CN107034297B - 一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用、核酸组合和试剂盒 - Google Patents

一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用、核酸组合和试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用、核酸组合和试剂盒，涉及水禽分子生物技术领域。本发明公开的与肉鸭生长性状相关的分子标记，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示，第88bp位置具有T‑G碱基突变。其可用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育领域中，用于对肉鸭生长性状的筛选，为选育或培育具有优良生长性状的肉鸭品种提供理论依据和遗传基础，有利于提高育种效率，加快肉鸭育种进程。

Description

一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用、核酸组合和 试剂盒
技术领域
本发明涉及水禽分子生物技术领域，具体而言，涉及一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用、核酸组合和试剂盒。
背景技术
肉鸭作为主要的养殖禽类动物，具有重要的经济价值，因此，培育或选育具有优良肉质特性的肉鸭品种显得十分重要。利用先进的分子标记辅助育种技术应用于优良的肉鸭品种选育，对于改善肉鸭种质资源的创新与利用，尤其是提高育种或选种效率具有重要的意义。但是，目前，尚无有关可作为肉鸭肉质生长性状的分子标记。
发明内容
本发明的目的在于提供一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用，为选育或培育具有优良生长性状的肉鸭品种提供理论依据和遗传基础，有利于提高育种效率，加快肉鸭育种进程。
本发明的另一目的在于提供一种检测上述分子标记的核酸组合及其应用，该核酸组合可检测或扩增出上述分子标记。
本发明的另一目的在于提供用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育的试剂盒。
本发明是这样实现的：
一种与肉鸭生长性状相关的分子标记，所述分子标记的碱基序列如SEQIDNO.1所示，所述分子标记的第88bp位置具有T-G碱基突变。
上述与肉鸭生长性状相关的分子标记在肉鸭生长性状分子标记辅助选育中的应用。
一种用于检测上述与肉鸭生长性状相关的分子标记的核酸组合，其包括SEQ IDNO.2-3所示的引物对。
上述核酸组合在肉鸭生长性状分子标记辅助选育中的应用。
一种用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育的试剂盒，其包括上述的核酸组合。
本发明的有益效果是：
本发明的研究首次发现肉鸭TRH基因第3外显子第277bp位置上存在一个与肉鸭生长性状相关的SNP位点(T/G)，在肉鸭群体共 570只个体中经过关联分析得出该SNP与肉鸭生长性状例如体重、胸肌重、腓肠肌重、胸肌肌纤维直径、胸肌肌纤维总数、胸肌肌纤维密度、腓肠肌肌纤维直径以及腓肠肌肌纤维总数等肉质性状显著相关 (P<0.05)，TG型表现为优势基因型。
因此，本发明提供的碱基序列如SEQ ID NO.1所示的与肉鸭生长性状相关的分子标记可靠性高，该分子标记的第88bp的位置对应于肉鸭TRH基因第3外显子第277bp位置，存在T-G碱基突变，其可用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育领域中，用于对肉鸭生长性状的筛选，为选育或培育具有优良生长性状的肉鸭品种提供理论依据和遗传基础，有利于提高育种效率，加快肉鸭育种进程。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明实施例2提供的LDR分型图(图中：双峰172bp ±0.5bp/174bp±0.5bp为TG基因型，单峰172bp±0.5bp为TT基因型，单峰174bp±0.5bp为GG基因型)。
具体实施方式
下面通过具体的实施例，并结合附图对本发明做进一步的详细描述。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。另外，如果没有明确说明，在下面的实施例中所采用的所有材料均为市场上可以购得的，实施例中未提及的具体实验方法，按照本技术领域常规实验方法进行或者为本领域技术人员容易获得的。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
在本发明中，如无特殊说明，所用专业术语按照以下上述理解：
LDR：连接酶检测(Ligase Reaction Detection,LDR)。
SNP：单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)。
