CN110308221A - 同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法 - Google Patents

同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，包括：采用氰丙基硅氧烷强极性固定相CP Sil 88气相色谱柱进行气相色谱检测，规格为80‑100m×0.25mm×0.20μm，色谱条件为：进样口温度200‑230℃；进样量1μL；分流比8‑12:1；氮气流速10‑12cm/s；恒定线速度模式；检测器：氢火焰离子化检测器FID；检测器温度200‑230℃；尾吹流量2‑5mL/min。本发明能够实现了72种脂肪酸的高效分离及定性和定量分析，具有高通量、高灵敏度、低检测限的优点。

Description

同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法
技术领域
本发明涉及食品检测技术领域。更具体地说，本发明涉及一种同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法。
背景技术
脂肪酸是由碳、氢、氧三种元素组成的一类化合物，也是人体主要能量来源之一；包括短链脂肪酸(C3-C5)、中链脂肪酸(C6-C12)和长链脂肪酸(C13-C24)。其中短链脂肪酸的主要来源于牛奶、低聚糖、发芽大麦食品、燕麦麸和玉米淀粉等食品；中链脂肪酸的主要来源于食用油(尤其是椰子油和棕榈仁油)、乳类和奶类等食品；长链脂肪酸的主要来源于肉类食物、食用油和氢化食品等。
目前检测食品中脂肪酸的方法主要有气相色谱法、液相色谱法、银离子薄层色谱法、红外光谱法、质谱法、毛细管电泳法等。其中，气相色谱由于分离效率高、检测限低而广为应用。随着检测技术的快速发展，急需建立脂肪酸的高通量、精准识别快检技术，而现有气相色谱高效分离检测方法还有待进一步提高。因此，在现有脂肪酸气相色谱分析方法基础上，建立一种新的检测方法，实现食品中脂肪酸的高通量、精准定性定量分析，具有较好的推广应用价值。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其能够实现了72种脂肪酸的高效分离及定性和定量分析，具有高通量、高灵敏度、低检测限的优点。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，包括：采用氰丙基硅氧烷强极性固定相CP Sil 88气相色谱柱进行气相色谱检测，规格为80-200m×0.25mm×0.20μm，色谱条件为：
进样口温度200-230℃；进样量1μL；分流比8-12:1；氮气流速10-12cm/s；恒定线速度模式；
色谱柱初始温度为60-80℃，保持4-6min，以20-30℃/min的加热速率升至150-180℃，保持3-5min，以1-5℃/min升至200-225℃，保持40-60min，再以0.5-2℃/min升至200-230℃，保持4-6min；
检测器：氢火焰离子化检测器FID；检测器温度200-230℃；尾吹流量2-5mL/min。
优选的是，色谱柱规格为100m×0.25mm×0.20μm。
优选的是，色谱条件为：
进样口温度230℃；进样量1μL；分流比10:1；氮气流速10.6cm/s；恒定线速度模式；
色谱柱初始温度为60℃，保持5min，以25℃/min的加热速率升至160℃，保持4min，以2℃/min升至225℃，保持50min，再以1℃/min升至230℃，保持5min；
检测器：氢火焰离子化检测器FID；检测器温度230℃；尾吹流量3mL/min。
优选的是，多种脂肪酸包括C3-C5短链脂肪酸、C6-C12中链脂肪酸和C13-C24长链脂肪酸。
