CN107132296A - 一种同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，步骤如下：1)将待测特殊医学用途配方食品经的样品前处理后，备用；2)将前处理后的样品放入气相色谱‑质谱联用仪采用选择离子扫描气相色谱‑质谱法进行测定；色谱条件为：色谱柱：固定相为聚二氰丙基聚硅氧烷；载气：氮气；载气流速：0.4mL‑0.6mL/min；进样口温度：240℃‑260℃；分流比：25‑35:1‑2；进样量：1.0μL；柱温：初始温度140℃，保持5分钟，升温速率3‑5℃/min升温至240℃，保持30分钟；3）用FID检测器；检测脂肪酸甲酯的色谱峰面积。本发明的测定方法有效的降低了RSD值，保证试样测定结果的准确性，测定数据真实稳定可靠。

Description

一种同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法
技术领域
本发明属于医药检验领域，主要用于特殊医用配方食品的脂肪酸含量测定，可提高测定结果的准确性。
背景技术
特殊医学用途配方食品，剂型多为混悬液或粉剂，产品基质不均一，成分复杂，在含量测定时均需要不同程度的前处理过程；且本方法属于脂肪酸甲酯的含量测定，种类有37种之多，这对色谱柱类型、色谱条件、前处理、操作人员的水平等要求都是比较困难的，这些对于结果数据的准确性都会产生一定影响。
现有特殊医学用途配方食品的脂肪酸含量测定方法主要为气相法，主要来源于《食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》（GB 5009.168-2016），该方法为《食品安全国家标准 特殊医学用途配方食品通则》（GB 29922-2013）中脂肪酸含量测定的规定方法，且为2016年最新更新方法。该标准中主要介绍了3种前处理方法，其中水解-提取法适用于食品中脂肪酸含量的测定；酯交换法适用于游离脂肪酸含量不大于2%的油脂样品的脂肪酸含量测定；乙酰氯-甲醇法适用于含水量小于5%的乳粉和无水奶油样品的脂肪酸含量测定。前处理主要流程如下：
碱水解法：称取均匀试样适量，移入到250ml平底烧瓶中，加入约100mg焦性没食子酸，加入几粒沸石，再加入2ml95%乙醇和4ml水，混匀，加入氨水5ml，混匀。将烧瓶放入70℃~80℃水浴中水解20min。每5min震荡一下烧瓶，使粘附在烧瓶壁上的颗粒物混入溶液中。水解完成后，取出烧瓶冷却至室温。
脂肪提取：水解后的试样，加入10ml95%乙醇，混匀。将烧瓶中的水解液转移到分液漏斗中，用50ml乙醚石油醚混合液冲洗烧瓶和塞子，冲洗液并入分液漏斗中，加盖。振摇5min，静置10min。将醚层提取液收集到250ml烧瓶中。按照以上步骤重复提取水解液3次，最后用乙醚石油醚混合液冲洗分液漏斗，并收集到250ml烧瓶中。旋转蒸发仪浓缩至干，残留物为脂肪提取物。
脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化：在脂肪提取物中加入2%氢氧化钠甲醇溶液8ml，连接回流冷凝器，80℃±1℃水浴上回流，直至油滴消失。从回流冷凝器上端加入7ml15%三氟化硼甲醇溶液，在80℃±1℃水浴中继续回流2min。用少量水冲洗回流冷凝器。停止加热，从水浴上取下烧瓶，迅速冷却至室温。准确加入10ml~30ml正庚烷，振摇2min，再加入饱和氯化钠水溶液，静置分层。吸取上层正庚烷提取液大约5ml，至25ml试管中，加入大约3g~5g无水硫酸钠，振摇1min，静置5min，吸取上层溶液到进样瓶中待测定。
测定过程：
色谱参考条件 聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相（柱长100m，内径0.25mm，膜厚0.2μm），进样器温度270℃，检测器温度280℃，程序升温from 100℃（13min） to 180℃（6min）at 10℃/min，to 200℃（20min）at 1℃/min，to 230℃（10.5min）at 4℃/min，载气为氮气，分流比100:1，进样体积1.0μl。上机操作时，分别将脂肪酸标准测定液及试样测定液分别注入气相色谱仪，以色谱峰峰面积定量。
该方法存在的问题有：
1. 三氟化硼甲醇溶液有14%、10%、15%等浓度，14%和15%较常用，其中三氟化硼与甲醇以1:1的比例络合，而三氟化硼在甲酯化的过程起到催化剂的作用，单独用甲醇在短时间内无法甲酯化皂化脂肪酸，在脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化采用氢氧化钠甲醇溶液-三氟化硼甲醇溶液体系，虽然缩短了部分脂肪酸甲酯化的时间，但三氟化硼存在毒性大、后续废液处理等问题，且在操作过程中需要二次加液，给操作人员增加了不确定因素和安全隐患。