下面对本发明实施例的一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用、核酸组合和试剂盒进行具体说明。
在哺乳动物中，甲状腺激素释放激素(thyrotropin-releasing hormone,TRH)能促进促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone， TSH)、生长激素(Growth hormone，GH)和催乳素(Prolactin，PRL) 的分泌；在鱼类，TRH能促进GH和PRL的分泌，却对TSH的分泌没有影响；在禽类中，TRH起着促进TSH和GH分泌的作用，且在鸡胚胎期和幼年鸡中，TRH对GH的分泌作用相当于哺乳动物中生长激素释放激素(Growth hormone-releasing hormone,GHRH)对GH 的分泌作用。另有研究表明，在下丘脑-垂体-生长轴 (hypothalamic-pituitary-thyroid axis，HPT)中，TRH通过垂体调控这些激素分泌，后者又进一步对其靶腺的激素分泌进行调节，而靶腺分泌的激素如甲状腺分泌的3，5，3′-triiodothyronine(T3)对下丘脑TRH 的分泌还存在负反馈调节。可见，下丘脑TRH在动物生长发育过程中扮演着重要角色。HPT轴上游关键调控基因在外周组织中也有广泛的分布，尤其是TRH与其受体在猪皮下脂肪组织中的共表达和 TSH及其受体在肌肉和皮下脂肪组织中的共表达，提示相应激素通过旁分泌或自分泌方式对局部组织进行生长调控的可能性。
TRH可通过经典的HPT轴调控机体生长发育，也能以旁分泌的形式调控胃肠分泌和蠕动，该调控作用可能影响饲料能聊的消化吸收，进而对个体增重产生影响。在金皮资源群体中存在与生长性状有显著关联的TRH基因SNP座位ss325994933，其在国内外不同株种中的频率分布存在明显差异，可能在中外猪种生长性状差异形成中有一定影响。
一方面，本发明提供了一种与肉鸭生长性状相关的分子标记，上述分子标记的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，上述分子标记的第88bp 位置具有T-G碱基突变。即该分子标记的第88bp位置的碱基为T或 G。
该分子标记位于肉鸭TRH基因第3号外显子上，第88bp位置的碱基突变对应于肉鸭TRH基因第3号外显子第277位核苷酸的T/G 突变。
本发明的研究首次发现肉鸭TRH基因第3外显子第277bp位置上存在一个与肉鸭生长性状相关的SNP位点(T/G)，并提供了该SNP 位点的遗传变异及肉鸭生长性状的遗传效应。在肉鸭群体共570只个体中经过关联分析得出该SNP与肉鸭生长性状例如体重、胸肌重、腓肠肌重、胸肌肌纤维直径、胸肌肌纤维总数、胸肌肌纤维密度、腓肠肌肌纤维直径以及腓肠肌肌纤维总数等肉质生长性状显著相关 (P<0.05)。TG基因型的生长性状好于TT和GG基因型，TG型表现为优势基因型。
因此，本发明提供的碱基序列如SEQ ID NO.1所示的与肉鸭生长性状相关的分子标记可靠性高，其可用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育领域中，用于对肉鸭生长性状的筛选，为选育或培育具有优良生长性状的肉鸭品种提供理论依据和遗传基础，有利于提高育种效率，加快肉鸭育种进程。
另一方面，本发明提供了上述与肉鸭生长性状相关的分子标记在肉鸭生长性状分子标记辅助选育中的应用。
通过检测TRH基因的第3外显子第277bp位的SNP位点即SEQ ID NO.1的第88bp位置是否发生T-G碱基突变作为选育条件，实现对优良生长性状的肉鸭品种的选育或培育或筛选目的。
例如，上述与肉鸭生长性状相关的分子标记在筛选或选育或培育具有优良肉质特性的肉鸭品种中的应用。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，利用上述分子标记对待测肉鸭的TRH基因进行基因分型，选择TG基因型的上述待测肉鸭进行育种或培育。
例如，以待测肉鸭的基因组DNA为模板，通过针对扩增上述分子标记的引物进行PCR扩增，扩增产物用连接酶检测反应后测序，对分子标记的第88bp的碱基突变类型分析。基因分型标准为连接产物检测出双峰172bp±0.5bp/174bp±0.5bp为TG基因型，单峰172bp±0.5bp为TT基因型，单峰174bp±0.5bp为GG基因型。选择优势基因型即TG基因型的待测肉鸭进行育种或培育。
进一步地，上述生长性状包括体重、胸肌重、腓肠肌重、胸肌肌纤维直径、胸肌肌纤维总数、胸肌肌纤维密度、腓肠肌肌纤维直径以及腓肠肌肌纤维总数中的一种或几种的组合。
本发明的研究结果显示，在TT、TG、GG三种基因型中，TG 基因型的肉鸭的体重和胸肌重、腓肠肌重高于GG基因型和TT基因型；在胸肌肌纤维直径和胸肌肌纤维总数等肌纤维特性上，TG基因型的肉鸭的平均直径最大，总数最多；TG基因型的肉鸭的胸肌肌纤维密度值则是最大。TG基因型是有利基因型或称为优势基因型，具有相对优良的生长性状尤其是肉质生长性状。
另一方面，本发明提供了一种用于检测权利要求1上述的与肉鸭生长性状相关的分子标记的核酸组合，其包括SEQ ID NO.2-3所示的引物对。