优选的是，多种脂肪酸包括C3:0，C4:0，C5:0，C6:0，C7:0，C8:0，C9:0，C10:0，C11:0，C12:0，C11:1-10c，C13:0，C12:1-11c，C14:0，C13:1-12c，C14:1-9t，C14:1-9c，C15:0，C15:1-10t，C15:1-10c，C16:0，C15:1-14c，C16:1-9t，C16:1-9c，C17:0，C17:1-10t，C17:1-10c，C18:0，C18:1-6t，C18:1-9t，C18:1-11t，C18:1-6c，C18:1-9c，C18:1-11c，C19:0，C18:2-9t,12t，C19:1-7t，C19:1-10t，C19:1-7c，C19:1-10c，C18:2-9c,12c，C20:0，C20:1-11t，C18:3-6c,9c,12c，C20:1-5c，C20:1-8c，C20:1-11c，C19:2-10c,13c，C18:3-9c,12c,15c，C21:0，C18:2-9c,11t，C18:2-10t,12c，C21:1-12c，C20:2-11c,14c，C22:0，C22:1-13t，C20:3-8c,11c,14c，C22:1-13c，C21:2-12c,15c，C20:3-11c,14c,17c，C23:0，C20:4-5c,8c,11c,14c，C23:1-14c，C22:2-13c,16c，C24:0，C20:5-5c,8c,11c,14c,17c，C24:1-15c，C22:3-13c,16c,19c，C22:4-7c,10c,13c,16c，C22:5-4c,7c,10c,13c,16c，C22:5-7c,10c,13c,16c,19c，C22:6-4c,7c,10c,13c,16c,19c。
优选的是，检出限在0.000084-0.001276g/100g之间，定量限在0.000289-0.004263g/100g之间。
优选的是，日内精密度的RSD值控制在0.57-9.81％之间，日间精密度的RSD值控制在0.47-9.87％之间。
本发明至少包括以下有益效果：
第一、本发明采用氰丙基硅氧烷强极性固定相CP Sil 88气相色谱柱，建立能够同时高通量检测72种C3-C24系列脂肪酸的方法，其中包括36种不饱和脂肪酸、22种饱和脂肪酸、12种反式脂肪酸和2种共轭脂肪酸，相比国标GB5009.168-2016《食品中脂肪酸的测定》检测方法，检测脂肪酸种类多35种，包括18种不饱和脂肪酸、5种饱和脂肪酸、10种反式脂肪酸和2种共轭脂肪酸；
第二、本发明建立的检测72种脂肪酸方法的日内精密度的RSD值控制在0.57-9.81％，日间精密度的RSD值控制在0.47-9.87％，低于国标GB 5009.168-2016中要求的10％，远低于国标GB 5009.257-2016中要求的15％，稳定性好，满足精准定量分析的要求；
第三、本发明建立的检测72种脂肪酸方法的检出限在0.000084-0.001276g/100g之间，表明在现有仪器和所用参数的条件下，0.0013g/100g的各脂肪酸甲酯都能够定性检出，是国标GB 5009.168-2016的检出限(0.0013-0.0066g/100g)的十分之二，是国标GB5009.257-2016的检出限(0.012g/100g)十分之一；本发明的定量限在0.000289-0.004263g/100g之间，表明在现有仪器和所用参数的条件下，0.0043g/100g的各脂肪酸甲酯都能够定量分析，是国标GB 5009.257-2016的定量限(0.024g/100g)的十分之二，显著降低了脂肪酸的检出限和定量限，准确性好，能够实现脂肪酸的精准识别；
第四、本发明建立的检测72种脂肪酸方法的线性关系：各脂肪酸的仪器响应值与浓度呈良好的线性相关，线性关系基本都高于0.999，完全满足定量分析的要求，且方法适应性广；
第五、本发明还能实现21种反式脂肪酸、3种顺反共轭亚油酸和2种反反共轭亚油酸的高效分离，相比国标GB5009.257-2016《食品中反式脂肪酸的测定》检测方法，检测脂肪酸种类多12种，包括7种反式脂肪酸、3种顺反共轭亚油酸和2种反反共轭亚油酸。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明的气相色谱升温程序图；
图2为本发明72种脂肪酸甲酯的气相色谱图之一；
图3为本发明72种脂肪酸甲酯的气相色谱图之二；
图4为本发明72种脂肪酸甲酯的气相色谱图之三；
图5为本发明26种脂肪酸异构体的气相色谱图；
图6为本发明实施例1花生油的气相色谱图；
图7为本发明实施例2牛奶的气相色谱图；
图8为本发明实施例3亚麻籽油的气相色谱图；
图9为本发明对比例1牛奶的气相色谱图；
图10为本发明对比例2亚麻籽油的气相色谱图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，包括：采用氰丙基硅氧烷强极性固定相CP Sil 88气相色谱柱进行气相色谱检测，规格为80-200m×0.25mm×0.20μm，长度可变化，内径、膜厚为定值，购于美国安捷伦科技有限公司，色谱条件为：