2. 色谱条件在实际测定种会因柱子厂家、填料或者不同仪器而有些许差别，且条件中未对载气流速进行说明，而在实际测定过程中，载气流速的不同会直接影响几个关键峰的分离效果。
3.对37种脂肪酸甲酯目标峰的定性研究是基于单个脂肪酸甲酯标准溶液和脂肪酸甲酯混合标准溶液分别进样并进行匹配和核对，这种方式繁琐且溶液量取工作量大，序列处理麻烦，且单标溶液购买获取困难，存储要求严格，都可能影响后续样品测定的准确性。
发明内容
本发明为了解决现有技术存在的技术问题，根据本发明方法测定的特殊医学用途配方食品的特点，采用的技术方案如下：
一种同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，步骤如下：
1) 将待测特殊医学用途配方食品经的样品前处理后，备用；
2) 将经过前处理的样品以气相色谱法进行测定；色谱条件为：色谱柱：固定相为聚二氰丙基聚硅氧烷； 载气：氮气；载气流速：0.4mL-0.6 mL /min；进样口温度：240℃-260℃；分流比：25-35:1-2；进样量：1.0μL；柱温：初始温度140℃，保持5分钟，升温速率3-5℃/min升温至240℃，保持30分钟；
3）用FID检测器；检测脂肪酸甲酯的色谱峰面积。
优选地，所述的色谱条件为：色谱柱为：固定相为聚二氰丙基聚硅氧烷； 载气：氮气；载气流速：0.5mL/min；进样口温度：245-255℃； 分流比：28-32:1； 进样量：1.0μL；检测器：FID检测器；柱温：初始温度140℃，保持5分钟，升温速率3-5℃/min升温至240℃，保持30分钟。
更优选地，所述的色谱条件为：色谱柱为：固定相为聚二氰丙基聚硅氧烷； 载气：氮气；载气流速：0.5mL/min；进样口温度：250℃； 分流比：30:1； 进样量：1.0μL；检测器：FID检测器；柱温：初始温度140℃，保持5分钟，升温速率4℃/min升温至240℃，保持30分钟。
所述的前处理步骤如下：采用水解-提取法来进行样品前处理：精密量取1.0mL样品放入25mL圆底烧瓶中，加8-12mL无水甲醇和0.1-0.8mL 40-60g/L的强碱甲醇溶液，装上回流冷凝器，通氮气，70℃-90℃水浴锅加热30-60min，用水冲洗降温后将内容物转移至分液漏斗中。用5-10 mL正庚烷冲洗烧瓶后倒入分液漏斗，摇晃。加8-15mL 200g/L氯化钠溶液，剧烈摇晃分离，将有机层转移至含有无水硫酸钠的小瓶，静置，过滤即得；
混合脂肪酸甲酯标准溶液：取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10ml容量瓶中，用正庚烷稀释定容，贮存于-10℃以下冰箱，有效期3个月。
优选地，所述的前处理条件为：精密量取1.0mL样品放入25mL圆底烧瓶中，加8-12mL无水甲醇和0.1-0.3mL 60g/L的强碱甲醇溶液，装上回流冷凝器，通氮气，78℃-85℃水浴锅加热30-40min，用水冲洗降温后将内容物转移至分液漏斗中。用5-10 mL正庚烷冲洗烧瓶后倒入分液漏斗，摇晃。加10-15mL 200g/L氯化钠溶液，剧烈摇晃分离，将有机层转移至含有无水硫酸钠的小瓶，静置，过滤即得；
混合脂肪酸甲酯标准溶液：取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10ml容量瓶中，用正庚烷稀释定容，贮存于-10℃以下冰箱，有效期3个月。
更优选地，所述的前处理条件为：精密量取1.0mL样品放入25mL圆底烧瓶中，加10mL无水甲醇和0.2mL 60g/L的强碱甲醇溶液，装上回流冷凝器，通氮气，80℃水浴锅加热40min，用水冲洗降温后将内容物转移至分液漏斗中。用5mL正庚烷冲洗烧瓶后倒入分液漏斗，摇晃。加10mL200g/L氯化钠溶液，剧烈摇晃分离，将有机层转移至含有无水硫酸钠的小瓶，静置，过滤即得；
混合脂肪酸甲酯标准溶液：取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10ml容量瓶中，用正庚烷稀释定容，贮存于-10℃以下冰箱，有效期3个月。
优选地，色谱条件中所述的色谱柱为CNW CD-2560色谱柱。
优选地，色谱条件中所述强碱甲醇溶液中的强碱为氢氧化钾或氢氧化钠。
本发明的有益效果：
