CN103361334A - 一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法 - Google Patents

一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，其步骤为：1）在去除白皮层的菠萝蜜果皮中，加水，破碎压榨，分离出液体并过滤，制得滤液；2）向滤液加入柠檬酸钠，搅拌均匀后离心，取上清液；3）向清液加入单宁，静置30～40分钟，取沉淀物，得蛋白酶糊后，加入其质量浓度EDTA溶液、氯化钠溶液搅拌混匀、离心、弃掉沉淀后减压干燥，即得蛋白酶。该提取方法生产工艺和操作简单，原料能耗少，提取得到的蛋白酶性能稳定，回收率较高。

Description

一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法
技术领域
本发明涉及一种蛋白酶的提取方法，具体涉及一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法。
背景技术
菠萝蜜是一种热带桑科常绿乔木，果实6～7月成熟，果实巨大，被称为水果之王，富含有碳水化合物、糖分、蛋白质、淀粉、维生素、氨基酸以及对人体有用的各种矿物质。与此同时，菠萝蜜还有很高的药用价值和健体益寿的作用。
菠萝蜜果皮的营养价值与果肉、果核相当，但是人们往往会吃完果肉随手将果皮丢弃，浪费资源，体现不了菠萝蜜果皮的利用价值和营养价值。丢弃一段时间后的波罗蜜果皮还会发出一股臭味，易乳化出细菌而引来苍蝇，造成环境卫生的困扰。于是充分利用菠萝蜜果皮研发各种新产品，具有广阔的应用前景。
菠萝蛋白酶是从菠萝皮和菠萝肉中提取到的一种蛋白酶，目前大多采用盐析法提取，该提取方法是根据蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同而分离出蛋白酶，提取方法简单，但原料消耗多，所需设备也多，而且菠萝蛋白酶对环境条件有较强的敏感性，使得蛋白酶的回收率较低。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，该提取方法生产工艺和操作简单，原料能耗少，提取得到的蛋白酶性能稳定，回收率较高。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，包括以下步骤：
1）在去除白皮层的菠萝蜜果皮中，加入其重量1～2倍的水，破碎压榨，分离出液体并过滤，制得滤液；
2）向滤液加入其重量0.8～1.2％的柠檬酸钠，其中柠檬酸钠的浓度为4～6％，搅拌均匀后离心，取上清液；
3）向清液加入其重量2～4％的单宁,静置30～40分钟，取沉淀物，得蛋白酶糊后，加入其重量10％的EDTA溶液和其重量20％的氯化钠溶液，其中EDTA溶液浓度和氯化钠溶液的浓度分别为0.1～0.2％、1～2％，搅拌混匀、离心、弃掉沉淀后减压干燥，即得蛋白酶。
优选的，所述菠萝蜜果皮破碎前经过发酵的过程。
优选的，所述单宁的浓度为1～3％。
优选的，所述单宁的浓度最佳为2％。
优选的，所述提取蛋白酶时，PH为6～8，温度控制在55～60℃。
步骤2）中，所述的离心优选为3800～4200r/min离心5～10分钟。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明菠萝蛋白酶生产工艺和操作简单；原料来源广泛，纯属天然植物，安全无毒，具有很好的药用价值（如：可作为抗水肿及抗炎药物等）和广阔的应用前景。
具体实施方式
下面以4个优选实施例作进一步说明，但本发明不局限于这些实施例。
实施例1
一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，其步骤如下：
1）在去除白皮层的菠萝蜜果皮中，加入其重量1.5倍的水，于常温下发酵2天，破碎压榨，分离出液体并过滤，制得滤液；
2）向滤液加入其重量1％的柠檬酸钠，其中柠檬酸钠的浓度为5％，搅拌均匀后，以4000r/min离心8分钟，取上清液；