进样口温度200-230℃；进样量1μL；分流比8-12:1；氮气流速10-12cm/s；恒定线速度模式；
色谱柱初始温度为60-80℃，保持4-6min，以20-30℃/min的加热速率升至150-180℃，保持3-5min，以1-5℃/min升至200-225℃，保持40-60min，再以0.5-2℃/min升至200-230℃，保持4-6min；
检测器：氢火焰离子化检测器FID；检测器温度200-230℃；尾吹流量2-5mL/min。
在另一个技术方案中，色谱柱规格为100m×0.25mm×0.20μm，通常购买的色谱柱为该规格。
在另一个技术方案中，色谱条件为：
进样口温度230℃；进样量1μL；分流比10:1；氮气流速10.6cm/s；恒定线速度模式；
如图1所示，色谱柱初始温度为60℃，保持5min，以25℃/min的加热速率升至160℃，保持4min，以2℃/min升至225℃，保持50min，再以1℃/min升至230℃，保持5min；
检测器：氢火焰离子化检测器FID；检测器温度230℃；尾吹流量3mL/min。
在另一个技术方案中，多种脂肪酸包括C3-C5短链脂肪酸、C6-C12中链脂肪酸和C13-C24长链脂肪酸。
在另一个技术方案中，72种脂肪酸甲酯的参考保留时间如表1所示，多种脂肪酸包括C3:0，C4:0，C5:0，C6:0，C7:0，C8:0，C9:0，C10:0，C11:0，C12:0，C11:1-10c，C13:0，C12:1-11c，C14:0，C13:1-12c，C14:1-9t，C14:1-9c，C15:0，C15:1-10t，C15:1-10c，C16:0，C15:1-14c，C16:1-9t，C16:1-9c，C17:0，C17:1-10t，C17:1-10c，C18:0，C18:1-6t，C18:1-9t，C18:1-11t，C18:1-6c，C18:1-9c，C18:1-11c，C19:0，C18:2-9t,12t，C19:1-7t，C19:1-10t，C19:1-7c，C19:1-10c，C18:2-9c,12c，C20:0，C20:1-11t，C18:3-6c,9c,12c，C20:1-5c，C20:1-8c，C20:1-11c，C19:2-10c,13c，C18:3-9c,12c,15c，C21:0，C18:2-9c,11t，C18:2-10t,12c，C21:1-12c，C20:2-11c,14c，C22:0，C22:1-13t，C20:3-8c,11c,14c，C22:1-13c，C21:2-12c,15c，C20:3-11c,14c,17c，C23:0，C20:4-5c,8c,11c,14c，C23:1-14c，C22:2-13c,16c，C24:0，C20:5-5c,8c,11c,14c,17c，C24:1-15c，C22:3-13c,16c,19c，C22:4-7c,10c,13c,16c，C22:5-4c,7c,10c,13c,16c，C22:5-7c,10c,13c,16c,19c，C22:6-4c,7c,10c,13c,16c,19c。
本发明采用氰丙基硅氧烷强极性固定相CP Sil 88气相色谱柱，建立能够同时高通量检测72种C3-C24系列脂肪酸的方法，其中包括36种不饱和脂肪酸、22种饱和脂肪酸、12种反式脂肪酸和2种共轭脂肪酸，如图2-4所示，各波峰采用阿拉伯数字顺序编号，同表1各序号对应脂肪酸名称。相比国标GB5009.168-2016《食品中脂肪酸的测定》检测方法，检测脂肪酸种类多35种，包括18种不饱和脂肪酸(C11:1-10c、C12:1-11c、C13:1-12c、C15:1-14c、C18:1-6c、C18:1-11c、C19:1-7c、C19:1-10c、C20:1-5c、C20:1-8c、C19:2-10c,13c、C21:1-12c、C21:2-12c,15c、C23:1-14c、C22:3-13c,16c,19c、C22:4-7c,10c,13c,16c、C22:5-4c,7c,10c,13c,16c和C22:5-7c,10c,13c,16c,19c)、5种饱和脂肪酸(C3:0、C5:0、C7:0、C9:0和C19:0)、10种反式脂肪酸(C14:1-9t、C15:1-10t、C16:1-9t、C17:1-10t、C18:1-6t、C18:1-11t、C19:1-7t、C19:1-10t、C20:1-11t和C22:1-13t)和2种共轭脂肪酸(C18:2-9c,11t和C18:2-10t,12c)。