该引物对可对待测肉鸭基因组DNA进行扩增，得到上述分子标记(SEQ ID NO.1)，再通过对分子标记的第88bp位置的碱基检测T 或G，即可判断出待测肉鸭的基因型。为选择优势基因型即TG基因型的待测肉鸭进行育种或培育提供了有力支持。
可选地，在发明的一些实施方案中，上述核酸组合还包括SEQ ID NO.4-6所示的探针中的一种或几种的组合。
其中，SEQ ID NO.4所示的探针为TRH__modify序列，其3’端连接有FAM荧光报告基因，5’端带有磷酸化修饰；其具体序列为： 5’-P-CATTCAAGTAAGTCAGACGTGCACTTTTTTTTTTTTTTTTTT TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-FAM-3’。
SEQ ID NO.5所示的探针为TRH_T序列： 5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTGGATGCTGTCTTTTGGATA ACA-3’。
SEQ ID NO.6所示的探针为TRH_G序列： 5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTGGATGCTGTCTTTTGGA TAACC-3’。
SEQ ID NO.4-6所示的探针可用于连接酶检测反应(Ligase ReactionDetection,LDR)，快速准确的检测出上述分子标记的第88bp 位置的碱基类型，判断出待测肉鸭的基因型。连接产物检测出双峰 172bp±0.5bp/174bp±0.5bp为TG基因型，单峰172bp±0.5bp为TT基因型，单峰174bp±0.5bp为GG基因型。
本发明提供的核酸组合可以快速、准确地扩增出上述分子标记，并检测出分子标记的第88bp位置是否发生T-G碱基突变，可以用于对肉鸭MRH基因进行分析，有利于筛选出生长发育快、肉品质相对较好的肉鸭个体，指导肉鸭生长性状的分子标记辅助选育或培育工作。
基于此，另一方面，本发明提供了上述核酸组合在肉鸭生长性状分子标记辅助选育中的应用。
进一步地，上述应用包括：以待测肉鸭的基因组DNA为模板，用SEQ ID NO.2-3所示的引物对进行PCR扩增，得到上述分子标记。
其中，SEQ ID NO.2为上游引物，SEQ ID NO.3为下游引物。
优选地，在本发明的一些实施方案中，上述PCR扩增的体系可参考如下进行：50ng/μL DNA模板1μL、2mM dNTP 2μL、3mM Mg2+ 0.6μL、10×PCR反应缓冲液2μL、10μM上下游引物各0.4μL、1U/μL Taq酶0.2μL、加ddH2O至总体积20μL。
优选地，在本发明的一些实施方案中，PCR扩增反应程序为：94℃预变性2min、94℃变性90s、50℃退火90s、65℃延伸30s，40个循环、最后65℃延伸10min。
进一步地，上述应用包括：检测上述分子标记上第88bp位置的碱基突变类型，根据检测结果对上述待测肉鸭的TRH基因进行基因分型，选择TG基因型的上述待测肉鸭进行育种或培育。
进一步地，采用连接酶检测反应检测分子标记上第88bp位置的碱基突变类型，根据检测结果对上述待测肉鸭的TRH基因进行基因分型，选择TG基因型的上述待测肉鸭进行育种或培育。连接酶检测反应所用的探针为SEQ ID NO.4-6所示的探针。
优选地，在本发明的一些实施方案中，连接酶检测反应的体系为： PCR产物4μL、10×PCR反应缓冲液1μL、0.5μM探针混合物1μL、2U/μL DNA 连接酶0.05μL、加ddH2O至总体积10μL。
优选地，在本发明的一些实施方案中，连接酶检测反应的程序为： 95℃预变性2min、94℃变性15s、50℃退火25s，30个循环。
需要说明的是，在其他的实施例中，也可直接将PCR产物测序，通过测序检测分子标记上第88bp位置的碱基突变类型。
本发明将肉鸭TRH基因作为肉鸭生长性状的候选基因，以第3外显子上的第277bp位的SNP位点即SEQ ID NO.1的分子标记的第88bp位的 T→G突变为筛选位点，建立了基于连接酶检测反应的SNP快速检测方法，为利用上述分子标记进行肉鸭生长性状的快速选育提供了技术支撑。
还有一方面，本发明提供了一种用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育的试剂盒，该试剂盒包括上述的核酸组合。
本发明提供的试剂盒可以快速、简单、方便地对肉鸭基因组DNA进行 PCR扩增，得到分子标记(SEQ ID NO.1)，并根据分子标记第88bp位的碱基类型对肉鸭TRH基因分型，选择TG基因型的上述待测肉鸭进行育种或培育。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供了一种与肉鸭生长性状相关的分子标记，其碱基序列如SEQ IDNO.1所示，该分子标记的第88bp位置具有T-G碱基突变。
该分子标记位于肉鸭TRH基因第3号外显子上，第88bp位置的 T-G碱基突变对应于肉鸭TRH基因第3号外显子第277位核苷酸的 T/G突变。