3）向清液加入其重量3％的单宁,其中单宁的浓度为2％，静置30～40分钟，取沉淀物，得蛋白酶糊后，加入其重量10％的EDTA溶液和其重量20％的氯化钠溶液，其中EDTA溶液浓度和氯化钠溶液的浓度分别为0.1％、1.5％，搅拌混匀，调节PH为7、温度控制在55℃，以4000r/min离心8分钟，弃掉沉淀后减压干燥，即得蛋白酶。
实施例2
一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，其步骤如下：
1）在去除白皮层的菠萝蜜果皮中，加入其重量2倍的水，于常温下发酵1天，破碎压榨，分离出液体并过滤，制得滤液；
2）向滤液加入其重量1.2％的柠檬酸钠，其中柠檬酸钠的浓度为4％，搅拌均匀后，以3800r/min离心10分钟，取上清液；
3）向清液加入其重量2％的单宁,其中单宁的浓度为3％，静置40分钟，取沉淀物，得蛋白酶糊后，加入其重量10％的EDTA溶液和其重量20％的氯化钠溶液，其中EDTA溶液浓度和氯化钠溶液的浓度分别为0.1％、1％，搅拌混匀，调节PH为6、温度控制在60℃，以4200r/min离心5分钟，弃掉沉淀后减压干燥，即得蛋白酶。
实施例3
一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，其步骤如下：
1）在去除白皮层的菠萝蜜果皮中，加入其重量1倍的水，破碎压榨，分离出液体并过滤，制得滤液；
2）向滤液加入其重量0.8％的柠檬酸钠，其中柠檬酸钠的浓度为6％，搅拌均匀后，以4200r/min离心5分钟，取上清液；
3）向清液加入其重量4％的单宁,其中单宁的浓度为1％，静置30分钟，取沉淀物，得蛋白酶糊后，加入其重量10％的EDTA溶液和其重量20％的氯化钠溶液，其中EDTA溶液浓度和氯化钠溶液的浓度分别为0.2％、2％，搅拌混匀，调节PH为8、温度控制在57℃，以3800r/min离心10分钟，弃掉沉淀后减压干燥，即得蛋白酶。
实施例4
一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，其步骤如下：
1）在去除白皮层的菠萝蜜果皮中，加入其重量2倍的水，破碎压榨，分离出液体并过滤，制得滤液；
2）向滤液加入其重量1％的柠檬酸钠，其中柠檬酸钠的浓度为5％，搅拌均匀后，以4000r/min离心8分钟，取上清液；
3）向清液加入其重量3％的单宁,其中单宁的浓度为2％，静置38分钟，取沉淀物，得蛋白酶糊后，加入其重量10％的EDTA溶液和其重量20％的氯化钠溶液，其中EDTA溶液浓度和氯化钠溶液的浓度分别为0.2％、1.5％，搅拌混匀，调节PH为7、温度控制在58℃，以4000r/min离心7分钟，弃掉沉淀后减压干燥，即得蛋白酶。

Claims (6)

1.一种菠萝蜜果皮中提取蛋白酶的方法，包括以下步骤：
1）在去除白皮层的菠萝蜜果皮中，加入其重量1～2倍的水，破碎压榨，分离出液体并过滤，制得滤液；
2）向滤液加入其重量0.8～1.2％的柠檬酸钠，其中柠檬酸钠的浓度为4～6％，搅拌均匀后离心，取上清液；
3）向清液加入其重量2～4％的单宁,静置30～40分钟，取沉淀物，得蛋白酶糊后，加入其重量10％的EDTA溶液和其重量20％的氯化钠溶液，其中EDTA溶液浓度和氯化钠溶液的浓度分别为0.1～0.2％、1～2％，搅拌混匀、离心、弃掉沉淀后减压干燥，即得蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述菠萝蜜果皮破碎前经过发酵的过程。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单宁的浓度为1～3％。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述单宁的浓度为2％。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取蛋白酶时，PH为6～8，温度控制在55～60℃。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）所述的离心为3800～4200r/min离心5～10分钟。
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