表1
仪器精密度用相对标准偏差(RSD)表示，用于评价气相色谱方法对测定同一个样品结果重复性的再现性。本实验采用同一气相色谱分析方法对72种脂肪酸混标溶液的日内(一天内测定7次)和日间(连续7天测定)精密度进行考察，72种脂肪酸日内精密度和日间精密度如表2所示，各脂肪酸甲酯日内精密度的RSD值控制在0.57-9.81％，日间精密度控制在0.47-9.87％，低于国标GB 5009.168—2016中要求的10％，远低于国标GB 5009.257—2016中要求的15％，稳定性好，满足精准定量分析的要求。
表2
72种脂肪酸检测限及定量限如表3所示，可以看出，本发明检出限在0.000084-0.001276g/100g之间，表明在现有仪器和所用参数的条件下，0.0013g/100g的各脂肪酸甲酯都能够定性检出，是国标GB 5009.168-2016的检出限(0.0013-0.0066g/100g)的十分之二，是国标GB 5009.257-2016的检出限(0.012g/100g)的十分之一；本发明的定量限在0.000289-0.004263g/100g之间，表明在现有仪器和所用参数的条件下，0.0043g/100g的各脂肪酸甲酯都能够定量分析，是国标GB 5009.257-2016的定量限(0.024g/100g)的十分之二。本发明显著降低了脂肪酸的检出限和测定限，准确性好，能够实现脂肪酸的精准识别。
表3
72种脂肪酸标准曲线、相关系数和浓度范围如表4所示，72种脂肪酸甲酯标准品溶液进行梯度稀释，将各浓度的稀释混标液按建立的方法进行气相色谱分析，在所考察的浓度范围内进行线性拟合，得出各脂肪酸甲酯的线性方程和相关系数，线性关系均基本高于0.999，完全满足定量分析的要求。
表4
本发明还能实现21种反式脂肪酸、3种顺反共轭亚油酸和2种反反共轭亚油酸的高效分离，如图5所示，各波峰采用阿拉伯数字顺序编号，同表5各序号对应脂肪酸名称，其中11号、12号之间未标记的波峰为C18:2-9c,12c(同表1中41号)，17号、18号之间未标记的波峰为C18:3-9c,12c,15c(同表1中49号)，为了不影响展示26种脂肪酸异构体，图5中未对这两种物质进行编号处理。相比国标GB5009.257-2016《食品中反式脂肪酸的测定》检测方法，检测脂肪酸种类多12种，包括7种反式脂肪酸(C14:1-9t、C15:1-10t、C17:1-10t、C19:1-7t、C19:1-10t、C18:2-9c,12t、C18:2-9t,12c)、3种顺反共轭亚油酸(C18:2-9c,11t、C18:2-10t,12c和C18:2-11c,13t)和2种反反共轭亚油酸(C18:2-9t,11t和C18:2-10t,12t)，26种脂肪酸异构体的参考保留时间如表5所示。
表5
序号 脂肪酸名称 参考保留时间(min)
1 C14:1-9t 35.09
2 C15:1-10t 37.45
3 C16:1-9t 39.736
4 C17:1-10t 42.341
5 C18:1-6t 44.751
6 C18:1-9t 44.867
7 C18:1-11t 45.009
8 C18:2-9t,12t 46.937
9 C19:1-7t 47.483
10 C18:2-9c,12t/C19:1-10t 47.684
11 C18:2-9t,12c 47.866
12 C18:3-9t,12t,15t 49.394
13 C18:3-9t,12t,15c/C18:3-9t,12c,15t 50.242
14 C18:3-9c,12t,15t/C20:1-11t 50.471
15 C18:3-9c,12c,15t 50.671
16 C18:3-9c,12t,15c 51.28
17 C18:3-9t,12c,15c 51.38
18 C18:2-9c,11t 52.302
19 C18:2-11c,13t 52.742
20 C18:2-10t,12c 52.884
21 C18:2-9t,11t/C18:2-10t,12t 53.949
22 C22:1-13t 57.215
<实例1>
花生油中脂肪酸的气相色谱定性定量分析