现有前处理方法采用三氟化硼甲醇溶液，有14%、10%、15%等浓度，其中14%和15%较常用，三氟化硼与甲醇以1:1的比例络合，三氟化硼在甲酯化的过程起到催化剂的作用，单独用甲醇在短时间内无法甲酯化皂化脂肪酸。本方法根据特殊医学用途配方食品的特点，采用无水甲醇-氢氧化钾甲醇体系进行脂化，后在氮气保护下高温加热一定时间后，用正庚烷萃取冲洗，高浓度NaCl溶液和无水硫酸钠纯化脱水后，进行后续含量测定。
本发明的前处理方法与现有国标中的前处理方法（三氟化硼甲醇体系）相比，按照国标中的前处理步骤所需的反应时间为3h左右,本发明的前处理时间需约2h，缩短时间为1h。虽减少了前处理步骤，但结果却较国标方法好，部分脂肪酸甲酯的含量高于国标方法。采用试剂种类少，毒性小，不需二次加液，安全可操作性高，有效的保护了操作人员，同时也保证了测定结果的准确性；另外本方法针对的测定样品类型属于特殊医学用途配方食品，组分组成和基底较普通食品复杂，蛋白质含量高，且本方法测定样品时，既可以对蛋白质的进行预沉淀，又保证了里面油脂的皂化和脂化过程顺利进行。
本发明中的前处理方法流程简便易行，耗时较短，样品经处理后，经溶剂转移定容进行气相色谱的测定。
与国家标准中推荐参数相比，本发明的测定方法对测定过程中的气相色谱参数进行了优化，根据柱子类型、出峰时间调整了程序升温的梯度，使其中待测的37种脂肪酸能够到达很好的分离效果，并且保证了检测效率，同时缩短了单针的运行时间，适宜的参数对仪器也起到更好的维护作用，有效的降低了RSD值，保证试样测定结果的准确性，测定数据真实稳定可靠。
具体实施方式
以下实施例对本发明内容进一步说明，但下述内容不应理解为对本发明保护范围的限制。在不背离本发明精神实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均涵盖在本发明的保护范围之内。
实施例1
分别精密量取1.0mL特殊医学用途配方食品样品impact及自制品各两份，分别放入25mL圆底烧瓶中，加10mL无水甲醇和0.2mL 60g/L氢氧化钾甲醇溶液，装上回流冷凝器，通氮气，80℃水浴锅加热40min，用水冲洗降温后将内容物转移至分液漏斗中。用5mL正庚烷冲洗烧瓶后倒入分液漏斗，摇晃。加10mL200g/L氯化钠溶液，剧烈摇晃分离，将有机层转移至含有无水硫酸钠的小瓶，静置，过滤即得。
混合脂肪酸甲酯标准溶液：取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10ml容量瓶中，用正庚烷稀释定容，贮存于-10℃以下冰箱，有效期3个月。
色谱条件：色谱柱：CNW CD-2560（ 100m×0.25mm×0.20μm）；
载气：氮气；
载气流速：0.5mL/min；
进样口温度：250℃；
分流比：30:1；
进样量：1.0μL；
检测器：FID检测器；
柱温：140℃（5min）to240℃（30min）at 4℃/min。
试样溶液的测定分别准确吸取1.0μL脂肪酸标准溶液（100ppm）及试样测定次数不少于两次，以色谱峰面积定量。
试样中各脂肪酸的含量计算
Xi=(Asi×FFAME-FA i )/( ∑Astdi×FFAME-FA i)
式中Xi：试样中某个脂肪酸占总脂肪酸的百分比，%；
Asi：试样中测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积；
FFAME-FA i:各脂肪酸甲酯转化为脂肪酸的换算系数；
∑Astdi：标准测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积之和。
以重复性条件下获得的两次独立测定结果表示，结果保留3位有效数字。
本实施例针对IMPACT样品进行含量测定，结果如下。经过测定，以信噪比为10为定量限，结果如下：
脂肪酸简称 IMPACT-1 IMPACT-2 AVERAGE RSD% 自制品-1 自制品-2 AVERAGE RSD%
C4：0 6.58 6.26 6.42 3.52 7.25 7.85 7.55 5.62
C6：0 1.85 1.94 1.895 3.36 - - - -
C8：0 17.7 18.54 18.12 3.28 19.6 18.5 19.05 4.08
C10：0 13.9 14.23 14.065 1.66 13.2 14.8 14 8.08
C11：0 - - - - - - - -
C12：0 0.143 0.156 0.1495 6.15 0.142 0.16 0.151 8.43
C13：0 - - - - - - - -
