征在于，
将桃胶粉末在60-65℃下处理25分钟后，与蒸馏水按1g:100ml的比例混合，90℃，80分钟搅拌提取。
3.根据权利要求1所述的一种桃胶多糖提取方法，其特征在于，
将浓缩液置于40℃下，向浓缩液中按10:2的体积比充入液氮，充入时，液氮排出口在浓缩液的最底部，连续充入3次，每次充入结束后，将浓缩液置于2℃下存放35分钟后，去沉淀，再进行下次充入。
4.根据权利要求1所述的一种桃胶多糖提取方法，其特征在于，
向去除沉淀的浓缩液中按10倍体积比加入无水乙醇，1.25MPa下静置50分钟，4000r/min离心20分钟，获取沉淀。
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