步骤：称取100mg花生油，置于10mL离心管中，加入2mL的C11:0内标液，再加入0.1mL 2mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，旋涡混匀30s。以4000rpm离心10min。取上清液20μL定容至1mL容量瓶，采用岛津GC-2010气相色谱测定，气相色谱柱为CP Sil 88(100m×0.25mm×0.20μm)，色谱条件位：进样口温度：200℃；进样量：1μL；分流比：8:1；流速：10cm/s(氮气)；恒定线速度模式；柱箱升温程序：60℃保持5min，21℃/min升至150℃，保持5min，以1℃/min升至200℃，保持60min，再以0.5℃/min升至200℃，保持6min；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)；检测器温度：200℃；尾吹流量：2.0mL/min。
由图6可知：花生油经本方法检测后共有10种脂肪酸，其中油酸(C18:1-9c)、亚油酸(C18:2-9c,12c)和棕榈酸(C16:0)含量较高，除此之外还有硬脂酸(C18:0)、C18:1-11c、C20:0、C20:1-11c、C18:3-9c,12c,15c、C22:0和C22:1-13c。
<实例2>
牛奶中脂肪酸的气相色谱定性定量分析
步骤：称取1mL牛奶，置于烧瓶中，加入氨水5mL，混匀。将烧瓶放入70-80℃水浴中，水解20min。每5min振荡一下烧瓶，使黏附在烧瓶壁上的颗粒物混入溶液中。水解完成后，取出烧瓶冷却至室温。水解后的试样，加入10mL95％乙醇，混匀。将烧瓶中的水解液转移到分液漏斗中，用50mL乙醚石油醚混合液冲洗烧瓶和塞子，冲洗液并入分液漏斗中，加盖。振摇5min，静置10min。将醚层提取液收集到250mL烧瓶中。按照以上步骤重复提取水解液3次，最后用乙醚石油醚混合液冲洗分液漏斗，并收集到250mL烧瓶中。旋转蒸发仪浓缩至干，残留物为脂肪提取物。加入2mL的C11:0内标液，再加入1ml异辛烷和0.1mL 2mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，旋涡混匀30s。以4000rpm离心10min。取上清液20μL定容至1mL容量瓶，采用岛津GC-2010气相色谱测定，气相色谱柱为CP Sil 88(100m×0.25mm×0.20μm)，色谱条件位：进样口温度：230℃；进样量：1μL；分流比：11.5:1；流速：11.6cm/s(氮气)；恒定线速度模式；柱箱升温程序：80℃保持4min，29℃/min升至180℃，保持3min，以4.5℃/min升至225℃，保持40min，再以2℃/min升至230℃，保持4min；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)；检测器温度：230℃；尾吹流量：3.8mL/min。
由图7可知：牛奶经本方法检测后可能有10种脂肪酸，包括C4:0、C6:0、C8:0、C10:0、C12:0、C14:0、棕榈酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、油酸(C18:1-9c)和亚油酸(C18:2-9c,12c)。
<实例3>
亚麻籽油中脂肪酸的气相色谱定性定量分析
步骤：称取100mg亚麻籽油，置于10mL离心管中，加入2mL的C11:0内标液，再加入0.1mL 2mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，旋涡混匀30s。以4000rpm离心10min。取上清液20μL定容至1mL容量瓶，采用岛津GC-2010气相色谱测定，气相色谱柱为CP Sil 88(100m×0.25mm×0.20μm)，色谱条件位：进样口温度：230℃；进样量：1μL；分流比：10:1；流速：10.6cm/s(氮气)；恒定线速度模式；柱箱升温程序：60℃保持5min，25℃/min升至160℃，保持4min，以2℃/min升至225℃，保持50min，再以1℃/min升至230℃，保持5min；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)；检测器温度：230℃；尾吹流量：3.0mL/min。