C14：0 3.53 3.127 3.3285 8.56 3.24 3.65 3.445 8.42
C14：1 - - - - - - - -
C15：0 0.307 0.27 0.2885 9.07 - - - -
C15：1 - - - - - - - -
C16：0 4.89 4.369 4.6295 7.96 3.87 3.95 3.91 1.45
C16：1 2.99 2.65 2.82 8.53 2.81 2.58 2.695 6.03
C17：0 0.289 0.258 0.2735 8.01 0.181 0.198 0.1895 6.34
C17：1 0.121 0.106 0.1135 9.35 - - - -
C18：0 2.49 2.7 2.595 5.72 2.49 2.85 2.67 9.53
C18：1N9T - - - - - - - -
C18：1N9C 12.7 14.6 13.65 9.84 13.6 12.5 13.05 5.96
C18：2N6T - - - - - - - -
C18：2N6C 14.8 13.05 13.925 8.89 - - - -
C20：0 0.139 0.128 0.1335 5.83 - - - -
C18：3N6 0.123 0.107 0.115 9.84 - - - -
C20：1 0.454 0.402 0.428 8.59 0.328 0.375 0.3515 9.45
C18：3N3 0.963 0.892 0.9275 5.41 0.853 0.901 0.877 3.87
C21：0 - - - - - - - -
C20：2 0.875 0.939 0.907 4.99 0.597 0.667 0.632 7.83
C22：0 - - - - - - - -
C20：3N6 - - - - - - - -
C23：0 0.105 0.0944 0.0997 7.52 - - - -
C22：1 - - - - - - - -
C20：3N3 - - - - - - - -
C20：4N6 0.673 0.694 0.6835 2.17 0.589 0.582 0.5855 0.85
C18：2N6 0.294 0.257 0.2755 9.50 0.132 0.144 0.138 6.15
C24：0 - - - - - - - -
EPA 9.08 8.887 8.9835 1.52 5.27 4.92 5.095 4.86
C24：1N9 0.143 0.125 0.134 9.50 - - - -
DHA 7.96 6.93 7.445 9.78 6.46 6.57 6.515 1.19
由上表可知，本发明的方法能够快速准确测出样品中37种脂肪酸含量，方法稳定性好（RSD均小于10%)，可操作性高，结果可信度高。
由于现在国家对于特殊医学用途配方食品中脂肪酸甲酯的各含量均没有非常明确的含量要求，只有大体范围，因此，本方法中为了验证方法的准确度，采用加标回收率、重复性进行方法验证。本实施例中，为了确认本方法的可靠和准确性，同时进行了加标回收率方法学验证部分了脂肪酸甲酯，加入方式为：取适量混合标准溶液分别加入按照处方量的80%、100%和120%的单一脂肪酸甲酯对照溶液，分别平行制备3份，混匀后进样。结果如下：
脂肪酸简称 C4：0 C8：0 C10：0 C18：1N9 C18：2N6C C18：3N3 EPA DHA
80%-1 92.14 96.87 94.16 102.65 95.12 92.14 91.46 85.46
80%-2 90.57 98.04 98.2 101.25 91.02 93.01 89.41 90.21
80%-3 89.32 97.95 93.24 98.65 92.14 94.73 92.24 88.22
100%-1 90.84 92.51 99.61 99.67 94.55 90.16 92.11 90.47
100%-2 90.95 97.02 91.24 97.23 99.36 92.1 89.34 85.14
100%-3 88.46 94.13 92.51 96.01 94.5 94.82 91.89 86.34
120%-1 92.86 96.47 94.71 96.57 93.22 94.64 90.14 92.13
120%-2 91.92 95.24 92.58 98.07 97.1 92.58 92.87 90.54
120%-3 92.1 91.95 98.31 99.86 93.28 95.61 90.16 89.49