本发明提供的碱基序列如SEQ ID NO.1所示的与肉鸭生长性状相关的分子标记可靠性高，其可用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育领域中，用于对肉鸭生长性状的筛选，为选育或培育具有优良生长性状的肉鸭品种提供理论依据和遗传基础，有利于提高育种效率，加快肉鸭育种进程。
实施例2
本实施例提供了实施例1所述的分子标记在肉鸭生长性状分子标记辅助选育中的应用。利用分子标记对待测肉鸭的TRH基因进行基因分型，选择TG基因型的待测肉鸭进行育种或培育。包括如下步骤：
1.以待测肉鸭的基因组DNA为模板，采用上游引物：5’ -AGCTGAAAAAGCGACAGCAT-3’，(SEQ NO.2所示)和下游引物： 5’-GCTCATCATTCCAGCCTCTC-3’(SEQ NO.3所示)，进行PCR扩增，得到扩增产物即分子标记。
PCR扩增的体系：50ng/μL DNA模板1μL、2mM dNTP 2μL、3mM Mg2+0.6μL、10×PCR反应缓冲液2μL、10μM上下游引物各0.4μL、 1U/μL Taq酶0.2μL、加ddH2O至总体积20μL。
PCR扩增反应程序为：94℃预变性2min、94℃变性90s、50℃退火90s、 65℃延伸30s，40个循环、最后65℃延伸10min。
2.用2％琼脂糖凝胶检测PCR产物，片段大小为171bp，判定PCR扩增片段正确；胶回收扩增产物。
3.扩增产物进行连接酶检测反应；连接酶检测反应所用的探针的碱基序列如SEQID NO.4-6所示。
EQ ID NO.4所示的探针为A探针TRH__modify序列，其3’端连接有FAM荧光报告基因，5’端带有磷酸化修饰；其序列为： 5’-P-CATTCAAGTAAGTCAGACGTGCACTTTTTTTTTTTTTTTTTT TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-FAM-3’。
SEQ ID NO.5所示的探针为B探针TRH_T序列： 5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTGGATGCTGTCTTTTGGATA ACA-3’。
SEQ ID NO.6所示的探针为C探针TRH_G序列： 5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTGGATGCTGTCTTTTGGA TAACC-3’。
连接酶检测反应体系：PCR产物4μL、10×PCR反应缓冲液1μL、 0.5μM探针混合物(A、B和C探针，各0.5μM)1μL、2U/μL DNA连接酶 0.05μL、加ddH2O至总体积10μL。
连接酶检测反应的程序为：95℃预变性2min、94℃变性15s、50℃退火25s，30个循环。
4.用ABI3730DNA测序仪对LDR产物进行测序胶毛细管电泳。
5.用GENESCANTM672软件进行数据收集、泳道线校正、迁移片段大小测量和校正内在分子量标准；用Genemapper软件进行数据分析和基因分型，基因分型标准为连接产物检测出双峰172bp±0.5bp/174bp±0.5bp为TG 基因型，单峰172bp±0.5bp为TT基因型，单峰174bp±0.5bp为GG基因型。分型图见图1。
6.根据上述肉鸭TRH基因分型的结果，可选择TG基因型的待测肉鸭用于育种或培育(本步骤为可选步骤)。
实施例3
肉鸭TRH基因型与生长性状的关联分析
1.随机选取570只肉鸭(家鸭、Anas platyrhynchos domestica)，公母各半，称重后，翅静脉采血，放入含有抗凝剂的2ml EP管中，用于基因组DNA的提取。
2.采用血液基因组DNA提取试剂盒(DP304-03)(天根生化科技 (北京)有限公司)，根据说明书操作提取基因组DNA。
3.参考实施例2中步骤1-5，对TRH基因分型。
4.各基因型在肉鸭中的分布频率分析：利用SPSS软件中的皮卡逊卡方值对基因型频率进行卡方适合性检验，由表1可知，肉鸭突变位点的χ2为1.99，小于χ2 0.05(2)＝5.99，说明肉鸭在该位点上均处于哈代-温伯平衡状态，所抽检的肉鸭个体具有随机性。
表1 TRH基因型在肉鸭中的分布
Figure BDA0001313130810000111
5.利用SAS 9.0软件的一般线性模型对TRH基因型与肉鸭生长性状进行关联分析，模型为Yij＝μ+Gj+eij，Yij为性状表现值，μ为总体均数，Gj为基因型效应，eij为随机误差。关联分析结果见表2。
表2 TRH基因型与肉鸭生长性状的关联分析
Figure BDA0001313130810000121
注：同一生长性状基因型间差异显著用不同肩标表示。
由表2可知，8日龄，2周龄，3周龄，6周龄，70日龄时TG基因型肉鸭的体重和胸肌重、腓肠肌重最高，其次是GG基因型，且TG基因型显著高于GG基因型(P<0.05)；在胸肌和腓肠肌肌纤维平均直径、总数等肌纤维特性上，TG基因型肉鸭肌纤维平均直径值最大，总数最多，显著高于 TT和GG基因型(P<0.05)，而TT和GG基因型间差异不显著(P>0.05)， TG基因型肉鸭胸肌肌纤维密度值则是最大，显著高于TT和GG基因型 (P<0.05)，而TT和GG基因型间差异不显著(P>0.05)。结果表明，TG 基因型与肉鸭日龄体重、胸肌重、胸肌及其腓肠肌肌纤维平均直径、胸肌肌纤维密度、胸肌及其腓肠肌肌纤维总数等肉质生长性状显著相关，杂合型即TG基因型是有利基因型，可用于肉鸭生长性状的选育或培育。