由图8可知：亚麻籽油经本方法检测后可能有20种脂肪酸，其中亚麻酸(C18:3-9c,12c,15c)、油酸(C18:1-9c)、亚油酸(C18:2-9c,12c)、硬脂酸(C18:0)和棕榈酸(C16:0)含量较高，除此之外还可能有C16:1-9c、C17:0、C18:1-11c、C20:0、C18:3-9t,12t,15c、C18:3-9c,12t,15t、C18:3-6c,9c,12c、C20:1-5c、C19:2-10c,13c、C18:3-9t,12c,15c、C22:0、C20:2-11c,14c、C20:3-8c,11c,14c、C21:2-12c,15c和C24:0。
<对比例1>
牛奶中脂肪酸的气相色谱定性定量分析
步骤：称取1mL牛奶，置于烧瓶中，加入氨水5mL，混匀。将烧瓶放入70-80℃水浴中，水解20min。每5min振荡一下烧瓶，使黏附在烧瓶壁上的颗粒物混入溶液中。水解完成后，取出烧瓶冷却至室温。水解后的试样，加入10mL95％乙醇，混匀。将烧瓶中的水解液转移到分液漏斗中，用50mL乙醚石油醚混合液冲洗烧瓶和塞子，冲洗液并入分液漏斗中，加盖。振摇5min，静置10min。将醚层提取液收集到250mL烧瓶中。按照以上步骤重复提取水解液3次，最后用乙醚石油醚混合液冲洗分液漏斗，并收集到250mL烧瓶中。旋转蒸发仪浓缩至干，残留物为脂肪提取物。以4000rpm离心10min。取上清液20μL定容至1mL容量瓶，采用岛津GC-2010气相色谱测定，气相色谱柱为CP Sil 88(100m×0.25mm×0.20μm)，色谱条件位：进样口温度：270℃；进样量：1μL；分流比：100:1；流速：10.6cm/s(氮气)；恒定线速度模式；柱箱升温程序：100℃保持13min，10℃/min升至180℃，保持6min，以1℃/min升至200℃，保持20min，再以4℃/min升至230℃，保持10.5min；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)；检测器温度：280℃；尾吹流量：3.0mL/min。
由图9可知：牛奶经本方法检测后可能有7种脂肪酸，包括C4:0、C6:0、C8:0、C10:0、C12:0、C14:0、棕榈酸(C16:0)。可以看出，相对于实例2硬脂酸(C18:0)、油酸(C18:1-9c)和亚油酸(C18:2-9c,12c)未检出。
<对比例2>
亚麻籽油中脂肪酸的气相色谱定性定量分析
步骤：称取100mg亚麻籽油，置于10mL离心管中，再加入0.1mL的2mol/L的氢氧化钾甲醇溶液，旋涡混匀30s。以4000rpm离心10min。取上清液20μL定容至1mL容量瓶，采用岛津GC-2010气相色谱测定，气相色谱柱为CP Sil 88(100m×0.25mm×0.20m)，色谱条件位：进样口温度：270℃；进样量：1μL；分流比：100:1；流速：10.6cm/s(氮气)；恒定线速度模式；柱箱升温程序：100℃保持13min，10℃/min升至180℃，保持6min，以1℃/min升至200℃，保持20min，再以4℃/min升至230℃，保持10.5min；检测器：氢火焰离子化检测器(FID)；检测器温度：280℃；尾吹流量：3.0mL/min。
由图10可知：亚麻籽油经本方法检测后可能有7种脂肪酸，其中亚麻酸(C18:3-9c,12c,15c)、油酸(C18:1-9c)、亚油酸(C18:2-9c,12c)、硬脂酸(C18:0)和棕榈酸(C16:0)含量较高，除此之外还可能有C18:3-6c,9c,12c、C20:1-5c，可以看出，相对于实例3C16:1-9c、C17:0、C18:1-11c、C20:0、C18:3-9t,12t,15c、C18:3-9c,12t,15t、C19:2-10c,13c、C18:3-9t,12c,15c、C20:2-11c,14c、C22:0、C20:3-8c,11c,14c、C21:2-12c,15c和C24:0未检出。
通过实验验证发现，本方法适用于检测含有C3-C24脂肪酸的物质，除上述案例的花生油、亚麻籽油和牛奶外，还可检测各类富含脂肪酸的食用油、肉类食品、蔬菜、乳及乳制品及其他富含脂肪酸的物质，由于说明书篇幅有限，不作一一进行详述。
这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (7)