平均回收率 91.02 95.58 94.95 98.88 94.48 93.31 91.07 88.67
RSD% 1.57 2.37 3.17 2.22 2.69 1.88 1.45 2.82
通过上表结果可知，RSD%值均满足小于10%要求，表明本发明方法的稳定性较好，准确度高。
对比例1
本对比例中分别采用本发明实施例1的前处理方法和国家标准中推荐的前处理方式进行测定，色谱条件为本发明中实施例1条件，针对与实施例1中相同的IMPACT样品进行含量测定，结果如下：
脂肪酸简称 IMPACT-1 IMPACT-2 AVERAGE RSD% IMPACT-1(国标法） IMPACT-2（国标法） AVERAGE RSD%
C4：0 6.58 6.26 6.42 3.52 6.25 7.85 7.05 16.05
C6：0 1.85 1.94 1.895 3.36 - - - -
C8：0 17.7 18.54 18.12 3.28 19.6 18.5 19.05 4.08
C10：0 13.9 14.23 14.065 1.66 13.2 14.8 14 8.08
C11：0 - - - - - - - -
C12：0 0.143 0.156 0.1495 6.15 0.142 0.16 0.151 8.43
C13：0 - - - - - - - -
C14：0 3.53 3.127 3.3285 8.56 3.03 3.65 3.34 13.13
C14：1 - - - - - - - -
C15：0 0.307 0.27 0.2885 9.07 - - - -
C15：1 - - - - - - - -
C16：0 4.89 4.369 4.6295 7.96 3.87 3.95 3.91 1.45
C16：1 2.99 2.65 2.82 8.53 2.81 2.36 2.585 12.31
C17：0 0.289 0.258 0.2735 8.01 0.181 0.198 0.1895 6.34
C17：1 0.121 0.106 0.1135 9.35 - - - -
C18：0 2.49 2.7 2.595 5.72 2.49 2.85 2.67 9.53
C18：1N9T - - - - - - - -
C18：1N9C 12.7 14.6 13.65 9.84 13.6 12.5 13.05 5.96
C18：2N6T - - - - - - - -
C18：2N6C 14.8 13.05 13.925 8.89 - - - -
C20：0 0.139 0.128 0.1335 5.83 - - - -
C18：3N6 0.123 0.107 0.115 9.84 - - - -
C20：1 0.454 0.402 0.428 8.59 0.328 0.4 0.364 13.99
C18：3N3 0.963 0.892 0.9275 5.41 0.853 0.954 0.9035 7.90
C21：0 - - - - - - - -
C20：2 0.875 0.939 0.907 4.99 0.597 0.667 0.632 7.83
C22：0 - - - - - - - -
C20：3N6 - - - - - - - -
C23：0 0.105 0.0944 0.0997 7.52 - - - -
C22：1 - - - - - - - -
C20：3N3 - - - - - - - -
C20：4N6 0.673 0.694 0.6835 2.17 0.589 0.582 0.5855 0.85
C18：2N6 0.294 0.257 0.2755 9.50 0.123 0.244 0.1835 46.63
C24：0 - - - - - - - -
EPA 9.08 8.887 8.9835 1.52 5.27 4.92 5.095 4.86
C24：1N9 0.143 0.125 0.134 9.50 - - - -
DHA 7.96 6.93 7.445 9.78 5.46 6.57 6.015 13.05
结果显示，经过国标方法测定的RSD%值总体高于本发明方法，有些含量少的脂肪酸甲酯甚至未被检出，产生漏检。本发明法前处理方法相对国标操作步骤少，相对稳定，结果可信度高。
虽然前述内容已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上所作出的不偏离本发明精神的修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，步骤如下：