总之，本发明实施例提供的碱基序列如SEQ ID NO.1所示的与肉鸭生长性状相关的分子标记可靠性高，该分子标记的第88bp的位置对应于肉鸭TRH基因第3外显子第277bp位置，存在T/G的碱基突变，其可用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育领域中，用于对肉鸭生长性状的筛选，为选育或培育具有优良肉质生长性状的肉鸭品种提供理论依据和遗传基础，有利于提高育种效率，加快肉鸭育种进程。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 江苏省家禽科学研究所
<120> 一种与肉鸭生长性状相关的分子标记及其应用、核酸组合和试剂盒
<160> 6
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 171
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
agctgaaaaa gcgacagcat cctggcagaa ggtcgctgtg ggaccaacat gtggacatcc 60
ctagtgcacg tctgacttac ttgaatgtgt tatccaaaag acagcatcca gggagagggt 120
atctgatgca taaacatcag catcctagca agagaggctg gaatgatgag c 171
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
agctgaaaaa gcgacagcat 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
gctcatcatt ccagcctctc 20
<210> 4
<211> 79
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
cattcaagta agtcagacgt gcactttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt 60
tttttttttt ttttttttt 79
<210> 5
<211> 95
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt 60
tttttttttt cctggatgct gtcttttgga taaca 95
<210> 6
<211> 97
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt 60
tttttttttt ttcctggatg ctgtcttttg gataacc 97

Claims (10)

1.一种与肉鸭生长性状相关的分子标记，其特征在于，所述分子标记的碱基序列如SEQID NO.1所示，所述分子标记的第88bp位置具有T-G碱基突变。
2.权利要求1所述的与肉鸭生长性状相关的分子标记在肉鸭生长性状分子标记辅助选育中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，利用所述分子标记对待测肉鸭的TRH基因进行基因分型，选择TG基因型的待测肉鸭进行育种或培育。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述生长性状包括体重、胸肌重、腓肠肌重、胸肌肌纤维直径、胸肌肌纤维总数、胸肌肌纤维密度、腓肠肌肌纤维直径以及腓肠肌肌纤维总数中的一种或几种的组合。
5.一种用于检测权利要求1所述的与肉鸭生长性状相关的分子标记的核酸组合，其特征在于，其包括SEQ ID NO.2-3所示的引物对。
6.根据权利要求5所述的核酸组合，其特征在于，所述核酸组合还包括SEQ ID NO.4-6所示的探针中的一种或几种的组合。
7.权利要求5或6所述的核酸组合在肉鸭生长性状分子标记辅助选育中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：以待测肉鸭的基因组DNA为模板，用SEQ ID NO.2-3所示的引物对进行PCR扩增，得到所述分子标记。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用还包括以下步骤：检测所述分子标记上第88bp位置的碱基突变类型，根据检测结果对待测肉鸭的TRH基因进行基因分型，选择TG基因型的所述待测肉鸭进行育种或培育。
10.一种用于肉鸭生长性状分子标记辅助选育的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求5或6所述的核酸组合。
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