1.同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其特征在于，包括：采用氰丙基硅氧烷强极性固定相CP Sil 88气相色谱柱进行气相色谱检测，规格为80-200m×0.25mm×0.20μm，色谱条件为：
进样口温度200-230℃；进样量1μL；分流比8-12:1；氮气流速10-12cm/s；恒定线速度模式；
色谱柱初始温度为60-80℃，保持4-6min，以20-30℃/min的加热速率升至150-180℃，保持3-5min，以1-5℃/min升至200-225℃，保持40-60min，再以0.5-2℃/min升至200-230℃，保持4-6min；
检测器：氢火焰离子化检测器FID；检测器温度200-230℃；尾吹流量2-5mL/min。
2.如权利要求1所述的同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其特征在于，色谱柱规格为100m×0.25mm×0.20μm。
3.如权利要求1所述的同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其特征在于，色谱条件为：
进样口温度230℃；进样量1μL；分流比10:1；氮气流速10.6cm/s；恒定线速度模式；
色谱柱初始温度为60℃，保持5min，以25℃/min的加热速率升至160℃，保持4min，以2℃/min升至225℃，保持50min，再以1℃/min升至230℃，保持5min；
检测器：氢火焰离子化检测器FID；检测器温度230℃；尾吹流量3mL/min。
4.如权利要求1-3任一项所述的同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其特征在于，多种脂肪酸包括C3-C5短链脂肪酸、C6-C12中链脂肪酸和C13-C24长链脂肪酸。
5.如权利要求4所述的同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其特征在于，多种脂肪酸包括C3:0，C4:0，C5:0，C6:0，C7:0，C8:0，C9:0，C10:0，C11:0，C12:0，C11:1-10c，C13:0，C12:1-11c，C14:0，C13:1-12c，C14:1-9t，C14:1-9c，C15:0，C15:1-10t，C15:1-10c，C16:0，C15:1-14c，C16:1-9t，C16:1-9c，C17:0，C17:1-10t，C17:1-10c，C18:0，C18:1-6t，C18:1-9t，C18:1-11t，C18:1-6c，C18:1-9c，C18:1-11c，C19:0，C18:2-9t,12t，C19:1-7t，C19:1-10t，C19:1-7c，C19:1-10c，C18:2-9c,12c，C20:0，C20:1-11t，C18:3-6c,9c,12c，C20:1-5c，C20:1-8c，C20:1-11c，C19:2-10c,13c，C18:3-9c,12c,15c，C21:0，C18:2-9c,11t，C18:2-10t,12c，C21:1-12c，C20:2-11c,14c，C22:0，C22:1-13t，C20:3-8c,11c,14c，C22:1-13c，C21:2-12c,15c，C20:3-11c,14c,17c，C23:0，C20:4-5c,8c,11c,14c，C23:1-14c，C22:2-13c,16c，C24:0，C20:5-5c,8c,11c,14c,17c，C24:1-15c，C22:3-13c,16c,19c，C22:4-7c,10c,13c,16c，C22:5-4c,7c,10c,13c,16c，C22:5-7c,10c,13c,16c,19c，C22:6-4c,7c,10c,13c,16c,19c。
6.如权利要求5所述的同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其特征在于，检出限在0.000084-0.001276g/100g之间，定量限在0.000289-0.004263g/100g之间。
7.如权利要求5所述的同时检测分离多种脂肪酸的气相色谱方法，其特征在于，日内精密度的RSD值控制在0.57-9.81％之间，日间精密度的RSD值控制在0.47-9.87％之间。
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