1) 将待测特殊医学用途配方食品经的样品前处理后，备用；
2) 将经过前处理的样品以气相色谱法进行测定；色谱条件为：色谱柱：固定相为聚二氰丙基聚硅氧烷； 载气：氮气；载气流速：0.4mL-0.6 mL /min；进样口温度：240℃-260℃；分流比：25-35:1-2；进样量：1.0μL；柱温：初始温度140℃，保持5分钟，升温速率3-5℃/min升温至240℃，保持30分钟；
3）用FID检测器；检测脂肪酸甲酯的色谱峰面积。
2.根据权利要求1所述的同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，所述的色谱条件为：色谱柱为：固定相为聚二氰丙基聚硅氧烷； 载气：氮气；载气流速：0.5mL/min；进样口温度：245-255℃； 分流比：28-32:1； 进样量：1.0μL；检测器：FID检测器；柱温：初始温度140℃，保持5分钟，升温速率3-5℃/min升温至240℃，保持30分钟。
3.根据权利要求2所述的同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，所述的色谱条件为：色谱柱为：固定相为聚二氰丙基聚硅氧烷； 载气：氮气；载气流速：0.5mL/min；进样口温度：250℃； 分流比：30:1； 进样量：1.0μL；检测器：FID检测器；柱温：初始温度140℃，保持5分钟，升温速率4℃/min升温至240℃，保持30分钟。
4.根据权利要求1所述的同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，所述的前处理步骤如下：
采用水解-提取法来进行样品前处理：精密量取1.0mL样品放入25mL圆底烧瓶中，加8-12mL无水甲醇和0.1-0.8mL40-60g/L的强碱甲醇溶液，装上回流冷凝器，通氮气，70℃-90℃水浴锅加热30-60min，用水冲洗降温后将内容物转移至分液漏斗中；
用5-10 mL正庚烷冲洗烧瓶后倒入分液漏斗，摇晃；
加8-15mL 200g/L氯化钠溶液，剧烈摇晃分离，将有机层转移至含有无水硫酸钠的小瓶，静置，过滤即得；
混合脂肪酸甲酯标准溶液：取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10ml容量瓶中，用正庚烷稀释定容，贮存于-10℃以下冰箱，有效期3个月。
5.根据权利要求4所述的同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，所述的前处理条件为：精密量取1.0mL样品放入25mL圆底烧瓶中，加8-12mL无水甲醇和0.1-0.3mL 60g/L的强碱甲醇溶液，装上回流冷凝器，通氮气，78℃-85℃水浴锅加热30-40min，用水冲洗降温后将内容物转移至分液漏斗中；
用5-10 mL正庚烷冲洗烧瓶后倒入分液漏斗，摇晃；
加10-15mL 200g/L氯化钠溶液，剧烈摇晃分离，将有机层转移至含有无水硫酸钠的小瓶，静置，过滤即得；
混合脂肪酸甲酯标准溶液：取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10ml容量瓶中，用正庚烷稀释定容，贮存于-10℃以下冰箱，有效期3个月。
6.根据权利要求5所述的同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，所述的前处理条件为：精密量取1.0mL样品放入25mL圆底烧瓶中，加10mL无水甲醇和0.2mL 60g/L的强碱甲醇溶液，装上回流冷凝器，通氮气，80℃水浴锅加热40min，用水冲洗降温后将内容物转移至分液漏斗中；
用5mL正庚烷冲洗烧瓶后倒入分液漏斗，摇晃；
加10mL200g/L氯化钠溶液，剧烈摇晃分离，将有机层转移至含有无水硫酸钠的小瓶，静置，过滤即得；
混合脂肪酸甲酯标准溶液：取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10ml容量瓶中，用正庚烷稀释定容，贮存于-10℃以下冰箱，有效期3个月。
7.根据权利要求1-3所述的一种同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，所述的色谱柱为CNW CD-2560色谱柱。
8.根据权利要求1-3所述的一种同时测定特殊医学用途配方食品中脂肪酸含量的方法，其特征在于，所述强碱甲醇溶液中的强碱为氢氧化钾或氢氧化钠。
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